PERAN PEMBERIAN EKSTRAK TEMPE TERHADAP KINERJA REPRODUKSI TIKUS BETINA USIA LEPAS SAPIH GHINA INDRIANI

(1)

PERAN PEMBERIAN EKSTRAK TEMPE TERHADAP

KINERJA REPRODUKSI TIKUS BETINA

USIA LEPAS SAPIH

GHINA INDRIANI

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR 2014

(2)

(3)

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN

SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA*

Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Peran Pemberian Ekstrak Tempe terhadap Kinerja Reproduksi Tikus Betina Usia Lepas Sapih adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.

Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.

Bogor, Agustus 2014 Ghina Indriani NIM B04100126

(4)

ABSTRAK

GHINA INDRIANI. Peran Pemberian Ekstrak Tempe terhadap Kinerja Reproduksi Tikus Betina Usia Lepas Sapih. Dibimbing oleh NASTITI KUSUMORINI dan ARYANI SISMIN SATYANINGTIJAS.

Tempe merupakan makanan yang terbuat dari hasil fermentasi kedelai yang mengandung fitoestrogen dan bersifat estrogenik. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak tempe terhadap kinerja reproduksi tikus betina usia lepas sapih. Delapan belas ekor tikus betina lepas sapih usia 21 hari dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu kelompok kontrol dan perlakuan. Kelompok perlakuan diberi ekstrak tempe 0.5 g/mL/hari selama 28 hari. Dilakukan pengukuran terhadap bobot badan, bobot ovarium, bobot uterus, serta kadar hormon estradiol dan testosteron. Pengambilan data dilakukan saat tikus berusia 28, 42, dan 56 hari dan dianalisis menggunakan metode Independent Samples T-test dengan selang kepercayaan 95% (α=0.05). Hasil penelitian pemberian fitoestrogen dengan dosis 0.5 g/mL perhari pada usia 42 hari dapat mempengaruhi kinerja reproduksi berupa penurunan bobot badan dan ovarium, serta peningkatan kadar hormon estradiol.

Kata kunci: ekstrak tempe, fitoestrogen, kinerja reproduksi, tikus betina

ABSTRACT

GHINA INDRIANI. The Role of Tempe Extract on The Reproductive Performance of Female Rat in Prepuberty Age. Supervised by NASTITI KUSUMORINI and ARYANI SISMIN SATYANINGTIJAS.

Tempe is a fermented soybean that contains phytoestrogen which has estrogenic effect. This study was conducted to study the effect of tempe extract in reproductive performance of female rats at weaning age. Eighteen female rats weaning age or 21 days were divided into 2 groups, control and treatment group. The treatment group were given tempe extract 0.5 g/mL/day for 28 days. Body weight, ovarium weight, uterus weight, and oestradiol and testosterone concentration were measured. Data was collected at the age of 28, 42, and 56 days and analysed using Independent Samples T-test methode with 95% confidence interval (α: 0.05). The result showed that administration of phytoestrogen with 0.5 g/mL/day have an influence in rat reproductive performance which were decrease body and ovarium weight, and increase the oestradiol concentration at the age of 42 days.

(5)

Skripsi

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan

pada

Fakultas Kedokteran Hewan

PERAN PEMBERIAN EKSTRAK TEMPE TERHADAP

KINERJA REPRODUKSI TIKUS BETINA

USIA LEPAS SAPIH

GHINA INDRIANI

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR 2014

(6)

(7)

Judul Skripsi : Peran Pemberian Ekstrak Tempe terhadap Kinerja Reproduksi Tikus Betina Usia Lepas Sapih

Nama : Ghina Indriani NIM : B04100126

Disetujui oleh

Dr Dra Nastiti Kusumorini Pembimbing I

Dr Drh Aryani Sismin Satyaningtijas, MSc Pembimbing II

Diketahui oleh

Drh Agus Setiyono, MS, PhD, APVet (K) Wakil Dekan

(8)

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Februari 2014 ini ialah reproduksi, dengan judul Peran Pemberian Ekstrak Tempe terhadap Kinerja Reproduksi Tikus Betina Usia Lepas Sapih.

Terima kasih penulis ucapkan kepada Ibu Dr Dra Nastiti Kusumorini dan Ibu Dr Drh Aryani Sismin Satyaningtijas, MSc selaku pembimbing skripsi yang telah banyak memberi saran. Di samping itu, penghargaan penulis sampaikan kepada Nurul Chotimah, Retno Tegarsih, Roro Ambarwati yang telah bersama-sama berjuang dalam mengumpulan data penelitian. Penulis juga berterima kasih kepada Ibu Ida, Ibu Sri, Pak Dikdik, dan Pak Gholib yang telah membantu peneliti di laboratorium dan kandang. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada teman-teman Acromion 47 khususnya Nunuy, Deka, Gamma, Erlan, Tatum, Upay, Hida, Laras, Tri untuk bantuan, dukungan, dan motivasi yang diberikan. Karya ini penulis persembahkan untuk Bapak, Ibu, serta seluruh keluarga, atas segala doa dan kasih sayangnya.

Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.

Bogor, Agustus 2014

(9)

DAFTAR ISI

DAFTAR TABEL viii

DAFTAR GAMBAR viii

DAFTAR LAMPIRAN viii

PENDAHULUAN 1 Latar Belakang 1 Tujuan Penelitian 2 Manfaat Penelitian 2 TINJAUAN PUSTAKA 2 Reproduksi Betina 2

Tempe sebagai Sumber Fitoestrogen 3

METODE 4

Tempat dan Waktu Penelitian 4

Alat dan Bahan 4

Persiapan Penelitian 4

Hewan Coba 4

Ekstrak Tempe 5

Prosedur Penelitian 5

Analisis Data 6

HASIL DAN PEMBAHASAN 6

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Badan 6

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Ovarium 7

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Uterus 8

Kadar Hormon Estrogen dan Testosteron 9

SIMPULAN DAN SARAN 10

Simpulan 10

Saran 10

DAFTAR PUSTAKA 10

LAMPIRAN 13

(10)

DAFTAR TABEL

1 Rataan bobot badan anak tikus usia 28, 42, dan 56 hari 6 2 Rataan bobot ovarium (g) dan rasio bobot ovarium terhadap bobot

badan anak tikus usia 28, 42, dan 56 hari 7

3 Rataan bobot uterus (g) dan rasio bobot uterus terhadap bobot badan

anak tikus usia 28, 42, 56 hari 8

4 Rataan kadar estrogen terhadap testosteron (E/T) anak tikus pada usia

28, 42, dan 56 hari 9

DAFTAR GAMBAR

1 Bagan pengelompokan hewan coba 5

2 Bagan pelaksanaan penelitian 6

DAFTAR LAMPIRAN

1 Cara pembuatan ekstrak tempe 13

2 Analisis statistik rataan bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari 14 3 Analisis statistik rataan bobot ovarium pada usia 28, 42, dan 56 hari 15 4 Analisis statistik rataan rasio ovarium terhadap bobot badan pada usia

