58
Lampiran 1
1. Hasil Kromatogram Asam 4-t-butilsinamat (dengan penampak noda sinar UV
254 nm)
Fase Gerak
I II III
Keterangan:
A : noda asam malonat
B : noda asam 4-t-butilsinamat C : noda 4-t-butilbenzaldehid
I : fase gerak heksana-kloroform-asam asetat (5:3:2) II : fase gerak heksana-kloroform-asam asetat (4:3:3) III : fase gerak kloroform-aseton-asam asetat (2:1:2)
59
Lampiran 2
2. Hasil Kromatogram Asam 4-t-butilsinamat (dengan penampak noda larutan
anisaldehid-asam sulfat)
Fase Gerak
I II III
Keterangan:
A : noda asam malonat
B : noda asam 4-t-butilsinamat C : noda 4-t-butilbenzaldehid
60
Lampiran 3
3. Serapan Inframerah Asam 4-t-butilsinamat pada penelitian terdahulu
(Santoso, 2006)
61
Lampiran 4
4. Perhitungan Volume Pemberian Suspensi Asam 4-t-butilsinamat dan Asam
Sinamat
2.1. Dosis 2,5 mg/kgBB dengan suspensi asam 4-t-butilsinamat dan asam sinamat pada konsentrasi 0,5 mg/ml ( pada tikus dengan berat 200 gram):
Dosis tikus = 0,5mg
2.2. Dosis 5 mg/kgBB dengan suspensi asam 4-t-butilsinamat dan asam sinamat pada konsentrasi 1mg/ml ( pada tikus dengan berat 200 gram):
Dosis tikus = 1mg
2.3. Dosis 7,5 mg/kgBB dengan suspensi asam 4-t-butilsinamat dan asam sinamat pada konsentrasi 1,5 mg/ml ( pada tikus dengan berat 200 gram):
Dosis tikus = 1,5mg
2.4. Dosis 10 mg/kgBB dengan suspensi asam 4-t-butilsinamat dan asam sinamat pada konsentrasi 2 mg/ml ( pada tikus dengan berat 200 gram):
Dosis tikus = 2mg
2.5. Dosis 12,5 mg/kgBB dengan suspensi asam 4-t-butilsinamat dan asam sinamat pada konsentrasi 2,5 mg/ml ( pada tikus dengan berat 200 gram):
62
Lampiran 5
5. Perhitungan Anava Satu Arah dan HSD 5% untuk Hasil Pengujian Asam 4-t
-butilsinamat
5.1. Pada Waktu Pengamatan 0 menit (T0)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T0 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 2,5 mg/kgBB D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.01375 5 0.00275 8.25 0.000119 2.620652
Within Groups 0.008 24 0.000333
Total 0.02175 29
Kesimpulan:
63
Lanjutan lampiran 5
Perhitungan HSD 5% Pada T0
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
5.2. Pada Waktu Pengamatan 30 menit (T1)
Volume kaki tikus putih tidak berubah, sama seperti pada waktu T0.
5.3. Pada Waktu Pengamatan 60 menit (T2)
Volume kaki tikus putih tidak berubah, sama seperti pada waktu T0.
5.4. Pada Waktu Pengamatan 90 menit (T3)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T3 Perlakuan
64
Lanjutan lampiran 5
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 7, 5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.017667 5 0.003533 4.988235 0.002844 2.620652
Within Groups 0.017 24 0.000708
Total 0.034667 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (4,99) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T3
K- D I D II D III D IV D V
65
Lanjutan lampiran 5 5.5. Pada Waktu Pengamatan 120 menit (T4)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T4 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 2,5 mg/kgBB D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.034667 5 0.006933 13.86667 2.02E-06 2.620652
Within Groups 0.012 24 0.0005
Total 0.046667 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (13,87) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T4
K- D I D II D III D IV D V
Perlakuan Mean 0.26 0.20 0.26 0.30 0.30 0.30
66
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
5.6. Pada Waktu Pengamatan 150 menit (T5)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T5 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 2,5 mg/kgBB D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.024667 5 0.004933 4.082759 0.007994 2.620652
Within Groups 0.029 24 0.001208
Total 0.053667 29
67
Lanjutan lampiran 5 Harga F hitung (4,08) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T5
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
5.7. Pada Waktu Pengamatan 180 menit (T6)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T5 Perlakuan
68
Between Groups 0.02275 5 0.00455 4.55 0.004646 2.620652
Within Groups 0.024 24 0.001
Total 0.04675 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (4,55) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T6
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
5.8. Pada Waktu Pengamatan 210 menit (T7)
PERHITUNGAN ANAVA
69
Lanjutan lampiran 5
Keterangan :
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 2,5 mg/kgBB D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam 4-t-butil sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.05275 5 0.01055 19.47692 9.57E-08 2.620652
Within Groups 0.013 24 0.000542
Total 0.06575 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (19,48) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T7
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
5.9. Pada Waktu Pengamatan 240 menit (T8)
70
Lampiran 6 6. Perhitungan Anava Satu Arah dan HSD 5% untuk Hasil Pengujian Asam Sinamat
6.1. Pada Waktu Pengamatan 0 menit (T0)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T0 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.014 5 0.0028 8.4 0.000105 2.620652
Within Groups 0.008 24 0.000333
Total 0.022 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (8,4) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T0
K- D I D II D III D IV D V
Perlakuan Mean 0.25 0.27 0.24 0.20 0.23 0.25
K- 0.25 0 tb 0.02 tb 0,01 tb 0,05 * 0.02 tb 0 tb
71
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
6.2. Pada Waktu Pengamatan 30 menit (T1)
Volume kaki tikus putih tidak berubah, sama seperti pada waktu T0.
