46
DAFTAR PUSTAKA
Ade Chandra Iwansyah, Mashitah M. Yusoff., Identifikasi Dan Kuantifikasi Asam Galat Sebagai Sumber Antioksidan Pada Ekstrak Daun Kacip Fatimah (Labisia Pumila Var. Alata) Larut Air . Vol. 2 No. 3, Th. 2013 – Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan.
Ade rachma islami.Uji toksiistas akut gelatin babi pada tikus betina galur Sprague dawley. 2016.
Adumanya Ocu , A.A.Uwakwe And E.B. Essien., Acute Toxicity (Ld50) Study Of Methanol Extract Of Salacia Senegalensis Lam (Dc) Leaf On Albino Mice. International Journal of Current Research in Chemistry and Pharmaceutical Sciences www.ijcrcps.com Volume 1 Issue: 4 2014 Pages: 20-23.
Ahmad Nazrun Shuid.,etal., The effects of Labisia pumila var. alata on bone markers and bone calcium in a rat model of post-menopausal osteoporosis . Journal of Ethnopharmacology 133 (2011) 538–542. see front matter © 2010 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.
doi:10.1016/j.jep.2010.10.033.
Ahmad, Shihab Uddin; Shuid, Ahmad Nazrun; Mohamed, Isa Naina (2018). Labisia pumila improves wound healing process in ovariectomized rat model. Bangladesh Journal of Pharmacology, 13(1), 106–. doi:10.3329/bjp.v13i1.34473.
Alif Aiman Zakaria., et al., A Review on Therapeutic Effects of Labisia pumila on Female Reproductive Diseases. BioMed Research International Volume 2021, Article ID 9928199, 9 pages https://doi.org/10.1155/2021/9928199.
Amalina Qurratu Ayun.,et al. Pengujian Toksisitas Akut LD50 Infusa Benalu Teh (Scurrula sp.) dengan Menggunakan Mencit (Mus musculus). P-ISSN 2337-3202, E-ISSN 2337-4373. Vol. 9, No. 1: 53-63, Maret 2021.
Astutik H., et al. The Effect of Anastatica hierochuntica L . Extract on the Histology of Myometrial Cells and Prostaglandin L evels ( PGE2 , PGF2α ) in Pregnant Mice. 2020;22(Ishr 2019):81–6.
Diantika L.,et al. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Benalu Mangga (Dendrophthoe petandra) Terhadap Mencit Swiss Webster. Volume 3, Nomor 2, Juni 2016.
Dietrich Lorke (1983). A new approach to practical acute toxicity testing. , 54(4), 275–287. doi:10.1007/bf01234480.
Dinda Elisa Putri., Uji Toksisitas Akut Yang Diukur Dengan Penentuan Ld50ekstrak Daun Sirih (Piper Betle L.) Pada Mencit Jantan. 2018.
Dwi putri.,2017. Pengaruh waktu dan suhu penyimpanan terhadap aktivitas antioksidan ekstrak daun sembung.
Ehsan Karimi.,et al., Phenolics and flavonoids profiling and antioxidant activity of three varieties of Malaysian indigenous medicinal herb Labisia pumila Benth. journal of Medicinal Plants Research Vol. 5(7), pp. 1200-1206, 4 April, 2011 Available online at http://www.academicjournals.org/JMPR ISSN 1996-0875 ©2011.
Endarini Lh. Farmakognisi Dan Fitokimia. N.D.
Erma Yunita.,et al. Effect of the Different Ethanol Concentration during Maceration on Quercetin Level of Tamarind (Tamarindus indica L.) Leaves Extract by Spectrophotometry UV – Vis. p-ISSN 1693-3591 e- ISSN 2579-910XVol.17 No. 02 Desember 2020: 273-280.
Fakultas Kedokteran Universitas Udayana., 2020. Modul Praktikum Ekstrak Etanol daun magenta.
Fazliana Mansor ., Studies on Labisia pumila var. alata extract with phytoestrogenic effects: impact on biological activities and gene expression. the Department of Molecular Medicine and Surgery, Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden 2010.
Johnson, Pamela Jo; Kozhimannil, Katy B.; Jou, Judy; Ghildayal, Neha;
Rockwood, Todd H. (2016). Complementary and Alternative Medicine Use among Women of Reproductive Age in the United States. Women's Health Issues, 26(1), 40–47. doi:10.1016/j.whi.2015.08.009.
Hendra Stevani.,Praktikum Farmakologi. Modul Bahan Ajar Cetak Farmasi.
Cetakan pertama, Desember 2016.
Hodson, Peter V.; Adams, Julie; Brown, R. Stephen (2018). Oil Toxicity Test Methods Must Be Improved. Environmental Toxicology and Chemistry, (), –. doi:10.1002/etc.4303.
https://id.wikipedia.org/wiki/Toksisitas.
https://byherbs.sg/2021/02/16/labisia-pumila-goodness/.
Ika Kurnia,et al., 2017. Aktivitas Antidiare Ekstrak Etanol Daun Suji (Dracaena Angustifolia Roxb) Antidiarrheal Activities Of Etanol Extract Suji Leaf (Dracaena Angustifolia Roxb).
Institut Pertanian Bogor., Mencit. MENCIT.pdf
Jumain., et al. Uji Toksisitas Akut Dan Ld50 Ekstrak Etanol Daun Kirinyuh (Euphatorium Odoratum Linn) Pada Mencit (Mus musculus). Media Farmasi Vol. XIV. No. 1. April 2018.
June K. Dunnick1 And Abraham Nyska. The Toxicity and Pathology of Selected Dietary Herbal Medicines. Toxicologic Pathology, 41: 374-386, 2013 Copyright # 2012 by The Author(s) ISSN: 0192-6233 print / 1533-1601 online DOI: 10.1177/0192623312466451.
