• Tidak ada hasil yang ditemukan

Isolasi dan Seleksi Bakteri Nitrifikasi dan Denitrifikasi

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2019

Membagikan "Isolasi dan Seleksi Bakteri Nitrifikasi dan Denitrifikasi"

Copied!
10
0
0

Teks penuh

(1)

# Ko re sp o n d e n si: Balai Rise t Per ikan an Bu d id aya Air Tawar d an Pe n yu lu h an Pe r ikan an . Jl. Se m p u r No . 1 , Bo g o r 1 6 1 5 4 , In d o n e sia. Te l. + 6 2 2 5 1 8 3 1 3 2 0 0

E-m ail: yosmani ar@ yahoo.com

Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra

ISOLASI DAN KARAKTERISASI BAKTERI NITRIFIKASI DAN DENITRIFIKASI SEBAGAI KANDIDAT PROBIOTIK

Yosmaniar#, Hessy Novita, dan Eri Setiadi

Balai Riset Perikanan Bu didaya Air Tawar dan Penyu luhan Pe rikanan

(Naskah dit erima: 5 Desember 2017; Revisi final: 10 Januar i 2018; Diset ujui publikasi: 10 Januar i 2018)

ABSTRAK

Senyawa nitrogen yang tinggi pada limbah budidaya perikanan intensif dapat memperburuk kualitas air, sehin gga perlu diatasi dengan penambahan prob iotik unt uk prose s biorem ediasi. Tujuan p enelitian ini adalah untuk mendapatkan bakteri nitrifikasi dan denitrifikasi yang berpotensi sebagai kandidat probiotik pengendali senyawa nitrogen pada budidaya ikan air tawar. Tahap penelitian terdiri atas: 1) koleksi sampel air dan sedimen dari kolam budidaya ikan patin di kawasan minapolitan Desa Pudak Kecamatan Kumpeh Kabupat en Muaro Jamb i Provinsi Jam bi dan Desa Koto Mesjid Ke camatan XIII Koto Kampar Kabupaten Kam par Provinsi Riau; 2) pengujian sam pel secara in vit r o yan g me liput i: a) Isolasi dan sele ksi bakt eri nitrifikasi dan denitrifikasi; b) Karakterisasi morfologis bakteri terpilih; c) Karakterisasi fisiologi/biokimia isolat bakteri terpilih; d) Karakterisasi genetika isolat bakteri terpilih dengan sekuensing 16S-rRNA. Analisis data dilakukan secara deskriptif. Berdasarkan hasil penelitian diperoleh empat isolat bakteri nitrifikasi dan empat isolate bakteri denitrifikasi. Isolat bakteri nitrifikasi Pandoraea pnomenusa strain 1318 (NP1); Pseudomonas aeruginosa strain PSE12 (NP2); Pseudomonas aeruginosa strain PSE12 (NP3); Burkholderia viet namiensis strain NE 7 (NP4); dan denitrifikasi Achromobact er xylosoxidans strain TPL14 (DP1); St enot rophomonas acidaminiphila strain BTY (DP2); St enot rophomonas malt ophilia strain BHWSL2 (DP3); Ochrobact rum int ermedium strain: SQ 20 (DP4) Achromobact er xylosoxidans st rain TPL14 (DP1); St enot rophomonas acidaminiphila strain BTY (DP2); St enot rophomonas malt ophilia strain BHWSL2 (DP3); Ochrobact rum int ermedium strain : SQ 20 (DP4); yang berpotensi digunakan sebagai kandidat probiotik p engendali senyawa n itrogen pada budidaya ikan air t awar.

KATA KUNCI: bakteri nitrifikasi; bakteri denit rifikasi; karakt erisasi; probiot ik

ABSTRACT: Isolation and characterization of nitrifying and denitrifying bacteria as probiotic candidates. By: Yosmaniar, Hessy Novita, and Eri Setiadi

Wast es from an int ensive aquacult ure cont ain nit rogen compounds which, if unt reat ed, could rapidly reduce wat er qualit y condit ion wit hin t he syst em. The addit ion of probiot ics as bioremediat ion t o aquacult ure syst em has been used t o improve water quality with promising result s. The aim of this st udy was t o obt ain pot ent ial nit rifying and denit rifying bact eria that could be used as probiot ic candidat es t o cont rol excessive nitrogen compounds in freshwat er cult ure. This study consist ed of t wo st eps, 1) t he collect ion of wat er samples and sediment s from cat fish ponds at ‘Minapolit an Area” in Pudak Village, Jambi Province and Kot o M esjid Village, Riau Province; 2) in vit ro t est s consist ing of isolat ion and select ion of nit rifying and denit rifying bacteria; morphological characterization of t he selected nitrifying and denitrifying bact er ia; char act er izat ion of physiological/biochemical select ed nit rifying and denit r ifying bact er ia; genet ic charact erizat ion of t he select ed nit rifying and denit rifying bact eria wit h 16SrRNA sequencing. All dat a were analyzed descript ively. The st udy had found four nit rifying bact eria isolat es: Pandoraea pnomenusa st rain 1318 (NP1); Pseudomonas aeruginosa strain PSE 12 (NP2); Pseudomonas aeruginosa strain PSE12 (NP3); Burkholderia vietnamiensis st rain NE 7 (NP4). The st udy also found four isolat es of denit rifying bact eria isolat es: Achromobact er xylosoxidans st rain TPL14 (DP1); St enot rophomonas acidaminiphila st rain BTY (DP2); St enot rophomonas malt ophilia st rain BHWSL2 (DP3); Ochrobact rum int ermedium st rain: SQ 20 (DP4). All the identified nit rifying and denit rifying bacteria isolat es have t he potent ial t o be used as probiot ic candidat es t o control nit rogen compound in freshwat er aquacult ure.

(2)

PENDAHULUAN ko lam. Hal ini berdampak pada penurunan kualit as air b u d id aya kare n a m e n in gkat n ya se n yawa n it ro ge n (amo n ia, n it rit , d an nit rat ) seh in gga m en gganggu keseimbangan siklus nit ro gen sepert i nit rifikasi dan denit rifikasi yang dapat menyebabkan keracunan dan mo rt alit as ikan.

Unt uk memperbaiki kualit as air dapat dilakukan d e n g a n m e m a n fa a t k a n m ik r o o r g a n is m e (bio remediasi). Bio remediasi merupakan upaya unt uk memperbaiki kualit as air melalui aktivitas bio logi oleh m ik r o o r g a n is m e (Ru s m a n a , 2 0 0 3 ). Be b e r a p a p e r s ya r a t a n b io r e m e d ia s i, a n t a r a n la in m a m p u mengo pt imalkan laju nit rifikasi untuk menjaga amo nia aga r t e t ap re n d a h , m am p u m e n go p t im alk an laju denit rifikasi unt uk mengeliminir kelebihan nit ro gen s e b a g a i g a s n it r o g e n d a r i k o la m (Ba d jo e r i & Widiyant o , 2008; Khasani, 2008).

