Uji Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Jambu Bol (Syzygium malaccense L. Merr & Perry) Sebagai Antikolesterol Menggunakan Tikus Jantan

(1)

(2)

Lampiran 2. Bagan kerjapenelitian

Serbuk simplisia

Daun Jambu Bol

Simplisia

dicuci, ditiriskan, dipotong menjadi bagian kecil dan ditimbang sebagai berat basah

dikeringkan dalam lemari pengering

ditimbang berat kering dihaluskan

diekstraksi secara maserasi

Pemeriksaan

Karakterisasi simplisia Skrining Fitokimia Uji Antikolesterol Ekstrak

Penetapan kadar air

Penetapan kadar sari larut dalam

air Penetapan kadar

sari larut dalam etanol Penetapan kadar

abu total Penetapan kadar

abu tidak larut asam

(3)

Lampiran 3. Bagan pembuatan ekstrak etanol daun jambu bol

Dimasukkan ke dalam wadah

Ditambahkan penyari, biarkan selama 5 hari Disaring

Direndam kembali dengan penyari, biarkan selama 2 hari

Disaring

Diuapkan menggunakan

rotavapor (suhu 40oC)

Di uapkan di atas waterbath (suhu 40oC) Disaring

Berat serbuk 900 gram

Ampas Maserat

Maserat Ampas

(4)

Lampiran 4. Bagan pengerjaan uji aktivitas antikolesterol pada tikus

diukur kadar kolesterol total awal dengan cholesterol test

dicatat kadar kolesterol awal

diinduksi dengan lemak kambing, minyakjelantah dan kuning telur 1% bb selama 14 hari

Tikus dipuasakan

18 jam

Diukur kadar kolesterolnya

Tikus dibagi menjadi 6 kelompok, tiap kelompok

terdiri dari 5 ekor tikus

− Kelompok kontrol diberi Na CMC 0,5%

− Kelompok uji EEDJB 100, 200, 300, dan 400 mg/kg bb

− Kelompok pembanding

Simvastatin 0,9 mg/kg bb

Diberikan sediaan uji selama 21 hari

Dicek kadar kolesterol total pada

(5)

(6)

(7)

Lampiran 7. Gambar sediaan penginduksi

Lemak kambing

Kuning telur bebek

(8)

Lampiran 8. Gambar alat

Wadah strips

Strip kolesterol

Chip cholesterol test

(9)

Cholesterol test EasyTouch®GCU

Oral sonde dan spuit

(10)

(11)

1. Penetapan kadar air

% Kadar air= volume air (ml )

berat sampel (gram )

x

100

%

No

Berat sampel Volume awal Volume akhir Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 5,0500 g 5,0500 g 1,2 2,4 1,6 2,6

2 5,0500 g 5,0000 g 1,6 2,6 2,0 2,8

3 5,0300 g 5,0000 g 2,0 2,8 2,4 3,0

Kadar air simplisia

%Kadar air = 1,6 − 1,2 ml

5,0500 g x100% = 7,92%

% Kadar air = 2,0 – 1,6ml

5,0500 g x 100 % = 7,92%

% Kadar air = 2,4 – 2,0 ml

5,0300 g x 100 % = 7,95%

% Kadar air rata-rata = 7,92 % + 7,92 % + 7,95 %

3 = 7,93 %

Kadar air ekstrak

Kadar air = 2,6 – 2,4 ml

5,0500 g x100% = 3,96%

% Kadar air = 2,6 – 2,6 ml

5,0000 g x 100 % = 4%

(12)

% Kadar air = 3,0 – 2,8 ml

5,0000 g x 100 % = 4 %

% Kadar air rata-rata = 3,96 % + 4,0 % + 4,0 %

3 = 3,98 %

2. Penetapan kadar sari larut air

% kadar sari yang larut dalam air =berat sari air

berat sampel

x

100

20 x 100 %

No

Berat sampel Berat sari

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak 1 5,0000 g 5,0500 g 0,1300 g 0,4000 g 2 5,0000 g 5,0000 g 0,1200 g 0,3500 g 3 5,0500 g 5,0500 g 0,1500 g 0,3500 g

Kadar sari simplisia

% Kadar sari larut dalam air = 0,1300 g

Kadar sari ekstrak

Kadar sari larut dalam air = 0,4000 g

(13)

