Saran - KESIMPULAN DAN SARAN - AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PANDAN WANGI (Pandanu

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN

B. Saran

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN

DAFTAR PUSTAKA

Agustiningsih, Windan, A., dan Mindaningsih., 2010, Optimasi Cairan Penyari pada Pembuatan Ekstrak Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifous Roxb.) Secara Maserasi Terhadap Kadar Fenolik dan Flavonoid Total, Momentum, 6(2), 36 – 41.

Akhlaghi, M., dan Bandy, B., 2009, Mechanisms of flavonoid protection against myocardial ischemia-reperfusion injury, Journal of Molecular and Cellular Cardiology, 46(3), 309 – 317.

Arnao, M. B., 2000, Some Methodological Problems In The Determination Of Antioxidant Activity Using Chromogen Radicals: A Practical Case, Trends in Food Science & Technology, 11 (2000), 419 – 421.

Chang, C., Yang, M., Wen, H., dan Chern, J., 2002, Estimation of Total Flavonoid Content in Propolis by Two Complementary Colorimetric Methods, Journal of Food and Drug Analysis, 10(3), 178 – 182.

Dalimartha, S., 2000, Atlas Tumbuhan Obat Indonesia, Trubus Agriwidya, Bogor, 105 – 106.

Depkes RI., 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta.

Dewanti, N. I., dan Sofian, F. F., 2017, Aktivitas Farmakologi Ekstrak Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.), Journal Farmaka, 15(2), 193.

Erlidawati, Safrida, dan Mukhlis, 2008, Potensi Antioksidan Sebagai Antidiabetes, Syiah Kuala University Press, Banda Aceh.

Fitriana, W. D., Fatmawati, S., dan Ersam T., 2015, Uji Aktivitas Antioksidan terhadap DPPH dan ABTS dari Fraksi-fraksi Daun Kelor (Moringa oleifera), Prosiding Simposium Nasional Inovasi dan Pembelajaran Sains, Bandung.

Gandjar, G.H., dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta.

Ghasemzadeh, A., dan Jaafar, H.Z., 2013, Profiling of Phenolic Compounds and Their Antioxidant and Anticancer Activities in Pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb.) extracts from Different Locations of Malaysia, Journal bmc Complementary and Alternative Medicine, 13(341), 4 – 8.

Harmita, 2006, Analisis Fisikokimia, Universitas Indonesia press, Depok.

Lee, B. W., Lee, J. H., Gal, S. W., Moon, Y. H., dan Park, K. H., 2006, Selective ABTS Radical-Scavenging Activity of Prenylated Flavonoids from Cudrania tricuspidate, Journal Biosci Biotechnol Biochem, 70(2), 427–432.

Lin, H., Kuo, Y. H., Lin, Y. L., dan Chiang, W., 2009, Antioxidative Effect and Components From Leaves of Lotus (Nelumbo nucifera), 57(15), 6623 – 6629.

Miean, K.H., dan Mohamed, S., 2001, Flavonoid (Myricetin, Quercetin, Kaemferol, Luteolin, and Apigenin) Content of Edible Tropical Plants, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 49(6), 3107 – 3110.

Molyneux, P., 2004, The Use of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity, Songklanakarin J. Sci.

Technol, 26 (2), 211 – 219.

Najib, A., 2018, Ekstraksi Senyawa Bahan Alam, Deepublish, Yogyakarta.

Nakiboglu, M., Urek, R. O., Kayali, H. A., dan Tarhan, L., 2007, Antioxidant Capacities of Endemic Sideriris Sipylea and Origanum Sipyleum From Turkey, Journal Food Chemistry, 104(2), 630 – 635.

Nur, I. M., 2020, Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi n-Heksan Ekstrak Etanol Daun Katuk (Sauropus androgynus (l.) Merr.) Dengan Metode ABTS Serta Penetapan Kadar Flavonoid Total, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Wahid Hasyim Semarang.

Oliveira, S, Glalci, A.S., Camila, R.E., Thuany, A.S., Edmar, S, Oriana, A. F., Marcelo, J., Pena, F., dan Paulete, R., 2014, Evaluation of Antiradical Assays Used in Determining The Antioxidant Capacity of Pure Compounds and Plant Extracts, Quim.Nova, 37(3), 497 – 503.