Ag e n b io r e m e d ia si yan g d ig u n ak a n m e m ilik i kemampuan met abo lisme nit rifikasi dan denit rifikasi, seh in gga se cara langsu n g dapat me ro m bak bahan o rganik di dalam air media (Yuhana, 2010). Nit rifikasi merupakan reaksi pent ing dalam siklus nit ro gen yang membu t uhkan o ksigen dalam pro se s o ksidasi NH3, menjadi NO2 dan oksidasi NO2 menjadi NO3 (Agustiyani et al., 2010). Denit rifikasi merupakan pro ses mikro bial di mana NO3 dan NO2, diubah menjadi NO2 dan N2 di sedimen aero bik maupun anero bik (Lo ng et al., 2013).

Iso la si, se le ks i, d an k a ra kt e r is as i m e ru p a ka n t ahapan p en t in g un t uk m en dap at kan b akt eri yang diharapkan sebagai kandidat unt uk pro bio t ik. Tahapan pro ses t ersebut dip erlu kan agar jen is b akt e ri yang dipero leh memiliki kemam puan sesuai t arget . Pada t ahap seleksi dibut uhkan medium bakt eri yang t epat dan pengujian secara bio kimia at au fisio lo gis. Tahap kar akt e risas i d ilaku k an u n t u k m e n g e t ah u i je n is bakt eri dan hubungan kekerabat annya menggunakan 1 6 S r RNA s e k u e n s in g . An a lis is Ta k s o n o m i m e n g g u n a k a n g e n 1 6 S d a n 1 8 S r RNA u n t u k mensekuensing dat a t elah menunjukkan pendekat an yang valid dalam mengkarakt erisasi ko munit as bakt eri (So gin et al., 2006).

Penelitian ini bertujuan untuk mendapat kan bakteri nit rifikasi d an de nit rifiksi yang berpo t en si se bagai kandidat probio tik pengendali senyawa nit ro gen pada budidaya ikanair t awar. Kabupaten Muaro Jambi Pro vinsi Jambi dan Desa Ko t o Mesjid Kecamat an XIII Koto Kampar Kabupaten Kampar Pr o vin s i Ria u (Ga m b ar 2 ). Ke d u a De s a t e r s e b u t merupakan sen t ra budidaya ikan pat in int ensif dan dijadikan sebagai kawasan minapo lit an (Yant o s, 2016). Pengambilan sampel air permukaan pada ko lam ikan pat in dilakukan di ke dua de sa den gan set iap de sa sebanyak empat ko lam. Krit eria ko lam yang diambil sampel air dan sedimen merupakan ko lam budidaya pat in intensif. Unt uk sampel air permukaan ko lam ikan dilakukan lima t it ik per ko lam, yait u di set iap sudut ko lam (e mp at sam p el) d an d i t e ngah ko lam (sat u sampel) menggunakan bo bo t sampel dengan vo lume 600 m L yang st e ril. Unt uk sedimen, dilakukan t iga t it ik set iap ko lam yait u dua t it ik di dua sudut ko lam dan sat u t it ik di t engah ko lam menggunakan eigment grab, kemudian sampel sedimen diambil sebanyak 300 g pada set iap t it ik. Selanjut nya sedimen dipindah ke dalam bo t o l sampel st eril. Bo t o l sampel yang t elah t erisi air maupun sedimen dimasukkan ke dalam cool box.

Isolasi dan Seleksi Bakteri Nit rifikasi dan Denit rifikasi

Media spesifik unt uk iso lasi bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi berdasarkan (Ro dina, 1972), unt uk 1000 m L, ya it u : 1 3 ,5 g KH2PO4; 0 ,7 g K2HPO4; 0 ,1 g Sedangkan unt uk bakt eri denit rifikasi: 10 g Na-aset at , 5 g KNO3; 0,2 g KH2PO4; 0,9 g K2HPO4; 0,1 g CaCl2.2H kecepat an 130 rpm, selanjut nya senyawa nit rat yang d ih asilkan d iu ku r m e n g gu n a kan m e t o d e Bru cin e menggunakan Spectrofo to met er (Clesceri et al., 1998).

(3)

selama 5-7 h ari. Ko lo n i yang t e rpisah d im u rn ikan kembali dengan cara menggores ulang pada media agar n it rifikasi. Iso lat m urn i yan g d ipe ro leh digun akan unt uk uji selanjut nya.

Se b an ya k 1 m L s a m p e l a ir d a n 1 g s e d im e n dimasukkan ke dalam t abung ulir yang berisi 20 mL me dia de nit rifikasi cair, ke mud ian diin kub asi pada suhu 28°C selama 7 hari. Perubahan t ingkat kekeruhan d a n g a s ya n g d ih a s ilk a n p a d a t a b u n g d u r h a m menunjukkan adanya bakt eri denit rifikasi. Sebanyak 2 mLsuspensi kultur bakt eri yang po sitif menghasilkan gas diino kulasi ulang dalam media denit rifikasi cair pada t abung reaksi vo lume 22 mL yangmengandung bakt eri denit rifikasi, kemudian diinkubasi pada suhu 28°C selama 7 hari. Sat u o se dari kult ur bakt eri digo res pada media agar denit rifikasi dengan menggunakan met o de kuadran dan diinkubasi pada ko ndisi anaero b dalam Anaerobik j ar selama 7–10 hari. Ko lo ni sel yang t erpisah dimurnikan kembali dengan digo res kuadran p ad a m e d ia ca wa n d an d iin k u b a si p a d a k o n d is i anaero bik. Iso lat murni yang dipero le h selanjut nya dilakukan uji o ksidat if/ferment at if.

