Penetapan Kadar Kalsium Secara Spektrofotometri Serapan Atom dan Fosfor Secara Spektrofotometri Sinar Tampak pada Ikan Teri (Stolephorus spp.)

(1)

(2)

Lampiran 2. Gambar sampel

Teri tawar Teri tawar yang sudah dihaluskan

Teri nasi Teri nasi yang sudah dihaluskan

(3)

Lampiran 3. Hasil analisis kualitatif mineral kalsium

Endapan kalsium sulfat

Keterangan : 1. Larutan sampel

2. Sampel + asam sulfat 1N

Kristal kalsium sulfat (perbesaran 10x10)

(4)

Lampiran 4. Hasil analisis kualitatif mineral fosfor

Endapan kuning amonium fosfomolibdat Keterangan :

1. Larutan sampel

(5)

Lampiran 5. Gambar alat spektrofotometer serapan atom, spektrofotometer uv-visible dan tanur

Atomic Absorption Spectrophotometer Hitachi Z-2000

(6)

Lampiran 5 (lanjutan)

(7)

Lampiran 6. Bagan alir proses destruksi kering

Ikan teri kering

Ditimbang sebanyak 5 gram di atas krus porselen

Diarangkan di atas hot plate

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100◦C dan perlahan - lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500◦C dengan interval 25◦C setiap 5 menit

Ditambahkan 5 ml asam nitrat (1:1) Diuapkan pada hot plate sampai kering

Hasil

Dilakukan selama 60 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator

Abu

Dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator

Dicuci bersih

Dimasukkan kembali ke dalam tanur dengan temperatur awal 100˚C dan perlahan - lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500˚C dengan interval 25˚C setiap 5 menit.

(8)

Lampiran 7. Bagan alir pembuatan larutan sampel

Sampel yang telah didestruksi

Dilarutkan dalam 5 ml asam nitrat (1:1) Dipindahkan ke dalam labu tentukur 100 ml Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali dengan 10 ml akuabides. Dicukupkan dengan akuabides hingga garis tanda

Dimasukkan ke dalam botol Larutan sampel

Disaring dengan kertas saring Whatman No.42

Filtrat

Dibuang 5 ml untuk menjenuhkan kertas saring

Dilakukan analisis kualitatif

Dilakukan analisis kuantitatif dengan Spektrofotometer Serapan Atom pada λ 422,7 nm untuk kadar kalsium, dan analisis kuantitatif dengan Spektrofotometer Sinar Tampak pada λ 710 nm untuk kadar fosfor

(9)

Lampiran 8. Perhitungan Konsentrasi Larutan Induk Baku KH2PO4

BM KH2PO4 = 136,09 BM P = 30,9738

(10)

Lampiran 9. Data Penentuan Kerja pada Panjang Gelombang 710 nm

No Menit Ke- Absorbansi 1 11 0.4843 2 12 0.4855 3 13 0.4829 4 14 0.4826 5 15 0.4815 6 16 0.4817 7 17 0.4815 8 18 0.4812 9 19 0.4815

10 20 0.4827

11 21 0.4814

12 22 0.4808

13 23 0.4817

14 24 0.4816

15 25 0.4821

16 26 0.4818

17 27 0.4818

18 28 0.4820

19 29 0.4821

20 30 0.4822

21 31 0.4823

22 32 0.4825

23 33 0.4824

24 34 0.4820

25 35 0.4825

26 36 0.4825

27 37 0.4828

28 38 0.4827

29 39 0.4829

30 40 0.4828

31 41 0.4828

32 42 0.4829

33 43 0.4831

34 44 0.4828

35 45 0.4832

36 46 0.4830

37 47 0.4831

(11)

39 49 0.4833

40 50 0.4833

41 51 0.4833

42 52 0.4836

43 53 0.4834

44 54 0.4834

45 55 0.4832

46 56 0.4833

47 57 0.4835

48 58 0.4835

49 59 0.4836

50 60 0.4837

Keterangan:

(12)

Lampiran 10. Data kalibrasi kalsium dengan spektrofotometer serapan atom, perhitungan persamaan garis regresi dan koefisien korelasi (r).

