Investigating the Erα and Cyclin D1 Gene Expression Levels, Changes in SOD, NO, and MDA Levels, and Histopathology of
Mice Testicular Tissue Treated with AFG1
Toraj Zamir-nasta1, Seyran Kakebaraei2, Mona Pazhouhi3,
Cyrus Jalili4
1 PhD Student in Phatology, Student Research Committee, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran
2 PhD Student in Anatomical Sciences, School of Medicine, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran
3 PhD in Biochemistry, School of Medicine, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran
4 Professor, Medical Biology Research Center, Health Technology Institute, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran
(Received January 9, 2021 ; Accepted may 3, 2021)
Abstract
Background and purpose: Previous studies have shown the adverse effects of aflatoxin G1 on testicular tissue and the process of spermatogenesis. The aim of this study was to investigate changes in the expression of Cyclin D1, the estrogen receptor ERα and the levels of nitric oxide (NO), superoxide
dismutase (SOD), and malondialdehyde (MDA) in testicular tissue following exposure to AFG1.
Materials and methods: Twenty four mice were divided into four groups (n=6 per group); a control group (saline) and three treatment groups to receive AFG1 for 7, 15, and 28 days intraperitoneally. Histopathological changes caused by this toxin along with the expression of Cyclin D1 and Erα, as well as Nitric oxid (NO), superoxide dismutase (SOD), and malondialdehyde (MDA) levels in
testicular tissue were measured.
Results: The expression of Cyclin D1 in testicular tissue in AFG1 receiving groups increased in a time-dependent manner and the expression of ERα decreased in testicular tissue in AFG1 receiving groups (P<0.05). Also, AFG1 decreased the level of SOD in testicular tissue in a time-dependent manner and increased the levels of MDA and NO. Atrophy of the seminiferous tubules and extensive intercellular edema were seen in treatment groups compared to the control group.
Conclusion: AFG1 disrupts the process of cell division by atrophy of spermatozoa tubules in testicular tissue. It also reduced the expression of ERα receptors and increased the expression of Cyclin D1 along with decreasing the level of SOD in testicular tissue and increased MDA andNO levels. These factors can cause disorders in the process of spermatogenesis.
Keywords: aflatoxin G1, spermatogenesis, ERα, Cyclin D1, oxidative stress, mice
J Mazandaran Univ Med Sci 2021; 31 (198): 1-12 (Persian).
* Corresponding Author: Cyrus Jalili - Health Technology Institute, Kermanshah University of Medical Sciences, Kermanshah, Iran (E-mail: [email protected])
هرود ﻢﮑﯾ و ﯽﺳ هرﺎﻤﺷ 198 ﺮﯿﺗ لﺎﺳ 1400 ) 12 -1 (
يﺎﻫ نژ نﺎﯿﺑ ﯽﺳرﺮﺑ ، Erα
Cyclin D1
تاﺮﯿﯿﻐﺗ ، ، SOD
، NO
و MDA
ﯽﺑﺎﯾزرا ﮏﯾژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘﺴﯿﻫ
يرﻮﺳ شﻮﻣ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ
ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ رد
AFG1
ﺎﺘﺴﻧﺮﯿﻤﺿ جرﻮﺗ 1
ﯽﯾاﺮﺑ ﻪﮐﺎﮐ ناﺮﯿﺳ 2
ﯽﻫوﮋﭘ ﺎﻧﻮﻣ 3
ﯽﻠﯿﻠﺟ سوﺮﯿﺳ 4
هﺪﯿﮑﭼ
ﻪﻘﺑﺎﺳ :فﺪﻫ و ﺳ تاﺮﺛا ﻦﯿﺸﯿﭘ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ) ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ءﻮ
(AFB1 نﺎــﺸﻧ ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا ﺪﻧور و ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ يور ﺮﺑ ارB1
هداد نﺎﯿﺑ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﯽﺳرﺮﺑ فﺪﻫ ﺎﺑ ،ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا .ﺪﻧا Cyclin D1
ﯽﻧژوﺮﺘﺳا هﺪﻧﺮﯿﮔ ، ) ﺪﯾﺎﺴﮐا ﮏﯾﺮﺘﯿﻧ ﺢﻄﺳ وERα
( NO ﻪــﺑ
هاﺮﻤﻫ ) زﺎﺗﻮﻤﺴﯾد ﺪﯿﺴﮐاﺮﭘﻮﺳ ) ﺪﯿﻫﺪﻟآ يد نﻮﻟﺎﻣ و (SOD
ﺎﻌﺘﻣ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد (MDA ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ ﺐﻗ
،AFG1 ﺖﻓﺮﯾﺬﭘ مﺎﺠﻧا .
شور و داﻮﻣ :ﺎﻫ
،ﯽﺑﺮﺠﺗ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد 24
ﺶﯾﺎــﻣزآ و لﺮــﺘﻨﮐ هوﺮــﮔ رﺎــﻬﭼ رد ﯽﻫﺎﮕﺸﯾﺎﻣزآ ﮏﭼﻮﮐ ﺪﯿﻔﺳ شﻮﻣ ﺮﺳ
)6 ﻢﯿﺴﻘﺗ (هوﺮﮔ ﺮﻫ رد ﺮﺳ هوﺮﮔ ،ﻦﯿﻟﺎﺳ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ .ﺪﻧﺪﺷ يﺪﻨﺑ
ﯽﺸﯾﺎﻣزآ يﺎﻫ تﺪــﻣ ﻪــﺑ ارAFG1
7 ، 15 و 28 ﻞــﺧاد زور
ﻐﺗ .ﺪﻧدﺮﮐ ﺖﻓﺎﯾرد ﯽﻗﺎﻔﺻ نﺎﯿﺑ ناﺰﯿﻣ هاﺮﻤﻫ ﻪﺑ ﻢﺳ ﻦﯾا زا ﯽﺷﺎﻧ ﮏﯾژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘﺴﯿﻫ تاﺮﯿﯿ
Cyclin D1 و
ﺢﻄــﺳ ﻦﯿــﻨﭽﻤﻫ ،Erα
،NO SOD و MDA هزاﺪﻧا ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ﺪﯾدﺮﮔ يﺮﯿﮔ
.
ﻪﺘﻓﺎﯾ :ﺎﻫ نﺎﯿﺑAFG1 Cyclin D1 نﺎــﯿﺑ و ،ﺶﯾاﺰــﻓا نﺎــﻣز ﻪــﺑ ﻪﺘــﺴﺑاو ﻞﮑــﺷ ﻪﺑ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ار
ERα ار ﻪــﻀﯿﺑ ﺖــﻓﺎﺑ رد
) ﺶﻫﺎﮐ 05 /0 P<
.داد ( ﺢﻄــﺳ نﺎﻣز ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو ﻞﮑﺷ ﻪﺑAFG1
ﺢﻄــﺳ ،ﺶﻫﺎــﮐ ﻪــﻀﯿﺑ ﺖــﻓﺎﺑ رد ارSOD وMDA
ﺶﯾاﺰــﻓا ارNO و
ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ مﺮﭙﺳا يﺎﻫ
هوﺮﮔ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ﻊﯿﺳو ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻦﯿﺑ مدا و زﺎﺳ ﯽﻣ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﯽﺸﯾﺎﻣزآ يﺎﻫ
دﻮﺷ .
:جﺎﺘﻨﺘﺳا AFG1 ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ﺎﺑ ﺎﺑ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ،ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد زﺎﺳ مﺮﭙﺳا يﺎﻫ
ﺶﻫﺎﮐ نﺎﯿﺑ هﺪﻧﺮﯿﮔ يﺎﻫ نﺎﯿﺑ ﺶﯾاﺰﻓا وERα
Cyclin D1 زﺎﺗﻮﻤﺴﯾد ﺪﯿﺴﮐاﺮﭘﻮﺳ ﺢﻄﺳ ﺶﻫﺎﮐ هاﺮﻤﻫ ﻪﺑ
) ( SOD ﺢﻄﺳ ﺶﯾاﺰﻓا و ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ) ﺪﯿﻫﺪﻟآ يد نﻮﻟﺎﻣ
و (MDA
) ﺪﯾﺎﺴﮐا ﮏﯾﺮﺘﯿﻧ ﺐﯿﺳآ ﺪﯾﺪﺸﺗ (NO
ﻞﻣاﻮﻋ ﻦﯾا ﻪﮐ هﺪﺷ ﺮﺠﻨﻣ ار ﺎﻫ ﯽﻣ
ددﺮﮔ ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا ﺪﻧور رد لﻼﺘﺧا ﺐﺒﺳ ﺪﻧاﻮﺗ .
