Slide Analisis Karbohidrat Ari 2021

Ari Tri Astuti

Analisis Karbohidrat

Analisis Karbohidr at

0 1

Analisis Kualitatif

0 2

Analisis

Kuantitatif

UJI KUALITATIF

Menyebabkan

karbohidrat mengalami dehidrasi

dan membentuk furfural (bentuk pentosa) atau 5- hidroksimetilfurfural (bentuk

heksosa), contoh : Molish

Reagen asam

dehidrasi Reagen gula

pereduksi Reagen

kondensasi

Reagen ini

mendeteksi adanya furfural atau 5-

hidroksimetilfurfural melalui proses adisi.

Contoh : reagen Molisch, Bial, dan Seliwanoff.

Reagen ini mengandung ion tembaga(II) dan dapat

mereduksi karbohidrat

dimana ion tembaga(II) akan direduksi menjadi larutan tembaga(I)oksida. Contoh : reagen Benedict dan

Barfoed

UJI

KUALITATIF

Uji

Molish

 Uji karbohidrat umum

 Didasari reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat (H₂SO₄)

membentuk cincin furfural yang berwarna ungu

 Karbohidrat oleh asam sulfat pekat (H₂SO₄) akan dihidrolisis menjadi monosakarida

 Monosakarida lalu mengalami dehidrasi oleh asam sulfat pekat (H₂SO₄) menjadi furfural/hidroksil fulfural

 Furfural/hidroksil fulfural + alfa naftol  senyawa berwarna ungu (violet)

 Reagen molish

(recolsinol/α naftol dalam alkohol/etanol)

 Sampel + reagen molish

Reaksi Uji Molish

Uji

Iodin/Iodium

 Karbohidrat dengan golongan

polisakarida akan memberikan reaksi dengan larutan Iodium dan memberikan warna biru kehitaman yang

menunjukkan adanya amilum (pati) pada sampel

 Warna spesifik tergantung jenis Karbohidratnya

 Sampel + larutan iodin

 Amilosa + iodin  biru

 Amilopektin + iodin  merah violet

 Glikogen/dextrin+ iodin  merah

coklat

Uji Iodin/Iodium

Uji Barfoed

 Larutan Barfoed merupakan campuran dari cupri asetat dan asam asetat

 Uji ini untuk membedakan monosakarida dan disakarida dengan kontrol pH dan waktu pemanasan

 Untuk penentuan KH jenis monosakarida dilakukan dalam suasana asam

 Prinsip : reaksi Cu²⁺ menjadi Cu⁺

 Larutan Barfoed + gula reduksi (monosakarida)

endapan merah kuprooksida (Cu₂O)

 Dalam reaksi ini, disakarida bereaksi sangat lama dg reagen Barfoed shg TIDAK membentuk endapan warna merah

Uji

Benedict

 Uji kimia untuk mengetahui kandungan gula (karbohidrat) pereduksi.

 Gula pereduksi : jenis

monosakarida dan beberapa disakarida (laktosa dan maltosa)

 Pada uji Benedict, pereaksi ini akan bereaksi dengan gugus aldehid (kecuali aldehid dalam gugus aromatik dan alpha

hidroksiketon)

 Gula yang mempunyai gugus

aldehid ditambah larutan benedict dan dipanaskan maka akan

membentuk reaksi oksidasi reduksi (redoks) dan adanya endapan warna merah

bata/coklat

 Larutan benedict

merupakan campuran garam kuprisulfat

(CuSO4), natrium sitrat, dan natrium karbonat

Reaksi Uji Benedict

Uji Seliwanof

 Tes seliwanoff juga disebut tes fruktosa/ketosa

 Reagen seliwanoff berisi 0,05 g recolsinol dlm 100 ml HCl

 Fruktosa termasuk jenis monosakarida ketosa krn mempunyai gugus keton

 Jenis monosakarida ketosa lebih cepat didehidrasi menjadi fulfural daripada aldosa

 Aldosa bereaksi negatif pada tes Seliwanoff

 Pada uji ini, fulfural + resorcinol (1,3 dihidroksi benzen) akan membentuk kompleks warna merah cokelat

 Fruktosa  Fulfural + reagen seliwanof 

warna merah coklat

Uji Osazon

• Osazon adalah suatu kristal berwarna kuning yang larut dalam air, dan terbentuk apabila monosakarida atau disakarida pereduksi dipanaskan dengan fenilhidrazin

