BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap efek antifertilitas bawang putih (Allium sativum L.) dengan bentuk sediaan, dosis, dan jangka waktu pemberian berbeda.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap parameter lain terkait kemungkinan adanya efek antifertilitas berdasarkan penelitian-penelitian sebelumnya.
DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, K. 2012. Regulation of Human Sperm Motility and Hyperactivation Components by Calcium, Calmodulin, and Protein Phosphatases.
Archives of Andrology 35:187-208.
Aka, LO et al., 2010. The Effects of Dietary Supplementation of Allium sativum on Some Vital Biochemical Parameters in Male Albino Rats. Sokoto Journal of Veterinary Sciences (2010). 8(1):26-30.
Amagase, Haranobu. 2006. Clarifying the Real Bioactive Constituents of Garlic.
The Journal of Nutrition 136: 716S-725S.
Amagase, Haranobu. et al. 2001. Intake of Garlic and Its Bioactive Components.
The Journal of Nutrition 131:955S-962S
Ashkenazi A dan Dixit VM. 1998. Death Receptors: Signaling and Modulation.
Science 281: 433-442.
Ashraf, Rizwan et al., 2011. Garlic (Allium sativum) Supplementation with Standard Antidiabetic Agent Provides Better Diabetic Control in Type 2 Diabetes Patients. Pak. J. Pharm. Sci., Vol.24, No.4, October 2011, pp.565-570
Ashraf, Rizwan, et al. 2013. Effects of Allium sativum (Garlic) on Systolic and Diastolic Blood Pressure in Patients with Essential Hypertension. Pak. J. Pharm. Sci., Vol.26, No.5, September 2013, pp.859-863
Astuti, Sussy. 2009. Profil Imunohistokimia Antioksidan Copper, Zincsuperoxide Dismutase (Cu,Zn-Sod) dan Jumlah Sel Spermatogenik pada Jaringan Testis Tikus yang Diberi TEP. Lembaga penelitian.
Ayaz, E. dan Halpsoy HC. 2007. Garlic (Allium sativum) and traditional medicine. Turkiye Parazitol Derg. 2007;31(2):145-9.
Banerjee, SK. et al 2001. Garlic-induced alteration in rat liver and kidney morphology and associated changes in endogenous antioxidant status. Food and Chemical Toxicology 2001;39(8):793-797.
Boepple P.A., Hayes F.J., Dwyer A.A., Raivio T., Lee H., Crowley W.F., Pitteloud N.,Relative roles of inhibin B and sex steroids in the negative feedback regulation of follicle-stimulating hormone in men across the full spectrum of seminiferous epithelium function. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 93(5), pp. 1809-1814, 2008.
Boitani, C., M. Stefanini, A. Fragale, and A.R. Morena. 1995. Activin stimulates Sertoli cell proliferation in a defined period of rat testis development.
Chada, M., R. Prusa, J. Bronsky, K. Kotaska, K. K. Sidlova, M. Pechova, and L. Lisa. 2003. Inhibin B, follicle stimulating hormone, luteinizing hormone and testosteron during childhood and puberty in males: Changes in serum concentration in relation to age and stage of puberty. Physiol. Res. 52:45-51.
Chairul. 2003. Identifikasi Secara Cepat Bahan Bioaktif pada. Tumbuhan di Lapangan. Jurnal Berita Biologi, Vol 6,. No. 4, April 2003.
Chakrabarti K, Pal S, Bhattacharyya AK. 2003. Sperm immobilization Activity of Allium sativum L. and Other Plant Extracts. Asian J Andrology 2003; 5: 131–5.
Chang, H.Y. and Yang, X. 2000. Proteases for Cell Suicide: Functions and Regulation of Caspase. Microbiol.Mol.Biol.Rev. 64: 821-846
Chemes HE. Infancy is not a period of testicular development. Int J Androl., 2001. 24:2-7
Chhatwal, Simran et al. 2012. To Study The Antihyperglycaemic And Lipid Lowering Effect of Garlic as An Adjunct to Metformin in Patients of Type 2 Diabetes Mellitus with Obesity. International Journal of Basic & Clinical Pharmacology. July-August 2012 | Vol 1, Issue 1.
Clermont, Y. (1962) Quantitative Analysis of Spermatogenesis of The Rat: A Revised Model for The Renewal of Spermatogonia. Am. J. Anat. Ill, 111-129.
