4 SALMONELLA
2. PERBENTHAN
2.12. Egg-YolkEmulsion
Pergunalan
telur
ayam yang masih s€gar, pisahkan kuningtelur
dari putih telur. Campurkan kunihgtelur
dengan 4 kali jumlah air. Panaskan campuran dalam penangas air pada suhu 40- 46oC selama 2jam
dan biarkan sehingga endapan terbentuk selama15-24
jam, tuangkancatan jemih
dan sterilkan dengan cara penyaringan. Sidpan emulsi padaO-sdC
selama tidak lebih dati?2 jam sebelum dipergunakan.
2.13.
Eosine Methylene Blue near (BMB Agar) PeptoneLactose
K2HPO4
air zuling
It
Eosine (lsrulan 2%
w/v)
Methylene blue(lanatan 0,25%
wl''tl
Fluid'Ihioglycollate
Medium- Tryptictse atau cssitone L--CystineGlukosa Yeast extract
, Sodium chlorida Sosium thioglycollate Resazurin 0,1%
2
gnrn
15 gram 1g."io
20 ml 25ml.
Masukhsn ba}lan-baian dalam 1 liter suling, Pana'kari sampai
laut
Stcril'i<an dalarn autoklaP pada 121oC setama 15menit
pH akhi!7'1'
Eschsichia Coli (EC)
Roth.
Tlypticase atau
tryptone
20gam
I,actos€
5sr'm
Bile salts No'
3
1'5 glamDipots.ssium hydrogen
phosphate
4gt'n
Pot ssium dihydro8en
phosPhate
1,5gam
Natrium
klorida
5 glamAir suling
1 gtamIirutkan
bahan-bahon dalam1 liter air
suling'Jika
perlu Pan'6kdn sgar trafran-bahan benat-b€nsrlarut'
Tlangkantiap
10trll
ke dalsmtibung
yah8 berisi tabqng Durhamterbalik
st€rilkan pads12loc
s€isms 15menit
pH15 gram 0,5 glam 5 gram 5 garn 2,5 glarjl 0,1 gram 1 gram 0,?5
gam
1 liter-
Masukkan bahan-bahan
ke
dalam1 [ter at
sulingdan didihkan
s.ipayd- bensr-benar laxut. Dinginkan hinSga 50-€OoC dan tiap 10 atau 25El
ttang- kan ke da.lam tabung-tabung.Sebelum
penahbalan
media, rnasukkan 0,1 grdm i{alsiurn karbonat ke da-lalr
tabung-tabungtsdi.
Stalilksnrddamautoklal
pada ruhu 121oC selarne 15 menit. pH akhi! ?.110,1.Sebelum digunskan, tabung-tlbung
bqisi
media dipanaskan selama 10 menii d€ngan uap mengalir unl,uk rnenghiLBngkano2
yang tarut,lalu segers dingin.kan di bewah aL klan.
Agar
Air
suling2.16.
Celatine Agar.Gelatine
Natrium
klo
daTIYPticase/trYPtone Agar
Air
sulingIrrutj€n
bahan-bahan dalam pada 121oC selama 15 menit.2.1?. Ileart
lnfusion Broth."'
Infusi dari Beef heart TrYPtose
Natrium klorida
Air
suling2.18.
Hektoen Enteric Agar.Proteose PePton Yeast extract Powder Lactose
Suctosa Calicin Bile salt No. 3 Sodium chlorida Sodium thiosulPhate Ammonium fcrric cihate Acid fuchsin
BromthYmol blue Agar
Air
sulingI . 30gam
10 Sram 10 gram 15 glam 1
liter
1
liter
air suling.Atut Pll akhir
?.2. Sterilkanl
lj
500 gtam 10 gram 5 gram 500 ml.
Masukkan infusi
dari
beef heaft ke dalam 500ml at
suling' kemudian tam-uuhl*
Uut"n-trit-
yang laiD lalu panaskan sehinggalarut
Tuangkan ke da'irn *JJir'.r*i,r,'n
fuda suh'.r 121oC selama 15menit
pH akhir7'4' :.
Ril'r',,
ffij,'
l!F:.
*.\',. :
'lff'.i 1,11
li .
r.. ,,
t..
';':1:1' ,:
$, i"'i "j
,'t
,.il ,.
I,il..t, {:, ,i.,
-,
I ,':
,,,'i.'.ii!,
12 g.am 3 gram 12 gr^m 12 glam 2 gr^m 9 glam 5 gram 5 glam 1,5 gram 0,1 gram 0-065 gtam
15 glam
l
liter.Larutlcan ?6 gram media
ini
ke dalam 1liter
air suling dan aduk 10 menit'[tt oH t,sit
Panaskantidak lebih dari 1
menit hinggamendidih' ad
k*.o.j "*."" -r-ut.
