1
DETEKSI PROTEIN C-MYC PADA JARINGAN KELENJAR
SUSU MENCIT (Mus musculus L.) DENGAN METODE
IMUNOHISTOKIMIA
SKRIPSI
FEBBY DINA
110805022
DEPARTEMEN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
2
DETEKSI PROTEIN C-MYC PADA JARINGAN KELENJAR
SUSU MENCIT (Mus musculus L.) DENGAN METODE
IMUNOHISTOKIMIA
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains
FEBBY DINA
110805022
DEPARTEMEN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
i
PERSETUJUAN
Judul : Deteksi Protein C-myc Pada Jaringan Kelenjar Susu Mencit (Mus musculus L.) Dengan Metode
Imunohistokimia Kategori : Skripsi
Nama : Febby Dina Nomor Induk Mahasiswa : 110805022
Program Studi : Sarjana (S1) Biologi Departemen : Biologi
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara
Disetujui di Medan, Januari 2016
Komisi Pembimbing:
Pembimbing II Pembimbing I
Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. Biomed Dr. Salomo Hutahaean, M.Si NIP.196602091992031003 NIP. 196510111995011001
Disetujui Oleh
Departemen Biologi FMIPA USU Ketua,
ii
PERNYATAAN
DETEKSI PROTEIN C-MYC PADA JARINGAN KELNJAR
SUSU MENCIT (Mus musculus L.) DENGAN METODE
IMUNOHISTOKIMIA
SKRIPSI
Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil karya sendiri. Kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.
Medan, Januari 2016
iii
PENGHARGAAN
Puji dan syukur penulis ucapkan Kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan kasih-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Deteksi Protein C-Myc Pada Jaringan Kelenjar Susu Mencit (Mus Musculus L.) Dengan Metode Imunohistokimia” dibuat sebagai salah satu syarat untuk meraih gelar sarjana sains pada departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara, Medan.
Penulis mengucapkan terimakasih sebesar-besarnya kepada Bapak Dr. Salomo Hutahaean, M.Si selaku dosen pembimbing 1 dan Bapak Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. Biomed selaku dosen pembimbing 2 atas segala bimbingan, arahan, waktu dan kesabaran yang telah diberikan kepada penulis selama menyelesaikan skripsi ini. Terimakasih juga kepada Ibu Masitta Tanjung, S.Si, M.Si selaku dosen penguji 1 dan Ibu Dr. Saleha Hanum, M.Si selaku dosen penguji 2 atas segala masukan dan arahan yang telah diberikan sehingga penulisan skripsi ini dapat diselesaikan.
Penulis juga mengucapkan banyak terimakasih kepada Ibu Dr.Nursahara Pasaribu M.Sc selaku Ketua Departemen Biologi FMIPA USU. Ibu Dr.Saleha Hannum M.Si selaku selaku sekretaris Departemen Biologi FMIPA USU dan Ibu Dr.Nursahara Pasaribu M.Sc selaku dosen Pembimbing Akademik yang telah banyak memberikan arahan dan motivasi mulai dari awal perkuliahan hingga penulisan skripsi ini. Bang Erwin dan Kak Ros selaku staf pegawai di Departemen Biologi. Kepada Laboratorium Genetika dan Laboratorium Struktur Hewan FMIPA USU yang telah membantu dalam proses penelitian hingga selesai.
Terimakasih juga penulis ucapkan yang sebesar-besarnya kepada keluarga besar khususnya Ayah dan Ibunda tercinta dan tersayang Tonni Lumbantoruan dan Jriesa Aminah Sidabukke serta tulang Monang Sidabukke M.Si. atas segala doa, dukungan, semangat, materi, serta kasih sayang yang selalu ada untuk penulis. Terimakasih kepada kakak dan adik tercinta Fanny O. Sihombing, Frechilia R. Sihombing dan Lazzaro C. Sihombing yang selalu memberikan motivasi, arahan, kasih sayang dan semangat kepada penulis. Terimakasih juga kepada Riski O. Simanjuntak, Titis Sihombing, Romida F. Buaton, Dedeck S. Silalahi, Novi K Lumbangaol dan Rahmad Zais sebagai sahabat yang telah memberikan waktu untuk bertukar pikiran dan berdiskusi selama penelitian berlangsung serta teman seperjuangan stambuk 2011 yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih mempunyai kekurangan disebabkan keterbatasan kemampuan dan pengetahuan yang penulis miliki, walaupun penulis sudah berusaha untuk yang terbaik. Oleh sebab itu dengan kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran yang membangun demi kesempurnaan penulisan ini.
