IDENTIFIKASI DAN SINERGISME KAPANG LIPOL

(1)

JURNAL ILMU LINGKUNGAN

Volum e 13 Issue 1: 19-26 ( 2015) ISSN 1829-8907

IDENTIFIKASI DAN SINERGISME KAPANG LIPOLITIK DARI LIMBAH

SBE (

SPENT BLEACHING EARTH) SEBAGAI AGEN BIOREMEDIASI

Ervin a Mukharomah1_{, Munaw ar}2_{, Hary Widjajanti}2

1_{Jurusan Biologi Lingkungan, Program St udi Pengelolaan Lingkungan, Pascasarjana, Universitas} Sriwijaya, em ail: m ukharom ah.ervina@gmail.com

2_{Jurusan Biologi, Fakult as MIPA, Universitas Sriwijaya}

ABSTRAK

Identifikasi dan sinergism e lipolitik dari Lim bah SBE (Spent Bleaching Ear th) yang berpotensi sebagai agen biorem ediasi t elah dilakukan pada bulan Januari-Maret 2015. Pengam bilan sam pel dengan m etode Random Sam pling dari PT Wilm ar Int ernational Group Mariana Sum atera Selatan. Penelitian dilakukan di Labolatorium Mikrobiologi Jurusan Biologi Fakult as Mat em at ika dan Ilmu Pengetahuan Universitas Sriwijaya. Penelitian ini bertujuan untuk m em peroleh isolat kapang lipolit ik yang berpotensi m endegradasi residu m inyak dan sebagai agen rem ediasi. Hasil penelitian ini diperoleh kapang lipolitik yang m am pu m endegradasi m inyak yait u Cylindr ocladium sp (V2), Fumago sp (V5) dan Aspergilus Fumigatus (V8). Ketiga isolat kapang ini dapat m enurunkan residu m inyak sebesar 76,6 %. Kapang yang m emiliki pot ensi tinggi dalam m endegradasi minyak yaitu Aspergilus Fumigatus (V8).

Kata Kunci : Kapang lipolitik, sinergism e, biorem ediasi.

1 . PENDAHULUAN

Kelapa sawit (Elaeis guineensis

Jacq) mer up akan komod itas u tama per keb un an di Indonesia. Dimana dalam in du st ri banyak Min yak gor eng mer u pakan kebutuh an yan g vital bagi r umah tangga maup un usaha-usaha pan gan. Hal in i menyeb abkan men in gkatn ya kegiatan p rodu ksi min yak gor eng un tuk memenu hi kebutuh an man usia sehin gga semakin b esar pu la kecend er u ngan nya u ntu k men cemar i lin gkungan . Pencemar an ter seb ut b erasal dar i b uangan limb ah yang dihasilkan untuk mendapatkan minyak gor eng kelap a sawit dengan kualitas baik.

In dustr i pengolah an min yak kelapa sawit mengh asilkan tiga jenis limb ah yaitu limb ah cair, limbah p adat dan gas. Limbah gas keluar d ar i cer obong asap boiler, limbah p ad at b erupa solid, cangkang, sab ut dan ab u. Limb ah p ad atan yan g ber upa abu d an solid d apat diman faatkan untuk pupuk, sedangkan sabut dan cangkang dap at d igunakan sebagai p en imbun jalan dan sebagian dap at digun akan sebagai bahan bakar boiler. Kelap a sawit sebagai tanaman pen gh asil min yak kelap a sawit dan inti

kelapa sawit mer up akan salah satu pr imadona tanaman p erkebunan yan g men jadi sumber p en gh asil d evisa non-migas bagi In donesia (Nasr ul & Maimu n, 2009 ).

Esitiasih , dkk (20 10 ) men amb ah kan bahwa minyak kelapa sawit mengand ung senyawa fosfolip id tin ggi sehingga b er war na ker u h, sen yawa in ilah per lu dihilan gkan dengan p r oses

bleaching. Dimana p r oses ini men gh asilkan limbah yang dalam ju mlah besar setiap pr oduksinya dan su lit diu r ai dikar en akan masih ada kandun gan minyak yang mer u sak lin gku ngan dan sulit d iur aikan .