28, 42, dan 56 hari 16

5 Analisis statistik rataan bobot uterus pada usia 28, 42, dan 56 hari 17 6 Analisis statistik rataan rasio uterus terhadap bobot badan pada usia 28,

42, dan 56 hari 18

7 Analisis statistik rataan kadar hormon estrogen pada usia 28, 42, dan 56

hari 19

8 Analisis statistik rataan kadar hormon testosteron pada usia 28, 42, dan

56 hari 20

9 Analisis statistik rataan rasio estrogen terhadap testosteron pada usia 28,

(11)

1

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Reproduksi merupakan suatu kemampuan makhluk hidup dalam menghasilkan keturunan. Reproduksi diatur oleh interaksi antara sistem syaraf dan sistem endokrin. Kedua sistem ini berinteraksi secara konsisten dan saling bekerja sama dalam menginisiasi, mengkoordinasi, dan mengatur semua fungsi reproduksi (Senger 1999). Pada hewan betina, reproduksi dipengaruhi oleh hormon estrogen dan progesteron. Kadar estrogen atau estradiol yang normal sangat diperlukan dalam kinerja reproduksi hewan betina. Fungsi dari estrogen adalah sebagai perangsang perkembangan karakteristik seks sekunder, mempercepat pertumbuhan folikel ovarium, merangsang pertumbuhan duktus mamari dan menyebabkan perkembangan kelenjar mamari (Ganong 2003). Menurut Batubara (2010), pada masa pubertas terjadi peningkatan sekresi Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) dari hipotalamus. Kemudian GnRH akan berikatan dengan reseptor di pituitari sehingga sel-sel gonadotrop akan mengeluarkan Follicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH). FSH dan LH kemudian akan merangsang produksi estrogen.

Pada masa prapubertas kadar GnRH yang beredar rendah. Rendahnya kadar GnRH ini tidak cukup untuk merangsang pituitari anterior untuk melepaskan hormon gonadotropin seperti FSH dan LH. Hal ini menyebabkan rendahnya kadar estrogen yang akan menginduksi terjadinya proses reproduksi (Senger 1999). Menurut Suprihatin (2008), kekurangan hormon estrogen pada masa prapubertas dapat menyebabkan gangguan terhadap kinerja reproduksi, berupa tidak berkembangnya uterus dan atropi miometrium (Ganong 2003). Gangguan kinerja reproduksi ini dapat diatasi dengan pemberian estrogen eksogen yang relatif aman (Suprihatin 2008).

Tempe merupakan makanan yang terbuat dari hasil fermentasi kedelai. Tempe mengandung protein, lemak, karbohidrat, kalsium, vitamin, mineral, dan fitoestrogen. Fitoestrogen merupakan kelompok tanaman, baik biji-bijian, kacang-kacangan, sayuran, dan buah-buahan yang memiliki sifat khasiat menyerupai hormon estrogen atau dapat berinteraksi dengan reseptor estrogen (Biben 2012). Salah satu bentuk dari fitoestrogen adalah isoflavon yang terdiri atas genistein dan daidzein. Fitoestrogen ini dapat meniru ataupun dapat menghambat efek estrogen. Pada dosis rendah, fitoestrogen memiliki sifat seperti estrogen namun sebaliknya, pada dosis tinggi akan berlawanan dengan estrogen (Nurfaiziyah et al. 2011). Pemberian genistein dengan dosis 300 ppm dapat membantu mempercepat pembukaan vaginal pada hewan betina (You et al. 2002). Pemberian pakan yang mengandung fitoestrogen secara berlebihan dapat menyebabkan gangguan fungsi ovarium seperti sistik ovari, mengurangi tingkat konsepsi, dan infertilitas sementara (Jainudeen dan Hafez 2000). Menurut Biben (2012), penggunaan sediaan fitoestrogen dapat bermanfaat pada pemakaian yang tidak berlebihan dan sewajarnya.

Telah banyak penelitian dilakukan untuk mengetahui pengaruh fitoestrogen terhadap fertilitas dan perkembangan sistem reproduksi. Hasil dari penelitian tersebut ada yang berdampak positif maupun negatif. Hal ini disebabkan oleh

(12)

2

respon individu terhadap fitoestrogen berbeda-beda (Rishi 2002). Menurut Tan et al. (2006), pemberian fitoestrogen tidak memberikan efek yang berarti pada usia pubertas dan pada fertilitas individu. Pada penelitian Suprihatin (2008), tikus usia prapubertas yang diberi tepung tempe mengalami peningkatan kinerja reproduksi yang meliputi usia pubertas, jumlah korpus luteum, jumlah embrio, jumlah anak yang dilahirkan, dan produksi air susu. Selain itu, hasil penelitian Muhiddin (2013) menunjukkan pemberian fitoestrogen pada masa prapubertas dengan dosis 0.25 g/mL perhari selama 28 hari dapat meningkatkan kinerja reproduksi berupa peningkatan bobot ovarium pada anak tikus usia 42 hari. Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan untuk mengkaji pengaruh pemberian fitoestrogen yang berasal dari ekstrak tempe pada dosis yang lebih tinggi. Pemberian fitoestrogen ini diharapkan dapat meningkatkan kinerja organ dan hormon reproduksi karena fitoestrogen memiliki efek estrogenik.

Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh pemberian 0.5 g/mL ekstrak tempe yang mengandung fitoestrogen pada masa prapubertas terhadap kinerja reproduksi betina tikus Rattus norvegicus meliputi bobot badan, bobot ovarium dan uterus, serta kadar hormon estrogen dan testosteron.

Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberi informasi tentang efektivitas pemberian fitoestrogen pada masa prapubertas terhadap perkembangan kinerja reproduksi betina saat mencapai pubertas.