Laurence & Bacharach., Tabel Konversi Perhitungan Dosis Antar Jenis Hewan, 1964.
Logarithm Tables.
Lully Hanni Endarini., Farmakognisi dan Fitokimia. Cetakan pertama desember 2016.
Mad Mustapa.,Et Al. Uji Toksisitas Akut Yang Diukur Dengan Penentuan Ld50 Ekstrak Etanol Bunga Cengkeh (Syzygium aromaticum L.) Terhadap Mencit (Mus Musculus) Menggunakan Metode Thompson-Weil.
Maria aloisia uron leba, 2017. Buku Ajar Ekskresi dan real Kromatografi. ISBN 978-602-453-657-2.
Mitayani, Febriyanti. Ekstrak Kacip Fatimah Sebagai Bahan Pemulihan Rahim Pasca Persalinan. Menara Ilmu Vol. XIII No.6 April 2019 ISSN 1693-2617 LPPM UMSB E-ISSN 2528-7613 146.
Moini Jazani, Arezoo; Nasimi Doost Azgomi, Hamidreza; Nasimi Doost Azgomi, Alireza; Nasimi Doost Azgomi, Ramin (2019). A comprehensive review of clinical studies with herbal medicine on polycystic ovary syndrome (PCOS). DARU Journal of Pharmaceutical Sciences, (), –.
doi:10.1007/s40199-019-00312-0.
Mulyanto B. Farmakologi Eksperimental. Univ Indones Jakarta. 2019:11.
Nik Hazlina Nik Hussain.,etal., Potential Role of Labisia pumila in the Prevention and Treatment of Chronic Diseases. Journal of Food Research; Vol. 2, No. 4; 2013 ISSN 1927-0887 E-ISSN 1927-0895.
Norhanisah Abdullah.,et al., Labisia pumila: A Review on its Traditional, Phytochemical and Biological Uses. World Applied Sciences Journal 27 (10): 1297-1306, 2013 ISSN 1818-4952 © IDOSI Publications, 2013 DOI:
10.5829/idosi.wasj.2013.27.10.1391.
Noviyanti.,etal., 2017. Effect Of Giving Water Of Fathimah Grass (Anastatica Hierochuntica)Toward The Level Of Estro Gen Hormone In Pregnant Albino Rats (Rattus Norvegicus).
Nurul Maizan Manshor et al., Vasorelaxant effect of water fraction of Labisia Pumila and its mechanisms in spontaneously hypertensive rats aortic ring preparation. Received 1 August 2019; Received in revised form 16 December 2019; Accepted 25 December 2019 Available online 11 January 2020 2590-0862/© 2020 Published by Elsevier B.V.
https://doi.org/10.1016/j.ijchy.2020.100024.
Nurusyuhadah Idrus , Furzani Pa’ee., Formulation of Capsuled Herbal Mixture Using Zingiber officinale and Labisia pumila For Postnatal Care.
Enhanced Knowledge in Sciences and Technology Vol. 1 No. 1 (2021) 1- 7. DOI: https://doi.org/10.30880/ekst.2021.01.01.001 Received 16 December 2020; Accepted 01 February 2021; Available online 11 February 2021.
OECD. 2018. Guidance Document on aqueous-phase aquatic toxicity testing of difficult test chemicals. Series on Testing and Assessment No 23, 2nd ed.
Organization for Economic Co-Operation and Development, Paris, France.
OECD Guideline For Testing Of Chemicals. Acute Oral Toxicity – Up-And-Down Procedure. 425 Adopted: 17th December 2001.
Parasuraman P. (2011)Toxicological sreening. J. Pharmacol Pharmacother.
Apr-Jun;2(2):74- 79.
Peraturan Badan Pengawas Obat Dan Makanan Tentang Pedoman Uji Toksisitas Praklinik Secara In Vivo. Rancangan 20 November 2020.
Puguh Ika Listyorini.,Uji Keamanan Ekstrak Kayu Jati (Tectona Grandis L.F) Sebagai Bio-Larvasida Aedes Aegypti Terhadap Mencit . UPHJ 1 (2) (2012).
Purwo Sri Rejeki.,et al. Ovariektomi Pada Tikus Dan Mencit. Pusat Penerbitan dan Percetakan Universitas Airlangga (AUP). Cetakan pertama 2018.
Rahmadi, Nanang Sasmita , Arbain. Identifikasi Tumbuhan Berkhasiat Obat Di Hutan Lindung Wehea Kabupaten Kutai Timur (Identification of Medicinal Plants In Wehea Forest, East Kutai District). Diterbitkan online sejak 1 Mei 2017 Jurnal Pertanian Terpadu (JPT).
Rimawati D., et al. The Histological Differences Of Balb / C Mice Uterine Glands In Gestation Period Which Given Kacip Fatimah (Labisia Pumila)Exposure With Graded Dose.2015;4(4):560–4.
Robert W. Kapp., Book Reviews Derelanko MJ and Auletta CS. Handbook of Toxicology. 3rd ed. DOI: 10.1177/1091581814551327.
Shihab Uddin Ahmad.,et al., Labisia pumila improves wound healing process in ovariectomized rat model . A Journal of the Bangladesh Pharmacological Society (BDPS) Bangladesh J Pharmacol 2018; 13: 106-113.
International Pharmaceutical Abstracts, Open J-gate, Science Citation Index Expanded, SCOPUS and Social Sciences Citation Index; ISSN:
1991-0088.
Sister Sianturi.,et al. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol 70% Daun Tegining Ganang (Cassia planisiliqua Burm.F.) Terhadap Mencit Jantan (Mus musculus L.). Volume 5 Nomor 2 September 2019 p-ISSN: 2442-9791, e- ISSN: 2715-4181.