Men ingkatn ya pr odu ksi min yak kelapa sawit maka limb ah h asil penjer n ihan dar i Bleaching earth semakin

banyak. Kuch ar z et al., (1 994), men amb ah kan b ah wa Spent Bleaching earth (SBE) meru pakan limbah bahan

(2)

20

(20 12) beb er apa jen is SBE yan g digun akan di industr i ad alah ben tonit, activated clay dan ar ang aktif. SBE adalah limbah hasil pemutih an yang dap at mer usak lingku ngan. Limbah SBE ini dapat d ijadikan media p ertu mbuhan oleh mikr oor gan isme yan g mamp u h idup menyebabkan minyak ter seb ut berbentuk lap isan tipis d i per mukaan air seh ingga menu tup per mukaan air dan dapat men ghalangi oksigen masuk dalam air. Hal in i juga d apat menggan ggu pencahayaan seh ingga ter ganggu nya kelestar ian biota air d an p r oses

Biodegr adasi mer u pakan pemecahan pencemar or ganik oleh dilakukan isolasi, menguji kemamp uan kapang pend egr adasi lipid dan men gu ji

sin ergis an tar kapang yang d iamb il di ar ea pembuan gan limbah .

Untu k itu per lu dilakukan p enelitian agar d iper oleh kap an g yan g mampu men der ad asi minyak. Tahap awal d alam p en elitian ini yaitu men car i kapang yan g mamp u men degrad asi min yak, yaitu dilakukan den gan car a mengisolasi d an men seleksi kapan g lipolitik. Selanjutnya melaku kan u ji sin ergis atar kapang lip olitik yang d isimpan dalam coolb ox.

(3)

den gan kecep atan 150 rp m selama 7 har i atau sampai menu nju kan per tumbuh an yan g dicirikan campur an CPO d an MM men un ju kkan cir i b erb eda seper ti ter dapat gelembu ng. Per ub ahan ini diamati setiap h ar i modifikasi dar i Mun awar (1 99 9).

Isolasi Kapang dari Limbah SBE

Masing-masin g samp el yang diku ltu r pada MM cair selama 7 har i d an dikocok d engan kecep atan 1 20 r p m. Setelah dikocok selam a 7 h ari dien cer kan samp ai 10-6_{dengan car a mengambil 1 mL} ditamb ah kan ke dalam tabung r eaksi yan g telah d iber i gar am fisiologis sebanyak 9 mL, selanjutnya dihomogen kan dengan for tek sehin gga ter bentu k p engen cer an 10-1_{. Den gan car a} yan g sam a dilakukan pengen cer an hin gga 10-6_{. Kemu dian d ar i setiap pen gencer an} ditumbuhkan dalam medium PDA d engan metode pour plate dan d iin kubasi 2x24

jam pada suh u 3 70_{C samp ai menu njukan} ter jadin ya per tumbuhan. Kemu dian diamatai setiap kolon i kapang yang tu mbuh dengan cir i berbeda metode in i mer u pakan mod ifikasi dar i Gofar (2012).

Pe murnian Kapang Lipolitik

Koloni kapang dengan cir i ber beda (sep ert i war n a, bentuk koloni, d an per mukaan koloni) masing-masin g d i mur nikan d en gan car a di str eak ke med iu m PDA dalam cawan p etr i, lalu diinkub asi selama 2 x 24 jam. Teknik ini dilaku kan secara b erulang samp ai diper oleh koloni yang diindikasikan mur ni. Jika b elum memp er oleh koloni yan g mur n i, d ilakukan kemb ali (ulangi), hingga men dapat koloni yang mu r ni. Koloni murn i adalah kolon i yan g b erasal dar i satu sel saja. Kolon i mu rni yang didapat diinokulasikan pada medium mir ing u ntu k men dapat isolat mu rni. Met od e ini mer up akan modifikasi dar i Gofar (20 12 ).

Sele ksi Kapang Lipolitik dari Limbah SBE

Isolat mu rn i diseleksi ber dasar kan kemamp uan ber tah an hidu p d an tu mbuh pad a media PDA yan g d itambah CPO 4,4 % d an indikator Brom otym ol Blue (0,08

g/ l) ser ta kemamp uan un tuk

men ggun akan limbah minyak ter seb ut, seleksi d ilakukan dengan car a masin g-masin g isolat d iin okulasi ke dalam med ium PDA yang telah d itamb ah CPO dan in dikat or Brom otym ol Blue. Ku ltu r

diinkub asi pada su hu 370_{C selama 24} jam. Tu mbuhnya koloni isolat kap ang yan g men unjukkan warn a kuning p ad a med ium berar ti isolat kapang t er sebut mampu tumbuh dan mend egr ad asi minyak.

