Aplikasi metoda loop mediated isothermal amplification(LAMP) terhadap gen MPHB64(Rv3036c) sebagai diagnosis cepat Infeksi M.Tuberculosis.

Aptikasi Metoda Loop Mediated Isothermal

Amptificatio" (LAMP)

Terhadap Gen

"r-

MpB64

Gvro36c)

Sebagai Diagncsis

cep*t Infetai

fu{. tulwrctdosis

Elizabeth Bahar *,Rahmatini **

Baeian M ikrobiologi F akultas K edokteran Unand*

Su;an Farm akol ogi Fakulras Kedokteran LJnand* *

Abetrak

Metoda

Loop-mediated Isothermat Amplificafion .(LAMP) menggunakan fag palymerase'"ng

***prnGi

"r*uit*s

sfrand diiplacemenl, misalnya Bst, Pfu, dan Aac

potymerase. Metoda

ini

mampu mengamplifit<aii

orun dan

RNA secsra sederhana'

cepat,

spesifik

o"n'*uo'nln!"f"i

Oiiatui<an dengan temparatur vans konstan (60 -6S.C) dengan

f"m"

"nllra

iS

-

OO

*"nit.

proOui ampnitif<asi

meniapii

t't-t'to

kali'

Sejumlahpenelitian**mp"*ir'atkanmetodainimempunyaisensitivitasdanspesifisitas yang

tilgjlLtitian

ini

bertujuan untuk mengkaji nirai diagnostik LAMP terfradap ge-n MPB64

M.

tubercufo"'s'-6"n

MPB64

meri'pjfan

g91y-?19

conserved

dan

spesifik untuk

M. tunercutosiJJo'frrut

!9t9^lidiagnostik

LAYP

Y?864

dibandinskan densan metode diagnostik

r"it t"p"tti

PcR

oan piwamaan.Basil tahan Asam

(BTA)'Standar

baku emas cig

unarJ' kun,lip"o"

medjg.Lbwenstein Jensen {LJ )'

penelitian dipkukan terhadap

lf

isampel

sputum' Preparasi sputum dilakukan dengan N-Asetit

si"Gin'l

rtinOrf

*

sitrat'

Sitan;utnya sputum dikultur pada media LowensteinJensen

,*i"*"

4

-

g minggu. iiotasi otrtR eiinrukan 2 kari,

yaitu dari sputum

{menggunafan OrnJrn'p'bf.fn

Loi"ti*

fii,

Qiagen) dan

dari

kuttur {metoda Boiling}' Desain primer

tAMitefid;ap

gen MPB 64 dilakukan dengan Primer explorer '

Hasil LAMP yang

di

dapatkan analisis kesesuaian antara PCR dengan LAMP memperlihatkan tiriJra:t yang'

erat

tp =

o'ooo

dan

r

=

Q'747\' tebaliknya

tingkat

kesesuaian antara

'fiilit'J"igrn

gin

atau

PCR dengan BTA berada pada

posisi

kurang

erat

(masin#,i'"iri-i";

9!+s

JJn

t

=

0.396)lDari hasil kultur pada LAMP menyebabkar,

*p""ii*lt"t

*-"toO'

ini menjadi rendah' yaitu 60'0%'