Pengaruh Antioksidan dan Antidiabetes Ekstrak Air Buah Passiflora ligularis Juss. pada Tikus Diabetes yang Diinduksi Streptozotocin

(1)

Hindawi Publishing Corporation Pemberitahuan Penelitian Ilmiah Internasional Volume 2014, ID Artikel 130342, 10 halaman

http://dx.doi.org/10.1155/2014/130342

Artikel Penelitian

Efek Antioksidan dan Antidiabetes dari Air

Ekstrak Buah Passiflora ligularis Juss. pada Tikus Diabetes yang Diinduksi Streptozotocin

Palanirajan Anusooriya,

¹

Deivasigamani Malarvizhi,

¹

Velliyur Kanniappan Gopalakrishnan,

^1,2

dan Kanakasabapathi Devaki

¹

1Departemen Biokimia, Universitas Karpagam, Coimbatore, Tamil Nadu 641 021, India

2Departemen Bioinformatika, Universitas Karpagam, Coimbatore, Tamil Nadu 641 021, India

Korespondensi dapat dialamatkan ke Kanakasabapathi Devaki; dr.devaki.bc@gmail.com Diterima 20 Juni 2014; Diterima 2 Desember 2014; Dipublikasikan 21 Desember 2014 Penyunting Akademik: Changyang Gong

Hak Cipta © 2014 Palanirajan Anusooriya dkk. Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah Lisensi Atribusi Creative Commons, yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, asalkan karya aslinya dikutip dengan benar.

Diabetes melitus adalah gangguan endokrin yang paling umum yang mengganggu homeostasis glukosa yang mengakibatkan komplikasi diabetes yang parah termasuk retinopati, angiopati, nefropati, dan neuropati yang menyebabkan gangguan neurologis karena gangguan dalam pemanfaatan glukosa. Aktivitas hipoglikemik terdeteksi dalam ekstrak air Passiflora ligularis, tanaman obat yang digunakan secara tradisional, menggunakan model tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin (STZ, 30 mg / kg berat badan). Pemberian ekstrak air Passiflora ligularis secara oral pada tikus diabetes selama 30 hari menghasilkan penurunan glukosa darah. Tikus diabetes mengalami penurunan kadar protein total serum, albumin, globulin, dan rasio albumin / globulin dibandingkan dengan tikus kontrol. Selain itu, aktivitas penanda hati dan ginjal meningkat secara signifikan pada tikus diabetes dibandingkan dengan tikus kontrol. Pengobatan dengan ekstrak buah P. ligularis dan glibenklamid membalikkan parameter ini mendekati normal. Ekstrak dengan dosis 400 mg / kg yang diberikan secara oral selama 30 hari menunjukkan peningkatan yang signifikan dalam antioksidan enzimatik (SOD, katalase, dan Gpx) dan nonenzimatik (vitamin C, vitamin E, dan glutation tereduksi). Kelompok yang diberi perlakuan ekstrak tanaman menunjukkan penurunan yang signifikan dalam peroksidasi lipid (LPO). Ekstrak air dari buah Passiflora ligularis dapat menurunkan glukosa darah dan mengurangi stres oksidatif dengan menghilangkan radikal bebas pada diabetes.

1. Pendahuluan

Diabetes mellitus adalah gangguan metabolisme yang merupakan gabungan dari faktor keturunan dan lingkungan yang menyebabkan kadar gula darah tinggi yang tidak normal (hiperglikemia). Kadar gula darah tinggi yang tidak normal ini disebabkan oleh kerusakan pada sekresi insulin atau kerja insulin di dalam tubuh [1]. Diabetes melitus ditandai dengan hiperglikemia, kelainan lipoprotein, peningkatan laju metabolisme basal, kerusakan enzim, dan stres oksidatif yang tinggi yang menyebabkan kerusakan sel beta pankreas. Ini adalah kelainan endokrin yang paling umum yang mengganggu homeostasis glukosa yang mengakibatkan komplikasi diabetes yang parah termasuk retinopati, angiopati, nefropati, dan neuropati serta

menyebabkan gangguan neurologis karena per- turbasi dalam pemanfaatan glukosa [2].

Saat ini, di Amerika Serikat, hingga 1 dari 3 kasus baru diabetes melitus didiagnosis pada anak muda berusia di bawah 18 tahun

Subscribe to DeepL Pro to translate larger documents.

Visit www.DeepL.com/pro for more information.

(2)

adalah T2DM, dengan representasi yang tidak proporsional pada etnis minoritas, yang paling sering terjadi pada anak muda berusia antara 10 dan 19 tahun.

Tren ini tidak hanya terjadi di Amerika Serikat, tetapi juga terjadi di dunia internasional; diproyeksikan bahwa pada tahun 2030, sekitar 366 juta orang di seluruh dunia akan mengidap diabetes melitus [3]. Jumlah penderita diabetes mellitus tipe 2 (T2DM) meningkat dengan laju tiga kasus baru setiap sepuluh detik [4], dan penyakit ini didiagnosis pada usia yang lebih muda. Beberapa faktor risiko di balik penyakit ini termasuk stres kronis dan depresi, polutan dan racun lingkungan, obesitas dan kelebihan gizi, dan gaya hidup yang tidak sehat [5]. India memiliki jumlah pasien diabetes tertinggi di dunia, penyakit gula ini menimbulkan masalah kesehatan yang sangat besar di negara ini.

Menyebut India sebagai ibu kota diabetes di dunia, Jurnal Internasional Diabetes di Negara Berkembang mengatakan bahwa ada peningkatan yang mengkhawatirkan pada diabetes di India. Diperkirakan 3,4 juta kematian terjadi karena

(3)

2 Pemberitahuan Penelitian Ilmiah Internasional

terhadap konsekuensi dari gula darah tinggi. WHO juga memperkirakan bahwa 80 persen kematian akibat diabetes terjadi di negara-negara berpenghasilan rendah dan menengah dan memproyeksikan bahwa kematian tersebut akan meningkat dua kali lipat antara tahun 2005 dan 2030 [6].

Spesies Passiflora umumnya ditemukan di seluruh dunia. Penelitian telah mengungkapkan penggunaannya dalam proses anti-inflamasi, antimikroba, antioksidan, dan anti tumor. Berbagai jenis sediaan, ekstrak, dan senyawa individu yang berasal dari spesies ini telah ditemukan memiliki spektrum efek farmakologis yang luas pada beberapa organ seperti otak, darah, dan sistem kardiovaskular dan saraf serta pada proses biokimia dan fungsi fisiologis yang berbeda termasuk proteosintesis, kapasitas kerja, reproduksi, dan fungsi seksual. Penelitian diperlukan untuk memeriksa potensi penggunaan spesies ekstrak Passiflora dalam pencegahan patologi, seperti iskemia jantung, iskemia ginjal, dan penyakit neurodegeneratif dan diabetes, di mana kerusakan stres oksidatif pada protein tampaknya memainkan peran utama.

