IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 9A ASAL KOLON SAPI BALI SECARA FENOTIPIK
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas - Tugas dan Memenuhi
Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
Oleh
Mita Ekamelinda NIM. 1109005049
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN UNIVERSITAS UDAYANA
Setelah mempelajari dan menguji dengan sungguh-sungguh kami berpendapat bahwa
tulisan ini baik ruang lingkup maupun kualitasnya dapat diajukan sebagai skripsi untuk
memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan.
Ditetapkan di Denpasar tanggal 9 Juni 2015
Panitia Penguji :
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. Ketua
dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M.Kes. Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si.
Sekretaris Anggota
drh. Aida Louise Tenden Rompis drh. I Ketut Suada, M.Si.
IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 9A ASAL KOLON SAPI BALI SECARA FENOTIPIK
SKRIPSI
Diajukan untuk Melengkapi Tugas-tugas dan Memenuhi
Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan
Oleh
Mita Ekamelinda NIM. 1109005049
Menyetujui/Mengesahkan:
Pembimbing I, Pembimbing II,
Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M.Kes NIP. 19700122 199512 1 001 NIP. 19670122 199601 1 001
DEKAN FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA
Dr. drh. Nyoman Adi Suratma, MP. NIP. 19600305 198703 1 001
i
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 24 Januari 1993, merupakan
anak pertama dari pasangan Bapak Munziri M. Yasin dan Ibu Nusita Ekalandu
Tobari. Penulis melaksanakan pendidikan di SD Negeri 02 Pagi Duren Sawit,
SMP Negeri 27 Jakarta dan SMA Negeri 61 Jakarta. Pada tahun 2011 penulis
diterima di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana melalui jalur Seleksi
Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN) jalur Ujian Tertulis.
Selama menjadi mahasiswa UNUD, penulis aktif sebagai anggota minat
dan profesi SULUH pada tahun 2011 – 2012 dan sebagai Bendahara tahun 2012 –
2014, serta anggota minpro Satwa Liar Rothschildi 2011 – 2014, dan sebagai
ketua cluster Omnivora 2014 – 2015. Penulis terpilih sebagai anggota istimewa
Badan Perwakilan Mahasiswa FKH pada tahun 2012 – 2013 dan menjabat sebagai
ketua Komisi Kesejahteraan Mahasiswa pada tahun 2013 – 2014. Penulis juga
aktif sebagai anggota dalam LPM Suara Satwa periode 2014 – 2015, serta dalam
kepanitiaan kampus dan di luar kampus lainnya. Penulis juga terpilih sebagai staff
Kementerian Informasi dan Komunikasi BEM-PM UNUD tahun 2013 – 2014.
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran
Hewan (S.KH.) Universitas Udayana, penulis melakukan penelitian dengan judul
ii ABSTRAK
Bakteri asam laktat merupakan bakteri yang bermanfaat dalam bidang pangan dan kesehatan sebagai biopreservatif, fermentatif, atau probiotik. Sapi bali diketahui dapat menjadi inang potensial untuk bakteri asam laktat spesifik. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi secara fenotipik bakteri asam laktat isolat 9A yang diisolasi dari kolon sapi bali, yang memiliki potensi sebagai antimikroba. Identifikasi secara fenotipik mencakup uji secara konvensional dan uji API 50 CHL. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa secara konvensional, bakteri asam laktat isolat 9A adalah Streptococcus sp, sedangkan dengan uji kit API 50 CHL, menunjukkan hasil isolat 9A sebagai Lactobacillus fermentum dengan nilai identifikasi 83%. Perbedaan hasil antara uji konvensional dengan hasil uji kit API 50 CHL, menunjukkan adanya perbedaan sensitivitas dan spesifitas dari kedua uji, sehingga perlu dikonfirmasi lebih lanjut.
iii ABSTRACT
Lactic acid bacteria are the type of bacteria that has benefits in food and health industries as biopreservative, fermentative, or probiotics. Bali cattle are known as potential host for specific lactic acid bacteria. The aim of this study is to identify phenotypically lactic acid bacteria 9A isolated from bali cattle’s colon, that has potential as antimicrobial. In this study, phenotypic identification include conventional method and API 50 CHL. The result of this study showed that lactic acid bacteria isolate 9A is Streptococcus sp., whereas the kit API 50 CHL showed isolate 9A as Lactobacillus fermentum with 83% identity. The difference between the results of conventional method and kit API 50 CHL, may indicate the difference in sensitivity and specificity of the two methods, hence it needs further confirmation.
iv
UCAPAN TERIMAKASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, Allah
SWT Yang Maha Berkehendak atas kesempatan yang diberikan dan hanya atas
izin-Nya lah penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Identifikasi
Bakteri Asam Laktat Isolat 9A Asal Kolon Sapi Bali secara Fenotipik”. Tak lupa penulis hantarkan shalawat dan salam kepada Nabi Besar Muhammad SAW.
Melalui tulisan ini pula, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya
kepada seluruh pihak yang telah membantu penulisan skripsi ini :
1. Bapak Dr. drh. Nyoman Adi Suratma, MP. selaku Dekan Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
2. Bapak Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. selaku pembimbing pertama, atas
keikutsertaan saya dalam penelitian Hibah Bersaing 2014, serta atas
bimbingan, masukan dan waktu yang telah diberikan selama penulisan
skripsi sampai selesai.
