KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI
EKSTRAK n-HEKSANA HERBA KURMAK MBELIN
(Enydra fluctuans Lour.)
OLEH:
YEMIMA KASIH ORIZA S.
NIM 101501099
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 16 Agustus 2014 Pembimbing I, Panitia Penguji,
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt. NIP 195108161980031002 NIP 195709091985112001
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
Pembimbing II, NIP 195108161980031002
Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt Dra. Erly Sitompul, M.Si., Apt. NIP 194908111976031001 NIP 195006121980032001
Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 19510301980031002
Medan, 6 Oktober 2014 Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat dan kasihnya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Steroid/ Triterpenoid dari Ekstrak n-Heksana Herba Kurmak Mbelin (Enydra fluctuans Lour.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis juga mengucapkan terima kasih yang tulus dan ilkhas kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penukis dapat menyelesaikan pendidikan. Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan kepada penulis selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Ibu Dra. Erly Sitompul, M.Si., Apt., dan Bapak Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran, dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ayahanda dan Ibunda tercinta, Ir. Antonius Silalahi dan Erlina Tarigan, B.Sc., yang tiada hentinya memberi semangat dan doa
dengan tulus ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga kepada abang dan adikku tersayang, Dea Reo Prasadena Silalahi dan Ias Zilena Cacia Silalahi yang selalu memberi doa, dorongan dan semangat.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, 6 Oktober 2014
Penulis,
Yemima Kasih Oriza S NIM 101501099
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI EKSTRAK n-HEKSANA HERBA KURMAK MBELIN
(Enydra fluctuans Lour.)
ABSTRAK
Salah satu tumbuhan suku Asteraceae yang digunakan sebagai sayuran oleh masyarakat Kabupaten Karo yaitu kurmak mbelin (Enydra fluctuans Lour.), dapat digunakan sebagai pencahar dan untuk mengobati penyakit herpes. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, skrining fitokimia untuk golongan senyawa yang terkandung di dalam herba kurmak mbelin dan mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid.
Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, ekstraksi dilakukan secara perkolasi dengan pelarut etanol, kemudian ekstrak yang diperoleh difraksinasi dengan n-heksana, penentuan perbandingan fase gerak dengan mengunakan kromatografi lapi tipis (KLT), kemudian ekstrak n-heksana difraksinasi dengan kromatografi kolom (KK) dan KLT preparatif. Kemurnian isolat ditentukan dengan kromatografi lapis tipis (KLT) dua arah dan isolat murni yang diperoleh dikarakterisasi secara spektrofotometri sinar ultraviolet (UV) dan sperktrofotometri sinar inframerah (IR).
Hasil karakterisasi simplisia herba kurmak mbelin diperoleh kadar air 5,20%, kadar sari yang larut dalam air 20,63%, kadar sari yang larut dalam etanol 17,24%, kadar abu total 14,28% dan kadar abu yang tidak larut asam 0,54%. Hasil skrining fitokimia diperoleh adanya senyawa flavonoid, steroid/triterpenoid, tanin, saponin dan glikosida. Hasil analisis isolat menunjukkan bahwa isolat yang diperoleh adalah senyawa golongan steroid/triterpenoid dengan penampak bercak Liebermann-Burchard berwarna biru dengan nilai Rf 0,57 dan isolat yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri sinar UV memberikan absorbansi maksimum pada panjang gelombang 212,2 nm menunjukkan adanya gugus kromofor dan hasil spektrofotometri sinar IR menunjukkan adanya gugus C-O,-CH3,-CH2, C=C, C-H alifatis dan -OH.
Kata kunci: Enydra fluctuans Lour., karakterisasi, skrining fitokimia, isolasi, steroid/triterpenoid.
SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ISOLATION OF STEROID/TRITERPENOID OF
n-HEXANE EXTRACT OF KURMAK MBELIN HERB (Enydra fluctuans Lour.)