No. Konsentrasi (µg/ml) (X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 0,0000 0,00000 0,0000 0,000000

2. 0,2000 0,0152 0,00304 0,0400 0,000231

3. 0,4000 0,0273 0,01092 0,1600 0,000745

4. 0,6000 0,0390 0,02340 0,3600 0,001521

5. 0,8000 0,0506 0,04048 0,6400 0,002560

6. 1,0000 0,0635 0,06350 1,0000 0,004032

∑ 3,0000 0,1956 0,14134 2,2000 0,009090

= 0,0326 – (0,0622)(0,5000)

= 0,0015

Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,0622X + 0,0015

(13)

Lampiran 11. Data kalibrasi fosfor dengan spektrofotometer sinar tampak, perhitungan persamaan garis regresi dan koefisien korelasi (r).

No. Konsentrasi (µg/ml) (X)

Absorbansi (Y)

= 0,2540 – (0,6939)(0,3571)

= 0,0062

Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,6939X + 0,0062

(14)

Lampiran 12. Hasil analisis kadar kalsium pada sampel 1. Hasil analisis kalsium pada teri tawar

No. Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ml)

Kadar (mg/100g)

1. 5,0148 0,0175 0,2572 2.564,7556

2. 5,0153 0,0174 0,2556 2.548,4718

3. 5,0149 0,0175 0,2572 2.564,7044

4. 5,0147 0,0174 0,2556 2.548,7767

5. 5,0146 0,0174 0,2556 2.548,8275

6. 5,0149 0,0173 0,2540 2.532,6456

2. Hasil analisis kalsium pada teri nasi

Absorbansi (A)

Konsentrasi (µg/ ml)

Kadar (mg/100g) 1. 5,0006 0,0370 0,5707 570,6711 2. 5,0007 0,0372 0,5740 573,8746 3. 5,0009 0,0373 0,5756 575,4591 4. 5,0011 0,0374 0,5772 577,0435 5. 5,0014 0,0376 0,5804 580,2234 6. 5,0013 0,0375 0,5788 578,6277 3. Hasil analisis kalsium pada teri toge

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1. 5,0009 0,0358 0,5514 551,3477

2. 5,0012 0,0359 0,5531 552,9220

3. 5,0005 0,0356 0,5482 548,1767

4. 5,0008 0,0357 0,5498 549,7513

5. 5,0016 0,0360 0,5547 554,4849

(15)

Lampiran 13. Hasil analisis kadar fosfor pada sampel 1. Hasil analisis kadar fosfor pada teri tawar

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1. 5,0148 0,136 0,1871 1305,6604

2. 5,0153 0,138 0,1900 1325,6451

3. 5,0149 0,137 0,1885 1315,6926

4. 5,0147 0,136 0,1871 1305,6865

5. 5,0146 0,137 0,1885 1315,7713

6. 5,0149 0,137 0,1885 1315,6926

2. Hasil analisis kadar fosfor pada teri nasi

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1. 5,0007 0,154 0,2130 372,6961

2. 5,0009 0,155 0,2144 375,2027

3. 5,0011 0,154 0,2130 372,6662

4. 5,0014 0,153 0,2116 370,1226

5. 5,0013 0,152 0,2101 367,6087

3. Hasil analisis kadar fosfor pada teri toge

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

1. 5,0009 0,119 0,1626 568,8941

2. 5,0012 0,117 0,1597 558,7361

3. 5,0005 0,117 0,1597 558,8143

4. 5,0008 0,118 0,1611 563,8239

5. 5,0016 0,119 0,1626 568,7761

(16)

Lampiran 14. Contoh perhitungan kadar kalsium dan fosfor pada sampel 1. Contoh perhitungan kadar kalsium

Berat sampel yang ditimbang = 5,0148 gram Absorbansi (Y) = 0,0175

Persamaan regresi: Y = 0,0622X + 0,0015

X =

0622 , 0

0015 , 0 0175 ,

0 

= 0,2572 µg/ml

Konsentrasi kalsium = 0,2572 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(µg/ml) i

