UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR DAN NONPOLAR HERBA KEMANGI (
Ocimumsanctum
L.) TERHADAP SEL T47D
SKRIPSI
Oleh:
RIZKI AWALIA PUSPITANINGRUM
K100130192
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
i
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR DAN NONPOLAR HERBA KEMANGI (
Ocimumsanctum
L.) TERHADAP SEL T47D
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RIZKI AWALIA PUSPITANINGRUM
K100130192
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
iv
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh,
Alhamdulillah, puji syukur kepada Allah SWT atas limpahan rahmat dan
hidayahnya sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Salawat dan
salam semoga selalu tercurah pada baginda Rasulullah SAW. Skripsi ini berjudul
“UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR DAN NONPOLAR HERBA KEMANGI (Ocimum sanctum L.) TERHADAP SEL T47D”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat meraih gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Terimakasih penulis sampaikan kepada pihak-pihak yang membantu
selama penyusunan skripsi ini. Secara khusus rasa terimakasih penulis sampaikan
kepada :
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing skripsi.
3. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku penguji 1.
4. Ibu Ratna Yuliani, M. Biotech.St. selaku penguji 2.
5. Ibu Setyo Nurwaini, S.Farm. selaku pembimbing akademik.
6. Kedua orang tua dan adik yang telah memberikan semangat, dukungan
dan doa yang tak terhingga selama ini.
7. Rekan-rekan tim seperjuangan skripsi: Putri, Atikah, Dhinar, dan
Selviana.
Semoga skripsi ini nantinya dapat bermanfaat bagi penulis, pembaca dan
perkembangan dunia kesehatan terutama bidang farmasi.
Wassalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh
Surakarta, 29 November 2016
v
a. Sistematika Tanaman Kemangi ... 3
vi
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ... 9
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ... 9
C. Alat dan Bahan ... 9
5. Pemanenan dan Penghitungan Sel T47D ... 11
6. Pembuatan Larutan Stok ... 12
D. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ... 20
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 25
A. Kesimpulan ... 25
B. Saran ... 25
DAFTAR PUSTAKA ... 26
vii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Reaksi pembentukan kristal formazan ... 17
Gambar 2. Sel T47D normal tanpa perlakuan ... 17
Gambar 3. Grafik hubungan konsentrasi dengan persen sel hidup. ... 18
Gambar 4. Profil KLT ekstrak etanol herba kemangi . ... 21
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen deteksi senyawa... 13
Tabel 2. Data absorbansi sel, persen sel hidup, dan nilai IC50 ... 19
Tabel 3. Deteksi golongan senyawa pada ekstrak etanol ... 21
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Determinasi tumbuhan kemangi ... 30
Lampiran 2. Perhitungan rendemen ... 31
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi larutan uji... 32
Lampiran 4. Perhitungan kepadatan sel T47D pada uji sitotoksik...34
x
DAFTAR SINGKATAN
CO2 : Karbondioksida
COX-2 : Cyclooxigenase-2
DMSO : Dimetil Sulfoksida
DNA : Deoxyribonucleid Acid
ELISA : Enzyme-linked Immunosorbent Assay
GF254 : Gel Fluoresensi 254
IAPs : Inhibitor of Apoptosis
IC50 : Inhibitory Concentration 50
IL-1β : Interleukin-1β
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
LAF : Laminar Air Flow
MTT : 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazolium bromid
NF-kB : Nuclear Factor kappa B
P.A : Pro Analisis
PBS : Phosphate Buffered Saline
Rf : Retardation Factor
RPMI : Roswell Park Memorial Institute
SDS : Sodium Dodecyl Sulfat
UV 254 : Ultraviolet 254
xi
ABSTRAK
Kemangi (Ocimum sanctum L.) merupakan tanaman yang telah diteliti memiliki aktivitas sebagai antikanker, antibakteri dan antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol 96%, fraksi polar, semipolar dan nonpolar herba kemangi terhadap sel T47D dan mengetahui golongan senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol herba kemangi dan fraksi yang memiliki aktivitas sitotoksik paling baik.
Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Ekstrak etanol selanjutnya difraksinasi dengan partisi cair-cair. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT assay untuk mendapatkan nilai IC50. Kandungan senyawa dalam ekstrak maupun fraksi dengan IC50 paling baik diidentifikasi menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dengan berbagai pereaksi semprot.
Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi kloroform, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat memiliki nilai IC50 berturut turut adalah >250 µg/mL, >250 µ g/mL, 36,98 µg/mL, and >250 µg/mL. Fraksi kloroform merupakan fraksi yang memiliki aktivitas sitotoksik paling baik. Hasil uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol herba kemangi mengandung golongan senyawa flavonoid, terpenoid, saponin, alkaloid, dan fenolik. Fraksi kloroform mengandung golongan senyawa flavonoid, terpenoid, alkaloid, dan fenolik.
xii
ABSTRACT
Previous experiment indicated broad spectrum biological activity of Basil (Ocimum sanctum L.) ie anticancer, antibacterial, and antioxidant. This experiment aimed to determine the cytotoxic effects of ethanol extract 96%, polar, semipolar, and nonpolar fra ction Basil (Ocimum sanctum L.) on T47D cells and to know the compounds contained in herbs basil as well as the fraction of the best cytotoxic activity.
Extraction was conducted by maceration method using ethanol extract 96%. The ethanolic extract fractionated by using liquid partition. The content of the compounds in the extract and the fractions were identified using Thin Layer Chromatography (TLC) with various spray reagent. Cytotoxic test performed by using MTT assay method to obtain IC50 values.
This experiment conclude IC50 of ethanol extract 96%, n-hexane, chloroform, and ethyl acetate fraction were IC50 > 250 µ g/mL, > 250 µ g/mL,
36,98 µ g/mL, and > 250 µ g/mL respectivly. Chloroform fraction has the strongest effect anticancer. TLC test results show that the ethanol extract of the herbs basil contain the class of flavonoids, terpenoids, saponins, alkaloids and phenolic. Chloroform fraction containing class of flavonoids, terpenoids, alkaloids and phenolic.
