3
ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКА МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОМПАКТНОЙ КОСТИ
Далина А.Д., Нургалиева А.Н., Бекболсынов Д., Огай В.Б.
Евразийский Национальный Университет им. Л.Н.Гумилева, Астана, РК, [email protected] Научный руководитель – phD, Булгакова О.В.
Известно, что костный мозг является источником мультипотентных стволовых клеток, таких как гематопоэтические стволовые клетки (ГСК) и мезенхимальные стволовые клетки (МСК). Однако культура МСК зачастую остается контаминирована ГСК.
По этой причине, в данной работе вместо костного мозга мы использовали компактные кости мышей в качестве альтернативного источника получения МСК по следующим критериям:
1) ГСК имеются в большом количестве в полостях костного мозга;
2) ГСК практически отсутствуют в компактных костях;
3) МСК обнаружены в компактных костях человека и животных
Целью данной работы является получение мезенхимальных стволовых клеток компактной кости и изучение их биологических характеристик.
Предлагаемый метод основан на выделении МСК из компактной кости, что является наиболее удобным в целях ограничения контаминации гемопоэтическими стволовыми клетками. Для проведения опыта были использованы инбредные мыши линии Balb/C. Учитывая все эти условия, мы разработали схему выделения МСК из компактных костей. Которая включает следующие этапы:
удаление костного мозга, механическое расщепление трубчатых костей, ферментативная обработка костных фрагментов, инкубирование костных фрагментов в среде для МСК, культивирование МСК мигрировавших их костных фрагментов.
Полученная линия клеток обладала морфологическими признаками, характерными для мультипотентных стромальных клеток, включая фибробластоподобную морфологию и формирование клеточных колоний.
В данной работе нами была так же проведена направленная дифференцировка МСК в остеобласты, хондробласты и адипоциты, с использованием специальных индукторов. Таким образом, данные, полученные при индукции хондрогенной, остеогенной и адипогенной дифференцировки МСК позволяют утверждать, что МСК компактной кости не являются сборной группой клеток, состоящей из стромальных элементов различных линий дифференцировки, а построены по иерархическому принципу, характерному для пула мультипотентных стволовых клеток.
Таким образом, использование мезенхимальных стромальных клеток компактной кости в качестве источника получения тканей мезодермального происхождения, может применяться с целью дальнейшего использования в клеточной терапии и регенеративной медицине.
