(Momordica charantia L.) DENGAN MENGGUNAKAN UJI

(1)

UJI AKTIVITAS PROTEIN BUAH PARIA

(Momordica charantia L.) DENGAN MENGGUNAKAN UJI

KEMATIAN LARVA UDANG DAN ALUR SEL SECARA

IN VITRO

AN1 KURNIAWATI

PROGRAM PASCA SARJANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

(2)

ABSTRAK

P,NI KURNIAWATI. Uji Aktivitas Protein Buah Paria (Momordica charantia L.) dengan Menggunakan Uji Kematian Larva Udang dan Alur Sel Secara in Vitro.

Penelitian ini dilakukan untuk mempelajari aktivitas ekstrak protein aktif buah paria muda dan matang dari beberapa kultivar paria dengan uji kematian larva udang dan alur sel. Buah muda adalah buah yang dipanen untuk sayur, buah matang adalah buah paria yang telah berubah warna menjadi kuningorange. Bahan timaman yang digunakan adalah buah paria Hijau, Putih, Kotok, dan Giok.

Ekstraksi protein buah paria menggunakan buffer pH, diendapkan dengan amonium sulfat dan dirnurnikan dengan kolom sephadeks. Uji hayati yang digunakan untuk menguji aktivitas ekstrak protein adalah uji kematian larva udang d m uji menggunakan alur sel in vitro. Peubah yang diamati pada uji kematian larva udang adalah LC50 (Lethal Consentration 50 %), sedangkan untuk uji menggunakan a1 ur sel adalah indeks penghambatan proliferasi.

Semua kultivar paria baik muda maupun matang menunjukkan aktivitas dengan nilai LCs0 dibawah 100 pg/ml. Analisis ragam terhadap indeks p~nghambatan proliferasi alur sel menunjukkan bahwa urnur buah, kultivar, dan irlteraksinya nyata mempengaruhi indeks penghambatan proliferasi alur sel L929 d m KR4. Fraksi dan konsentrasi ekstrak protein nyata mempengaruhl indeks p:nghambatan proliferasi alur sel L929 dan KR4 tetapi interaksinya tidak b erpengaruh nyata terhadap indeks penghambatan proliferasi.

Buah paria giok muda menunjukkan penghambatan tertinggi terhadap proliferasi alur sel L929 yaitu sebesar 26.19%. Buah matang paria hijau rrlenunjukkan penghambatan tertinggi terhadap proliferasi alur sel KR4 (36.67%).

Sernua Graksi menunjukkan aktivitas penghambatan proliferasi, hanya M s i E clan

G tidak menunjukkan penghambatan terhadap alur sel KR4. Fraksi F menunjukkan plenghambatan tertinggi terhadap alur sel L929 (21.48%) meskipun tidak berbeda nyata dengan fiaksi B (13.66%) dan E (19.83%). Fraksi C (23.50%) menunjukkan penghambatan tertinggi terhadap alur sel KR4 meskipun tidak berbeda nyata dlzngan fraksi A (17.26%), B (21.16%), D (13.97%). Semakin tinggi konsentrasi uji elcstrak protein semakin meningkat aktivitas penghambatan proliferasi. Konsentrasi elcstrak protein 400 pg/ml dapat menghambat proliferasi alur sel L929 dan KR4 brzrturut-turut sebesar 15.97 % dan 2 1.96%.

(3)

SURAT PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis yang berjudul :

UJI AKTNITAS PROTEIN BUAH PARIA (Momordica charantia L.)

DENGAN MENGGUNAKAN LARVA UDANG DAN ALUR SEL

SECARA IN W R O

atlalah benar merupakan hasil karya sendiri dan belurn pernah dipublikasikan. Semua sumber data dan informasi yang digunakan telah dinyatakan secara jelas dan d 3pat diperiksa kebenarannya.

