BAB IV HASIL PENELITIAN
4.2 Pembahasan
Penelitian pada tes pendugaan digunakan media Laktosa Broth, Media Laktosa Broth (LB) pada tes pendugaan dipakai karena merupakan medium yang digunakan dalam prosedur kualitatif dalam mendeteksi Coliform pada air, makanan, dan produk susu. Dalam uji tahap pendugaan, keberadaan Coliform masih dalam tingkat probabilitas rendah, masih dalam dugaan. uji penduga menggunakan media LB (Laktosa Broth) yang bertujuan sebagai pendeteksi awal keberadaan bakteri. Pemeriksaan adanya bakteri Escherichia coli dari batu es yang sudah mencair dilakukan berdasarkan penggunaan media kaldu laktosa (laktosa broth) yang ditempatkan di dalam tabung reaksi berisi tabung durham yang berupa tabung kecil yang letaknya terbalik, digunakan untuk menangkap gas yang terjadi akibat fermentasi laktosa menjadi asam dan gas (Yunan, 2017).
Hasil Penelitian yang didapatkan pada uji pendugaan ialah sampel positif pada media Laktosa broth dapat memfermetasikan laktosa dengan ciri-ciri tabung durham memiliki gelembung atau tabung reaksi tersebut berwarna keruh yang negatif tidak dapat memfermentasikan laktosa dengan ciri-ciri tabung durham tidak memiliki gelembung udara dan tabung reaksi tidak berubah warna atau jernih.
Setelah dilakukan uji pendugaan selanjutnya yaitu tes Penegasan dengan tujuan uji penegasan untuk mengetahui lebih lanjut apakah terdapat bakteri Coliform atau tidak, dengan menggunakan media BGLBB (Brillian Green Lactose Bile Broth) tujuannya ialah sebagai pendeteksi keberadaan bakteri golongan coliform dengan berbagai tingkat pengenceran. Didapatkan sampel menunjukkan hasil positif dan menunjukkan pertumbuhan bakteri Coliform.
Media ini mampu menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif karena adanya empedu dan brilliant green. Laktosa pada media ini akan difermentasi oleh bakeri kelompok coli-aerogenes yang kemudian membentuk gas. Adanya hasil positif yaitu adanya gas di dalam tabung pada tes penegasan dan media pada tabung reaksi berwarna keruh,Kekeruhan disebabkan oleh meningkatnya asam sehingga komponen laktosa menggumpal. Gumpalan inilah yang menjadikan hasil keruh. Sedangkan gas berasal dari hasil fermentasi laktosa membentuk gas
31
karbondioksida. Gas inilah yang nantinya akan terperangkap dalam tabung durham yang dipasang terbalik. Secara garis besar reaksi fermentasinya adalah sebagai berikut (Kamaliah, 2017):
C12H22O11 C6H12O6 C3H6O3+CO2
(Laktosa) (Glukosa) (Asam laktat + Karbndioksida)
Jumlah tabung yang positif disesuaikan dengan tabel MPN sehingga diperoleh indeks MPN Total Coliform. Hasil tes penegasan ini juga dapat digunakan untuk menghitung jumlah perkiraan terdekat bakteri Coliform yang ada di dalam air, sedangkan untuk hasil negatif pada media BGLB akan memperlihatkan warna jernih pada media tabung reaksi dan pada tabung durham tidak memiliki gelembung udara (Ummi, 2016).
Coliform merupakan sekumpulan golongan bakteri yang dijadikan indikator untuk kualitas air dan makanan. Bakteri ini dapat ditemukan di alam seperti di tanah dan air. Salah satu bakteri Coliform yang menjadi indikator pencemaran feses pada air adalah Escherichia coli. Kehadiran bakteri Escherichia coli dan Coliform dalam air mengindikasikan air sudah tercemar.
Hal ini juga mengindikasikan buruknya minuman-minuman es yang diperjualbelikan (Rani, 2016).