ABSTRACT
One of the Asteraceae plants that is consumed as a vegetable in Karo is kurmak mbelin (Enydra fluctuans Lour.). This plant has traditionally been used as a laxative and to treat herpes. The purpose of this study was to perform simplex characterization, the phytochemical screening of compounds contained in kurmak mbelin herb and the isolation of the steroid/triterpenoid compound.
This research included simplex characterization, phytochemical screening, extraction was accomplished by percolation with ethanol as solvent, then the ethanol extract was fractionated with n-hexane as solvent, determination of the ratio of mobile phase by Thin Layer Chromatography, then the n-hexane extract was fractionated with Column Chromatography and followed by preparativeThin Layer Chromatography. The purity of isolate was confirmed by two-dimensional Thin Layer Cromatography and the pure isolate was characterized with ultraviolet and infrared spectrophotometric methods.
The result of simplex characterization, the water content 5.20%, water-soluble extract 20.63%, ethanol-water-soluble extract 17.24%, total ash 14.28%, acid-insoluble ash 0.54%. The result of phytochemical screening showed the presence of flavonoid, steroid/triterpenoid, tanin, saponin and glycosides. The result of isolate analysis indicated that the isolate was steroid/triterpenoid which gave blue colour with Rf value 0.57 with Liebermann-Burchard reagent, and the resulting isolat was then characterized by UV spectrophotometry that gave maximum absorption at wavelength 212.2 nm indicating the presence of chromophore and the result of IR spectrophotometry indicated the presence of C-O, -CH3, CH2, C=C, aliphatic C-H and –OH functional groups.
Key words: Enydra fluctuans Lour., characterization, phytochemical screening, isolation, steroid/triterpenoid.
DAFTAR ISI
Halaman JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xiii
DAFTAR GAMBAR ... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ... xv BAB I PENDAHULUAN ... 1 1.1 Latar Belakang ... 1 1.2 Perumusan Masalah ... 2 1.3 Hipotesis ... 3 1.4 Tujuan Penelitian ... 3 1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Tumbuhan ... 5
2.1.1 Daerah tumbuh ... 5
2.1.2 Nama daerah ... 5
2.1.3 Nama asing ... 5
2.1.5 Morfologi tumbuhan ... 6
2.1.6 Kandungan kimia ... 7
2.1.6 Kegunaan ... 7
2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan ... 7
2.2.1 Alkaloid ... 7 2.2.2 Flavonoida ... 8 2.2.3 Saponin ... 8 2.2.4 Tanin ... 9 2.2.5 Glikosida ... 10 2.2.6 Glikosida antrakuinon ... 11 2.2.7 Steroid/ triterpenoid ... 11 2.3 Ekstraksi ... 14 2.4 Kromatografi ... 16
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ... 16
2.4.2 Kromatografi kolom ... 18
2.4.3 Kromatografi lapis tipis preparatif ... 19
2.4.4 Kromatografi lapis tipis dua arah ... 20
2.5 Spektrofotometri ... 20
2.5.1 Spektrofotometri ultraviolet ... 20
2.5.2 Spektrofotometri inframerah ... 21
BAB III METODE PENELITIAN ... 22
3.1 Alat-alat yang digunakan ... 22
3.2 Bahan-bahan yang digunakan ... 22
3.3.1 Pereaksi Bouchardat ... 23
3.3.2 Pereaksi Meyer ... 23
3.3.3 Larutan asam sulfat 2 N ... 23
3.3.4 Larutan asam nitrat 0,5 N ... 23
3.3.5 Larutan Dragendorff ... 23
3.3.6 Larutan Molisch ... 24
3.3.7 Pereaksi asam klorida 2 N ... 24
3.3.8 Larutan timbal (II) asetat 0,4 M ... 24
3.3.9 Larutan besi (III) klorida 1% b/v ... 24
3.3.10 Larutan pereaksi kloralhidrat ... 24
3.3.11 Larutan Pereaksi Liebermann-Burchard ... 24
3.3.12 Larutan Pereaksi Floroglusin ... 24
