LAMPIRAN 1
Bahan untuk media uji
1a. Media padat amilolitik (untuk 100 ml) MgSO4 0,01 gr
KH2PO4 0,01 gr
NaCl 0,2 gr
Amilum 1,2 gr Agar powder 1,8 gr
Untuk melihat zona halo setelah inkubasi diuapi dengan kristal I2.
1b. Media Bushnell-Hass (untuk 100 ml) KH2PO4 0,1 gr K2HPO4 0,1 gr NH4NO3 0,1 gr FeCl3 0,05 gr MgSO4.7H2O 0,02 gr CaCl2.2H2O 0,02 gr
1c. Media padat proteolitik (untuk 100 ml) 100 ml media Bushnell-Hass
Skim milk 2 gr Agar powder 1,8 gr
1d. Media padat lipolitik (untuk 100 ml) Minyak goreng 600 µl per 20 ml Tween 20 50 µl per 20 ml Rhodamin b 40 µl per 20 ml Agar powder 2 gr
LAMPIRAN 2
Pengelompokan spesies isolat bakteri dominan pada reaktor pengolahan limbah cair
Tabel 2a.Tingkat kesamaan isolat B dengan berbagai spesies Micrococcus sp. No. Jenis uji B 1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 Motilitas + - - - + - - 2 Oksidase + + + + + + + + + - 3 VP d - - - + - - - - + 4 Pigmentasi Y Y Y C Y O C R R - 5 Glukosa - - + - + d - - d + 6 Sukrosa - - d - + - - - - + 7 Arginin - - - + - - - 8 Nitrat + - + - - + - - + + Keofisien sebanding (%) 50 38 35 63 48 25 53 46 55 Keterangan:
(Y) yellow, (C) cream, (O) orange, (R) red
(1) Micrococcus luteus; Micrococcus afermentans; Micrococcus lysodeikticus; Staphylococcus afermentans, (2) Micrococcus varians; Micrococcus lactis; Staphylococcus lactis, (3) Micrococcus lylae, (4) Micrococcus kristinae, (5) Micrococcus nishinomiyaensis, (6) Micrococcus sedentarius, (7) Micrococcus agilis, (8) Micrococcus roseus; Staphyococcus roseus, (9) Stomatococcus mucilaginosus.
Tabel 2b. Tingkat kesamaan isolat F dengan berbagai spesies Bacillus sp.
Jenis Uji F 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 14 16 18 19 22 24 Pewarnaan gram + + + + + d + + + + + d d d - - d d Bentuk sel bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt Sel yang membentuk rantai + + + + + d d + d d d d d d - - d d Motilitas + - + - + + + + + + + + + + + + + + Panjang sel > 3 µm + + + + + - - d - - - + + d d d - - Bentuk dan ukuran spora VT X V X V X V X V X V X V X V X V X VX VX VT X VX VT X VX VX VX VT X Pembengkakan sel spora d - - - - d d - - - - d + + + + d +
Jenis Uji F 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 14 16 18 19 22 24 Cellubiose (Hydrolysis selulase) d - d d d - d + + + + d + + + + d d Galactose (Gelatin) - - - d - - d + d + d d d + + + - - Mannose (Manitol) - - - - d d + d + + d + d + + + + + Raffinose - - - d + d + + + + + + d + Salicin - - + d d - d + + + + d d + + + d d Xylose + - - - - - - + d + d d - + + + d - ONPG - - - d - d + + + + d d d + + + d - Citrate + - d d + - - + + + d d - - - d - - Urease + - d d - - + d - d - - d - - - - - Indole - - - + - - - - - VP (Voges Proskauer) d + + + + - - - + d + d + d d + d d Reduksi nitrate - + + + + + - d + + + d - d + + + d Oksidase + d d d d - + - - - - - + - + - - - Hidrolisis kasein (Protein) + + + + + + - + + + + + + - - + - d Hidrolisis tepung (Amilum) + + + + + + + + + + + + + + + + + + Koefisien sebanding (%) 65 72 55 57 54 55 48 55 63 51 71 56 68 65 63 63 64 Keterangan:
(T) spora terminal, (V) spora sentral atau subteminal, (X) spora oval,(Y) spora bulat.