يﺎﻫ هژاو :يﺪﯿﻠﮐ
ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ،ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا ،G1
Cyclin D1 ،
شﻮﻣ ،ﻮﯿﺗاﺪﯿﺴﮐا سﺮﺘﺳا ،ERα
ﻪﻣﺪﻘﻣ
ﻦﯿــﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ) ﺎــﻫ
،ﮏﯿﻠﮑﯾﺎــﺳوﺮﺘﻫ تﺎــﺒﯿﮐﺮﺗ (AFs
ﻦﯾرﺎــﻣﻮﮐﻮﻧارﻮﻔﯾد (Difuranocoumarin)
راد نﮋﯿــﺴﮐا و سووﻼــﻓ سﻮﻠﯾژﺮﭙــﺳآ چرﺎــﻗ ﻪﻠﯿﺳو ﻪﺑ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ هﺪﺷ
ﯽﻣ ﺪﯿﻟﻮﺗ سﻮﮑﯿﺘﯾزارﺎﭘ ﺪﻧﻮﺷ
)1 . ( نﻮﻨﮐﺎﺗ 17 ﻧ عﻮ ﺐﯿﮐﺮﺗ
:لﻮﺌﺴﻣ ﻒﻟﻮﻣ ﯽﻠﯿﻠﺟ سوﺮﯿﺳ
- هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ : ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﺰﮐﺮﻣ
ﺖﻣﻼﺳ هﺪﮑﺸﻫوﮋﭘ ،ﯽﮑﺷﺰﭘ يژﻮﻟﻮﯿﺑ [email protected]
E-mail:
1 . اﺮﯾا ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﯽﯾﻮﺠﺸﻧاد تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ﻪﺘﯿﻤﮐ ،يژﻮﻟﻮﺗﺎﭘ ياﺮﺘﮐد يﻮﺠﺸﻧاد ن
2 . ناﺮﯾا ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﯽﮑﺷﺰﭘ هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽﺤﯾﺮﺸﺗ مﻮﻠﻋ ياﺮﺘﮐد يﻮﺠﺸﻧاد
3 . ناﺮﯾا ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ هﺎﮕﺸﻧاد ،ﯽﮑﺷﺰﭘ هﺪﮑﺸﻧاد ،ﯽﻤﯿﺷﻮﯿﺑ ياﺮﺘﮐد
4 . ﺰﮐﺮﻣ ،دﺎﺘﺳا هﺎﮕﺸﻧاد ،ﺖﻣﻼﺳ هﺪﮑﺸﻫوﮋﭘ ،ﯽﮑﺷﺰﭘ يژﻮﻟﻮﯿﺑ تﺎﻘﯿﻘﺤﺗ ، هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ ﯽﮑﺷﺰﭘ مﻮﻠﻋ
ناﺮﯾا ،هﺎﺸﻧﺎﻣﺮﮐ
: ﺖﻓﺎﯾرد ﺦﯾرﺎﺗ 20
/ 10 / 1399 : تﺎﺣﻼﺻا ﺖﻬﺟ عﺎﺟرا ﺦﯾرﺎﺗ 6
/ 11 / 1399 : ﺐﯾﻮﺼﺗ ﺦﯾرﺎﺗ 13
/2 / 1400
پ زا ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ﻪﮐ ﺖﺳا هﺪﺷ يزﺎﺳاﺪﺟ
،عﻮــﻧ رﺎــﻬﭼ
،AFB1 ،AFB2 ،AFG1 ﯽﻠـــﺻاAFG2
نآ ﻦﯾﺮـــﺗ ﺎـــﻫ
ﯽﻣ ﺪﻨﺷﺎﺑ )2
، ﺎﻫ ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ عاﻮﻧا نﺎﯿﻣ رد .3(
عﻮﻧ ﺪﻌﺑG1
ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ) زا ﻢﻬﻣ (B1
رﺎﯿﺴﺑ ناﺰﯿﻣ ﻪﺑ و هدﻮﺑ عﻮﻧ ﻦﯾﺮﺗ
ﯽﻣ ﺖﯾور تﺎﺑﻮﺒﺣ و تﻼﻏ رد يدﺎﯾز ددﺮــﮔ
)4
، . 5(
شراﺰــﮔ
نﺎﻃﺮﺳ زوﺮﺑ ناﺰﯿﻣ ﻦﯾﺮﺗﻻﺎﺑ ﻪﮐ ﻦﯿﭼ لﺎﻤﺷ رد ﺖﺳا هﺪﺷ ﯽﻣ اراد ار يﺮﻣ و ﻪﯾر
،ﺪﺷﺎﺑ AFG1 ناواﺮﻓ زا ﯽﮑﯾ ﻦﯾﺮــﺗ
ﻪﻘﻄﻨﻣ ﻦﯾا ﯽﯾاﺬﻏداﻮﻣ و تﻼﻏ رد ﯽﮔدﻮﻟآ ﻊﺒﻨﻣ ﯽﻣ
ﺪــﺷﺎﺑ )6 . (
ﻪــﮐ ﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ﺮﮕﯾد شراﺰﮔ رد رد ﺺــﻘﻧ ﺎــﺑAFG1
ﯽﺘﻧآ ﻪﺋارا ﺖﯿــﺳﻮﻔﻨﻟ ﻂــﺳﻮﺗ ﯽﯾﺎــﺳﺎﻨﺷ مﺪــﻋ و نژ يﺎــﻫ
T
ﯽﻣ رﻮﻣﻮﺗ ﺶﯾاﺪﯿﭘ ﺚﻋﺎﺑ دﻮﺷ
)7 . ( ﯽﺳرﺮﺑ ﯽــﻠﺒﻗ يﺎﻫ نﺎــﺸﻧ
ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ﻪﮐ ﺪﻧداد ﺐﺒﺳ ﺎﻫ
ﺶﻫﺎﮐ يژﻮــﻟﻮﻓرﻮﻣ و كﺮــﺤﺗ
مﺮﭙﺳا لﻮﻠﺳ داﺪﻌﺗ ﺶﻫﺎﮐ ،ﺎﻫ رد ﺢﺿاو مدا ،ﮏﯾﺪﯿﻟ يﺎﻫ
ﺖﻓﺎﺑ ﺖﯿــﺳﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا داﺪــﻌﺗ ﺶﻫﺎــﮐ ،ﻪــﻀﯿﺑ ﯽﻨﯿﺑﺎــﻨﯿﺑ و ﺎــﻫ
،ﺎﻫﺪﯿﺗﺎﻣﺮﭙــﺳا نﻮــﻣرﻮﻫ ﯽﻣﺮــﺳ ناﺰــﯿﻣ ﺶﻫﺎــﮐ
يﺎــﻫ ،LH
ﯽــﻣ لﻮﯾداﺮﺘﺳا ﺖﯾﺎﻬﻧ رد و نوﺮﺘﺳﻮﺘﺴﺗ ،FSH دﻮــﺷ
)8
، 9 .(
ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ﻪــﺑ هدراو ﺐﯿﺳآ ﺶﯾاﺰﻓا ﺎﺑAFB1
ﺐﺒــﺳDNA
و ﺪﯿﻟﻮﺗ ﺶﻫﺎﮐ نآ ﯽﭘ رد و ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا ﺪﻧور رد لﻼﺘﺧا ﯽــﻣ مﺮﭙﺳا ﺖﯿﻔﯿﮐ دﻮــﺷ
) 10 . ( ﯽﺘﻧآ ناﺪﯿــﺴﮐا ﯽﺗﺎــﺒﯿﮐﺮﺗ ﺎــﻫ
زا ﯽﺷﺎﻧ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﺐﯿﺳآ ﺮﺑاﺮﺑ رد ﺖﻈﻓﺎﺤﻣ ﺚﻋﺎﺑ ﻪﮐ ﺪﻨﺘﺴﻫ لﻮﮑﻟﻮﻣ لﺎﮑﯾدار مﺎﻧ ﻪﺑ ﯽﯾﺎﻫ ﯽﻣ دازآ يﺎﻫ
داﻮﻣ ﻦﯾا .ﺪﻧﻮﺷ
ﻪﺘﺳد ﯽﻤﯾﺰﻧآﺮﯿﻏ و ﯽﻤﯾﺰﻧآ هوﺮﮔ ود رد ﯽﻣ يﺪﻨﺑ
ﺪــﻧدﺮﮔ
) ،ﻞﻣﺎﺷ ﯽﻤﯾﺰﻧآ هوﺮﮔ (SOD
ﻢﺘــﺴﯿﺳ ِﻢﻬﻣ عاﻮﻧا زا ﯽﮑﯾ ،
ﯽﻋﺎﻓد ﯽﺘﻧآ ناﺪﯿﺴﮐا لﻮﻠﺳ ﯽﻣﺎﻤﺗ رد ًﺎﺒﯾﺮﻘﺗ و ﺖﺳا ﯽﯾﺎــﻫ
ﺎــﺑ ﻪــﮐ دراد دﻮــﺟو ،ﺪــﻧراد راﺮــﻗ نﮋﯿــﺴﮐا ضﺮﻌﻣ رد ﻪﮐ لﺎﮑﯾدار تﻻﻼﺘﺧا ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺖﻣوﺎﻘﻣ ﻧ دازآ يﺎﻫ
ﯽــﻤﻬﻣ ﺶــﻘ
ﯽﻣ ﺎﻔﯾا ﯽﻟﻮﻠﺳ ﺎﺸﻏ زا ﺖﻈﻓﺎﺤﻣ رد ﺪﻨﮐ
) 11 . ( لﺎﮑﯾدار يﺎﻫ
ﺎﯾ و ﺎﻫ ﻢﺗا ،دازآ ﻮﻣ
لﻮـﮑﻟ دﺮــﻔﻨﻣ يﺎﻫ نوﺮـﺘﮑﻟا ﺎـﺑ ﯽﯾﺎـﻫ
هدﻮـﺑ ﻻﺎـﺑ رﺎﯿﺴـﺑ يﺮﮕﺸـﻨﮐاو ترﺪﻗ و مواﺪﻣ شدﺮـﮔ ﺎـﺑ ﻪﮐ
لﻮﮑﻟﻮﻣوﺮﮐﺎـﻣ ﻪـﺑ ﺐﯿﺳآ ﺐﺟﻮﻣ ،نﺪﺑ رد ﻒـﻠﺘﺨﻣ يﺎـﻫ
ﺗ و ﺪﯾﺪــﺷ يرﺎﺘﺧﺎــﺳ تاﺮــﯿﯿﻐﺗ و ناراﺪــﻧﺎﺟ نﺪــﺑ تاﺮــﯿﯿﻐ
ﮏﻣاﺪــﻧا يدﺮﮑﻠﻤﻋ ﯽــﻣ ﯽﻟﻮﻠــﺳ يﺎــﻫ
زﺎــﺳ ﻪــﻨﯿﻣز و دﻮــﺷ
يرﺎﻤﯿﺑ ﯽﻣ ﯽﻔﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ دﻮــﺷ
) 12
، 13 . ( ﺪﯿــﺴﮐا ﮏــﯾﺮﺘﯿﻧ )
( NO
ﮏــﯾژﻮﻟﻮﯿﺑ يﺎــﻫدﺮﮑﻠﻤﻋ و هدﻮــﺑ دازآ لﺎــﮑﯾدار ﮏـــﯾ ﻪﺳوﺮﭘ رد يدﺪﻌﺘﻣ
ﯽﮑﯾژﻮـﻟﻮﯾﺰﯿﻓ يﺎﻫ
، ﯽﮑﯾژﻮﻟﻮﺗﺎﭘ و
رد
ﯽﻣ يزﺎﺑ قوﺮﻋ يژﻮﻟﻮﯾﺰﯿﻓﻮﺗﺎﭘ ﺪﯾﺎﻤﻧ
) 14 . ( ﻮﯿﺗاﺪﯿــﺴﮐا سﺮﺘﺳا
ﻂﯿﺤﻣ رد يﺎﻫﺪﯿــﺴﮐاﺮﭘ ﺪــﯿﭙﯿﻟ ﻞﯿﮑــﺸﺗ ﻪــﺑ ﺮــﺠﻨﻣ ﯽﻟﻮﻠــﺳ
ﯽﻣ ﺮﮕﺸﻨﮐاو و راﺪﯾﺎﭘﺎﻧ راﺪﯾﺎﭘﺎﻧ يﺎﻫﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ ﻪﯾﺰﺠﺗ .دﻮﺷ
ﻪــﺑ ﺮــﺠﻨﻣ عﺎﺒــﺷا ﺮــﯿﻏ بﺮــﭼ يﺎﻫﺪﯿــﺳا زا هﺪــﺷ ﻖﺘــﺸﻣ و يد نﻮﻟﺎﻣ ﻞﯿﮑﺸﺗ ﯽﻣ ﺪﯿﺋﺪﻟآ
دﻮﺷ ) 15 .(
هﺪﻧﺮﯿﮔ يﺎﻫ وﺰﺟ ،ERα ﺮــﯾز هداﻮﻧﺎــﺧ هﺪــﻧﺮﯿﮔ يﺎــﻫ
يﺪﯿﺋوﺮﺘــﺳا ﻨﺘــﺴﻫ
ﺪ ﻪــﮐ ﺮــﺑ يور ﻪﺘــﺴﻫ راﺮــﻗ و ﺪــﻧراد
نژوﺮﺘــﺳا 17- β ﻪــﺑ ناﻮــﻨﻋ ﻦﯾﺮــﺗ ﺐــﺳﺎﻨﻣ ﺪــﻧﺎﮕﯿﻟ
ﻦــﯾا
هﺪﻧﺮﯿﮔ ﺎﻫ ﻪﺑ ﯽﻣ بﺎﺴﺣ دور
) 16 . ( ﻦﯾا هﺪﻧﺮﯿﮔ ﺎﻫ رد بﺎــﯿﻏ
تﺎﺒﯿﮐﺮﺗ ﮏﯿﻧژوﺮﺘﺳا ﻪﺑ
مﺮﻓ ﺮﯿﻏ هﺪﯾد لﺎﻌﻓ ﯽﻣ
دﻮﺷ و د ر
ترﻮــﺻ لﺎــﺼﺗا ﺪــﻧﺎﮕﯿﻟ ﻪــﺑ ﻦــﯾا هﺪــﻧﺮﯿﮔ ﺎــﻫ ﺪــﻨﯾاﺮﻓ
هﺰﯾﺮﻤﯾدﻮﻤﻫ نﺪﺷ
رد نآ ﺎﻫ دﺎﺠﯾا ﯽﻣ دﻮﺷ ﻪــﮐ رد ﺖــﯾﺎﻬﻧ
زا نوﺮﭘﺎﭼ يﺎﻫ دﻮــﺧ اﺪــﺟ هﺪــﺷ و ﺮــﺑ يور مﻮــﻧژDNA
لﻮﻠــﺳ فﺪــﻫ نﺎــﯿﺑ نژ ﯽــﺼﺨﺸﻣ ار
ءﺎــﻘﻟا ﯽــﻣ ﺪــﻨﯾﺎﻤﻧ .
