46 LAMPIRAN
Lampiran 1. Komposisi dan Prosedur Pembuatan Medium 1. Medium Strach Casein Nitrat (SCN)
Bahan
2. Medium Yeast Extract Malt Extract (YEME) (Nurkanto et al., 2008) Bahan
3. Pembuatan Medium Oatmeal (Nurkanto et al., 2008)
4. Pembuatan Medium Protease Agar (PA) (Himedia) Bahan
47 5. Pembuatan Medium Starch Agar (SA)
6. Pembuatan Media Urea Broth (Bridson, 1998) Bahan
Urea 20 g
Sodium klorid 5 g Potasium dihidrogen fosfat
7. Pembuatan Medium Sulfide Indole Motility (SIM) (Bridson, 1998) Bahan
Pepton 6,1 g
Tripton 20 g
Ferro ammonium sulfat 0,2 g Na-tiosulfat 0,2 g
Agar 3,5 g
Akuades 1000 ml
pH 7,3 ± 0,2
8. Pembuatan Medium Basal Bahan
K2HPO4 1 g
MgSO4 0,5 g
FeSO4 50 mg
Na-Molibdat 0,005 g
48 Prosedur pembuatan medium
Semua bahan dilarutkan dalam akuades sampai volume 1000 ml. Larutan dididihkan dan terus diaduk hingga homogen. Kemudian pH medium diatur, apabila terlalu asam ditambahkan NaoH dan apabila terlalu basa ditambahkan HCl. Setelah itu medium disterilkan dengan autoklaf dengan suhu 121 oC bertekanan 2 atm selama 15 menit.
49 Lampiran 2. Spesifikasi Alat dan Bahan
1. Alat
No. Nama Alat Merek/Tipe Kegunaan Tempat
1 Object glass Sail brand Untuk pengujian
mikromorfologi Lab. Mikrobiologi 2 Cover glass Sail brand
Penutup
(pasangan) object glass
Lab. Mikrobiologi 3 Labu Erlenmeyer Schott Duran,
Germany
Menyimpan
media Lab. Mikrobiologi 4 Beaker glass IWAKI
Pyrex®, Japan Preparasi media Lab. Mikrobiologi 5 Tabung reaksi IWAKI
Pyrex®, Japan Uji biokimiawi Lab. Mikrobiologi 6 Cawan petri IWAKI
Pyrex®, Japan Kultivasi bakteri Lab. Mikrobiologi 7 Pipet ukur IWAKI
Pyrex®, Japan
Mengambil larutan dengan volume yang diketahui
Lab. Mikrobiologi
8 Pipet tetes Stera, Indonesia
Mengambil larutan dengan volume yang tidak diketahui
Lab. Mikrobiologi
9 Desikator - Menstabilkan
suhu Lab. Mikrobiologi
10 Mikropipet Socorex, Swiss
Memindahkan
larutan Lab. Mikrobiologi
11 Tip Biologix,
Amerika
Memindahkan
larutan Lab. Mikrobiologi 12 Timbangan analitik
Tipe EO 2140 (Ohaus Co., USA)
Menimbang
media Lab. Mikrobiologi 13 Hot plate Ika® C-MAG
HS 10
Menghomogenkan larutan dengan pemanasan
Lab. Mikrobiologi 14 Stirrer bar - Mengaduk larutan Lab. Mikrobiologi
15 Kulkas National®
model B22AF
Menyimpan
media Lab. Mikrobiologi
16 Autoclave
Sterilisasi alat dan
bahan Lab. Mikrobiologi
17 Oven Memmert Sterilisasi alat Lab. Mikrobiologi 18 Inkubator Memmert Menginkubasi
50
19 Microwave Menumaster Memanaskan
media Lab. Mikrobiologi 20 Spektrofotometer - Mengukur
serapan warna
Lab. Organik, MIPA
21 Mikroskop cahaya Oliympus C110
Untuk mengamati
mikromorfologi Lab. Mikrobiologi 22 Mikroskop stereo Olympus Z20 Untuk mengamati
makromorfologi Lab. Mikrobiologi 23 Rotary evaporator Stuart
RE300DB
CR7 Mengsentrifugasi suatu suspensi Lab. Riset UNSOED
25 pH meter
Mengukur pH
media Lab. Mikrobiologi
26 Pembakar spirtus - Pencipta suasana