TINJAUAN PUSTAKA

Reproduksi Betina

Hormon reproduksi utamanya berasal dari sistem atau organ utama berikut, yaitu hipotalamus, pituitari anterior dan posterior, gonad, uterus, dan plasenta. Hormon dari hipotalamus yang mengatur reproduksi adalah Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH), Adrenocorticotropic Hormone (ACTH), dan Prolactin-Inhibiting Factor (PIF). Pituitari anterior mensekresikan tiga hormon gonadotropik yaitu FSH, LH, dan prolaktin, sedangkan pituitari posterior sebagai tempat penyimpanan hormon oksitosin dan vasopresin. Pada hewan betina, gonad berupa ovarium menghasilkan hormon estrogen dan progesteron yang merupakan hormon steroid (Hafez et al. 2000). Di dalam tubuh, bentuk endogen estrogen adalah 17β-estradiol, estron, dan estriol. Hormon tersebut disekresikan oleh sel teka interna dan sel granulosa folikel ovarium. Sel teka interna didominasi oleh reseptor LH yang bekerja melalui cAMP (cyclic Adenosine monophosphate) untuk meningkatkan perubahan kolesterol menjadi androstenedion. Sebagian dari androstenedion inilah yang akan diubah menjadi estradiol. Sel granulosa

(13)

3 didominasi oleh reseptor FSH. FSH ini bekerja melalui cAMP untuk meningkatkan aktivitas aromatase (Ganong 2003). Aromatase merupakan enzim yang mengkatalisis perubahan testosteron menjadi senyawa aromatik estradiol (Dorland 2012). Menurut Ganong (2003), estrogen memiliki fungsi meningkatkan folikel ovarium, meningkatkan jumlah otot uterus, menyebabkan pertumbuhan duktus dan pembesaran payudara, dan sebagai hormon feminisasi pada masa pubertas atau merangsang karakteristik seks sekunder.

Pubertas merupakan periode saat ciri-ciri seks sekunder mulai berkembang dan kemampuan untuk reproduksi seksual mulai didapat (Dorland 2012). Pubertas pada betina tercapai saat hipotalamus mampu menghasilkan Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) dalam jumlah yang cukup sehingga dapat merespon umpan balik positif dari estradiol. Jumlah yang memadai dari GnRH dapat menyebabkan ovulasi. GnRH akan merangsang sekresi Follicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH) dari anterior pituitari. Setelah disekresikan, FSH dan LH menstimulasi gonad. Estrogen dan androgen disekresikan oleh gonad sebagai umpan baliknya (Hafez et al. 2000).

Pada hewan betina, masa pubertas dimulai saat individu mencapai usia estrus dan ovulasi pertama serta usia dimana tubuh dapat mendukung kebuntingan (Senger 1999). Estrus terjadi ketika tingginya sekresi estrogen dari praovulatori folikel de Graaf. Pada akhir estrus, ovulasi terjadi dengan diikuti pembentukan korpus luteum yang mensekresikan progesteron. Jika terjadi kebuntingan, korpus luteum dibutuhkan untuk pemeliharaan kebuntingan (Hafez dan Hafez 2000). Pubertas dapat dipengaruhi oleh faktor internal dan faktor eksternal. Faktor internal yang mempengaruhi pubertas berupa faktor genetik dan kadar hormon, sedangkan faktor eksternal yang dapat mempengaruhi onset pubertas bervariasi antarspesies. Faktor eksternal tersebut berupa musim hewan lahir, penyinaran atau photoperiod selama masa pubertas, ada atau tidaknya lawan jenis pada masa peripubertal, dan kepadatan kelompok pada kandang (Senger 1999). Pada tikus masa pubertas dicapai pada usia 40-60 hari (Fox 2002).

Tempe sebagai Sumber Fitoestrogen

Tempe merupakan makanan tradisional Indonesia yang terbuat dari hasil fermentasi kedelai. Melalui proses fermentasi, biji kedelai mengalami proses penguraian menjadi senyawa sederhana sehingga mudah dicerna (BSN 2012). Adapun kandungan gizi rata-rata dalam 100 g tempe adalah air 64%, protein 18.3%, lemak 4%, karbohidrat 12.7%, kalsium 129 mg, fosfor 154 mg, dan zat besi 10 mg (Pambudi 2013). Selain itu, kedelai yang difermentasi menjadi tempe memiliki kandungan fitoestrogen yang lebih tinggi dibandingkan dengan kedelai yang tidak diolah. Di dalam kedelai atau produk olahannya, genistein memiliki konsentrasi sebesar 26.8-120.5 mg/100 g berat kering dan daidzein sebesar 10.5-85 mg/100g berat kering (Widodo 2005).

Fitoestrogen termasuk dalam senyawa nonsteroid yang aktivitas estrogennya lemah dan tidak sekuat estrogen sintetik. Salah satu bentuk fitoestrogen adalah isoflavon (Murkies et al. 1998). Menurut Rishi (2002), ada dua komponen isoflavonoid utama, yaitu genistein dan daidzein yang terdapat pada kacang kedelai dalam bentuk aglikon (bentuk tak terkonjugasi) ataupun dalam bentuk beta-glikosida (bentuk terkonjugasi). Daidzein merupakan senyawa isoflavon

(14)

4

yang aktivitas antioksidannya lebih tinggi dibandingkan dengan senyawa isoflavon lainnya.

Isoflavon ini termasuk molekul nonsteroid alami yang secara struktur memiliki kemiripan dengan 17β-estradiol dan modulator selektif reseptor estrogen. Isoflavon memiliki cincin fenolik dan dapat berikatan dengan reseptor estrogen (Mishra et al. 2011). Kemiripan molekul isoflavon dengan estrogen alami menyebabkan isoflavon dikenal memiliki efek estrogenik dan antiestrogenik. Penggunaan dengan dosis rendah akan menunjukkan efek menyerupai kerja estrogen (estrogenik), namun sebaliknya penggunaan dengan dosis tinggi dapat menghasilkan efek yang berlawanan dengan kerja estrogen (antiestrogenik). Ada dua tipe reseptor estrogen dalam tubuh manusia, yaitu reseptor estrogen α (alfa) yang ditemukan pada jaringan mamari dan uterus serta reseptor reseptor estrogen β (beta) yang terdistribusi pada tulang, otak, endotel pembuluh darah, dan kantung kemih. Afinitas pengikatan isoflavon oleh reseptor β lebih baik dari reseptor α. Akibat dari reaksi pengikatan isoflavon dengan reseptor estrogen, isoflavon dapat memberi efek kardioprotektif, memperkuat tulang, dan membantu dalam mengurangi gelaja menopause (Mishra et al. 2011).

METODE

Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilaksanakan di kandang Unit Pengelola Hewan Laboratorium, Laboratorium Bagian Fisiologi, Departemen Anatomi, Fisiologi, dan Farmakologi, dan Laboratorium Hormon, Unit Rehabilitasi Reproduksi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor pada bulan Februari hingga Mei 2014.

Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah kandang tikus berpenutup kawat kasa, timbangan analitik, sentrifuge, kit komersial Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Kit DRG Estradiol ELISA EIA-2693 dan Kit DRG Testosteron ELISA EIA-1559, syringe 24G, spoit 3 mL, spoit 1 mL, mortar, stamper, sonde lambung, tabung reaksi, tabung eppendorf, alas bedah tikus, peralatan bedah (skalpel, pinset, gunting), pot organ, dan tisu. Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah ekstrak tempe yang diekstraksi etanol 70%, hewan coba yang digunakan adalah 18 ekor tikus Rattus norvegicus betina usia 21 hari, larutan NaCl fisiologis (0.9%), Normal Buffered Formaldehide, larutan eter, dan akuades.