هﺪﻧﺮﯿﮔ يﺎﻫ نژوﺮﺘﺳا ﻪﺑ رﻮﻃ ﻪﯿﻟوا رد لﻮﻠــﺳ يﺎــﻫ ،ﻢــﺣر
،نژاو نﺎﺘﺴﭘ و ﺰﻐﻣ دﻮﺟو ﺪــﻧراد و ﻪــﺑ ود عﻮــﻧ ﺎــﻔﻟآ و ﺎــﺘﺑ
ﻢﯿﺴﻘﺗ ﯽﻣ عﻮــﻧ ﻪﮐ ﺪﻧﻮﺷ ﺎــﻔﻟآ
رد مﺎــﻤﺗ ﺖــﻓﺎﺑ ﺦــﺳﺎﭘ يﺎــﻫ
هﺪــﻨﻫد ﻪــﺑ نژوﺮﺘــﺳا دﻮــﺟو
،دراد ﺎــﻣا ﺪــﻧﺮﯿﮔ ه ﺎــﺘﺑ رد
ﺖﻓﺎﺑ يﺎﻫ يﺮﺗدوﺪــﺤﻣ ﺖــﻓﺎﯾ
ﯽــﻣ ﺪﻧﻮــﺷ ) 17 ﺮــﮐذ ﻞــﺑﺎﻗ(.
هﺪﻧﺮﯿﮔ ﺪﺟاو ﺰﯿﻧ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ ﻪﮐ ﺖﺳا يﺎﻫ
ﯽﻣERα ﺪــﺷﺎﺑ
و تﺎــﺒﯿﮐﺮﺗ ﯽﻧژوﺮﺘــﺳا
رد ﺢﻄــﺳ ﯽﻌﯿــﺳو ﯽــﻣ ﺪــﻨﻧاﻮﺗ
،دﺮﮑﻠﻤﻋ ﺰﺘﻨﺳ و ﺎﯾ ﯽﺘﺣ رﺎﺘﺧﺎﺳ ﻦﯾا هﺪﻧﺮﯿﮔ ﺎــﻫ ار ﺖــﺤﺗ
ﺮﯿﺛﺎﺗ راﺮﻗ ﺪﻨﻫد ) 18 . ( رد تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ
، و نﺎﻃﺮــﺳ ﻦﯿــﺑ طﺎــﺒﺗرا
ﯾا رد ﺶﻬﺟ ﺖﺳا هﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ﺎﻫ هﺪﻧﺮﯿﮔ ﻦ
) 19 ، 20 . ( ﻪﺑ
رﻮﻃ ﯽﻠﮐ ﻢﯿﻈﻨﺗ ﻪﺧﺮﭼ ﯽﻟﻮﻠﺳ رد ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻢﯿﺴﻘﺗ
ًﺎﺗﺪﻤﻋ ﺮﺑ
هﺪﻬﻋ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ يﺎﻫ Cyclin ﯽﻣ ﺪﺷﺎﺑ ﻪﮐ رد ﻦﯾا نﺎﯿﻣ نﺎــﯿﺑ
نژ يﺎــﻫ طﻮــﺑﺮﻣ ﻪــﺑ Cyclin D1 و
Cyclin E1 زا
ﻪــﻠﻤﺟ
ﻢﻬﻣ ﻦﯾﺮﺗ ﻞﻣاﻮﻋ ﯽﻣ و ﺪﺷﺎﺑ تﺎــﺒﯿﮐﺮﺗ و نژوﺮﺘــﺳا ﺎــﺑ ﻪــﮐ
ﯽﻣ نژوﺮﺘﺳا ﻪﺒﺷ ﻮﺗ
ﺪﻧﻮــﺷ ﺶﻨــﮐاو دراو ﺪﻨﻧا )
21 . ( ًﺎﺗﺪــﻤﻋ
Cyclin ﺎﻫ ﻪﺑ ﮏﻤﮐ ) يﺎﻫزﺎﻨﯿﮐ ﻂﺒﺗﺮﻣ (CDK
ﺎــﺑ
،دﻮــﺧ
ﺖﯿﻟﺎﻌﻓ يﺎﻫ دﻮﺧ ار ﻪﺑ مﺎﺠﻧا ﯽــﻣ .ﺪﻨﻧﺎــﺳر ﺶﯾاﺰــﻓا ناﺰــﯿﻣ
نﺎــﯿﺑ ﻦﯿﺌﺗوﺮــﭘ cyclin D1 ﺚــﻋﺎﺑ
هﺎــﺗﻮﮐ نﺪــﺷ زﺎــﻓ G1
ﻣ ﯽ دﻮﺷ و لﻼﺘﺧا ﻦﯾا نﺎﯿﺑ ﻢﯿﻈﻨﺗ لﻮﮑﻟﻮﻣ
رد ﻞﺣاﺮﻣ ﻪﯿﻟوا
ﻞﮑﯿﺳ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﺖﺳا ﯽﻗﺎﻔﺗا ﻪﮐ
رد ﯽــﯾادز رﻮﻣﻮﺗ ﻦﯿﺣ خر
ﯽﻣ ﺪﻫد ) 22 . ( ﻦﯾا ﻪﺘﮑﻧ ﻪﺑ ﯽﺑﻮﺧ ﺺﺨــﺸﻣ هﺪــﯾدﺮﮔ ﺖــﺳا
ﻪــﮐ ﻦﯿﺌﺗوﺮــﭘ يﺎــﻫ Cyclin D1 ﻢــﻬﻣ ناﻮــﻨﻋ ﻪــﺑ
ﻦﯾﺮــﺗ
ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ هﺪــﻧﺮﯿﮔ نژوﺮﺘــﺳا ﺲﮑﻠﭙــﻤﮐ ياﺮــﺑ فﺪــﻫ يﺎــﻫ
ﯽــﻣ بﺎﺴﺣ ﻪﺑERα ﺪــﻧور
) 23 ، 24 . ( ﺖــﻘﯿﻘﺣ رد تﺎــﻌﻟﺎﻄﻣ
ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ﻪﮐ ﺪﻧا هداد نﺎﺸﻧ ﻦﯿﺸﯿﭘ يور ﺮﺑ ﺮﯿﺛﺎﺗ ﺎﺑB1
ﯿﻫ رﻮــﺤﻣ ﯽــﺳﻮﻣﻻﺎﺗﻮﭙ -
رد لﻼﺘـــﺧا ﺚــﻋﺎﺑ يﺰﯿﻓﻮــﭙﯿﻫ
دﻮــﺷ ﯽــﻣ ﻪــﻀﯿﺑ ﺖــﻓﺎﺑ ﯽﻨﯾﺮﮐوﺪــﻧآ هﺎﮕﺘــﺳد )
25 ، 26 زا .(
نآ ﻪــﮐ ﺎــﺟ عﻮــﻧ زا ﺪــﻌﺑAFG1
ﯽﻤــﺳ ﺰــﺟB1 ﻦﯾﺮــﺗ
ﻦﯿﺴﮐﻮﺗﻼﻓآ ﯽــﻣ بﻮــﺴﺤﻣ ﺎﻫ
ﺮــﺑ نآ ﺖﯿﻤــﺳ ﺮــﺛا و دﻮــﺷ
ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ عﻮــﻧ ﺮــﮕﯾد ﺎــﺑ هاﺮــﻤﻫ و ﯽﻠﮐ رﻮﻃ ﻪﺑ
نآ يﺎــﻫ
،ﺖــﺳا هﺪﯾدﺮﮔ شراﺰﮔ ﻪــﻟﺎﻫ رد ﻪــﺘﮑﻧ ﻦــﯾا ﮏــﻨﯾا
يا زا
ﯽﻣ ﯽﻗﺎﺑ مﺎﻬﺑا ﻪﮐ ﺪﻧﺎﻣ
ﺎﯾآ ﺮﯿﯿﻐﺗ رد نﺎﯿﺑ ﻢﯿﻈﻨﺗ هﺪــﻨﻨﮐ يﺎــﻫ
ﻪﺧﺮﭼ ﯽﻟﻮﻠﺳ ﯽﻣ ﺪﻧاﻮﺗ رد ﺪﻧور ﻢﯿﺴﻘﺗ ﯽﻟﻮﻠﺳ لﻮﻠﺳ يﺎــﻫ
لﺎــﻨﯿﻣرژ ﺮﯿﺛﺎــﺗ هﺪــﻧﺮﯿﮔ ﯽﺑﺎــﯾزرا ﻦﯾاﺮﺑﺎــﻨﺑ ؟دراﺬــﮕﺑ يﺎــﻫ
ﯽﻧژوﺮﺘﺳا ﻪﺑ ناﻮﻨﻋ هار يﺎﻫزاﺪﻧا نﺎﯿﺑ Cyclin ﺎﻫ رد ﺖﻓﺎﺑ
،ﻪﻀﯿﺑ تاﺮﯿﯿﻐﺗ طﻮﺑﺮﻣ نﺎﯿﺑ ﻪﺑ cyclin D1 ﺎﺑ رد
ﻪــﻀﯿﺑ ﺖﻓ
و يراﺮﻗﺮﺑ ﻦﯿﺑ طﺎﺒﺗرا ﻦﯾا
نژ ﺎﺑ هﺪﻧﺮﯿﮔ يﺎﻫ و ﯽﻧژوﺮﺘــﺳا
ﯽﺑﺎﯾزرا ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ) ﺪﯾﺎــﺴﮐا ﮏــﯾﺮﺘﯿﻧ ﺢﻄــﺳ
نﻮﻟﺎــﻣ ،(NO
) ﺪﯿﯾﺪﻟآ يد ) زﺎــﺗﻮﻣ ﺲﯾد ﺪﯿﺴﮐاﺮﭘﻮﺳ و (MDA
(SOD
ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ﯽــﺷﺎﻧ يژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘــﺴﯿﻫ تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ و
زا يﺮﻣاAFG1 ﺖﺳا ﻪﮐ رد ﻦــﯾا نﺎــﯿﻣ ﯽــﻣ درﻮــﻣ ﺪــﻧاﻮﺗ
ﮔراﺮﻗ ﻪــﺟﻮﺗ .دﺮــﯿ
نژ نﺎــﯿﺑ ناﺰــﯿﻣ ﯽﺑﺎــﯾزرا cyclin D1
و
) شور ﻪــﺑERα RT-PCR
( Reverse transcription
.ﺖﻓﺮﮔ مﺎﺠﻧاPCR
داﻮﻣ و شور ﺎﻫ
تﺎﻧاﻮﯿﺣ و رﺎﻤﯿﺗ
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﻦﯾا رد ﯽﺑﺮﺠﺗ