Karakte risasi

Isolat h asil seleksi selanju tnya dikar akterisasi melalui du a tahap, seb agai b erikut.

a. Karakte risasi Morfo logi Koloni

Isolat kap ang d itu mbuh kan p ad a med ium PDA. Kar akter isolat kap ang yan g diamati melip uti mor fologi koloni (sep er ti tepu ng, men ggu nung, licin, ad a atau tidak gar is-gar is r ad ial d ar i p usat koloni kear ah tepi koloni, d iameter koloni, war na koloni, tepi koloni, dan seb alik koloni) (Ganjar , 1999 ).

b. Karake risasi Morfo logi Sel

Pengamatan mor fologi mikr oskopis isolat kapang dilkukan dengan membu at pr epar at basah dengan lakt ofenol. Mor fologi yan g diamati adalah sp or a (ben tuk, per mukaan, ukur an d an war na), spor an gia (b en tuk, war na, d an ukur an) dan kbentuk h ifa (ber sep ta/ tid ak) (Jhonson, et al 1 99 4).

Ide ntifikasi Kapang lipo litik

Ber dasar kan kar akter dar i kap an g lipolotik yang d iper oleh dar i pr oses kar akterisasi selan jutn ya diidentifikasi ber dasar kan b uku

Illustrated Genera Of Im perfect Fungi (H.l. Barnett & Barry B. Hunter, 2008).

3 . HASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi

(4)

22

Tabel 1 . Isolasi Isolat Kapang Lipo litik

No Pe ngen ce ran

samp el

Ju mlah is o lat

Ko de is o lat

1 10-4 ₂ _{V1, V2}

2 10-5 ₂ _{V3, V4}

3 10-6 ₂ _{V5, V6}

4 10-7 ₂ _{V7, V8}

Hasil isolasi yang d iper oleh dapat d ilih at pad a Tabel 1 m enun ju kkan bahwa pad a pengen cer an ter end ah ter lihat p aling banyak kolon i yang tumbu h. Dar i cir i morfologi, b entu k d an per mu kaan yan g berbeda pad a masing-masin g koloni diambil dan diten tukan menjad i koloni yan g b er b ed a. Pada pengencer an 10-4_{terd apat 207 kolon i} dan ter dapat 2 isolat yang ber beda dengan d ib er i label V1 dan V2. Pada pengencer an 10-5_{d ihitun g terdap at 198} koloni yan g tu mbuh dan setelah dilakukan p en gamatan ter d ap at 2 isolat yang berb eda d en gan diber i lab el V3 dan V4 . Pad a cawan yan g b er isi isolat dengan pengencer an 10-6 _{dihitu ng} ter d ap at 92 kolon i yang tu mbuh d an ter d ap at 2 isolat yan g b erb eda dengan member i label V5 d an V6. Selanjutn ya pada p en gen cer an ter akh ir 10-7_{ter dapat} 87 kolon i yan g tu mbu h dan terd ap at 2 isolat yang ber beda d en gan dib er i label V7 dan V8. Kemudian pada masing-masin g isolat yan g d i an ggap berbeda dimurn ikan dengan ditanam dengan menggun akan metod e gores (steak plate) menggu nakan med ia PDA.

Selanjutn ya d ilih at ap abila isolat pada masin g-masing cawan sud ah mu r ni yaitu d i dalam 1 cawan sud ah ter d ap at kolon i yang ter p isah. Isolat kapang mur ni d iambil sebanyak 1 ose diinoku lasikan ke dalam media PDA miring secar a asep tis dengan meletakkan jar um ose yang ter dapat biakan pada d asar kemir ingan agar d an ditar ik d engan ger akan zig-zag, selan jutn ya b iakan kapang d iin kubasi pada su hu 37o_{C selama 2 har i car a ker ja} ini modifikasi (Kur n iawan , 2006 ). Biakan yang su dah tumbuh p ad a agar miring d ap at dilih at pada Gambar 1.

Selanjutn ya setelah dilakukan per emajaan t er hadap isolat kapan g yang telah mur n i kemu dian dilakukan seleksi.

Hal ini dilakukan untu k memper oleh kapang lipolit ik, yaitu kap ang yang mampu mengub ah lip id menjadi lipase d an men ggunakan CPO sebagai sumber kar bon.