Most Probable Number (MPN) merupakan suatu metode numerasi mikroorganisme yang menggunakan data dari hasil pertumbuhan mikroorganisme pada medium cair spesifik. Dalam seri tabung yang ditanam dari cair yang ditanam berdasarkan jumlah sampel atau diencerkan menurut tingkat seri tabungnya, sehingga dihasilkan kisaran jumlah mikroorganisme yang diuji dalam nilai MPN/satuan volume atau massa sampel. Prinsip utama dari metode ini adalah mengencerkan sampel sampai tingkat tertentu sehingga didapatkan konsentrasi mikroorganisme yang pas atau sesuai, dan jika ditanam dalam tabung menghasilkan frekuensi pertumbuhan tabung positif, kadang- kadang tapi tak selalu (Kamaliah, 2017).
Dalam metode MPN digunakan medium cair di dalam tabung reaksi , dalam hal ini perhitungan dilakukan berdasarkan jumlah tabung positif.
Pengamatan tabung yang positif dapat dilihat dengan mengamati timbulnya
kekeruhan, atau terbentuknya gas di dalam tabung durham untuk bakteri pembentuk gas. Umumnya untuk setiap pengenceran digunakan 3 atau 5 seri tabung. Makin banyak tabung yang digunakan dalam perhitungan nilai MPN, akan menunjukkan tingkat ketelitian yang lebih tinggi. Metode MPN biasanya dilakukan untuk menghitung jumlah bakteri di dalam contoh berbentuk cair.
Kelompok bakteri yang dapat dihitung dengan metode MPN juga bervariasi bergantung pada media yang digunakan untuk pertumbuhannya (Yunan, 2017).
Berdasarkan hasil penelitian pada media BGLB untuk pengujian coliform yang dilakukan didapatkan hasil bervariasi yaitu pada sampel 2 dan sampel 4 total bakteri Coliform sebanyak 4 MPN, sampel 3 dengan total bakteri 3 MPN, sampel 8 dan sampel 10 total bakteri 15 MPN, sampel 9 dengan total bakteri 7 MPN, dan sampel 1, 5, 6, 7 didapatkan hasil total bakteri 0 MPN.
Sampel 9 sampel yaitu 7 MPN. Sampel 1, 5, 6, dan 7 merupakan jumlah bakteri terendah diantara semua sampel yaitu 0 MPN. Sedangkan berdasarkan hasil penelitian media BGLB untuk pengujian Escherichia coli yang dilakukan didapatkan hasil pada sampel 9 dengan total bakteri 7 MPN/100 ml, dan sampel 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, dan 10 didapatkan hasil total bakteri 0 MPN/100 ml.
Berdasarkan hasil penelitian Rimadani Ritonga dkk (2013) tentang Analisis Escherichia coli dan Higiene Sanitasi pada Minuman Es Teh yang Dijual di Pajak Karona Jamin Ginting Kecamatan Medan Baru Tahun 2013 bahwa ternyata seluruh pedagang minuman es teh yang dijual menggunakan air isi ulang (depot) sebagai air campuran untuk pembuatan es teh. Dimana dalam proses pengolahannya air isi ulang dimasukkan kedalam dispenser dan kemudian ditambahkan gula lalu diaduk setelah itu dimasukkan teh pekat yang telah dimasak dengan air mendidih lalu diaduk, dibiarkan terus berada di dalam dispenser sampai sore dan jika hampir habis dilakukan perlakuan yang sama.
Dari 10 sampel yang diperiksa terdapat 2 diantaranya mengandung E. coli sebanyak 38 MPN dan 27 MPN. Hal ini dapat memungkinkan terjadinya kontaminasi minuman es teh dengan bakteri yang terdapat pada air isi ulang.
Sedangkan pada hasil Penelitian Fathoni Afif dkk (2015) tentang Identifikasi Bakteri Escherichia Coli pada Air Minum Isi Ulang yang
33
Diproduksi Depot Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Padang Selatan Sebanyak 10 dari 13 sampel yang diproduksi 13 depot air minum isi ulang di Kecamatan Padang Selatan Hasil pemeriksaan laboratorium menunjukkan bahwa 2 sampel memenuhi persyaratan untuk dilakukan uji kualitatif. Satu dari 2 sampel uji kualitatif menunjukkan hasil positif dan menunjukkan pertumbuhan koloni bakteri. Tidak ditemukan bakteri Escherichia coli sehingga kemungkinan ditemukannya bakteri patogen enterik lainnya lebih rendah. Hasil pemeriksaan biokimia menunjukkan adanya bakteri Pseudomonas aeruginosa pada sampel tersebut.