Secara medis, buah ini telah digunakan di Amazonia sebagai pencegah demam kuning, batu empedu, rabies, dan bisul. Daerah tersebut juga meresepkan rebusan daun untuk mencegah malaria dan demam lainnya serta untuk

meredakan sakit perut. Buah pasak bumi terbukti memiliki sifat analgesik (penghilang rasa sakit), antinyeri,

antiinflamasi, antispasmodik, penekan batuk, afrodisiak, p e n e k a n sistem saraf pusat, diuretik, hipotensi (penurun tekanan darah), dan obat penenang. Selain itu, secara tradisional dilaporkan memiliki aktivitas antikonvulsan, antidepresan, astringen, kardiotonik (mengencangkan, menyeimbangkan, dan memperkuat jantung), disinfektan, saraf (menyeimbangkan / menenangkan saraf), neurastenik (mengurangi nyeri saraf), obat penenang, dan vermifuge (mengusir cacing). Ini mungkin memiliki efek yang menjanjikan dan kuat pada gangguan neurologis dan penyakit kronis seperti penyakit jantung dan kanker [7].

Sejauh ini, belum ada penelitian yang dilakukan untuk mengungkap efek antihiperglikemik P. ligularis. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui potensi antioksidan dan antidiabetes dalam ekstrak buah P. ligularis.

2. Bahan dan Metode

2.1. Pengumpulan dan Ekstraksi Bahan Tanaman. Buah segar Passiflora ligularis dikumpulkan dari Munnar, Kerala, dan disahkan oleh Dr. G. V. S. Murthy Survei botani India, Universitas Pertanian Tamil Nadu, Coimbatore (Nomor voucher BSI/SRC/5/23/2012/Tech/495). Buah dicuci bersih dengan air dan kulitnya dibuang; kemudian daging buahnya dikumpulkan. Daging buah kemudian digiling dengan mixer listrik. Sari buah dikumpulkan dan disaring.

Ekstrak air dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator pada suhu kamar selama 3 hari untuk mendapatkan pigmen berwarna coklat tua dan ditimbang.

Kemudian ekstrak air disimpan dalam wadah kedap udara untuk digunakan di kemudian hari.

2.2. Skrining Fitokimia Awal. Skrining fitokimia dilakukan untuk menganalisis keberadaan metabolit sekunder yang bertanggung jawab untuk menyembuhkan penyakit [8, 9].

(4)

=×

100.

2.3. Hewan Percobaan. Tikus albino jantan dewasa dengan berat sekitar 150-200 g diperoleh dari rumah hewan Universitas Karpagam, Coimbatore, dan digunakan untuk penelitian ini. Tikus ditempatkan pada suhu konstan 22 ±

5∘C dengan siklus 12 jam terang, 12 jam gelap, dan diberi makan pelet dengan akses gratis ke air keran. Semua percobaan dilakukan

sesuai dengan pedoman yang direkomendasikan oleh Komite untuk Tujuan Pengendalian dan Pengawasan Percobaan pada Hewan (CPCSEA), Pemerintah India.

2.4. Toksisitas Akut. Tikus Wistar albino dengan berat antara 150 dan 180 g digunakan untuk penelitian ini. 250, 500, 1000, dan 2000 mg/kg ekstrak air Passiflora ligularis diberikan secara oral kepada empat kelompok yang masing-masing terdiri dari lima hewan. Kelompok lain yang terdiri dari lima tikus berfungsi sebagai kontrol dan menerima 1 ml larutan garam fisiologis. Mereka semua ditempatkan di bawah pengamatan selama 24 jam untuk melihat tanda-tanda kematian, gejala toksik, perubahan perilaku, atau kematian.

2.5. Induksi Diabetes. Diabetes diinduksi dengan suntikan streptozotocin (30 mg/kg) intraperitoneal dalam air.

Hiperglikemia dikonfirmasi setelah 72 jam dengan peningkatan glukosa darah dan perubahan perilaku (rasa haus yang berlebihan dan sering buang air kecil). Tikus dengan kadar glukosa darah lebih dari 240 mg/dL digunakan untuk penelitian ini.

3. Tes Toleransi Glukosa [10]

3.1. Desain Eksperimental untuk GTT Tikus Diabetes. Uji toleransi glukosa dipelajari dalam ekstrak air Passiflora ligularis pada tikus diabetes. Hewan-hewan tersebut dibagi menjadi 5 kelompok (𝑛 = 3) sebagai berikut:

Kelompok 1: Tikus kontrol;

Kelompok 2: Tikus kontrol diabetes;

Kelompok 3: Tikus yang diberi 200 mg/kg ekstrak air buah P. ligularis;

Kelompok 4: Tikus yang diberi 400 mg/kg ekstrak air buah P. ligularis;

Kelompok 5: Tikus yang diberi 600 mg/kg ekstrak air buah P. ligularis.

Hewan dipuasakan semalaman dengan akses bebas ke air. Sampel darah puasa diambil dari ekor dan kadar glukosa darah diukur dengan menggunakan heamoglucostrips dalam glukometer (Life scan, Johnson and Johnson Ltd.) dan juga dikonfirmasi dengan metode O- Toluidine. Untuk tikus GTT, kontrol dan kontrol diabetes hanya diberi air putih. Tikus kelompok 3, 4, 5 diberi perlakuan dengan konsentrasi masing-masing 200, 400, dan 600 mg/kg ekstrak air buah P. ligularis. Kadar glukosa darah diperiksa setelah 30 menit. Kemudian semua tikus diberi larutan glukosa sebanyak 3 g/kg. Tiga sampel darah lagi dikumpulkan pada 60, 120, dan 180 menit setelah beban glukosa.

Indeks glikemik dihitung dengan menggunakan rumus Indeks glikemik Awal - Akhir

(1) Awal

(5)

Pemberitahuan Penelitian Ilmiah Internasional 3 TABEL 1: Skrining fitokimia ekstrak buah berair dari Passiflora ligularis.

Ekstrak AL SA TP FL ST CG DARI TN AP CHO

Berair ++ ++ + ++ ++ ++ ++ + + +

AL: alkaloid; CHO: karbohidrat; ST: steroid; CG: kardioglikosida; FL: flavanoid; SA: saponin; TP: tanin dan senyawa fenolik; OF: minyak dan lemak; AP:

asam amino dan protein; TN: terpenoid.

"+": ada; "-" tidak ada.