Persiapan Penelitian

Hewan Coba

Hewan yang digunakan dalam penelitian adalah tikus betina (Rattus norvegicus) berusia 21 hari. Tikus dipelihara di kandang Unit Pengelola Hewan Laboratorium, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.

(15)

5 Pemeliharaan dilakukan menggunakan kandang berukuran 30 x 20 x 12 cm, berbahan plastik, dan berpenutup kawat kasa pada bagian atasnya. Setiap kandang dialasi dengan sekam yang diganti secara periodik. Pakan dan air minum diberikan ad libitum.

Ekstrak Tempe

Sumber fitoestrogen yang digunakan dalam penelitian berasal dari tempe yang diekstrak menggunakan etanol 70% di Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik (Balitro). Setiap 100 g ekstrak tempe mengandung 87.55 mg isoflavon yang terdiri atas 83.30 mg daidzein dan 4.25 mg genestein.

Prosedur Penelitian

Delapan belas ekor tikus betina lepas sapih berusia 21 hari dibagi menjadi dua kelompok, yaitu kelompok kontrol yang tidak diberi ekstrak tempe dan kelompok perlakuan yang diberi ekstrak tempe. Tikus pada masing-masing kelompok berjumlah sembilan ekor. Ekstrak tempe sebanyak 5 g dilarutkan dengan 10 mL akuades, kemudian tikus dicekok 0.5 g/mL ekstrak tempe dengan menggunakan sonde lambung setiap hari selama 28 hari. Pengelompokan hewan coba disajikan pada Gambar 1.

Gambar 1 Bagan pengelompokan hewan coba

Tikus betina berusia 28, 42, dan 56 dari masing-masing kelompok dinekropsi untuk mendapatkan gambaran kinerja reproduksi, meliputi pengukuran bobot badan, bobot organ reproduksi (ovarium dan uterus), dan pengambilan sampel darah untuk pengukuran kadar estrogen dan testosteron. Pengambilan data diawali dengan pengukuran bobot badan tikus, kemudian dilakukan pembiusan terhadap tikus. Pembiusan dilakukan dengan menggunakan larutan eter, setelah tikus terbius dilakukan pengambilan darah sebanyak ± 3 mL secara intrakardial. Sampel darah yang diambil dibiarkan selama ± 1 jam, selanjutnya disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit untuk mendapatkan sampel serum. Pengukuran kadar hormon estrogen dan testosteron dalam sampel serum dilakukan dengan menggunakan ELISA. Hasil pengukuran ini dinyatakan dalam satuan pg/mL. Setelah pengambilan darah, tikus dinekropsi dan dilakukan pembukaan ruang abdomen untuk pengambilan organ ovarium dan uterus. Organ dipreparir dengan baik hingga tidak terdapat lemak jaringan yang tersisa. Kemudian organ ovarium dan uterus ditimbang menggunakan timbangan analitik

18 ekor tikus betina usia 21 hari Kontrol (K) = 9 ekor Sampling usia 28 hari 3 ekor Sampling usia 42 hari 3 ekor Sampling usia 56 hari 3 ekor Perlakuan (P) 28 hari = 9 ekor Sampling usia 28 hari 3 ekor Sampling usia 42 hari 3 ekor Sampling usia 56 hari 3 ekor

(16)

6

untuk mendapatkan bobot basah organ. Bobot yang diperoleh dinyatakan dalam satuan gram. Bagan prosedur penelitian disajikan pada Gambar 2.

Usia anak tikus (Hari) 21 28 42 48 56

Gambar 2 Bagan pelaksanaan penelitian

Analisis Data

Hasil parameter yang telah diukur dinyatakan dalam rataan ± simpangan

baku. Perbedaan antar kelompok perlakuan diuji secara statistika dengan metode Independent Samples T-Test pada selang kepercayaan 95% menggunakan software SPSS 21.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Badan

Rataan bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari setelah pemberian ekstrak tempe dengan dosis 0.5 g/mL ditampilkan pada Tabel 1. Hasil rataan bobot badan tikus usia 28 dan 56 hari menunjukkan tidak ada beda nyata (p>0.05) antara tikus kelompok perlakuan dengan tikus kelompok kontrol. Hal ini menunjukkan bahwa tidak ada pengaruh pemberian ekstrak tempe terhadap rataan bobot badan.

Tabel 1 Rataan bobot badan anak tikus usia 28, 42, dan 56 hari

Usia Rataan bobot badan (g)

Kontrol Perlakuan

28 hari 34.34 ± 2.77 35.47 ± 2.39

42 hari 59.89 ± 6.64a 46.32 ± 2.97b

56 hari 85.47 ± 4.56 88.51 ± 5.42

ab_{Angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukkan hasil berbeda}

nyata pada taraf uji 5%.

Pemberian ekstrak tempe dosis 0.5 gram per hari pada tikus betina selama 28 hari.

Sampling usia 28, 42, dan 56 hari:

Pengambilan sampel darah, organ ovarium dan uterus.

(17)

7 Bobot badan tikus usia 42 hari menunjukkan hasil yang lebih rendah dan berbeda nyata (p<0.05) pada tikus kelompok perlakuan terhadap tikus kelompok kontrol. Hasil ini berbeda dengan penelitian Muhiddin (2013) yang menyatakan bahwa terjadi peningkatan rataan bobot badan tikus usia 42 hari pada kelompok yang diberi ekstrak tempe dengan dosis 0.25 g/mL. Hal ini diduga disebabkan oleh perbedaan dosis ekstrak tempe yang diberikan. Menurut Whitten dan Patisaul (2001), fitoestrogen dapat meningkatkan atau menekan proliferasi pada sel yang dipengaruhi oleh estrogen tergantung dari konsentrasi fitoestrogennya. Pada dosis rendah dapat meningkatkan proliferasi sel, sedangkan pada dosis tinggi dapat menekan proliferasi sel yang dipengaruhi estrogen. Oleh sebab itu, diduga pada dosis 0.5 g/mL, fitoestrogen dapat menyebabkan penekanan proliferasi sel, sehingga dapat menurunkan bobot badan pada tikus kelompok perlakuan usia 42 hari.

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Ovarium

Hasil pengukuran rataan bobot ovarium dan rasio bobot ovarium terhadap bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari setelah pemberian ekstrak tempe 0.5 g/mL ditampilkan pada Tabel 2.