Sampel pada media BGLB yang positif dilanjutkan ke tahap konfirmasi atau identifikasi apakah benar sampel yang didapat merupakan bakteri Escherichia coli atau bukan dengan menggunakan media Endo agar. Endo agar merupakan media selektif sekaligus media differensial dari bakteri yang memfermentasikan laktosa dan bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa, yang mana bakteri ini berasal dari saluran pencernaan. Endo Agar sering digunakan untuk mengkonfirmasi hasil dari pemeriksaan presimtif atau pendugaan Coliform. Hasil dari fermentasi laktosa adalah asam dan aldehid yang diproduksi oleh bakteri seperti Escherichia coli bereaksi dengan fuchsin sehingga pada media terlihat koloni dan pinggirannya berwarna merah yang disertai juga warna brilian metalik yang berkilau. Adapun bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa membentuk warna koloni yang transparan (dedy, 2016).
Pada Media Endo agar bakteri yang tidak dapat memfermentasi laktosa seperti Salmonella sp, dan Shigella sp. koloni dan media akan berwarna transparan atau tidak berwarna karena bakteri tidak memfermentasi laktosa.
Sedangkan pada bakteri yang dapat memfermentasi laktosa seperti Escherichia coli, Klebsiella sp. koloni dan media akan berwarna merah atau merah muda, karena memfermentasi laktosa.
Selain media Endo Agar Adapun media lain yang bisa dipakai seperti Media EMB Agar (Eosin Methylene Blue Agar), EMB Agar merupakan media selektif dan media diferensial, media ini selektif untuk menumbuhkan bakteri
gram negatif dan pada umumnya digunakan untuk isolasi dan diferensiasi bakteri non fecal coliform dan fecal coliform. Media EMB digunakan untuk membedakan antara koloni bakteri yang dapat memfermentasi laktosa dengan yang tidak dapat memfermentasi laktosa. Di media EMB juga ditambahkan sukrosa untuk membedakan antara koloni bakteri coliform yang mampu memfermentasi sukrosa lebih cepat dari laktosa dengan koloni bakteri yang tidak mampu memfermentasi sukrosa
Pada metode penanaman pada media Endo agar menggunakan metode gores, teknik ini lebih menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu, Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.
Inokulum digoreskan di permukaan media agar dalam cawan petri dengan jarum ose. Di antara garis-garis goresan akan terdapat sel-sel yang cukup terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni. Cara penggarisan dilakukan pada medium pembiakan padat bentuk lempeng. Bila dilakukan dengan baik teknik inilah yang paling praktis.
Sampel yang tercemar bakteri Total Coliform dimungkinkan berasal dari limbah yang dihasilkan oleh manusia yang tinggal disekitar lokasi yang meresap melalui tanah dan mencemari sumber air. Pencemaran air oleh bakteri Total Coliform sangat berbahaya, karena bakteri golongan ini mengandung bakteri Escherichia.coli yang merupakan penyebab utama penyakit diare. Penyakit diare sangat berbahaya karena dapat menyebabkan kehilangan cairan dengan jumlah yang sangat besar. Jika terus menerus kehilangan cairan, maka dapat mengakibatkan kematian. Oleh karena itu sangat perlu untuk dilakukan pengawasan kualitas air yang digunakan.
