BAB V SIMPULAN DAN SARAN
5.2 Saran
Perlu dilakukan pengujian verifikasi dengan parameter lainnya seperti spesifitas untuk melengkapi parameter verifikasi.
DAFTAR PUSTAKA
L A M
P
I
R
A
N
Ditimbang Ammonium asetat sebanyak 192,70 mg dengan menggunakan wadah timbang
Disaring larutan Ammonium asetat 2 mM menggunakan penyaring vakum
Dimasukkan selang fase gerak pada instrument LC-MS/MS ke dalam botol fase gerak Ammonium Asetat
Dimasukkan filtrat ke dalam botol berukuran 500 mL, Disonikasi selama 3 menit
Lampiran 1 Pembuatan Fase Gerak 1. Fase Gerak
a. Ammonium Asetat 2mM sebanyak 500 mL
Dilarutkan dengan aquadest, lalu homogenkan dengan spatel
Dimasukkan 250 mL aquadest ke dalam labu ukur 500 mL
Dipindahkan larutan ammonium asetat ke dalam labu ukur 500 mL yang sudah ditambahkan aquadest
Ditepatkan dengan aquadest hingga tanda batas, homogenkan
Dimasukkan selang fase gerak pada instrument LC-MS/MS ke dalam botol fase gerak asetonitril
Diukur sebanyak 350 mL asetonitril ke dalam gelas ukur
Diukur sebanyak 500 mL asetonitril ke dalam gelas ukur b. Asetonitril 100 % sebanyak 350 mL
Lampiran 2 Pembuatan Asetonitril dalam Asam Format 0,1%
2. Pembuatan Asetonitril dalam Asam Format 0,1% sebanyak 500 mL
Dimasukkan ke dalam botol cokelat dan disonikasi selama 3 menit
Dipipet 500 µL asam format 0,1% dengan mikropipet, Dipindahkan ke gelas ukur yang berisi asetonitril
Dimasukkan ke dalam botol cokelat dan homogenkan
Ditimbang setara sebanyak 5 mg standar Asam Salisilat
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Dipipet sebanyak 500 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 1000 µg/mL
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Lampiran 3 Pembuatan Larutan Stock Standar Carvedilol 1000 µg/mL
3. Larutan Stock Standar Asam Salisilat 1000 µg/mL
Lampiran 4 Larutan Kerja Standar Asam Salisilat 4. Larutan Kerja Standar Asam Salisilat
a. Larutan Kerja Standar Asam Salisilat 100000 ng/mL
Ditepatkan dengan metanol hingga tanda batas, homogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Dilarutkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril sebanyak ¾ labu ukur, lalu disonikasi selama 2 menit
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Lampiran 5 Pembuatan Larutan Standar Asam Salisilat (Working Standar) 5. Pembuatan Larutan Standar Asam Salisilat (Working Standar)
WS 1 (Konsentrasi 500 ng/mL)
Dipipet sebanyak 25 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 ng/mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Dipipet sebanyak 50 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 ng/mL
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril WS 2 (Konsentrasi 1000 ng/mL)
WS 3 (Konsentrasi 50 ng/mL)
WS 3 (Konsentrasi 100000 ng/mL)
Dipipet sebanyak 200 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 µg/mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dipipet sebanyak 40 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 µg/mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dipipet sebanyak 80 µL dari larutan stock Asam Salisilat 100000 µg/mL WS 4 (Konsentrasi 20000 ng/mL)
WS 5 (Konsentrasi 40000 ng/mL)
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dipipet sebanyak 120 µL dari larutan stock Asam Salisilat 100000 µg/mL
WS 7 (Konsentrasi 80000 ng/mL)
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dipipet sebanyak 160 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 µg/mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dipipet sebanyak 200 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 µg/mL
Dilarutkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril sebanyak ¾ labu ukur, lalu di sonikasi selama 3 menit WS 8 (Konsentrasi 10000 ng/mL)
Lampiran 6 Pembuatan Larutan Stock QC
6. Pembuatan Larutan Stock QC 1000 µg/mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Ditimbang setara sebanyak 5 mg standar Asam Salisilat
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Ditepatkan dengan metanol hingga tanda batas, homogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dipipet sebanyak 500 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 1000 µg/mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Lampiran 7 Pembuatan Larutan Stock QC
7. Pembuatan Larutan Stock QC
a. Larutan Kerja (A) Stock 100000 ng/mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Dipipet sebanyak 30 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 ng/mL
8. Pembuatan Larutan Kerja QC
a. QC-L (Quality Control Low)
b. QC-M (Quality Control Medium)
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dipipet sebanyak 100 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat 100000 ng/mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
c. QC-H (Quality Control High)
Lampiran 9 Pembuatan Larutan Stock Internal Standar Celecoxib
9. Pembuatan Larutan Stock Internal Standar Celecoxib 1000 µg/mL Dipipet sebanyak 150 µL dari larutan stock standar Asam Salisilat
100000 ng/mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 2 mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan 0,10% Asam Format dalam Asetonitril
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik
Ditimbang seksama sebanyak 5 mg standar Celecoxib
Dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
Dilarutkan dengan metanol sebanyak ¾ labu ukur, lalu disonikasi selama 2 menit
Ditepatkan dengan metanol hingga tanda batas, homogenkan dengan kocok selama 30 detik
Dipipet sebanyak 2500 µL dari larutan stock standar Celecoxib 1000 µg/mL Lampiran 10 Pembuatan Larutan Kerja Internal Standar Celecoxib
10. Pembuatan Larutan Kerja Internal Standar Celecoxib 10.000 ng/mL
Dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL
Diencerkan dan ditepatkan dengan metanol
Dihomogenkan dengan kocok selama 30 detik