TEKNIK IDENTIFIKASI PEYAKIT CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA SECARA VISUAL,CEPAT DAN SEDERHANA MUTIA E. DWIASTUTI

(1)

TEKNIK IDENTIFIKASI PEYAKIT CVPD DAN DEFISIENSI

UNSUR HARA SECARA VISUAL,CEPAT DAN

SEDERHANA

MUTIA E. DWIASTUTI

(2)

PROGRAM KURSUS CVPD

NO TAHAPAN METODE PELATIHAN

1. Penyampaian materi Metode ajar/ penyuluhan dan diskusi 2. Identifikasi gejala

CVPD dan difisiensi unsur hara

Demonstrasi peserta mengidentifikasi gejala terhadap bahan tanaman jeruk yang sudah disediakan panitia

3. Identifikasi uji pati

yodium

Peserta mempraktekkan uji pada reagen dan bahan tanaman jeruk yang sudah disediakan panitia serta mendiskusikan hasil ujinya.

4. Identifikasi molekuler

dengan PCR

Peserta membandingkan dengan uji sederhana pati yodium

5. Penyediaan kit uji pati

yodium

Bagi peserta yang tertarik bisa mendapatkannya waktu 45 menit 25 menit 30 menit 15 menit 5 menit

(3)

PENDAHULUAN

Liberibacter asiaticum

CVPD , silent killer disease

 Endemik 10 m -1000 m dpl

 1990 jeruk Batu dan Bali punah : kerugian 23 M/th

 1997 : 100% keprok tejakula terinfeksi, lagi.

 1997 Kalbar (bebas > 31% infected)  65.000 org petani jeruk terancam

(4)

PENDAHULUAN Transmisi CVPD: 1) Benih dan mata tempel sakit

(5)

PENDAHULUAN

Transmisi CVPD 2). hama vektor Diaphorina citri

(6)

TAXONOMI Kingdom : Bacteria Phylum : Proteobacteria Class : Alphaproteobacteria Order : Rhizobiales Family : Rhizobiaceae Genus : Liberibacter

Species : - Candidatus Liberibacter africanus ( Jagoueix et

al.1994) syn Liberibacter africanus / africanum

- Candidatus Liberibacter asiaticus ( Jagoueix et

al.1994) syn Liberibacter asiaticus / asiaticum

(7)

TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD

A. Teknik Identifikasi berdasarkan Gejala Serangan CVPD Lapang

1. Kelainan gejala harus diamati pada keseluruhan tanaman dalam kebun, amati pada tanaman degenerasi tapi tanpa luka pada batang atau akar

(8)

A. Teknik Identifikasi berdasarkan Gejala Serangan CVPD Lapang

(9)

1. Infeksi pada tanaman muda :

Temukan gejala kuncup berkembang lambat, pertumbuhannya mencuat ke atas, daun kecil.

(10)

PENDAHULUAN

Pada tanaman dewasa temukan gejala pada daun, periode pertunasan, buah

(11)

Pada gejala berat, : daun menguning sebagian atau seluruhnya, terjadi pengerasan tulang daun primer dan sekunder, daun menjadi lebih kaku dan menebal (vein crocking)

(12)

Pada tanaman dewasa, kadang ditemukan gejala greening sektoral

: blotching cabang tertentu , tunas air lebih banyak dari tanaman

normal di luar musim pertunasan, daun pada menjorok ke atas, cabang-cabang meranggas

(13)

buah lebih kecil, tidak simetris, buah red nose (warna orange pada pangkal buah )

terutama di tempat yang terlindung dari sinar. Buah terserang bijinya abortus dan rasanya asam .

(14)

TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD : KEBERADAAN SERANGGA VEKTOR

(15)

AGENS HAYATI D. CITRI Agens hayati : entomopatogen Hirsutella citriformis, B. bassiana dan M.anisopliae

(16)

TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN WAWANCARA

gejala khas tidak

ditemukan?????  Wawancara petani, budidaya

yang dilakukan

 Pupuk cukup?

 Pangkas berat sampai batas sehat

 Pupuk mikro dan makro seimbang sesuai kebutuhan

 Amati pertunasan berikutnya, ada gejala sama  CVPD

 tidak bergejala/ sehat bukan penyakit menular (CVPD)

(17)

TEKNIK IDENTIFIKASI KEBERADAAN TANAMAN INANG LAIN YANG PEKA

Sub famili spesies

Aurantioideae : Aurantieae Aeglopsis chevalieri Swingle

Atalantia (syn. Severinia) buxifolia (Poir.) Oliv.

Balsamocitrus dawei Stapf Citrus spp.

Limonia acidissima L. Murraya exotica L. Murraya paniculata.

Pamburus missionis (Wight) Swingle Swinglea glutinosa (Blanco) Merr. Triphasia trifolia (Burm. f.) P. Wilson Aurantioideae: Clauseneae Clausena anisata (Willd.) Benth.

Clausena indica Oliv.

Clausena lansium (Lour.) Skeels Rutoideae: Diosmeae Calodendrum capense (L. f.) Thunb Rutoideae: Toddaliinae _{Vepris lanceolata (Lam.) G. Don}

(18)

TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ].

