UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (
Psidium
guajava
L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
ii
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (
Psidium
guajava
L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN
JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON”. Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. yang terhormat, selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Setyo Nurwaini, M.Sc., Apt. selaku pembimbing akademik. 3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St selaku penguji 1 dan Dr. Haryoto, M.Sc selaku penguji 2
5. Bapak dan Ibuku tercinta yang senantiasa membimbing dan mendoakan keberhasilanku dalam menyelesaikan tugas akhir ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta, 29 Desember 2016
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PENGESAHAN ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
HALAMAN PENGESAHAN ... iv
BAB IPENDAHULUAN ... 1
A.Latar Belakang Masalah ... 1
B.Rumusan Masalah ... 2
C.Tujuan Penelitian ... 2
D.Tinjauan Pustaka ... 2
1. Tanaman Jambu Biji (Psidium guajava L.) ... 2
2. Kanker Kolon ... 4
3. Sel Kanker WiDr ... 5
4. Metode MTT assay ... 5
E. Landasan Teori ... 6
F. Hipotesis ... 7
BAB IIMETODE PENELITIAN ... 8
A.Kategori dan Rancangan Penelitian... 8
B.Variabel Penelitian ... 8
C.Alat dan Bahan ... 8
D.Tempat Penelitian ... 9
E. Jalannya Penelitian ... 9
viii
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ... 15
A.Ekstraksi dan Fraksinasi ... 15
B.Uji Sitotoksik dengan metode MTT assay ... 15
C.Uji Kromatografi Lapis Tipis ... 22
BAB IVKESIMPULAN DAN SARAN ... 25
A.KESIMPULAN ... 25
B.SARAN... 25
DAFTAR PUSTAKA ... 26
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Perbandingan morfologi sel WiDr, (a) sel hidup, (b) sel WiDr akibat perlakuan ekstrak etanol 250 µg/mL dan (c) sel membentuk kristal formazan setelah penambahan pereaksi MTT ... 17 Gambar 2. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker kolon WiDr ... 18 Gambar 3. Profil KLT ekstrak etanol daun jambu biji dengan fase gerak
n-heksan:etil asetat (8:2) sebelum diberi pereaksi dilihat pada sinar
x
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Pereaksi semprot untuk deteksi kandungan senyawa ... 13 Tabel 2. Rendemen fraksi polar, semi polar, dan non polar daun jambu biji ... 15 Tabel 3. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ... 18 Tabel 4. Pengaruh perlakuan fraksi polar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ... 19 Tabel 5. Pengaruh perlakuan fraksi semipolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ... 20 Tabel 6. Pengaruh perlakuan fraksi nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ... 20 Tabel 7. Hasil uji sitotoksik ekstrak etanol fraksi polar, semipolar dan nonpolar
daun jambu biji terhadap sel WiDr dengan metode MTT assay ... 21 Tabel 8. Deteksi golongan senyawa ekstrak etanol daun jambu biji dengan
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan hasil rendemen ... 29 Lampiran 2. Skema uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan
nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker kolon WiDr ... 31 Lampiran 3. Perhitungan kepadatan sel WiDr ... 32 Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar
dan non polar daun jambu biji... 33 Lampiran 5. Data uji sitotoksik dengan metode MTT pada 96-well plate
menggunakan ELISA Reader ... 34
Lampiran 6. Data uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non polar daun jambu biji (Psidium guajava L.) terhadap sel kanker kolon WiDr ... 35 Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan ekstrak
etanol daun jambu biji ... 37 Lampiran 8. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
polar daun jambu biji ... 38 Lampiran 9. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
semipolar daun jambu biji ... 39 Lampiran 10. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
xii
ABSTRAK
Kanker kolon merupakan salah satu penyebab umum kematian yang berasal dari transformasi epitel usus normal polip adenomatosa dan kanker invasif. Operasi, kemoterapi, dan radioterapi merupakan metode yang digunakan dalam pengobatan kanker. Meskipun menunjukkan keberhasilan terapi, efek samping yang ditimbulkan dalam penggunaan obat masih tergolong berbahaya sehingga perlu dikembangkan pengobatan dengan herbal. Daun jambu biji (Psidium guajava L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat dikembangkan sebagai agen antikanker. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker kolon WiDr dan mengetahui golongan senyawa yang terdapat pada sampel yang memiliki IC50 paling baik.
Penyarian pada penelitian dilakukan dengan metode maserasi dengan etanol 96%. Fraksinasi dilakukan dengan metode partisi cair-cair dengan penyari n-heksan, etil asetat, dan etanol-air. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT assay. Skrining fitokima dilakukan dengan metode kromatografi lapis tipis.
Hasil IC50 ekstrak etanol daun jambu biji yaitu 183,888 µg/mL dan nilai IC50
fraksi polar, semipolar, dan nonpolar lebih besar dari 250 µg/mL. Hasil uji kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol mengandung golongan senyawa flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, dan polifenol.
xiii ABSTRACT
Colon cancer is one of the common causes of death that comes from the transformation of normal intestinal epithelial adenomatous polyps and invasive cancer. Surgery, chemotherapy, and radiotherapy is the method used in the treatment of cancer. Although it shows the success of therapy, side effects in the use of drugs is still quite dangerous, so should be developed with herbal medicine. Guava leaf (Psidium guajava L.) is a plant that can be developed as an anticancer agent. The purpose of this study was to determine the cytotoxic effect of ethanol extract, fractions polar, semipolar and nonpolar guava leaves against WiDr colon cancer cells and determine classes of compounds contained in the sample had the most excellent IC50.
extraction methods on research done by maceration method with 96% ethanol. Fractionation was conducted using liquid-liquid partition with penyari n-hexane, ethyl acetate, and ethanol-water. Cytotoxic test was conducted by MTT assay. Phytochemical screening was conducted using thin layer chromatography.
Results IC50 ethanol extract of guava leaves is 183,888 µ g / mL and IC50 fraction of polar, semipolar and nonpolar greater than 250 µ g / mL. Thin layer chromatography test results showed that ethanol extracts contain class of flavonoids, tannins, saponins, alkaloids and polyphenols.