Tabel 2 Rataan bobot ovarium (g) dan rasio bobot ovarium terhadap bobot badan anak tikus pada usia 28, 42, dan 56 hari

Parameter Rataan bobot badan (g)

Kontrol Perlakuan

Usia 28 hari

Bobot ovarium (g)

Rasio ovarium/bobot badan

0.017 ± 0.004 0.048 ± 0.009 0.018 ± 0.004 0.050 ± 0.014 Usia 42 hari Bobot ovarium (g)

0.027 ± 0.005a 0.045 ± 0.009 0.016 ± 0.002b 0.035 ± 0.005 Usia 56 hari Bobot ovarium (g)

0.055 ± 0.012 0.065 ± 0.017

0.062 ± 0.023 0.071 ± 0.028

Hasil pengukuran bobot ovarium pada tikus usia 28 dan 56 hari tidak menunjukkan adanya perbedaan nyata (p>0.05) antara tikus kelompok kontrol dan perlakuan. Hal ini diduga fitoestrogen dalam ekstrak tempe ini belum bekerja optimal sehingga tidak menunjukkan hasil yang berbeda nyata. Hasil rataan bobot ovarium usia 42 hari menunjukkan penurunan yang berbeda nyata (p<0.05). Penelitian Muhiddin (2013) menunjukkan bahwa pemberian ekstrak tempe dengan dosis 0.25 g/mL dapat meningkatkan bobot ovarium secara beda nyata (p<0.05) pada usia 42 hari. Perbedaan hasil ini dapat disebabkan oleh adanya perbedaan dosis ekstrak tempe yang diberikan pada hewan coba. Rasio bobot ovarium terhadap bobot badan tikus juga tidak menunjukkan adanya perbedaan nyata (p>0.05) antara tikus kelompok kontrol dan perlakuan pada usia 28, 42, dan 56 hari. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak tempe dengan dosis 0.5 g/mL per hari tidak berpengaruh nyata pada rasio bobot ovarium terhadap bobot badan.

(18)

8

Menurut Jefferson (2010), ovarium memiliki reseptor estrogen β dan fitoestrogen memiliki afinitas yang tinggi terhadap reseptor estrogen β, sehingga fitoestrogen dapat sangat berpengaruh pada ovarium. Allred et al. (2001) menyatakan bahwa genistein yang terdapat di dalam isoflavon (golongan fitoestrogen) dapat merangsang proliferasi sel-sel organ reproduksi karena pengaruh estrogeniknya. Penelitian Suttner et al. (2005) juga menyatakan bahwa fitoestrogen dapat menyebabkan proliferasi sel pada ovarium, sehingga dapat meningkatkan bobot ovarium. Selain itu, menurut Mardiati dan Sitasiwi (2008), isoflavon pada dosis tinggi dapat mempengaruhi perkembangan ovarium dan menekan sintesis estrogen endogenus, sehingga mengganggu perkembangan folikel ovarium. Pertumbuhan folikel dapat mendukung pertambahan bobot ovarium (Murasawa et al. 2005), sehingga apabila pertumbuhan folikel terhambat, dapat menurunkan bobot ovarium. Pada penelitian ini menunjukkan penurunan bobot ovarium pada usia 42 hari. Hal ini diduga bahwa pemberian ekstrak tempe dengan dosis sebesar 0.5 g/mL per hari dapat mempengaruhi perkembangan ovarium.

Pengaruh Ekstrak Tempe terhadap Bobot Uterus

Estrogen pada keadaan normal dapat meningkatkan jumlah otot uterus. Selain itu, di bawah pengaruh estrogen, otot uterus menjadi lebih aktif dan mudah terangsang (Ganong 2003). Kelebihan stimulasi estrogen pada uterus secara terus menerus dapat menghambat implantasi (Jefferson 2010). Hasil pengukuran rataan bobot uterus dan rasio bobot uterus terhadap bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari setelah pemberian ekstrak tempe 0.5 g/mL ditampilkan pada Tabel 3.

Tabel 3 Rataan bobot uterus (g) dan rasio bobot uterus terhadap bobot badan anak tikus pada usia 28, 42, dan 56 hari

Parameter Rataan bobot badan (g)

Kontrol Perlakuan

Usia 28 hari Bobot uterus (g)

Rasio uterus/bobot badan

0.016 ± 0.004 0.045 ± 0.009 0.019 ± 0.008 0.054 ± 0.022 Usia 42 hari Bobot uterus (g)

0.050 ± 0.022 0.082 ± 0.031 0.035 ± 0.001 0.076 ± 0.005 Usia 56 hari Bobot uterus (g)

0.118 ± 0.023 0.139 ± 0.029

0.107 ± 0.057 0.119 ± 0.057

Hasil menunjukkan bahwa bobot uterus dan rasio bobot uterus terhadap bobot badan tikus usia 28, 42, dan 56 hari pada kelompok perlakuan tidak berbeda nyata (p>0.05) dari tikus kelompok kontrol. Pada usia 28 hari, hasil rataan bobot uterus dan rasio bobot uterus terhadap bobot badan tidak jauh berbeda antara kelompok kontrol dan perlakuan. Hal ini diduga disebabkan oleh waktu pemberian ekstrak tempe yang singkat, sehingga belum nampak hasil nyata antara perlakuan dan kontrol. Pada usia 42 dan 56 hari, hasil rataan bobot uterus tikus kelompok perlakuan cenderung lebih rendah dibandingkan dengan tikus kelompok kontrol.

Penurunan bobot uterus pada usia 42 dan 56 hari ini diduga sebagai efek antiestrogenik yang disebabkan oleh genistein (Zin et al. 2013). Efek

(19)

9 antiestrogenik ini dapat terjadi dari pemberian dosis fitoestrogen yang cukup tinggi. Hasil penelitian Santell et al. (1997) membuktikan bahwa isoflavon, genistein, dalam dosis rendah mempunyai efek estrogenik untuk meningkatkan berat uterus dengan menstimulasi penebalan endometrium uterus. Namun pemberian dengan dosis lebih tinggi akan menghasilkan efek antiestrogenik.

Kadar Hormon Estrogen dan Testosteron

Pengaruh pemberian ekstrak tempe terhadap kadar hormon estrogen dan testosteron serta rasio hormon estrogen terhadap testosteron pada usia 28, 42, dan 56 hari disajikan pada Tabel 4.

