LAPORAN PRAKTIKUM HEMATOLOGI I o Tanggal praktikum : Sabtu, 10 Desember 2011
o Judul : Menghitung Jumlah Eritrosit Cara Tabung
o Metode : Kamar hitung
o Tujuan : Menghtung jumlah eritrosit per ml darah
o Prinsip :
Darah + larutan hayem, sel lain selain eritrosit akan lisis. o Nilai normal :
♀ 4,0 – 5,5 jt/mm3 ♂ 4,5 – 6,5 jt/mm3 o Dasar Teori :
Sel darah merah, eritrosit (en:red blood cell, RBC, erythrocyte) adalah jenis sel darah yang paling banyak dan berfungsi membawa oksigen ke jaringan-jaringan tubuh lewat darah dalam hewan bertulang belakang. Bagian dalam eritrosit terdiri dari hemoglobin, sebuah biomolekul yang dapat mengikat oksigen. Hemoglobin akan mengambil oksigen dari paru-paru dan insang, dan oksigen akan dilepaskan saat eritrosit melewati pembuluh kapiler. Warna merah sel darah merah sendiri berasal dari warna hemoglobin yang unsur pembuatnya adalah zat besi. Pada manusia, sel darah merah dibuat di sumsum tulang belakang, lalu membentuk kepingan bikonkaf. Di dalam sel darah merah tidak terdapat nukleus. Sel darah merah sendiri aktif selama 120 hari sebelum akhirnya dihancurkan.
Sel darah merah atau yang juga disebut sebagai eritrosit berasal dari Bahasa Yunani, yaitu erythros berarti merah dan kytos yang berarti selubung/sel)
Bilik Hitung Neubauer
Pada bilik hitung ‘Improved Neubauer’ luas seluruh bidang adalah 9 mm2 dan bidang ini dibagi menjadi 9 ‘Bidang Besar’ yang masing-masing bidang memiliki luas 1 mm2 . Bidang Besar di bagi menjadi 16 ‘Bidang Sedang’,yang luasnya masing-masing ¼ x ¼ mm2. Bidang besar yang letaknya ditengah–tengah pembagiannya berbeda, yaitu di bagi menjadi 25 bidang,luas masing bidang 1/5 x 1/5 mm2 dan bidang itu dibagi lagi menjadi 16 bidang kecil. Dengan demikian jumlah seluruh bidang kecil itu seluruhnya 400 buah dengan luas 1/20 x 1/20 mm2 .
Tinggi Bilik hitung, yaitu jarak antara permukaan yang bergaris dengan kaca penutup yang terpasang adalah 1/10 mm.
Maka Volume ditiap-tiap bidang sebagai berikut: 1 bidang kecil = 1/20 x 1/20 x 1/10 = 1/4000 mm3 1 bidang sedang = 1/4 x 1/4 x 1/10 = 1/160 mm3 1 bidang besar = 1 x 1 x 1/10 = 1/10 mm3
Volume seluruh bidang = 3 x 3 x 1/10 = 0.9 mm3 Volume bidang untuk pemeriksaan jumlah sel darah: -Pemeriksaan Jumlah Leukosit (4 bidang besar) 1 x 1 x 1/10 x 4 = 0.4 mm3
-Pemeriksaan jumlah eritrosit (5 bidang ditengah) 1/5 x 1/5 x 1/10 x 5 =0,02 mm3
-Pemeriksaan jumlah trombosit (10 bidang ditengah) 1/5 x 1/5 x 1/10 x 10=0.04 mm3
Untuk menghitung jumlah sel eosinofil dalam darah sering digunakan bilik hitung yang volumenya yang lebih besar, yaitu bilik hitung “Fuch-Rosental”. Ukuran seluruh bidang dibagi 4 mm x 4 mm, dengan tinggi 2/10 mm,sedangkan garis-garisnya berlainan lagi.
Hitung Eritrosit
Hitung eritrosit adalah jumlah eritrosit per milimeterkubik atau mikroliter dalah. Seperti hitung leukosit, untuk menghitung jumlah sel-sel eritrosit ada dua metode, yaitu manual dan elektronik (automatik). Metode manual hampir sama dengan hitung leukosit, yaitu menggunakan bilik hitung. Namun, hitung eritrosit lebih sukar daripada hitung leukosit.