 Gejala pada benih jeruk yang belum ditanam biasanya agak sulit karena masa inkubasi penyakit cukup lama antara 4 – 8 bulan setelah inokulasi.

 Cara pengamatan secara langsung terhadap gejala, vektor, wawancara dan tanaman inang tidak jelas juga, maka perlu didampingi alat bantu identifikasi.

 Alat bantu tersebut berupa pemeriksaan lebih rinci dan akurat dengan

 1. METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ], penggandaan DNA patogen

 2. Metode dengan tanaman indikator

 3. Metode uji pati yodium

 4. Elektron mikroskop

(19)

TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN UJI PATI YODIUM

 Alat bantu tersebut berupa pemeriksaan penumpukan amilum dengan

UJI PATI YODIUM atau dengan METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ].

 Teknik ini sangat sederhana dan murah sekali (hanya memerlukan biaya Rp 350,- saja. Sangat murah bila dibanding dengan uji PCR dengan biaya Rp 125.000 – Rp 250.000),

 berguna untuk membantu deteksi cepat di lapang. Teknik yang ditemukan oleh Schneider 1968, di uji lagi oleh Kawano, 2006 dan diacu secara Nasional oleh Kementerian Pertanian Australia pada tahun 2014 sampai sekarang.

(20)

TEKNIK IDENTIFIKASI DENGAN UJI PATI YODIUM

(21)

No Lokasi Perbandingan hasil analisa CVPD

Iodine test Anatomy test-amylum

PCR

1 Desa Tongkah 5 Negative Negative Negative

2 Desa Tongkah 5 Negative Negative Negative

3 Desa Bukit 5 Negative Negative Negative

11 Desa Melas 5 positive positive positive

12 Desa Melas 5 positive positive positive

13 Desa Beganding 5 Negative Negative Negative

14 Desa Beganding 5 Negative Negative Negative

15 Desa Simpang empat 5 positive positive positive

16 Desa Simpang empat 5 positive positive positive

17 Desa Simpang Empat 2 Positive, 3 Negative

Positive Positive

18 Desa Brastepu 1 Positive, 4 Negative Positive Positive

19 Desa Brastepu 1 Positive, 4 Negative Positive Positive

(22)

(23)

TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK

Pedoman Untuk mengatasi kerancuan ini gejala, antara CVPD dan defisiensi hara :

Unsur-unsur hara mikro tersebut adalah Zn, Fe, Mn, Cu, B, dan Mo serta unsur hara makro N dan Mg. Gejala klorosis pada daun kekurangan unsur hara biasanya mempunyai pola teratur,

(24)

- Zn

(25)

- Mn

(26)

- B

(27)

(28)

(29)

PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN

JERUK SECARA VISUAL

 Semua peserta mengisi formulir yang disediakan untuk praktek identifikasi

 Panitia menyediakan 3 door prize buku untuk peserta terbaik dalam identifikasi visual

 Peserta mengisi gejala apa dari tiap slide yang ditayangkan

 Begitu slide berakhir, peserta dimohon dapat menggeser formulir pada peserta sebelah kirinya untuk dicocokkan

(30)

PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK

SECARA VISUAL

(31)

(32)

(33)

(34)

(35)

(36)

(37)

(38)

SECARA VISUAL

(39)

SECARA VISUAL

(40)

(41)

(42)

(43)

(44)

(45)

(46)

(47)

(48)

(49)

(50)

(51)

(52)

JAWABAN 1 8 2 9 3 10 4 11 5 12 6 13

(53)

PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK

IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK

(54)

Panitia menyiapkan 20 nomor sampel berbeda di ruang sebelah

Tiap peserta diberi kesempatan untuk praktek dalam waktu tidak lebih dari 10 menit

satu nomor sampel digunakan untuk 3 peserta, dengan mengambil daun yang berbeda

Peserta diminta mengisi lembar jawaban, : nama, gejala .... Dan hasil reaksi uji pati yodium

Peserta yang mengerjakan dengan benar tentang gejala dan hasil reaksi uji pati akan mendapat souvenir/ door prize

(55)

(56)

(57)

(58)

Gores tulang daun dengan terpilih dengan kertas abrasif (120 mesh) yang sudah dipotong sebanyak 20 kali gores dengan tekanan yang sama

(59)

 Masukkan tiap sampel daun yang telah digores dalam plastik dan tambahkan dengan H2O 100 ml

 kemudian ratakan pada bagian daun.

 Satu sampel satu plastik.

(60)

Amati segera cairan dalam plastik masing-masing. Cairan dalam sampel daun yang terinfeksi CVPD akan biru kehitaman. Merupakan reaksi adanya pati amilase yang

berwarna biru dengan pengecatan iodne dan pengecatan amylopektin berwarna ungu dengan iodine. Cairan dalam sampel sehat atau bergejala difisiensi hara tidak akan berubah warna, (tetap jernih/putih).

(61)

Iodine kit

 Kit siap pakai untuk identifikasi CVPD

 Bisa digunakan untuk 100 sampel

 Akurasi 75-80%

 Waktu pengujian sangat singkat (10 menit)

 Langsung digunakan di lapang

 Biaya sangat murah (Rp 350,/ sampel

 uji PCR dengan biaya Rp 125.000 – Rp 250.000/ sampel),

(62)

(63)