Gambar 1 . Iso lat Kapang dari Limbah SBE

Hasil Se leksi Isolat Kapang Lipo litik dari Limbah SBE

Seleksi ber tujuan unt uk mendapat isolat kapang yang mamp u meman faatkan CPO seb agai sumber kar bon. Kapang yang mamp u meman faatkan CPO b erati kapang ter sebut ter masu k jenis kap an g lipolitik yang mampu mend egr ad asi d aer ah ter cemar min yak gor eng. Isolat kapang lipolitik mer u pakan hasil isolasi d an seleksi kapang lip olitik yang telah d ilakukan sebelumn ya. Isolat kapang lipolitik in i kemud ian d iseleksi un tuk melih at p otensinya d alam mend egr adasi lipid. Hasil yang d ip er olah tersaji d alam Tab el 2.

Tabe l 2 . Hasil Seleksi Kapang Lipolitik

No Kode Iso lat Index Lipase

1 V1 3 ,6 ± 0 ,8

2 V2 3 ,0 ± 0 ,6

3 V3 2 ,0 ± 0 ,4

4 V4 2 ,6 ± 0 ,7

5 V5 2 ,5 ± 0 ,8

6 V6 2 ,1 ± 0 ,5

7 V7 2 ,9 ± 1 ,0

8 V8 2 ,9 ± 1 ,3

(5)

sebagai su mber kar bon. Hal in i d apat d ilih at pada zon a kuning yan g ter bentuk p ad a sekitar an kolon i yang tu mbuh (Gambar 2) hal in i men un jukkan bahwa telah terben tuk lip ase akibat aktivitas d ar i kapan g lip olitik tersebut.

Gambar 2 . Se le ksi Kapang Lipo litik Karakte r Kapang Lipolitik dari Limbah

SBE

Isolat yang su dah ter seleksi selanju tnya dilakukan uji kar akter isasi. Yaitu untu k men getahui bentuk mor fologi d an mengetahu i bentu k spora.

Karakte r Mo rfo logi Kolo ni Kapang Lipo litik

Hasil pen gamatan karakter isasi mor fologi koloni kap an g lip olitik pada Tab el 4 menu njukkan p ertumbu han yang lambat p ad a semu a isolat. Namu n adanya p er b ed aan dar i masin g-masing isolat kap ang yan g tumbuh. Hal ini dapat dilihat d ar i diameter kolon i p ad a masin g-masing isolat. Per tumbuhan kolon i kapang ter gan tung dengan kemampu an kapang u ntu k tu mbu h d an memanfaatkan nu tr isi yan g ter sedia. Kap ang yang memiiliki d iameter koloni terb esar yaitu pada isolat V1, selan jutn ya kapang isolat V4 dan yang p aling kecil isolat kap an g V2. Besar n ya d iameter koloni isolat kapang masing-masing secar a ber urutan 1,2, 1,1 d an 1 ,0. Hal in i menu nju kkan p erb ed aan yang tid ak ter lalu jauh p er tu mbuh an koloni kap ang d i ant ar a ket iga kolon i kapang ter seb ut.

Hal ini sesu ai d engan yang telah d ikatakan Ganjar et al., (1 999) konidia

atau tubuh buahnya dapat tu mbuh d en gan b erb agai macam war n an ya seper ti mer ah, h itam, jin gga, ku nin g, p utih , kebiruan, coklat d ll, sehin gga war na in i dapat menentu kan jen is kap angnya. Per b ed aan morfologi kolon i kap ang lipolitik juga dap at dilihat dar i var iasi war n a.

Mo rfologi Sel Kapang lipo litik

Hasil pengamatan morfologi mikr oskopis spora pada kolon i kapang men un jukkan perbedaan ciri-cir i ber dasarkan karakter n ya d ar i 8 isolat yan g d iamati kar akter nya ter d ap at 3 isolat kapang lipolitik yan g berbeda. Dan ter dapat b eb er apa isolat memiliki kar akter yan g sam a yaitu V1 d an V8 masin g-masin g memiliki u ku r an h ifa besar, ter dapat septat p ad a hifan ya, ser ta hifa memiliki cab an g, u kur an sp or a sedang dan memiliki bentuk sp or a elips. Kemud ian isolat V4 dan V5 masing-masin g memiliki u kur an h ifa sed an g, h ifa yan g dimiliki ber sep tat, ada per cab an gan pad a hifa, memiliki u ku r an sp or a kecil dan memiliki bentuk spor a bulat. Dan selan ju tnya isolat yang memiliki kar akter sama adalah V2, V3, V6 d an V7 . Masing-masin g isolat V2 , V3, V6, V7.