Medan, Januari 2016
iv
DETEKSI PROTEIN C-MYC PADA JARINGAN KELENJAR
SUSU MENCIT (Mus musculus L.) DENGAN METODE
IMUNOHISTOKIMIA
ABSTRAK
Protein c-myc adalah protein yang disandi oleh gen c-myc yang berfungsi sebagai faktir transkripsi dan replikasi sel dalam siklus sel. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat ekspresi protein c-myc pada jaringan kelenjar susu mencit (Mus musculus L.). Empat ekor mencit betina dibedah dan diambil organ kelenjar susu, dibuat irisan preparat jaringan dan diwarnai dengan metode imunohistokimia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada protein c-myc diekspresikan di sel lemak dan tubulus pada jaringan kelenjar susu,sedangkan pada ovarium diekspresikan di sel granulosa, sel teka dan cairan folikular. Tingkat ekspresi protein c-myc dikelenjar susu dibandingkan dengan ekspresinya di jaringan ovarium lebih tinggi dengan skor 2.83 (ekspresi tinggi) sedangkan pada jaringan ovarium dengan skor 2.08 (ekspresi sedang).
v
DETECTION OF C-MYC PROTEIN IN THE MAMMARY
GLAND TISSUE OF MICE (Mus Musculus L.) WITH
IMMUNOHISTOCHEMISTRY METHODS
ABSTRACT
C-myc protein is a protein that encoded by the c-myc gene that serves as transcription and replication factor of the cells in the cell cycle. This study aims to detect the c-myc protein expression in mammary gland and ovary tissue of mice (Mus musculus L.). Four female mice are dissected and their mammary glands and ovary was taken, they are made as slide preparations and performed immunohistochemistry methods. The results showed that the c-myc protein expressed in adipocyte and tubules cell on mammary gland tissue whereas in the ovary expressed in theca cells, granulose cells and folicular liquid. The level of expression in mammary gland when it compared to c-myc expression in ovarian tissue is higher with a score of 2.83 (high expression), and in the ovary is 2.08 (medium expression).
vi
DAFTAR LAMPIRAN ix
2.5.1. Mekanisme Molekuler Pembentuk Sel Kanker
9 9 2.6. Metode Imunohistokimia 11
BAB 3. METODOLOGI PENELITIAN 12
vii
BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN 16 4.1. Mikroanatomi Kelenjar Susu Mencit (Mus musculus L.) dengan
Pewarnaan Hematoxilin Eosin
4.2. Mikroanatomi Ovarium Mencit (Mus musculus L.) dengan Pewarnaan Hematoxilin Eosin.
4.3. Ekspresi Protein C-myc pada Jaringan Kelenjar Susu Mencit (Mus Musculus L.) Melalui Metode Imunohistokimia
4.4 Ekspresi Protein C-myc pada Jaringan Ovarium Mencit (Mus Musculus L.) Melalui Metode Imunohistokimia
4.5. Hasil Skoring Ekspresi Protein C-myc Pada Jaringan Ovarium dan Kelanjar Susu Mencit (Mus Musculus L.)
BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN 5.1. Kesimpulan
Daftar Pustaka 24
viii
DAFTAR GAMBAR
Nomor Gambar
Judul Halaman
2.1. Gambaran histologi kelenjar mamma dalam keadaan inaktif, perbesaran 90x
7
2.2. Folikulogenesis dan Ovulasi di ovarium 8 2.3. c-myc bekerja sama dengan p53 dalam menghambat
ekspresi dari gen- gen pertumbuhan
10
4.1. Mikroanatomi jaringan kelenjar susu mencit (Mus musculus L). dengan pewarnaan HE, perbesaran 40x.
16
4.2. Mikroanatomi ovarium mencit (Mus musculus L.) dengan pewarnaan HE, perbesaran 40x.
17
4.3. Gambaran dua lapang pandang histologis jaringan kelenjar susu (imunohistokimia, 1000x).
18
4.4. Gambaran dua lapang pandang histologis ovarium mencit (Mus musculus L.) (imunohistokimia, 1000x).
20
4.5. Grafik skoring tingkat ekspresi protein c-myc pada jaringan kelenjar susu dan ovarium mencit (Mus musculus L).
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Lampiran
Judul Halaman
1. Foto Alat dan Kerja 27
2. Lampiran Data dan Hasil Analisis Ekspresi Protein c-myc