steril Lab. Mikrobiologi 27 Bor gabus 0,5 mm - Menginokulasi
isolat Lab. Mikologi 28 Filler Brand Menyedot larutan Lab. Mikrobiologi 29 Jarum inokulum - Inokulasi bakteri Lab. Mikrobiologi 30 Sprayer alkohol Nagata Untuk kerja
aseptis Lab. Mikrobiologi
31 Baki Nagata Tempat alat Lab. Mikrobiologi
32 Spatula Batang penngaduk Lab. Mikrobiologi
33 Corong -
Untuk
memudahkan memasukkan larutan
Lab. Mikrobiologi
34 Rak tabung reaksi - Meletakan tabung
reaksi Lab. Mikrobiologi
2. Bahan
No Nama bahan Spesifikasi Kegunaan
1 Isolat aktinomisetes Isolat uji
2 Medium SCN 2000 ml Sebagai medium tumbuh
isolat aktinomisetes 3 Medium YEME 1800 ml Sebagai medium tumbuh
isolat aktinomisetes 4 Medium Oatmeal 1800 ml Sebagai medium tumbuh
isolat aktinomisetes
5 Medium TSA 100 ml Sebagai medium tumbuh
isolat aktinomisetes 6 Medium TSB 100 ml Sebagai medium uji isolat
51
10 Medium Urea Agar 50 ml Sebagai medium uji isolat aktinomisetes
11 Medium SIM 50 ml Sebagai medium uji isolat aktinomisetes
12 Medium Basal 600 ml Sebagai medium uji isolat aktinomisetes
13 Galaktosa 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
14 Sukrosa 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
15 Raffinosa 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
16 Mannitol 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
17 Arabinosa 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
18 Xilosa 1 % Sebagai bahan uji biokimiawi
glass dan cover glass
52
Lampiran 3. Tabel Pengamatan Koloni Aktinomisetes
Isolat Karakteristik Hari ke-
2 4 6 8 10 12 14
ke substrat
Belum ada
Ada Ada Ada Ada
Ada Ada
Bentuk Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular Irregular Irregular
Permukaan Seperti bakteri
Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru
Elevasi Raised Raised Raised Raised Raised Raised Raised Margin Rata Rata Undulate Undulate Undulate Undulate Undulate Miselium
ke substrat
Belum ada
Ada Ada Ada Ada Ada Ada
Bentuk Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular Sirkular
Permukaan Seperti bakteri
Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru Berbeludru
Elevasi Raised Raised Raised Raised Raised Raised Raised
Margin Rata Rata Rata Rata Rata Rata Undulate
Kode Isolat
K-2C K-3E
Atas Bawah Atas Bawah
2
4
53 6
8
10
12
14
54 Lampiran 4. Tabel Pengamatan Makroskopis
Isolat Hari ke- Koloni tampak atas Koloni tampak bawah
K-2C
7
14
K-3E
7
14
55 Lampiran 5. Tabel Pengamatan Uji Biokimiawi
No Uji Biokimiawi K-2C K-3E
1 Hidrolisis amilum + +
2 Hidrolisis kasein + +
3 Hidrolisis lipid + +
4 Uji erase + +
5 Uji reduksi nitrat + -
6 Uji produksi H2S - -
7 Uji
pengunaan karbohidrat
Galaktosa - +
Sukrosa + +
Raffinosa + +
Mannitol + +
Arabinose + +
Xilosa - +
Gambar
Uji Biokimiawi Kode Isolat
K-2C K-3E
Hidrolisis amilum
Hidrolisis kasein
Hidrolisis lipid
56 Uji erase
Uji reduksi nitrat