3.2. Studi Antidiabetes. Hewan-hewan tersebut dibagi menjadi lima kelompok dengan empat tikus di setiap kelompok. Kelompok 1 berfungsi sebagai kontrol, tikus sehat normal yang diberi diet pelet normal dan 1,0 ml buffer sitrat sebagai kendaraan, kelompok 2 tikus diinduksi diabetes dengan injeksi intraperitoneal tunggal 30 mg/kg bb streptozotocin dan dipelihara tanpa pengobatan selama 30 hari, kelompok 3 tikus diinduksi diabetes seperti yang disebutkan pada kelompok 2 dan diobati dengan glibenklamid (1.25 mg/kg bb) secara oral melalui sonde intragastrik oral, untuk jangka waktu 30 hari, tikus kelompok 4 diinduksi dengan diabetes seperti yang disebutkan dalam kelompok 2 dan diobati dengan Passiflora ligularis (400 mg/kg bb) secara oral untuk jangka waktu 30 hari, tikus kelompok 5 diobati dengan Passiflora ligularis saja (400 mg/kg bb) secara oral untuk jangka waktu 30 hari, dan ekstrak air buah (400 mg/kg) diberikan

200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0

Kontrol Kontrol diabete s Puasa 1 jam

200 400 600

2 jam 3 jam

secara oral melalui tabung intragastrik selama 30 hari.

Ekstrak diberikan secara oral melalui tabung intragastrik selama periode penelitian 30 hari dan kemudian dikorbankan dengan anestesi kloroform ringan.

Darah dan serum yang dipisahkan dari darah digunakan untuk studi biokimia. Organ hati, ginjal, dan pankreas dikumpulkan dalam larutan garam dan digunakan untuk analisis antioksidan.

3.3. Analisis Biokimia. Glukosa serum diperkirakan dengan metode kit [11]. Hemoglobin dan hemoglobin terglikosilasi diperkirakan dengan metode Drabkin [12]. Kolesterol serum dan HDL diperkirakan dengan metode satu langkah [13] menggunakan kit reagen diagnostik yang diproduksi oleh Span Diagnostics Ltd. Trigliserida diperkirakan dengan GPO-PAP, uji titik akhir [14] menggunakan kit reagen diagnostik yang diproduksi oleh Span Diagnostics Ltd. Aktivitas serum aspartat aminotransferase (AST) dan alanin aminotransferase (ALT) diperkirakan dengan menggunakan kit yang tersedia secara komersial [15].

Aktivitas serum alkali fosfatase juga diperkirakan [16].

Total protein dan albumin dalam serum diperkirakan dengan metode Biuret [17]. Urea dalam serum diperkirakan dengan menggunakan kit diagnostik berdasarkan metode DAM [18]; kreatinin dalam serum diperkirakan dengan menggunakan kit diagnostik berdasarkan metode pikrat basa [19]. Bilirubin dalam serum diperkirakan dengan menggunakan kit Diagnostik Span [20].

3.4. Analisis Antioksidan dalam Jaringan. Dalam penelitian ini, aktivitas antioksidan dari ekstrak buah Passiflora ligu- laris dianalisis pada organ yang berbeda, yaitu hati, ginjal, dan pankreas. Setelah 30 hari, tikus dikorbankan dengan anestesi kloroform ringan dan organ-organnya dikumpulkan dalam hati garam yang digunakan untuk memperkirakan glikogen [21]. Semua jaringan digunakan

untuk estimasi protein [22], antioksidan enzimatik seperti superoksida dismutase [23], katalase [24], GPx [25], dan antioksidan nonenzimatik seperti vitamin C [26], vitamin E [27], dan glutation tereduksi [28]. Peroksidasi lipid [29] juga diperkirakan.

(6)

GAMBAR 1: Uji toleransi glukosa oral dari ekstrak air Passiflora ligularis pada tikus percobaan.

3.5. Analisis Statistik. Hasil yang diperoleh dinyatakan sebagai rata-rata ± standar deviasi (SD). Perbandingan statistik antar kelompok dilakukan dengan analisis varians satu arah yang diikuti dengan Uji Jarak Berganda Duncan (DMRT) menggunakan SPSS versi 10 (SPSS, Chicago, IL).

Batas signifikansi statistik ditetapkan pada 𝑃<0,05.

4. Hasil dan Pembahasan

Fitokimia memainkan peran penting dalam pertahanan tanaman terhadap mangsa, mikroorganisme, dan stres serta perlindungan antar spesies. Komponen tanaman ini telah digunakan sebagai obat selama ribuan tahun. Oleh karena itu, skrining fitokimia berfungsi sebagai langkah awal dalam memprediksi jenis-jenis senyawa aktif potensial dari tanaman [30]. Tabel 1 menunjukkan fitokimia yang ada dalam ekstrak buah P. ligularis.

Skrining fitokimia dari P. ligularis mengungkapkan adanya berbagai fitokimia (Tabel 1). Secara khusus ekstrak air dari Passiflora ligularis menunjukkan adanya alkaloid, tanin, senyawa fenolik, flavonoid, steroid, glikosida jantung, terpenoid, dan karbohidrat.

Pada studi toksisitas akut, tikus percobaan sempat tidur beberapa jam, setelah pemberian ekstrak Passiflora ligularis pada tikus Wistar albino jika dibandingkan dengan tikus kontrol normal. Tetapi tidak ada perubahan perilaku kasar atau perubahan morfologis seperti gangguan pernapasan, rambut rontok, gelisah, kejang- kejang, pencahar, koma, penurunan berat badan, buang air kecil, gatal-gatal, dan lain sebagainya. Tidak ada kematian dan tidak ada reaksi toksik yang ditemukan pada salah satu dosis yang dipilih sampai akhir pengobatan.

Hal ini menunjukkan sifat aman dari ekstrak Passiflora ligularis pada tikus Wistar albino.

Gambar 1 menunjukkan kadar glukosa darah pada GTT kelompok tikus kontrol dan eksperimen setelah pemberian oral

(7)

TABEL 2: Pengaruh P. ligularis terhadap glukosa, hemoglobin, hemoglobin terglikosilasi, dan profil lipid dalam serum tikus kontrol dan tikus percobaan.

(mg/dL) (Grup I) (Grup

II)

(Kelompok III)

(Kelompok IV)

(Grup V)

Nilai dinyatakan sebagai rata-rata ± SD untuk empat hewan dalam setiap kelompok.

Nilai yang tidak memiliki huruf superskrip yang sama (a-d) berbeda secara signifikan pada 𝑃 < 0,05 (DMRT).

200 400 600

GAMBAR 2: Indeks glikemik ekstrak air Passiflora ligularis.

glukosa. Ekstrak buah Passiflora ligularis berair diberikan secara oral (200, 400, dan 600 mg / kg, selama 15 hari) kepada hewan percobaan. Pada tikus diabetes, peningkatan puncak konsentrasi glukosa darah diamati setelah 60 menit dan tetap tinggi selama 120 menit. Tikus diabetes yang diobati dengan Passiflora ligularis menunjukkan penurunan konsentrasi glukosa darah yang signifikan pada 60 menit dan pada interval 120 menit dan indeks glikemik ditemukan masing-masing sebesar 28,3%, 33,3%, 29,2%

(Gambar 2). Di antara berbagai dosis (200, 400, dan 600 mg/kg) P. ligularis pada OGTT pada tikus normal dan diabetes, 400 mg/kg memberikan efek hipoglikemik yang efektif jika dibandingkan dengan dosis lainnya. Efek ini dapat terjadi karena pengurangan penyerapan glukosa usus atau induksi proses glikogenik bersama dengan pengurangan glikogenolisis dan glikoneogenesis. Oleh karena itu, dosis efektif ini, 400 mg / kg ekstrak buah air P.