، 24 ﻎﻟﺎﺑ ﺮﻧ يرﻮﺳ شﻮﻣ ﻪﻌﻄﻗ
ﻦﯿﮕﻧﺎــﯿﻣ ﺎﺑ) ﯽــﻧزو
2 20± ﻂﯾاﺮــﺷ .ﺪﻧﺪــﺷ بﺎــﺨﺘﻧا (مﺮــﮔ
) دراﺪﻧﺎﺘــﺳا 12
و ﯽﯾﺎﻨــﺷور ﺖﻋﺎــﺳ 12
ﺎــﺳ ،ﯽﮑﯾرﺎــﺗ ﺖﻋ
يﺎﻣد 2 25± ) ﯽﺒــﺴﻧ ﺖــﺑﻮﻃر و داﺮﮕﯿﺘﻧﺎــﺳ ﻪــﺟرد 10
50±
.ﺪــﯾدﺮﮔ ﺖــﯾﺎﻋر ﺎﻫ شﻮﻣ مﺎﻤﺗ يراﺪﻬﮕﻧ ﺖﻬﺟ ( ﺪﺻرد رد ﺎــﻫ نآ ﯽﻓدﺎﺼﺗ يﺪﻨﺑ هوﺮﮔ ﻪﻣادا رد 4
هوﺮــﮔ 6 ﯽﯾﺎــﺗ
،لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ .ﺖﻓﺮﯾﺬﭘ مﺎﺠﻧا 2
0 / ﯽﻠﯿﻣ ترذ ﻦــﻏور مﺮﮔ
هوﺮﮔ و ﯽﺸﯾﺎﻣزآ يﺎﻫ ارAFG1
ناﺰﯿﻣ ﻪﺑ) 20 مﺮﮔوﺮﮑﯿﻣ
(مﺮﮔﻮﻠﯿﮐ ﺮﺑ ﺐﯿﺗﺮﺗ ﻪﺑ
15 ، 7 و 28 ﻞﮑــﺷ ﻪــﺑ زور ﻞــﺧاد
ﺪﻧدﺮﮐ ﺖﻓﺎﯾرد ﯽﻗﺎﻔﺻ )
24 .( ﻦﯾﺪﺑ ﻖﯾرﺰﺗ زا ﻞﺒﻗ ﻪﮐ ﺐﯿﺗﺮﺗ
،ﻢــﺳ )AFG1 Sigma, USA, Cas NO: 1162-39-5
(
) لﻮﻧﺎﺗا و ترذ ﻦﻏور رد 95:5 v/v
رد ﺎــﺒﻗﺎﻌﺘﻣ .ﺪــﺷ ﻞﺣ (
يﺎﻫزور 15 ، 7 و 28
، ﻪﻧﻮﻤﻧ زا يرادﺮﺑ ﺖــﻬﺟ ﻪــﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ
و يژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘﺴﯿﻫ تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ اﺪﻧا
هز ﮏــﯾﺮﺘﯿﻧ ﺢﻄــﺳ يﺮــﯿﮔ
ﺪﯾﺎﺴﮐا )
،(NO ﺪــﯿﻫﺪﻟآ يد نﻮﻟﺎــﻣ )
( MDA ﺪﯿــﺴﮐاﺮﭘﻮﺳ و
) زﺎﺗﻮﻣ ﺲﯾد اﺰﯾﻻا زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ (SOD
.ﺖﻓﺮﮔ ترﻮﺻ
ﯽﺳرﺮﺑ يﺎﻫ ﺐﯿﺳآ ﯽﺳﺎﻨﺷ
ﻪــﻧﻮﻤﻧ ﺘــﺷادﺮﺑ ﻪــﻀﯿﺑ ﺖــﻓﺎﺑ يﺎــﻫ ﻪ
و ﯽــﺳرﺮﺑ يﺎــﻫ
ژﺎــﺳﺎﭘ رﺎــﮐ ﻦﯾا ﺖﻬﺟ .ﺖﻓﺮﮔ ترﻮﺻ ﮏﯾژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘﺴﯿﻫ ﻞﮑﻟا رد ﯽﺘﻓﺎﺑ ) يدﻮﻌــﺻ ﻒﻠﺘﺨﻣ يﺎﻫ
80 ، 70 و 90 (ﺪــﺻرد
ﻪــﻧﻮﻤﻧ و ،مﺎــﺠﻧا ﻖــﻠﻄﻣ يﺎــﻫ ﻞــﮑﻟا رد ﺾﯾﻮــﻌﺗ ود و ﺎــﻫ
ﺐــﻟﺎﻗ ﺖــﻬﺟ ﻪــﺑ يﺮــﯿﮔ
ﻪــﻣادا رد و ﻪﺘــﺸﻏآ باﺬــﻣ ﻦﯿﻓارﺎــﭘ
ﺐﻟﺎﻗ لﺪــﻣ) راود مﻮـــﺗوﺮـﮑـﯿـﻣ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ .ﺪﻧﺪــﺷ يﺮﯿﮔ
MICROM. Germany, Serial: 21074 ﺐـــﻟﺎـﻗ (
يﺎـــﻫ
ﺖﻣﺎﺨــﺿ ﺎــﺑ ﯽـــﻨـﯿـﻓارﺎـﭘ 5
ﻪــﺑ و ﺪــﯾدﺮﮔ ﻢﻫاﺮــﻓ ﺮــﺘﻣوﺮﮑﯿﻣ
ﮐ ﮓــﻧر ﮏــﻤ و ﻦﯿﻠﯿــﺴﮐﻮﺗﺎﻤﻫ يﺰــﯿﻣآ
تاﺮــﯿﯿﻐﺗ ﻦﯾزﻮــﺋا
ﮏﯾژﻮﻟﻮﺗﺎﭘﻮﺘﺴﯿﻫ .ﺪﯾدﺮﮔ ﯽﺳرﺮﺑ
ﺶﺠﻨﺳ NO ﺶﺠﻨــﺳ ﻪــﯾﺎﭘ ﺮــﺑ ﻪــﮐ ﺖــﯿﻠﭘوﺮﮑﯿﻣ شور زا Griess
ﯽﺑﺎﯾزرا ﺖﻬﺟ ،ﺖﺳا ﺎﺘــﺳار ﻦــﯾا رد .ﺪﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳاNO
) ﯽﯾور ﻊﯾﺎﻣ و هﺪﺷ ﺰﯿﻟ ﯽﺘﻓﺎﺑ ﻪﻧﻮﻤﻧ 400
ﻂﺳﻮﺗ (ﺮﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ
6 ﯽــﻠﯿﻣ ﺘﻧﺎــﺳ ﻂﯾاﺮــﺷ ﺖــﺤﺗ يور تﺎﻔﻟﻮــﺳ مﺮــﮔ ژﻮﯿﻔﯾﺮ
ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘ ﺎــﺑ ﻞﺻﺎﺣ لﻮﻠﺤﻣ .ﺪﯾدﺮﮔ ﯽﯾادز 100
ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ
،مﻮﯾدﺎــﻧاو ﺪــﯾﺮﻠﮐ 50
) ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ -N-1
يد ﻦﻠﯿــﺗا ﻞــﯿﺘﻔﻧ
يد ﻦﯿــﻣآ و (ﺪــﯾاﺮﻠﮐورﺪﯿﻫ
50 ﺪﯿﻣﺎﻧﻮﻔﻟﻮــﺳ ﺮــﺘﯿﻟوﺮﮑﯿﻣ
ﻢﯾﺪﺳ ﺖﯾﺮﺘﯿﻧ زا .ﺪﯾدﺮﮔ طﻮﻠﺨﻣ 1/
0 ﯽــﻨﺤﻨﻣ ياﺮﺑ رﻻﻮﻣ
ﺖــﻈﻠﻏ رﻮﻈﻨﻣ ﻦﯾﺪﺑ ﻪﮐ ﺪﺷ هدﺎﻔﺘﺳا دراﺪﻧﺎﺘﺳا ﯽــﺸﯾاﺰﻓا يﺎــﻫ
زا ) ﺖــﯾﺮﺘﯿﻧ ﻢﯾﺪــﺳ 5
، 10 ، 25 ، 50 ، 75 و 100 (رﻻﻮــﻣوﺮﮑﯿﻣ
ﺖﯿﻠﭘوﺮﮑﯿﻣ ﻪﻤﻫ ﻪﺑ .ﺪﯾدﺮﮔ ﻪﯿﻬﺗ ﻢﯾﺪﺳ ﺖﯾﺮﺘﯿﻧ يوﺎﺣ يﺎﻫ
لﻮﻠﺤﻣ ،ﯽﯾور ﻊﯾﺎﻣ و Greiss
ﻖــﯾﺮﻃ زا ﺞﯾﺎﺘﻧ .ﺪﺷ هدوﺰﻓا
) اﺰــﯾﻻا شور Stat Fax 100
تﻻﺎــﯾا ،اﺪــﯾرﻮﻠﻓ ،ﯽﻣﺎــﯿﻣ
جﻮﻣ لﻮﻃ رد (ﺎﮑﯾﺮﻣآ هﺪﺤﺘﻣ 540
.ﺖﻓﺮﯾﺬﭘ مﺎﺠﻧا ﺮﺘﻣﻮﻧﺎﻧ
ﺶﺠﻨﺳ MDA
ﺢﻄﺳ نﻮﯿــﺳاﺪﯿﺴﮐاﺮﭘ ﺮﮕﻧﺎــﺸﻧ ناﻮــﻨﻋ ﻪــﺑ ﻪﮐMDA
ﺖــﻬﺟ ﻦﯾﺪﺑ .ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﯽﺑﺎﯾزرا درﻮﻣ ﺖﺳا حﺮﻄﻣ ﺪﯿﭙﯿﻟ يوﺎــﺣ ﻦــﮕﻤﻫ ﺮﻓﺎــﺑ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ 55
/5 لﻮــﻠﺤﻣ ﺪــﺻرد
ﻪــﻧﻮﻤﻧ يزﺎــﺳدراﺪﻧﺎﺘﺳا ،KCl ﻪــﻣادا رد و ﺪــﺷ مﺎــﺠﻧا ﺎــﻫ
ﻪﻧﻮﻤﻧ تﺪﻣ ﻪﺑ ﺎﻫ 10
رود ﺎﺑ ﻪﻘﯿﻗد 1500
.ﺪﻧﺪــﺷ ژﻮﯿﻔﯾﺮﺘﻧﺎﺳ
ﻪﻧﻮﻤﻧ ﺲﭙﺳ ﻦﮕﻤﻫ يﺎﻫ
يوﺎــﺣ ﯽــﺸﻨﮐاو طﻮﻠﺨﻣ ﻪﺑ هﺪﺷ