Ou, B., Huang, D., Woodill, M. H., Flanagan, J. A., 2002, Analysis of Antioxidant Activities of Common Vegetables Employing Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) and Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) Assay:

A Comparative Study, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 50(11), 8 – 3122.

Ozgen, M., Reese, R. N., Tulio, A. Z., Scheerens, J. C., dan Miller, A. R., 2006.

Modified 2,2-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) method to measure antioxidant capacity of selected small fruits and comparison to ferric reducing antioxidant power (FRAP) and 2,2’-diphenyl- 1-picrylhydrazyl (DPPH) methods. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 54, 1151 – 1157.

Pamungkas, D. K., Retnaningtyas, Y., dan Wulandari, L., 2017, Pengujian Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Metanol Daun Mangga Gadung (Mangifera indica L. Var. gadung) dan Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.), e-jurnal Pustaka Kesehatan, 5(1), 48 – 49.

Poojary, R., Kumar, N.A., Kumarachandra, R., dan Sanjeev, G., 2016, Evaluation of Invitro Antioxidant Properties of Hydro Alcoholic Extract of Entire Plant of Cynodon Dactylon, Journal Young Pharmacists, 8(4), 378 – 384.

Prior, R. L., Wu, X., dan Schaich, K., 2005, Standarized Methods Determination of Antioxidants Capacity and Phenolics in Food and Dietary Supplement, Journal Agriculture Food Chemistry, 55, 4290 – 4302.

Puspitasari, A.D., dan Wulandari, 2017, Aktivitas antioksidan, penetapan kadar fenolik dan flavonoid total ekstrak daun kersen (Munitingia calabura L), Pharmaciana, 7 (2), 147 – 158.

Puspitasari, A. D., Anwar, F. F dan Faizah, N. G., 2019, Aktivitas Antioksidan Penetapan Kadar Fenolik Total dan Flavonoid Total Ekstrak Etanol, Etil Asetat dan N-heksan Daun Petai (Parkia speciosa Hassk.), Jurnal Ilmiah Teknosains, 5(1), 2 – 4.

Rafi, M., Widyastuti, N., Suradikusumah, E., dan Darusman, L. K., 2012, Aktivitas Antioksidan serta Kadar Fenol dan Flavonoid Total Dari Enam Tumbuhan Obat Indonesia, Jurnal Bahan Alam Indonesia, 8(3), 162 – 163.

Rahayu, S. E., dan Handayani, R., 2008, Keanekaragaman Morfologi dan Anatomi Pandanus (Pandanaceae) di Jawa Barat, Journal vis Vitalis, 1(2), 40 – 41.

Safitri I., Nuria, M. C., dan Puspitasari, A. D., 2018, Perbandingan Kadar Flavonoid dan Fenolik Total Ekstrak Metanol Daun Beluntas (Pluchea indica L.) Pada Berbagai Metode Ekstraksi, Jurnal Inovasi Teknik Kimia, 3(1), 31 – 36.

Sami, F.J., dan Rahimah, S., 2016, Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Bunga Brokoli (Brassica oleracea L. var. Italica) dengan Metode DPPH (2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyl) dan Metode ABTS (2,2 azinobis (3- etilbenzotiazolin)-6-asam sulfonat), Journal Fitofarmaka Indonesia, 2( 2 ) , 107 – 110.

Setiawan, F., Yunita, O., dan Kurniawan, A., 2018, Uij Aktivitas Ekstrak Etanol Kayu Secang (Caesalpinia Sappan) Menggunkan Metode DPPH, ABTS, dan FRAP, Media Pharmaceutica Indonesia 2(2), 85 – 88.

Shalaby, E.A., dan Shanap, S.M.M., 2013, Comparison of DPPH and ABTS, Assays of Determination antioxidant potential of water and methanol extract of spirulina platensis, Indian Jornal Of Geomarine Science, 42(5), 55 – 56.

Suryani, C. L., Tamaroh, S., Ardiyan, A., dan Setyowati, A., 2017, Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Pandan (Pandanus amaryllifolius) dan Fraksi-Fraksinya, Agritech, 37(3), 271 – 279.

