Persiapan Sampel

BAB III METODE PENELITIAN

3.6 Persiapan Sampel

Alat yang akan diⁱgunakan pada peⁱneⁱliⁱtiⁱan iⁱniⁱ adalah:

1. Cawan Peitrii

2. Piⁱpeⁱt Ukur 3. Iⁱnkubator 2 Geⁱlas Ukur 3 Tabung Reⁱaksiⁱ 4 Miⁱkro Piⁱpeⁱt

5 Plastiⁱk Peⁱmbungkus

6 Piⁱnseⁱt

7 Beⁱakeⁱr Glass 8 Sarung Tangan 9 Kapas

10 Koreⁱk Apiⁱ 11 Alu

12 Tiⁱmbangan 13 Autoclavei

14 Alat Tuliⁱs 15 Keⁱrtas Sariⁱng 16 Kasa

17 Allumuniⁱum Foll 18 Keⁱrtas Cakram 19 Spriⁱtus

20 Keⁱrtas Cakram 21 Oseⁱ

22 Peⁱnggariⁱs 23 Eⁱrleⁱnmeⁱyeⁱr 24 Bakiⁱ

25 Rak Tabung Reⁱaksiⁱ 26 Hot Plateⁱ

27 Tiⁱssueⁱ 28 Apiⁱ Bunseⁱn 29 Koran 30 Mortar 31 Push Ball

32 Batang Peⁱngaduk 33 Cameⁱra

Adapun bahan bahan yang diⁱgunakan pada peⁱneⁱliⁱtiⁱan iⁱniⁱ adalah:

1. Biⁱakan jamur Malasseⁱziⁱa furfur 2. Meⁱdiⁱa SDA

3. Liⁱdah Buaya (Aloeⁱ veⁱra L.) 4. Alkohol

5. Aquadeⁱs Steⁱriⁱl 6. NaCl 0,9%

7. Miⁱkonazoleⁱ 3.6.2 Cara Kerja

Pembuatan Media Agar Sabouraud Dextrose Agar

Peⁱmbuatan meⁱdiⁱa agar iⁱniⁱ akan diⁱlakukan diⁱ Laboratoriⁱum Miⁱkrobiⁱologiⁱ Fakultas Keⁱdokteⁱran Uniⁱveⁱrsiⁱtas Muhammadiⁱyah Sumateⁱra Utara. Adapun langkah langkah yang akan diⁱlakukan dalam peⁱmbuatan meⁱdiⁱa agar adalah seⁱbagaiⁱ beⁱriⁱkut:

1. Seⁱrbuk SDA diⁱtiⁱmbang seⁱbanyak 10 gram dan masukkan keⁱ dalam wadah

2. Larutkan keⁱ dalam 500 mL akuadeⁱst

3. Keⁱmudiⁱan meⁱdiⁱa diⁱpanaskan dan diⁱaduk sampaiⁱ larut

4. Seⁱlanjutnya meⁱdiⁱa diⁱsteⁱriⁱlkan dalam autoklaf pada suhu 121⁰C seⁱlama 15 meⁱniⁱt

5. Seⁱteⁱlah iⁱtu meⁱdiⁱa diⁱtuangkan seⁱbanyak 20 mL keⁱ dalam cawan peⁱtriⁱ dan diⁱbiⁱarkan hiⁱngga meⁱdiⁱa meⁱngeⁱras.

Determinasi Tanaman

Tahapan peⁱrtama adalah meⁱlakukan ujiⁱ deⁱteⁱrmiⁱnasiⁱ yang beⁱrtujuan untuk meⁱngeⁱtahuiⁱ dan meⁱngiⁱdeⁱntiⁱfiⁱkasiⁱ keⁱbeⁱnaran tanaman yang diⁱgunakan dalam peⁱneⁱliⁱtiⁱan baiⁱk dariⁱ ciⁱriⁱ ciⁱriⁱ morfologiⁱ daun deⁱngan acuan buku. Ujiⁱ deⁱteⁱrmiⁱnasiⁱ tanaman diⁱlakukan diⁱ Laboratoriⁱum Fakultas MIⁱPA- Uniⁱveⁱrsiⁱtas Sumateⁱra Utara.

Pengambilan Bahan

Sampeⁱl daun yang diⁱgunakan diⁱambiⁱl seⁱcara acak, deⁱngan meⁱmiⁱliⁱh tanaman deⁱngan daun yang seⁱgar, beⁱrwarna hiⁱjau, dan beⁱrsiⁱh yang diⁱpeⁱroleⁱh diⁱ Seⁱiⁱ Agul, Keⁱcamatan Meⁱdan Barat, Meⁱdan, Sumateⁱra Utara.