ligularis, digunakan untuk studi antidiabetes lebih lanjut pada tikus albino Wistar. Tikus diabetes yang tidak diobati yang diamati meningkat dalam serum

glukosa akibat efek STZ yang menyebabkan kerusakan jaringan di pankreas yang menghancurkan sel 𝛽 dan mengakibatkan defisiensi insulin. Kekurangan insulin pada akhirnya menyebabkan peningkatan glukosa darah [31].

hemoglobin yang terlambat terlihat pada tikus diabetes dinormalisasi mendekati normal dengan pemberian ekstrak buah P. ligularis dan glibenklamid. Penurunan hemoglobin pada tikus diabetes disebabkan oleh interaksi kelebihan glukosa dengan hemoglobin membentuk hemoglobin terglikosilasi (Tabel 2). Hemoglobin terglikosilasi (HbA1c) hampir dua kali lipat pada tikus STZ dan menurun secara signifikan ketika diobati dengan

P. ligularis dan mempertahankan hemoglobin dan hemoglobin terglikosilasi dalam kisaran normal. Hal ini membuktikan peran P. ligularis dalam mengendalikan glukosa darah.

Peningkatan yang signifikan dalam lipid serum diamati pada tikus diabetes bila dibandingkan dengan tikus kontrol (Tabel 2). Dalam kasus kekurangan insulin seperti pada diabetes mellitus, lipolisis tidak terhambat dan oleh karena itu hal ini menyebabkan hiperlipidemia. Pemberian ekstrak buah Passiflora ligularis secara oral pada tikus diabetes selama 30 hari secara signifikan membalikkan nilai-nilai ini mendekati normal. Hal ini mungkin disebabkan oleh peningkatan sekresi insulin oleh Passiflora ligularis yang menurunkan kolesterol total dan trigliserida total dan meningkatkan kadar HDL.

Tabel 3 menunjukkan tingkat penanda hati dan ginjal;

tingkat urea, kreatinin, dan bilirubin meningkat secara signifikan pada kelompok diabetes dan pengobatan dengan ekstrak Passiflora ligularis selama 30 hari secara signifikan membalikkan nilai-nilai ini mendekati normal. Efek serupa diamati pada kelompok yang diobati dengan glibenklamid.

Ekstrak Passiflora ligularis yang diberikan pada tikus yang

Indeks glikemik (%)

Parameter Glukosa (mg/dL) Hemoglobin

(mg/dL)

Hemoglobin terglikosilasi (%)

Kolesterol total (mg/dL)

Trigliserida

HDL (mg/dL) Kontrol 96.1 ± 0.28â 13.3 ± 0.43â 6.5 ± 0.12â 111.6 ± 5.77 â 77.4 ± 0.40â 21.3 ± 0.28â Kontrol diabetes 221.6 ± 2.^28b 6.8 ± 0.05^b 11.2 ± 0.01^b 228.3 ± 2.88^b 188.5 ± 0.46^b 15.2 ± 0.21^b Diabetes +

glibenklamid 111.6 ± 0.57^c 13.3 ± 0.04^a 5.4 ± 0.04^c 115.6 ± 1.15^a 101.6 ± 2.88^c 23.0 ± 0.04^c Diabetes + P.

ekstrak ligularis 116.1 ± 0.28^d 12.7 ± 0.12^c 6.3 ± 0.05^d 131.6 ± 2.88^c 88.8 ± 0.11^d 25.1 ± 0.28^d Ekstrak P. ligularis

dirawat sendiri 95.1 ± 0.28â 13.4 ± 0.01â 6.6 ± 0.02â 101.6 ± 2.88^d 78.8 ± 0.28â 21.3 ± 0.28â

34 32 30

33.3 Pada tikus kontrol diabetes, terdapat peningkatan glukosa yang signifikan. Streptozotocin menyebabkan kerusakan sel secara selektif

29.2 pulau pankreas dan membawa peningkatan glukosa darah

28.3 tingkat [32]. Terbukti dari investigasi ini bahwa

28 26

Pemberian pada dosis 30 mg/kg berat badan menyebabkan respons diabetogenik yang signifikan pada tikus albino. Dari ini

Hasil yang diberikan pada Tabel 2, bahwa penurunan kadar glukosa darah

24 200 400 600 yang dibawa oleh ekstrak air P. ligularis cukup sebanding

Konsentrasi (mg/kg) dengan reduksi yang dibawa oleh glibenklamid.

Peningkatan yang signifikan dalam hemoglobin dan peningkatan glikos

(8)

diobati dengan ekstrak Passiflora ligularis saja menunjukkan efek yang sama dengan tikus kontrol. AST dan ALP dianggap sebagai indikator sensitif cedera hati [33]. Peningkatan kadar serum AST dan ALP telah dikaitkan dengan integritas struktural hati yang rusak.

Yang signifikan

(9)

Ginjal Pankreas

Pemberitahuan Penelitian Ilmiah Internasional 5

TABEL 3: Pengaruh P. ligularis terhadap penanda ginjal dan hati, protein total, albumin, dan globulin dalam serum tikus kontrol dan tikus percobaan.

(Grup I) (Grup II)

(Kelompok III)

(Kelompok IV)

(Grup V)

TABEL 4: Perubahan kadar protein dalam hati, ginjal, dan pankreas 20 kontrol dan hewan percobaan.

Khusus

Hati

Protein (mg/g) Kontrol

(Kelompok I) Kontrol diabetes (Kelompok II) Diabetes + glibenklamid (Kelompok III) Diabetes + Passiflora ligularis

1,42 ± 0,07â 1,06 ± 0,03â 0,93 ± 0,03â 0,87 ± 0,01^b 0,57 ± 0,06^b 0,50 ± 0,12^b

1,26 ± 0,04^c 0,88 ± 0,06^c 0,80 ± 0,09^c

1,34 ± 0,025^cd 1,01 ± 0,06^ad 0,91 ± 0,03^a

10

5

0

Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V

Glikogen Kelompok IV

Passiflora ligularis saja yang dirawat (Kelompok V)

1.48 ± 0.16^ad 1.08 ± 0.06^a 1.07 ± 0.17^d

GAMBAR 3: Perubahan glikogen hati tikus kontrol dan tikus percobaan.

Nilai yang tidak memiliki huruf superskrip yang sama (a-d) berbeda secara signifikan pada

𝑃 < 0,05 (DMRT).

penurunan enzim hati, yaitu, kadar AST dan ALP, terlihat setelah pemberian oral ekstrak air

P. ligularis dibandingkan dengan hewan diabetes. Hal ini menyiratkan fungsi normal dan efek perlindungan hati P.

ligularis dan mendukung sifat hepatoprotektif P. ligularis.