Tahir, M., Muflihunna, A., dan Syafrianti., 2017, Penentuan Fenolik Total Ekstrak Etanol Daun Nilam (Pogostemon cablin Benth.) Dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis, Journal Fitofarmaka Indonesia, 4(1), 215 – 216.

Tjitrosoepomo, G., 2002, Taksonomi Tumbuhan (Spermatophyata), UGM Press, Yogyakarta.

Trilaksani, W., 2003, Antioksidan: Jenis, Sumber, Mekanisme Kerja dan Peran Terhadap Kesehatan, Institut Pertanian Bogor, Bogor.

Yuslianti, E. R., 2018, Pengantar Radikal Bebas dan Antioksidan, Penerbit Deepublish, Yogyakarta.

Werdhasari, A., 2014, Peran Antioksidan Bagi Kesehatan, Jurnal Biotek Medisiana Indonesia, 3(2), 59–68.

LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman pandan wangi

48 Lampiran 1. Lanjutan ...

49 Lampiran 1. Lanjutan ...

Lampiran 2. Perhitungan rendemen simplisia ekstrak etanol 1. Susut pengeringan

Bobot awal daun pandan wangi : 1.500 gram Bobot akhir daun pandan wangi : 265 gram Susut pengeringan : 𝐁𝐨𝐛𝐨𝐭 𝐚𝐰𝐚𝐥−𝐛𝐨𝐛𝐨𝐭 𝐚𝐤𝐡𝐢𝐫

𝐛𝐨𝐛𝐨𝐭 𝐚𝐰𝐚𝐥 × 𝟏𝟎𝟎%

Susut pengeringan : 𝟏.𝟓𝟎𝟎 𝐠𝐫𝐚𝐦−𝟐𝟔𝟓 𝐠𝐫𝐚𝐦

𝟏.𝟓𝟎𝟎 𝐠𝐫𝐚𝐦 × 𝟏𝟎𝟎% = 82,333%

2. Simplisia daun pandan wangi

Bobot Segar (gram) Bobot Simplisia (gram) Rendemen Simplisia (%)

1.500 265 gram 17,67

Perhitungan : Rendemen : 𝐁𝐞𝐫𝐚𝐭 𝐬𝐢𝐦𝐩𝐥𝐢𝐬𝐢𝐚 𝐝𝐚𝐮𝐧 𝐩𝐚𝐧𝐝𝐚𝐧 𝐰𝐚𝐧𝐠𝐢

𝐛𝐞𝐫𝐚𝐭 𝐬𝐞𝐠𝐚𝐫 𝐝𝐚𝐮𝐧 𝐩𝐚𝐧𝐝𝐚𝐧 𝐰𝐚𝐧𝐠𝐢 × 𝟏𝟎𝟎%

Rendemen : ^{𝟐𝟔𝟓 𝐠𝐫𝐚𝐦}

𝟏.𝟓𝟎𝟎 𝐠𝐫𝐚𝐦× 𝟏𝟎𝟎% = 17,67%

3. Ekstrak etanol daun pandan wangi

Bobot Serbuk (gram) Bobot Ekstrak (gram) Rendemen Ekstrak (%)

250 11,7 4,68

Perhitungan : Rendemen : 𝐁𝐞𝐫𝐚𝐭 𝐞𝐤𝐬𝐭𝐫𝐚𝐤 𝐝𝐚𝐮𝐧 𝐩𝐚𝐧𝐝𝐚𝐧 𝐰𝐚𝐧𝐠𝐢

𝐛𝐞𝐫𝐚𝐭 𝐲𝐚𝐧𝐠 𝐝𝐢𝐞𝐤𝐬𝐭𝐫𝐚𝐤𝐬𝐢 × 𝟏𝟎𝟎%

Rendemen : ^{𝟏𝟏,𝟕 𝐠𝐫𝐚𝐦}

𝟐𝟓𝟎 𝐠𝐫𝐚𝐦 × 𝟏𝟎𝟎% = 4,68%

Lampiran 3. Perhitungan penimbangan larutan ABTS 7,31 mM dan K2S2O8

1. ABTS 7,31 mM

keterangan Hasil Penimbangan Berat cawan kosong 38208, 6 mg Berat cawan + ABTS 38308, 9 mg Berat cawan + sisa 38208, 7 mg