Pembuatan Simplisia Daun Lidah Buaya

Tanaman liⁱdah buaya diⁱcuciⁱ beⁱrsiⁱh keⁱmudiⁱan diⁱkupas dan diⁱambiⁱl bagiⁱan dagiⁱngnya saja, keⁱmudiⁱan diⁱpotong keⁱciⁱl. Seⁱteⁱlah iⁱtu liⁱdah buaya teⁱrseⁱbut diⁱkeⁱriⁱngkan meⁱnggunakan oveⁱn deⁱngan suhu 50 deⁱrajat ceⁱlciⁱus. Jiⁱka sudah keⁱriⁱng, haluskan liⁱdah buaya teⁱrseⁱbut deⁱngan meⁱnggunakan bleⁱndeⁱr hiⁱngga meⁱnjadiⁱ seⁱrbuk dan diⁱayak deⁱngan meⁱnggunakan ayakan nomor 40 meⁱsh hiⁱngga diⁱpeⁱroleⁱh seⁱrbuk halus.⁷

Cara keⁱdua biⁱsa diⁱlakukan adalah liⁱdah buaya yang sudah diⁱpotong dan diⁱcuciⁱ beⁱrsiⁱh teⁱrseⁱbut diⁱkeⁱriⁱngkan deⁱngan suhu ruang seⁱlama 3 hariⁱ tanpa teⁱrpapar cahaya matahariⁱ. Seⁱteⁱlah iⁱtu, reⁱndam liⁱdah buaya teⁱrseⁱbut deⁱngan eⁱtanol 70%

seⁱlama 3-5 hariⁱ dan sariⁱng deⁱngan meⁱnggunakan keⁱrtas sariⁱng, diⁱlanjutkan deingan meilakukan rotary eⁱvaporator.

Pembuatan Ektrak Lidah Buaya (Aloe vera L.)

Peⁱmbuatan eⁱkstrak liⁱdah buaya akan diⁱlakukan diⁱ Laboratoriⁱum Biⁱokiⁱmiⁱa Fakultas Keⁱdokteⁱran Uniⁱveⁱrsiⁱtas Muhammadiⁱyah Sumateⁱra Utara. Langkah langkah peⁱmbuatan eⁱkstrak liⁱdah buaya adalah seⁱbagaiⁱ beⁱriⁱkut:³⁴

1. Seⁱrbuk liⁱdah buaya yang sudah diⁱdapat keⁱmudiⁱa diⁱtiⁱmbang seⁱbanyak 250 gram diⁱmasukkan keⁱ dalam labu Eⁱrleⁱnmeⁱyeⁱr dan diⁱreⁱndam deⁱngan meⁱnggunakan eⁱtanol 70% seⁱbanyak 1000 mL seⁱlama 5 kaliⁱ 24 jam 2. Pastiⁱkan beⁱrada pada wajah teⁱrtutup dan tiⁱdak teⁱrkeⁱna cahaya matahariⁱ,

seⁱlama proseⁱs maseⁱrasiⁱ harus seⁱseⁱriⁱg mungkiⁱn diⁱlakukan peⁱngadukan pada campuran teⁱrseⁱbut

3. Seⁱteⁱlah 5 hariⁱ campuran teⁱrseⁱbut diⁱsariⁱng deⁱngan corong kaca yang diⁱlapiⁱsiⁱ keⁱrtas sariⁱng seⁱhiⁱngga ampas caiⁱran teⁱrpiⁱsah

4. Caiⁱran teⁱrseⁱbut diⁱuapkan agar meⁱndapatkan eⁱkstrak yang beⁱbas bahan peⁱlarut deⁱngan cara diⁱmasukkan keⁱ dalam rotary eⁱvaporator deⁱngan suhu 40 deⁱrajat ceⁱlciⁱus

5. Hasiⁱl yang diⁱdapat adala larutan yang leⁱbiⁱh keⁱntal dan peⁱkat

6. Keⁱmudiⁱan larutan teⁱrseⁱbut diⁱeⁱnceⁱrkan deⁱngan meⁱnggunakan akuadeⁱst 7. Peⁱngeⁱnceⁱran teⁱrseⁱbut seⁱsuaiⁱ deⁱngan konseⁱntrasiⁱ yang diⁱiⁱngiⁱnkan yaiⁱtu

80%, 85% dan 90%.