Siti Nurjanah. Uji Toksisitas Akut Dan Subkronik Dari Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma Longa Linn.) Pada Tikus. 2020.
Syefri Hardiko. Toksisitas Ekstrak Rumput Laut (Eucheuma Cottonii) Dengan Pelarut N-Heksana Dan Etil Asetat Terhadap Artemia salina.2018.
Udayana Fku. Modul Praktikum Penanganan Hewan Coba. 2019:1–9.
Yusof, Juliana.,et al., (2016). Use of complementary and alternative medicine in pregnancy and its impact on obstetric outcome. Complementary
Therapies in Clinical Practice,
S1744388116300822. doi:10.1016/j.ctcp.2016.09.005.
Zamroni Salim,et al., INFO KOMODITI Tanaman Obat. Badan Pengkajian dan Pengembangan Perdagangan Kementerian Perdagangan Republik Indonesia Diterbitkan pertama: September 2017.
Zulkifli.,Et Al.2017. Uji Efek Antidiare Ekstrak Daun Prasman (Eupatorium Triplinerve Vahl.) Terhadap Tikus Galur Wistar (Rattus Norvegicus).
52
LAMPIRAN
Lampiran 1
Perhitungan dosis ekstrak rumput fatimah Ditentukan berdasarkan dosis yang digunakan.
a. Dosis yang diberikan pada kelompok perlakuan akan diencerkan sesuai dengan kapasitas lambung mencit yaitu 0,5 ml
Perhitungan :
Berat badan mencit = 20 gr
I. 500mg/KgBB = 20 gr X 500 = 10 mg
Larutan = 10 X 10 ml = 0,2 ml
II. 1000mg/KgBB = 20 gr X 1000 = 20 mg
Larutan = 20 X 10 ml = 0,2 ml
III. 1500mg/KgBB = 20 gr X 1500 = 30 mg
Larutan = 30 X 10 ml = 0,2 ml
IV. 2000mg/KgBB = 20 gr X 2000 = 40 mg
Larutan = 40 X 10 ml = 0,2 ml
Berat badan mencit = 22 gr
I. 500mg/KgBB = 22 gr X 500 = 11 mg
Larutan = 11 X 10 ml = 0,1 ml
II. 1000mg/KgBB = 22 gr X 1000 = 22 mg 1000
1000
1000
1000 1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
Larutan = 22 X 10 ml = 0,2 ml
III. 1500mg/KgBB = 22 gr X 1500 = 33 mg
Larutan = 33 X 10 ml = 0,3 ml
IV. 2000mg/KgBB = 22 gr X 2000 = 44 mg
Larutan = 44 X 10 ml = 0,4 ml
Berat badan mencit = 23 gr
I. 500mg/KgBB = 23 gr X 500 = 11,5 mg
Larutan = 11,5 X 10 ml = 0,1 ml
II. 1000mg/KgBB = 23 gr X 1000 = 23 mg
Larutan = 23 X 10 ml = 0,2 ml
III. 1500mg/KgBB = 23 gr X 1500 = 34,5 mg
Larutan = 34,5 X 10 ml = 0,3 ml
IV. 2000mg/KgBB = 23 gr X 2000 = 46 mg
Larutan = 46 X 10 ml = 0,4 ml 1000
1000 1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000 1000
1000
1000
1000
54
Lampiran 2
Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan (Laurence & bacharach, 1964)
20g mencit
200g tikus
400g marmot
1,5 Kg kelinci
2,0 Kg kucing
4,0 Kg kera
12,0Kg anjing
70Kg manusia 20g
mencit 1,0 7,0 12,29 27,8 29,7 64,1 124,2 387,9
200g
Tikus 0,14 1,0 1,74 3,3 4,2 9,2 17,8 56,0
400g
marmot 0,08 0,57 1,0 2,25 2,4 5,2 10,2 31,5
1,5Kg kelinci
0,04 0,25
0,44 1,0 1,06 2,4 4,5 14,2
2,0Kg
Kucing 0,03 0,23 0,42 0,92 1,0 2,2 4,1 13,0
4,0Kg
Kera 0,016 0,11 0,19 0,42 0,45 1,0 1,9 6,1
12,0Kg
Anjing 0,008 0,06 0,10 0,022 0,24 0,52 1,0 3,1
70Kg
manusia 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,013 0,16 0,32 1,0
VolumeMaksimum Larutan Obat yang Diberikan pada Hewan Uji
Binatang Volume maksimum pemberian (ml)
iv Im ip sc po
Mencit (20-30 gram) 0,5 0,05 0,1 0,5-1,0* 1,0 Tikus (100 gram) 1,0 0,1 2,0-5,0 2,0-5,0* 5,0
Hamster (50 gram) - 0,1 1,0-5,0 2,5 2,5
Marmot (250 gram) - 0,25 2,0-5,0 5,0 10,0
Merpati (300 gram) 2,0 0,5 2,0 2,0 10,0
Kelinci (2,5 kg) 5,0-10,0 0,5 10,0-20,0 5,0-10,0 20,0 Kucing (3 kg) 5,0-10,0 1,0 10,0-20,0 5,0-10,0 50,0 Anjing (5 kg) 10,0-20,0 5,0 20,0-50,0 10,0 100,0
55
Lampiran 3
Prosedur Praktikum Pembuatan Ekstrak Rumput Fatimah Praktikum Ekstrak Etanol Rumput Fatimah
(Modul Praktikum Ekstrak Etanol Daun Magenta , Fakultas Kedokteran Universitas Udayana ,2020).