Berdasarkan penelitian Dyna Putri Mayaserli dan Dwi Anggraini tentang Identifikasi Bakteri Escherichia colli pada Jajanan Bakso Tusuk di Sekolah Dasar Kecamatan Gunung Talang pada Tahun 2018 disimpulkan bahwa pada setiap sampel bakso tusuk yang diuji telah terjadi cemaran bakteri baik melebihi ambang batas maupun tidak melebihi ambang batas, Jumlah koloni 1 dari 5 sampel yang diuji telah melebihi ambang batas yang telah ditentukan oleh BPOM RI tahun 2013 dengan batas cemaran maksimum 1 x 105
35
Berdasarkan penelitian Desyana Fredilla Kusuma Wardani B Mahasiswi Institut Pertanian Bogor dengan judul skripsi Identifikasi Sumber Cemaran Escherichia coli Patogen Pada Minuman Es di kota Bogor tahun 2017 dengan hasil analisa menujukan 91% sampel minuman es ,100% es batu dan 29 % fasilitas sanitasi di duga mengandung Escherichia coli.
Penelitian yang dilakukan Nona Sahdan, mahasiswi Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Alaudin Makasar tahun 2010 dengan judul penelitian ″Analisis Bakteri Coliform Pada Jajanan Anak Sekolah Dasar SD Inpres Bontamanai Makasar″, menunjukan data pada empek – empek yang paling tinggi cemaran bakteri Coliform yaitu (>1100/750 ml).
Pada penelitian Wahyu Zikra dkk (2018) tentang Identifikasi Bakteri Escherichia coli (E.coli) pada Air Minum di Rumah Makan dan Cafe di Kelurahan Jati serta Jati Baru Kota Padang Ada 13 sampel (81.25%) dari 16 sampel yang menunujukkan indeks MPN yang positif. Terdapat 3 sampel dengan indeks MPN tertinggi yaitu 115/100 ml sampel sebanyak 2 sampel dan 96/100 ml sampel sebanyak 1 sampel. Indeks MPN terendah yaitu 2.2/100 ml sampel. Sebanyak 3 sampel air minum dengan nilai indeks MPN 0/100 ml sampel. Indeks MPN didapatkan (62.5%) dikategorikan air minum yang kurang bagus, (12.5%) dikategori amat buruk, (6.25%) buruk, dan (18.75) dikategorikan sebagai air minum yang bagus.
36
Dari hasil penelitian yang dilakukan Gambaran Jumlah Bakteri Escherichia coli dan Coliform pada minuman es jajanan anak SDN di kelurahan Lubuk Buaya Padang tahun 2020 dengan jumlah sampel sebanyak 10 sampel minuman es dapat disimpulkan sebagai berikut : 1. Terdapatnya Bakteri Escherichia coli pada minuman es jajanan anak SDN
di kelurahan Lubuk Buaya Padang tahun 2020.
2. Jumlah coliform didapatkan hasil yang bervariasi yaitu pada sampel 2 dan sampel 4 total bakteri sebanyak 4 MPN/100 ml, sampel 3 dengan total bakteri 3 MPN/100 ml, sampel 8 dan sampel 10 total bakteri 15 MPN/100 ml, sampel 9 dengan total bakteri 7 MPN/100 ml, dan sampel 1, 5, 6, 7 didapatkan hasil total bakteri 0 MPN/100 ml.
3. Jumlah bakteri Escherichia coli didapatkan hasil pada sampel 9 dengan total bakteri 7 MPN/100 ml, dan sampel 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, dan 10 didapatkan hasil total bakteri 0 MPN/100 ml.
5.2 Saran
1. Pada Penelitian selanjutnya melakukan pemeriksaan jumlah bakteri Escherichia coli dan Coliform pada makanan jajanan anak-anak.
2. Disarankan kepada masyarakat agar lebih selektif dalam memilih minuman jajanan yang akan dikonsumsi oleh anaknya .
37
DAFTAR PUSTAKA
Afrisetiawati,Rani, Erly , dan Endrinaldi.2016.Identifikasi Bakteri Escherichia coli pada Air Minum Isi Ulang yang Diproduksi DAMIU di Kelurahan Lubuk Buaya Kota Padang.Jurnal Kesehatan Andalas.Vol 5(3):570-574.
Arianda,dedy.2016.Buku Saku Bakteriologi.AM-Publishing:Bekasi.