Karakterisasi, M or fologis, Biokim ia Bakteri Nitrifikasi, dan Denit rifikasi

Karakt erisasi bakt eri nit rifikasi dan den it rifikasi d ilaku kan d e n gan m e laku kan p e n gam at an se cara mo rfo lo gis pada be nt uk dan warna ko lo n i b akt e ri sert a melalui pewarnaan gram. Set elah itu, iso lat yang t erseleksi kemudian diuji secara bio kimia (No vit a et al., 2014). Iso lat yang t erseleksi kemudian diuji secara bio kimia dengan menggunakan kit API unt uk melihat kemampuan bakt eri dalam menggunakan gula-gula yang ada pada med ia sebagai su mer C dan N. Ciri bio kim ia merupakan krit eria yang amat p ent ing di dalam ident ifikasi spesimen bakt eri yang t ak dikenal

karena secara mo rfo lo gis biakan at aupun sel bakt eri ya n g b e r b e d a d ap at t am p a k se ru p a , t a n p a h a sil p e n g a m a t a n fisio lo g is ya n g m e m a d ai m e n g e n a i o rganik yang diperiksa maka penent uan spesiesnya t idak mungkin dilakukan. Karakt erist ik dan klasifikasi se bagai mikro ba sepe rt i bakt eri b erdasarkan pada re aksi enzimat ik at aupun bio kim ia. Mikro ba dap at t u m b u h p ad a b e b e rap a t ip e m e d ia m e m p ro d u ksi met abo lit t ent unya yang didet eksi dengan int eraksi mikro ba dengan reagen t est yang mana menghasilkan perubahan warna reagen (Murray et al., 2005).

Karakterisasi Isolat Bakteri Nitrifikasi dan Denitrifikasi Terpilih dengan Sekuensing 16S-rRNA

Karakt e risasi b akt eri nit rifikasi dan de nit rifikasi yan g t e rp ilih se cara m o le ku le r d e n gan 1 6 S rRNA se kue nsing dilakukan u nt u k m enget ahu i jenis d an k e k e r a b a t a n is o la t b a k t e r i. DNA is o la t t e r p ilih d ie kst raksi de n gan me t o d e ge n e aid kit (p ro se du r sesuai dengan inst ruksi m anual dalam kit ). Se t elah it u dilakukan uji PCR menggunakan primer 16SrRNA (Marchesi et al., 1998) dengan susunan primer forward 63f (52 -CAG GCC TAA CAC ATG CAA GTC-32 ), dan primer Reverese, 1387r (52 -GGG CGG WGT GTA CAA GGC-3 2 ). Amp lifikasi PCR dilaku kan se ban yak 3 0 siklus menggunakan suhu predenat urasi 95°C selama 5 menit , denat urasi pada suhu 92°C selama 30 det ik, annealing pada suhu 55°C selama 30 det ik, elongat ion 72°C selama 1 menit , dan final ext ent ion dengan suhu 72°C selama 5 menit .

Sekuensing dan Dendogram

Hasil PCR 16S rRNA menunjukkan t arget pit a DNA b e ra d a p a d a 1 3 0 0 b p . Is o la t ya n g t e la h d i PCR kemudian di sekuensing. Hasil sekuensing dari masing-Gambar 1. Lokasi pengambilan sampel air dan sedimen di kawasan minapo lit an Desa Pudak

Kecamat an Kumpeh Kabupat en Muaro Jambi (A), Desa Ko t o Mesjid Kecamat an XIII Ko t o Kampar Kabupat en Kampar Pro vinsi Riau (B).

Figure 1. Locat ions of wat er and sediment sampling in t he st udy sit es: (A) Pudak Village, (B) Kot o M esj id Village.

(4)

m a s in g is o la t d is e ja ja r k a n d e n g a n s e k u e n d a r i Genebank selanjut nya dilakukan BLAST di NCBI unt uk m e lih a t t in gk at ke m irip an n ya d e n ga n se k u e n d i Genebank.

Kemudian hasil sekuensing disejajarkan lagi dengan pro gram MEGA 5 unt uk mendapat kan dendo gram

Analisis Dat a

Se m u a d at a yan g d ip e ro le h d it ab u lasi d e n gan bant uan Micro so ft Excel 2010. Dat a yang dipero leh dari iso lasi, seleksi, dan ident ifikasi bakt eri kandidat pro bio t ik dianalisis secara deskript if dan dit ampilkan dalam t abel.

HASIL DAN BAHASAN

Isolasi Bakt eri Nitrifikasi dan Denitrifikasi

Ha sil is o las i b a kt e r i ka n d id at p ro b io t ik yan g t erident ifikasi. Kelo mpo k denit rifikasi di Desa Pudak, Jambi lebih banyak dibandingkan nit rifikasi, sedangkan d i Ria u n it r ifik a s i le b ih d o m in a n d ib a n d in g k a n d e n it r ifik a s i. Ko n d is i p e r b e d a a n t e r s e b u t mengindikasikan bahwa kedalaman ko lam (ko lo m air) dan kandungan bahan o rganik baik di air maupun di sed ime n d id u ga be rp e ngaru h t erh ad ap p erbe d aan ju mlah b akt e ri n it rifikasi dan bakt eri de nit rifikasi. Azhar et al. (2017) melapo rkan bahwa kelimpahan dan keanekaragaman bakt eri dipengaruhi oleh kedalaman air, ket ebalan sedimen, dan kandungan bahan o rganik baik di air maupun di sedimen.

Jumlah isolat yang berhasil diiso lasi dari dua lokasi pengambilan co nt o h disajikan pada Tabel 1.

Karakterisasi Isolat Bakteri Nitrifikasi dan Denit rifikasi

Dipero leh 4 iso lat bakt eri nit rifikasi dan 4 iso lat b akt e ri de n it rifikasi d e ngan ciri m o rfo lo gi ko lo n i is o lat t e p ian sa m a yait u licin s e d an gk an wa rn a, permukaan, dan bentuk umumnya hampir sama (Tabel 2). Bakt eri nit rifikasi t erpilih NP1 dan NP4 bersifat

gram po sitif sedangkan NP2 dan NP3 merupakan gram negat if. Pada iso lat e bakt eri nit rifikasi dit emukan ada yang gram negat if. Hal ini menunjukkan bahwa iso -lat e NP2 dan NP3 dapat berperan ganda (nit rifikasi d a n d e n it r ifik a s i). Se m u a b a k t e r i d e n it r ifik a s i m e r u p a k a n g r a m n e g a t if. Em p a t is o la t b a k t e r i n it rifikasi yait u NP1, NP2 , NP3 , NP4 t erm asu k ke dalam kelo mpo k bakt eri het ero t ro f.