Petunjuk Umum
1. Tujuan Melakukan Praktikum 1. Melihat sendiri hasil praktikum.
2. Membandingkan hasil percobaan dengan pendapat- pendapat atau teori- teori yang ada dan kemudian mengambil kesimpulan akhir.
3. Membantu dalam mempelajari efek yang ditimbulkan atau diharapkan.
2. Cara Pelaksanaan
1. Modul Praktikum digunakan sebagai pegangan dalam pelaksaan praktikum secara mandiri.
2. Pada setiap kegiatan selalu dilakukan pencatatan pada buku catatan harian .
3. Pada setiap pelaksanaan praktikum, selalu didampingi oleh analis laboratorium.
3. Penilaian/Evaluasi
Penilaian dilakukan terhadap proses dan hasil akhir praktikum yang dilakukan. Pada akhir pelaksanaan praktikum dilakukan pembuatan laporan praktikum.
4. Aturan Pelaksanaan
1. Lakukan praktikum sebaik-baiknya dan dengan tertib.
2. Adakan persiapan secukupnya tiap kali akan melakukan praktikum, agar percobaan- percobaan yang dilakukan dapat bermanfaat.
3. Ambillah pelajaran sebanyak mungkin dari percobaan yang dilakukan.
4. Berhati-hatilah menggunakan alat-alat dan bahan-bahan praktikum.
I. Luaran Praktikum
Mahasiswa mengetahui dan mampu melakukan cara pembuatan ekstrak ( Peristhrope bivalvis L. Merr).
II. Tujuan Praktikum
a. Untuk Mengetahui alat dan bahan praktikum pembuatan ekstrak dengan teknik maserasi.
b. Mengetahui proses tahapan ekstraksi langkah demi langkah.
III. Landasan Teori
Ekstraksi adalah pemisahan satu atau beberapa bahan dari suatu padatan atau cairan dengan bantuan pelarut. Ekstraksi juga merupakan proses pemisahan satu atau lebih komponen dari suatu campuran homogen menggunakan pelarut cair (solven) sebagai separating agen. Pemisahan terjadi atas dasar kemampuan larut yang berbeda dari komponen- komponen dalam campuran.
Komponen- komponen kimia yang terkandung di dalam bahan organik seperti yang terdapat di dalam tumbuh- tumbuhan sangat dibutuhkan oleh keperluan hidup manusia, baik komponen senyawa tersebut digunakan untuk keperluan industri maupun untuk bahan obat-obatan. Komponen tersebut dapat diperoleh dengan metode ekstraksi dimana ekstraksi merupakan proses pelarutan komponen kimia yang sering digunakan dalam senyawa organik untuk melarutkan senyawa tersebut dengan menggunakan suatu pelarut.
Ekstraksi dapat dibedakan menjadi dua cara berdasarkan wujud bahannya yaitu:
1. Ekstraksi padat cair, digunakan untuk melarutkan zat yang dapat larut dari campurannya dengan zat padat yang tidak dapat larut.
2. Ekstraksi cair- cair, digunakan untuk memisahkan dua zat cair yang saling bercampur, dengan menggunakan pelarut dapat melarutkan salah satu zat.
Ekstraksi padat cair secara umum terdiri dari maserasi, refluktasi, sokhletasi, dan perkolasi. Metoda yang digunakan tergantung dengan jenis senyawa yang kita gunakan. Jika senyawa yang kita sangat rentan terhadap pemanasan maka metoda maserasi dan perkolasi yang kita pilih, jika tahan terhadap pemanasan maka metode refluktasi dan sokletasi yang digunakan (Safrizal,2010).
Pada ekstraksi cair- cair, bahan yang menjadi analit berbentuk cair dengan pemisahannya menggunakan dua pelarut yang tidak saling bercampur sehingga terjadi distribusi sampel di antara kedua pelarut tersebut.
Pendistribusian sampel dalam kedua pelarut tersebut dapat ditentukan dengan perhitungan koefisien distribusi (KD).
Ekstraksi Padat- Cair
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak larut dengan pelarut cair. Senyawa aktif yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid, dan lain-lain. Dengan diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah pemilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat.
Pengertian Maserasi
Maserasi istilah aslinya adalah macerare (bahasa Latin, artinya merendam).
Cara ini merupakan salah satu cara ekstraksi, dimana sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi bahan nabati yaitu direndam menggunakan pelarut bukan air (pelarut nonpolar) atau setengah air, misalnya etanol encer, selama periode waktu tertentu sesuai dengan aturan dalam buku resmi kefarmasian.
Maserasi adalah salah satu jenis metoda ekstraksi dengan sistem tanpa pemanasan atau dikenal dengan istilah ekstraksi dingin, jadi pada metode ini pelarut dan sampel tidak mengalami pemanasan sama sekali. Sehingga maserasi merupakan teknik ekstraksi yang dapat digunakan untuk senyawa yang tidak tahan panas ataupun tahan panas (Hamdani, 2014). Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari.
Prinsip Maserasi
Prinsip maserasi adalah pengikatan/pelarutan zat aktif berdasarkan sifat kelarutannya dalam suatu pelarut (like dissolved like). Langkah kerjanya adalah merendam simplisia dalam suatu wadah menggunakan pelarut penyari tertentu selama beberapa hari sambil sesekali diaduk, lalu disaring dan diambil beningannya. Selama ini dikenal ada beberapa cara untuk mengekstraksi zat aktif dari suatu tanaman ataupun hewan menggunakan pelarut yang cocok.
Pelarut-pelarut tersebut ada yang bersifat “bisa campur air” (contohnya air
sendiri, disebut pelarut polar) ada juga pelarut yang bersifat “tidak campur air”
(contohnya aseton, etil asetat, disebut pelarut non polar atau pelarut organik).