Hasil dari Tabel 3 menunjukkan bahwa kadar protein total serum pada tikus kontrol diabetes berkurang secara signifikan. Peningkatan protein serum, yaitu rasio albumin dan globulin pada tikus diabetes yang diobati dengan ekstrak air P. ligularis dan obat standar, diamati. Kerusakan hati paling sering terjadi pada diabetes melitus. Pemberian ekstrak buah Passi- flora ligularis menurunkan tingkat penanda hati pada tikus yang diobati dengan diabetes. Ini menunjukkan efek hepatoprotektif P. ligularis.

STZ menyebabkan kerusakan pada hati, ginjal, dan pankreas serta perubahan terkait hiperglikemia yang dapat bertahan dalam jaringan. Perubahan kadar protein dalam jaringan seperti hati, ginjal, dan pankreas dari hewan percobaan diberikan pada Tabel 4. Tabel 4. Kadar protein

dalam hati dan ginjal

Konsentrasi (mg/g)

15 Parameter Urea (mg/dL) Kreatinin

(mg/dL)

Bilirubin

(mg/dL) SGOT (IU/L) SGPT (IU/L) Protein total (mg/dL)

Albumin (mg/dL)

Globulin (mg/dL) Kontrol 27.9 ± 0.01â 0.5 ± 0.06â 1.10 ± 0.01â 33.3 ± 0.28â 27.4 ± 0.40â 8.2 ± 0.23â 5.5 ± 0.11â 2.4 ± 0.67â Kontrol diabetes 30.4 ± 0.^46b 0.7 ± 0.04^b 1.33 ± 0.02^b 56.1 ± 0.98^b 59.0 ± 0.80^b 4.6 ± 0.02^b 3.3 ± 0.02^b 0.6 ± 0.01^b Diabetes +

glibenklamid25, 4 ± 0,34^c 0.5 ± 0.01^a 1.18 ± 0.01^c 38.4 ± 0.40^c 33.3 ± 0.23^c 7.7 ± 0.03^c 4.8 ± 0.26^c 2.9 ± 0.05^c Diabetes + P.

ekstrak ligularis23, 2 ± 0,35^d 0.4 ± 0.01^c 1.15 ± 0.01^d 43.3 ± 0.28^d 41.0 ± 0.86^d 7.2 ± 0.08^d 4.7 ± 0.19^c 2.3 ± 0.06^a Ekstrak P. ligularis

dirawat sendiri 27.6 ± 0.34â 0.6 ± 0.01^d 1.09 ± 0.01â 35.1 ± 0.28ê 29.3 ± 0.28ê 8.6 ± 0.05ê 5.4 ± 0.10â 3.1 ± 0.01^d

(10)

menurun pada kelompok diabetes dibandingkan dengan kelompok kontrol. Pada pengobatan dengan ekstrak buah Passiflora ligularis dan obat standar glibenklamid pada tikus diabetes selama 30 hari, nilainya meningkat secara signifikan mendekati normal. Ekstrak air Passiflora ligularis saja pada kelompok perlakuan tidak menunjukkan perubahan yang merugikan. Penurunan kadar protein total pada tikus yang diinduksi disebabkan oleh kerusakan lokal pada retikulum endoplasma yang mengakibatkan hilangnya P₄₅₀ yang menyebabkan kegagalan fungsional dengan penurunan sintesis protein.

Peningkatan kadar protein pada kelompok yang diobati menunjukkan stabilisasi retikulum endoplasma yang mengarah ke sintesis protein [34]. Pemberian Passiflora ligularis dapat meningkatkan sintesis protein dengan menstabilkan retikulum endoplasma.

Dalam penelitian ini, kadar glikogen hati menurun secara signifikan pada tikus diabetes Grup II, dibandingkan dengan glibenklamid sebagai standar dan kelompok yang diobati dengan Passiflora ligularis.

Kandungan glikogen hati berkurang secara signifikan pada tikus diabetes yang diinduksi STZ (Gambar 3).

Glikogen adalah bentuk penyimpanan intraseluler utama glukosa dan kadarnya di berbagai jaringan merupakan cerminan langsung dari aktivitas insulin karena insulin mendorong pengendapan glikogen intraseluler dengan merangsang glikogen

(11)

TABEL 5: Aktivitas ekstrak buah Passiflora ligularis pada enzim antioksidan di hati, ginjal, dan pankreas tikus kontrol dan tikus percobaan.

Khusus

Superoksida dismutase (enzim yang dibutuhkan

untuk 50% dari

penghambatan pengurangan NBT / menit / mg

protein)

Katalase (𝜇mol H O22

dimanfaatkan / menit / mg / protein)

Glutation peroksidase (𝜇mol GSH yang digunakan/menit/mg/pro

tein)

(Grup I) (Grup II)

(Kelompok III)

(Grup IV)

(Grup V)

6 Pemberitahuan Penelitian IlmiahInternasional

Hati Ginjal Pankreas Hati Ginjal Pankreas Hati Ginjal Pankreas

Kontrol 6.71 ± 0.01â 2.13 ± 0.03â 1.13 ± 0.01â 2.04 ± 0.10â 2.04 ± 0.10â 2.2 ± 0.13â 1.04 ± 0.25â 1.36 ± 0.3â 1.77 ± 0.06â Kontrol diabetes 3.93 ± 0.^02b 0.94 ± 0.03^b 0.63 ± 0.01^b 0.8 ± 0.05^b 0.8 ± 0.05^b 0.93 ± 0.13^b 0.52 ± 0.17^b 0.72 ± 0.2^b 1.15 ± 0.08^b Diabetes+

glibenklamid6, 4 ± 0,2^c 1.93 ± 0.02^c 0.93 ± 0.02^c 1.1 ± 0.31^c 1.18 ± 0.31^c 1.27 ± 0.51^c 0.93 ± 0.18^c 0.78 ± 0.09^b 1.45 ± 0.2^c Diabetes +

Passiflora ligularis 5.91 ± 0.01^d 1.76 ± 0.02^d 0.88 ± 0.01^d 1.68 ± 0.11^d 1.68 ± 0.11^d 1.84 ± 0.41^d 0.84 ± 0.05^d 1.12 ± 0.14^c 1.6 ± 0.06^d Passiflora ligularis

saja yang diobati6, 56 ± 0,03^ca 1.97 ± 0.01^c 1.16 ± 0.03â 1.97 ± 0.13â 1.97 ± 0.13âd 2.16 ± 0.16â 1.04 ± 0.2â 1.53 ± 0.19^d 1.72 ± 0.08â

(12)

TABEL 6: Pengaruh ekstrak buah Passiflora ligularis berair terhadap antioksidan nonenzimatik di hati, ginjal, dan pankreas tikus kontrol dan tikus percobaan.

Khusus (Grup I) (Grup II)

Hati

Vitamin E (𝜇protein) Vitamin C (𝜇protein Glutation tereduksi (𝜇 g/mg protein) Ginjal

Pankreas Hati Ginjal Pankreas Hati Ginjal Pankreas

(Kelompok III)

(Grup IV)

(Grup V)

Nilai dinyatakan sebagai rata-rata ± SD untuk enam hewan dalam setiap kelompok.