6.3. Pada Waktu Pengamatan 60 menit (T2)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T2 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
72
Between Groups 0.048667 5 0.009733 29.2 1.84E-09 2.620652
Within Groups 0.008 24 0.000333
Total 0.056667 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (29,2) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T2
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
6.4. Pada Waktu Pengamatan 90 menit (T3)
PERHITUNGAN ANAVA
73
Lanjutan lampiran 6 Keterangan :
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.051417 5 0.010283 22.43636 2.49E-08 2.620652
Within Groups 0.011 24 0.000458
Total 0.062417 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (22,44) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T3
K- D I D II D III D IV D V
74
Lanjutan lampiran 6
6.5. Pada Waktu Pengamatan 120 menit (T4)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T4 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.053417 5 0.010683 25.64 6.77E-09 2.620652
Within Groups 0.01 24 0.000417
Total 0.063417 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (25,64) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T4
K- D I D II D III D IV D V
Perlakuan Mean 0.26 0.30 0.21 0.17 0.20 0.23
75
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
6.6. Pada Waktu Pengamatan 150 menit (T5)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T4 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.050417 5 0.010083 18.61538 1.46E-07 2.620652
Within Groups 0.013 24 0.000542
76
Lanjutan lampiran 6 Kesimpulan:
Harga F hitung (18,62) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T5
K- D I D II D III D IV D V
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
6.7. Pada Waktu Pengamatan 180 menit (T6)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T6 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
77
Lanjutan lampiran 6 Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.07375 5 0.01475 29.5 1.66E-09 2.620652
Within Groups 0.012 24 0.0005
Total 0.08575 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (29,5) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T6
K- D I D II D III D IV D V
Perlakuan Mean 0.31 0.29 0.21 0.17 0.20 0.23
K- 0.31 0 tb 0.02 tb 0,1 * 0,14 * 0,11 * 0,08 *
q (0.05; p;db) = 4,37 HSD(5%) = =
n RJK
q 0,04
Keterangan:
tb : Perbedaan tidak bermakna karena mean < HSD 5% * : Perbedaan bermakna karena mean > HSD 5%
6.8. Pada Waktu Pengamatan 210 menit (T7)
78
Lanjutan lampiran 6
6.9. Pada Waktu Pengamatan 240 menit (T8)
PERHITUNGAN ANAVA
Volume Telapak kaki Tikus Pada T8 Perlakuan
K- : Kelompok kontrol (Kelompok tikus yang diberi Suspensi CMC Na 0,5%) D I : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 2,5 mg/kgBB
D II : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 5 mg/kgBB D III : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 7,5 mg/kgBB D IV : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 10 mg/kgBB D V : Kelompok tikus yang diberi suspensi asam sinamat 12,5 mg/kgBB
Tabel Anava
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 0.06675 5 0.01335 16.86316 3.6E-07 2.620652
Within Groups 0.019 24 0.000792
Total 0.08575 29
Kesimpulan:
Harga F hitung (16,86) > F tabel 0,05% (2,62) maka terdapat perbedaan efek yang bermakna.
Perhitungan HSD 5% Pada T6
K- D I D II D III D IV D V
Perlakuan Mean 0.31 0.28 0.22 0.17 0.20 0.23
79
Lanjutan lampiran 6
q (0.05; p;db) = 4,37 HSD(5%) = =
n RJK
q 0,06
Keterangan:
80
Lampiran 7
7. Hasil Perhitungan Analisis Probit Asam 4-t-butilsinamat
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * *
Parameter estimates converged after 11 iterations. Optimal solution found.
Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX):
Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * * * * * * * *
Observed and Expected Frequencies
81
Lanjutan Lampiran 7
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * * * * * * * *
Confidence Limits for Effective dosis
82
Lanjutan Lampiran 7
10.00 8.00
6.00 4.00
2.00
dosis
0.5
0.0
-0.5
-1.0
Probit
83
Lampiran 8
8. Hasil Perhitungan Analisis Probit asam sinamat
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * *
Parameter estimates converged after 11 iterations. Optimal solution found.
Parameter Estimates (PROBIT model: (PROBIT(p)) = Intercept + BX):
Regression Coeff. Standard Error Coeff./S.E.
dosis .31412 .04044 7.76712
Intercept Standard Error Intercept/S.E.
-1.75075 .22638 -7.73357
Pearson Goodness-of-Fit Chi Square = 24.846 DF = 1 P= .000
Since Goodness-of-Fit Chi square is significant, a heterogeneity factor is used in the calculation of confidence limits.
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * * * * * * * *
Observed and Expected Frequencies
Number of Observed Expected
dosis Subjects Responses Responses Residual Prob
84
Lanjutan Lampiran 8
* * * * * * * * * * * * P R O B I T A N A L Y S I S * * * * * * * * * * * *
Confidence Limits for Effective dosis
85
Lanjutan Lampiran 8
8.00 7.00
6.00 5.00
4.00 3.00
2.00
dosis 0.5
0.0
-0.5
-1.0
-1.5
Pr
obi
t
86
87
88
Lampiran 10 Tabel Uji HSD