Kelebihan dan Kekurangan Metode Maserasi
Kelebihan dari ekstraksi dengan metode maserasi adalah:
a. Unit alat yang dipakai sederhana, hanya dibutuhkan bejana perendam b. Biaya operasionalnya relatif rendah
c. Prosesnya relatif hemat penyari dan tanpa pemanasan Kelemahan dari ekstraksi dengan metode maserasi adalah:
a. Proses penyariannya tidak sempurna, karena zat aktif hanya mampu terekstraksi sebesar 50% saja
b. Prosesnya lama, butuh waktu beberapa hari.
Faktor-Faktor yang Harus Diperhatikan dalam Ekstraksi
Dalam proses ekstraksi, ada beberapa hal yang harus diperhatikan antara lain:
1. Ukuran partikel
Ukuran partikel mempengaruhi laju ekstraksi dalam beberapa hal.
Semakin kecil ukurannya, semakin besar luas permukaan antara padat dan cair; sehingga laju perpindahannya menjadi semakin besar. Dengan kata lain, jarak untuk berdifusi yang dialami oleh zat terlarut dalam padatan adalah kecil.
2. Zat pelarut
Larutan yang akan dipakai sebagai zat pelarut seharusnya merupakan pelarut pilihan yang terbaik dan viskositasnya harus cukup rendah agar dapat dapat bersikulasi dengan mudah. Biasanya, zat pelarut murni akan diatas pada awalnya, tetapi setelah proses ekstraksi berakhir, konsentrasi zat terlarut akan naik dan laju ekstraksinya turun, pertama karena gradien konsentrasi akan berkurang dan kedua zat terlarutnya menjadi lebih kental.
3. Temperatur
Dalam banyak hal, kelarutan zat terlarut (pada partikel yang diekstraksi) di dalam pelarut akan naik bersamaan dengan kenaikan temperatur untuk memberikan laju ekstraksi yang lebih tinggi.
4. Pengadukan fluida
Pengadukan pada zat pelarut adalah penting karena akan menaikkan proses difusi, sehingga menaikkan perpindahan material dari permukaan partikel ke zat pelarut.
Pemilihan juga diperlukan tahap-tahap lainnya. Pada ektraksi padat- cair misalnya, dapat dilakukan pra- pengolahan (pengecilan) bahan ekstraksi atau pengolahan lanjut dari rafinat (dengan tujuan mendapatkan kembali sisa-sisa pelarut).
5. Pemilihan pelarut pada umumnya dipengaruhi oleh faktor-faktor berikut ini :
a. Selektivitas
Pelarut hanya boleh melarutkan ekstrak yang diinginkan, bukan komponen- komponen lain dari bahan ekstraksi. Dalam praktek, terutama pada ekstraksi bahan-bahan alami, sering juga bahan lain (misalnya lemak, resin) ikut dibebaskan bersama-sama dengan ekstrak yang diinginkan. Dalam hal ini larutan ekstrak tercemar yang diperoleh harus dibersihkan, yaitu misalnya di ekstraksi lagi dengan menggunakan pelarut kedua.
b. Kelarutan
Pelarut sedapat mungkin memiliki kemampuan melarutkan ekstrak yang besar (kebutuhan pelarut lebih sedikit).
c. Kemampuan tidak saling bercampur
Pada ekstraksi cair- cair pelarut tidak boleh (atau hanya secara terbatas) larut dalam bahan ekstraksi.
d. Kerapatan
Terutama pada ekstraksi cair-cair, sedapat mungkin terdapat perbedaaan kerapatan yaitu besar antara pelarut dan bahan ekstraksi. Hal ini dimaksudkan agar kedua fasa dapat dengan mudah dipisahkan kembali setelah pencampuran (pemisahan dengan gaya berat). Bila beda kerapatan kecil, seringkali pemisahan harus dilakukan dengan menggunakan gaya sentrifugal (misalnya dalam ekstraktor sentrifugal).
e. Reaktifitas
Pada umumnya pelarut tidak boleh menyebabkan perubahan secara kimia pada komponen- komponen bahan ekstraksi. Sebaliknya
dalam hal-hal tertentu diperlukan adanya reaksi kimia (misalnya pembentukan garam) untuk mendapatkan selektivitas yang tinggi.
Seringkali ekstraksi juga disertai dengan reaksi kimia. Dalam hal ini bahan yang akan dipisahkan mutlak harus berada dalam bentuk larutan.
f. Titik didih
Ekstrak dan pelarut biasanya harus dipisahkan dengan cara penguapan, destilasi atau rektifikasi, maka titik didih kedua bahan itu tidak boleh terlalu dekat, dan keduanya tidak membentuk aseotrop.
ditinjau dari segi ekonomi, akan menguntungkan jika pada proses ekstraksi titik didih pelarut tidak terlalu tinggi (seperti juga halnya dengan panas penguapan yang rendah).
g. Kriteria yang lain
Pelarut sedapat mungkin harus:
✓
Murah✓
Tersedia dalam jumlah besar✓
Tidak beracun✓
Tidak dapat terbakar✓
Tidak eksplosif bila bercampur dengan udara✓
Tidak korosif✓
Tidak menyebabkan terbentuknya emulsi✓
Memilliki viskositas yang rendah✓
Stabil secara kimia dan termis.Karena hampir tidak ada pelarut yang memenuhi syarat di atas, maka untuk setiap proses ekstraksi harus dicari pelarut yang paling sesuai. Beberapa pelarut yang terpenting adalah : air, asam-asam organik dan anorganik, hidrokarbon jenuh, toluen, karbon disulfit, eter, aseton, hidrokarbon yang mengandung khlor, isopropanol, etanol .