Ati,Dwi Sinta.2017.Skripsi.Analisis Higiene Sanitasi, Kandungan Zat Warna Sintetis, Pemanis Buatan, Dan Bakteri Coliform pada Minuman Es Jeruk Peras yang Dijual Pedagang Keliling di Kecamatan Medan Baru Kota Medan.Medan:Universitas Sumatera Utara.
Fitriyani.2018.Skripsi.Analisis Kandungan Pewarna Sintetis Non Pangan Pada Jajanan Di Lingkungan SMPN Kota Malang Sebagai Sumber Belajar Biologi.Malang:Universitas Muhammadiyah Malang.
Habibah,Ummi.2016.Analisis Cemaran Bakteri Coliform dan Identifikasi Escherichia coli pada Air Minum Isi Ulang (AMIU) Depot di Kelurahan Pondok Cabe Ilir Kota Tangerang Selatan.Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah:Jakarta.
Handayani, Fitri et al.2017.Identifikasi Bakteri Escherichia Coli pada Minuman Teh Kemasan Industri Rumah Tangga di Kelurahan Sungai Dama Dan Selili Menggunakan Metode Most Probable Number (Mpn).Jurnal Ilmiah Manuntung.Vol 3(1) 59-63.
Harryadi.P. 2010. Penanganan Kontaminasi Pangan Dalam Rangka Menjamin Keamanan Pangan, Workshop Pokja Keamanan PanganRencana Aksi Nasional Pangan Dan Gizi.
Ismail,Deni.2012. Uji Bakteri Escherichia Coli Pada Minuman Susu Kedelai Bermerek Dan Tanpa Merek.Surakarta:Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Jiwintarum,yunan, Agrijanti, dan Baiq Lilis Septiana.2017. Most probable number (MPN) coliform dengan variasi volume media lactose broth single strength (LBSS) dan lactose broth double strength (LBDS). Jurnal Kesehatan Prima.Vol 11(1):11-17.
Kamaliah.2017.Kualitas Sumber Air Tangkiling yang Digunakan sebagai Air Baku Air Minum Isi Ulang dari Aspek Uji MPN Total Coliform.MITL Vol 2 (2):5-12.
Maharani, S. Bherliana.2015. Karya Tulis Ilmiah.Metode Most Probable Number (MPN) Untuk Menghitung Nitrosomonas.Lampung: Universitas Lampung.
Mayaserli, Dyna Putri , dan Dwi Anggraini.2019. Identifikasi Bakteri Escherichia Colli Pada Jajanan Bakso Tusuk Di Sekolah Dasar Kecamatan Gunung Talang.Jurnal Kesehatan Perintis.Vol 6(1):30-34.
Molita,Agtaria Dwi.2017. Skripsi.Identifikasi Bakteri Escherichia Coli pada Minuman Susu Kedelai Bermerek dan Tidak Bermerek.Lampung:
Universitas Lampung.
Natasya,Safita Dila.2016.Tugas Akhir.Analisis Kuantitatif Bakteri Escherichia Coli pada Air Minum Menggunakan Metode MPN (Most Probable Number) dari Kabupaten Tobasa.Medan: Universitas Sumatera Utara.
Permenkes No.1096 Tahun 2011. Higiene Sanitasi Jasaboga. In: Indonesia, K.
R.(Ed).
Purba,Kezia Ramayana Br.2013. Analisis Higiene Sanitasi Pengolahan dan Pemeriksaan Bakteri E. Coli pada Minuman Air Kelapa Muda.Medan:
Universitas Sumatera Utara.
Ritonga Rimadani, Irnawati Marsaulina,dan Indra Chahaya.2013. Analisis Escherichia Coli Dan Higiene Sanitasi Pada Minuman Es Teh Yang Dijual Di Pajak Karona Jamin Ginting Kecamatan Medan Baru.Medan:Universitas Sumatera Utara.
Rosnita.2019.Karya Tulis Ilmiah. Gambaran Escherichia Coli Pada Minuman Es Jajanan Anak Sekolah Di Beberapa SD di Kelurahan 26 Ilir.Palembang: Politeknik Kesehatan Palembang.
