loMoARcPSD|32624688
Dvpt proses pembekuan pencairan
TECNICHE DI BIOCHIMICA E BIOLOGIA MOLECOLARE (Università della Calabria)
Machine Translated by Google
Kin Ho, Serguei Tchessalov, Angela Kantor, Nicholas Warne Pengembangan Produk Obat, Wyeth Biopharma
Proses Pencairan untuk Massal Biologis dalam Tas Sekali Pakai Pengembangan Freeze dan
ke sistem laboratorium untuk penilaian protein. Dalam ketiga kasus tersebut, siklus pembekuan-pencairan dikembangkan untuk sistem laboratorium agar sesuai dengan jejak suhu skala produksi spesifik produk, atau sesuai dengan braket yang ditentukan.
non.
perpindahan panas [11]. Konfigurasi penanganan dan pengangkutan tersedia
pengeringan beku, tampaknya hanya sedikit perhatian yang diberikan pada pengembangannya
dapat dirancang untuk mengoptimalkan operasi pembekuan-pencairan dengan meminimalkan konsentrasi krio dan waktu pembekuan. Geometri wadah persegi panjang dapat dimanipulasi sedemikian rupa sehingga laju pembekuan ditentukan terutama oleh konduksi panas satu dimensi, atau suhu. Peningkatan skala linier kemudian didasarkan pada kesetaraan suhu
[1-4]. Tekanan-tekanan ini dapat menyebabkan pengendapan buffer yang mengakibatkan pH
Meminimalkan tekanan ini untuk mencapai stabilitas produk maksimum produk obat klinis, untuk memasok klinis awal yang berpotensi panjang
risiko kontaminasi silang, khususnya di berbagai fasilitas produk. Penggunaan bahan sekali pakai dikombinasikan dengan produksi beku-cair
stabilitas produk yang sama.
Mengembangkan proses pembekuan-pencairan yang kuat untuk mempertahankan produk dan masuk. Sistem tas sekali pakai dapat dirancang untuk menyediakan a
menurunkan. Dalam publikasi terbaru, P. Shamlou [14] mendemonstrasikannya penyimpanan jangka panjang bahan obat dalam wadah yang nyaman dan
hemat biaya. Tiga studi kasus berfokus pada pengembangan siklus beku-cair dalam kantong sekali pakai menggunakan sistem kriopreservasi.
Tinjauan Farmasi Amerika 1 sikap adalah pendekatan baru yang dirancang untuk memungkinkan jangka pendek atau panjang
beberapa keunggulan dibandingkan sistem kontainer kaku tradisional termasuk
biaya perawatan. Sistem sekali pakai sebenarnya bisa menghilangkan
akan menghasilkan karakteristik produk yang sama dan akibatnya kemudian dicairkan dan diselesaikan sesuai permintaan pasar, atau sesuai kasus
proses. Selain itu, tingkat pembekuan dan pencairan juga penting
teknologi yang memungkinkan untuk membekukan sub-obat berbasis protein
koneksi aseptik, dan menghilangkan kebutuhan akan pipa keras di rumah tion hingga detail dalam mendefinisikan proses pembekuan dan pencairan [9, 10].
bahwa geometri wadah pembekuan adalah parameter kunci, dan itu
jarak pembekuan yang lebih pendek untuk volume tertentu dibandingkan wadah kaku yang tersedia secara komersial, sehingga secara signifikan mengurangi resistensi terhadap
stabilitas sangat penting untuk pengawetan dan penyimpanan produk. Berbeda dengan
untuk mempertahankan profil suhu produk yang setara atau 'riwayat termal' produk serupa [12], dan laju pengeringan yang setara [13]. Dia
volume produksi (beban) minimum dan maksimum. Untuk studi protein konsentrasi tinggi, protein model digunakan dalam pengembangan siklus dalam upaya untuk menghilangkan fenomena pendinginan super yang diamati.
Penyimpanan zat obat beku bersifat konservatif dan umum
pergeseran [5, 6], konsentrasi garam untuk mengganggu kestabilan protein [7], dan pembukaan sebagian protein [8], yang semuanya dapat menyebabkan hilangnya aktivitas.
tas dapat dengan mudah disimpan dalam pilihan freezer: dada, tegak,
Oleh karena itu, teknologi mendapatkan perhatian.