Konsentras

(µg/g) kalsium

Kadar 

=

g 0148 , 5

5000 x ml 100 µg/ml

0,2572 x

= 25647,0846 µg/g = 2564,7085 mg/100g

(17)

2. Contoh perhitungan kadar fosfor

Berat sampel yang ditimbang = 5,0148 gram Absorbansi (Y) = 0,136

Persamaan regresi: Y = 0,6939X + 0,0062

X =

6939 , 0

0062 , 0 136 ,

0 

= 0,1871 µg/ml

Konsentrasi fosfor = 0,1871 µg/ml

(g) Sampel Berat

n pengencera Faktor

x (ml) Volume x

(mcg/ml) i

Konsentras

(mcg/g) fosfor

Kadar 

=

g 0148 , 5

3500 x ml 100 µg/ml

0,1871 x

= 13056,6043 µg/g = 1305,6604 mg/100g

(18)

Lampiran 15. Perhitungan statistik kadar kalsium pada sampel 1. Perhitungan statistik kadar kalsium pada teri tawar

No. Xi (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

2.556,6971

SD =





Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0.01, dk = 5 diperoleh nilai t tabel = α /2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung< t tabel.

(19)

t hitung4 =

6 / 7700 , 8

7,9204

= 2,2122

t hitung5 =

6 / 7700 , 8

7,8696

= 2,1980

t hitung6 =

6 / 7700 , 8

7,9494

= 2,2203

Dari hasil perhitungan di atas didapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kalsium pada teri tawar:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 2.556,6971 ± ( 4,0321 x 8,7700/√6)

(20)

2. Perhitungan statistik kadar kalsium pada teri nasi

No. Xi

(kadar mg/100g)

(Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

(21)

t hitung4 =

6 / 4362 , 3

1,0603

= 0,7558

t hitung5 =

6 / 4362 , 3

4,2402

= 3,0226

t hitung6 =

6 / 4362 , 3

2,6445

= 1,8851

Kadar kalsium pada teri nasi:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 575,9832 ± ( 4,0321 x 3,4362/√6)

(22)

3. Perhitungan statistik kadar kalsium pada teri toge

(23)

t hitung4 =

6 / 3336 , 2

1,8624

= 1,9389

t hitung5 =

6 / 3336 , 2

2,8712

= 3,0138

t hitung6 =

6 / 3336 , 2

1,3857

= 1,4546

Kadar kalsium pada teri toge:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 551,6137± ( 4,0321 x 2,3336/√6)

(24)

Lampiran 16. Perhitungan statistik kadar fosfor pada sampel 1. Perhitungan statistik kadar fosfor pada teri tawar

1. 1305,6604 -8,3644 69,9623

2. 1325,6451 11,6203 135,0325

3. 1315,6926 1,6679 2,7817

(25)

t hitung4 =

6 / 5251 , 7

8,3383

= 2,7142

t hitung5 =

6 / 5251 , 7

1,7466

= 0,5685

t hitung6 =

6 / 5251 , 7

1,6679

= 0,5429

Kadar fosfor pada teri tawar:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 1314,0248± ( 4,0321 x 7,5251/√6)

(26)

2. Perhitungan statistik kadar fosfor pada teri nasi

No. Xi

(kadar mg/100g)

(Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

(27)

Pada hasil perhitungan diatas diperoleh t hitung < t tabel, ada 1 data yang ditolak maka perhitungan diulangi kembali dengan 5 sampel yang di terima.