Corzo-Martinez M., Corzo N. & Mar Villamiel. (2007). Biological properties of onions and garlic, Trends in Food Science & Technology, 18, 609-625. Daniel, N.N., dan Krosmeyer, S.J. 2004. Cell Death : Critical Control Points. Cell.
116 : 205-219.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Gizi. 1992. Daftar Komposisi Bahan Makanan. Jakarta : Bharata,
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Materia Medika Indonesia Jilid VI. Direktorat jenderal pengawasan obat dan makanan: Jakarta.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta.
Dixit, VP. dan S. Joshi. 1982. Effects of Chronic Administration of Garlic (Allium sativum Linn) on Testicular Function.
Engvall, E. dan Perlman P. 1971. "Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin G". Immunochemistry 8 (9): 871–4. Evans WC (1996). Trease and Evans Pharmacognosy, 14th Edition, Bailiere
Finn, G. 1994. Textbook of Histology. Diterjemahkan oleh Gunawijaya A. Buku Teks Histologi Jilid 2. Jakarta: Binapura Akasara.
Ghalehkandi, G. 2014. Garlic (Allium sativum) Juice Protects from Semen Oxidative Stress in Male Rats Exposed to Chromium Chloride. Anim. Reprod., v.11, n.4, p.526-532, Oct./Dec. 2014
Gupta, S. Molecular steps of death receptors and mitochondrial pathway of apoptosis. Life sci 69: 2957-2964, 2001.
Guyton, AC. dan Hall JE. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 9. Jakarta: EGC.
Hammami, et al. 2009. Chronic Crude Garlic Feeding Modified Adult Male Rat Testicular Markers: Mechanism of Action. Reproductive Biology and Endocrinology 2009, 7:65 doi:10.1186/1477-7827-7-65
Hapsoh., Rahmawati. 2008. Modul Agronomi: Budidaya Tanaman Obat-Obatan.
Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera Utara.
Harbone, JB. 1996. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Penerjemah Kosasih Padmawinata, Iwang Soediro;
Hayes, A. et al. 2001. The development of articular cartilage: Evidence for an appositional growth mechanism. Anatomy and Embryology 203(6), pp. 469-479
Hernawan, Udhi Eko dan Ahmad Dwi Setyawan. 2003. REVIEW: Senyawa Organosulfur Bawang Putih (Allium sativum L.) dan Aktifitas Biologinya.
Biofarmasi 1 (2): 65-76, Agustus 2003, ISSN: 1693-2242
Kaspul. 2004. kualitas Spermatozoa Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) Setelah Perlakuan Dengan Boraks. Bioscientiae Volume 1, Nomor 2.
Kasuga et al. 2001. Pharmacologic Activities of Aged Garlic Extract in Comparison with Other Garlic Preparations. American Society for Nutritional Sciences.
Krinke, G. J. 2000. The Laboratory Rat. San Diego. CA: Academic Press. Hal: 150-152
Kubec R., Svobodova ` M. and Velı `sek J. 1999. Gas chromatographic determination of S-alk(en)ylcysteinesulphoxides. Journal of Chromatography A 862: 85–94.Kirsch, et al., 1999
Lequin, RM. 2005. Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Clinical Chemistry 51 (12): 2415–2418.
Li Y, Xu Shi-ying (2007). Preparation of Garlic Poweder with High Allicin Content. Agric. Sci. China, 6(7): 890-898.
M, al-Bekairi A, Shah A H, Qureshi S. 1990. Effect of Allium sativum on Epididymal Spermatozoa, Estradiol-treated Mice and General Toxicity.
Journal of Ethnopharmacology 29 (2): 117-25.Almeida et al (2005
Malole, Sri Utami Pramono, C. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan di. Laboratorium. Jawa Barat: Institut Pertanian Bogor. Hal : 104 – 112.
McNeilly, A.S., C.J. Souja, D.T. Baird, I.A. Swanston, J. McVerry, J. Cranfield, and G.A. Lincoln. 2002. Production of inhibin a not b in rams: changes in plasma inhibin a during testis growth, and expression of inhibin /activin subunit mrna and protein in adult testis. J. Reproduction. 123:827-835.
Moreno, Lizama, dkk.. 2006. Caspase Activation Throughout The First Wave of Spermatogenesis in The Rat. Cell Tissue Res 325 : 533-540.
Omotoso, G et al. 2009. Effects Of Aqueous Extract of Allium Sativum (Garlic) on Semen Parameters in Wistar Rats. The Internet Journal of Urology. 2009 Volume 7 Number 2.