Prinsip ini dapat diterapkan untuk meningkatkan skala proses freeze-thaw atau Pengembangan dimulai dari sistem produksi, kemudian diturunkan skalanya
metode yang disukai, ketika penyimpanan lebih lama diperlukan, karena manfaatnya meningkatkan stabilitas produk, memperpanjang umur simpan, dan mengurangi potensi pertumbuhan mikroba. Zat obat dapat dibekukan,
percaya bahwa profil suhu produk atau laju pengeringan serupa
Pembekuan-pencairan, bila digabungkan dengan kantong sekali pakai, akan memberikan hasil yang baik
sterilisasi kemudian semakin mengurangi modal serta operasional dan fleksibilitas operasional dan pengurangan kebutuhan modal. Beku
percobaan. Namun, tekanan beku-cair dapat timbul selama proses ini karena denaturasi dingin dan panas, konsentrasi beku (konsentrasi krio), dan interaksi zat terlarut dengan antarmuka es-cair.
faktor yang dapat mempengaruhi stabilitas dan aktivitas protein, dan memerlukan perhatian harus menjadi tujuan utama ketika mengembangkan pembekuan-pencairan
proses pembekuan-pencairan. Untuk peningkatan skala pengeringan beku, hal ini penting untuk memudahkan pengiriman. Selain itu, sistem tas pra-sterilisasi juga ditawarkan
D
Perkenalan
Ringkasan
Strategi Pengembangan (Scale-down).
loMoARcPSD|32624688
Ho_APR 09/07/08 15:23 Halaman 2
HTF: cairan perpindahan panas
HMW: spesies dengan berat molekul tinggi Singkatan
TC: termokopel
Gambar 1.
kedalaman kantong 16,6L = lebar kantong 30 atau 100 mL
Panjang jalur pembekuan-pencairan yang sama untuk sistem skala produksi dan laboratorium:
mengembangkan formulasi zat obat yang stabil pada –20°C versus –80°C, atau
profil stabilitas, pendekatan bracketing menjadi lebih menarik.
Semua parameter ini harus dipertimbangkan dalam rencana pengembangan freeze-thaw.
tergantung pada volume penanganan. Dan
tabungan. Logistik operasional untuk penyimpanan dan pengiriman produk adalah
laju pembekuan dan pencairan menghasilkan suhu produk yang setara
biasanya bahan yang diekstrusi bersama terdiri dari beberapa lapisan film. Itu Pertimbangan untuk Pengembangan Siklus Freeze-Thaw
berdasarkan stabilitas produk protein dan suhu kerapuhan
fasilitas manufaktur komersial untuk memvalidasi hanya satu resep untuk pencairan harus dilakukan secepat sistem dapat beroperasi untuk mencegahnya
beban pada tingkat operasi produksi maksimum. Tergantung pada ruang lingkup proyek dan pengalaman kami dengan protein yang diminati, hal ini berbeda-beda Gambar 1, dimana lebar kantong 30 atau 100 mL sama dengan kedalamannya
memodelkan profil produk minimum dan maksimum pada produksi
anil berikutnya tidak akan menyebabkan kristalisasi yang tidak diinginkan, yang mana kisaran –80°C hingga –20°C. Suhu penyimpanan yang dipilih pada akhirnya ditentukan oleh stabilitas produk. Jika memungkinkan, sebaiknya dilakukan
skalabilitas tidak hanya bergantung pada profil suhu produk, tetapi juga volume penanganan, memungkinkan fasilitas manufaktur menggunakan satu standar
profil suhu produk yang dihasilkan. Jika dilakukan dengan benar,
jejak suhu dari skala produksi yang dijalankan, jika sesuai, atau 2) film diekspos pada atau di bawah suhu kerapuhan yang ditentukan
pendekatan pencocokan untuk produksi dengan ukuran batch tetap. Setelah
mendapatkan lebih banyak pengalaman kemudian dalam pengembangan dan dengan lebih berkembang zat obat dibekukan dan disimpan pada suhu –50°C mungkin masuk akal
(100L untuk sistem 6 kantong dan 16,6L untuk sistem 1 kantong). Lebih disukai di
baik pada skala pengembangan, sehingga memodelkan minimum dan maksimum disebabkan oleh pembekuan dan menghasilkan produk yang homogen saat dicairkan.
profil suhu untuk 2 sistem yang berbeda harus berbeda karena perbedaan skala. Resep standar untuk laju pembekuan-pencairan maksimum diharapkan dapat menghasilkan berbagai profil suhu produk
yang disebut kesetaraan jejak suhu produk. Bekukan-cairkan
sangat penting, tidak hanya untuk stabilitas produk, namun juga untuk integritas wadah sekali pakai. Bahan konstruksi kantong plastik sekali pakai adalah
dengan sengaja memperlambat proses pembekuan-pencairan untuk menampung banyak hal proses pembekuan-pencairan pada dasarnya lambat [1]. Baik beku maupun
profil masa depan (kesetaraan konsentrasi krio). Konsep kesetaraan ini harus diterapkan pada tahap pembekuan dan pencairan.