Kadar sari larut dalam air = 0,3500 g

3. Penetapan kadar sari larut etanol

% kadar sari yang larut dalam etanol

=

berat sari air

berat sampel x 100

20 x100 %

No

Simplisia Ekstrak Simplisia Ekstrak

1 5,0500 g 5,0000 g 0,1500 g 0,5000 g

2 5,0000 g 5,0500 g 0,1500 g 0,5500 g

3 5,0000 g 5,0000 g 0,1700 g 0,5500 g

Kadar sari simplisia

Kadar sari larut dalam etanol = 0,1050 g

5,0500 g x 100

20 x100 % = 14,85 %

Kadar sari larut dalam etanol =0,1500 g

5,0000 g x

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata=14,85% + 15% + 17%

3 = 15,61%

Kadar sari ekstrak

5,0000 g x 100

20 x100 % = 50 %

Kadar sari larut dalam etanol =0,5500 g

5,0500 g x 100

20 x100 % = 54 %

(14)

5,0000 g x 100

20 x100 % = 55 %

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata=50% + 45% + 55%

3 = 53%

4. Penetapan kadar abu total

% kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g)x 100 % No

Berat sampel Berat abu

1 2,0002 g 2,0000 g 0,2000 g 0,0400 g

2 2,0004 g 2,0003 g 0,1500 g 0,0450 g

3 2,0006 g 2,0002 g 0,2500 g 0,0550 g

Kadar abu total simplisia

% Kadar abutotal = 0,2000

Kadar abu total ekstrak

2,0000x 100 % = 2 %

(15)

2,0003x 100 % = 2,24 %

% Kadar abu total = 0,0550

2,0002 x 100 % = 2,74 %

% Kadar abu total rata-rata = 2 + 2,24% + 2,74%

3 = 2,32 %

5. Penetapan kadar abu yang tidak larut asam

% Kadar abu tidak larut asam = berat abu tidak larut asam

berat sampel x 100 %

No

1 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0065 g

2 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0041 g

3 2,0000 g 2,0000 g 0,0100 g 0,0045 g

Kadar abu simplisia

% Kadar abu tidak larut asam = 0,0100

2,0000x 100 % = 0,5 %

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,5% + 0,5% + 0,5%

3 = 0,5 %

(16)

Kadar abu ekstrak

2,0000x 100 % = 0,11 %

2,0000x 100 % = 0,12 %

% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 0,11% + 0,11% + 0,12%

3 = 0,11 %

(17)

Mencit

(18)

Contoh perhitungan dosis simvastatin yang diberikan pada tikus

- Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada tikus dengan berat 200 g secara oral adalah 2 ml

a. Berat 20 tablet adalah 2543 mg, berat rata-rata pertablet adalah 127,15g Dosis simvastatin yang digunakan adalah 10 mg

Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis hewan (tikus) dikali 0,018 Dosis tikus dengan berat 200 g adalah (10 mg x 0,018 = 0,18 mg)

Dosis simvastatin yang diberikan adalah

1000

200 x 0,18 mg = 0,9 mg/kg bb

b. Maka serbuk simvastatin yang digunakan adalah

= 0,9 mg

kg bb

10 mg x 127,15 mg= 11,44

c. Volume suspensi simvastatinyang diberikan untuk tikus

Pembuatan suspensi simvastatin : ambil 11,44 mg serbuk simvastatin dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC Na 0,5%

Berat badan tikus = 200 g

Volume larutan yang diberi = 200

1000 x 10 ml= 2 ml

(19)

Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol daun jambu bol yang akan diberikan pada tikus hiperkolesterolemia.

- Dosis suspensi ekstrak etanol daun jambu bol yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb.

a. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol daun jambu bol :

Timbang 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg ekstrak etanol daun jambu bol, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC Na 0,5%

b. Volume suspensi ekstrak etanol daun jambu bol yang akan diberikan pada tikus dengan berat badan 200 g.