Oommen, Suby et al., 2003. Allicin (from Garlic) Induces Caspase-Mediated Apoptosis in Cancer Cells. European Journal of Pharmacology 485 (2004) 97– 103
Pentikäinen V, 2002. Regulation of Male Germ Cell Apoptosis: Roles of sex steroids and the cellular death receptors Fas and TNFR1. Dissertation.
Programme for Developmental and Reproductive Biology Biomedicum,
Helsinki University of Helsinki, Finlanda.
Print, Cristin G. dan Kate Lakoski Loveland. 2000. Germ Cell Suicide: New Insights into Apoptosis During Spermatogenesis. BioEssays 22:423±430, ß 2000 John Wiley & Sons, Inc.
Raff, M. 1998. Cell Suicide for Beginners. Nature 396:119-122.
Roser, David. 1991. Bawang Putih untuk Kesehatan Jakarta: Bumi Aksara Rukmana, Rahmat. 1995. Budidaya Bawang Putih. Jakarta: Penerbit Kanisius. Rusmiati. 2007. Pengaruh ekstrak kayu secang (Caesalpinia Sappan L.) terhadap
spermatozoa mencit jantan (Mus musculus L.). Bioscientiae. Kalimantan Selatan. Program Studi Biologi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat 4 (2): 68
Sakkas D, Mariethoz E, St. John JC. Abnormal sperm parameters in humans are indicative of an abortive apoptotic mechanism linked to the Fas-mediated pathway. Exp Cell Res. 1999; 251: 350 -355
Santoso, H.B. 2000. Bawang Putih. Edisi ke-12. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Shaha C., Tripathi R., dan Mishra DP., 2010. Male germ cell apoptosis:
Sharp, Patrick E. 1998. Laboratory Animal Pocket Reference Series: The Laboratory Rat. Published by CRC Press.
Sherwood, L. 2001. Fisiologi Manusia: dari Sel ke Sistem ed. 2. Jakarta: EGC. Simoni, M.J., B. Gromoli, and E. Nieschlag. 1997. The follicle-stimulating
hormone receptor: Biochemistry, molecular biology, physiology, and patophysiology. Endocrine Reviews. 18(6):739-773.
Sowash, J.R. “Rat Dissection”, 1-9, May 2009.
Steller, H. (1995). The control of apoptosis in Drosophila. Trends Cell Biol. 5(2): 74—77
Sudarsono, A. Pudjoarinto, et al. 2006. Tumbuhan Obat 1. Yogyakarta: Pusat Penelitian Obat Tradisional Universitas Gadjah Mada.
Syamsiyah, Siti.2003. Khasiat dan Manfaat Bawang Putih: Raja Antibiotik Alami.
Jakarta: Agro Media Pustaka
Verma A, Kanwar KC. 1999. Effect of Vitamin E on Human Sperm Motility and Lipid Peroxidation in Vitro. Asian J Androl, 1:151-154.
Voigt, R., 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Diterjemahkan oleh Soendani N. S., UGM Press, Yogyakarta.
Wang X, Sharma RK, Sikka SC, Thomas AJ Jr, Falcone T, Agarwal A. Oxidative Stress is Associated with Increased Apoptosis Leading to Spermatozoa DNA Damage in Patients with Male Factor Infertility. Fertil Steril. 2003;80 Wei, Z., dan Lau, B. H. S. 1998. Nutrition Research, 18,61–70.
Wei, Zhihua and Benjamin Lau. 1998. Garlic Inhibits Free Radical Generation and Augments Antioxidant Enzyme Activity in Vascular Endothelial Cells. Nutrition Research, Vol. 18, No. 1, pp. 61-70.1998
Wibowo, Singgih. 2009. Budiya Bawang Putih. Jakarta: Penebar Swadaya.
Wilkison, J.M., Halley,S., Towers, P.A. 2000. Comparison of male reproductive parameters in three rat strains: Dark Agouti, Sprague Dawley and Wistar. Australia: Laboratory Animals Ltd. Laboratory Animals 34, 70-75.
World Health Organization. 1988. Understanding Semen Parameters. Geneva: World Health Organization.
World Health Organization. 1999. Monographs on Selected Medicinal Plants, Vol I. Geneva: World Health Organization.
World Health Organization. 2000. General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of Traditional Medicine. Geneva: World Health Organization.
World Health Organization. 2010. Standards for The Evaluation of Human Semen. Geneva: World Health Organization.
