AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PANDAN WANGI (Pandanus amaryllifolius Roxb.) MENGGUNAKAN METODE ABTS DAN DETERMINASI. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi serta mengetahui kadar total fenolik dan flavonoid. Serbuk simplisia daun pandan wangi diekstraksi dengan cara maserasi dan digunakan pelarut etanol 96% sehingga diperoleh ekstrak etanol daun pandan wangi.
Ekstrak diuji aktivitas antioksidannya dengan metode ABTS dan ditentukan kadar total fenolik dan flavonoidnya. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pandan wangi mempunyai aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 μg/mL menggunakan Trolox Comparator untuk mendapatkan nilai IC50 μg/mL dan penentuan kadar fenolik dan flavonoid diperoleh kadar mgGAE/gram dan mgQE. /gram. Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi dan trolox sebagai perbandingan dapat tergolong antioksidan sangat kuat.
Judul Tesis: Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) Menggunakan Metode ABTS dan Penentuan Kandungan Total Fenolik dan Flavonoid. “Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) menggunakan metode ABTS dan penentuan kandungan total fenolik dan flavonoid”.
PENDAHULUAN
- Latar Belakang
- Rumusan Masalah
- Tujuan Penelitian
- Manfaat Penelitian
- Tinjauan Pustaka
- Tanaman Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.)
- Khasiat dan Manfaat Tanaman
- Ekstraksi
- Radikal bebas
- Antioksidan
- Fenolik
- Flavonoid
- Metode ABTS
- Spektrofotometri UV-Vis
- Landasan Teori
- Hipotesis
Senyawa yang dapat berperan sebagai antioksidan antara lain senyawa fenolik dan flavonoid. 0.5:0.5) dalam pembuatan ekstrak daun pandan wangi. Ekstrak yang mampu mengekstrak senyawa fenolik dan flavonoid daun pandan wangi secara maksimal adalah etanol 96% yang memberikan kandungan total fenolik sebesar 478,7629 RE/g ekstrak dibandingkan dengan resorsinol dan total kandungan flavonoid sebesar 99,4086 RE/g ekstrak dengan perbandingan rutin. Berdasarkan hal tersebut penulis melakukan penelitian aktivitas antioksidan ekstrak etanol 96% daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) dengan metode ABTS dan menentukan kandungan total fenol dengan menggunakan asam galat sebagai pembanding dan kandungan fenol total. total flavonoid menggunakan quercetin. sebagai perbandingan.
Ekstrak etanol daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) memiliki aktivitas antioksidan dengan metode ABTS. Untuk mengetahui aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) menggunakan metode ABTS. Penelitian ini dilakukan untuk memberikan informasi aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) yang diuji dengan metode ABTS serta kadar total fenolik dan flavonoid dalam ekstrak tersebut.
Senyawa yang dapat berperan sebagai antioksidan antara lain senyawa fenolik dan flavonoid. 0.5:0.5) dalam produksi ekstrak daun pandan wangi. Ekstrak etanol daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) mempunyai kadar senyawa total fenolik dan flavonoid tertentu.
METODE PENELITIAN
Bahan dan Alat yang Digunakan
- Bahan
- Alat
Jalannya Penelitian
- Pengumpulan dan pengolahan sampel tanaman
- Determinasi tanaman
- Pembuatan serbuk daun pandan wangi
- Pembuatan ekstrak etanol daun pandan wangi
- Uji aktivitas antioksidan dengan metode ABTS
- Penentuan kadar fenolik total
- Penentuan kadar flavonoid total
Larutan dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml, ditambahkan etanol pa sampai tanda batas hingga mencapai konsentrasi 1000 ppm (Arnao, 2000). Ekstrak etanol daun pandan wangi ditimbang sebanyak 1000 mg menggunakan cawan porselen, kemudian dilarutkan dengan etanol pa secukupnya hingga seluruh ekstrak larut, kemudian larutan dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml dan ditepatkan volumenya hingga tandai dengan etanol p.a. untuk mencapai konsentrasi 10.000 ppm (Puspitasari dan Wulandari, 2017). Sebanyak 100 mg asam galat ditimbang lalu ditambahkan etanol p.a dalam labu ukur 100 ml sampai tanda tera sehingga diperoleh konsentrasi larutan asam galat 1000 ppm (Puspitasari dkk., 2019).
Ekstrak etanol daun pandan wangi ditimbang hingga 1000 mg menggunakan cawan porselen kemudian dilarutkan dengan analisis etanol secukupnya hingga seluruh ekstrak larut. Larutan kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml dan ditepatkan volumenya dengan analisis etanol (Puspitasari dan Wulandari, 2017). Quercetin ditimbang 100 mg lalu dilarutkan dengan etanol pa dalam labu takar 250 ml. Ditambahkan etanol p.a pada tanda tersebut sehingga diperoleh konsentrasi larutan kuersetin sebesar 400 ppm (Puspitasari dkk., 2019). AlCl3 sebanyak 500 mg dilarutkan dalam etanol p.a dalam labu takar 5 ml, kemudian ditambahkan etanol p.a sampai batas tertentu (Puspitasari dkk., 2019).
Kalium asetat sebanyak 500 mg dilarutkan dalam etanol p.a dalam labu takar 5 ml, tambahkan etanol p.a hingga tanda batas (Puspitasari dkk., 2019). Ekstrak etanol daun pandan wangi ditimbang sebanyak 1000 mg dengan gelas kimia porselen, kemudian dilarutkan dengan etanol secukupnya hingga seluruh ekstrak larut, kemudian larutan tersebut ditambahkan ke dalam campuran.