Uji produksi H2S
Uji pengunaan karbohidrat
Galaktosa
Sukrosa
K
K
K
K-2C
K-3E
57 Raffinosa
Mannitol
Arabinose
Xilosa
58
Lampiran 6. Pengaruh Medium Pertumbuhan Terhadap Pertumbuhan Isolat Aktinomisetes
a. Isolat K-2C Medium Pertumbuhan
Hari ke-
7 14 21
SCN
YEME
Oatmeal
59 b. Isolat K-3E
Medium Pertumbuhan
Hari ke-
7 14 21
SCN
YEME
Oatmeal
60
Lampiran 7. Pengaruh pH Terhadap Medium Pertumbuhan a. Isolat K-2C
Medium Pertumbuhan
pH
12 7 2
SCN
YEME
Oatmeal
61 b. Isolat K-3E
Medium Pertumbuhan
pH
12 7 2
SCN
YEME
Oatmeal
62
Lampiran 8. Tabel Biomassa Miselium Aktinomisetes
Isolat Medium Bobot Awal Bobot Akhir Biomassa Miselium
K-2C SCN 0,0339 0,8464 0,8125
YEME 0,0339 0,5456 0,5117
Oatmeal 0,0339 3,8020 3,7681
K-3E SCN 0,019 0,6747 0,6557
YEME 0,019 0,5236 0,5046
Oatmeal 0,019 2,6585 2,6395
63
Lampiran 9. Tabel Bobot Pigmen Intraseluller dan Ekstraseluller Aktinomisetes
1. Pigmen Intraseluller
Kode Isolat Medium
Pertumbuhan Miselium (g)
Miselium Setelah Ekstraksi (g)
PigmenTerekstrak
2. Pigmen Ekstraseluller Kode
Isolat
Medium
Pertumbuhan Endapan (g)
Endapan Setelah Ekstraksi (g)
64
Lampiran 10. Tabel Pengamatan Perbandingan Warna Ekstrak Pigmen dengan Standar Warna Universal
Isolat Medium
Warna
Light reddish brown 2,5 YR 6/4
Light reddish brown 2,5 YR 6/4
Pinkish grey 5 YR 7/2
YEME Reddish yellow 7,5 YR 6/8
Reddish yellow 7,5 YR 7/8
Reddish yellow 7,5 YR 8/8
Pinkish white 7,5 YR 8/2
K-3E
SCN Pinkish white 7,5 YR 8/2
Pinkish white 7,5 YR 8/2
Pinkish white 7,5 YR 8/2
White 5 Y 8/1
YEME Yellow 2,5 Y 8/6
Pale yellow 2,5 Y 8/4
Pale yellow 2,5 Y 8/4
Yellow 2,5 Y 7/8
Oatmeal Pale yellow
2,5 Y 8/4
Pale yellow 2,5 Y 8/4
Pale yellow 2,5 Y 8/4
Pale yellow 2,5 Y 8/4
65
Lampiran 11. Tabel Pengamatan Serapan Panjang Gelombang Maksimum dari Ekstrak Pigmen
Isolat Medium
Panjang Gelombang Maksimum Intraseluller
Ekstraseluller
pH 4 pH 7 pH 10
K-2C
SCN 523,50 523,50 523,00 527,00
YEME 523,00 483,50 483,50 Not detected Oatmeal 533.50 534,50 531,00 Not detected
K-3E
SCN Not detected 528,40 538,00 Not detected
YEME 404,50 403,50 Not detected 377,00 Oatmeal 699,00 Not detected Not detected 451,50
66
BIODATA PENULIS
Penulis bernama lengkap Dwi Retnowati, dilahirkan di Bogor pada tanggal 10 Maret 1992 dari ayah Sutrisno dan ibu Suwarti. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara. Penulis saat ini bertempat tinggal di Perumahan Pondok Damai blok G 3/16 RT/RW 005/013, Kecamatan Cileungsi - Kabupaten Bogor (16820). Penulis memulai pendidikan di TK Aisyah 05 lulus tahun 1998, kemudian melanjutkan pendidikan tingkat dasar di SD Negeri 01 Cileungsi lulus tahun 2004, jenjang tingkat menengah dilalui di SMP Negeri 01 Cileungsi lulus tahun 2007. Tahun 2010 penulis lulus dari SMA Negeri 01 Cibinong, Bogor dan pada tahun yang sama melanjutkan pendidikan di Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman.