Zang, Tao, et al. 2013. Ameta-analysis of Randomized, Double-blind, Placebo-controlled Trials for The Effects of Garlic on Serum Lipid Profiles. J Sci Food Agric (wileyonlinelibrary.com) DOI 10.1002/jsfa.5557
http://animalsciences.missouri.edu/courses/4314/microscope_slides/sperm.htm http://www.sbs.utexas.edu/sanders/Bio347/Lectures/2006/Lecture%208%20200 https://jrsowash.wikispaces.com/file/view/rat.student.pdf
Lampiran 3. Skema Uji Antifertilitas Bawang Putih (Allium sativum L.)
Aklimatisasi hewan uji selama 2 minggu dengan
pakan standar
Simple random sampling
Kontrol Perlakuan 5 ekor tikus Diberikan pakan standar dan suspensi Na CMC 5 ekor tikus Diberikan pakan standar dan suspensi serbuk bawang putih dosis 50mg/kgBB 5 ekor tikus Diberikan pakan standar dan suspensi serbuk bawang putih dosis 100mg/kgBB 5 ekor tikus Diberikan pakan standar dan suspensi serbuk bawang putih dosis 150mg/kgBB Terminasi pada hari ke-31
Kauda epididimis Testis
Uji Motilitas Spermatozoa Uji ELISA Protein Kaspase-3 Analisis Data Pengukuran bobot testis
Lampiran 4. Skema Pembuatan Serbuk Bawang Putih (Allium sativum L.)
`
1 kg bawang putih segar
Kupas dan bersihkan. Kemudian dihaluskan menggunakan blender
Haluskan bawang kering dengan lumpang dan alu
Ayak serbuk bawang putih hasil freeze drymenggunakan
mesh 30-100
Pembuatan suspensi serbuk bawang putih dengan dosis 50 mg/kgBB, 100
mg/kgBB, dan 150 mg/kgBB. Determinasi Tanaman
di LIPI
Dehidrasi dengan freeze dry
pada suhu 100F (-12,20C) dan tekanan 10 Pa
Lampiran 5. Perhitungan Dosis VAO Dosis Rendah ( 50 mg/kgBB) 1 mL Konsentrasi = 12,5 mg/mL
Akan dibuat suspense untuk 5 ekor tikus untuk dosis rendah, maka sediaan dibuat sebanyak 5 mL.
Ekstrak yang harus ditimbang sebanyak = 12,5 mg/mL x 5 mL = 62,5 mg.
Dosis Sedang ( 100 mg/kgBB) 1 mL Konsentrasi = 25 mg/mL
Akan dibuat suspense untuk 5 ekor tikus untuk dosis rendah, maka sediaan dibuat sebanyak 5 mL.
Ekstrak yang harus ditimbang sebanyak = 25 mg/mL x 5 mL = 125 mg.
Dosis Tinggi ( 150 mg/kgBB) 1 mL Konsentrasi = 37,5 mg/mL
Akan dibuat suspense untuk 5 ekor tikus untuk dosis rendah, maka sediaan dibuat sebanyak 5 mL.
Ekstrak yang harus ditimbang sebanyak = 37,5 mg/mL x 5 mL = 187,5 mg.
Lampiran 6. Uji Parameter Standar Serbuk Bawang Putih (Allium sativum L.)
1. Kadar Abu
Bobot cawan = 25,4719 gram Bobot sampel = 2,00 gram Bobot akhir = 25,5759 gram
% kadar abu =
=
= 5,175% 2. Kadar Air Bobot sampel = 10 gram Jumlah aquades awal = 2,0 mL Jumlah aquades akhir = 2,7 mL % kadar air = = = 7% 3. Susut Pengeringan Bobot botol = 19,0074 gram Bobot sampel = 1,0034 gram Bobot akhir = 19,9108 gram = = = 90,03% Susut pengeringan= 100-90,03 = 9,97%
Lampiran 7. Gambar Alat dan Bahan Penelitian Gambar 11.Freeze Dryer Gambar 12. Tanur (Thermo Scientific) Gambar 13. Bawang Putih (Allium sativum
L.) Gambar 14.Blender (Panasonic) Gambar 15.Freezer (Sanyo) Gambar 16. Oven (Memmert) Gambar 17. Botol
Timbang Gambar 18. Kandang
Tikus.
Gambar 19.