Identifikasi Senyawa (Uji Fitokimia) 1. Alkaloiⁱd

Ambiⁱl seⁱdiⁱkiⁱt sampeⁱl dan tambahkan deⁱngan HCL 2M lalu panaskan diⁱatas peⁱnangas keⁱmudiⁱan diⁱngiⁱnkan deⁱngan suhu kamar. Tambahkan NaCl seⁱrbuk lalu aduk dan sariⁱngkan, fiⁱltrateⁱ diⁱtambahkan HCL 2M hiⁱngga volumeⁱ teⁱrteⁱntu.

Seⁱlanjutnya bagiⁱ fiⁱlteⁱr meⁱnjadiⁱ 2 tabung reⁱaksiⁱ diⁱmana tabung 1 tadiⁱtambah reⁱageⁱn Wargeⁱr dan tabung 2 seⁱbagaiⁱ blangko. Amatiⁱ peⁱmbeⁱntukan eⁱndapan tabung 1 diⁱbandiⁱngkan tabung 2 dan hasiⁱlnya diⁱkatakan meⁱngandung alkaloiⁱd jiⁱka teⁱrbeⁱntuk eⁱndapan.^35,36

2. Saponiⁱn

Masukkan sampeⁱl seⁱbanyak 1 mg keⁱ dalam tabung reⁱaksiⁱ, keⁱmudiⁱan tambahkan aquadeist lalu kocok dan diiamkan teirleibiih dulu. Jiika teirbeintuk buiih dan tiⁱdak hiⁱlang dalam waktu 30 meⁱniⁱt artiⁱnya bahan teⁱrseⁱbut meⁱngandung saponiⁱn.^35,15

3. Flavonoiⁱd

Larutkan sampeⁱl deⁱngan eⁱtanol absolut dan bagiⁱ meⁱnjad 2 tabung diⁱmana tabung 1 seⁱbagaiⁱ tabung ujiⁱ dan tabung 2 seⁱbagaiⁱ tabung blangko. Keⁱmudiⁱan tambahkan tabung 1 deⁱngan HCL peⁱkat seⁱbanyak 2 teⁱteⁱs. Hangatkan tabung meⁱnggunakan peⁱnangas seⁱlama 15 meⁱniⁱt dan amatiⁱ peⁱrubahan warna yang teⁱrjadiⁱ. Jiⁱka teⁱrbeⁱntuk warna meⁱrah kuat atau viⁱoleⁱt artiⁱnya bahan meⁱngnadung flavonoiⁱd.³⁵

4. Tanniⁱn dan Poliⁱfeⁱnol

Tambahkan sampeⁱl deⁱngan aquadeⁱst panas keⁱmudiⁱan aduk rata dan diⁱngiⁱnkan. Tambahkan 5 teⁱteⁱs NaCl 10% keⁱmudiⁱan sariⁱng, dan bagiⁱakan fiⁱltrateⁱ meⁱnjadiⁱ 3 diⁱmana tabung 1 seⁱbagaiⁱ blangko, tabung 2 tambahkan deⁱngan 3 teⁱteⁱs FeⁱCl3 dan tabung 3 tambahkan deⁱngan larutan geⁱlatiⁱn. Jiⁱka pada tabung 3 teⁱrdapat eⁱndapan beⁱrartiⁱ meⁱngandung tanniⁱn. Dan jiⁱka pada tabung tabung meⁱmbeⁱntuk seⁱlaiⁱn warna hiⁱjau keⁱcoklatan maka artiⁱnya meⁱngandung seⁱnyawa poliⁱfeⁱnol.³⁵

5. Teⁱrpeⁱnoiⁱd

Sampeⁱl liⁱdah buaya diⁱtambahkan deⁱngan vaniⁱlliⁱn dan H2SO4 peⁱkat dan jiⁱka teirjadii peirubahan warna ungu beibeirtii posiitiif meingandung teirpeinoiid.³⁵

6. Feⁱnolat

Larutan FeⁱCl3 1% diⁱtambahkan deⁱngan sampeⁱl keⁱmudiⁱan liⁱhat peⁱrubahan warna yang teirjadii. Diikatakan posiitiif jiika beirubah meinjadii warna hiijau, meirah ungu, biⁱru dan hiⁱtam.³

3.7 Pengelolaan dan Analisis Data