• Fungsi : membedakan bermacam-macam karbohidrat dari gambar kristalnya, misalnya identifikasi glukosa dan galaktosa dalam urin ibu menyusui

• Aldosa/ketosa + fenilhidrazin+pemanasanhidrazon/osazon (kristal kuning)

Uji Moore

 Prinsip dari uji moore adalah melihat ada tidaknya

karbohidrat dengan mengggunakan basa kuat/alkali kuat (NaOH) dan pemanasan

 Karbohidrat akan membentuk warna coklat karena

bertemu dg basa dan pemanasan sehingga membentuk warna karamel dan bau karamel yang khas

 Penggunaan NaOH sbg penurun titik lebur dan gugus OH pada NaOH akan berikatan dg gugus aldehid atau keton

 Pemanasan bertujuan untuk membuka ikatan karbon (C)

dengan hidrogen (H) diganti dg gugus OH

Reaksi Uji Moore

UJI

KUANTITATIF

 Metode yang digunakan untuk menstandarkan analisis gula pereduksi

 Merupakan uji karbohidrat yang resmi ditetapkan oleh BSN dalam SNI 01-2891- 1992

 Pada tahun 1936 International Commission for Uniform

Methods of Sugar Analysis mempertimbangkan metode luff schoorl sebagai salah satu metode yang digunakan untuk menstandarkan analisis gula pereduksi

 Prinsip analisis yaitu reduksi Cu²⁺ menjadi Cu⁺ oleh monosakarida. Monosakarida bebas akan mereduksi larutan basa dari garam logam menjadi bentuk oksida

atau bentuk bebasnya. Kelebihan Cu²⁺ yang tidak tereduksi kemudian dikuantifikasi dengan titrasi iodometri (SNI 01-2891-1992)

METODE LUFF SCHOORL

Waktu pemanasan kekuatan reagen

 Karbohidrat

kompleks gula sederhana

(gula

pereduksi)

Cu₂O (s) 2 CuI^- + I₂

 Gula pereduksi + 2 Cu²⁺

 2 Cu²⁺ (kelebihan) + 4 I^-

 I₂+ 2 S₂O₃^2-

2 CuI₂ 2 I^- + S₄0₆ ^2-

R e a k s i p a d a L u f f S c h o o r l

 Untuk analisis gula reduksi

 Gula reduksi = KH yang dapat mereduksi senyawa-senyawa penerima elektron

( contoh : glukosa, fruktosa)

 Ujung dari suatu gula pereduksi adalah ujung yang mengandung gugus aldehida atau keton bebas.

 Semua monosakarida dan disakarida

kecuali sukrosa termasuk sebagai gula pereduksi.

METODE NELSON SOMOGYI

 Metode ini didasarkan pada peristiwa tereduksinya kupri okisida menjadi kupro oksida karena adanya kandungan senyawa gula reduksi pada bahan.

 Reagen yang digunakan biasanya merupakan campuran kupri sulfat, Na-karbonat, natrium sulfat, dan K- Na-tartrat (reagen Nelson Somogy)

 Pereaksi Somogyi merupakan pereaksi tembaga alkali yang

mengandung Na₂PO₄ anhidrat dengan garam K-Na-tartrat (garam Rochelle), sedangkan pereaksi Nelson mengandung amonium molibdat H₂SO₄, NaHASO₄.7H₂O.

 Metode Nelson Somogyi digunakan untuk mengukur kadar gula reduksi dengan menggunakan pereaksi tembaga arsenomolibdat.

 Reagen nelson somogyi berfungsi sebagai oksidator antara kuprooksida yang bereaksi dengan gula reduksi membentuk endapan merah bata.

METODE NELSON SOMOGYI

 Kupri mula-mula direduksi menjadi kupro dengan pemanasan larutan gula

 Hasil reduksi kuprooksida yang bereaksi dengan arsenomolybdat dan akan mereduksi menjadi molybdine blue (molibdenum biru) dan warna biru inilah yang akan diukur nilai absorbansinya.

 Intensitas warna biru yang terbentuk ekuivalen dengan jumlah gula reduksi dalam sampel

 Reaksi warna yang membentuk dapat

menentukan konsentrasi gula dalam sampel dengan mengukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer.

METODE NELSON SOMOGYI

CREDITS: This presentation template was created by Slidesgo, including icons by Flaticon, and infographics & images by

Freepik

TERIMA KASIH

Do you have any questions?