(1) B. anthracis; (2) B. cereus, B. anthracoide; (3) B. mycoides; (4) B. thuringiensis; (5) B. firmus; (6) B. lentus; (7) B. megaterium; (9) B.subtilis; (10) B. licheniformis; (11) B. Amyloliquefaciens; (12) B. coagulans; (14) B. alvei; (16) B.circulans; (18) B. macerans; (19) B.polymyxa; (22) B. stearothermophilus; (24) B. stearothermophilus
LAMPIRAN 3
Dokumentasi Penelitian
Tabel 3a. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-7 pada media NA dan amilolitik No Sampel NA Amilolitik 1 Inlet 2 K1A - - 3 K1T 4 K1B 5 K2A - - 6 K2T 7 K2B 8 K3A - -
9 K3T 10 K3B - - 11 K4A - - 12 K4T 13 K4B - - 14 K1.2 15 K2.2 16 K3.2 - - 17 K4.2 18 Outlet 1
19 Outlet 2
Keterangan : Reaktor 1
K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah ) K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah ) K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah ) K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah ) Reaktor 2
K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1 K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2 K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3 K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4
Tabel 3b. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-7 pada media proteolitik dan lipolitik
No Sampel Proteolitik Lipolitik 1 Inlet
2 K1A - -
3 K1T
4 K1B
6 K2T 7 K2B 8 K3A - - 9 K3T 10 K3B - - 11 K4A - - 12 K4T 13 K4B 14 K1.2 15 K2.2
16 K3.2 - - 17 K4.2 18 Outlet 1 19 Outlet 2 Keterangan : Reaktor 1
K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah ) K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah ) K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah ) K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah ) Reaktor 2
K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1 K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2 K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3 K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4
Tabel 3c. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-21 pada media NA dan amilolitik
No Sampel NA Amilolitik
1 Inlet
3 K1T 4 K1B 5 K2A 6 K2T 7 K2B 8 K3A 9 K3T 10 K3B - -
11 K4A 12 K4T 13 K4B - - 14 K1.2 15 K2.2 16 K3.2 - - 17 K4.2 18 Out1 19 Out2
Keterangan : Reaktor 1
K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah ) K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah ) K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah ) K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah ) Reaktor 2
K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1 K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2 K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3 K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4
Tabel 3d. Dokumentasi untuk sampel pada hari ke-21 pada media proteolitik dan lipolitik
No Sampel Proteolitik Lipolitik
1 Inlet
2 K1A -
3 K1T
4 K1B
6 K2T 7 K2B 8 K3A 9 K3T 10 K3B - - 11 K4A 12 K4T 13 K4B - -
14 K1.2 15 K2.2 16 K3.2 - - 17 K4.2 18 Out1 19 Out2 Keterangan : Reaktor 1
K1 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 1 (Atas, tengah, Bawah ) K2 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 2 (Atas, tengah, Bawah ) K3 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 3 (Atas, tengah, Bawah ) K4 (A, T, B) : Kran Reaktor 1 kolom 4 (Atas, tengah, Bawah ) Reaktor 2
K1.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 1 K2.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 2 K3.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 3 K4.2 : Kran Reaktor 2 Kolom 4
Tabel 3c. Karakteristik mikroskopik isolat bakteri heterotropik untuk sampel hari ke-7
Sampel Isolat Gambar Pengamatan
Bentuk sel Gram
Inlet A Kokoid (-) B Batang (+) C Kokoid (-) D Kokus (+) E Kokus (+) Outlet 1 F Kokus (+) E Kokus (+)
G Batang (+) Outlet 2 H Kokoid (-) I Kokoid (-) B Batang (+) J Batang (+)
Tabel 3d. Karakteristik mikroskopik isolat bakteri heterotropik untuk sampel hari ke-21
Sampel Isolat Gambar Pengamatan
Bentuk sel Gram
Inlet K
B Batang (+) L Kokus (+) F Kokus (+) Outlet 2 B Batang (+) M Kokoid (-)
Gambar 1. Isolat B setelah dimasukkan Gambar 2. Isolat F setelah dimasukkan
Gambar 3. Isolat B setelah 24 jam Gambar 4. Isolat F setelah 24 jam
Gambar 5. Isolat B setelah 48 jam Gambar 6. Isolat F setelah 48 jam
Gambar 7. Hasil uji oksidase isolat B (kanan) Gambar 8. Hasil uji H2O2 isolat B