Sanjaya,Tri Agung,dan Ety Apriliana.2013. Deteksi Escherichia coli Pada Jajanan Cendol Yang Dijual Di Pasar Tradisional Kota Bandar Lampung.
Medical Journal of Lampung University.ISSN 2337-3776:10-17.
Sofan,Muhammad.2018.Perbandingan Jumlah Coliform Metode Most Probable Number Dengan Chromocult Coliform Agar Pada Depot Air Minum Isi Ulang Di Kabupaten Batang. Semarang : Universitas Muhammadiyah Semarang
Trihono.2010.Kualitas air dan kesehatan masyarakat. hasil Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas). Badan Penelitian Dan Pengembangan Kesehatan Kementrian Kesehatan RI.Vol 1: 351-77.
39
Wardhany,Selvy.2019. Tugas Akhir.Analisis Bakteri Coliform pada Air Minum dengan Menggunakan Metode Most Probable Number (MPN).Medan:
Universitas Sumatera Utara.
Zikra1,Wahyu ,dan Arni Amir ,dan Andani Eka Putra.2018.Identifikasi Bakteri Escherichia coli (E.coli) pada Air Minum di Rumah Makan dan Cafe di Kelurahan Jati serta Jati Baru Kota Padang. Jurnal Kesehatan Andalas.
Vol 7(2):212-216.
40
41
LAMPIRAN 2. Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian
LAMPIRAN 3. Dokumentasi Penelitian
Gambar 1 Sampel Yang di Uji
Sumber : Dokumen Pribadi Tanggal : 22 Juni 2020
Gambar 2 Proses Pengujian Sumber : Dokumen Pribadi Tanggal : 22 Juni 2020
Gambar 3 Pengamatan Pada Laktosa Broth
Sumber : Dokumen Pribadi Tanggal : 23 Juni 2020
43
Gambar 4 Pengamatan Pada BGLB
Sumber : Dokumen Pribadi Tanggal : 24 Juni 2020
Gambar 5 Pengamatan Pada Endo agar
Sumber : Dokumen Pribadi Tanggal : 24 Juni 2020
LAMPIRAN 4. Tabel MPN
Jumlah Tabung Positif Index MPN per 100 ml 10 ml 1 ml 0,1 ml
0 0 0 0
0 0 1 3
0 0 2 6
0 0 3 9
0 1 0 3
0 1 1 6
0 1 2 9
0 1 3 12
0 2 0 6
0 2 1 9
0 2 2 12
0 2 3 16
0 3 0 9
0 3 1 13
0 3 2 16
0 3 3 19
1 0 0 4
1 0 1 7
45
1 0 2 11
1 0 3 14
1 1 0 7
1 1 1 11
1 1 2 15
1 1 3 18
1 2 0 11
1 2 1 15
1 2 2 19
1 2 3 23
1 3 0 15
1 3 1 19
1 3 2 23
1 3 3 27
2 0 0 10
2 0 1 14
2 0 2 19
2 0 3 24
2 1 0 15
2 1 1 20
2 1 2 25
2 1 3 30
2 2 0 21
2 2 1 26
2 2 2 31
2 2 3 37
2 3 0 27
2 3 1 33
2 3 2 38
2 3 3 44
3 0 0 29
3 0 1 39
3 0 2 49
3 0 3 60
3 1 0 46
3 1 1 58
3 1 2 72
3 1 3 86
3 2 0 76
3 2 1 95
3 2 2 116
3 2 3 139
47
3 3 0 190
3 3 1 271
3 3 2 438
3 3 3 ≥1898
Sumber : Tabel MPN Menurut Formula Thomas
LAMPIRAN 5. TES PENEGASAN Coliform Kode
Sampel
10 ml 1 ml 0,1 ml Total
Bakteri (MPN)
1 - - - 0
2 + - - 4
3 - + - 3
4 + - - 4
5 - - - 0
6 - - - 0
7 - - - 0
8 + + + - 15
9 + + - 7
10 + + + - 15