Berat ABTS 100, 2 mg

Molaritas ABTS yang dibutuhkan 7,31 mM = 7,31 x 10^-3 M BM ABTS = 548,7 gram /mol

Volume Larutan = 25 mL→ 0,025 L

Penimbangan ABTS = BM ABTS x Vol. Larutan x Molaritas ABTS

= 548,7 gram/mol x 0,025 L x 7,31 x 10^-3 M

= 100,275 x 10^-3 gram

= 100,275 mg 2. K2S2O8 (Kalium persulfat) 2,45 mM

keterangan Hasil Penimbangan Berat cawan kosong 38208, 6 mg Berat cawan + ABTS 38308, 9 mg Berat cawan + sisa 38208, 7 mg

Berat ABTS 100, 2 mg

Molaritas K2S208 yang dibutuhkan 2,37 mM = 2,37 x 10^-3 M BM K2S208 = 270,309 gram /mol

Volume Larutan = 250 mL→ 0,250 L

Penimbangan K2S208 = BM K2S208 x Vol. Larutan x Molaritas K2S208

= = 270,309 gram/mol x 0,0250 L x 2,45 x 10^-3 M

= 16, 556 x 10^-3 gram

= 16,556 mg.

Lampiran 4. Pembuatan larutan stok ekstrak etanol daun pandan wangi 1. Penimbangan larutan sampel ekstrak etanol daun pandan wangi

a. Replikasi 1

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat beker glass kosong 129393,6 mg Berat beker glass + Sampel 130393,6 mg Berat beker glass + sisa 129393,6 mg

Berat Sampel 1000 mg

b. Replikasi 2

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat beker glass kosong 129393,6 mg Berat beker glass + Sampel 130393,8 mg Berat beker glass + sisa 129393,7 mg

Berat Sampel 1000, 1 mg

c. Replikasi 3

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat beker glass kosong 129393,7 mg Berat beker glass + Sampel 130393,7 mg Berat beker glass + sisa 129393,7 mg

Berat Sampel 1000 mg

Ekstrak etanol daun pandan wangi 1000 mg dilarutkan dengan etanol p.a dan dimasukkan ke dalam labu takar 100 mL dan dicukupkan volumenya sampai tanda batas.

2. Larutan stok ekstrak etanol daun pandan wangi 1) Replikasi 1

Larutan stok ekstrak etanol = ^{𝟏𝟎𝟎𝟎 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = 𝟏.𝟎𝟎𝟎.𝟎𝟎𝟎 𝛍𝐠

𝟏𝟎𝟎 𝐦𝐋 = 10.000 μg/mL

53 Lampiran 4. Lanjutan ...

2) Replikasi 2

Larutan stok ekstrak etanol = ^{𝟏𝟎𝟎𝟎,𝟏 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = 𝟏.𝟎𝟎𝟎𝟎.𝟏𝟎𝟎 𝛍𝐠

𝟏𝟎𝟎 𝐦𝐋 = 10,001 μg/mL 3) Replikasi 3

Larutan stok ekstrak etanol = ^{𝟏𝟎𝟎𝟎 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = 𝟏.𝟎𝟎𝟎.𝟎𝟎𝟎 𝛍𝐠

𝟏𝟎𝟎 𝐦𝐋 = 10.000 μg/mL 3. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm

Dari larutan stok sampel dengan konsentrasi 10.000 ppm dipipet 1 mL kemudian dicukupkan volumenya dalam labu takar 10 ml dengan etanol p.a sehingga didapatkan konsentrasi sampel sebesar 1000 ppm

1. 10 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1.000 = 5 mL x 10 ppm V1 = 0,05 mL ~ 50 μL

Larutan stok diambil sebanyak 50 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

2. 20 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1.000 = 5 mL x 20 ppm V1 = 0,1 mL ~ 100 μL

Larutan stok diambil sebanyak 100 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL

3. 30 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1.000 = 5 mL x 30 ppm V1 = 0,15 mL ~ 150 μL