Pemberitahuan Penelitian IlmiahInternasional7

Kontrol

1.56 ± 0.05â 3.3 ± 0.33â 3.24 ± 0.16â 0.34 ± 0.02â 0.33 ± 0.014â 0.26 ± 0.025â 17.4 ± 0.4â 11.89 ± 0.46â 11.14 ± 0.52â Kontrol diabetes 0.84 ± 0.^08b 2.26 ± 0.25^b 1.23 ± 0.16^b 0.27 ± 0.02^b 0.25 ± 0.013^b 0.21 ± 0.02^b 6.76 ± 0.93^b 4.13 ± 0.69^b 5.94 ± 0.46^b Diabetes +

glibenklamid 1.42 ± 0.19^ca 3.47 ± 0.11^a 2.58 ± 0.23^c 0.30 ± 0.01^b 0.28 ± 0.01^c 0.25 ± 0.01^a 11.08 ± 0.46^c 7.11 ± 0.32^c 7.13 ± 0.28^c Diabetes + Passiflora

ligularis 1.3 ± 0.5^ca 3.38 ± 0.19â 3.37 ± 0.37â 0.32 ± 0.01â 0.32 ± 0.025â 0.26 ± 0.026â 13.11 ± 0.61^d 8.92 ± 0.81^d 8.76 ± 0.58^d Passiflora ligularis

dirawat sendiri 1.4 ± 0.4^ca 3.15 ± 0.47â 3.37 ± 0.22â 0.33 ± 0.02â 0.34 ± 0.03â 0.27 ± 0.014â 17.52 ± 0.42â 11.62 ± 0.46â 10.87 ± 0.42â

(13)

Khusus

8 Pemberitahuan Penelitian Ilmiah

Internasional

sintase dan menghambat glikogen fosforilase [35].

Peningkatan kadar glikogen hati yang signifikan pada kelompok diabetes yang diobati dengan ekstrak mungkin disebabkan oleh pengaktifan kembali sistem glikogen sintase. Hasil percobaan menunjukkan bahwa

TABEL 7: Perubahan peroksidasi lipid pada hati, ginjal, dan pankreas tikus kontrol dan tikus percobaan.

Peroksidasi lipid^∗

Hati Ginjal

P a n k r e a s Ekstrak buah Passiflora ligularis memiliki aktivitas

antidiabetes yang cukup besar dan mampu mempertahankan tingkat glikogen hati.

Tabel 5 menunjukkan hasil kadar enzim antioksidan SOD, katalase, dan GPX pada tikus percobaan. Antioksidan enzimatik ini secara signifikan menurun pada organ yang berbeda (hati, ginjal, dan pankreas) k a r e n a ketidakmampuan pertahanan antioksidan dalam memerangi kerusakan yang dimediasi oleh ROS dan ketika mereka diobati dengan ekstrak buah Passiflora ligularis, aktivitas enzim-enzim ini meningkat dan dapat membantu untuk mengontrol kerusakan yang dimediasi oleh ROS.

radikal bebas bila dibandingkan dengan tikus diabetes dan efeknya

Kontrol (Kelomp ok I)

Kontrol diabetes (Kelompok II) Diabetes + glibenklamid (Kelompok III) Diabetes + Passiflora ligularis (Kelompok IV) Passiflora ligularis saja yang diobati

14,9 ± 0,26â 9,8 ± 0,2â 9,07 ± 0,14â 31,1 ± 0,32^b 16,2 ± 0,18^b 12,6 ± 0,34^b

18,8 ± 0,23^c 12,4 ± 0,53^c 10,19 ± 0,11^c

16,9 ± 0,18^d 13,5 ± 0,35^d 9,69 ± 0,13^d

15,4 ± 0,16â 9,5 ± 0,21â 9,10 ± 0,49â

yang dihasilkan oleh ekstrak buah Passiflora ligularis sebanding dengan obat standar glibenklamid. Implikasi stres oksidatif dalam patogenesis diabetes disarankan, tidak hanya oleh pembentukan radikal bebas oksigen, tetapi juga karena glikosilasi protein nonenzimatik, autooksidasi glukosa, gangguan metabolisme glutation, perubahan enzim antioksidan, pembentukan peroksida lipid, dan penurunan kadar asam askorbat. Selain GSH, terdapat mekanisme pertahanan lain terhadap radikal bebas seperti enzim superoksida dismutase (SOD), glutation tereduksi (GSH), dan katalase (CAT) yang berperan dalam mengeliminasi radikal bebas superoksida, hidrogen peroksida, dan hidroksil (36). Penurunan aktivitas CAT dan SOD pada tikus diabetes mungkin merupakan respons terhadap peningkatan produksi

H O₂₂ dan O₂ oleh autoksidasi glukosa. Enzim-enzim ini memainkan peran penting dalam menjaga tingkat fisiologis oksigen dan hidrogen peroksida dengan mempercepat penghilangan radikal oksigen dan menghilangkan peroksida organik dan hidroperoksida yang dihasilkan dari paparan STZ yang tidak disengaja [37]. Peningkatan enzim antioksidan yang diamati pada tikus yang diobati dengan diabetes disebabkan oleh adanya metabolit sekunder dalam ekstrak buah Passiflora ligu-laris. Ekstrak buah Passiflora ligularis kaya akan kandungan flavonoid yang memberikan potensi antioksidan yang baik dan mampu membalikkan perubahan pada tikus kontrol diabetes.

Tabel 6 menunjukkan penurunan yang signifikan pada antioksidan nonenzimatik seperti glutation (GSH) vitamin C dan E pada tikus diabetes jika dibandingkan dengan tikus kontrol. Kadar antioksidan ini meningkat secara signifikan pada berbagai organ (hati, ginjal, dan pankreas) tikus diabetes dengan pemberian ekstrak buah Passiflora ligularis. GSH memiliki peran multifaset dalam pertahanan antioksidan.

Ini adalah pemulung langsung radikal bebas serta kosubstrat untuk detoksifikasi peroksida oleh glutation peroksidase. Stres oksidatif pada diabetes menurunkan tingkat GSH di berbagai organ tikus bila dibandingkan dengan kontrol. Pemberian oral ekstrak buah Passiflora ligularis selama 30 hari menunjukkan peningkatan yang signifikan pada semua nilai antioksidan nonenzimatik dan mendekati nilai normal. Hal ini menunjukkan bahwa

pemberian ekstrak buah Passiflora ligularis dapat mengurangi stres oksidatif yang menyebabkan degradasi GSH yang lebih sedikit karena berkurangnya produksi ROS pada tahap diabetes.

(14)

(Grup V)

Nilai dinyatakan sebagai rata-rata ± SD untuk enam hewan dalam setiap kelompok.

Nilai yang tidak memiliki huruf superskrip yang sama (a-d) berbeda secara signifikan pada

𝑃 < 0,05 (DMRT).

∗ 𝑛 mol MDA yang terbentuk/menit/mg protein.