Pe r t u m b u h a n b a k t e r i h e t e r o t r o f le b ih b a ik d ib an d in g ka n d e n g a n b ak t e r i a u t r o t o f. De n g a n d e m ikian d ap at d ikat akan b ah wa ke e m p at iso lat b a kt e r i n it rifika si t e rm as u k ke d alam ke lo m p o k bakt eri hetero tro f. Bakt eri ini merupakan bakt eri yang t idak dapat me mfiksasi karbo n dan me nggu nakan karb o n o rgan ik u n t u k p e rt um b u h an n ya (Tab e l 3 ). Bakt eri he t ero t ro f t e rb agi me n jad i d u a ke lo m po k b e r d a s a r k an p a d a p e n g gu n a a n e n e r g i, ya it u : a ) fo t o he t ero t ro f, yang men ggu nakan cahaya sebagai s u m b e r e n e r g i, d a n b ) k e m o h e t e r o t r o f, ya n g me nggu nakan se nyawa o rganik maupun ano rgan ik s e b a g a i s u m b e r e n e r g i (Ho g g & St u a r t , 2 0 1 3 ). Pe r t u m b u h a n b a k t e r i h e t e r o t r o f le b ih b a ik dibandingkan dengan bakt eri aut ro t o f. Hal ini sesuai dengan penelit ian yang dilakukan o leh Michauda et al. (2006) yang melapo rkan bahwa pert umbuhan bakt eri het ero t ro f lebih cepat dibandingkan dengan bakt eri au t ro t o f.

Uji o ksidat if-fermen t at if dilakukan pada b akt e ri d e n it r ifika s i d e n ga n t u ju an m e n ca ri is o la t yan g bersifat o ksidat if dan ferment at if. Jika bakt eri bersifat ferment at if akan t erjadi perubahan warna dari yang hijau menjadi kuning, sedangkan bakt eri yang bersifat o ksidat if akan t et ap bewarna hijau (Novit a et al., 2014).

Iso lat bakt eri DP1 dan DP4 sert a bakt eri NP2 dan NP3 merupakan gram negat if. Bent uk sel semua iso lat adalah basil. Keempat iso lat bakteri nit rifikasi bersifat o ksid at if. Um u m n ya b a kt e ri d e n it rifik asi b e rs ifat o ksidat if, kare na dalam pro ses me t abo lisme un t uk t umbuh dan berkembang membut uhkan o ksigen.

Tabel 1. Jumlah iso lat bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi yang diiso lasi dari budidaya ikan pat in di Jambi dan Riau

Table 1. Number of nit rif ying and denit rif ying isolat es from cat fish cult ure in Jambi and Riau

Bakteri nitrifikasi

Nit rificat ion bacteria

Bakteri denitrifikasi

Denitrification bact eria

Total

Total

7 8 15

7 7 14

9 9 18

10 9 19

Total 33 33 66

Jumlah isolat (Number of isolate)

De sa Pudak Ke camatan Kumpe h Kabupate n Muaro Jambi Provinsi Jambi

De sa Kot o Me sjid Ke camatan XIII Koto Kampar Kabupate n Kampar Provinsi Riau

Asal sampel

Origin of sample

Jenis sampel Kind of sample

Air (Wat er) Se dime n (Sediment)

(5)

Karakterisasi Biokimia Isolat Bakteri Nitrifikasi dan Denit rifikasi

Dari h asil Tab le 4 d i at as me n un ju kkan b ahwa bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi t erpilih (NP2 dan NP4) dan (DP1 dan DP3) dapat memanfaat kan bahan u ji b io kim ia d e n gan b aik se b aga i m e d ia t u m b u h sehingga bero t ensi sebagai kandidat .

Karakterisasi Isolat Bakteri Nitrifikasi dan Denitrifikasi Terpilih dengan Sekuensing 16S-rRNA

Hasil karakt erisasi be rdasarkan 1 6 SrRNA dapat dilihat pada Gambar 3. Hasil PCR dengan 16S rRNA menunjukkan bahwa iso lat t erpilih menghasilkan pit a PCR p ad a t arge t 1 3 0 0 b p. Hasil se ku e n sin g yan g dilakukan dengan membandingkan sekuen yang ada di Genebank dipero leh hasil BLAST N sepert i disajikan pada Tabel 5.

Dendo gram filo geni dari iso lat bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi, disajikan pada Gambar 3 dan 4. Iso lat

DP1 m e n u n ju k k a n k e m ir ip a n 1 0 0 % d e n g a n Achromobact er xylosoxidans st rain TPL14 . Iso lat DP2 d a n DP3 h o m o lo g d e n g a n St en ot r op h om on a s aci dam i ni phi l a s t ra in BTY d a n St enot r ophomonas malt ophiliast rain BHWSL2 dengan t ingkat kemiripan 100% dan 99%. Sedangkan unt uk iso lat NP1 ho mo lo g d en gan Pandor aea pnomenusa st rain 13 1 8 d en gan t ingkat kemiripan 99% begit u juga dengan NP2, NP3 ho mo lo g dengan Pseudomonas aeruginosa strain PSE12 dengan kemiripan 99%, sedangkan isolat NP4 ho mo lo g 98% dengan Burkholderia viet namiensis st rain NE 7.

Hasil se ku e n sin g iso lat b akt e ri n it rifikasi NP1 m e n u n ju k kan b ah wa b akt e ri iso lat NP1 m e m iliki kekerabat an t erdekat dengan genus Pandoraea d an Bur khol der i a. Na m u n p a lin g d e k a t d e n g a n je n is Pandoraea pnomenusa st rain 1318 . Jenis bakt eri ge-nus Pandoraea yang pert am a kali t erbukt i memiliki ke m am p u an d a lam m e n d e gr ad a si d ich lo r o m e t an adalah Pandoraea pnomenusa LX-1 (Fu et al., 201 2). Bakt e ri Pandoraea pnomenusa mem iliki ke mamp uan dalam memanfaat kan sumber karbo n sebagai energi Tabel 2. Mo rfo lo gi dan karakt erist ikko lo ni iso lat bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi yang t erpilih Table 2. M orphology and charact erist ic of select ed isolat es of nit rif ying and denit rif ying bact eria

Warna Colour

Tepian Edge

Perm ukaan Sur face

Bent uk sel Shape of cell

Reaksi gram Gr am r eaction

NP1 Pu tih (W hite) Licin (Slippery) Datar (Flat) Basil Po sitif (Positive)

NP2 Pu tih (W hite) Licin (Slippery) Cemb u ng (Convex) Basil Neg atif (Negative)

NP3 Keco klatan (Brownish) Licin (Slippery) Cemb u ng (Convex) Basil Neg atif (Negative)

NP4 Keco klatan (Brownish) Licin (Slippery) Basil Po sitif (Positive)

D eni t rifikasi (Denitrification)

DP1 Keco klatan (Brownish) Licin (Slippery) Basil Neg atif (Negative)

DP2 Pu tih p u cat (Pale whit e) Licin (Slippery) Timb u l (Arise) Ko ku s (Coccus) Neg atif (Negative)