pengalaman dengan protein. Masuk akal juga untuk menggunakan profil titik harus dikembangkan dalam sistem pengembangan untuk
setelah dibekukan pada suhu –50°C, jika produk stabil pada suhu –20°C dan dirancang untuk memiliki jarak beku-cair yang setara, seperti yang ditunjukkan pada
Suhu penyimpanan beku untuk bahan biologis umumnya turun
kecepatan operasi (tingkat pembekuan-pencairan maksimum), terlepas dari Selama pembekuan, suhu titik setel dan waktu pemrosesan menghasilkan
Pilihan kami untuk pendekatan pembangunan meliputi: 1) pencocokan dirancang untuk menjalani beberapa siklus pembekuan-pencairan, proses di mana
Karena besarnya sistem produksi untuk pembekuan massal
berpotensi membahayakan integritas tas. Sebuah operasi di mana pencampuran selama pencairan meminimalkan efek konsentrasi krio
resep untuk mengelompokkan beban minimum (4.2L) dan beban maksimum
mengelompokkan beban produksi dengan pencairan beku yang lebih cepat dan lebih lambat, dihasilkan untuk beban minimum dan maksimum. Dua set terpisah
Untuk mendapatkan tingkat pembekuan-pencairan yang setara dengan produksi kantong pada 30 atau 100 mL. Baik sistem produksi maupun pengembangan
profil suhu dan waktu yang setara untuk larutan target,
Seperti yang telah disebutkan sebelumnya, definisi suhu beku-cair
dan sistem pembangunan, maka diperlukan adanya sistem pembangunan kecepatan selama pencairan mempengaruhi hasil operasi pembekuan-pencairan.
vinil asetat (EVA). EVA memiliki suhu kerapuhan sekitar –70°C dan –76°C [15, 16].
Mengingat wadahnya beku
dan juga menyediakan waktu pengoperasian batch yang wajar. Maksimal
merupakan faktor kunci yang dapat mempengaruhi kinerja pembekuan (konsentrasi pembekuan dan waktu pembekuan).
sebagai suhu penyimpanan. Namun, beberapa produk mungkin disimpan pada suhu –20°C
penelusuran skala produksi mungkin lebih disukai karena kurangnya
suhu yang lebih rendah untuk mewujudkan biaya energi dan peralatan jangka panjang
sistem skala dianggap dapat diskalakan satu sama lain dan setara
tarif tercepat yang ditentukan untuk menjaga stabilitas produk melalui studi yang sesuai.
Seperti disebutkan sebelumnya, tujuan dari peningkatan atau penurunan skala adalah untuk digunakan profil.
juga lebih menguntungkan pada suhu beku yang lebih tinggi.
pendekatan dapat diambil. Diperlukan lebih banyak upaya dan waktu untuk
mengembangkan siklus penelusuran yang sesuai. Pada awal pengembangan produk, pencocokan a film plastiknya. Masuk akal jika suhu bekunya sama
seluruh rangkaian batch produksi dan beberapa operasi produk.
dua profil produk yang sangat berbeda akan terjadi
Sistem yang tersedia secara komersial untuk pencairan beku biomaterial dalam kantong sekali pakai berisi modul pembekuan-pencairan, yang dapat menampung hingga 100L dengan sistem 6 kantong dengan masing-masing 16,6L (skala produksi penuh), atau 1 kantong sistem dengan kapasitas 16,6L (skala
produksi percontohan atau lebih kecil). Sistem pengembangan skala lab dapat menampung hingga 10
juga geometri tas. Geometri wadah pembekuan Parameter terprogram termasuk suhu, waktu dan pencampuran
kantong yang tersedia secara komersial untuk penyimpanan beku dibuat dengan etilen
dampak potensial seperti kerusakan produk dan masalah stabilitas,
volume penanganan lebih kecil. Titik setel
dari tas 16.6L. Dengan desain ini, produksi dan pengembangan
skala.
dapat mempengaruhi stabilitas produk. Bahan biologis beku harus dicairkan
Machine Translated by Google
20
-20
-40 -50
30
-70 -10
30 25 20 15 10
5 0 -5 -10 -15 -60
0
0123 02468
10
-30
-20 -25
6 912 15 3
-20
0 -60
40
0 20
Waktu, jam -40
Studi kasus
PERTANYAAN#6 Titik Setel HTF
Pencairan 15°C, plasebo, produksi PERTANYAAN#5
PERTANYAAN#7 PERTANYAAN#4
Suhu,
Suhu,
Suhu,
Siklus pembekuan-pencairan cepat dan siklus pembekuan-pencairan lambat dilakukan dengan menggunakan zat obat pada 25 mg/mL pada sistem pengembangan untuk memastikan siklus produksi. Proses ini secara reproduktif mengelompokkan siklus tercepat (satu kantong 16,6L berisi 4,2L) dan siklus paling lambat (enam kantong 16,6L) dalam sistem produksi. Tidak ada pengaruh signifikan terhadap kualitas protein yang diamati setelah zat obat mengalami hingga 5x siklus beku-cair menggunakan program siklus cepat dan lambat.