Analisis Data
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
- Determinasi Tumbuhan
- Pembuatan Serbuk Daun Pandan Wangi
- Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi
- Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode ABTS
- Penetapan Kadar Fenolik Total
- Penetapan Kadar Flavonoid Total
Perhitungan rendemen ekstrak etanol daun pandan wangi disajikan pada Lampiran 2. Ekstrak kental daun pandan wangi yang diperoleh mempunyai warna hitam kecoklatan dengan ciri khas aroma daun pandan wangi dan tekstur kental. Penampakan ekstrak kental daun pandan wangi ditunjukkan pada Gambar 5. Ekstrak etanol daun pandan wangi. Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) ditunjukkan pada Tabel IV.
Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun pandan wangi dapat dikatakan memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC50 sebesar 39,540 μg/mL. Hasil perhitungan nilai rata-rata IC50 dapat dilihat pada Tabel V. Nilai rata-rata IC50 perbandingan Trolox dan ekstrak etanol daun pandan wangi. Berdasarkan hal tersebut, panjang gelombang maksimum yang diperoleh pada 742 nm hampir sama dengan yang diperoleh Puspitasari dkk. Gelombang ini dapat digunakan untuk membaca serapan sampel ekstrak etanol daun pandan wangi secara spektrofotometri UV-Vis. Kurva baku asam galat dibuat sebanyak 3x ulangan yang digunakan untuk menghitung kandungan fenolik total ekstrak etanol daun pandan wangi, ditentukan dengan melihat nilai koefisien korelasi (r) yang mendekati 1.
Kurva persamaan regresi linier y = bx+a antara kandungan total fenolik larutan ekstrak etanol daun pandan wangi ditunjukkan pada Gambar 8. Penentuan kandungan total fenolik ekstrak etanol daun pandan wangi menggunakan asam galat sebagai larutan standar yang termasuk dalam fenol alami yang stabil dan biasanya digunakan sebagai standar dalam menentukan kandungan fenolik total ekstrak tumbuhan. Hal ini menunjukkan bahwa setiap gram ekstrak etanol daun pandan wangi mengandung fenol setara dengan 122,793 mg asam galat.
Dengan demikian, panjang gelombang tersebut dapat digunakan untuk membaca serapan sampel ekstrak etanol daun pandan wangi menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Kurva persamaan regresi linier y = bx + a antara kandungan flavonoid larutan uji (x) dengan serapan (y) ekstrak etanol daun pandan wangi ditunjukkan pada ulangan 2, ditunjukkan pada Gambar 10. dari total flavonoid Kandungan ekstrak etanol daun pandan wangi dilakukan secara spektrofotometri UV-Vis.
Hasil penentuan kandungan flavonoid total ekstrak etanol daun pandan wangi adalah 4,652 mgQE/gram. Hasil penentuan kandungan total flavonoid pada ekstrak etanol daun pandan wangi dapat dilihat pada Tabel XI. Ekstrak etanol daun pandan wangi memiliki kandungan fenolik dan flavonoid masing-masing sebesar 122,793 mgGAE/gram dan 4,652 mgQE/gram, serta memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 sebesar 39,540 μg/mL termasuk dalam kategori antioksidan sangat kuat. .
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Saran
Agustiningsih, Windan, A., dan Mindaningsih., 2010, Optimasi cairan penyaring pada produksi ekstrak daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifous Roxb.) secara maserasi terhadap kadar total fenolik dan flavonoid, Momentum. Akhlaghi, M. dan Bandy, B., 2009, Mekanisme perlindungan flavonoid terhadap cedera reperfusi iskemia miokard, Jurnal Kardiologi Molekuler dan Seluler. Ghasemzadeh, A. dan Jaafar, H.Z., 2013, Profil senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dan antikankernya dalam ekstrak Pandan (Pandanus amaryllifolius Roxb.) dari berbagai lokasi di Malaysia, Journal bmc Complementary and Alternative Medicine.
M., 2020, Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi n-Heksan Ekstrak Etanol Daun Katuk (Sauropus androgynus (l.) Merr.) Menggunakan Metode ABTS dan Penentuan Kadar Flavonoid Total, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim semarang. Poojary, R., Kumar, N.A., Kumarachandra, R., dan Sanjeev, G., 2016, Evaluasi Sifat Antioksidan Invitro Ekstrak Hidroalkohol Seluruh Tanaman Cynodon Dactylon, Jurnal Apoteker Muda. Puspitasari, A.D., dan Wulandari, 2017, Aktivitas antioksidan, penentuan kandungan total fenolik dan flavonoid ekstrak daun kersen (Munitingia calabura L), Pharmaciana.
Setiawan, F., Yunita, O., dan Kurniawan, A., 2018, Uji aktivitas ekstrak etanol kayu Secang (Caesalpinia Sappan) menggunakan metode DPPH, ABTS dan FRAP, Media Pharmaceutica Indonesia. Shalaby, E.A., dan Shanap, S.M.M., 2013, Perbandingan DPPH dan ABTS, Uji potensi antioksidan ekstrak air dan metanol spirulina platensis, Indian Jornal Of Geomarine Science. Tahir, M., Muflihunna, A. and Syafrianti., 2017, Penentuan total fenolik pada ekstrak etanol daun nilam (Pogostemon cablin Benth.) menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis, Jurnal Fitofarmaka Indonesia.
Lampiran 4. Pembuatan larutan stok ekstrak etanol daun pandan wangi 1. Timbang larutan sampel ekstrak etanol daun pandan wangi. Ekstrak etanol daun pandan wangi sebanyak 1000 mg dilarutkan dalam etanol p.a dan dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml dan volumenya dinaikkan hingga tanda batas. Masing-masing serbuk asam galat ditimbang sebanyak 100 mg, kemudian ditambahkan etanol sebanyak 100 ml dan dimasukkan ke dalam labu takar.