DP3 Keku nin g an (Yellowish) Licin (Slippery) Cemb u ng (Convex) Basil Neg atif (Negative)

DP4 Keku nin g an (Yellowish) Licin (Slippery) Datar (Flat) Basil Neg atif (Negative) Ni t ri fi kasi (Nitrification)

Morfologi karakt erist i k koloni isolat (M or phology and char acter istics of colonies) I sol at

Isolate

Tabel 3. Pert umbuhan iso lat bakt eri nit rifikasi yang t erpilih

Table 3. Growt h of select ed nit rif ying bact eria isolat es

Het erot rof Aut ot rof

Heterotr oph Autotr oph

NP1 + + + + +

NP2 + + + + +

NP3 + + + + +

NP4 + + + + +

Ke te rangan (Not e): + + + + = pertumbuhan sangat cepat (very rapi d growt h) + = pe rtumbuhan sangat lambat (very slow growt h)

Pert um buhan i sol at bakt eri ni t rifikasi Gr owth of nitr ifying bacteria isolates Isolat

(6)

d a n k e m a m p u a n d a la m m e r e d u k s i s e n ya w a dichlo ro met an (DMC) sebesar 56-85% (Yu et al., 2013).

Be rd a s a r ka n h as il se k u e n sin g , is o lat b a k t e r i n it r ifik a s i NP2 d a n NP3 m e r u p a k a n k e lo m p o k pro t e o b akt eri yang me miliki ke ke rab at an t erdekat

d e n gan je n is Pseudomonas s p . ya it u Pseudomonas aeruginosa st rain PSE 12 (Gambar 2). Syahput ra et al. (2011) menyebut kan bakt eri Pseudomonas aeruginosa dapat digunakan sebagai agen bio remediasi yang ramah lingkungan unt uk pengendalian pencemaran limbah Tabel 4. Karakt erist ik bio kimia iso lat bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi

Table 4. Biochemist r y charact erist ics of t he nit rif ying and denit rif ying bact eria

NP1 NP2 NP3 NP4

NO3 (Nit rate) + + -

-Glu ko sa (Glucose) - + -

-(Ad h) + + + +

Ur ea (Ur e) + + + +

Gelatin (Gel) - + -

-(Png ) - - + +

(Glu ) - + + +

Ar abin osa (Ar a) - - + +

(Mn e) - - + +

Man o sa (Man ) + + + +

(Nag) + + + +

(Gn t) + + + +

(Cap ) - + + +

(Ad i) + + + +

(Mlt) + + -

-Asam sitrat (Cit) + + -

-(Pac) + + + +

Oxidase (Ox) + + + +

Metabo lisme fer mentatif/o ksid atif Oksid atif Oksid atif Oksidatif Oksid atif

DP1 DP2 DP3 DP4

NO3 (Nit rate) + + + +

Glu ko sa (Glucose) + - -

(Ad h ) + + + +

Ur ea (Ur e) + + + +

(Esc) + - +

-Gelatin (Gel) + - +

-(Png ) - - +

-(Glu ) - + +

-(Mn e) - - +

-(Nag) + - + +

Malto sa (Mal) - - + +

(Mlt) + - - +

Asam sitrat (Cit) + - - +

Oxidase (Ox) + + + +

Metabo lisme fer mentatif/o ksid atif - - -

-Kode isolat bakt eri nit ri fi kasi Code of nitrifying bacter ia isolates

Kode isolat bakt eri denit ri fi kasi Code of denitrifying bacter ia isolates Uj i bi okim i a

Biochemical test Uj i bi okim i a Biochemical test

Ke tern gan (Not e): (+ ) iso lat d ap at me man faat kan mineral d an g ula- g ula seb agai su mbe r C d an C un tuk p e rtum buh ann ya (isolat es abl e t o t o use miner als and sugar s as C and C sources for growt h)

(7)

nit ro gen ano rganik sepert i nit rat dan nit rit . Bakt eri je n is Pseudom onas s p . m e r u p a k a n b a k t e r i ya n g do minan berperan sebagai bakt eri nit rifikasi dan pal-ing banyak digunakan sebagai pro bio t ik pengo lahan air limbah indust ri perikanan, karena kemampuannya dalam mendegradasi senyawa nit ro gen (Kumar et al., 2 0 1 3 ). Pseudom onas sp . d ik e t a h u i cu k u p t o le r an t erhadap lo gam Cd dan resist en t erhadap ant ibio t ik (Pat ra et al., 2010). Bakt eri ini dapat mereduksi nit rat dengan pro duk akhir berupa gas nit ro gen (N) kerena didukung dengan kelengkapan enzim yang dimilikinya (Rusmana, 2006).

Is o la t b a k t e r i n it r ifik a s i NP 4 (Ga m b a r 4 ) m e n u n ju kkan ke ke rab at an t e rd e kat d e n gan je n is Burkholder ia viet namiensis st rain NE 7. Bakt eri jen is

ini berperan penting dalam pro ses nitrifikasi diperairan dan merupakan bakt eri yang predo minan (So mbatjinda et al., 2 0 1 1). Bakt eri n it rifikasi h e t e ro t ro f se p ert i Burkohlderia cepacai NH-17 dapat mengko nversi nit rit (NO2-) menjadi nit rat (NO

3

-) yang selanjutnya mengubah nit rit (NO2-) menjadi NO dengan bant uan enzim nit rit reduktase. NO yangsudah t erbent uk diubah lebih lanjut me njad i nit rat (NO3-) o leh e nzim NO dio ksige nase dalam ko ndisi aero b (Mat suzaka et al., 2003).

Ha s il s e k u e n iso la t bakt er i d e n it r ifik a s i DP3 m e n u n ju k k a n b a h w a b a k t e r i t e r s e b u t m e m ilik i ked ekat an d en gan je nis St enot rhopomonas sp . dan pseudomonas sp. Namun, kerabat yang t erdekat adalah d e n gan je n is St enot r ophom onas malt ophil ia s t ra in BHWSL2 (Gambar 4). Genus St eno tro phomo nas secara Gambar 2. Hasil PCR 16SrRNA bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi. Pada gambar hasil

PCR t erd apat p it a DNA p ada panjang sekit ar 1 .30 0 b p u kuran t erseb ut mengacu pada 1 Kb DNA ladder.

Figure 2. Result s PCR 16SrRNA fro m t he select ed nit rifying and denit rfying bact eria. The PCR result s sho wed t he lenght o f DNA band is ro ughly 1,300 bp t he size refers t o 1 Kb DNA ladder.