) ﺪﯿﺳا ﮏﯿﺘﺳا ،تﺎﻔﻟﻮﺳ ﻞﯿﺳدود ﻢﯾﺪﺳ pH 4.5
ﺪﯿﺳا و (
تﺪــﻣ ﻪــﺑ طﻮﻠﺨﻣ نﺪﻧﺎﺷﻮﺟ .ﺪﻧﺪﺷ ﻪﻓﺎﺿا ﮏﯾرﻮﺘﯿﺑرﺎﺑﻮﯿﺗ 30 يﺎﻣد رد ﻪﻘﯿﻗد 85
ﯽﺘﻧﺎــﺳ ﻪﺟرد ناﺰــﯿﻣ و مﺎــﺠﻧا داﺮــﮔ
جﻮــﻣ لﻮــﻃ رد ﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﮑﭙــﺳا زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎﺑ بﺬﺟ 450
.ﺪﺷ هﺪﯿﺠﻨﺳ ﺮﺘﻣﻮﻧﺎﻧ
ﺶﺠﻨﺳ SOD
رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ ﻞﮑﺗوﺮﭘ ﺎﺑ ﻖﺑﺎﻄﻣ ،زاﺪﯿﺴﮐا سﺮﺘﺳا ﯽﺑﺎﯾزرا
ﺶﺠﻨﺳ ﺖﯿﮐ )SOD
ﮓــﻨﯿﺠﻧﺎﻧ ،ﯽﺘﺴﯾز ﯽﺳﺪﻨﻬﻣ
Jiancheng
،(
يوﺎــﺣ) ﺰــﯿﻟ ﺮﻓﺎــﺑ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﻪﻀﯿﺑ 1mM Na2EDTA
،
150mM NaCl ،
10mM PMSF ،
10 ﯽﻠﯿﻣ ﺮــﺘﻣ ،Tris
1 ﯽﻠﯿﻣ ناﺰـــﯿﻣ ﺶﺠﻨــﺳ .ﺪــﺷ ﻦـــﮕﻤﻫ (ﻦﯿﺗوﺮــﭘآ مﺮــﮔ
ﺖــﯿﻟﺎﻌﻓ ﺮــﺘﯿﻧ ﺶﻫﺎــﮐ ﻦﯿــﯿﻌﺗ ﺎــﺑ ﯽــﯾور ﻊﯾﺎــﻣSOD
ﻮــﻠﺑ و
) مﻮـــﯿﻟوزاﺮﺘﺗ ﻪـــﺑ (NBT
ﺪـــﯿﻟﻮﺗ لﺎـــﺒﻧد - O2
ﻢﺘـــﺴﯿﺳ زا
ﻦﯿﺘﻧاﺰﮔ - ﺪــﺣاو ﮏــﯾ .ﺪﯾدﺮﮔ ﺮﺴﯿﻣ زﺎﯿﺴﮐﻮﻨﯿﺘﻧاﺰﮔ SOD
ﺶﻫﺎﮐ ﻪﮐ ﯽﻨﯿﺌﺗوﺮﭘ راﺪﻘﻣ ناﻮﻨﻋ ﺖﺤﺗ ناﺰﯿﻣ ﻪﺑ ارNBT
50 ﯽﻣ رﺎﻬﻣ ﺪﺻرد ﻪــﺑ ﺞﯾﺎــﺘﻧ .ﺪــﺷ ﻒــﯾﺮﻌﺗ ،ﺪﻨﮐ
ترﻮــﺻ
.ﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ ﻦﯿﺌﺗوﺮﭘU/mg
شور
) Reverse transcription PCR (RT-PCR
هﺪــﻧﺮﯿﮔ نﺎــﯿﺑ رد تاﺮــﯿﯿﻐﺗ ناﺰﯿﻣ ﯽﺑﺎﯾزرا ياﺮﺑ يﺎــﻫ
و نژوﺮﺘــﺳا Cyclin D1
، دراﺪﻧﺎﺘــﺳا شور ﻪــﺑmRNA
TRIZOL ﺪﺷ يزﺎﺳاﺪﺟ
) 27 زا يﺮﯿﮔﻮﻠﺟ ياﺮﺑ .( ﯽﮔدﻮﻟآ
ﺶﯿﺑ ﺖﺒﻗاﺮﻣ مﻮﻧژ جاﺮﺨﺘــﺳا زا ﺪﻌﺑ يﺮﺗ
زﺎــﻓ رد مﻮــﻓوﺮﻠﮐ
بآ ناﺰــﯿﻣ .ﺖــﻓﺮﮔ مﺎــﺠﻧا ﮓــﻧر ﻢــﮐ راد ﻂــﺳﻮﺗRNA
) ﺮﺘﻣﻮﺘﻓوﺮﺘﮑﭙـــﺳا 260nm, A260/280=1,8-20
ﻦﯿـــﯿﻌﺗ (
رد ﻪﻧﻮﻤﻧ و ﺖﺸﮔ 70
- ﯽﺘﻧﺎــﺳ ﻪــﺟرد ياﺮــﺑ داﺮــﮔ
RT-PCR
ﺪــﯾدﺮﮔ هﺮــﯿﺧذ .
DNA ردc 20l و ﯽـــﺸﯾﺎﻣزآ ﺐــﯿﮐﺮﺗ
طﻮـــﻠﺨﻣ هﺪـــﻨﻨﮐﺪﯿﻟﻮﺗ ﺖﮐﺮـــﺷ ﻞـــﮑﺗوﺮﭘ ﻖـــﺒﻃ ﺪﻧﺪـــﺷ
) Fermentas, GmbH, Germany ﺮﭘ .(
و ﯽﯾﺎــﻣد ﻞــﮑﺗ
ياﺮﺑ 20l ﯽــﺸﯾﺎﻣزآ ﺐﯿﮐﺮﺗ 50
رد ﻪــﻘﯿﻗد
˚C 65 و ﻪــﺑ
نآ لﺎﺒﻧد 60 رد ﻪــﻘﯿﻗد
˚C 42 و 5 رد ﻪــﻘﯿﻗد
˚C 70 .دﻮــﺑ
ﺶﻨــﮐاو PCR - زا ﯽــﻤﺠﺣ ردRT 25
ﺲﮑﯿــﻣ ﺮﺘــﺴﻣ
) 5
، 12 ( ،RVE ﺮــﻫ) هﮋﯾو ﺮﻤﯾاﺮﭘFWD
75 ﺪــﺻرد (
و DNA )c 1 ( ) زﺎــﺌﻠﮐﻮﻧ نوﺪــﺑ بآ و 10
مﺎــﺠﻧا (
تﺪﻣ ﻪﺑ .ﺖﻓﺮﮔ 3
يﺎﻣد رد ﻪﻘﯿﻗد 95
ﯽﺘﻧﺎــﺳ ﻪﺟرد داﺮــﮔ
و ﻞﮑﯿﺳ ﮏﯾ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ 40
تﺪــﻣ ﻪــﺑ ماﺪــﮐ ﺮﻫ ﻞﮑﯿﺳ 20
يﺎﻣد رد ﻪﯿﻧﺎﺛ 95
ﯽﺘﻧﺎﺳ ﻪﺟرد ياﺮﺑ ،داﺮﮔ
annealing ﻪــﺑ
تﺪﻣ 45 يﺎﻣد) دﻮﺑ ﻪﯿﻧﺎﺛ 65
و 58 ياﺮــﺑ ﻪﺟرد GAPDH
يﺎﻣد و 55 و 57 ﻪﺑ ﻪﺟرد نژ ياﺮــﺑ ﺐﯿﺗﺮﺗ يﺎــﻫ
Cyclin D1
و .( ERα اﺮﺑ لﻮﻃ ﺶﯾاﺰﻓا ﻞﻤﻋ ي
1 يﺎــﻣد رد ﻪــﻘﯿﻗد
˚C 72
و 5 يﺎــﻣد رد ﻪﻘﯿﻗد
˚C 72 زورﺎــﮔآ لژ .ﺖــﻓﺮﮔ مﺎــﺠﻧا 5/
1
ﺐــﻟﺎﻗ ﺪــﯾﺎﻣوﺮﺑ مﻮﯾﺪﯿﺗا يﻮﺘﺤﻣ ﺪﺻرد ﺪــﺷ يﺮــﯿﮔ
ﺎــﺒﻗﺎﻌﺘﻣ و
تﻻﻮﺼﺤﻣ RT-PCR
ﮏﻫﺎﭼ رد ﻖﯾرﺰﺗ ﻪﻃﻮﺑﺮﻣ يﺎﻫ
ﺪﺷ
و ) لژ ﻢﺘــﺴﯿﺳ زا هدﺎﻔﺘــﺳا ﺎــﺑ bio-RAD
( 2000 هﺪﻫﺎــﺸﻣ
ﺪﯾدﺮﮔ ) ﻂــﺳﻮﺗ ﯽﺻﺎﺼﺘﺧا يﺎﻫﺮﻤﯾاﺮﭘ و ،Iran
Tehran (
CinnaGen Co ﯿﻟﻮﺗ
ــ ﮔ ﺪ ـ ﯾدﺮ ـ ــﻤﯾاﺮﭘ ﺖــﻔﺟ .ﺪ ـ
ــﺑ ﺮ ـ ياﺮ
RT-PCR هرﺎﻤــﺷ لوﺪﺟ رد
1 .ﺖــﺳا هﺪــﺷ هداد ﺶﯾﺎــﻤﻧ
نژ ياﺮﺑ Cyclin D1 ) زا
1 ( GAPDH نژ ياﺮــﺑ و
ERα
) زا 2 ( GAPDH ﺎﻫﺰﯿﻟﺎﻧآ .ﺪﯾدﺮﮔ هدﺎﻔﺘﺳا لﺮﺘﻨﮐ ناﻮﻨﻋ ﻪﺑ
مﺮــﻧ ﺎﺑ راﺰــﻓا Image pro- insight software .ﺪــﺷ مﺎــﺠﻧا
هداد ﺎﻫ ي ا ﻦﯾ ﻣ مﺮــﻧ زا هدﺎﻔﺘﺳا ﺎﺑ ﻪﻌﻟﺎﻄ راﺰــﻓا
ﻪﺨــﺴﻧSPSS
16 زرا درﻮﻣ ﯽﺑﺎﯾ رﺎﻣآ ي ﺎــﺘﻧ و ﺖﻓﺮﮔ راﺮﻗ ﺞﯾ
ﻪــﺑ ﻞــﺻﺎﺣ
ترﻮﺻ Mean±SD ﺑ
نﺎــﯿ دﺮﮔ ﺪــﯾ اﺮــﺑ . ي ﺎﻘﻣ ﻪــﺴﯾ ي ــﺑ ﻦﯿ
ﻟﺎــﻧآ ﺎﻬﻫوﺮﮔ ﺰﯿ
راو ﺲﻧﺎــﯾ ANOVA ﮏــﯾ
ﻪــﻓﺮﻃ
، ﺖــﺴﺗ
Bonfferoni ﺎﻘﻣ رﻮﻈﻨﻣ ﻪﺑ
ﻪﺴﯾ رﺎﻣآ ي هداد يﺎﻫ ﯽﻤﮐ ﻦﯿــﺑ
هوﺮﮔ يﺎﻫ ﯽﺸﯾﺎﻣزآ ﺖﺒﺴﻧ ﻪﺑ هوﺮﮔ ﺮــﺘﻨﮐ ل هدﺎﻔﺘــﺳا ﺪــﯾدﺮﮔ .