Tabel 4 Rataan kadar hormon estrogen dan testosteron serta rasio kadar estrogen terhadap testosteron (E/T) anak tikus pada usia 28, 42, dan 56 hari

Parameter Rataan bobot badan (g)

Kontrol Perlakuan Usia 28 hari Estrogen (pg/mL) 11.060 ± 3.152 17.573 ± 3.840 Testosteron (pg/mL) 303.000 ± 58.898 241.000 ± 62.554 Rasio E/T 0.037 ± 0.010 0.078 ± 0.032 Usia 42 hari Estrogen (pg/mL) 3.443 ± 0.427a 8.880 ± 1.592b Testosteron (pg/mL) 543.000 ± 268.613 483.330 ± 75.076 Rasio E/T 0.008 ± 0.005 0.019 ± 0.006 Usia 56 hari Estrogen (pg/mL) 9.763 ± 5.273 10.880 ± 5.395 Testosteron (pg/mL) 489.330 ± 71.703 450.670 ± 106.265 Rasio E/T 0.019 ± 0.008 0.023 ± 0.006

Hasil perhitungan statistik menunjukkan adanya peningkatan kadar hormon estrogen pada kelompok perlakuan terhadap kelompok kontrol pada setiap usia pengamatan. Namun, peningkatan kadar estrogen secara berbeda nyata (p<0.05) hanya ditunjukkan pada usia 42 hari. Hal ini dapat disebabkan oleh fitoestrogen mulai optimal bekerja pada usia 42 hari. Fitoestrogen merupakan kompetitor bagi estrogen endogenus untuk berikatan dengan reseptor estrogen. Kadar fitoestrogen yang tinggi menyebabkan estrogen endogenus tidak dapat berikatan dengan reseptor estrogen, sehingga kadar estrogen dalam darah meningkat (Mardiati dan Sitasiwi 2008).

Hasil perhitungan statistik rataan kadar hormon testosteron tampak menurun pada kelompok perlakuan terhadap kelompok perlakuan pada usia 28, 42, dan 56 hari. Namun, penurunan kadar testosteron ini tidak berbeda nyata (p>0.05). Penurunan ini dapat disebabkan oleh kerja fitoestrogen. Menurut Whitten dan Patisaul (2001), fitoestrogen memiliki potensi untuk mempengaruhi biosintesis dan metabolisme steroid. Isoflavon dan ligan merupakan inhibitor enzim 5α reduktase yang berperan dalam proses sintesis testosteron. Selain itu, isoflavon dan lignan juga merupakan inhibitor aromatase yang berperan sebagai katalis perubahan androstenedion menjadi estron dan testosteron menjadi estradiol (Ganong 2003).

(20)

10

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan

Pemberian fitoestrogen yang berasal dari ekstrak tempe pada masa prapubertas dengan dosis 0.5 g/mL per hari dapat mempengaruhi kinerja reproduksi berupa penurunan bobot badan dan ovarium pada usia 42 hari. Selain itu, fitoestrogen dapat berpengaruh terhadap peningkatan kadar hormon estrogen pada usia 42 hari.

Saran

Saran yang diajukan berdasarkan pada penelitian ini adalah perlu dilakukan penyeragaman bobot badan tikus yang akan digunakan dalam penelitian, agar hasil yang didapatkan lebih baik. Selain itu, perlu penambahan jumlah sampel tikus pada setiap kelompok.

DAFTAR PUSTAKA

Allred CD, Allred KF, Young HJ, Virant SM dan Herferich WG. 2001. Soy diets containing varying amounts of genistein stimulate growth of estrogen-dependent (MCF-7) in a dose-estrogen-dependent manner. Cancer Research. 61: 5045-5050.

Batubara JRL. 2010. Adolescent Development (Perkembangan Remaja). Sari Pediatri.Vol. 12, No. 1.

Biben HA. 2012. Fitoestrogen: Khasiat terhadap Sistem Reproduksi, Non Reproduksi, dan Keamanan Penggunaan. Seminar Ilmiah.30 Maret 2012. [BSN]. Badan Standardisasi Nasional. 2012. Tempe: Persembahan Indonesia

untuk Dunia. Jakarta: Badan Standardisasi Nasional.

Dorland WAN. 2012. Kamus Saku Kedokteran Dorland. Ed ke-28. Mahode et al., penerjemah; Hartanto et al., editor. Jakarta (ID): EGC

Fox JG. 2002. Laboratory Animal Medicine. Ed ke-2. New York (US): Academic Press.

Ganong WF. 2003. Fisiologi Kedokteran. Ed ke-20. Widjajakusumah HM, penerjemah; Djauhari, editor. Jakarta (ID): EGC. Terjemahan dari Medical Physiology.

Hafez ESE, Hafez B. 2000. Reproductive Cycle. Di dalam Reproduction In Farm Animals. Ed. Ke-7. Hafez ESE dan Hafez B, editor. Philadelphia (US): Lippincott Williams & Wilkins. hlmn 55-67.

Hafez ESE, Jainudeen MR, Rosnina Y. 2000. Hormone, Growth Factors, and Reproduction. Di dalam Reproduction In Farm Animals. Ed. Ke-7. Hafez ESE dan Hafez B, editor. Philadelphia (US): Lippincott Williams & Wilkins. hlmn 33-54.

(21)

11 Jainudeen MR, Hafez ESE. 2000. Reproductive Failure in Females. Di dalam: Reproduction in Farm Animals. Ed ke-7. Hafez ESE dan Hafez B, editor. Philadelphia (US): Lippincott Williams & Wilkins. hlmn 261-278.

Jefferson WN. 2010. Adult ovarian function can be affected by high level of soy. J Nutr. 140(12): 2322S-2325S.

Mardiati SM, Sitasiwi AJ. 2008. Korelasi jumlah folikel ovarium dengan konsentrasi hormon estrogen mencit (Mus musculus) setelah konsumsi harian tepung kedelai selama 40 hari. J Ana Fis. 16(2): 54-59.

Mishra N, Mishra VN, Devanshii. 2011. Natural phytoestrogens in health and disease. JIACM. 12(3):205-211.

Muhiddin SNM. 2013. Peran Ekstrak Tempe pada Masa Prapubertas terhadap Kinerja Reproduksi Tikus Betina Rattus norvegicus [Skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Murasawa M, Takahashi T, Nishimoto H, Yamamoto S, Hamano S, Tetsuka M. 2005. Relationship between ovarian weight and follicular population in Heifers. J of Reprod and Develop. 51(5): 689-93.

Murkies AL, Wilcox G, Davis SR. 1998. Phytoestrogens. J Clin Endocrinol Metab. 83(2):297-303.

Nurfaiziah A, Novrial D, Wijayana KA. 2011. Efek pemberian ekstrak tempe kedelai (Glycine max) terhadap ekspresi Caspase-3 mencit galur C3H model karsinogenesis payudara. Mandala of Health. Vol. 5, No. 2.

Pambudi S. 2013. Budidaya dan Khasiat Kedelai Edamame Camilan Sehat dan Lezat Multimanfaat. Yogyakarta (ID): Pustaka Baru Press.

Rishi RK. 2002. Phytoestrogens in health and illness. J Pharmacol 34:311-320. Santell RC, Chang YC, Nair MG, Helferich WG. 1997. Dietary genestein exert

estrogenic effects upon the uterus, mammary gland, and the hypothalamic/pituitary axis in rat. J Nutr. 127:263-269.

Senger PL. 1999. Pathways to Pregnancy and Parturation. Washington (US): Current Concepton Inc.

Suprihatin. 2008. Optimalisasi Kinerja Reproduksi Tikus Betina setelah Pemberian Tepung Kedelai dan Tepung Tempe pada Usia Prapubertas [Tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.