(28)

t hitung1 =

5 / 8902 , 2

1,0368

= 0,8022

t hitung2 =

5 / 8902 , 2

3,5434

= 2,7414

t hitung3 =

5 / 8902 , 2

1,0069

= 0,7790

t hitung4 =

5 / 8902 , 2

1,5367

= 1,1889

t hitung5 =

5 / 8902 , 2

4,0506

= 3,1338

Kadar fosfor pada teri nasi:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 371,6593 ± ( 4,0321 x 2,8902/√5)

(29)

3. Perhitungan statistik kadar fosfor pada teri toge

No. Xi (Xi-X̅ ) (Xi-X̅)²

(30)

t hitung4 =

6 / 9488 , 4

0,8265

= 0,4091

t hitung5 =

6 / 9488 , 4

4,1257

= 2,0421

t hitung6 =

6 / 9488 , 4

4,2073

= 2,0825

Kadar fosfor pada teri toge:

µ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

= 564,6504± ( 4,0321 x 4,9488/√6)

= (564,6504± 8,1462) mg/100g

(31)

Lampiran 17. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalsium dan fosfor 1. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalsium

Y = 0,0622X + 0,0015 Slope = 0,0622

No.

X

Absorbansi

Y Yi Y-Yi (Y-Yi)²

1. 0,0000 -0,0001 0,00150 -0,00160 0,0000025600

2. 0,2000 0,0152 0,01394 0,00126 0,0000015876

3. 0,4000 0,0273 0,02638 0,00092 0,0000008464

4. 0,6000 0,0390 0,03882 0,00018 0,0000000324

5. 0,8000 0,0506 0,05126 -0,00066 0,0000004356 6. 1,0000 0,0635 0,06370 -0,00020 0,0000000400

∑ 0,0000055020

Batas kuantitasi (LOQ) =

(32)

2. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi fosfor Y = 0,6939X + 0,0062

Slope = 0,6939

No.

X

Absorbansi

Y Yi Y-Yi (Y-Yi)²

Batas kuantitasi (LOQ) =

(33)

Lampiran 18. Hasil analisis kadar kalsium setelah penambahan larutan baku pada masing-masing sampel

1. Hasil analisis kadar kalsium setelah ditambahkan larutan baku pada teri tawar No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1. 5,0047 0,0190 0,2814 2810,8626 97,99% 2. 5,0265 0,0191 0,2830 2814,6643 99,45% 3. 5,0045 0,0190 0,2814 2810,9749 98,03%

∑ 15,0357 295,47%

5,0119 98,49%

2. Hasil analisis kadar kalsium setelah ditambahkan larutan baku pada teri nasi No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1. 5,0027 0,0408 0,6318 631,4918 92,56% 2. 5,0027 0,0409 0,6334 633,0986 95,24% 3. 5,0025 0,0408 0,6318 631,5170 92,60%

∑ 15,0079 280,40%

5,0026 93,47%

3. Hasil analisis kadar kalsium setelah ditambahkan larutan baku pada teri toge No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1. 5,0015 0,0393 0,6077 607,5348 93,24% 2. 5,0006 0,0393 0,6077 607,6441 93,42% 3. 5,0044 0,0394 0,6093 608,7890 95,33%

∑ 15,0065 281,99%

(34)

Lampiran 19. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium 1. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium pada teri tawar Persamaan regresi : Y = 0,0622X + 0,0015

µg/ml

Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 0,2814 µg/ml

CF = volume(ml) x Faktor pengenceran sampel

Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

5000 = 2810,8626 mg/100g

Kadar sampel setelah ditambah larutan baku (CF) = 2810,8626 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambah larutan baku (CA) = 2556,6971 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery =5,0119 g

Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A)

C*A = mlyangditambahkan

Konsentras _

=

= 259,3827 mg/100g

Maka % perolehan kembali kalsium = CF- CA x 100%

(35)

2. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium pada teri nasi Persamaan regresi : Y = 0,0622X + 0,0015

µg/ml

Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 0,6318 µg/ml CF = volume(ml) x Faktor pengenceran

sampel Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

500 = 631,4918 mg/100g

Konsentras _

=

= 59,9684 mg/100g

(36)

3. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium pada teri toge Persamaan regresi : Y = 0,0622X + 0,0015

µg/ml

Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

500 = 607,5348 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambah larutan baku (CA) = 551,6137mg/100g

Konsentras _

=

= 59,9684 mg/100g

(37)

Lampiran 20. Hasil analisis kadar fosfor setelah penambahan larutan baku pada masing-masing sampel