راﺪــﻘﻣ ) 05 /0 P<
( ياﺮــﺑ ﻦﯿــﯿﻌﺗ ﺢﻄــﺳ ﯽــﻨﻌﻣ يراد ﻦﯿــﺑ
ﯽﻫوﺮﮔ رد ﺮﻈﻧ ﻪﺘﻓﺮﮔ ﺪﺷ .
لوﺪﺟ هرﺎﻤﺷ
اﺮﭘ 1:
يﺎﻫﺮﻤﯾ درﻮﻣ هدﺎﻔﺘﺳا رد ﻦﯾا ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ
Anti-Sense 5ʹ-3ʹ Sense 5ʹ-3ʹ Primer
GCGGCCAGGTTCCACTTGAGC CTGACACCAATCTCCTCAACGAC Cyclin D1 409bp CACACGGCACAGTAGCGAG CCTCCCGCCTTCTACAGGT ERα 128bp GTCAGATCCACGACGGACACA
TCCCGTTGATGACAAGCTTCC
AGAACATCATCCCTGCATCCAC GAGAGTGTTTCCTCGTCCCG
GAPDH 127 bp(1 ) 236 bp2( )
ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺎﻫ
ﺳرﺮﺑ ﯽ ﺳﺎﻨﺷ ﺖﻓﺎﺑ ﯽ ﺑ ﺖﻓﺎﺑ ﯿ ﻪﻀ
ﯽﺳرﺮﺑ ﻪﮐ ﺪﻧداد نﺎﺸﻧ ﯽﺳﺎﻨﺷ ﺖﻓﺎﺑ يﺎﻫ ﻪﺑAFG1
نﺎﻣز ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو ترﻮﺻ
، ﻪــﯾﻻ داﺪــﻌﺗ ﺶﻫﺎﮐ ﺐﺟﻮﻣ يﺎــﻫ
لﻮﻠﺳ ﻪﺑ ﯽﻟﻮﻠﺳ شﺰﯾر ،ﺎﯾاز يﺎﻫ
،يﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙــﺳا ﺖﺴﯾا هاﺮﻤﻫ
ﯽﻟﻮﻠــﺳ ﻦﯿــﺑ مدا هاﺮــﻤﻫ ﻪــﺑ زﺎــﺳ مﺮﭙــﺳا يﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ﺪﯾدﺮﮔ ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ناﺰﯿﻣ ﻪﮐ ﻪﻈﺣﻼﻣ ﻞﺑﺎﻗ ﻞﮑﺷ ﻪﺑ ﺎﻫ
يا
هوﺮﮔ رد 28 شﻮــﻣ ﻪﮐ ﺐﯿﺗﺮﺗ ﻦﯾﺪﺑ .ﺪﺷ هﺪﯾد هزور يﺎــﻫ
ﺮﮔ ﺖﻓﺎﯾرد هو هﺪﻨﻨﮐ
ﺐﻗﺎﻌﺘﻣAFG1 28 ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد ،زور
هوﺮﮔ ﺮﯾﺎﺳ ﺎﺑ ﺎﻫ
، ﺶﯿﺑ ﺪﺻرد ﻪﻟﻮﻟ زا يﺮﺗ
زﺎــﺳ مﺮﭙــﺳا يﺎﻫ
ﯽﻣ نﺎﺸﻧ ار ﮏﯿﻓوﺮﺗآ ) ﺪﻧداد
ﺮﯾوﺎﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 1 و 2 .(
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 1
شﺮﺑ:
ﺿﺮﻋ ﯽ زا ﺖﻓﺎﺑ ﺑﯿ
،ﻪﻀ ) (A
هوﺮﮔ
،لﺮﺘﻨﮐ ) (B
هوﺮﮔ رد ﯾ ﺖﻓﺎ هﺪﻨﻨﮐ ﺐــﻗﺎﻌﺘﻣAFG1
7
،زور ) (C
هوﺮــﮔ رد ﯾ ﺖــﻓﺎ
هﺪﻨﻨﮐ ﺐﻗﺎﻌﺘﻣAFG1
15 زور و ) (D
هوﺮﮔ رد ﯾ ﺖــﻓﺎ هﺪــﻨﻨﮐ
AFG1
ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ 28 زور . ﺎــﺑAFG1
ﺖــﺷﺬﮔ نﺎــﻣز ﺐــﺟﻮﻣ ﺶﻫﺎــﮐ داﺪــﻌﺗ
ﻻ ﯾﻪ ﺎــﻫ ي لﻮﻠــﺳ ﺎــﻫ ي ﺎــﯾاز ) (C
ر ــﯾ شﺰ ﻠــﺳ ﺖــﺴﯾا هاﺮــﻤﻫ ﻪــﺑ ﯽﻟﻮ
) يﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا .ﺖﺳا هﺪﯾدﺮﮔ (D
ﯽﻨﻤﺳ يﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ رد
ﺮــﻓ ا ﺪــﻧور هوﺮــﮔ رد و لﺎــﻣﺮﻧ ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙــﺳ 15
و 28 هزور ﺪــﻧور
( ﯽﮑﺸﻣ نﺎﮑﯿﭘ) ﻞﺘﺨﻣ ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا هرﺎﺘﺳ) ﻊﯿﺳو ﯽﻨﯿﺑﺎﻨﯿﺑ مدا ﺎﺑ هاﺮﻤﻫ
يﺰﯿﻣآ ﮓﻧر .دﻮﺷ ﯽﻣ هﺪﯾد (ﯽﮑﺸﻣ
H&E
، 40x
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 2
شﺮﺑ:
ﺿﺮﻋ ﯽ زا ﺖﻓﺎﺑ ﺑﯿ
،ﻪﻀ ) (A
هوﺮﮔ
،لﺮــﺘﻨﮐ ) (B
هوﺮﮔ رد ﯾ ﺖﻓﺎ هﺪﻨﻨﮐ ﺐﻗﺎﻌﺘﻣAFG1
7
،زور ) (C
هوﺮﮔ رد ﯾ ﺖــﻓﺎ هﺪــﻨﻨﮐ
ﺐﻗﺎﻌﺘﻣAFG1
15 زور و ) (D
هوﺮﮔ رد ﯾ ﺖﻓﺎ هﺪﻨﻨﮐ ﺐﻗﺎﻌﺘﻣAFG1
28 زور . يﺎــﻫ ﻪــﻟﻮﻟ ﯽــﻓوﺮﺗآ ﺚــﻋﺎﺑ زد ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو ترﻮﺻ ﻪﺑAFG1
ﺎﻫ ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ناﺰﯿﻣ ﻪﮐ ﺪﯾدﺮﮔ زﺎﺳ مﺮﭙﺳا ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻦﯿﺑ مدا ﺎﺑ هاﺮﻤﻫ
هوﺮﮔ رد يا ﻪﻈﺣﻼﻣ ﻞﺑﺎﻗ ﻞﮑﺷ ﻪﺑ 28
ﺪﺷ هﺪﯾد هزور )
هﺪــﯾدﺮﮔ (D
يﺰﯿﻣآ ﮓﻧر .ﺖﺳا
H&E
، 10x
ﻐﺗ تاﺮﯿﯿ NO ﯽﺘﻓﺎــﺑ ﺢﻄــﺳ هوﺮــﮔ رد نﺎــﻣز ﺖــﺷﺬﮔ ﺎــﺑNO
يﺎــﻫ
ﺖـــﻓﺎﯾرد هﺪـــﻨﻨﮐ )AFG1 7
، 15
، 28 ﺮـــﻈﻧ زا ( آ يرﺎـــﻣ
ﯽﻨﻌﻣ ﺶﯾاﺰﻓا ﺖﺳا ﻪﺘﺷاد لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد يراد
) 05 /0 P<
) ( ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 3 .(
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ
) ﺪﯾﺎﺴﮐا ﮏﯾﺮﺘﯿﻧ تاﺮﯿﯿﻐﺗ ﺪﺻرد 3:
يﺎﻫ هوﺮﮔرد (NO
سﺎــﺳا ﺮــﺑ ﺎــﻫ هداد ﯽﻣﺎــﻤﺗ .ﻒــﻠﺘﺨﻣ
Mean±SD
.ﺪــﻧا هﺪــﺷ نﺎــﯿﺑ
ﺢﻄﺳ ندﻮﺑ راد ﯽﻨﻌﻣ ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ ( *) رد ﻒــﻠﺘﺨﻣ يﺎــﻫ هوﺮــﮔ رد NO
) ﺪﺷﺎﺑ ﯽﻣ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ 05
/0
P<
( ) ،لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ.
