85
Сопоставление данных настоящей работы с результатами цитогенетического анализа, проводившегося различными авторами на ранних этапах культивирования клеток ММ [8, 14, 15, 16], показало, что клетки трех клеточных линий остались на околодиплоидном уровне, сохранив (2n = 45, Karpas 707 и 2n = 44, U-266) или незначительно уменьшив (с 2n = 49 до 2n = 47, L 363) модальное число хромосом. В клетках RPMI 8226 модальное число хромосом увеличилось с 39 до 67.
Сравнительный кариотипический анализ исследованных линий позволил выявить следующие группы перестроенных хромосом: 1) хромосомы, которые были вовлечены в характерные численные и структурные перестройки, выявленные на ранних этапах культивирования клеток и сохранившие специфику этих перестроек в ходе длительного культивирования; 2) хромосомы, которые были перестроены ранее и продолжали подвергаться изменениям in vitro; 3) хромосомы, которые подвергались клональным и неклональным перестройкам исключительно в условиях in vitro.
Существенно отметить, что среди хромосом последней группы в перестройки нередко вовлекались нормальные гомологи или копии тех хромосом, которые уже были аномальными.
При анализе использованных в работе клеточных линий ММ человека нам не удалось выявить общих для этих линий хромосом и/или хромосомных локусов, участвующих в перестройках кариотипа, характерных для условий существования клеток в культуре. Вместе с тем, наблюдаемые в каждой клеточной линии структурные перестройки хромосом отмечались в различных случаях ММ человека на поздних этапах прогрессии опухолей [17]. Известно, что отличительным признаком кариотипа опухолевых клеток при ММ человека является комплексный характер реаранжировок хромосомного материала [18].
Таким образом, полученные данные в значительной степени свидетельствуют об однонаправленном характере кариотипической изменчивости клеток данного типа опухоли in vivo и in vitro.
Литературa
1 Kyle R. A., Rajkumar S.V. 2008. Multiple myeloma. Blood. 111 : 2962―2972.
2 Fonseca R., Barlogie B., Bataille R., Bastard C., Bergsagel P. L., Chesi M., Davies F. E., Drach J., Greipp P. R., Kirsch I. R., Kuehl W. M., Hernandez J. M., Minvielle S., Pilarski L. M., Shaughnessy J. D. Jr., Stewart A. K., Avet-Loiseau H. 2004.Genetics and cytogenetics of multiple myeloma: a workshop report.
Cancer Res. 64 : 1546―1558.
3 Drexler H. G., Matsuo Y. 2000. Malignant hematopoietic cell lines: in vitro models for the study of multiple myeloma and plasma cell leukemia. Leuk Res. 24 :681―703.
4 Bergsagel P. L., Kuehl W., M.. 2001. Chromosome translocations in multiple myeloma. - Oncogene.
20 : 5611―56 22.
5 Matsuoka Y., Moore G.E., Yagi Y., Pressman D. 1967. Production of free light chain of immunoglobulin by a hematopoietic cell line derived from a patient with multiple myeloma. Proc. Soc. Exp.
Biol. Med. 125 : 1246―1250.
6 Nilsson K. 1971. Characteristics of established myeloma and lymphoblastoid cell lines derived from an E myeloma patient: a comparative study. Int. J. Cancer. 7 : 380―396.
7 Diehl V., Schaadt M., Kirchner H., Hellriegel K.P. Gudat F., Fonatsch C., Laskewitz E., Guggenheim R. 1978. Long-term cultivation of plasma cell leukemia cells and autologous lymphoblasts (LCL) in vitro: a comparative study. Blut. 36 (6) : 331―338.
8 Karpas A., Fischer P., Swirsky D.1982. Human myeloma cell line carrying a Philadelphia chromosome. Science. 216 : 997―999.
9 Мамаева С. Е. 1988. Хромосомный анализ культивируемых клеток. В сб.: Методы культивирования клеток. Л., Наука. 78―98.
10 Seabright M. 1971. A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet. 2 : 971―972.
11 Савельева Л.Г. 1988. Кариотипическая характеристика постоянных клеточных линий различного гистогенеза: Автореф. канд. дис. Л. 23 с.
12 Heng H.H, Liu G, Bremer S, Ye K. J, Stevens J, Ye C. J. 2006. Clonal and non-clonal chromosome aberrations and genome variation and aberration. Genome. 49 : 195―204.
13 Ye C.J, Liu G., Bremer S.W., Heng H.H. 2007. The dynamics of cancer chromosomes and genomes.
Cytogenet Genome Res. 118(2-4): 237―246.
14 Moore G. E, Kitamura H. 1968. Cell line derived from patient with myeloma. N Y State J Med. 68 : 2054―2060.
86
15 Nilsson K., Bennich H., Johansson S.G.O., Ponten J. 1970. Established immunoglobulin producing myeloma (IgE) and lymphoblastoid (IgG) cell lines from an IgE myeloma patient. Clin. Exp. Immunol. 7:
477―489.
16 Diehl V., Schaadt M., Kirchner H., Hellriegel K.P. Gudat F., Fonatsch C., Laskewitz E., Guggenheim R. 1978. Long-term cultivation of plasma cell leukemia cells and autologous lymphoblasts (LCL) in vitro: a comparative study. Blut. 36 (6) : 331―338.