54 Lampiran 4. Lanjutan ...

Larutan stok diambil sebanyak 150 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL

4. 40 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1.000 = 5 mL x 40 ppm V1 = 0,2 mL ~ 200 μL

Larutan stok diambil sebanyak 200 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL

5. 50 ppm= V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1.000 = 5 mL x 50 ppm V1 = 0,25 mL ~ 250 μL

Larutan stok diambil sebanyak 250 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL

Lampiran 5. Pembuatan seri konsentrasi larutan asam galat 1. Penimbangan serbuk asam galat

Replikasi 1

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 27241, 5 mg Berat Kaca Arloji + Asam galat 27341, 9 mg Berat Kaca Arloji + sisa 27241, 6 mg

Berat Asam galat 100,3 mg

Replikasi 2

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 13163, 8 mg Berat Kaca Arloji + Asam galat 13262, 9 mg Berat Kaca Arloji + sisa 13164, 0 mg

Berat Asam galat 99,9 mg

Replikasi 3

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 8233, 9 mg Berat Kaca Arloji + Asam galat 8334, 9 mg Berat Kaca Arloji + sisa 8233, 9 mg

Berat Asam galat 100,2 mg

2. Pembuatan larutan induk asam galat 1.000 ppm sebanyak 100 mL Asam galat Replikasi 1 = ^{𝟏𝟎𝟎,𝟑 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟏𝟎𝟎.𝟑𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 =1.003 μg/mL Asam galat Replikasi 2 = ^{𝟗𝟗,𝟗 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟗𝟗,𝟗𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = 999 μg/mL Asam galat Replikasi 3 = ^{𝟏𝟎𝟎,𝟐 𝒎𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟏𝟎𝟎.𝟐𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟏𝟎𝟎 𝒎𝑳 = 1.002 μg/mL

Masing-masing serbuk asam galat ditimbang sebanyak 100 mg, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 100 mL pada labu takar.

56 Lampiran 5. Lanjutan ...

3. Perhitungan seri konsentrasi larutan induk asam galat a. 50 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 50 ppm V1 = 0,25 mL ~ 250 μL

Larutan stok diambil sebanyak 250 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

b. 100 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 100 ppm

V1 = 0,5 mL ~ 500 μL

Larutan stok diambil sebanyak 500 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

c. 150 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 150 ppm V1 = 0,75 mL ~ 750 μL

Larutan stok diambil sebanyak 750 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

d. 200 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 = 5 mL x 200 ppm

V1 = 1 mL ~ 1000 μL

Larutan stok diambil sebanyak 1000 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

57 Lampiran 5. Lanjutan ...

e. 250 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 250 ppm V1 = 1,25 mL ~ 1250 μL

Larutan stok diambil sebanyak 1250 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

f. 300 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 300 ppm V1 = 1,5 mL ~ 1500 μL

Larutan stok diambil sebanyak 1500 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

Lampiran 6. Pembuatan seri konsentrasi larutan kuersetin 1. Penimbangan serbuk kuersetin

Replikasi 1

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 353, 9 mg Berat Kaca Arloji + Kuersetin 453, 4 mg Berat Kaca Arloji + sisa 353, 4 mg

Berat Asam galat 100 mg

Replikasi 2

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 353, 3 mg Berat Kaca Arloji + Kuersetin 453, 3 mg Berat Kaca Arloji + sisa 353, 4 mg

Berat Asam galat 99,9 mg

Replikasi 3

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kaca Arloji kosong 353, 3 mg Berat Kaca Arloji + Kuersetin 453, 8 mg Berat Kaca Arloji + sisa 353, 47mg

Berat Asam galat 100,1 mg

2. Pembuatan larutan induk kuersetin 1000 ppm sebanyak 250 mL Kuersetin Replikasi 1 = ^{𝟏𝟎𝟎 𝒎𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟏𝟎𝟎.𝟎𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = 400 μg/mL Kuersetin Replikasi 2 = ^{𝟗𝟗,𝟗 𝒎𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟗𝟗.𝟗𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = 399,6 μg/mL Kuersetin Replikasi 3 = ^{𝟏𝟎𝟎,𝟏 𝒎𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = ^{𝟏𝟎𝟎.𝟏𝟎𝟎 𝝁𝒈}

𝟐𝟓𝟎 𝒎𝑳 = 400,4 μg/mL

Masing-masing serbuk kuersetin dari 3 replikasi ditimbang sebanyak 100 mg kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 250 mL pada labu takar.