Suttner AM, Danilovich NA, Banz WJ, Winters TA. 2005. Soy Phytoestrogens: effects on ovarian function. Society for the Study of Reproduction [Internet]. [diakses Juni 2014]. Tersedia pada: http://tw3a.siuc.edu/angssr.htm

Tan KAL, Walker M, Morris K, Greig I, Mason JI, Sharpe RM. 2006. Infant feeding with soy formula: effects on puberty progression, reproductive function, and testicular cell numbers in marmoset monkeys in adulthood. Hum Reprod. 21: 896-904.

Whitten PL, Patisaul HB. 2001. Cross-species and inter assay comparison of phytoestrogen action. J Environ Health Perspect. 109:5-20.

Widodo J. 2005. Isoflavon, Makanan Ajaib. Pusat Data dan Informasi PERSI [Internet]. [diakses Maret 2014]. Tersedia pada: http://www.pdpersi.co.id You L, Casanova M, Bartolucci EJ, Fryczynski MW, Dorman DC, Everitt JI,

Gaido KW, Ross SM, Heck Hd’A. 2002. Combined effects of dietary phytoestrogen and synthetic endocrine-active compound on reproductive development in Sprague-Dawley rats: Genistein and Methoxychlor. Toxicol Sci. 66: 91-104.

(22)

12

Zin SRM, Omar SZ, Khan NLA, Musameh NI, Das S, Kassim NM. 2013. Effects of the phytoestrogen genistein on the development of the reproductive system of Sprague Dawley rats. Clinics. 68(2):253-262.

(23)

13 Lampiran 1 Cara pembuatan ekstrak tempe

Ekstrak tempe sudah terbentuk Dilakukan freeze drying untuk pengeringan

Dimasukkan ke dalam rotavapor selama 2 hari dengan suhu 40 °C Disaring untuk mendapatkan filtrat

Didiamkan selama 24 jam

Dikocok menggunakan stirrer elektrik selama 2 jam agar homogen Diberi pelarut dengan perbandingan 1:3 yaitu 3 kg tempe dan 9 L etanol 70%

Digiling atau ditumbuk Tempe dirajang

(24)

14

Lampiran 2 Analisis statistik rataan bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari Group Statistics

Kelompok N Mean Std. Deviation Std. Error Mean

BB4mg Kontrol 3 34.3433 2.77291 1.60094 Perlakuan 3 35.4700 2.39042 1.38011 BB6mg Kontrol 3 59.8900 6.64133 3.83437 Perlakuan 3 46.3200 2.96628 1.71258 BB8mg Perlakuan 3 88.5100 5.41610 3.12698 Kontrol 3 85.4733 4.56469 2.63543

Independent Samples Test

Levene's Test for Equality of Variances

t-test for Equality of Means

F Sig. t Df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper BB4mg Equal variances assumed . 078 . 794 -.533 4 .622 -1.12667 2.11370 -6.99523 4.74189 Equal variances not assumed -.533 3.915 .623 -1.12667 2.11370 -7.04582 4.79249 BB6mg Equal variances assumed 2 .176 . 214 3.231 4 .032 13.57000 4.19944 1.91047 25.22953 Equal variances not assumed 3.231 2.767 .054 13.57000 4.19944 -.45298 27.59298 BB8mg Equal variances assumed . 213 . 668 .743 4 .499 3.03667 4.08944 -8.31744 14.39077 Equal variances not assumed .743 3.888 .500 3.03667 4.08944 -8.44706 14.52039

(25)

15

Lampiran 3 Analisis statistik rataan bobot ovarium pada usia 28, 42, dan 56 hari Group Statistics

BO4mg Kontrol 3 .016733 .0043363 .0025036 Perlakuan 3 .017767 .0044792 .0025861 BO6mg Kontrol 3 .027000 .0052915 .0030551 Perlakuan 3 .016233 .0024542 .0014170 BO8mg Perlakuan 3 .062100 .0227462 .0131325 Kontrol 3 .054767 .0122859 .0070933

F Sig. T df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper BO4m g Equal variances assumed .003 .962 -.287 4 .788 -.0010333 .0035994 -.0110268 .008960 2 Equal variances not assumed -.287 3.996 .788 -.0010333 .0035994 -.0110310 .008964 3 BO6m g Equal variances assumed 2.862 .166 3.197 4 .033 .0107667 .0033677 .0014166 .020116 8 Equal variances not assumed 3.197 2.822 .054 .0107667 .0033677 -.0003425 .021875 8 BO8m g Equal variances assumed 2.510 .188 .491 4 .649 .0073333 .0149257 -.0341072 .048773 8 Equal variances not assumed .491 3.075 .656 .0073333 .0149257 -.0395147 .054181 4

(26)

16

Lampiran 4 Analisis statistik rataan rasio ovarium terhadap bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari

Group Statistics

BOBB4mg Kontrol 3 .048327 .0087414 .0050469 Perlakuan 3 .050427 .0138319 .0079858 BOBB6mg Kontrol 3 .045420 .0094338 .0054466 Perlakuan 3 .035097 .0054302 .0031351 BOBB8mg Perlakuan 3 .070773 .0279256 .0161228 Kontrol 3 .064677 .0172138 .0099384

Levene's Test for Equality of

Variances

F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper BOBB4mg Equal variances assumed 1.450 .295 -.222 4 .835 -.0021000 .0094469 -.0283289 .0241289 Equal variances not assumed -.222 3.378 .837 -.0021000 .0094469 -.0303487 .0261487 BOBB6mg Equal variances assumed 1.101 .353 1.643 4 .176 .0103233 .0062845 -.0071252 .0277719 Equal variances not assumed 1.643 3.194 .193 .0103233 .0062845 -.0090061 .0296527 BOBB8mg Equal variances assumed 1.340 .311 .322 4 .764 .0060967 .0189399 -.0464888 .0586821 Equal variances not assumed .322 3.328 .767 .0060967 .0189399 -.0509521 .0631454

(27)

17

Lampiran 5 Analisis statistik rataan bobot uterus pada usia 28, 42, dan 56 hari Group Statistics

Kelompok N Mean Std. Deviation Std. Error Mean BU4mg Kontrol 3 .015600 .0039154 .0022605 Perlakuan 3 .019267 .0079651 .0045987 BU6mg Kontrol 3 .049667 .0223010 .0128755 Perlakuan 3 .034933 .0013317 .0007688 BU8mg Perlakuan 3 .107133 .0566892 .0327295 Kontrol 3 .118300 .0227581 .0131394