1. Hasil analisis kadar fosfor setelah ditambahkan larutan baku pada teri tawar No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1. 5,0046 0,150 0,2072 1449,3079 97,06% 2. 5,0334 0,151 0,2087 1451,0363 98,30% 3. 5,0285 0,151 0,2087 1452,4502 99,31%

∑ 15,0665 294,67%

5,0222 98,22%

2. Hasil analisis kadar fosfor setelah ditambahkan larutan baku pada teri nasi No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1 5,0031 0,168 0,2332 407,8031 90,74% 2 5,0326 0,169 0,2346 407,9183 91,03% 3 5,0283 0,169 0,2346 408,2671 91,91%

∑ 15,0640 273,68%

5,0213 91,23%

3. Hasil analisis kadar fosfor setelah ditambahkan larutan baku pada teri toge No. Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Kadar (mg/100g)

Persen Perolehan

Kembali 1 5,0286 0,131 0,1799 625,9053 102,48% 2 5,0274 0,131 0,1799 626,0547 102,73% 3 5,0011 0,130 0,1784 624,3042 99,80%

∑ 15,0571 305,01%

(38)

Lampiran 21. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar fosfor 1. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar fosfor pada teri tawar Persamaan regresi : Y = 0,6939X + 0,0062

µg/ml

Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 0,2072 µg/ml CF = volume(ml) x Faktor pengenceran

sampel Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

3500 = 1449,3079 mg/100g

= 139,3821 mg/100g

(39)

2. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar fosfor pada teri nasi Persamaan regresi : Y = 0,6939X + 0,0062

µg/ml

Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

875 = 407,8031 mg/100g

C*A = mlyangditambahkan = 39,8301 mg/100g

(40)

3. Contoh perhitungan uji perolehan kembali kadar fosfor pada teri toge Persamaan regresi : Y = 0,6939X + 0,0062

µg/ml

Berat

(µg/ml) i

Konsentras _

1750 = 625,9053 mg/100g

C*A = mlyangditambahkan = 59,7725 mg/100g

(41)

Lampiran 22. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar kalsium 1. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar kalsium pada teri tawar

No. % Perolehan Kembali

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 97,99 -0,5 0,25

2. 99,45 0,96 0,92

3. 98,03 -0,46 0,21

∑ 295,47 1,38

X̅ 98,49

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 1,38



= 0,83

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

98,49 0,83

x

(42)

2. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar kalsium pada teri nasi

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 92,56 -0,91 0,83

2. 95,24 1,77 3,13

3. 92,60 -0,87 0,76

∑ 280,40 4,72

X̅ 93,47

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 4,72



= 1,54

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

93,47 1,54

x

(43)

3. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar kalsium pada teri toge

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 93,24 -0,16 0,03

2. 93,42 0,02 0,0004

3. 95,33 1,93 3,72

∑ 281,99 3,75

X̅ 93,40

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 3,75



= 1,37

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

93,40 1,37

x

(44)

Lampiran 23. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar fosfor 1. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar fosfor pada teri tawar

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 97,06 -1,16 1,35

2. 98,30 0,08 0,006

3. 99,31 1,09 1,19

∑ 294,67 2,55

X̅ 98,22

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 2,55



= 1,13

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

98,22 1,13

x

(45)

2. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar fosfor pada teri nasi

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 90,74 -0,49 0,24

2. 91,03 -0,2 0,04

3. 91,91 0,68 0,46

∑ 273,68 0,74

X̅ 91,23

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 0,74



= 0,61

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

91,23 0,61

x

= 0,69%

(46)

3. Perhitungan simpangan baku relatif (RSD) kadar fosfor pada teri toge

(Xi) (Xi-X̅ ) (Xi-X̅ )²

1. 102,48 0,81 0,66

2. 102,73 1,06 1,12

3. 99,80 -1,87 3,50

∑ 305,01 5,28

X̅ 101,67

SD =





1 -n

X

-Xi 2



=

1 3 5,28



= 1,62

RSD = x

X SD

_ 100%

= 100%

101,67 1,62

x

= 1,59%

(47)