3. Bapak dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M.Kes selaku pembimbing
kedua, atas bimbingan, masukan dan waktu yang telah diberikan selama
penulisan skripsi sampai selesai.
4. Para penguji skripsi Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si., drh. Aida
Louise Tenden Rompis, dan drh. I Ketut Suada, M.Si yang telah
memberikan masukan, kritik, saran dan penilaian.
5. Ibu Prof. Dr. drh. Gusti Ayu Yuniati Kencana, MP. selaku Pembimbing
v
6. Kedua orang tua saya, Bapak Munziri dan Ibu Nusita yang sangat saya
cintai dan saya hormati yang tak henti-hentinya memberikan semangat,
doa, nasehat, dan motivasi hingga sampai saat ini penulis tetap percaya
dan bersemangat dalam menyelesaikan studi.
7. Kepada seluruh teman-teman FKH Unud 2011, khususnya Widia, Wardah,
Mega dan Mbak Amel. Terimakasih sudah menjadi teman yang baik
selama di perantauan.
8. Teman - teman satu tim penelitian, Annisa, Yana, Sukoco, Rizky, Nuni
dan Dewa Wid, terimakasih untuk kekompakan dan kerjasamanya.
9. Kak Aulia Insani dan kak Bayu Ratna FKH Unud 2010 yang telah menjadi
senior yang baik dan membimbing.
10.Terakhir namun tidak kalah pentingnya, untuk teman – teman KKN Desa
Gumbrih, Lilie, Vira, Ubed, Siska, Novlin, Karina, Gung Indah, Wulan,
Ika dan Ririn yang telah menjadi saudara yang baik dan menyemangati
penulis untuk menyelesaikan skripsi ini.
Hanya kata terima kasih yang dapat penulis ucapkan kepada seluruh pihak
yang belum penulis sebutkan satu persatu. Penulis menyadari bahwa skripsi ini
masih sangat jauh dari sempurna, oleh karena itu segala kritik dan saran yang
sifatnya membangun sangat penulis harapkan. Besar harapan penulis agar skripsi
ini dapat bermanfaat dan dapat bernilai positif bagi semua pihak yang
membutuhkan.
vi DAFTAR ISI
Halaman
RIWAYAT HIDUP ... i
ABSTRAK …….……. ... ii
ABSTRACT………. ... iii
UCAPAN TERIMAKASIH ... iv
DAFTAR ISI ... vi
DAFTAR TABEL ... viii
DAFTAR GAMBAR ... ix
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Rumusan Masalah ... 3
1.3 Tujuan Penelitian ... 4
1.4 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Bakteri Asam Laktat ... 5
2.2 Antimikroba ... 6
2.3 Penggunaan Bakteri Asam Laktat dalam Pangan ... 9
2.3.1 Bakteri Asam Laktat sebagai Fermentatif... 10
2.3.2 Bakteri Asam Lakat sebagai Probiotik ... 10
2.3.3 Bakteri Asam Laktat sebagai Biopreservatif ... 12
2.4 Sapi Bali ... 13
2.5 Identifikasi Bakteri Asam Laktat secara Fenotipik ... 14
2.6 Konsep Penelitian ... 17
BAB III MATERI DAN METODE 3.1 Materi Penelitian ... 19
3.1.1 Objek ... 19
3.1.2 Alat ... 19
3.1.3 Bahan ... 19
3.2 Metode Penelitian ... 20
3.2.1 Sterilisasi Alat ... 20
3.2.2 Pembuatan Media……… ... 20
3.2.3 Pengambilan Isolat ... 20
3.2.4 Kultivasi Isolat ... 20
3.2.5 Identifikasi Isolat 9A secara Fenotipik ... 21
3.3 Analisis Data ... 23
vii BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Kultivasi Isolat 9A ... 24
4.1.1 Penanaman pada Media MRS Broth ... 24
4.1.2 Uji Katalase ... 25
4.1.3 Pewarnaan Gram ... 26
4.2 Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 9A secara Konvensional ... 27
4.2.1 Uji Produksi Gas CO2 ... 27
4.2.2 Uji Pertumbuhan Pada Suhu 10oC ... 28
4.2.3 Analisis Genus dari Isolat 9A ... 29
4.3 Konfirmasi Bakteri Asam Laktat Isolat 9A dengan Kit API 50 CHL... 30
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 35
5.2 Saran ... 35
viii
DAFTAR TABEL
Tabel ... Halaman
1. Jenis, Distribusi dan Penggunaan Bakteri Asam Laktat ... 9
2. Populasi Kelompok Bakteri Utama pada Usus Manusia ... 11
3. Hasil Kultivasi Isolat 9A ... 27
4. Hasil Uji Identifikasi Konvensional Isolat 9A ... 29
5. Identifikasi BAL Isolat 9A Menggunakan Kit API 50 CHL ... 31
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar ... Halaman
1. Bagan Identifikasi Konvensional Bakteri Asam Laktat ... 16
2. Skema Konsep Penelitian ... ... 18
3. Hasil Penanaman Isolat 9A pada Media MRS Broth ... 24
4. Hasil Uji Katalase Pada Isolat 9A ... 26
5. Hasil Pewarnaan Gram Isolat 9A ... 26
