Menghitung Jumlah Retikulosit

(1)

Menghitung Jumlah

Retikulosit

Oleh:

Betty Nurhayati, MSi

(2)

Tujuan dan Prinsip



Tujuan ::

Tujuan

1. Mengetahui jumlah retikulosit dalam darah

2. Menilai respon sumsum tulang.



Prinsip : arah ditam!ah larutan pe"arna

Prinsip

: arah ditam!ah larutan pe"arna

#ital Brilliant $resyl Blue %B$B&, maka sisa'

sisa inti %ri!osom& dan (N) pada retikulosit

tampak se!agai *ilamen atau granula !er"arna.

(3)

Dasar Teori

 asar Teori:asar Teori:

1.

1. (etikulosit adalah:+ritrosit muda, tidak !erinti tetapi(etikulosit adalah:+ritrosit muda, tidak !erinti tetapi mengandung sisa'sisa

mengandung sisa'sisa

inti %(i!osom dan (N)& !erupa !enang %*ilament& atau !intik inti %(i!osom dan (N)& !erupa !enang %*ilament& atau !intik %granula& atau dise!ut juga Su!stantia granula *ilamentosa %granula& atau dise!ut juga Su!stantia granula *ilamentosa %S-&.

%S-&. 2.

2. (i!osom mempunyai si*at dapat !ereaksi dengan at pe"arna(i!osom mempunyai si*at dapat !ereaksi dengan at pe"arna seperti )ure B, Brilliant $resyl Blue, atau Ne" Methylen seperti )ure B, Brilliant $resyl Blue, atau Ne" Methylen !lue dan mem!entuk endapan *ilamen dan granula yang !lue dan mem!entuk endapan *ilamen dan granula yang !er"arna !iru. (eaksi ini hanya akan !erlangsung dalam !er"arna !iru. (eaksi ini hanya akan !erlangsung dalam

sediaan #ital yang tidak di*iksasi, diseput pe"arnaan sediaan #ital yang tidak di*iksasi, diseput pe"arnaan supra#ital.

(4)

Dasar Teori

/.

/. erajat kemudaan dari retikulosit dapat

erajat kemudaan dari retikulosit dapat

diketahui dengan melihat mor*ologi sel pada

sediaan. Makin !anyak S-, makin muda

retikulosit terse!ut.

0. Nilai Normal : ,2  2,3

(5)

Bahan pemeriksaan, Alat, Bahan



Bahan pemeriksaan ::

Bahan pemeriksaan

1. arah kapiler

2. arah #ena dengan antikoagulan +T)



)lat4Bahan

::

' Ta!ung "idal4 ta!ung reaksi ke5il

' O!jek glas, "ater!ath /6

oo

$, pipet

pasteur,mikroskop, minyak imersi4 7ylol,

peralatan untuk pengam!ilan darah, para*ilm.

(6)

Reagen



(eagen

::

1. Briliant $resyl Blue %B$B& 13 atau

2. Ne" Methylen Blue %NMB& 13 dengan nomor $8

92/

Pelarut yang digunakan untuk melarutkan at "arna

B$B4NMB

::

1. )lkohol

2. Na$ ,;93

(7)

Reagen

/

/. arutan sitrat salin

. arutan sitrat salin

<at "arna se!anyak 1 gram dilarutkan dalam arutan

sitrat salin 1 m.

arutan sitrat salin terdiri dari:

1 !agian sitrat %Na.sitrat /3& ditam!ah dengan 0

!agian salin %Na$l ,=3&.

$ontoh: >ntuk mem!uat 1 m larutan sitrat salin

terdiri dari:

2 m sitrat %Na.sitrat /3 se!anyak 2 m& ditam!ah

dengan ; m salin % Na$ ,=3 se!anyak ; m&.

<at "arna yang sudah dilarutkan kemudian disaring.

(8)

Reagen

0. 0. Bu**er -os*at 8soosmotik p? 6,0:

Bu**er -os*at 8soosmotik p? 6,0:

<at "arna se!anyak 1 gram dilarutkan dalam

1 m larutan Bu**er osat isoosmotik p?

6,0.

(9)

Cara Kerja

 Mem!uat dan menghitung Sediaan hapus untuk retikulosit:Mem!uat dan menghitung Sediaan hapus untuk retikulosit:  Mem!uat Sediaan ?apus untuk retikulosit:Mem!uat Sediaan ?apus untuk retikulosit:

1. @e dalam ta!ung reaksi dimasukkan / tetes larutan at "arna 1. @e dalam ta!ung reaksi dimasukkan / tetes larutan at "arna

B$B 13 %yang telah disaring&. B$B 13 %yang telah disaring&.

2. Tam!ahkan darah yang akan diperiksa sama !anyak. 2. Tam!ahkan darah yang akan diperiksa sama !anyak.

/. $ampur !aik'!aik, kemudian ta!ung ditutup dengan para*ilm /. $ampur !aik'!aik, kemudian ta!ung ditutup dengan para*ilm

dan diinku!asi /6

dan diinku!asi /6oo$ selama 19  2 menit.$ selama 19  2 menit.

0. Setelah diinku!asi, di5ampur lagi, kemudian diam!il 1 tetes 0. Setelah diinku!asi, di5ampur lagi, kemudian diam!il 1 tetes

untuk di!uat sediaan hapus. untuk di!uat sediaan hapus. 9. @eringkan di udara.