Bogor, Juli 2002

Ani Kurniawati

-

(4)

UJI AKTIVITAS PROTEIN BUAH PARIA

(Momordica charantia

L.) DENGAN MENGGUNAKAN UJI

KEMATIAN LARVA UDANG DAN ALUR SEL SECARA

IN

VITRO

AN1 KURNIAWATI

Tesis

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Magister Sains pada Program Studi Agronomi

PROGRAM PASCA SARJANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

(5)

Ji~dul Tesis : Uji Aktivitas Protein Buah Paria (Momordica charantia L.) dengan Menggnakan Uji Kematian Larva Udang dm Alur sel

Secara in Vitro

Nilma : Ani Kurniawati

Nrp. . : 97043

Program Studi : Agronomi

Menyetuj ui, 1. Komisi Pembimbing

Prof Dr Ir Sugeng Sudiatso Ketua

/-

I

Prof Dr Ir Latifah K. Darusman Dr d&d Harran. MSc.

fuxota

v

h g g o t a

(6)

RIWAYAT

HIDUP

Penulis dilahirkan di Klaten 13 Nopember 1969, anak pertama dari tiga

bersaudara. Penulis menikah dengan Yurisman tahun 1995, saat ini dikaruniai dua

o~.ang anak, Shavira A. Pravianti (5 tahun ) dan Gernilang A Prirnagasi (3 tahun). Penulis menyelesaikan pendidikan dasar d m menengah di Klaten. Tahun 1988 penulis diterima sebagai mahasiswa program sarjana di Institut Pertanian Bogor dan memperoleh gelar Sarjana Pertanian dari Jurusan Budidaya Pertanian

pada tahun 1993.

Penulis diterima sebagai pengajar di Jurusan Budidaya Pertanian, mulai tahun 1994 hingga sekarang. Pada tahun 1997 penulis melanjutkan studi S2 di Program Pasca Sarjana - IPB, dengan beasiswa BPPS.

(7)

PRAKATA

Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat dan hidayah-Nya sehingga

tulisan ini dapat diselesaikan. Tema yang penelitiaan ini adalah penggalian potensi sayuran, yaitu beberapa kultivar paria, sebagai pangan fhgsional.

Thesis ini merupakan sebagian penelitian dari Graduate Team Research Gpant, Batch IV yang semulai dipimpin oleh Alm. Prof Dr Ir Livy W. Gunawan yang selanjutnya digantikan oleh Dr Ir Said Harran, MSc. Penulis mengucapkan te-irnakasih kepada alm. Prof Dr Ir Livy Winata Gunawan yang telah memberikan ke sempatan kepada penulis untuk bergabung dalam proyek penelitiannya, semoga Tuhan menerima amal baiknya dan keluarga yang ditinggalkan diberi perlindungan dan kekuatan.

Penulis menyampaikan ucapan terimaksih dan penghargaan kepada komisi pembimbing; Prof Dr Ir Sugeng Sudiatso. Prof Dr Ir Latifah K. Darusman, dan Dr

Ir Said Harran, MSc. yang telah memberikan bantuan baik berupa saran maupun faiilitas yang menunjang kelangsungan penelitian.

Penghargaan dan ucapan terimakasih kepada Drh Bambang Pontjo P., MS., Ph.D atas izin penggunaan laboratorium Patologi, FKH-IPB. Terimakasih kepada Ibu Sutanty, Ibu Wiwi, Ibu Hilda atas penerimaan yang bak; Mbak Ati (Saraswati) dan Mas Faisal atas bantuan dan persahabatannya di Laboratorium Imunologi- NAMRU.

Penghargaan juga saya sampaikan kepada teman-teman di Jurusan Budidaya Peltanian atas perhatian dan semangatnya Kepada Ir Evy Damayanti, MS staf pengajar Jurusan GMSK dan teman sekeja di Laboratorium NAMRU-2 Jakarta; terimakasih atas persahabatan dan kerjasamanya yang baik; Ir Herla R, MS. atas

waktuya di Laboratorium Patologi-FKH. Ucapan terimakasih untuk semua piha.

yang turut membantu kelancaran pekerjaan di Laboratorium Biokimia-FMIPA, Laboratorium PSPT, Laboratorium Imunologi-NAMRU-2 Jakarta.

Rasa terimakasih yang dalam untuk keluargaku; anak-anak, suami, ibu dan

sanua keluarga; tanpa pengertian, bantuan dan dukungannya saya tidak munglun dapat menyelesaikan semua ini.

Semoga tulisan ini bermanfaat bag penulis dalam melaksanakan tugas di ternpat bekerja dan dapat menyumbangkan informasi untuk pengembangan pemanfaatan sayuran, terutama paria.

Bogor, Juli 2002

(8)

DAFTAR IS1

Halaman DAFTAR TABEL ... ix ... ' X DAFTAR GAMBAR ... D AFTAR LAMPIRAN xi PIZNDAHULUAN ... Latar Belakang 1 Tujuan ... 4 Hipotesis ... 5 TlNJAUAN PUSTAKA

Botani Tanaman Paria ... ... Manfaat Paria ... Ekstraksi Protein Kanker ... ...