IV. Alat Dan Bahan
• Alat yang digunakan adalah:
- Maserator
- Batang pengaduk - Corong Buchner
- Kertas saring
- Beaker glass 100 ml
- Botol untuk menampung hasil saringan (maserat) - Evaporator
- Gelas untuk menampung ekstrak kental
• Bahan yang digunakan:
- Simplisia rumput fatimah (akar,batang,daun) - etanol 96%
V. Prosedur
1. Simplisia dikeringkan dengan oven 46o C ± 6 jam.
2. Bahan Uji yang kering disebut dengan simplisia.
3. Simplisia kemudian dihaluskan dengan blender untuk mendapatkan bubuk simplisia.
4. Serbuk simplisia diambil dan dilarutkan dalam pelarut etanol 96%
dengan perbandingan 1:10.
5. Simplisia yang telah dilarutkan dengan etanol 96% di maserasi dengan alat bantu sonikator.
6. Cairan yang diperoleh dari penyaringan tersebut disaring lagi dengan kertas saring Whatman.
7. Kemudian dimasukkan ke tabung labu dan dilakukan evaporasi dengan rotary evapotaor (evapor tempt = 27°C evapo bath suhu=48°C, rotasi=
24 tekanan vakum= 175 rpm) sampai semua air menguap dan menyisakan residu yang merupakan hasil ekstraksi
8. Hasil ekstraksi berupa ekstrak kental disimpan pada lemari pendingin pada suhu 4°C.
62
Lampiran 4
Prosedur Praktikum Uji Toksisitas Ekstrak Rumput Fatimah Terhadap Mencit Betina (Sumber: Praktikum Farmakologi,2016 hal 25).
Cara Pemberian Obat Pada Hewan
Melalui kegiatan praktikum ini, akan membantu untuk dapat memberikan obat kepada hewan uji dengan jalur oral, kemampuan ini diperlukan agar hewan coba terlindung dari rasa sakit selain itu dosis yang diberikan hewan coba juga sesuai dan kemampuan ini penting untuk melakukan percobaan- percobaan pada praktikum yang berikutnya.
mampu memegang dan mengendalikan hewan uji dengan benar, hewan uji terlindung dari rasa sakit dan cedera yang didapat bila hewan tersebut dipegang dengan benar, selain itu bila hewan tersebut tidak dipegang dengan benar, maka hewan tersebut dapat melukai anda.
Persiapan Praktikum A. Tujuan Percobaan
Melalui praktikum ini diharapkan anda mampu memegang, memberikan perlakukan dari hewan uji mencit dengan benar.
B. Prinsip Percobaan
Hewan percobaan dipegang, diberi perlakukan dengan benar sehingga hewan tetap tenang,sehat dan merasa aman.
C. Alat dan hewan yang digunakan Alat
1.
Masker2.
Sarung tangan3.
Kandang Spoit oral4.
Spoit 1 mlHewan uji yang digunakan adalah Mencit
Prosedur Uji Toksisitas Pada Hewan Uji Mencit
No CARA MEMEGANG MENCIT1 Mencit diangkat dengan cara memegang ekor kearah atas dengan tangan kanan
Sumber : The Laboratory Mouse 2 lalu letakkan mencit di letakkan
di permukaan yang kasar biarkan mencit menjangkau / mencengkeram alas yang kasar (kawat kandang).
3 Kemudian tangan kiri dengan ibu jari dan jari telunjuk menjepit kulit tengkuk mencit seerat / setegang mungkin
Sumber : The Laboratory Mouse 4 Ekor dipindahkan dari tangan
kanan, dijepit antara jari kelingking dan jari manis tangan kiri
Sumber : The Laboratory Mouse 5 Dengan demikian, mencit telah
terpegang oleh tangan kiri dan siap untuk diberi perlakuan
(Sumber: Praktikum Farmakologi,2016 hal 18) No CARA PEMBERIAN OBAT PADA HEWAN
1 Cairan obat diberikan dengan menggunakan sonde oral.
Sonde oral ditempelkan pada langit-langit mulut atas mencit, kemudian perlahan- lahan dimasukkan sampai ke esofagus dan cairan obat dimasukkan
Sumber : The Laboratory Mouse
Persiapan Praktikum A. Tujuan Percobaan
Menghitung perubahan berat badan mencit betina putih.
B. Prinsip Percobaan
Perubahan berat badan mencit betina (mus musculus) dapat ditentukan dengan selisih berat badan sebelum adaptasi, sesudah adaptasi, setelah di beri perlakuan sampai dengan 14 hari. Hewan dianggap sehat apabila perubahan berat badan tidak lebih dari 10% serta memperlihatkan perilaku normal.
C. Alat dan Bahan Alat yang digunakan
1. Kandang Mencit 2. Alat pelidung diri 3. Timbangan mencit Bahan yang digunakan
1. Pakan normal mencit 2. Air minum
3. Sekam
D. Hewan yang digunakan
Hewan yang digunakan adalah mencit betina sehat dengan berat badan 20- 30 g berumur antara 6 – 8 minggu.
Pelaksanaan Praktikum
1.
Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit betina sehat sebanyak 25 ekor.2.
Setelah 5 -7 hari mencit kemudian di timbang berat badannya dan dicatat.3.
Pada hari ke 6 mencit dipuasakan selama 4 jam, setelah 4 jam puasa mencit kembali ditimbang berat badan. Catat berat badan mencit sebelum dan sesudah perlakuan dan setiap 24 jam selama 14 hari.(Sumber: Praktikum Farmakologi,2016 hal 14-15).