1 0 . 0 0 0 8 .0 0 0 6 .0 0 0 5 .0 0 0 4 .0 0 0 3 .0 0 0 2 .5 0 0 2 .0 0 0 1 .5 0 0

1 .0 0 0 7 5 0

5 0 0

2 5 0 2 8

2 8 2 8 2 8 1 8 9 2 3 4 3 4 2 0 9 2 2 3

3 0

4 5

Tabel 5. Hasil BLAST N dari sekuen 16SrRNA Table 5. BLASTN result s from 16S rRNA sequence

Isolat Isolate

Asal isolat Isolates initial

Hom ologi bakt eri (Bl ast N) Bacter ial homology

Kem i ri pan Similarity (%)

Nom or aksesi Accession number

DP1 Jamb i Achromobacter xylosoxidans strain TPL1 4 1 00 EU3 73 3 8 9 .1

DP2 Jamb i St enotrophomonas acidaminiphila str ain BTY 1 00 GU2 65 5 5 7 .1

DP3 Riau St enotrophomonas maltophilia str ain BHWSL2 9 9 KX2 12 2 5 8 .1

DP4 Riau Ochrobact rum int ermedium str ain : SQ 20 9 8 KC19 5 7 8 5 .1

NP1 Jamb i Pandoraea pnomenusa str ain 1 3 1 8 9 9 KT87 3 8 5 2 .1

NP2 Jamb i Pseudomonas aeruginosa strain PSE1 2 9 9 KR81 5 8 4 6 .1

NP3 Jamb i Pseudomonas aeruginosa strain PSE1 2 9 9 KR81 5 8 4 6 .1

(8)

filo geni dit empat kan dalam gama pro t eo bact eri yang aw aln ya d ike n al d e n ga n n a m a St enot r ophom onas m al t oph i l i a d a n m e r u p a k a n Xa n t h o m o n a s ya n g t ermasuk ke dalam sub kelas pro t eo bakt eri (Anzai et al., 2000). Genus St eno t ro pho mo nas merupakan ge-nus yang do minan di alam (air, t anah, dan t umbuhan) d an m e m iliki d ist r ib u si yan g lu as se rt a b e rp e ran pent ing dalam siklus nit ro gen dan sulfur (Ryan et al., 2009). Genus St eno t ro pho mo nas baru diket ahui ada 8 jenis (Yo o n et al., 2006).

Ha s il s e k u e n is o la t b a k t e r i n it r ifik a s i DP4 m e n u n ju k k a n b a h w a b a k t e r i t e r s e b u t m e m ilik i kekerabat an dengan genus Ochro bact rum dan yang t erdekat dengan jenis Ochrobact rum int ermedium strain: SQ 20. Bakt eri jenis Ocrhobact rum antrhopi merupakan bakt eri denit rifikasi di t anah maupun di air (Bo t he et al., 2000). Bakt eri O. ant hropi memiliki bent uk sepert i batang atau basil, gram negatif, dan merupakan bakteri pereduksi NO3 and NO2 (Mahmo o d et al., 2009; Bat he et al., 2 0 0 6 ). Bakt e ri je n is in i d ap at h idu p d alam Gambar 3. Dendo gram filo geni iso lat e bakt eri nit rifikasi berdasarkan sekuen 16S-rRNA. Figure 3. Phylogeny dendogram of nit rif ying bact eria isolat es based on 16S-rRNA sequence.

NP1

KT873852.1 Pandoraea pnomenusa strain I3 18

DQ831002.2 Pandoraea sp. LB-7

NR 028749.1 Pandoraea apista strain LMG 16407

KP100423.1 Burkholderia sp. K5-6-SY

Gambar 4. Dendo gram filo geni iso lat bakt eri denit rifikasi berdasarkan sekuen 16S-rRNA.

Figure 4. Phylogeny dendogram of nit rif ying bact eria isolat es based on 16S-rRNA sequence. NR 117706.1 Achromobacter insuavis strain LMG 26845

DP4

KX611 37 7.1 St enot r ophomonas acidaminiphila st rain ICS-32

(9)

lin gk u n g an e k st r im se p e r t i lu m p u r d a n air ya n g t ercemar (Mahmo o d et al., 2009; Kesseru et al., 2002). Onchrobactrum adalah organisme mesofilik yang dapat t umbuh pada kisaran suhu 4-40º C dan kisaran pH 3-9, t et api o pt imal pad a suhu 30º C dan pH kisaran 6-7 (Lebuhn et al., 2000).

Berdasarkan hasil seleksi dan karakt erisasi bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi, dipero leh masing-masing e m p a t is o la t s e b ag a i k a n d id at p r o b io t ik u n t u k p e n ge n d alian se n yawa n it ro ge n p ad a lin gku n gan budidaya ikan. Hasil yang sama juga t elah dilakukan o leh Saput ra et al. (2011) yang mengiso lasi bakt eri d e n it rifikasi d ari m u ara Su n gai Cisad a n e d e n gan mem pro leh iso lat Pseudomonas aeruginosai di mana dari bakt eri ini dapat berperan nit rifikasi dengan uji couple process.

Berdasarkan hasil seleksi dan karakt erisasi bakt eri nit rifikasi dan denit rifikasi, dipero leh masing-masing e m p a t is o la t s e b ag a i k a n d id at p r o b io t ik u n t u k p e n ge n d alian se n yawa n it ro ge n p ad a lin gku n gan budidaya ikan.

KESIM PULAN

Berdasarkan h asil p en elit ian , d ip e ro leh b akt eri kandidat probio tik pengendali senyawa nit ro gen pada budidaya ikan air tawar dari kelompo k nit rifikasi antara lain: Pandoraea pnomenusa strain 1318 (NP1); Pseudomo-nas aer ug inosa s t r a in PSE1 2 (NP2 ); Pseudom onas a er u g i n osa s t r a in PSE1 2 (NP3 ); Bu r k h ol d er i a vi et na m i en si s s t r a in NE 7 (NP4 ) d a n k e lo m p o k denit rifikasi yait u: Achromobact er xylosoxidans st rain TPL14 (DP1); St enot rophomonas acidaminiphila st rain BTY (DP2); St enotrophomonas maltophilia strain BHWSL2 (DP3); Ochrobact rum int ermedium st rain: SQ 20 (DP4).

UCAPAN TERIM A KASIH

Ucapan t erima kasih kami sampaikan kepada Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar dan Penyuluhan Perikanan, Bo go r yang t elah membiayai penelit ian ini melalui APBN 2013. Ucapan t erima kasih kepada Bapak Herno wo dari Dinas Perikanan dan Kelaut an Pro vinsi Ja m b i d an Ba p a k Ha s ib e n d a r i Din a s Pe r ik a n a n Kabupat en Kampar Pro vinsi Riau.

