AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS EKSTRAK
ETIL ASETAT HERBA PURWOCENG (Pimpinella alpina
Molk)
DAN FRAKSINYA
SKRIPSI
Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1
Diajukan Oleh
MALIHAH KUMALASARI 0908010081
Kepada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto Purwokerto
2013
AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS EKSTRAK
ETIL ASETAT HERBA PURWOCENG (Pimpinella alpina
Molk)
DAN FRAKSINYA
Skripsi
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
MALIHAH KUMALASARI 0908010081
Kepada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Purwokerto Purwokerto
2013
PERNYATAAN
Yang bertanda tangan di bawah ini, saya:
Nama : Malihah Kumalasari
NIM : 0908010081
Program Studi : Farmasi
Fakultas/Universitas : Farmasi / Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan disuatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku
Purwokerto, Juli 2013
Yang menyatakan,
MALIHAH KUMALASARI
INTISARI
MALIHAH KUMALASARI.Aktivitas Penangkap Radikal Bebas Ekstrak
Etil Asetat Herba Purwoceng (Pimpinella alpinaMolk) Dan Fraksinya.
Di Bimbingan oleh RETNO WAHYUNINGRUM dan WIRANTI SRI
RAHAYU.
Latar Belakang : Flavonoid, tanin, dan polifenol merupakan beberapa senyawa yang berpotensi sebagai penangkap radikal bebas, karena ketiganya merupakan senyawa fenol dan senyawa-senyawa tersebut terstabilkan secara resonansi sehingga tidak reaktif. Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) telah dilaporkan mengandung steroid, alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin, dan fenolik. Berdasarkan kandungan metabolik sekunder dalam purwoceng, maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui potensi daya penangkap radikal bebas ekstrak etil asetat herba purwoceng dan fraksinya.
Tujuan Penelitian :Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas penangkap radikal bebas secara in vitro menggunakan radikal DPPH (1,1
diphenyl-2-picryl-hydrazil) dan radikal NO• (Oksida Nitrit).
Metode Penelitian : Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi, fraksinasi dilakukan dengan kromatografi kolom, uji penangkap radikal bebas dilakukan menggunakan radikal DPPH dan radikal NO•.
Hasil : Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC40 untuk ekstrak etil asetat
herba purwoceng dan fraksinya (F3, F4, F5, F6, F10 dan Fgab) menggunakan radikal DPPH berurutan 42,54 ppm, 126,85 ppm, 96,29 ppm, 34,69 ppm, 12,78 ppm, 75,31 ppm, 30,73 ppm, BHT 4,68 ppm dan Quercetin 0,71 ppm. Sedangkan hasil IC40 menggunakan radikal Oksida Nitrit secara berurutan untuk ekstrak etil
asetat herba purwoceng dan fraksinya (F3, F4, F5, F6, F10 dan Fgab) adalah 34,81 ppm, 55,84 ppm, 49,42 ppm, 13,52 ppm, 7,33 ppm, 23,34 ppm, 14,50 ppm, BHT 2,22 ppm, Quercetin 0,80 ppm.
Kesimpulan : Daya penangkapan radikal bebas ekstrak etil asetat herba purwoceng dan fraksinya lebih lemah daripada BHT danQuercetin.
Kata Kunci :Purwoceng, DPPH, Oksida Nitrit.
ABSTRACT
MALIHAH KUMALASARI. Free Radicals Scavenger Activity of Ethyl Acetate Extract of Purwoceng Herbs (Pimpinella alpinaMolk) and its fractions.
Supervised byRETNO WAHYUNINGRUMandWIRANTI SRI RAHAYU.
Background : Flavonoids, tannins and polyphenols are some compounds the potential as free radicals scavenger, because they are phenol compounds and it’s stable of resonansi so, it’s unreactive. Purwoceng (Pimpinella alpina Molk) have reported contain steroid, flavonoids, glikoside, saponin, tannins, and phenolic Based on secondary methabolic compounds of purwoceng Herbs, so research need be done to know the power potential free radicals scavenger ethyl acetate extract of herbs purwoceng and its fractions.
Research objectives : The goal of this research are to know the free radicals scavenger activity of in vitro using DPPH (1,1diphenyl-2-picryl-hydrazil) radicals and NO• (Nitric Oxide) radicals.
Research methods : The extraction are done by maceration method, fractionation is performed with column chromatography, free radicals scavenger test performed using DPPH radicals and NO • radicals.