− Volume suspensi EEDJB 100 mg/kg bb yang diberikan adalah

200

1000 x 10 ml = 2 ml

200

1000 x 10 ml = 2 ml

200

1000 x 10 ml = 2 ml

200

1000 x 10 ml = 2 ml

(20)

1. Perhitungan rendemen simplisia dan ekstrak

% rendemen = Berat kering

berat basah x 100% Simplisia

Berat basah Berat simplisia Persentase (%)

9100 g 3200 g 35,15

Ekstrak

Berat ekstrak Berat simplisia Persentase (%)

194,45 g 3200 g 6,07

2. Perhitungan dosis

Ekstrak etanol daun jambu bol pada dosis 200 mg/kg bb yang diberikan pada tikus sudah menurunkan kadar kolesterol tikus jadi jika diberikan pada manusia adalah : Konversi dosis tikus (200 g) ke dosis manusia (70kg) dikalikan 56,0

Dosis EEDJB 200 mg/kg bb = 200 mg

1000 g x 200 9 = 40 mg

Dosis ke manusia (70kg)= 40 mg x 56,0 = 2240 mg = 2,24 g ekstrak - Simplisia kering

2,24 g X =

194,45 g 3200 g

Simplisia kering = 36,8629 g - Daun segar

36,8629 g X =

3200 g 9100 g

Berat daun segar = 104,82901 g/hari atau 0.1048 kg/hari

(21)

1. Kontrol Na CMC 0,5%

setelah 14 hari (mg/dl)

Kadar kolesterol setelah perlakuan (mg/dl)

Hari ke-

(22)

4. EEDJB 300 mg/kg bb

Hari ke-

6. Simvastatin 0,9 mg/kg bb No BB

Hari ke-

(23)

N o

Perlakuan Kadar kolestero

Kadar Kolesterol Setelah Perlakuan (mg/dl)

7 14 21

222,8± 12,64 201,8 ± 6,72

225,4± 10,50 170,2 ±

240,2± 13,20 162,6 ±

248,2± 16,63 162,4 ± 6,11

246,8± 12,40 159,4 ± 4,56

146± 6,67 125,4± 6,42 6 Simvastati

n 0,9

(24)

Lampiran 16. Data Berat Badan Tikus

1. Setelah pemberian induksi hiperkolesterol

No Perlakuan Data berat tikus (g) 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb 150,0 150,8 150,2 152.0 152,3 152,3 153,0

6 Simvastatin 0,9 mg/kg bb

(25)

Lampiran 16. (lanjutan)

2. Setelah pemberian suspensi ekstrak etanol daun jambu bol

No Perlakuan Data berat tikus (g)

6 Simvastatin 0,9 mg/kg bb 6 Simvastatin

0,9 mg/bb

(26)

Lampiran 16 (lanjutan)

No Perlakuan

Data berat tikus (g) Hari ke-

15 16 17 18 19 20 21

1 Kontrol Na CMC 0,5 %

163,8 164,5 164,5 164,8 165,2 165,2 165,8 2 EEDJB 100

mg/kg bb

170,0 170,4 170,8 171,4 171,9 171,8 172,0 3 EEDJB 200

mg/kg bb

161,7 161,7 162,5 162,1 162,8 163,2 163,,0 4 EEDJB 300

mg/kg bb

159,5 159,9 160,1 160,1 160,4 159,8 159,8 5 EEDJB 400

mg/kg bb

157,0 157,4 157,8 158,0 158,0 158,2 158,1 6 Simvastatin

0,9 mg/kg bb

(27)

Lampiran 17. Hasil uji analisis statistik kadar kolesterol tikus

Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig. kadar setelah 7 hari

perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 7595.867 5 1519.173 8.644 .000 Within

Groups 4218.000 24 175.750 Total 11813.867 29

kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 9526.167 5 1905.233 11.238 .000 Within

Groups 4068.800 24 169.533 Total 13594.967 29

kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dL)

Between

Groups 13734.167 5 2746.833 27.143 .000 Within

(28)

Lampiran 17. (Lanjutan)

kadar setelah 7 hari perlakuan (mg/dL) Tukey HSD

Kelompok Perlakuan N

Subset for alpha = 0.05

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

kadar setelah 14 hari perlakuan (mg/dL)

Tukey HSD

Kelompok perlakuan N

(29)

Lampiran 17. (Lanjutan)

kadar setelah 21 hari perlakuan (mg/dL) Tukey HSD

Kelompok Perlakuan N

1 2 3

EEDJB 400 mg/kg bb 5 125.40

simvastatin 5 125.60

EEDJB 200 mg/kg bb 5 133.20 133.20

kontrol CMC O,5% 5 185.80

Sig. .820 .092 1.000