Isolat V2 yan g telah diamat i dibawah mikr oskop dap at dilih at bahwa isolat V2 ini memiliki uku ran hifa sed an g, hifa yan g dimiliki b er septat, ada per cab angan pada hifa, memiliki u ku r an spor a sedang d an memiliki bentu k sp or a elip s (Gamb ar 3).

Gambar 3 . Mo rfolo gi Isolat Kapang V2 Te ride ntifikasi Se bagai Cylindroclad ium sp (Pe rbe saran

4 0 0 x)

(6)

24

ter d ap at pad a isolat t er sebu t (Gambar 4 ).

Gambar 4 . Mo rfo logi Iso lat Kapang V4

Te rid entifikasi Sebagai Fuma go sp

Karakter istik isolat V4 antar a lain memiliki b en tuk kon idia bulat, ber war n a hijau kekunin gan , ser ta memiliki konid iafor . Berbeda d engan isolat V1 dan V2 masin g-masing memiliki sep tat (Gamb ar 5).

Gambar 5 . Mo rfo logi Iso lat Kapang V1 Te rid entifikasi Sebagai Aspergilus

Fumigat us

Ide ntifikasi Kapang Lipo litik

Hasil d ar i kar akter isasi dapat digun akan untuk mengid entifikasi isolat kapang lip olitik yang telah d iper oleh. Rin cian u ntu k men gidentifikasi dapat dilihat p ada Tab el 3 ber ikut.

Tabe l 3 . Tabel Ide ntifikasi

Karakteris tik Isolat

V2 V4 V1

Struktur no n re produksi Hifa

Septat/ aseptat

Sep tat Aseptat Sep tat

Warn a hifa Hialin Hialin Hialin

Struktur repro duksi Spo ra

Ben tuk Permu kaan Warn a

Kolu mela - - -

Konidia - - +

Ben tuk Elip s Elips Bulat Permu kaan Kasar Kasar Kasar Warn a Hijau Hijau Hijau

Konidifor + + +

Hasil identifikasi

Cylindro-cladium

sp

Fum ago

sp

Aspergilus fum igatus

Keter angan : - = tidak ad a + = ada

Ber d asar kan hasil p en gamatan kar akter isasi mikr oskopis pada Tab el 3 maka isolat V2 merupakan

Cylindrocladium sp. Hasil kar akter isasi in i

sesuai d en gan Barnett H I& Hunter Barry B., 2008, kolon i Cylindrocladium sp

tu mbu h cep at p ad a suh u 24 o_{C, d engan} d iameter per tumbuhan 1,0 cm p ad a har i p ertama, memiliki war na konidia b erwar na hijau , p er mukaan konidia kasar , m emiliki sep tet. Hal ini d iper kuat oleh Gan jar et al., (1999 ) bahwa Cylindrocladium sp memiliki konidia

b erb entu k elips, konidia memb entuk r antai kar ena konia in i ber hubungan an tar a satu dengan kon id ia yang lain nya, mu dah sekali lep as d an pada lin gkungan mu dah sekali menyeb ar seb agai tepu ng.

Ber d asar kan hasil pengamatan kar akter isasi mikr oskopis pada Tabel 3 maka isolate V2 mer up akan Fum ago sp.

Hasil karakter isasi ini sesuai dengan

(7)

kon idia kasar , tid ak memiliki sep tat. Hal in i dip er kuat oleh Gan jar et al., (1999 )

bah wa Fumago sp memiliki konid ia

berb en tuk elip s, konid ia memb en tuk r antai kar ena konia ini berhubungan antar a satu dengan kon idia yang lain nya, mud ah sekali lepas dan pada lin gku ngan 2008, koloni Aspergilus fum igatus tu mbuh

cepat pada suhu 24 o_{C, d en gan d iameter} per tumbuh an 1,2 cm p ada har i per tama Spesies ini memiliki kemampu an tu mbuh paling cepat d iband in gkan d ua sp esies lain nya, memiliki war na konid ia ber warn a hijau, p er mukaan konid ia kasar , tid ak memiliki septat. Hal ini diper ku at oleh Ganjar et al., (1999 )

bah wa Aspergilus fum igatus memiliki

kon idia berben tuk bulat, konid ia memb en tuk r antai kar en a kon ia ini ber hubungan ant ar a satu d en gan konid ia yan g lainn ya, mu dah sekali lepas d an pad a lingkungan mu dah sekali men yebar sebagai tepun g. Sp esies ini t d apat tu mbuh pada suhu yan g cu ku p t inggi yaitu 5 5 o_{C pada tekan an oksigen r en dah.}