Prinsip hitung eritrosit manual adalah darah diencerkan dalam larutan isotonis untuk memudahkan menghitung eritrosit dan mencegah hemolisis. Larutan Pengencer yang digunakan adalah:
Larutan Hayem : Natrium sulfat 2.5 g, Natrium klorid 0.5 g, Merkuri klorid 0.25 g, aquadest 100 ml. Pada keadaan hiperglobulinemia, larutan ini tidak dapat dipergunakan karena dapat menyebabkan precipitasi protein, rouleaux, aglutinasi. Larutan Gower : Natrium sulfat 12.5 g, Asam asetat glasial 33.3 ml, aquadest 200
ml. Larutan ini mencegah aglutinasi dan rouleaux. Natrium klorid 0.85 %
Harga Normal :
Dewasa laki-laki : 4.50 – 6.50 (x106/μL) Dewasa perempuan : 3.80 – 4.80 (x106/μL) Bayi baru lahir : 4.30 – 6.30 (x106/μL) Anak usia 1-3 tahun : 3.60 – 5.20 (x106/μL) Anak usia 4-5 tahun : 3.70 – 5.70 (x106/μL) Anak usia 6-10 tahun : 3.80 – 5.80 (x106/μL)
Penurunan eritrosit :
kehilangan darah (perdarahan), anemia, leukemia, infeksi kronis, mieloma multipel, cairan per intra vena berlebih, gagal ginjal kronis, kehamilan, hidrasi berlebihan Peningkatan eritrosit :
polisitemia vera, hemokonsentrasi/dehidrasi, dataran tinggi, penyakit kardiovaskuler Indeks Eritrosit
Mencakup parameter eritrosit, yaitu:
1. Mean cell / corpuscular volume (MCV) atau volume eritrosit rata-rata (VER) MCV = Hematokrit (l/l) / Jumlah eritrosit (106/µL)
Normal 80-96 fl
2. Mean Cell Hemoglobin Content (MCH) atau hemoglobin eritrosit rata-rata (HER) MCH (pg) = Hemoglobin (g/l) / Jumlah eritrosit (106/µL)
Normal 27-33 pg
3. Mean Cellular Hemoglobin Concentration (MCHC) atau konsentrasi hemoglobin eritrosit rata-rata (KHER)
MCHC (g/dL) = konsentrasi hemoglobin (g/dL) / hematokrit (l/l) Normal 33-36 g/dL
4. Red Blood Cell Distribution Width (RDW)
RDW adalah perbedaan/variasi ukuran (luas) eritrosit. Nilai RDW berguna memperkirakan terjadinya anemia dini, sebelum nilai MCV berubah dan sebelum terjadi gejala. Peningkatan nilai RDW dapat dijumpai pada anemia defisiensi (zat besi, asam folat, vit B12), anemia hemolitik, anemia sel sabit. Ukuran eritrosit biasanya 6-8µm, semakin tinggi variasi ukuran sel mengindikasikan adanya kelainan.
RDW = standar deviasi MCV / rata-rata MCV x 100 Nilai normal rujukan 11-15%
PEMBUATAN REAGEN HAYEM
Fungsinya : Untuk menghitung jumlah eritrosit Komposisi :
Na2SO4 2,5 gram untuk NaCl 0,5 gram untuk
HgCl2 (Merkuri klorida) 0,25 gram untuk Aquadest 100 ml
Cara Pembuatan :
- Timbang Na2SO4 sebanyak2,5 gram, NaCl sebanyak 0,5 gram, dan HgCl2 sebanyak 0,25 gram.
- Masukkan semua bahan ke dalam beaker glass
- Add kan dengan aquadest sampai 100 ml, homogenkan - Masukkan ke dalam botol reagen dan beri etiket
o Alat dan Bahan
- Alat : Bilik Hitung Mikro Pipet Spuit Tourniquet Mikroskop - Bahan : Darah EDTA
Larutan hayem Na-EDTA 10% Alkohol 70 % o Cara Kerja :
1. Disiapkan bilik hitung dengan cover glass
2. Dipipet larutan Hayem 1990 μl, lalu dimasukkan ke dalam tabung yang sudah diisi larutan Hayem (pengenceran 200x), dikocok
3. Dimasukkan ke dalam bilik hitung, didiamkan dalam cawan petri ± 3 – 5 menit 4. Dihitung jumlah sel dengan mikroskop pembesaran 400x lensa objek 40. o Hasil Pengamatan : 251 235 230 209 210 o Perhitungan : KV = p x l x t x jumlahkotak ¿ 1 20 x 1 20x 1 10x 80 kotak ¿ 80 4000mm 3 =4000 80 ¿mm3 ¿50¿mm3 1 9 1 7 19 1 6 1 4 1 6 17 1 8 1 4 1 6 20 1 4 1 3 11 14 1 3 1 4 1 6 15 1 5 1 8 1 3 15 11 1 2 1 8 17 1 2 1 3 1 5 17 1 4 1 8 1 8 17 1 7 1 3 1 5 14 1 2 11 1 5 18 1 0 1 2 11 12 1 7 1 2 1 7 11 11 1 2 1 3 12 1 5 1 4 1 2 13 1 3 1 3 1 4 13 1 5 1 4 1 7 13 1 3 1 4 1 3 14 1 6 1 4 1 2 14 1 3 11 1 0 11 1 0
Pengenceran ¿ 10 10+900= 10 1000= 1 100= 100 1 =100 x Σsel=P× KV × N ¿100×mm503×1135 ¿5.675 .000mm3 o Kesimpulan :
Setelah melakukan pemeriksaan terhadapa sampel daran Elfansyah Adyatma dapat disimpulkan bahwa jumlah sel darah merah dalam sampel adalah 5.675.000/mm3
LAPORAN PRAKTIKUM
HEMATOLOGI 1
“Menghitung Jumlah Eritrosit”
Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah praktikum hematologi 1
Disusun Oleh
:
Isti Sofia Insani
0911C1006
Sekolah Tinggi Analis Bakti Asih
Bandung
2011
DAFTAR PUSTAKA
file:///D:/hitung-jumlah-eritrosit.html file:///D:/Sel_darah_merah.htm http://1n1nt1.blogspot.com/2011/11/bilik-hitung-improved-neubauer.htmlDepartemen Kesehatan Republik Indonesia. (1993). PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI. Bandung : Depkes RI.