Pangan dan Kanker

... Uji Hayati

... Kultur Sel

...

Uji Alur sel

B t W DAN METODE

Tempat Dan Waktu Penelitian ... 18

Bahan dm Metode ... 18 ...

Ekstraksi Protein 19

Uji Kematian Larva Udang ... 20

...

Uji Menggunakan Alur Sel 21

H.4SIL DAN PEMB AHAS AN

...

Ekstraksi Protein 26

...

Uji Kematian Larva Udang 28

...

Uji Aktivitas Menggunakan Alur Sel 33

DPSTAR PUSTAKA ... : . . . 43 LAMPIRAN ... 46

(9)

DAFTAR TABEL

Halaman 1 Rendemen protein buah paria pada fiaksi amoniurn sulfat

...

27 2 Rekapitulasi Andisis Ragam terhadap peubah Indeks Penghambatan ,

Proliferasi ... 34 3 Interaksi Kultivar dan Umur Paria terhadap Indeks Penghambatan

...

Proliferasi Alur Sel L929 secara in Vitro 35

4 Interaksi Kultivar dan Umur Paria terhadap Indeks Penghambatan

...

Proliferasi Alur Sel KR4 secara in Vitro 3 5

5 Indeks Penghambatan Proliferasi Tiap Kelompok Fraksi

...

37 6 Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Protein terhadap Indeks Penghambatan

...

(10)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1 Rendemen Protein Buah Paria pada Fraksi Amoniurn Sulfat

. .

.

...

.

. . . . 27

- ,

2 Nilai LC 50 Ekstrak Protein Buah Paria pada Fraksi Amoriium Sulfat

Dengan Uji Kematian Larva Udang

. .

. . . . ... . . ... .. . . 28 3 Pola Pernisahan Ekstrak Protein Beberapa Kultivar Paria Muda

dengan Kolom Sephadeks . . .

.

. . . .. 30

4 Pola Pernisahan Ekstrak Protein Beberapa Kultivar Paria Matang

dengan KolomSephadeks ... 30

5 Rendemen Fraksi Kolom Kultivar paria Muda .

. . .

. .

. . .

. . . 3 1 6 Rendemen Fraksi Kolom Kultivar paria Matang . . . 32 7 Indeks Penghambatan Proliferasi Kultivar Paria Muda terhadap

Alur Sel L929 ... . .. ... ... ... ... ... ...

...

... .. . ... ... . ... . . . . 36

8 Indeks Penghambatan Proliferasi Kultivar Paria Matang terhadap

AlurSelKR4 ... .. ... 36 9 Indeks Penghambatan Roliferasi Kelompok Fraksi .

. . .

. . . .

. .

.. . . . 38

(11)

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1 Iiagan Alur Penelitian

. . . .

. . .

.

. .

. . .

.

. . .

.

. . . .

.

..

.

. . .

. .

. . .

.

46

2 Pangelompokan Frakai Hasil Fraksinasi Ekstrak Protein Buah

Paria

. .

. . .

. .

. . .

.

. . .

. .

. . .

. .

. . . 47

3 Hasil Freeze Drier Buffer Na3P04 50mM . . .

. . . .

.

. .

. . .

.

. . . 47 4 Hasil Freeze Drier Fraksi Kolom

.

. . .

.

. .. . . .

. . . .

.

. . .

.

. . .

.

. . . .

.

47 5 Hasil Uji-t Pengaruh Buffer dan Pelarut terhadap Proliferasi

Alur sel L929 dan KR4.. . . .

..

. . .

.

. .

. . . ..

.

. . 48 6 Analisis Ragam Indeks Penghambatan Proliferasi Ekstrak Protein

terhadap Alur sel L929 . . .

.

. . .

. .

. . . .. . .

. .

. . . ..

. .

. . . ... 48

7 Analisis Ragam Indeks Penghambatan Proliferasi Ekstrak Protein

terhadap Alur Sel KR4 ... ... ... ... ... ... ... ...

...

... ... ... 48 8 Kultivar Paria yang Diuji Aktivitasnya . . .

. . .

.

. . .

.

. .

. . 49

9 Uj:i Aktivitas Ekstrak Protein Paria dengan Alur Sel Menggunakan