Results : The results showed that the IC40 values of ethyl acetate extract of
purwoceng herbs and its fractions (F3, F4, F5, F6, F10 and Fgab) using DPPH radicals are 42,54 ppm, 126,85 ppm, 96,29 ppm, 34,69 ppm, 12,78 ppm, 75,31 ppm, 30,73 ppm, BHT 4,68 ppm and Quercetin 0,71 ppm, respectively. Whereas the IC40 using Nitric Oxide radicals for ethyl acetate extract of purwoceng herbs
and its fractions (F3, F4, F5, F6, F10 and Fgab) are 34,81 ppm, 55,84 ppm, 49,42 ppm, 13,52 ppm, 7,33 ppm, 23,34 ppm, 14,50 ppm, BHT 2,22 ppm, Quercetin 0,80 ppm respectively.
Conclusion : The power of free radicals scavenging of ethyl acetate extract herbs purwoceng and its fractions lower than BHT and Quercetin.
Key words :Purwoceng, DPPH, nitric oxide.
PERSEMBAHAN
Dengan segala rasa syukur kehadirat ALLAH SWT atas rahmat, nikmat,
hidayah dan inayah-Nya, maka:
Kupersembahkan skripsi ini untuk :
Ibunda dan ayahanda tersayang yang tak pernah berhenti
mencurahkan kasih sayang, doa dan selalu memberikan nasihat
dan semangat setiap harinya, tanpa batas yang dan tak
mungkin akan terbalaskan.
Saudara-saudaraku (yayu siti,kang Yadi,yayu Asih dan yayu
Uti) serta semua ponakanku tercinta khususnya
Ayu,Bagus,indung dan Rahma terima kasih atas segala
dukungannya dan doa,you are my inspiration.
Sobatku “TIRTA MUTIARA”:Easty, Dian, Ibah, Yuni,Desi,Depi,
dan semuanya yg tak bisa ku sebutkan satu-satu terima kasih
atas keceriaan yang kalian berikan.
Terima kasih khususnya pada teman seperjuangan : Ayu
septia,Balqis,Maretha,Agung,yang selama ini telah setia
mendengar keluh kesalku sehingga skripsi ini tersusun.serta
semua teman ASSASAINS dan FKK angkatan 2009 yang tak bisa
aku sebutkan namanya satu persatu, terima kasih atas
supportnya.
PRA KATA
Alhamdulillah, segala puji bagi Allah SWT yang telah memberikan rahmat, anugerah, serta hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi. Skripsi ini disusun guna memenuhi persyaratan untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Retno Wahyuningrum, M.Si., Apt dan Wiranti Sri Rahayu, M.Si., Apt yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Ucapan terima kasih dan penghargaan juga penulis sampaikan kepada : 1. Bapak Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
2. Dr. Nunuk Aries Nurulita., M.Si., Apt sebagai dekan dari Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Semua dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan bekal bagi kehidupan.
4. Teman-teman ASSASAINS dan FKK yang saling berbagi ilmu yang didapatkan.
5. Semua pihak yang telah mambantu penulis dalam menulis skripsi ini.
Besar harapan penulis, penulisan skripsi ini dapat bermanfaat. Penulis sadar sepenuhnya bahwa skripsi ini masih terdapat kesalahan, untuk itu diperlukan saran dan kritik dari semua pihak untuk kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat berguna untuk setiap orang yang membacanya. Amin.