Selain itu, produk obat terliofilisasi yang dibuat dari larutan yang sebelumnya mengalami siklus beku-cair tidak menunjukkan pengaruh signifikan terhadap kualitas protein (data tidak ditampilkan).
Studi kelayakan ini dilakukan untuk antibodi monoklonal (mAb1) 150kDa dalam pengembangan produk tahap akhir. Saat ini, obat
Saat ini bahan obat dari protein fusi komersial disimpan dalam keadaan beku dalam wadah baja tahan karat. Seringkali wadah bahan obat, setelah mengeluarkan jumlah yang diperlukan untuk pengisian dan liofilisasi, tidak mengandung volume yang cukup untuk dibekukan kembali di wadah lain karena jumlahnya kurang dari muatan minimum pada 18L. Pembekuan-pencairan dalam kantong sekali pakai dapat mengatasi masalah ini karena ukuran kantong (16,6 L) sudah sesuai. Bahan obat sisa dari setiap batch produk obat dapat dibekukan, dan kemudian dicairkan ketika kantong bahan obat tersedia dalam jumlah yang cukup untuk menghasilkan batch produk obat. Model 6 kantong dipilih terutama karena kapasitas pencairan yang dibutuhkan.
Produk obat dengan konsentrasi tinggi mengurangi volume suntikan, dan selama produksi, hal ini berarti lebih sedikit volume untuk ditangani dan disimpan.
Studi Kasus #1
Tinjauan Farmasi Amerika
dengan lima slot kosong. Profil suhu produk yang dihasilkan kemudian digunakan sebagai kontrol untuk mengembangkan siklus pembekuan-pencairan sistem pengembangan, menggunakan metode bracketing yang dijelaskan di atas.
Dua program siklus dikembangkan dalam sistem skala pengembangan: fast freeze-thaw dan slow freeze-thaw. Siklus pembekuan-pencairan cepat dirancang untuk menghasilkan laju pendinginan dan pemanasan yang lebih cepat dibandingkan dengan beban 4,2L pada skala produksi, sedangkan siklus pembekuan-pencairan lambat dapat menghasilkan laju yang lebih lambat dibandingkan dengan pembekuan dan pencairan bahan 100L pada skala produksi.
skala produksi. Pembekuan dan pencairan volume 4,2 L diharapkan menjadi proses tercepat dibandingkan volume yang diizinkan, sedangkan pembekuan- pencairan volume 100 L diperkirakan menjadi proses paling lambat. Siklus dalam sistem pengembangan, yang lebih lambat dari 100L dan lebih cepat dari 4,2L, pada prinsipnya harus mencakup semua kemungkinan profil suhu produk yang dapat dihasilkan dalam sistem produksi. Gambar 3 dan 4 mengilustrasikan contoh profil suhu produk pendinginan/pemanasan dan perbandingan laju menggunakan profil suhu produk 4,2L dan profil kantong 30mL untuk pembekuan-pencairan cepat.
Namun, konsentrasi protein yang lebih tinggi dapat dengan mudah menyebabkan tingkat konsentrasi pembekuan yang lebih tinggi selama pembekuan-pencairan sehingga dapat menyebabkan degradasi yang tidak diinginkan. Meminimalkan jarak pembekuan dapat menjadi cara yang efektif untuk menghindari konsentrasi pembekuan, dan sistem kantong sekali pakai merupakan pilihan wadah yang baik.
Diketahui dari pengalaman sebelumnya dengan konjugat ini bahwa pembekuan-pencairan dapat menyebabkan peningkatan kadar toksin tak terkonjugasi, bahan aktif yang biasanya terkonjugasi secara stabil ke protein.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi stabilitas konjugat dengan menyaring kondisi beku-cair yang sesuai untuk proses ini. Kami tahu bahwa tingkat pencairan sangat penting untuk menjaga stabilitas, dan, jika tidak optimal, juga dapat menyebabkan curah hujan. Kami mencoba 3 siklus pembekuan- pencairan yang berbeda: laju maksimum pada skala produksi dengan titik setel pencairan pada 25°C atau 15°C, serta kondisi kontrol yang sesuai dengan laju model produksi 6 kantong. Formulasi plasebo (hanya protein) digunakan sebagai larutan uji pada skala produksi untuk menghemat bahan konjugat.