7Days
(
:AFG1
7 ﺖﻓﺎﯾرد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ زور ) ،AFG1
15Days
(
AFG1
: 15 زور
ﺖـــﻓﺎﯾرد ﺐـــﻗﺎﻌﺘﻣ ) ،AFG1
28Days
( :AFG1
28 ﺐـــﻗﺎﻌﺘﻣ زور
ﺖﻓﺎﯾرد .AFG1
ﻐﺗ تاﺮﯿﯿ وSOD MDA
ﯽﺘﻓﺎﺑ ﺢﻄﺳ يﺎــﻫ هوﺮــﮔ رد نﺎــﻣز ﺖــﺷﺬﮔ ﺎﺑSOD
هﺪـــﻨﻨﮐ ﺖـــﻓﺎﯾرد )AFG1
7
، 15
، 28 ﺮـــﻈﻧ زا ( آ
يرﺎـــﻣ
ﯽﻨﻌﻣ ﺶﻫﺎﮐ ﺖــﺳا ﻪﺘﺷاد لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد يراد
) 05 /0 P<
( ) ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 4 .(
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 4 ﻐﺗ ﺪﺻرد: تاﺮﯿﯿ اﺮﭘﻮﺳ ﺴﮐ ﺪﯿ د زﺎﺗﻮﻤﺴﯾ ) ( SOD
هوﺮﮔرد ﺎﻫ ي
ﻣﺎﻤﺗ .ﻒﻠﺘﺨﻣ ﯽ
هداد سﺎﺳاﺮﺑ ﺎﻫ
Mean±SD
ﺑ نﺎﯿ هﺪﺷ ) .ﺪﻧا
* ﺮﮕﻧﺎﺸﻧ (
ﻨﻌﻣ ﯽ ﺢﻄﺳ ندﻮﺑ راد هوﺮﮔ ردSOD
ﺎﻫ ي ﺎﻘﻣ رد ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻪﺴﯾ
هوﺮﮔ ﺎﺑ
ﻣ لﺮﺘﻨﮐ ﯽ ) ﺪﺷﺎﺑ 05 /0
P<
،لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ،(
) 7Days
( :AFG1
7 زور
رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ ﺖﻓﺎﯾ
،AFG1
) 15Days
( :AFG1
15 د ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ زور ر
ﺖﻓﺎﯾ
،AFG1
) 28Days
( :AFG1
28 رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ زور ﺖﻓﺎﯾ
.AFG1
ﯽﺘﻓﺎﺑ ﺢﻄﺳ هوﺮﮔ رد رد نﺎﻣز ﺖﺷﺬﮔ ﺎﺑMDA
يﺎﻫ
ﺖﻓﺎﯾرد هﺪﻨﻨﮐ )AFG1 7
، 15
، 28 ﺮﻈﻧ زا ( يرﺎﻣآ ﺶﯾاﺰﻓا
ﯽﻨﻌﻣ ) ﺖــﺳا ﻪﺘﺷاد لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ رد يراد 05
/0 P<
(
) ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 5 .(
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 5
ﻐﺗ ﺪﺻرد:
تاﺮﯿﯿ نﻮﻟﺎﻣ ﺪﯿﻫﺪﻟﺂﯾد ) هوﺮــﮔ رد (MDA
ﺎــﻫ ي
ﻣﺎﻤﺗ ،ﻒﻠﺘﺨﻣ ﯽ
هداد سﺎﺳا ﺮﺑ ﺎﻫ
Mean±SD
ﺑ نﺎــﯿ ) .ﺪﻧﺎﻫﺪــﺷ
* ﺮﮕﻧﺎــﺸﻧ (
ﻨﻌﻣ ﯽ ﺢﻄﺳ ندﻮﺑ راد هوﺮﮔ ردMDA
ﺎﻫ ي ﺎﻘﻣ رد ﻒﻠﺘﺨﻣ ﻪﺴﯾ
ﺎﺑ هوﺮﮔ
ــﻣ لﺮــﺘﻨﮐ ﯽ ) ﺪــﺷﺎﺑ 05 /0
P<
،لﺮــﺘﻨﮐ هوﺮــﮔ ،(
) 7Days
( :AFG1
7 زور
رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ ﺖﻓﺎﯾ
،AFG1
) 15Days
( :AFG1
15 زور ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ رد ﺖﻓﺎﯾ
،AFG1
) 28Days
( :AFG1
28 زور رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ ﺖﻓﺎﯾ AFG1
ﻣAFG1
ناﺰﯿ ﺑ نﺎﯿ
Cyclin D1
اﺰﻓا ار ﺶﯾ داد
نﺎــﯿﺑ ناﺰــﯿﻣ ﻪــﮐ ﺪــﻧداد نﺎﺸﻧ تاﺪﻫﺎﺸﻣ Cyclin D1
لﻮﻠﺳ هدر رد ﺺﺧﻻﺎﺑ ﺰﻧژﻮﺗﺎﻣﺮﭙــﺳا و ﺰﻧژﻮﺘﯿــﺳﻮﺗﺎﻣﺮﭙﺳا يﺎــﻫ
هوﺮﮔ رد ﻪــﮐ ﯽﯾﺎﻫ رد ،ﺪــﻧدﻮﺑ هدﻮــﻤﻧ ﺖــﻓﺎﯾرد ارAFG1
ﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﺎﺑ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ هوﺮﮔ رد ﯽﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗﺮﯿﻏ ﺶﯾاﺰﻓا ،ل
7 و 28 و ﻪــﻈﺣﻼﻣ ﻞــﺑﺎﻗ ﺢﻄــﺳ رد هوﺮــﮔ رد يا
15 هزور
) 05 /0 P<
ﻦﯾﺪﺑ .دﻮﺑ ﻪﺘﻓﺎﯾ ﺶﯾاﺰﻓا ( ﺶﯿــﺑ ﻪــﮐ ﺐﯿﺗﺮﺗ
ﻦﯾﺮــﺗ
نﺎﯿﺑ ناﺰﯿﻣ Cyclin D1 شﻮﻣ رد
ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫ تﺪﻣ ﻪﺑ ارAFG1
15 ) ﺪﺷ هﺪﯾد ﺪﻧدﻮﺑ هدﺮﮐ ﺖﻓﺎﯾرد زور ﺮﯾﻮﺼﺗ
هرﺎﻤﺷ 6 .(
ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 6
ﺘﮑﻟا:
زرﻮﻓوﺮ زرا رادﻮﻤﻧ و ﯽﺑﺎﯾ
ﻧ ﻪﻤﯿ ﻤﮐ ﯽ ﻣ ناﺰﯿ ﺑ نﺎــﯿ
Cyclin D1
سﺎﺳاﺮﺑ
GAPDH
هوﺮﮔ رد ﺎﻫ ي ﻣﺎﻤﺗ .ﻒﻠﺘﺨﻣ ﯽ
هداد ﺎﻫ
سﺎﺳاﺮﺑ
Mean±SD
ﺑ نﺎﯿ هﺪﺷ .ﺪﻧا )
*
،(
نﺎﺸﻧ هﺪﻨﻫد فﻼﺘﺧا ﯽﻨﻌﻣ راد
ﺪﻨﺘــﺴﻫ ) 05 /0
P<
(
.
:Con
) ،لﺮــﺘﻨﮐ هوﺮــﮔ 7Days
( :AFG1
7 زور
ﺖﻓﺎﯾرد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ ) ،AFG1
15Days
( :AFG1
15 زور ﺖﻓﺎﯾرد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ
،AFG1
) 28Days
( :AFG1
28 رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ زور ﺖﻓﺎﯾ
AFG1
ﻣAFG1
ناﺰﯿ ﺑ نﺎﯿ داد ﺶﻫﺎﮐ ارERα
نﺎــﯿﺑ ناﺰــﯿﻣ ﻪــﮐ ﺪــﻧداد نﺎــﺸﻧ تاﺪﻫﺎــﺸﻣ
،ERα ﺎــﺑ
نﺎﻣز ﺖﺷﺬﮔ هوﺮﮔ رد
ﺖﻓﺎﯾرد يﺎﻫ هﺪﻨﻨﮐ
ﺖﺒــﺴﻧAFG1
ﯽــﻨﻌﻣ ﺢﻄــﺳ رد لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﻪﺑ ) يراد
05 /0 P<
ﺶﻫﺎــﮐ (
نﺎﯿﺑ ناﺰﯿﻣ .ﺖﺳا ﻪﺘﻓﺎﯾ ردERα
شﻮﻣ هوﺮﮔ يﺎﻫ 28
هزور
ﻪﮐ هوﺮــﮔ ﺎــﺑ ﻪــﺴﯾﺎﻘﻣ رد ﺪــﻧدﻮﺑ هدﻮﻤﻧ ﺖﻓﺎﯾرد ارAFG1
ﯽﻨﻌﻣ ﺢﻄﺳ رد لﺮﺘﻨﮐ ) يراد
05 /0 P<
.داﺪﻧ نﺎﺸﻧ ﺶﻫﺎﮐ (
هوﺮــﮔ ﻦﯿــﺑ يرﺎــﻣآ ﻪﺴﯾﺎﻘﻣ ﻦﯿﻨﭽﻤﻫ ﺖــﻓﺎﯾرد يﺎــﻫ
هﺪــﻨﻨﮐ
توﺎﻔﺗ ﭻﯿﻫAFG1 ﯽﻨﻌﻣ
هوﺮﮔ ﻦﯿﺑ ار يراد داﺪــﻧ نﺎﺸﻧ ﺎﻫ
) ﺮﯾﻮﺼﺗ هرﺎﻤﺷ 7 .(
ﺮﯾﻮــﺼﺗ هرﺎﻤــﺷ 7:
Error! No text of specified style in document.