9. @eringkan di udara.

A. Periksa di !a"ah mikroskop . A. Periksa di !a"ah mikroskop .

(10)

Cara Kerja (lanjutan)

 Menghitung Sediaan ?apus untuk retikulosit:Menghitung Sediaan ?apus untuk retikulosit:

1. Sediaan hapus yang sudah kering selanjutnya diperiksa di 1. Sediaan hapus yang sudah kering selanjutnya diperiksa di

!a"ah mikroskop dengan 5ara se!agai !erikut: !a"ah mikroskop dengan 5ara se!agai !erikut:

' i5ari daerah di mana eritrosit !erdekatan %tidak ' i5ari daerah di mana eritrosit !erdekatan %tidak !erkelompok atau tidak terpisah'pisah&.

!erkelompok atau tidak terpisah'pisah&.

2. i5ari sel (etikulosit yaitu sel yang tampak le!ih !esar 2. i5ari sel (etikulosit yaitu sel yang tampak le!ih !esar

%relati*& dari eritrosit dan mengandung granula4 *ilamen %S-& %relati*& dari eritrosit dan mengandung granula4 *ilamen %S-&

di antara sel'sel eritrosit. di antara sel'sel eritrosit.

)pa!ila menggunakan pe"arnaan B$B 13, maka eritrosit )pa!ila menggunakan pe"arnaan B$B 13, maka eritrosit

!er"arna !iru muda keunguan, sedangkan S- !er"arna ungu !er"arna !iru muda keunguan, sedangkan S- !er"arna ungu

tua. tua.

)pa!ila menggunakan pe"arnaan NMB 13, maka eritrosit )pa!ila menggunakan pe"arnaan NMB 13, maka eritrosit !er"arna !iru muda, sedangkan S- !er"arna !iru tua. !er"arna !iru muda, sedangkan S- !er"arna !iru tua.

(11)

Cara kerja (lanjutan)

/. >ntuk mempermudah perhitungan, pada okuler

dipasang kertas untuk memperke5il lapang pandang.

0. engan menggunakan pem!esaran o!jekti* 1 kali,

dihitung jumlah retikulosit dalam 1 eritrosit atau

le!ih.

9. $ara menghitung retikulosit dalam sediaan hapusan ,

arahnya sama dengan 5ara menghitung untuk sediaan

hapus pada hitung jenis lekosit.

A. )pa!ila jumlah eritrosit sudah men5apai 1 sel

atau le!ih, maka hitung jumlah retikulosit dalam

persen%3& atau dalam permil %3o&.

(12)

Pengamatan



$ontoh matriks

menghitung jumlah

retikulosit dalam

Sediaan hapus:

p p 11 22 // 00 99 AA 66 ;; == 11 dstdst umlahumlah +ritro +ritro sit sit 9

9 AA 66 6969 AA 9;9; A2A2 ;; 6969 A9A9 77 1212

(eti (eti kulosi kulosi tt '' '' 11 22 '' '' 11 '' 11 '' yy AA

(13)

Pelaporan asil

Misalnya :

1. umlah eritrosit : 12 sel

2. umlah retikulosit : A sel

Maka pelaporan hasil jumlah retikulosit adalah :



alam permil %3o& C

_{1412 7 A sel C 9 3o}



alam persen % 3& C

_{1412 7 A sel C ,9 3}

(14)

(etikulosit%1&

 Ukuran:Ukuran: 8 - 128 - 12 _µ_µmm  Bentuk:Bentuk: bulatbulat

 WarnaWarna

sitoplasma:

sitoplasma: pucatpucat

 Granularitas:Granularitas:

granul tunggal atau granul tunggal atau multipel, pekat,

multipel, pekat, lembayung lembayung

 Bentuk intiBentuk inti: tidak: tidak

ada ada

 Distribusi dalamDistribusi dalam

darah:

darah: 0.5 - 1.5 %0.5 - 1.5 % dari jumlah eritrosit dari jumlah eritrosit

 Pewarnaan:Pewarnaan: supraital, dengan supraital, dengan !resyl blue !resyl blue  Perbesaran:Perbesaran: "" 1000 1000

Catatan: #etikulosit yang ditunjuk mengandung granul halus $ sisa at-at ribonukleat&. 'alam gambar ada ( retikulosit

(15)

Nucleated Red Blood Cells and Reticulocytes

D Nu5leated (ed Blood $ells or N(B$s and (eti5ulo5ytes are the early *orms o* red 5ells that 5an !e seen in the peripheral !lood. D 8n normal !lood, N(B$s are not normally seen, though a

small num!er o* reti5ulo5ytes 5an !e e7pe5ted. %.93 ' 2.3&

(16)

Reticulocytes

(esidual (N)

D (eti5ulo5ytes 5ontain residual (N) "hi5h 5an !e stained supra#itally. %i.e. ne" methylene !lue, !rilliant 5resyl !lue&

D 8t "ould make the (N) pre5ipitate and aggregate into a net"ork o* strands or 5lumps #isi!le !y light mi5ros5opy.

(17)

(etikulosit%2&

Catatan: )el yang ditunjuk adalah retikulosit yang dengan pe*arnaa +ay-run*ald-iemsa e*arnaa berbeda dengan eritrosit de*asa. )el yang ditunjuk lebih besar, ona perinuklear tidak ada dan bersiat polikromatik

(18)