Dua kondisi diselidiki pada skala produksi: total muatan maksimum 100L (6 kantong pada 16,6L) dan muatan minimum 4,2L
Kadar protein dan toksin tak terkonjugasi dinilai menggunakan 3 siklus yang dikembangkan dalam sistem skala produksi dan dikonversi ke sistem pengembangan. Laju pencairan maksimum pada 15°C dipilih untuk pelaksanaan produksi berdasarkan data stabilitas dan pengamatan curah hujan (data tidak ditampilkan). Gambar 2 menunjukkan contoh jejak plasebo pada skala produksi dibandingkan dengan skala pengembangan. Pada kedua skala, profil suhu-waktu
menunjukkan kesetaraan. Studi Kasus #3
Bentuk sediaan konsentrasi tinggi dapat memberikan fleksibilitas dalam uji klinis. Mengobati penyakit kronis memerlukan terapi dalam jumlah besar untuk mengakomodasi dosis besar dalam jangka waktu lama.
3 Studi Kasus #2
Ada kebutuhan untuk memperpanjang masa kadaluarsa bahan obat antibodi terkonjugasi untuk fleksibilitas produksi di lokasi kontraktor. Salah satu pilihannya adalah membekukan zat obat tersebut. Setelah mempertimbangkan beberapa opsi pembekuan, maka dipilihlah model sekali pakai (model satu kantong) pada skala produksi, terutama karena ukuran batch 30L cocok untuk
konfigurasi kantong 16,6L, yaitu 2 kantong dapat menampung batch tersebut.
Sensitivitas stabilitas ukuran batch produksi konjugat dan tetap ini mengarahkan keputusan pengembangan untuk menggunakan pendekatan pencocokan.
zat disimpan dalam wadah baja tahan karat (muatan minimum 18L) pada suhu – 50°C yang terhubung ke sistem penyimpanan beku wadah yang tersedia secara komersial. Studi pengembangan menunjukkan bahwa HMW meningkat pada beberapa siklus pembekuan-pencairan, dan HMW disebabkan oleh adanya manitol. HMW juga mempunyai efek skala dengan kehadiran manni
TC#10, 30mL
TC#9, 30ml TC#9, 30mL
4.2L
TC#10, 30ml 4.2L
Waktu berjalan, jam Waktu berjalan, jam
Gambar 2.
Gambar 3.
Plasebo pada pencairan 15°C, jejak skala laboratorium vs. jejak produksi
Perbandingan profil suhu produk antara kantong 4,2L dan 30mL. Pendinginan (A) dan pemanasan (B) dalam kantong 30mL lebih cepat dibandingkan kantong 4,2L.
4.2L TC#9, 30mL TC#10, 30mL
Suhu,
3 -20
20
6 912 15 -60
0 -40
-80 0 40
Laju 1.5
0
Suhu produk,°C 1
-0,5
-3 -23
0,5 3
2.5 2
-18 -13 -8
-40 20
0 -60
5 0
20
10 25
40
-20
15 -80
-23 -6
-3 0
-2 1
-3 -1
-63 -43
-4
Suhu produk,°C -5
Perbandingan laju pendinginan (A) dan laju pemanasan (B) antara kantong 4,2 L dan
30mL. Pendinginan dan pemanasan dalam kantong 30mL lebih cepat dibandingkan kantong 4,2L.
Contoh siklus pembekuan lambat: mAbM hingga 150 mg/mL dengan 10 jejak TC, tanpa pendinginan super
hamparan jejak suhu mAb1 dan mAbM, tidak ada pendinginan super yang diamati untuk 10 termokopel mana pun hingga 10 kali pengoperasian dengan dan tanpa manitol.
Dua dari 10 jejak termokopel menunjukkan pendinginan super
Gambar 6.
Gambar 7.
Gambar 4.
Gambar 5.
Laju
Suhu,
Waktu, jam
Sekali lagi, untuk menghemat bahan, beberapa bahan pasca pembekuan dibekukan dan dicairkan 5 kali lagi setelah penambahan manitol.
Model 6 tas dipilih untuk mAb1. Kami memutuskan pendekatan bracketing untuk pengembangan siklus beku-cair. Dengan pendekatan serupa dengan Studi Kasus 2, upaya dilakukan untuk mengembangkan siklus pembekuan- pencairan. Suhu –70°C dimasukkan selama pembekuan untuk nukleasi es.