17 Gutiérrez N. C., García J. L., Hernández J. M., Lumbreras E., Castellanos M., Rasillo A., Mateo G., Hernández J. M., Pérez S., Orfao A., San Miguel J. F. 2004. Prognostic and biologic significance of chromosomal imbalances assessed by comparative genomic hybridization in multiple myeloma. Blood. 104 : 2661―2666.
18 Kuehl W. M. , Bergsagel P. L. 2002. Multiple myeloma: evolving genetic events and host interactions. Nat Rev Cancer. 2 : 175―187]
87
ГИСТОЛОГИЯ, ЦИТОЛОГИЯ, КЛЕТОЧНАЯ БИОЛОГИЯ УДК 612.42:616.379.
Абдрешов С.Н., Ахметбаева Н.А.
АДРЕНЕГРИЧЕСКАЯ ИННЕРВАЦИЯ КРОВЕНОСНЫХ СОСУДОВ КОНЕЧНОСТИ У КРЫС В УСЛОВИЯХ МИКРОГРАВИТАЦИИ
(Институт физиологии человека и животных)
В данной статье показано, что при условиях невесомости у крыс в стенке сосудов передней и задней конечности отмечается снижение плотности адренергического нервного сплетения, и слабое свечение сохранившихся нервных волокон и варикозных расширений.
В наземных условиях физиологические эффекты невесомости на организм изучаются в модельных опытах, в частности, используется антиортостатическое положение тела в пространстве [1, 2]. При антиортостатическом положении тела в пространстве при изменении силы тяжести в организме происходит перемещение большого количества крови из вен ног нижней части тела в сторону грудной клетки и в бассейн наружной яремной вены. Приток крови и тканевой жидкости в верхнюю часть тела приводит к повышению давления интерстициальной жидкости, к отекам тканей лица и в области шеи, иногда даже к носовым кровотечениям [3, 4, 5, 6]. Одним из экстремальным фактором является влияние длительного воздействия постоянного магнитного поля высокой напряженности на организм. В таких условиях исследователями отмечено активность адренергической и холинергической системы организма [7]. Было отмечено, что на 30-ые сутки облучения животных содержание адреналина и норадреналина в крови превышает уровень контроля, что, по мнению авторов, свидетельствовала, о повышение активности гормонального и медиаторного звеньев симпатико-адреналовой системы [7].
Поскольку в литературе отсутствуют сведения об адренергической иннервации кровеносных сосудов конечности при условиях изменения вектора гравитации, нами предпринято настоящее исследование.
Материалы и методы
Эксперименты проводили на половозрелых белых лабораторных крысах (самцах массы тела 220-270гр). Первая группа животных – контроль (8 крыс), 2-я группа – опытная (12 крыс). Для моделирования микрогравитации использовалась установка, где крысы были подвешены на стендах вниз головой под углом 45°±5° сроком на 14 суток, таким образом, чтобы полностью снять весовую нагрузку с задних конечностей. С помощью передней конечности животные свободно передвигались по решетчатому полу стенда [8]. Обе группы крысы содержались в обычных условиях вивария, на стандартном рационе со свободным доступом к пище и воде.
У крыс, декапитированных под эфирным наркозом, для исследования адренергической иннервации брали вену и артерию передней и задней конечностей. Для изучения адренергической иннервации сосудов использовали гистохимический метод Фалька в модификации В.А.Говырина с использованием глиоксалевой кислоты и флуоресцентного микроскопа ЛЮМАМ [9, 10]. На тотальных препаратах сосудов изучали архитектонику нервного сплетения. Для выявление области локализации адренергических нервных волокон в стенке сосудов готовились криостатные среды толщиной 20 мкм. Всего было обследовано свыше 200 тотальных и криостатных срезов.
Результаты и их обсуждение
Адренергическая иннервация стенки вены и артерии передней и задней конечностей у интактной крысы был представлен развитой сетью яркофлуоресцирурующих нервных волокон состоящих многочисленными регулярно расположенными варикозными расширениями. Сравнение адренергической иннервации вены и одноименной артерии передней и задней конечностей интактной крысы выявило следующие особенности: в стенке артерии плотность нервных волокон выше, более сложная архитектоника нервного сплетения. В многочисленных петлях нервных сплетений в стенке артерий можно видеть отдельные конечные терминали, которые дают сами несколько разветвлений, таким образом увеличивается плотность нервного сплетения (рисунок 1). В стенке венозного сосуда нервные волокна образуют крупные петли и нервное редкое разветвлений. Терминальная нервных волокна, несколько разветвляясь, образуют концевые терминали с варикозными утолщениями (рисунок 2).
88
В препаратах артерии и вены передней конечности крысы, длительно находившегося в антиортостатическом состоянии, отмечается снижение плотности нервного сплетения, вследствие исчезновения терминальных нервных волокон. Снижается свечение сохранившихся нервных структур, то есть нервных волокон и их варикозных утолщений.
Об. 30 ок. РК 6,3 х
Рисунок – 1 Гистохимическая реакция на катехоламины. Адренергическая иннервация артерии
передней конечности интактной крысы.
Об. 30 ок. РК 6,3 х
Рисунок 2 – Адренергическое нервное сплетения в