F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper BU4mg Equal variances assumed 1.018 .370 -.716 4 .514 -.0036667 .0051242 -.0178938 .0105605 Equal variances not assumed -.716 2.913 .527 -.0036667 .0051242 -.0202526 .0129192 BU6mg Equal variances assumed 10.838 .030 1.142 4 .317 .0147333 .0128984 -.0210784 .0505451 Equal variances not assumed 1.142 2.014 .371 .0147333 .0128984 -.0403892 .0698558 BU8mg Equal variances assumed 1.303 .317 -.317 4 .767 -.0111667 .0352685 -.1090876 .0867543 Equal variances not assumed -.317 2.628 .775 -.0111667 .0352685 -.132942 .1106088

(28)

18

Lampiran 6 Analisis statistik rataan rasio uterus terhadap bobot badan pada usia 28, 42, dan 56 hari

BUBB4m g Kontrol 3 .045170 .0087597 .0050574 Perlakuan 3 .054413 .0216669 .0125094 BUBB6m g Kontrol 3 .082013 .0306239 .0176807 Perlakuan 3 .075593 .0049866 .0028790 BUBB8m g Perlakuan 3 .119287 .0572176 .0330346 Kontrol 3 .138743 .0286005 .0165125

F Sig. T df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper BUBB4mg Equal variances assumed 1.74 9 .257 -.685 4 .531 -.009243 .013493 -.046706 .028219 Equal variances not assumed -.685 2.637 .549 -.009243 .013493 -.055732 .037245 BUBB6mg Equal variances assumed 3.97 3 .117 .358 4 .738 .006420 .017913 -.043316 .056156 Equal variances not assumed .358 2.106 .753 .006420 .017913 -.067055 .079895 BUBB8mg Equal variances assumed .896 .397 -.527 4 .626 -.019456 .036931 -.121995 .083082 Equal variances not assumed -.527 2.941 .635 -.019456 .036931 -.138342 .099428

(29)

19

Lampiran 7 Analisis statistik rataan kadar hormon estrogen usia 28, 42, dan 56 hari

E4mg Kontrol 3 11.0600 3.15233 1.82000 Perlakuan 3 17.5733 3.83985 2.21694 E6mg Kontrol 3 3.4433 .42712 .24660 Perlakuan 3 8.8800 1.59286 .91964 E8mg Kontrol 3 9.7633 5.27343 3.04461 Perlakuan 3 10.8800 5.39467 3.11462

F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper E4mg Equal variances assumed .320 .602 -2.271 4 .086 -6.51333 2.86831 -14.4770 1.45038 Equal variances not assumed -2.271 3.854 .088 -6.51333 2.86831 -14.5976 1.57095 E6mg Equal variances assumed 6.680 .061 -5.710 4 .005 -5.43667 .95213 -8.08019 -2.79314 Equal variances not assumed -5.710 2.286 .021 -5.43667 .95213 -9.07916 -1.79417 E8mg Equal variances assumed .004 .951 -.256 4 .810 -1.11667 4.35552 -13.2095 10.97618

Equal variances not assumed

(30)

20

Lampiran 8 Analisis statistik rataan kadar hormon testosteron usia 28, 42, dan 56 hari

T4mg Kontrol 3 303.00 58.898 34.005 Perlakuan 3 241.00 62.554 36.116 T6mg Kontrol 3 543.00 268.613 155.084 Perlakuan 3 483.33 75.076 43.345 T8mg Kontrol 3 489.33 71.703 41.398 Perlakuan 3 450.67 106.265 61.352

Variances

F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Difference Std. Error Difference 95% Confidence Interval of the Difference

Lower Upper T4mg Equal variances assumed . 013 . 915 1 .250 4 . 279 62.000 49.605 -75.726 1 99.726 Equal variances not assumed 1 .250 3 .986 . 280 62.000 49.605 -75.923 1 99.923 T6mg Equal variances assumed 2 .055 . 225 . 371 4 . 730 59.667 161.027 -387.417 5 06.750 Equal variances not assumed . 371 2 .311 . 742 59.667 161.027 -551.159 6 70.492 T8mg Equal variances assumed . 271 . 630 . 522 4 . 629 38.667 74.013 -166.826 2 44.159 Equal variances not assumed . 522 3 .508 . 633 38.667 74.013 -178.693 2 56.026

(31)

21

Lampiran 9 Analisis statistik rataan rasio kadar hormon estrogen terhadap testosteron usia 28, 42, dan 56 hari

Group Statistics Kelompok N Mean Std. Deviation Std. Error Mean RET4mg Kontrol ₃ _.0370600 _.00984019 _.00568124 Perlakuan ₃ _.0784533 _.03197770 _.01846233 RET6mg Kontrol ₃ _.0078467 _.00503573 _.00290738 Perlakuan ₃ _.0189833 _.00605558 _.00349619 RET8mg Kontrol ₃ _.0192967 _.00802008 _.00463040 Perlakuan ₃ _.0231467 _.00633172 _.00365562

Variances t-test for Equality of Means

F Sig . t df Sig. (2-taile d) Mean Differen ce Std. Error Differen ce 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper RET4 mg Equal variances assumed 5.42 1 .08 0 -2.14 3 4 .099 -.041393 .019317 -.09502 5 .0122 3 Equal variances not assumed -2.14 3 2.37 5 .145 -.041393 .019317 -.11310 5 .0303 18 RET6 mg Equal variances assumed .010 .92 6 -2.44 9 4 .071 -.011137 .004547 -.02376 1 .0014 88 Equal variances not assumed -2.44 9 3.87 1 .073 -.011137 .004547 -.02392 9 .0016 55 RET8 mg Equal variances assumed .187 .68 7 -.653 4 .550 -.003850 .005899 -.02022 9 .0125 29 Equal variances not assumed -.653 3.79 6 .551 -.003850 .005899 -.02058 3 .0128 83

(32)

22

RIWAYAT HIDUP

Penulis yang bernama lengkap Ghina Indriani merupakan anak kedua dari dua bersaudara dari pasangan Cecep Suhendar dan Lili Sulaeni. Penulis dilahirkan di Tembilahan, Riau pada tanggal 24 Januari 1993. Pendidikan menengah diselesaikan di SMA Negeri 5 Bogor pada tahun 2010 dan pada tahun yang sama diterima di Institut Pertanian Bogor dengan mayor Fakultas Kedokteran Hewan melalui Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).

Selama menjadi mahasiswa, penulis pernah menjadi anggota Divisi Pendidikan dan Pengembangan Sumber Daya Manusia (PPSDM) BEM Veternity. Selain itu, penulis juga masuk ke dalam divisi hewan kecil Himpunan Minat Profesi Hewan Kesayangan dan Satwa Akuatik (HKSA). Berbagai kegiatan yang pernah diikuti penulis sebagai penunjang kegiatan akademik salah satunya adalah Kegiatan Magang di DNA Animal Clinic Bogor pada tahun 2012 dan Kegiatan Magang di Bali Zoo pada tahun 2013.