Fenomena tak terduga, pendinginan super, diamati pada sistem pengembangan dengan penurunan suhu beku (Gambar 5). Peristiwa supercooling ini bersifat sporadis dan tidak menunjukkan pola frekuensi kejadian maupun posisi kantong. Fenomena ini belum teramati pada skala produksi, kemungkinan karena kantong berskala besar dengan volume larutan yang besar umumnya dapat menyediakan tempat nukleasi yang cukup untuk pembentukan es. Dalam pengembangan
Terakhir, program set point yang direvisi digunakan untuk mengevaluasi stabilitas mAb1. Gambar 7 menunjukkan overlay mAb1 dan mAbM saat menggunakan siklus yang direvisi.
sistem fenomena super pendinginan diamati dalam 2 dari 3 percobaan dan terjadi secara acak pada protein atau buffer run. Terjadinya supercooling tidak hanya mempengaruhi penghitungan nominal waktu pembekuan (5°C hingga – 5°C), namun juga berkaitan dengan tingkat konsentrasi protein.
Konsentrasi protein yang lebih tinggi tampaknya berkorelasi dengan tingkat ketidakpastian yang lebih tinggi dalam terjadinya supercooling. Dampak pendinginan super selama pembekuan-pencairan belum diketahui. Oleh karena
itu, siklus pembekuan-pencairan dengan pendinginan super jelas tidak dianggap sebagai siklus yang kuat. Karena tol. Ketika manitol hadir, pengurangan volume proses mempertahankan tingkat
HMW dibandingkan dengan beban maksimum [17]. Sebagai solusi cepat, manitol dikeluarkan dari bahan obat untuk mululasi, dan ditambahkan kembali selama proses produk obat.
Untuk menghilangkan supercooling, beberapa revisi dilakukan pada program set point termasuk memperpanjang durasi pembekuan awal menjadi 15 menit dari 5 menit, dan menurunkan suhu pembekuan awal untuk memfasilitasi nukleasi. Program revisi ini pertama kali dicoba pada buffer sebanyak 5 kali, kemudian dicoba pada larutan mAbM bebas manitol sebanyak 5 kali, dan terakhir pada larutan mAbM yang mengandung manitol. Tidak ada
pendinginan super yang teramati pada salah satu dari 15 proses (contoh pada Gambar 6). Singkatnya persediaan mAb1 yang terbatas, model protein mAbM digunakan untuk
pengembangan siklus dalam upaya menghilangkan pendinginan super.
ry, fenomena pendinginan super tidak terlihat pada salah satu dari 15 proses dengan konsentrasi protein hingga 150 mg/mL, yang meniru konsentrasi potensial mAb1. Semua proses juga menunjukkan reproduktifitas yang baik.
Gambar 8 merangkum hasil stabilitas penelitian. MAb1 tanpa manitol tetap stabil hingga 5x siklus beku-cair dalam kantong sekali pakai pada semua konsentrasi yang diuji. Dengan formulasi mAb1 pada 50mg/mL yang mengandung manitol, diamati bahwa HMW meningkat seiring dengan jumlah siklus, dan laju pembekuan-pencairan yang lebih cepat tampaknya lebih menguntungkan stabilitas mAb1. Hasil penelitian, mAb1 dengan manitol 50mg/
mL tidak direkomendasikan sebagai formulasi bahan obat untuk penyimpanan beku dalam kantong sekali pakai. Pada konsentrasi tinggi dengan dan tanpa manitol, HMW tidak mengalami perubahan
Beberapa faktor mendorong kami untuk menyelidiki teknologi pembekuan- pencairan sekali pakai. Hal ini termasuk permintaan akan bentuk sediaan dengan konsentrasi tinggi, terbatasnya ketersediaan sistem penyimpanan beku dalam wadah untuk aplikasi di masa depan, dan keinginan untuk membekukan kembali sejumlah kecil bahan obat (<18L). Oleh karena itu, studi kelayakan dimulai untuk mengevaluasi pembekuan-pencairan bahan obat mAb1 pada konsentrasi tinggi dengan dan tanpa manitol. Pada akhirnya hasilnya dapat digunakan untuk merekomendasikan konsentrasi dan formulasi zat obat baru,
serta proses produksi produk obat.
Bahan mAbM disiapkan pada 50, 100 dan 150 mg/mL, dan diisi ke dalam kantong. Kantong tersebut kemudian dibekukan dan dicairkan sebanyak 5 kali.