Karya Ilmiah :
1. Usaha Pembuatan Sirup Jambe (Areca catechu L.) Kaya Manfaat, Dan Menyehatkan Dengan Rasa Yang Enak Serta Menyegarkan (Program Kreativitas Mahasiswa, 2011)
2. (Program Kreativitas Mahasiswa, 2012)
3. Metode Ektraksi Dna Untuk Identifikasi Molekuler Aktinomisetes Endofit Tanaman Menggunakan Sekuen 16s rDNA(Laporan PKL, 2012).
4. Identifikasi Aktinomisetes Asal Serasah Mangrove Segara Anakan Cilacap dan Kemampuannya dalam Produksi Pigmen pada Berbagai Medium Pertumbuhan (Skripsi, 2014)
Kegiatan pengembangan diri yang dilakukan :
1. Peserta Kegiatan Orientasi Pengenalan Kampus (OSPEK) “SYNAPS” Fakultas Biologi Tahun 2010
2. Pelatihan dan Pengembangan Karakter Mahasiswa (PKKM) UNSOED Tahun 2010.
3. Asisten Praktikum Mikrobiologi Dasar Jurusan Perikanan Unsoed Tahun 2012.
4. Asisten Praktikum Mikrobiologi Dasar Fakultas Biologi Unsoed Tahun 2012 dan 2013.
5. Asisten Praktikum Mikrobiologi Farmasi Unsoed Tahun 2012 dan 2013. 6. Asisten Praktikum Mikrobiologi Dasar D-III Bilogi Unsoed Tahun 2012. 7. Praktik Kerja Lapangan (PKL) di LIPI Cibinong Bogor, 21 Januari – 22
Februari 2013.
8. Asisten Praktikum Mikrobiologi Industri Tahun 2013.
67
10.Asisten Praktikum Mikrobiologi Kesehatan Masyarakat Unsoed Tahun 2013 11.Kuliah Kerja Nyata (KKN) Posdaya Desa Pandak, Kecamatan Sumpiuh
Kabupaten Banyumas Universitas Jenderal Soedirman tahun 2013 12.Asisten Praktikum Bakteriologi Fakultas Biologi Unsoed Tahun 2013 13.Asisten Praktikum Mikrobiologi Farmasi Unsoed Tahun 2014.
14.Asisten Praktikum Mikrobiologi Kelautan Unsoed Tahun 2014 15.Asisten Praktikum Mikrobiologi Ligkungan Tahun 2014. Pengalaman Organisasi dan Kepanitiaan :
1. Anggota Unit Kegiatan Mahasiswa Bioma Fakultas Biologi Unsoed Tahun 2010-2011
2. Kepanitiaan Expo Unit Kegiatan Mahasiswa BIOMA Fakultas Biologi Tahun 2011
3. Kepanitiaan Malam Keakraban BIOMA sebagai Sie. Acara Tahun 2011 4. Kepanitian LOKOMOSI (Lomba Kreasi Bioma Poster dan Fotografi) Tahun
2011 sebagai sie Publikasi Dekorasi dan Dokumentasi
5. Sekretaris Umum Unit Kegiatan Mahasiswa Bioma Fakultas Biologi Unsoed Tahun 2012
6. Kepanitiaan Expo Unit Kegiatan Mahasiswa BIOMA Tahun 2012
7. Kepanitiaan Malam Keakraban BIOMA sebagai Sie. Acara Tahun 2012-2013 8. Kepanitiaan Lomba Fotografi dan Desain Grafis Tahun 2012