Format pelaporan data pengamatan berat badan pada hewan uji selama 14 hari
Kelompok Mencit
Berat Badan (g)
Sebelum Adaptasi
Setelah Adaptasi Selama 5
Hari
Setelah puasa selama
4 jam
Setelah Di Beri Perlakuan
2 jam
hari ke
1 hari
ke 2
hari ke
3 hari ke 4
hari ke 5
hari ke 6
hari ke 7
hari ke 8
hari ke 9
hari ke 10
hari ke 11
hari ke 12
hari ke 13
hari ke 14
I kontrol
1 2 3 4 5
II 500mg
1 2 3 4 5
III 1
1000mg 2 3 4 5
IV 1500mg
1 2 3 4 5
V 2000mg
1 2 3 4 5
Persiapan Praktikum A. Tujuan Percobaan
Menganalisis pengaruh absorbsi ekstrak rumput fatimah dengan pemberian obat peroral.
B. Prinsip Percobaan
Pengamatan pengaruh pemberian absorbsi ekstrak rumput fatimah oleh tubuh yang terjadi dengan mulainya efek toksik pada hewan coba mencit betina.
C. Alat Dan Bahan Alat yang di gunakan
1. Botol kaca sediaan 2. Gelas ukur Tahan Panas 3. Spoit 1 ml
4. Sonde oral
5. Higrometer Htc-1 Jam Digital Alat Ukur Suhu Ruangan 6. Timbangan
7. Masker 8. Handscoon 9. Air suling 10. ATK
Bahan yang digunakan
1. Ekstrak Rumput Fatimah 2. Mencit Betina
Pelaksanaan Praktikum
1.
Mencit dikelompokkan ke dalam 5 kelompok, tiap kelompok terdiri dari 5 ekor, dimana2.
Kelompok I sebagai kontrol, diberikan air suling3.
Kelompok II sebagai kelompok perlakuan yang diberikan esktrak rumput fatimah secara oral dengan dosis 500 mg4.
Kelompok III sebagai kelompok perlakuan yang diberikan esktrak rumput fatimah secara oral dengan dosis 1000 mg5.
Kelompok IV sebagai kelompok perlakuan yang diberikan esktrak rumput fatimah secara oral dengan dosis 1500 mg6.
Kelompok V sebagai kelompok perlakuan yang diberikan esktrak rumput fatimah secara oral dengan dosis 2000 mg7.
Semua pemberian dilakukan satu kali dengan dosis yang sesuai8.
Setiap pemberian obat dicatat waktunya, kemudian mencit diamatiberapa lama waktu yang dibutuhkan mulai efek toksik selama 2 jam pertama selanjutnya tiap 24 jam selama 14 hari dengan mengamati refleksi tremor, diare, lemas, jalan mundur, aktivitas somatomotor/tingkah laku, tidur dan kematian
(Sumber: Praktikum Farmakologi,2016 hal 44 – 45).
Format pelaporan data pengamatan efek toksik ekstrak rumput fatimah pada hewan uji selama 14 hari.
Penga matan
30 mnt 2 jam Hari ke 1 Hari ke 2 Hari ke 3 Hari ke 4 Hari ke 5 Hari ke 6 Hari ke 7
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4 Lemas
Tremor
Kejang
Salivasi
Laju nafas cepat Diare
Jalan mundur
Jalan dengan perut Tidur
Pengam atan
Hari ke 8 Hari ke 9 Hari ke 10 Hari ke 11 Hari ke 12 Hari ke 13 Hari ke 14 Hari ke 15
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4
K P 1
P 2
P 3
P 4 Lemas
Tremor
Kejang
Salivasi
Laju nafas cepat Diare
Jalan mundur
Jalan dengan perut Tidur
72
Lampiran 5
Dokumentasi Pembuatan Ekstrak Rumput Fatimah
No Hari/Tanggal Kegiatan Dokumentasi
1. Senin,
11 April 2022
Rumput Fatimah (akar, batang,daun) sebanyak 1000 gram yang sudah bersih di potong- potong kecil.
2. Senin, 11 April 2022
Di masukkan ke dalam herbs dryer ± 6 jam dengan suhu 45°C.
3. Selasa, 12 April 2022
Rumput fatimah dikeluarkan dari herbs dryer lalu di blender untuk menjadi simplisia serbuk kasar, dengan berat 869 gram (berbau khas seperti jamu pahit).
4. Selasa, 12 April 2022
Simplisia sumput fatimah timbang .
150 gram = 4 wadah 169 gram = 1 wadah 100 gram = 1 wadah
5. Selasa, 12 April 2022
Simplisia rumput fatimah dimasukan ke dalam wadah maserasi .
6. Selasa, 12 April 2022
Takar pelarut etanol 96%
sebanyak:
✓ 750 ltr untuk 150 gram simplisia
✓ 800 ltr untuk 169 gram simplisia
✓ 650 ltr untuk 100 gram simplisia
Masing - masing diaduk dan di tutup rapat.
12 April 2022 maserasi rumput fatimah yang telah di rendam dengan pelarut etanol 96% di beri label ( tanggal, nama simplisia, berat simplisia).
8
.
Selasa s/d Kamis,12 April 2022- 14 April 2022
Simplisia di letakkan ke dalam sonikator untuk dilakukan maserasi selama 60 menit (setiap wadah maserasi dilakukan 3x dengan sonikator atau sampai dengan maserasi sudah tidak berubah warna lagi).
9
.
Senin, 18 April 2022Hasil maserasi tiap - tiap wadah di saring dengan kertas saring dan diletakkan dalam labu ukur.
Sumber: Data Primer,2022 18 April 2022
dan di catat berapa liter maserasi yang didapatkan.
Maserasi I = 3450 ltr (warna coklat merah pekat)
Maserasi II = 3410 ltr (warna kuning teh)
Maserasi III = 3100 ltr (warna kuning)
11. Selasa, 19 April 2022
Larutan hasil maserasi di evaporator dengan temp 27°c , water bath 48°c, rotasi 24, tekanan vacum 175 ± 1,5 jam untuk memisahkan pelarut dengan ekstrak sehingga didapatkan ekstrak kental rumput fatimah.