3.4 Pengumpulan dan Pengolahan Tumbuhan ... 25
3.4.1 Pengumpulan bahan tumbuhan ... 25
3.4.2 Identifikasi tumbuhan ... 25
3.4.3 Pengolahan tumbuhan ... 25
3.5 Pemeriksaan Mikroskopik Herba Kurmak Mbelin Segar.... 25
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia Herba Kurmak Mbelin 26
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ... 26
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 26
3.6.3 Penetapan kadar air ... 26
3.6.4 Penetapan kadar sari yang larut air ... 27
3.6.5 Penetapan kadar sari yang larut etanol ... 27
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam ... 28 3.7 Skrining Fitokimia ... 28 3.7.1 Pemeriksaan alkaloid ... 28 3.7.2 Pemeriksaan glikosida ... 29 3.7.3 Pemeriksaan saponin ... 29 3.7.4 Pemeriksaan flavonoid ... 30
3.7.5 Pemeriksaan glikosida antrakinon ... 30
3.7.6 Pemeriksaan tanin ... 30
3.7.7 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 30
3.8 Pembuatan Ekstrak ... 31
3.9 Fraksinasi Ekstrak Etanol ... 31
3.10 Kromatografi Lapis Tipis dari Ekstrak n-Heksana Herba Kurmak Mbelin ... 32
3.11 Kromatografi Kolom dari Ekstrak n-Heksana Herba Kurmak Mbelin ... 32
3.12 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Hasil Kromatografi Kolom dengan KLT Preparatif ... 33
3.13 Uji Kemurnian terhadap Kristal Hasil Isolasi ... 34
3.14 Identifikasi Isolat ... 35
3.14.1 Identifikasi isolat secara spektrofotometri UV ... 35
3.14.2 Identifikasi isolat secara spektrofotometri IR ... 35
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 36
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 36
4.2 Hasil Karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Serbuk Simplisia 37
4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 37
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 41
5.1 Kesimpulan ... 41
5.2 Saran ... 41
DAFTAR PUSTAKA ... 42
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman 3.1 Hasil karakteristik simplisia dari herba kurmak mbelin ... 37 3.2 Hasil skrining fitokimia dari simplisia herba kurmak mbelin ... 37 3.3 Hasil analisis spektrum Inframerah ... ... 40
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Rumus bangun koniina ... 8
2.2 Rumus bangun hesperetin ... 8
2.3 Rumus bangun diosgenin ... ... 9
2.4 Rumus bangun katekin ... 9
2.5 Rumus bangun dioscin ... 10
2.6 Rumus bangun sinigrin ... 10
2.7 Rumus bangun nikleosidin ... ... 11
2.8 Rumus bangun aloin ... 11
2.9 Rumus bangun α-amirin ... 12
2.10 Rumus bangun sitosterol ... ... 12
2.11 Rumus bangun digitogenin ... 12
2.12 Rumus bangun struktur dasar steroida dan sistem penomorannya 13 2.13 Rumus bangun kolesterol ... ... 13
2.14 Rumus bangun stigmasterol ... 13
2.15 Rumus bangun ergosterol ... 14
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Identifikasi tumbuhan ... 45
2 Bagan kerja penelitian ... 46
3 Bagan pembuatan ekstrak n-heksana herba kurmak mbelin ... 47
4 Gambar makroskopik tumbuhan kurmak mbelin ... 48
5 Gambar mikroskopik tumbuhan segar dan serbuk simplisia herba kurmak mbelin ... 50
6 Perhitungan hasil penetapan kadar ... 53
7 Bagan kromatografi kolom ... 58
8 Kromatogram dan harga Rf dari fraksi n-heksana herba kurmak mbelin ... 59
9 Kromatogram KLT hasil kromatografi kolom dari ekstrak n-heksana herba kurmak mbelin ... 61
10 Kromatogram hasil KLT Preparatif dari F4 ... 64
11 Kromatogram hasil KLT dua arah ... 65
12 Spektrum ultraviolet isolat murni herba kurmak mbelin ... 66
13 Spektrum IR isolat murni herba kurmak mbelin ... 67