Purwokerto, Juli 2013
Penulis
RIWAYAT HIDUP
Nama : Malihah Kumalasari
NIM / Angkatan : 0908010081 / 2009
Tempat / Tanggal Lahir : Kebumen, 18 Juli 1991
Agama : Islam
Nama Orang tua : Tachjat
Muksodah
Alamat : Redisari, RT 05 / 05 Kecamatan Rowokele,
Kabupaten Kebumen, Provinsi Jawa Tengah
Riwayat Pendidikan :
1. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto ( Angkatan 2009)
2. SMA / Tahun Lulus : SMAN 1 Rowokele / 2009
3. SMP / Tahun Lulus : MTsN 1 Rowokele / 2006
4. SD / Tahun Lulus : MWI Purwosari / 2003
5. TK / Tahun Lulus : RA Nurul Jannah Purwosari / 1997
Organisasi :
1. BEM (Badan Ekslusif Mahasiswa)
2. DEMA ( Dewan Mahasiswa )
Prestasi :
1. Juara III PKM penelitian se Universitas Muhammadiyah
Purwokerto
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL... ii
HALAMAN PERSETUJUAN... iii
HALAMAN PENGESAHAN... iv
HALAMAN PERNYATAAN... v
INTISARI... vi
ABSTRACT... vii
HALAMAN PERSEMBAHAN... viii
PRAKATA... ix
RIWAYAT HIDUP... x
DAFTAR ISI... xi
DAFTAR GAMBAR... xiii
DAFTAR TABEL... xiv
DAFTAR LAMPIRAN... xv
BAB I PENDAHULUAN... 1
A. Latar Belakang Permasalahan ... 1
B. Perumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian ... 2
D. Manfaat Penelitian ... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 4
A. Radikal Bebas... 4
B. Uji Aktivitas Radikal DPPH (1,1diphenyl-2-picryl-hydrazil) ... 6
C. Uji Aktivitas Radikal Oksida Nitrit (NO•)... 8
D. Kromatografi kolom ... 8
E. Purwoceng (Pimpinella alpinaMolk) ... 9
BAB III METODE PENELITIAN... 11
A. Jenis dan Rancangan penelitian ... 11
B. Variabel Penelitian... 11
C. Definisi Variabel Operasional ... 11
D. Waktu dan Tempat Penelitian... 12
E. Bahan dan Alat... 12
F. Cara Penelitian ... 13
1. Perlakuan Herba Purwoceng (Pimpinella alpina Molk)... 13
2. Uji Penangkap Radikal DPPH ... 14
3. Uji Penangkap Radikal Oksida Nitrit ... 16
G. Analisis Data... 18
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 19
A. Determinasi Tanaman ... 19
B. Perlakuan Herba Purwoceng... 19
C. Uji Penangkap Radikal DPPH ... 22
D. Uji Penangkap Radikal Oksida Nitrit ... 27
E. Perbandingan Penentuan Aktivitas Penangkap Radikal DPPH dan Radikal Oksida Nitrit... 31
BAB V KESIMPULAN... 33
A. Kesimpulan ... 33
B. Saran ... 33
DAFTAR PUSTAKA... 34
LAMPIRAN ... 37
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Terminasi Senyawa Antiradikal dengan Radikal ... 5
Gambar 2 Struktur DPPH... 7
Gambar 3 Donasi Elektron atau Radikal Hidrogen dari Antioksidan ke Radikal DPPH ... 7
Gambar 4 Reaksi Antara Ion Nitrit dengan Sulfanilamida di gabung dengan Naphtylethylendiamine... 8
Gambar 5 Tanaman Purwoceng ... 10
Gambar 6 KLT dari Ekstrak Etil Asetat... 20
Gambar 7 KLT dari Fraksi hasil Kromatografi Kolom ... 21
Gambar 8 Scanning(λ maks) Laruta DPPH ... 22
Gambar 9 StrukturButyl hydroxytoluene... 24
Gambar 10 StrukturQuercetin... 24
Gambar 11 Hasil IC40Ekstrak EA, fraksi 3,4,5,6,10, gab dan Kontrol Positif Menggunakan Radikal DPPH ... 25
Gambar 12 Scanning(λ maks) Larutan Sodium Nitroprusid ... 28
Gambar 13 Hasil IC40Ekstrak EA, fraksi 3,4,5,6,10 gab dan Kontrol Positif Menggunakan Radikal NO•... 29
Gambar 14 Hasil IC40Ekstrak EA,Fraksi 3,4, 5, 6, 10, gab, dan Kontrol Positif Menggunakan Radikal DPPH dan Radikal Oksida Nitrit ... 31
DAFTAR TABEL
Tabel 1 Hasil Pemeriksaan Organoleptik, Bobot, dan Rendemen
Ekstrak PE, EA, Etanol ... 20 Tabel 2 Nilai IC40Ekstrak Etil Asetat Herba purwoceng dan fraksinya
serta Kontrol Positif Menggunakan Radikal DPPH ... 25 Tabel 3 Nilai IC40Ekstrak Etil Asetat Herba purwoceng dan fraksinya
serta Kontrol Positif Menggunakan Radikal NO•... 29
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Hasil Determinasi Tanaman Purwoceng ... 37
Lampiran 2 Perhitungan Uji Aktivitas Antioksidan (%Penghambatan) dan IC40... 39
Lampiran 3 HasilScanning Operating timeRadikal Oksida Nitrit... 69
Lampiran 4 Dokumentasi... 70
Lampiran 5 Analisis Data IC40Daya Tangkap Radikal DPPH ... 71
Lampiran 6 Analisis Data IC40Daya Tangkap Radikal NO•... 76
Lampiran 7 Hasil Uji T ... 81