12. Selasa , 19 April 2022
Timbang wadah kosong terlebih dahulu untuk mengetahui berat ekstrak yang didapat.
Botol kosong= 81,54 gram Berat seluruhnya = 113,2 gram Berat ekstrak = 31,75 gram Letakkan pada lemari pendingin dengan suhu +4°C
76
Lampiran 6
Dokumentasi Persiapan dan Perlakuan Pada Hewan Uji
No Hari/Tanggal Kegiatan Dokumentasi
1. Rabu,
20 April 2022
Mencit di datangkan dari tempat pemeliharaan mencit maros makassar sebanyak 30 mencit betina sehat, tidak bunting usia 6- 8 minggu dengan berat badan 20- 23 gram.
2. Rabu,
20 April 2022
Mencit di pisahkan secara acak pada masing- masing kandang, setiap kandang berisi 5 mencit betina dan di beri label pada tiap kandang, pada badan mencit juga di beri tanda no urut.
3
.
Rabu,20 April 2022
Mencit di timbang ulang sebelum adaptasi
(setiap hari mencit di beri pakan dan minum standard, di bersihkan kandang 2 hari sekali, suhu ruangan di atur dengan 25°C, dengan kondisi gelap 12 jam, terang 12 jam)
4. Minggu, 24 April 2022
Mencit kembali di timbang pada hari ke 5 adaptasi
5
.
Senin,25 April 2022
Mencit di timbang setelah 4 jam dipuasakan (minum tetap diberikan) sebelum perlakuan
6. Senin,
25 April 2022
Mencit di berikan perlakuan sesuai dosis dengan sonde.
Sonde oral ditempelkan pada atas lidah langit-langit mulut atas mencit, selanjutnya secara perlahan dimasukkan sampai ke esofagus dan sediaan ekstrak rumput fatimah
dimasukkan.(praktikum farmakologi,2016.hal 24)
7. Senin,
25 April 2022
Pengamatan selama 2 jam pertama
Lemas,
laju nafas cepat 222x/mnt tidur, dilanjutkan pengamatan selama 14 hari kedepan, muncul efek diare dan kematian pada mencit. (terlampir)
8
.
Senin,25 April 2022
Penimbangan mencit betina setelah 2 jam perlakuan dan sampai hari ke 14 (terlampir)
9.
Kamis, 5 Mei 2022Mencit no 1 pada dosis pemberian 1000mg/kgBB, melahirkan mati 7 mencit, kemudian ±1,5 jam mencit betina post partum mati dengan BB akhir 15,5 gram.
(drop out).
Sumber: Data Primer,2022.
Lampiran 7
Hasil Pengamatan berat badan mencit selama 14 hari
Sumber:Data Primer,2022
Lampiran 8
Hasil Pengamatan efek toksik dan kematian mencit selama 14 hari
Sumber:Data Primer,2022
84
Lampiran 9
Tabel Thomson dan Weil (1952)
86
Lampiran 10
Surat Pengantar Etik
87
Lampiran 11
Rekomendasi Persetujuan Etik
KEMENTERIAN PENDIDIKAN, KEBUDAYAAN RISET, DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS HASANUDDIN
FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT
Jln.Perintis Kemerdekaan Km.10 Makassar 90245, Telp.(0411) 585658, E-mail : [email protected], website: https/fkm.unhas.ac.
REKOMENDASI PERSETUJUAN ETIK Nomor :
3295/UN4.14.1/TP.01.02/2022Tanggal : 25 Maret 2022
Dengan ini Menyatakan bahwa Protokol dan Dokumen yang Berhubungandengan Protokol berikut ini telah mendapatkan Persetujuan Etik :
No.Protokol 18322092047 No. Sponsor
Protokol
Peneliti Utama Amik Rahayu Wahyudi Sponsor Pribadi
Judul Peneliti Uji Toksisitas Ekstrak Rumput Fatimah (Anastatica Hierochuntica) Terhadap Mencit Betina
No.Versi Protokol 1 Tanggal
Versi
18 Maret 2022
No.Versi PSP 1 Tanggal
Versi
18 Maret 2022 Tempat Penelitian Laboratorium F.MIPA Universitas Hasanuddin Makassar
Laboratorium Animal Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar
Judul Review Exempted
x Expedited Fullboard
Masa Berlaku 25 Maret 2022 Sampai 25 Maret 2023
Frekuens i review lanjutan
Ketua Komisi Etik Penelitian
Nama :
Prof.dr.Veni Hadju,M.Sc,Ph.D
Tanda tangan Tanggal 25 Maret 2022 Sekretaris komisi Etik
Penelitian
Nama :
Dr. Wahiduddin, SKM.,M.Kes
Tanda tangan Tanggal 25 Maret 2023
Kewajiban Peneliti Utama :
1. Menyerahkan Amandemen Protokol untuk persetujuan sebelum di implementasikan 2. Menyerahkan Laporan SAE ke Komisi Etik dalam 24 Jam dan dilengkapi dalam 7 hari dan
Lapor SUSAR dalam 72 Jam setelah Peneliti Utama menerima laporan
3. Menyerahkan Laporan Kemajuan (progress report) setiap 6 bulan untuk penelitian resiko tinggi dan setiap setahun untuk penelitian resiko rendah
4. Menyerahkan laporan akhir setelah Penelitian berakhir
5. Melaporakn penyimpangan dari protocol yang disetujui (protocol deviation/violation) 6. Mematuhi semua peraturan yang ditentukan
88
Lampiran 12
Surat Izin Penggunaan Laboratorium Biofarmaka
89