Suhu,
TC#9, 30mL TC#10, 30mL 4.2L
Waktu, jam
Ho_APR 09/07/08 15:23 Halaman 4
loMoARcPSD|32624688
Titik Setel HTF
Pasal 9, 150 Pasal 4, 50
Pasal 8, 100 TS#3, 150
Produksi Pasal 7, 50 Pasal 6, 150 Pasal #2, 100 PERTANYAAN#1, 50
TC#10, penyangga TS#5, 100
Jalankan 2, TC#6, mAbM Titik Setel HTF
Jalankan 5, TC#4, mAb1 40
-80 -60 -40 20 0
0369 -20
Waktu, jam
PERTANYAAN#9 Titik Setel HTF
PERTANYAAN#8
Persyaratan #10
Machine Translated by Google
FT cepat
8
150 orang 2
Siklus 6
Linier (50+orang) 0
0123456
12 50+pria
4 10
50 orang
100+ orang
Wu. Interpharm Press, Buffalo Grove, IL 2. Arakawa, T., SJ Prestrelski, WC Kenney dan JF Carpenter.
Biokimia. mol. 25(4): 281-305 4.D.Greiff, R.Kelly. Kriotoleransi enzim (1966)
Profil pembekuan-pencairan telah berhasil dikembangkan dan telah menunjukkan kelayakan operasi pembekuan-pencairan dengan bahan sekali pakai untuk ketiga studi kasus. Sistem produksi selalu diprogram untuk berjalan pada kecepatan tercepat untuk pembekuan dan pencairan, yang memungkinkan satu resep umum (profil set-point) terlepas dari ukuran muatannya. Merupakan praktik yang lebih baik dalam manufaktur komersial untuk menggunakan dan memvalidasi hanya satu resep untuk seluruh rangkaian batch produksi.
Kriobiologi, 2: 335-341 5. KA
Pikal-Cleland, N. Rodriguez-Hornedo, G. Amidon. Denaturasi protein selama pembekuan dan pencairan dalam sistem buffer fosfat: Beta-Galactosidase monomer dan tetramerik. (2000) Lengkungan.
Pembekuan bahan obat berbasis protein dalam kantong sekali pakai adalah a Kesetaraan profil suhu produk antara sistem produksi dan pengembangan
digunakan untuk peningkatan atau penurunan skala.
Liza Rivera untuk eksperimen sistem produksi.
5
14. P. Shamlou, L. Breen, W. Bell, M. Pollo, B. Thomas. Teknologi freeze-thaw baru yang dapat diskalakan untuk solusi protein massal. (2007)
Faktor-faktor yang mempengaruhi stabilitas protein jangka pendek dan jangka panjang.
Referensi 1. R.
Wisniewski, V. Wu. Bab. 2: Pembekuan dan pencairan produk biofarmasi dalam skala besar. Bioteknologi dan Manufaktur, Pengolahan, dan Pelestarian
Biofarmasi - Seri Teknologi Pembuatan Obat, Vol. 2, Diedit oleh K.Avis, V.
mAb1 ketika >100mg/mL dapat dianggap sebagai formulasi zat obat tanpa masalah stabilitas beku-cair. Selain itu, zat obat mAb1 yang mengandung manitol pada konsentrasi tinggi dapat menghilangkan penambahan manitol selama produksi produk obat, sehingga menghemat waktu dan tenaga proses.
(2001) Tinjauan Pengiriman Obat Tingkat Lanjut 46 (Mar): 307-326 3. P.
Privalov. Denaturasi protein secara dingin. (1990) Kritik. Putaran.
Bioteknologi. Aplikasi. Biokimia. 46 (bagian 1): 13-25 15.
J. Brydson. Bahan Plastik, Edisi ke-7. (1999) Elsevier 16. Ikhtisar – Ethylene Vinyl Acetate Copolymer (EVA), Kelas film. www.matweb.com 17. K. Ho, D. Luisi, D.
Sek, A. Kantor, N. Warne.
Karakterisasi cryo freeze-thaw larutan antibodi monoklonal dalam baja tahan karat:
pengaruh skala proses dan tingkat eksipien. (2005) Pertemuan Tahunan AAPS, Nashville, TN
Biofarmasi. 45(3): 249-257 10. E.Cao,
Y.Chen, Z.Cui dan P. Foster. Pengaruh laju pembekuan dan pencairan terhadap denaturasi protein dalam larutan air.
(2003) Bioteknologi & Bioteknologi 82(6): 684-90 11. S. Webb, J.
Webb, T. Hughes, D. Sesin, A. Kincaid. Pembekuan biofarmasi menggunakan teknik umum – dan besarnya konsentrasi pembekuan skala besar. Biofarmasi (2002) 15(5):
22-34 12. S. Tchessalov, D. Dixon, N. Warne. Prinsip peningkatan siklus liofilisasi.
(2007) Farmasi Amerika. Ulasan, 10 (2): 88-92 13. S. Tsinontides, P. Rajniak, D.