59 Lampiran 6. Lanjutan ...

3. Perhitungan seri konsentrasi larutan induk kuersetin a. 2 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 400 = 5 mL x 2 ppm

V1 0,025 mL ~ 25 μL

Larutan stok diambil sebanyak 25 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

b. 4 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 400 = 5 mL x 4 ppm

V1 = 0,05 mL ~ 50 μL

Larutan stok diambil sebanyak 50 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

c. 6 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 400 = 5 mL x 6 ppm V1 = 0,075 mL ~ 75 μL

Larutan stok diambil sebanyak 75 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

d. 8 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 400 = 5 mL x 8 ppm

V1 = 0,1 mL ~ 100 μL

Larutan stok diambil sebanyak 100 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

60 Lampiran 6. Lanjutan ...

e. 10 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 400 = 5 mL x 10 ppm V1 = 0,125 mL ~ 125 μL

Larutan stok diambil sebanyak 125 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

f. 12 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 400 = 5 mL x 12 ppm V1 = 0,15 mL ~ 150 μL

Larutan stok diambil sebanyak 150 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

61 Lampiran 7. Pembuatan larutan induk trolox

1. Penimbangan serbuk trolox

Keterangan Hasil Penimbangan

Berat Kertas kosong 351,3

Berat Kertas + trolox 451,7 Berat Kertas + sisa trolox 351,7

Berat Trolox 100

2. Pembuatan larutan induk trolox 1000 ppm sebanyak 100 mL Trolox = ^{𝟏𝟎𝟎,𝐦𝐠}

𝟏𝟎𝟎 𝐦𝐋 = ^{𝟏𝟎𝟎.𝟎𝟎𝟎 𝛍𝐠}

𝟏𝟎𝟎 𝐦𝐋 = 1000 μg/mL

Serbuk trolox ditimbang sebanyak 100 mg, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 100 mL pada labu takar.

3. Perhitungan seri konsentrasi larutan induk trolox a. 5 ppm = V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 1000 = 5 mL x 5 ppm V1 = 0,025 mL ~ 25 μL

Larutan stok diambil sebanyak 25 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

b. 10 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1000 = 5 mL x 10 ppm

V1 = 0,05 mL ~ 50 μL

Larutan stok diambil sebanyak 50 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

62 Lampiran 7. Lanjutan ...

c. 15 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1000 = 5 mL x 15 ppm

V1 =0,075 ~ 75 μL

Larutan stok diambil sebanyak 75 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

d. 20 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1000 = 5 mL x 20 ppm

V1 = 0,1 mL ~ 100 μL

Larutan stok diambil sebanyak 100 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

e. 25 ppm = V1 x C1 = V2 x C2 V1 x 1000 = 5 mL x 25 ppm V1 = 0,125 mL ~ 125 μL

Larutan stok diambil sebanyak 125 μL, kemudian ditambahkan etanol p.a hingga 5 mL.

Lampiran 8. Hasil pembacaan absorbansi larutan trolox a. Replikasi 1

64 Lampiran 8. Lanjutan ...

b. Replikasi 2

65 Lampiran 8. Lanjutan ...

c. Replikasi 3

66 Lampiran 8. Lanjutan ...

Hasil pembacaan absorbansi sampel ekstrak etanol daun pandan wangi a. Replikasi 1

67 Lampiran 8. Lanjutan ...

b. Replikasi 2

68 Lampiran 8. Lanjutan ...

c. Replikasi 3

Lampiran 9. Hasil perhitungan nilai IC50 trolox dan sampel ekstrak etanol a. Trolox

Pada persamaan regresi linier Y = bx + a antara konsentrasi larutan uji dengan persentase aktivitas antioksidan

R1 Y = 2,4394 X + 5,4462 50 = 2,4394 X + 5,4462 X = 18, 264 μg/mL R2 Y = 2,3455 X + 7,6773