Peningkatan kadar GSH yang signifikan dilaporkan pada tikus diabetes yang diobati dengan ekstrak akar P.

corymbosa (Rottl.) [38].

Tabel 7 menjelaskan penurunan yang signifikan dalam peroksidasi lipid pada hati, ginjal, dan pankreas hewan kontrol dan hewan percobaan. Pada jaringan hati, ginjal, dan pankreas tikus diabetes, tingkat peroksidasi lipid (LPO) meningkat secara signifikan dibandingkan dengan tikus kontrol. Radikal hidroksil adalah spesies aktif utama yang menyebabkan oksidasi lipid dan kerusakan biologis yang signifikan [39]. Kemampuan ekstrak Passiflora ligularis untuk memadamkan radikal hidroksil tampaknya secara langsung berkaitan dengan menghambat proses peroksidasi lipid. Setelah pemberian ekstrak Passiflora ligularis secara oral selama 30 hari, nilai yang meningkat kembali ke tingkat yang mendekati normal. Kedua kelompok yang diobati menunjukkan penurunan yang signifikan dalam peroksidasi lipid, menunjukkan perannya dalam perlindungan terhadap peroksidasi lipid.

5. Kesimpulan

Sebagai kesimpulan, hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian oral ekstrak air P. ligularis menurunkan glukosa darah, lipid serum yang dapat disebabkan oleh peningkatan sekresi insulin melalui pemulihan sel 𝛽 pankreas. P. ligularis memiliki potensi antioksidan yang dapat digunakan untuk tujuan terapeutik terutama dalam pencegahan kerusakan oksidatif yang terjadi selama diabetes. Kehadiran alkaloid dan flavonoid dari P. ligularis juga telah terbukti bermanfaat dalam mengendalikan diabetes dan banyak penyakit lainnya seperti yang terbukti dari penelitian ini. Oleh karena itu, disimpulkan bahwa ekstrak air P. ligularis memiliki aktivitas antidiabetes dan mungkin terbukti efektif untuk pengelolaan diabetes.

Konflik Kepentingan

Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan terkait publikasi makalah ini.

(15)

Pemberitahuan Penelitian Ilmiah Internasional 9

Ucapan terima kasih

Penulis berterima kasih kepada Rektor, CEO, Wakil Rektor, dan Panitera Universitas Karpagam yang telah memberikan fasilitas dan dorongan.

Referensi

[1] J. Gotep, "Fraksi glikosida yang diekstrak dari daging buah Cucumis metuliferus E. Meyer memiliki efek antihiperglikemik pada tikus yang diinduksi aloksan," Journal of Natural Pharma, vol. 2, no. 2, hal. 48-51, 2011.

[2] V. K. Sharma, S. Kumar, HJ Patel, dan S. Hugar, "Aktivitas hipoglikemik Ficus Glomerata pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan," International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, vol. 1, no. 2, pp. 18-22, 2010.

[3] K. C. Copeland, P. Zeitler, M. Geffner dkk., "Kelompok Studi TODAY. Karakteristik remaja dan pemuda dengan diabetes tipe 2 yang baru saja terjadi: Kelompok TODAY pada awal,"

Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, vol. 96, no. 1, hlm. 159- 167, 2011.

[4] International Diabetes Federation (IDF), Diabetes Atlas, Federasi Diabetes Antar Bangsa (IDF), Brussels, Belgia, edisi ke-4, 2009.

[5] A. Ghamarian, M. Abdollahi, X. Su, A. Amiri, A. Ahadi, dan A. Nowrouzi, "Pengaruh ekstrak biji sawi putih terhadap tes toleransi glukosa (GTT) dan profil metabolik pada tikus diabetes tahap awal dan akhir," DARU Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 20, no. 1, artikel 56, 2012.

[6] K. PS Kumar, D. Bhowmik, S. Srivastava, S. Paswan, dan A.

Dutta, "Epidemi diabetes di India - tinjauan komprehensif mengenai fitur klinis, manajemen dan pengobatan," The Pharma Innovation, vol. 1, no. 2, hal. 18, 2012.

[7] P. P. Joy, J. Thomas, S. Mathew, dan B. P. Skaria, "Tanaman obat," dalam Hortikultura Tropis, T. K. Bos, J. Kabir, P. Das, dan P.

P. Joy, Eds, vol. 2, hal. 449-632, Naya Prokash, Calcutta, India, 2010, Medicinal Plants,.

[8] G. E. Trease dan W. C. Evans, Farmakognosi, W. B. Saunders, Philadelphia, Pa, Amerika Serikat, edisi ke-4, 1996.

[9] J. B. Harborne, Metode Fitokimia, Chapman & Hall, London, Inggris, 1987.

[10] S. Bonner-Weir, "Bukti morfologi untuk polaritas pankreas dari sel 𝛽 di dalam pulau-pulau Langerhans," Diabetes, vol. 37, no. 5, pp. 616-621, 1988.

[11] T. Sasaki, S. Matsy, dan A. Sonae, "Pengaruh konsentrasi asam asetat terhadap reaksi warna pada metode asam borat O- Toluidine untuk estimasi glukosa darah," Rinsho Kagaku, vol.

1, hal. 346-353, 1972.

[12] D. L. Drabkin dan J. M. Austin, "Konstanta spektrofotometri untuk turunan hemoglobin yang umum pada darah manusia, anjing, dan kelinci," The Journal of Biological Chemistry, vol.

98, hal. 719-733, 1932.

[13] D. R. Wybenga, V. J. Pileggi, P. H. Dirstine, dan J. di Giorgio,

"Penentuan langsung secara manual kolesterol total serum dengan reagen tunggal yang stabil," Clinical Chemistry, vol.

16, no. 12, hal. 980-984, 1970.

[14] G. Bucolo dan H. David, "Penentuan kuantitatif trigliserida serum dengan menggunakan enzim," Clinical Chemistry, vol.

19, no. 5, hal. 476-482, 1973.

[15] S. Reitman dan S. Frankel, "Metode kolorimetri untuk penentuan kadar glutamat oksalat dan glutamat piruvat serum

transaminase," The American Journal of Clinical Pathology, vol.

28, no. 1, hal. 56-63, 1957.

[16] P. R. Kind dan EJ King, "Estimasi fosfatase plasma dengan penentuan fenol terhidrolisis dengan amino-antipirin," Journal of Clinical Pathology, vol. 7, no. 4, pp. 322-326, 1954.

[17] W. Q. Wolfson, C. Chon, E. Calvary, dan F. Ichiba, "Studi t e n t a n g protein serum. Prosedur cepat untuk estimasi protein total, albumin sejati, globulin total, globulin alfa, globulin beta, dan globulin gamma dalam 100 ml. serum,"

American Journal of Clinical Pathology, vol. 18, no. 9, hlm.

723-730, 1948.

[18] C. G. Coulambe dan LA Favrean, "Toksisitas senyawa amonium kuartener pada ayam," Kimia Klinis, vol. 11, no. 17, hal. 624, 1965.