Jangan disterilkan dalam Autoclave' Dinginkan sam-o"i iotiar' *"taf."n
ke dalam cawanPetii
sebanvak 20 ml"Jangan disim- pan lebih d:rriI
hari'2.19
Hugh- Leirson Mcdium' PeptonNatrium khlorida
Potassium monohydrogen phosphate Glucose
Air
suling2 gram 5 gram 0.3 glam 10 grarn
l liter
Masukkan selwuh bahan'bahan ke dalam 985 ml air suling, panaskan sampai mendidih sehingga larut. Tuangkan
tiap 5
ml ke dalam tabung kecil dan ste- rilkan pada suhu 121oC sellma 15 menit.plj
akhir ?.1.Larutkan bahan-bahan dalam air suling, atur plJ 7,0, masukkan dalam tabung 0,16 mm sebanyak
5 ml,
Sterilkan dalamautoklaf
pada 121oC selama 15 menit.Indole Medium
'ftyptone
NaClDL
tryptophaneAir
suling10 gram 5
C-.n
1,0 glam 1liter
10 gram 3
gam
5 giam 10 gram 20 gram 1 gram 0,4
gam
0,015 eram 15 gtaml liter
1.4 gram 1 gram 0.2
g^rn
3 glatn 1
liter
2.21.
K.F. Sterptococcus Agar.Proteose Peptone Yeast extract Natrium khlorida
Natrium GlYceroPhosphate ivlaltose
Sodium azide Bromceresol purple Agar
AA sulng
Masukkan bahan-bahan ke dalam 1
liter
air suling. 'Ibangkan ke dalam labu_labu dengan ukuran yang diinginkan, lalu sterilkan pada suhu 121oC selama 10 menit.
Dinginkan hingga mencapai suhu
50
6OoC dan tambahkan 1 ml larutantIi-
phenyl t€tmzolium chloride 17o yang sudah disterilkan s€carafiltrasi
unttrktiap 100 ml
perbenihan. Campur dengan baik dan dinginkan hingga suhg4soc,
Ialu tuangkan ke dalam cawan P€tri.2.22
Koser's Citrale Brothsodium amonium hidrogen pbosphate K2HPO4
MgSO4
Sodium citrate
Air
sulingLarutkan
bahan-babaq danatur pH 6,8.
I'lasukksn banyak 10 ml. Sterilkan selama 15 menit pada 121oC Lactose Broth (single strengih).ke
dalam tabuns213.
Beef extract 3 gam
Peptone
' Iactose
Air
suling5 gram 5
$am
1
liter
I
Le.rutkan bahan-bahan,
atur pH
6,8. Masukkan sebanyak 10ml ke
dalam tabung kimia yang berisi t3bung Durham terbalik. Sterilkan selama 15 menit pada suhu 121oc.2.24.
Lactose Broth (double strength) Beef extractPeptone Lactose
Air
suling6 glam 10 gram 10 gram 1
liter
l,arutkan bahan-bahan, atur pH 6,8. Masukkan ke dalam tabung sebanyak 10 rnl.
sterilkan sclama 15 menit pada zuhu 121oC
2-25. l-awyl
Sulphate Broth (single strength).Tryptone, tryptos€ atau
trypticase
20g*n
Lactose
5 garnK2IiPO4
2,75g^n
KH2PO4
2,15 gramNaCl
5 glamSodium lauryl
sulphate
0,1 gramAir suling
1liter
Larutkan bahan-bahan dalam
air
zuling,atur pH
6,8. Masukkan 10rhl
ke dalarntabung kimia
yang mengandung tabung Durhamterbalik.
Sterilkan selama 10 menlt pada 121oC.2.26.
Lauryl Sulfate'Itlptose
Broth (doble shength).Tryptone/hyptose lactose
K2HPO4 KH2PO4
NaCl
Sodium lauryl sulphate
Air
suling40 gram 10 glam 5,5 gleln 5,5 glam 10 glam
0,2 grarn 1
liter
Larutkan
bahan-bahan dalamair
suling,dtur pH 58.
Masukkan10 tnl
ke dalam tabungkimia
yang mengEndung tabung Durhahterbalik.
I{€mudian sterilkan selama 1O menit pada 121oC.2.27.
Lysine Decarboxylase Broth.L--lysine |
5F*
'.
Peptone
3Yeast extract Glukosa
Bromceresol PurPle (larut€n 1%)
Air
suling5 glam 3 gram 1 gtain 0,015 gram 1
liter
Masukkan bahan-bahan ke dalarlt 1
liter ai!
suling. Panaskan perlahan-lahan sambil diaduk agarlarut.
Masukkan5 ml
ke dalamtabung
Stcrilkan peda suhu 121oC selama 20 menit. pH akhir 6,5.2.28.
Mac Conkey Agar P€ptoneLactose Bile salts NaCl Agat Neutral red Crystal violet
Air
suling20
glrm
10 glam 1,5 gram
5 glaln 15 gram
0,03 gram 0,001 gram 1
liter
10 gram 5 gram 3 glam 5 gla]n 12,5 gram
Larutkan semua bahan-bahan,
atur
pH ?,8. Sterilkan selama 15menii
pada 121oC.hangkan
ke dalam pinggan Petri sebanyak 15 ml.i
2.29.
Mac. Codkey Broth.Pepton Lactosa Bile salt
Natrium klorida
Meiah netral (larutan 1%) atau Ungu Bromcresol (larutan 1%)
Air
sulingpH akhb ?,6.