50 = 2,3455 X + 7,6773 X = 18, 044 μg/mL R3 Y = 2,3638 X + 8,1579

50 = 2,3638 X + 8,1579 X = 17, 701 μg/mL Rata-rata = 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3

= 18,264+ 18,044+ 17,701 3

= 18, 003 μg/mL

Nilai IC50 pembanding trolox sebesar 18, 003 μg/mL

70 Lampiran 9. Lanjutan ...

b. Sampel ekstrak etanol

Persamaan regresi linier dari bentuk Y = bx + a antara konsentrasi larutan uji dengan persentase aktivitas antioksidan

R1 Y = 1,1293 X + 6,1899 50 = 1,1293 X + 6,1899 X = 38,794 μg/mL R2 Y = 1,0686 X + 6,9794

50 = 1,0686 X + 6,9794 X = 40,259 μg/mL R3 Y = 1,1648 X + 3,913

50 = 1,1648 X + 3,913 X = 39,566 μg/mL Rata-rata = 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3

= 𝟑𝟖,𝟕𝟗𝟒+ 𝟒𝟎,𝟐𝟓𝟗+ 𝟑𝟗,𝟓𝟔𝟔 𝟑

= 39,540 μg/mL

Nilai IC50 ekstrak etanol daun pandan wangi sebesar 39,540 μg/mL

Lampiran 10. Hasil pembacaan absorbansi larutan induk asam galat Replikasi 1

72 Lampiran 10. Lanjutan ...

Replikasi 2

73 Lampiran 10. Lanjutan ...

Replikasi 3

74 Lampiran 10. Lanjutan ...

Hasil pembacaan absorbansi fenolik sampel ekstrak etanol daun pandan wangi

75 Lampiran 10. Lanjutan ...

Persamaan regresi linier larutan asam galat untuk replikasi 1, 2, dan 3 Replikasi Konsentrasi Absorbansi Persamaan regresi

50 0,235

Y=0,002 X + 0,135 R = 0,9995

100 0,335

150 0,450

200 0,550

250 0,641

300 0,747

50 0,224

Y= 0,002 X + 0,121 R = 0,9997

100 0,319

150 0,415

200 0,525

250 0,616

300 0,722

50 0,247

Y = 0,002 X + 0,154 R = 0,9994

100 0,351

150 0,459

200 0,557

250 0,643

300 0,744

Lampiran 11. Perhitungan kadar fenolik total ekstrak etanol daun pandan wangi

a. Data absorbansi

b. Persamaan kurva baku asam galat

R1 Y = 0,002 X + 0,121

0,362 = 0,002 X + 0,121

X = 120,5 mcg/mL

Kadar fenolik = 𝑥 𝑥 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑒𝑛𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

Kadar fenolik = 120,5 𝑥 10 𝑥 100 𝑚𝐿 1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar fenolik = 120,5 mg/gram

R2 Y = 0,002 X + 0,121

0.366 = 0,002 X + 0,121

X = 122,5 μg/mL

Kadar fenolik = 122,5 𝑥 10 𝑥 100 𝑚𝐿 1,1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar fenolik = 122,378 mg/gram Replikasi Absorbansi Pengenceran

(f)

Berat Total Sampel

Volume Total Sampel

1 0,362 10 1000 mg

100 ml

2 0,366 10 1000,1 mg

3 0,372 10 1000 mg

77 Lampiran 11. Lanjutan …..

R3 Y = 0,002 X + 0,121

0,372 = 0,002 X + 0,121

X = 125,5 μg/mL

Kadar fenolik = 125,5 𝑥 10 𝑥 100 𝑚𝐿 1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar fenolik = 125,5 mg/gram