DAFTAR ACUAN

Ag u s t iyan i, D., Kayad o e , R.M., & Im am u d d in , H. (2010). Oksidasi nit rit o leh bakt eri het ero t ro fik pada ko ndisi aero bik. Jurnal Biologi lndonesia,6(2), 265-275.

An zai, Y., Kim , H., Park, J.Y., Wakvab ayash i, H., & Oyaizu, H. (2000). Phylo genet ic affiliat io n o f t he pseudo mo nads based o n 16S rRNA sequence. Int J Syst Evol M icrobiol, 50, 1563–1589.

Azh ar, H.M., Ulkh aq , M.F., Suciyo no , dan Prayo go . 2017. Kelimpahan dan keanekaragaman b akt eri p ada p em b e n ih an ikan le le (Clar ias gar iepinus) de ngan sist em air t e rt u t up (close wat er syst em). Journal of Aquacult ure Science,2(4), 81-89.

Bad jo e ri, M. & Wid iyan t o , T. (2 0 0 8 ). Pe n ggu n aan b a k t e r i n it r ifik a s i u n t u k b io r e m e d ia s i d a n pe ngaruhn ya t erhad ap ko nsent rasi amo nia d an nit rit di t ambak udang. Oseanologi dan Limnologi di Indonesia, 34(2), 261-278.

Bat h e , S., Ach o u ak, W., Hart m an n , A., He u lin , T., Schlo t er, M., & Lebuhn, M. (2006). Gen et ic and pheno t ypic micro diversit y o f Ochr obact r um sp p. FEM S microbiology ecology, 56(2), 272-280. Bo ck, E., Ko o ps, H.P., & Harms, H. (1989). Nit rifying

bact eria. In H.G. Schlegel and B. Bo wien (Edit o rs), Aut o t ro phic Bact eria. Science Tech Publishers, M adi-son, WI, 81-96.

Bo t he , H., Jo st , G., Sch lo t e r, M., Ward , B., & Karl-Paul, W. (2000). Mo lecu lar analysis o f ammo nia o xidat io n and denit rificat io n in nat ural enviro n-ment s. FEM S M icrobiology Reviews, 24, 673-690. Clesceri, L.S., Greenberg, A.E., & Eat o n, A.D. (1998).

St andard Met ho ds fo r t he Examinat io no f Wat er an d Wast e wa t e r. 2 0 t h Ed it io n .Am e rican Pu b lic Healt h Asso ciat io n, Washingt o n, D.C., 1325 pp.

Djo koset iyanto , D., Sunarma, A., & Widanarni. (2006). Perubahan amo nia (NH-N) nit rit (NO2-N) dan nitrat (NO-N) pada media pemeliharaan ikan nila merah (Oreochromis sp.) di dalam sist em resirkulasi. Jurnal Akuakult ur Indonesi, 5(1), 13-20.

Unit ed Stat es Enviro nment al Pro t ect io n Agency (EPA). (1971). Met ho d 352.1: Nit ro gen, Nit art e (Co lo ri-met ric, Bru cine) Spect ro pho t o me t er.

Fu, L.X., Yu, J.M., Cheng, Z.W., Jiang, Y.F., Chen, J.M., Gu , X.N., & Zhu , R.Y. (2 012 ). Charact erist ics o f d ich lo r o m e t h a n e d e g r a d a t io n b y Pan dor a ea pnomenusa LX-1. Journal Enviromen Science, 32(7), 563-1571.

Ho gg & St uart . (2013). Essent ial M icrobiology (2nd ed.). Wiley-Blackwell. 86 p.

Jun, X., Xiuzheng, X., & To ngbing, Y. (2000). Phyxico – che mical fact o rs & b act e ria in fish po n ds. The ICLARM Quart el, 23(4), 16-20.

(10)

Kum ar, V.J.R., Sukum aran , V., Achu t han , C., Jo sep h, V., Ph ilip , R., & Sin gh , S.B. (2 0 1 3 ). Mo le cu lar charact erizat io n o f t he n it rifyin g bact erial co n-so rt ia emplo yed fo r t he act ivat io n o f bio react o rs used in brackish and marine aquacult ure syst ems. Int ernat ional Biodet eriorat ion & Biodegradat ion, 78, 74-81.

Leb u hn , M., Acho u ak, W., Schlo t e r, M., Be rge, O., Meier, H., Barakat , M., & Heulin, T. (2000). Taxo -no mic charact erizat io n o f Ochrobact rum sp. iso -lat e s fro m so il sam p les an d wh e at ro o t s, an d de script io n o f Ochrobact r um t rit ici sp. n o v. an d Ochrobact rum grignonense sp. Int ernat ional Journal of Syst emat ic and Evolut ionary M icrobiolog, 50(6), 2200-2207.

Lo ng, A., Heit man, J., To bias, C., Philips, R., & So ng, B. (2 0 1 3 ). An a m m o x, d e n it r ifica t io n , a n d codenit riflcatio n in agricult ural so ils. Appl. Environ. M icrobiol, 79(1), 168-176.

Mahm o o d, Q., Hu, B., Cai, J., Zhen g, P., Azim, M., Jila n i, G., & Is la m , E. (2 0 0 9 ). Is o la t io n o f Ochrobact rum sp. QZ2 fro m su lfid e an d n it rit e t r e a t m e n t s ys t e m . Jour nal of H azar dous M a-t erials,165(1), 558-565.

March e s i, J.R., Sa t o , T., An d re w, T., We ig h t m an , Mart in , T.A., Fr y, J.C., Hio m, S.J., & Wade , W.G. (1998). Design and evaluat io n o f useful bacterium-specific PCR p rimers t h at amplify genes co ding fo r bact erial 16S-rRNA. App Env of M icrobi, 64(2), 795-799.

Mat su zaka, E., No mu ra, N., & Mased a, H. (2 0 0 3). Part icipat io n o f nit rit e redu ct ase in co nversio n o f NO2 - t o NO3 - in a h e t e ro t ro p h ic n it rifie r, Burkho lderia cepacia NH-17, wit h denit rificat io n act ivit y. M icrobes Environ, 18, 203–209.

Michaud, L., Blanchet o n, J.P., Bruni, V., & Piedrahit a, R. (2006). Effect o f part iculat e o rganic carbo n o n het ero t ro phic bact erial po pulat io ns and nit rifica-t io n e fficien cy in b io lo gical filrifica-t ers. Aquacult ur al Engineering, 34, 224-233.