[19] R. W. Bonses dan H. H. Taussky, "Pada penentuan kreatinin secara kolorimetri dengan reaksi Jaffe," The Journal of Biological Chemistry, vol. 158, hal. 581-591, 1945.

[20] H. T. Malloy dan K. T. Evelyn, "Penentuan bilirubin dengan kolorimeter fotolistrik," The Journal of Biological Chemistry, vol. 119, hal. 481, 1937.

[21] M. A. Morales, AJ Jabbagy, dan HR Terenizi, "Mutasi yang mempengaruhi akumulasi glikogen," Neurospora News Letters, vol. 30, hal. 24-25, 1973.

[22] O. H. Lowry, N. J. Rosenbrough, A. L. Farr, dan R. J. Randall,

"Pengukuran protein dengan pereaksi Folin fenol," The Journal of Biological Chemistry, vol. 193, no. 1, hal. 265-275, 1951.

[23] K. Das, L. Samanta, dan GBN Chainy, "Uji spektrofotometri yang dimodifikasi dari superoksida dismutase menggunakan nitrit yang diinduksi oleh radikal superoksida," Indian Journal of Biochemistry and Biophysics, vol. 37, no. 3, pp. 201-204, 2000.

[24] A. K. Sinha, "Uji kolorimetri katalase," Analytical Bio- chemistry, vol. 47, no. 2, hal. 389-394, 1972.

[25] J. T. Rotruck, AL Pope, HE Ganther, AB Swanson, GD Hafeman, dan WG Hoekstra, "Selenium: peran biokimiawi sebagai komponen glutathione peroksidase," Science, vol. 179, no. 4073, hal. 588-590, 1973.

[26] S. T. Omaye, T. P. Turbull, dan H. C. Sauberchich, "Metode yang dipilih untuk penentuan asam askorbat dalam sel, jaringan, dan cairan," Methods in Enzymology, vol. 6, hal. 3- 11, 1979.

[27] H. R. Rosenberg, Kimia dan Fisiologi Vitamin, Penerbit Interscience, New York, NY, USA, 1942.

[28] M. S. Moron, JW Depierre, dan B. Mannervik, "Tingkat aktivitas glutation, glutation reduktase, dan glutation S- transferase dalam paru-paru dan hati tikus," Biochimica et Biofisika Acta, vol. 582, no. 1, hal. 67-78, 1979.

[29] H. Ohkawa, N. Ohishi, dan K. Yagi, "Pengujian peroksida lipid dalam jaringan hewan dengan reaksi asam tiobarbiturat,"

Biokimia Analitik, vol. 95, no. 2, hal. 351-358, 1979.

[30] Y. L. Chew, EWL Chan, PL Tan, YY Lim, J. Stanslas, dan JK Goh, "Penilaian kandungan fitokimia, komposisi polifenol, aktivitas antioksidan dan antibakteri tanaman obat Leguminosae di Semenanjung Malaysia," BMC Complementary and Alternative Medicine, vol. 11, artikel 12, 2011.

[31] R. A. DeFronzo dan D. Tripathy, "Resistensi insulin otot rangka adalah cacat utama pada diabetes tipe 2," Diabetes care, vol. 32, no. 2, hal. S157-S163, 2009.

[32] C. I. Sajeeth, P. K. Manna, R. Manavalan, dan C. I. Jolly,

"Aktivitas antidiabetes dari formulasi poliherbal, Esf/ay/500 pada tikus Albino jantan diabetes yang diinduksi streptozotocin: sebuah penelitian," International Journal of Drug Formulation & Research, vol. 1, no. 1, hal. 311-322, 2010.

(16)

[33] N. P. Yadav, A. Pal, K. Shanker d k k . , "Efek sinergis silymarin dan ekstrak standar Phyllanthus amarus terhadap hepatotoksisitas yang diinduksi oleh CCl4 pada Rattus norvegicus," Phy-tomedicine, vol. 15, no. 12, hal. 1053-1061, 2008.

[34] S. Naskar, A. Islam, U. K. Mazumder, P. Saha, P. K. Haldar, dan M. Gupta, "Potensi antioksidan in vitro dan in vivo dari ekstrak hidrometanol buah phoenix dactylifera," Journal of Scientific Research, vol. 2, no. 1, hal. 144-157, 2010.

[35] P. Malini, G. Kanchana, dan M. Rajadurai, "Khasiat antibiabetik asam ellagic pada diabetes melitus yang diinduksi streptozotocin pada tikus wistar albino," Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, vol. 4, no. 3, pp. 124- 128, 2011.

[36] V. A. Kangralkar, DS Patil, dan RM Bandivadekar, "Stres oksidatif dan diabetes: sebuah tinjauan," International Journal of Pharma-Ceutical Applications, vol. 1, no. 1, hal. 38-45, 2010.

[37] L. Pari dan M. Latha, "Peran protektif ekstrak tanaman Scoparia dulcis terhadap status antioksidan otak dan lipidperoksidasi pada tikus Wistar jantan diabetes STZ," BMC Complementary and Alternative Medicine, vol. 4, artikel 16, 2004.

[38] V. N. Shilpa, N. Rajasekaran, V. K. Gopalakrishnan, dan K.

Devaki, "Aktivitas antioksidan in-vivo dari Premna corymbosa (Rottl.) terhadap stres oksidatif yang diinduksi oleh streptozotocin pada tikus albino Wis- tar," Journal of Applied Pharmaceutical Science, vol. 2, no. 10, 2012.

[39] V. Lobo, A. Patil, A. Phatak, dan N. Chandra, "Radikal bebas, antioksidan, dan makanan fungsional: Dampaknya terhadap kesehatan manusia," Pharmacognosy Reviews, vol. 4, no. 8, hal. 118-126, 2010.

(17)

BioMed Penelitian Internasional

Hindawi Publishing Corporation

http://www.hindawi.com Volume 2014

Jurnal

Farmasi

Jurnal Internasional

Kimia Obat

Jurnal

Vaksin

Jurnal

Pengiriman Obat

Hindawi Publishing Corporation http://www.hindawi.com

Volume 2014

Pengobatan Darurat Internasional

Nye ri

Penelitian dan Perawatan

M E D I A

TOR

INFLAMASI

Jurnal

Kecandua n

Hindawi Publishing Corporation http://www.hindawi.com

Volume 2014

Stroke

Penelitian dan Perawatan

Jurnal Dunia Ilmiah

http://www.hindawi.com Volume 2014 Volume 2014

Jurnal Internasional

Antibiotik

Hindawi Publishing Corporation http://www.hindawi.com Volume 2014

Penyakit Autoimun

Scientifica

http://www.hindawi.com

Jurnal

Pengobatan Tropis

Kirimkan naskah Anda di http://www.hindawi.com

Volume 2014 Hindawi Publishing Corporation

http://www.hindawi.com

Jurnal

Racun

Jurnal

Toksikologi

Kemajuan dalam Ilmu Farmakologi

Penelitian dan Praktik Anestesiologi