زرا رادﻮﻤﻧ و زرﻮﻓوﺮﺘﮑﻟا ﯽﺑﺎﯾ
ﻧ ﻪﻤﯿ ﻤﮐ ﯽ ﻣ ناﺰﯿ ﺑ نﺎﯿ ﺎــﻫ هوﺮــﮔ ردERα
ي
سﺎﺳاﺮﺑ ﻒﻠﺘﺨﻣ
GAPDH
، ﻣﺎﻤﺗ ﯽ سﺎــﺳا ﺮــﺑ ﺎــﻫ هداد
Mean±SD
ﺑ نﺎــﯿ
.ﺪﻧا هﺪﺷ )
*
،(
نﺎﺸﻧ هﺪﻨﻫد فﻼﺘﺧا ﯽﻨﻌﻣ راد ﺪﻨﺘــﺴﻫ ) 05 /0
P<
،(
: con
) ،لﺮــﺘﻨﮐ هوﺮــﮔ 7Days
( :AFG1
7 ﺖــﻓﺎﯾرد ﺐــﻗﺎﻌﺘﻣ زور ،AFG1
) 15Days
(
AFG1
: 15 ﺖـــﻓﺎﯾرد ﺐـــﻗﺎﻌﺘﻣ زور ،AFG1
) 28Days
(
:AFG1
28 رد ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ زور ﺖﻓﺎﯾ
AFG1
ﺚﺤﺑ
ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد ﺰﯾﻮﺠﺗ ﻪﮐ ﺪﯾدﺮﮔ ﺺﺨﺸﻣ
AFG1
شﻮﻣ رد نﺎــﻣز ﻪــﺑ ﻪﺘــﺴﺑاو ﻞﮑــﺷ ﻪﺑ ،ﯽﺸﯾﺎﻣزآ هوﺮﮔ يﺎﻫ
ﻪﻟﻮﻟ ﯽﻓوﺮﺗآ ﺚﻋﺎﺑ مﺮﭙﺳا يﺎﻫ
ﻊﯿــﺳو ﯽﻟﻮﻠﺳ ﻦﯿﺑ مدا و زﺎﺳ
شﻮﻣ رد ﻪﮐ ﯽﯾﺎﻫ ﺖﻓﺎﯾرد ارAFG1
ﺖﺒــﺴﻧ ﺪﻧدﻮﺑ هدﻮﻤﻧ
ﯽﻣ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﻪﺑ دﻮﺷ
. ﺮﯿﺧا تﺎﻌﻟﺎﻄﻣ ﺖﻘﯿﻘﺣ رد نﺎــﺸﻧ
ﻪﮐ ﺪﻧداد ﯽﻣ ﯽﻌﯿﺳو ﺢﻄﺳ ردAFB1
ﺖــﻓﺎﺑ ياﺮــﺑ ﺪــﻧاﻮﺗ
ﺪﺷﺎﺑ نﺎﺳر ﺐﯿﺳآ ﻪﻀﯿﺑ )
28 ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد (.
يا داد نﺎﺸﻧ
،ﺪﺷ ه
ﺰﯾﻮﺠﺗ ﻪﻈﺣﻼﻣ ﻞﺑﺎﻗ ﺢﻄﺳ ردAFB1
رد ﺐﯿﺳآ ﺎﺑ يا DNA
مﺮﭙﺳا ﻪﺘﺴﻫ غﻮﻠﺑ ،كﺮﺤﺗ ناﺰﯿﻣ كﺮﺤﺗ ،يا
ﻮﻓرﻮﻣ و يژﻮــﻟ
مﺮﭙﺳا ﯽﻣ ﺶﻫﺎﮐ ار ﺎﻫ ﺪﻫد
) 29 .( ــﻌﻟﺎﻄﻣ رد تﺎ نﺎــﺸﻧ ﯽــﻠﺒﻗ
داد ﺪﺷ ه ﻪﮐ وAFB1 نﺎــﻣز ﻪــﺑ ﻪﺘــﺴﺑاو ﻞﮑــﺷ ﻪﺑAFG1
ﺮﺠﻨﻣ ﻪﺑ ﺐﯿﺳآ
،ﯽﺘﻓﺎــﺑ ﻪــﺑ هﮋــﯾو رد هدر لﻮﻠــﺳ يﺎــﻫ ﺎــﯾاز
ﯽﻣ ﺑ ،ددﺮﮔ ﻪ يرﻮــﻃ ﺪــﺻرد ﻪــﮐ ﻪــﻟﻮﻟ
يﺎــﻫ مﺮﭙــﺳا زﺎــﺳ ﺎــﺑ
ﺐﯾاﺮﺿ
،يﺰﯾﺎﻤﺗ ﯽﻨﯾﺰﮕﯾﺎﺟ ﻪﻟﻮﻟ يا و ﺰﻧژﻮﯿﻣﺮﭙﺳا ﯽﻔﻨﻣ
رد
شﻮﻣ يﺎﻫ ﺖﻓﺎﯾرد هﺪﻨﻨﮐ ﺶﯾاﺰﻓاAFB1
و ﺮﻄﻗ ﻪﻟﻮﻟ يﺎــﻫ
مﺮﭙﺳا زﺎﺳ و ﺖﻣﺎﺨﺿ ﯽﭘا مﻮﯿﻠﺗ لﺎﻨﯿﻣرژ ﻪﺑ رﻮﻃ ﯽﻨﻌﻣ يراد
ﺶﻫﺎﮐ ــﺘﻓﺎﯾ ﺖــﺳا ﻪ ) 24
، 30 . ( ﺮــﺿﺎﺣ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ رد ﺺﺨــﺸﻣ
ﺰﯾﻮﺠﺗ ﻪﮐ ﺪﯾدﺮﮔ شﻮﻣ ردAFG1
ﯽــﺸﯾﺎﻣزآ هوﺮــﮔ يﺎﻫ
ﯽﺘﻓﺎــﺑ ﺢﻄﺳ ،نﺎﻣز ﻪﺑ ﻪﺘﺴﺑاو ﻞﮑﺷ ﻪﺑ وNO
رد ارMDA
)يﺎﻫزور 7
، 15
، 28 ــﮔ ﻪــﺑ ﺖﺒﺴﻧ ( و ﺶﯾاﺰــﻓا لﺮــﺘﻨﮐ هوﺮ
ﺢﻄﺳ ناﺰﯿﻣ هوﺮﮔ رد ارSOD
) ﯽﺸﯾﺎﻣزآ يﺎﻫ 7
، 15
، 28 (
ﯽﻣ ﺶﻫﺎﮐ لﺮﺘﻨﮐ هوﺮﮔ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﺪﯾﺪــﺸﺗ رد ﺮﻣا ﻦﯾا ﻪﮐ ﺪﻫد
ﺐﯿﺳآ مﺮﭙﺳا ﯽﻌﯿﺒﻃ ﺪﻧور رد لﻼﺘﺧا و ﺎﻫ شﻮﻣ رد ﯽﯾاز
ﯽﯾﺎﻫ
ﻪﮐ ﺖــﺳا ﺮﺛﻮــﻣ ﺪﻧدﻮﺑ هدﻮﻤﻧ ﺖﻓﺎﯾرد ارAFG1
، رد اﺮــﯾز
ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ ﺪﺷ هداد نﺎﺸﻧ يا ــﺴﮐﻮﺗ داﻮﻣ ﻪﮐ
دﺮــﮑﻠﻤﻋ ﺮــﺑ ﮏﯿ
شﻮﻣ ﻪﻀﯿﺑ ﯽــﻣ ﺮﯿﺛﺄﺗ ﻎﻟﺎﺑ ﺮﻧ ﯽﯾاﺮﺤﺻ يﺎﻫ
ﻦــﯾا و دراﺬــﮔ
ﺪــﺣ زا ﺶﯿــﺑ ﺪــﯿﻟﻮﺗ ﻖــﯾﺮﻃ زا ﺖــﺳا ﻦــﮑﻤﻣ تاﺮﺛا ،NO
ﺪﺷﺎﺑ داﻮﻣ ﻦﯾا زا ﯽﺷﺎﻧ ﻮﯿﺗاﺪﯿﺴﮐا سﺮﺘﺳا زا وMDA )
31 . (
هوﻼــﻋ ﻪــﺑ رد
هداد نﺎــﺸﻧ ﯽــﻠﺒﻗ تﺎــﻌﻟﺎﻄﻣ ﺪــﺷ
داﻮــﻣ ﻪــﮐ
و ﺪﯿــﺴﮐا ﮏﯾﺮﺘﯿﻧ ﺢﻄﺳ ﺶﯾاﺰﻓا ﺚﻋﺎﺑ ﮏﯿﺴﮐﻮﺗ MDA
ﺢﻄﺳ ﺶﻫﺎﮐ و ﯽﻣSOD
ﺪﻧﻮﺷ ) 32 . ( ﻦﯿــﻨﭽﻤﻫ ﻪــﻌﻟﺎﻄﻣ رد
ﺮﮕﯾد ،ﺪﯾدﺮﮔ نﺎﯿﺑ ﺪﯿــﺴﮐا ﺢﻄــﺳ ﺶﯾاﺰــﻓا ﺚﻋﺎﺑAFB1
ﺪﯿــﺴﮐاﺮﭘﻮﺳ ﺢﻄﺳ ﺶﻫﺎﮐ و ﺪﯿﺋﺪﻟآ يد نﻮﻟﺎﻣ و ﮏﯾﺮﺘﯿﻧ ﯽﻣ زﺎﺗﻮﻤﺴﯾد دﻮﺷ
) 33 . ( نﺎﯿﺑ ناﺰﯿﻣ ﺮﺿﺎﺣ ﻪﻌﻟﺎﻄﻣ رد ERα
شﻮﻣ ﻪﻀﯿﺑ ﺖﻓﺎﺑ رد ﻪــﮐ ﯽﯾﺎﻫ
هدﻮــﻤﻧ ﺖــﻓﺎﯾرد ارAFG1
وﺮــﮔ ﻪﺑ ﺖﺒﺴﻧ ﯽﻬﺟﻮﺗ ﻞﺑﺎﻗ ﺢﻄﺳ رد ﺪﻧدﻮﺑ ﺶﻫﺎــﮐ لﺮــﺘﻨﮐ ه
ﻪﺘﻓﺎﯾ
،ﺖﺳا ﯽﻣ ﻪﻧﻮﮔ ﻦﯾا ﻦﯾاﺮﺑﺎﻨﺑ ﻪﺠﯿﺘﻧ ناﻮﺗ
دﺮــﮐ يﺮــﯿﮔ
هﺪﻧﺮﯿﮔ ﻪﺑ طﻮﺑﺮﻣ يدﺮﮑﻠﻤﻋ ﺢﻄﺳ ﻪﮐ لﻮﻠــﺳ ردERα
ﺎــﻫ
ﺎﺑ ﻪﻬﺟاﻮﻣ ﺐﻗﺎﻌﺘﻣ ﺖﺳا هدﺮﮐ اﺪﯿﭘ ﺶﻫﺎﮐAFG1
. نآ زا ﺎــﺟ
لﻮﻠــﺳ رد ﺰﻧژوﺪﯿﺋوﺮﺘﺳا ﻢﺴﯿﻧﺎﮑﻣ ﻢﯿﻈﻨﺗ ﻪﮐ ﮓﯾﺪــﯿﻟ يﺎــﻫ
و ﯽﻧژوﺮﺘﺳا تﺎﺒﯿﮐﺮﺗ ﻂﺳﻮﺗ ﻪﻀﯿﺑ ﯽﻣERα
ﺪــﺷﺎﺑ
، ﯿﮐﺮﺗ تﺎــﺒ
ﯽﻧژوﺮﺘﺳا رد ﺢﻄﺳ ﯽﻌﯿﺳو ﯽﻣ ﺪﻨﻧاﻮﺗ
،دﺮﮑﻠﻤﻋ ﺰﺘﻨﺳ و ﺎــﯾ