No vit a, L., Ru s m an a, I., & W id iya n t o , T. (2 0 1 4 ). St rukt ur pengo ksidasi ammo nia berdasarkan gen amo A di sit u Sawangan Bo jo ngsari, Jawa Barat . Limnot ek, 21(1), 74-86

Pat ra, S., Das, T.K., Gho sh, S.C., Sarkar, D., & Jan a, B.B. (2 01 0). Cad mium t o le rance an d ant ib io t ic resist ance o f Pseudomonas sp. iso lat ed fro m wa-t er, slu dges, and fish raised in waswa-t ewawa-t e r-fe d t r o p ical p o n d s. Indian Jour nal of Exper im ent al Biology, 48, 383-393.

Ro dina, G.A. (1972). M et hode in aquat ic microbiology. Dalam Rit a RC. Machael S. edit o r: Universit y Park Press. Balt imo re USA, 461 pp.

Rusmana, I. (2003). Nit ro us o xida fo rmat io n in bac-t eria. Journal M icrobiology Indonesia, 8, 63-66. Rusmana, I. (2006). Gaseo us and pro duct s o f nit rat

and nit rit reductio n by denitrifying pseudo mo nads is o la t e d fr o m e s t u a r in e s e d im e n t . Ju r n a l M ikrobiologi Indonesia, 11(2), 63-66.

Ryan , R.P., Mo n ch y, S., Card inale , M., Tagh avi, S., Cro ssman, L., Aviso n, M.B., Berg, G., Van der Lelie, D., & Do w, J.M. (2009). The versat ilit y and adap-t a adap-t io n o f b a c t e r ia fr o m t h e g e n u s St e n o t r o p h o m o n a s . Na t u r e Re vie w s Mo cro bio lo gy. Macmillan Publishers Limit ed , 7, 514-525.

Sanders, E.R. (2012). Asept ic labo rat o r y t echniques: Plat ing met ho ds. Journal of Visualized Experiment s, (63), 3064.

So gin, M.L., Mo rriso n, H.G., Huber, J.A., Welch, D.M., Huse, S.M., Neal, P.R., Arriet a, J.M., & Herndl, G.J. (20 06). Micro bial diversit y in t he deep sea and t he underexplo red”rare bio sphere”. Pro ceedings o f t he Nat ional Academy o f Sciences o f t he Unit ed St at es o f America, 103, 12115–12120.

So m b a t jin d a , S., Bo o n a p a t h ch a r e o n , N. , Ru e n g jit c h a t c h a w a lya , M., Wa n t a w in , C. , Wit h yach u mn arn ku l, B., & Te chkarn jan aruk, S. (2011). Dynamics o f micro bial co mmunit ies in an eart hen shrimp po nd during t he shrimp gro wing perio d. Environment and Nat ural Resources Research, 1(1), 171-180.

Syahput ra, K., Rusmana, I., & Widyast ut i, U. (2011). Is o lasi d an kar ak t e r is asi b akt e r i d e n it r ifika si se bagai age n b io reme diasi nit ro gen an o rganik. Jurnal Riset Akuakult ur, 6(2), 197-209.

Wid iyan t o , T. (2 00 6 ). Seleksi bakt er i nit r ifikasi dan denit rifikasi unt uk bioremediasi di t ambak udang. Disert asi. Seko lah Pasca Sarjana Inst it ut Pert anian Bo go r, 121 hlm.

Yan t o s. (2 0 1 6 ). Ke b ijakan p e m e rin t ah Kab u p at e n Kampar t erh adap peningkat an daya sain UMKM Desa Ko t o Mesjid dalam menghadapi masyarakat e k o n o m i ASEAN (MEA). Jur nal Risal ah, 2 7 (1 ), 32-45.

Yo o n , J.H., Kan g, S.J., Oh, H.W., & Oh, T.K. (20 06 ). Stenotrophomonas dokdonensissp. iso lated fro m so il. Int . J. Syst . Evol. M icrobiol, 56, 1363–1367. Yu, J., Cai, W., Cheng, Z., & Chen, J. (2013).

Degrada-t io n o f d ich lo ro m eDegrada-t h ane b y an iso laDegrada-t e d sDegrada-t rain Pandor aea pnomenusa and it s p erfo rm an ce in a bio t ricklin g filt er. Journal Enviroment Science, 1 3, 1-23.

Gambar

Gambar 1.Lokasi pengambilan sampel air dan sedimen di kawasan minapolitan Desa PudakKecamatan Kumpeh Kabupaten Muaro Jambi (A), Desa Koto Mesjid KecamatanXIII Koto Kampar Kabupaten Kampar Provinsi Riau (B).Figure 1.Locations of water and sediment sampling in the study sites: (A) Pudak Village, (B)Koto Mesjid Village.
Table 1.Number of nitrifying and denitrifying isolates from catfish culture in Jambi and Riau
Tabel 2.Morfologi dan karakteristikkoloni isolat bakteri nitrifikasi dan denitrifikasi yang terpilihTable 2.Morphology and characteristic  of selected isolates of nitrifying  and denitrifying bacteria
Tabel 4.Karakteristik biokimia isolat bakteri nitrifikasi dan denitrifikasiTable 4.Biochemistry characteristics of the nitrifying and denitrifying bacteria
+3

Referensi

Dokumen terkait

Dari jumlah penyedia barang/ jasa yang memasukkan (uplo ad) Do kumen Penawaran dan Tabel Kualifikasi melalui Aplikasi SPSE di atas, Panitia Pemilihan Langsung

1.2 RUMUSAN MASALAH 1.3 DASAR HUKUM.. BAB III PENUTUP

Para Bapa Konsili dengan sangat merasakan, sebagai sebuah nafas sejati dari Roh Kudus, sebuah kebutuhan untuk berbicara tentang Allah kepada pria dan wanita dari waktu mereka

Senyawa diazonium kemudian bereaksi dengan N-(1-naphthyl)-ethylenediamine dihydrochloride (NED) yang berwarna merah muda. Senyawa azo ini ekivalen dengan senyawa diazonium

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui tingkat kepuasan konsumen terhadap pelayanan jasa yang diberikan travel Mawar Biru dan untuk mengetahui perbedaan tingkat

[r]

1) Hampir setengah dari responden memiliki pengetahuan cukup tentang penyakit tuberkulosis. 2) Sebagian besar responden memiliki kepatuhan berobat pada kategori

BRGM is also involved in international projects, such as the European Geological Data Infrastructure (EGDI) and the European Plate Observing System (EPOS) to organize geoscience