Rata-rata kadar fenolik ekstrak etanol daun pandan wangi

= 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3 3

= (120,5+ 122,378 + 125,5)𝑚𝑔𝐺𝐴𝐸/𝑔𝑟𝑎𝑚 3

= 122,793 mgGAE/gram

Lampiran 12. Hasil pembacaan absorbansi larutan induk kuersetin Replikasi 1

79 Lampiran 12. Lanjutan ...

Replikasi 2

80 Lampiran 12. Lanjutan ...

Replikasi 3

81 Lampiran 12. Lanjutan ...

Hasil pembacaan absorbansi flavonoid sampel ekstrak etanol daun pandan wangi

82 Lampiran 12. Lanjutan ...

Persamaan regresi linier larutan kuersetin untuk replikasi 1, 2, dan 3

Replikasi Konsentrasi Absorbansi Persamaan regresi

2 0,213

Y=0,050 X + 0,137 R = 0,993

4 0,344

6 0,459

8 0,533

10 0,659

12 0,708

2 0,222

Y= 0,053 X + 0,118 R = 0,999

4 0,333

6 0,437

8 0,545

10 0,645

12 0,757

2 0,222

Y = 0,050 X + 0,124 R = 0,998

4 0,332

6 0,409

8 0,537

10 0,635

12 0,716

Lampiran 13. Perhitungan kadar flavonoid total ekstrak etanol daun pandan wangi

a. Data absorbansi

b. Persamaan kurva baku kuersetin R1 Y = 0,053 X + 0,118

0,612 = 0,053 X + 0,118 X = 9,320 μg/mL

Kadar flavonoid = 𝑥 𝑥 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑝𝑒𝑛𝑖𝑚𝑏𝑎𝑛𝑔𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

Kadara flavonoid = 9,320 𝑥 5 𝑥 100 𝑚𝐿 1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar flavonoid = 4,66 mg/gram R2 Y = 0,053 X + 0,118

0,684 = 0,053 X + 0,118 X = 10,679 μg/mL

Kadar flavonoid = 4,854 𝑥 5 𝑥 100 𝑚𝐿 1,1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar flavonoid = 4,854 mg/gram Replikasi Absorbansi Pengenceran

(f)

Berat Total Sampel

Volume Total Sampel

1 0,615 5 1000 mg

100 ml

2 0,684 5 1000,1 mg

3 0,589 5 1000 mg

84 Lampiran 13. Lampiran …..

R3 Y = 0,053 X + 0,118 0,589 = 0,053 X + 0,118 X = 8,887 μg/mL

Kadar flavonoid = 8,887 𝑥 5 𝑥 100 𝑚𝐿 1 𝑔𝑟𝑎𝑚

Kadar flavonoid = 4,443 mg/gram

Rata-rata kadar flavonoid ekstrak etanol daun pandan wangi

= 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 1+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 2+ 𝑟𝑒𝑝𝑙𝑖𝑘𝑎𝑠𝑖 3 3

= (4,66+ 4,854+ 4,443)𝑚𝑔𝑄𝐸/𝑔𝑟𝑎𝑚 3

= 4,652 mgQE/gram

85 Lampiran 14. Dokumentasi penelitian

a. Pembuatan ekstrak etanol daun pandan wangi

Daun pandan wangi Sortasi basah daun pandan wangi

Penimbangan setelah sortasi

Pengeringan dengan

oven Kadar air Proses penyerbukan

Penimbangan bahan

untuk ekstrak Maserasi Penyaringan maserat

Pemekatan Penimbangan wadah

kosong Berat ekstrak kental b. Penimbangan ekstrak etanol daun pandan wangi

Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

c. Uji aktivitas antioksidan

Penimbangan ABTS Penimbangan trolox Larutan induk ABTS

Larutan induk ekstrak Kurva baku trolox

Kurva baku sampel ekstrak etanol daun

pandan wangi d. Penetapam kadar fenolik

Penimbangan asam galat replikasi 1

Penimbangan asam galat replikasi 2

Penimbangan asam galat replikasi 3

Larutan induk asam galat

Penimbangan natrium karbonat

kurva baku asam galat

88 e. Penetapan kadar flavonoid

Penimbangan kuersetin replikasi 1

Penimbangan kuersetin replikasi 2

Penimbangan kuersetin replikasi 3

Larutan induk kuersetin Kurva baku kuersetin Sampel ekstrak etanol daun pandan wangi

Dalam dokumen AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PANDAN WANGI (Pandanus amaryllifolius Roxb.) MENGGUNAKAN METODE ABTS SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTAL (Halaman 55-103)