4 . KESIMPULAN

Ber dasarkan hasil isolasi, seleksi, uji p otensi, siner gisme, kar akterisasi d an id en tifikasi kapang lipolitik dar i limb ah SBE dapat disimpulkan b ah wa:

1. Dip er oleh tiga isolat kapan g yan g ber poten si mamp u mend egr adasi r esid u min yak (lip olitik) dar i limb ah SBE dengan kode masin g-masing isolat V1, V2, V4 .

2. Masin g-masing isolat kap ang lip olitik ber dasar kan karakter istikn ya ter identifikasi sebagai b er ikut. Isolate kap an g V1, V2 dan V4 secar a ber ur utan t er id en tifikasi seb agai

Aspergilus fum igatus,

Cylindrocladium sp dan Fum ago sp.

3. Poten si lip olitik yang d itun jukkan oleh p er sen degr adasi minyak dar i tiga isolat kapang ad alah Aspergilus fum igatus (V1 ) sebesar 7 1,29 %

mer up akan p otensi yang paling tinggi, disu sul oleh Cylindrocladium

sp (V2 ) 59,8 % dan Fumago sp (V2 )

sebesar 39 ,28 %.

4. Tiga isolat kapang yang diper oleh yaitu Aspergilus fum igatus, Cylindrocladium sp dan Fum ago sp

b ersifat sin ergis sehin gga tiga isolat kapang tersebu t dapat digunakan d alam bentu k konsor sium.

5 . SARAN

Per lu dilakukan penelitian leb ih lanjut untuk mengetah ui efektifitas pr oses d egr edasi r esidu m inyak pada SBE dengan memper hitungkan faktor lin gkun gan seper ti pH, suhu dan

Tesis. Univer sitas Diponegor o Sem ar ang.

Bar nett, H.I & Barr y B. Hu nte, B.B. 20 08. Illustr ated Gen er a Of Imper fect

Fungi.

Br id son . E.Y. 19 98. The Oxoid Manual.

Oxoid Limitid . England.

Dwidjosepu tr o, D. 2010 . Dasar-dasar Hid rokarb on olastik Asal Rhizosfer Man gr ove Pad a tan ah Ter cemar Minyak Bumi. Jurnal Lahan Sub Optim al 1(2).

(8)

26

Polut an Or gan ik d an Lin gkun gan .

Prosiding Kongres Nasional VI Perhim punan Microbiologi Indonesia. Sur abaya.

Kuch ar z, C.J., Neber gall, R.S. dan Taylor, D.R., 19 94, Pr ocess for Regener at ing Spent Acid-Activated Bentonite Clays an d Smectite Catalysts, US Patent No. 5 ,358,915. Munawar . 1999. Isolasi dan Uji

Kemampuan isolat Bakter i Rhizosfer d ar i Hu tan Bakau d i Cilacap dalam Men degr adasi resid u minyak bum i. Tesis.

Pr ogr am Pascasarjan a Institut Tekn ologi Band un g. Tid ak dipublikasikan.

Munawar . 2000 . Op timalisasi Sumb er Nitr ogen (KNO3) pad a Med ium Per tumbuhan Bakteri Pengur ai Hidr okarbon. Jurnal Penelitian

Sains. 8 (I).

Nasr u l & Maimun T. 2009 . Pen gar uh Pen amb ah an Jamu r Pelapu k Putih (White Rot Fungi) pada Pr oses

Pen gomposan Tan dan Kosong Kelap a Sawit. Jurnal Rekayasa Kim ia dan Lingkungan 7( 4).

Yud on o, B. 2011. Siner gi Antar a Bakter i Tan ah dan Tan aman pada Pr oses Bior emed iasi Tan ah Ter kon tamin asi Min yak Bumi.

Disertasi. Pr ogr am Pasca Sar jana

Universitas Sr iwijaya. Tid ak Dipublikasikan .

Yusnimar . Zah r ina, I. Heltin a, D. 20 12. Sumb er Bahan Bakar Alter n atif d ar i Sp ent Bleach ing Earth Asal In du str i Refin er y Minyak Sawit.

Laporan Hibah Kom petitif Penelitian Strat egis Nasional.