Pham, W. Hunke, J. Placek, S.
sebagai fungsi dari siklus beku-cair. Temuan ini memberi kami solusi jangka panjang yang layak terhadap masalah pembentukan HMW. Mengandung manitol
Reynolds. Pengeringan beku – prinsip dan praktik untuk keberhasilan peningkatan skala manufaktur. (2004) Int. J. Farmasi. 280: 1-16
Biokimia. Biofisika. 384(2): 398-406 6.
B.Chang, C.Randall. Penggunaan analisis termal subambien untuk mengoptimalkan liofilisasi protein (1992) Cryobiology, 29: 632-656 7. M. Pikal.
Pengeringan beku protein, Bagian II: Pemilihan formulasi. (1990) Biofarmasi. 4:
26-30 8. GB Strambini, E. Gabellieri.
Protein dalam larutan beku: bukti terjadinya parsial yang disebabkan oleh es. (1996) Biofisis. J.70(2): 971-976
Jarak pembekuan dan pencairan yang sama dijaga antara sistem skala produksi dan pengembangan. Tergantung pada penerapan dan situasi, pendekatan pencocokan atau pendekatan bracketing dapat dipilih untuk pengembangan siklus.
pendekatan baru yang dirancang untuk memungkinkan penyimpanan bahan obat dalam jangka panjang dalam wadah yang mudah digunakan dan sekali pakai. Penelitian ini berfokus pada pengembangan siklus pembekuan/
pencairan antibodi konsentrasi tinggi dalam kantong sekali pakai menggunakan sistem kriopreservasi.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Andrea Paulson, Matt Olsen dan
Tinjauan Farmasi Amerika
9. S. Jiang, S. Kuku. Pengaruh kondisi proses terhadap pemulihan aktivitas protein setelah pembekuan dan pengeringan beku. (1998) Euro. J.Pharm.
Pengembangan dimulai dari sistem produksi, kemudian diturunkan ke sistem laboratorium untuk penilaian protein. Siklus pembekuan dan pencairan dikembangkan untuk sistem laboratorium guna mengelompokkan kisaran produksi minimum dan maksimum menggunakan protein model. Hasilnya menunjukkan bahwa antibodi yang diteliti stabil pada 2 dari 3 kondisi/
konsentrasi yang diuji setelah beberapa kali pembekuan dan pencairan.
%HMW
6
2 0 4
0123456 10 12
Siklus 8
Hasil %HMW beku-cair yang cepat (A) dan lambat (B).
Ringkasan
Pengakuan Kesimpulan
Angka 8.
%HMW
A
B
FT lambat
Kin Ho adalah Insinyur Proses Senior dalam Pengembangan Produk Obat di Wyeth
Biopharma, Andover, MA. Dia telah bekerja di Wyeth sejak tahun 1998. Dia bertanggung jawab atas pengembangan, peningkatan skala, transfer teknis dan dukungan proses pembuatan produk obat untuk biologi berbasis protein klinis dan komersial,
serta karakterisasi fisik produk-produk ini. Minat Kin saat ini meliputi filtrasi steril, pengembangan siklus pembekuan dan pencairan, serta penurunan skala produksi baja tahan karat dan sistem Cryo sekali pakai.
Serguei Tchessalov adalah Ilmuwan Riset Utama di Departemen Pengembangan Produk Obat, Wyeth BioPharma, Andover, MA. Beliau memiliki pengalaman 25 tahun di bidang liofilisasi.
Angela Kantor adalah Peneliti Utama II di kelompok Formulasi dan Pengembangan Proses di Wyeth BioPharma. Ibu Kantor bertanggung jawab atas pengembangan bentuk sediaan untuk antibodi baru dan molekul protein lainnya. Ibu Kantor menerima gelar Master di bidang Zoologi dan Fisiologi dari Universitas Wyoming dan berada di Dana Farber Cancer Institute,
Dr. Nick Warne adalah Direktur Grup Formulasi di Wyeth BioPharma di Andover,
Massachusetts. Beliau telah bekerja di Wyeth BioPharma selama 18 tahun dan fokus pada stabilisasi protein dan pengembangan formulasi.
Dia bertanggung jawab atas formulasi bentuk terapi protein terliofilisasi, pengembangan proses
pengeringan beku, peningkatan proses, dan dukungan manufaktur. Minatnya saat ini juga mencakup aspek rekayasa
pemrosesan bentuk sediaan parenteral (penyaringan, pengisian, pembekuan- pencairan, dan lain-lain).
Dr. Warne memegang banyak paten formulasi protein dan telah membuat beberapa presentasi di pertemuan
nasional
Penelitian Kolaboratif, dan Seragen sebelum bergabung dengan Wyeth.
loMoARcPSD|32624688
Ho_APR 09/07/08 15:23 Halaman 6