Timbangan Analitik
Gambar 20. Kurs Silikat Gambar 21. Tabung
Gambar 23. Sentrifuge (Eppendorf) Gambar 24. Vortex (Wiggenhouser) Gambar 25. Alat Bedah Gambar 26. ELISA
Reader Gambar 27. Optik (Motic) Mikroskop Gambar 28. Tempat
Pembiusan
Gambar 29.Stirrer
Homogenizer Gambar 30. Kit ELISA
(Sunlong) Gambar 31. Cawan Penguap Gambar 32. Lumpang dan Alu Gambar 33.Phosphate Buffer Saline Gambar 34. Alat Destilasi Azeotrop
Lampiran 8. Kegiatan Penelitian Gambar 35. Penimbangan Umbi Bawang Putih Gambar 36. Penghalusan Umbi Bawang Putih Gambar 37. Bubur (puree) Bawang Putih
Gambar 38. Proses
Freeze Dry
Gambar 39. Serbuk Bawang Putih
Gambar 40. Pembuatan Suspensi Bawang Putih
Gambar 41. Suspensi
Serbuk Bawang Putih Gambar 42. Tikus (Rattus norvegicus)
Gambar 43.
Penyondean Hewan Uji
Gambar 44. Pembiusan Hewan Uji
Gambar 45.
Pembedahan Hewan Uji Gambar 46. Penimbangan Bobot
Gambar 47.
Homogenasi Jaringan Testis
Gambar 48. Homogenat
Jaringan Gambar 49.Uji ELISA Tahapan
Gambar50. Sampel ELISA Gambar 51. Pembacaan Absorbansi Sampel Menggunakan ELISA Reader Gambar 52. Pengenceran Spermatozoa pada Kauda Epididimis Menggunakan NaCl Gambar 53. Penotolan Spermatozoa pada Kaca
Neubauer Gambar 54. Pengamatan Motilitas Spermatozoa Menggunakan Mikroskop Gambar 55. Penampakan Spermatozoa di Bawah Mikroskop
Lampiran 9. Hasil Penapisan Fitokimia
No. Penapisan Serbuk Hasil Penapisan Keterangan 1. Alkaloid
Gambar 56. Uji Alkaloid
Meyer (+) : menghasilkan endapan putih
Bouchard (+) : warna coklat-hitam Dragendorf (+) : warna jingga-merah 2. Flavonoid Gambar 57. Uji Flavonoid Flavonoid (-) : Penambahan NaOH tidak memberikan perubahan warna kuning yang intens
3. Saponin
Gambar 58. Uji Saponin
Saponin (+) : terbentuk busa/buih yang stabil
4. Steroid
Gambar 59. Uji Steroid
Steroid (+) : terbentuk warna merah setelah pengocokan
5. Tannin
Gambar 60. Uji Tannin
Tannin (-) : penambahan FeCl3 tidak memberikan perubahan warna menjadi ungu, biru, atau hijau.
6. Terpenoid
Gambar 61. Uji Terpenoid
Terpenoid (+) : terbentuk warna jingga pada interfase
Lampiran 10. Kurva Kalibrasi ELISA Kaspase-3
Konsentrasi (x)
Absorbansi Standar
Standar 1 Standar 2 Rata-rata 1/absorbansi
0 0.105 0.045 0.075 13.334
0.6 0.133 0.196 0.164 6.079
2.4 0.512 0.542 0.527 1.897
3.6 1.043 0.517 0.78 1.282
5.4 1.145 1.145 1.145 0.873
Berdasarkan hasil kurva kalibrasi dengan memplotkan konsentrasi sebagai (x) dan absorbansi sebagai (y) maka didapatkan persamaan regresi yaitu:
y = 0.2004x + 0.0574
Dengan menggunakan nilai rerata absorbansi pada masing-masing sampel yang diuji, maka konsentrasi sampel daat ditentukan sesuai dengan persamaan regresi pada kurva standar.
y = 0.2004x + 0.0574 R² = 0.9992 0 0.5 1 1.5 0 2 4 6 Abs o rba ns i Konsentrasi ng/mL
Kurva Kalibrasi
Absorbansi Linear (Absorbansi)Lampiran 11. Analisis Data Konsentrasi Kaspase-3
1. Uji Normalitas dan Homogenitas Terhadap Konsentrasi Kaspase 3
Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov
Tujuan : Untuk melihat data konsentrasi kaspase-3 tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data konsentrasi kaspase-3 terdistribusi normal Ha : Data konsentrasi kaspase-3 tidak terdistribusi normal
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Tests of Normality Kelompok Kolmogorov-Smirnov a Statistic df Sig. Konsentrasi Kaspase-3 kontrol .278 5 .200* dosis 50 .243 5 .200* dosis 100 .241 5 .200* dosis 150 .246 5 .200*
Keputusan : Uji normalitas konsentrasi kaspase 3 seluruh kelompok uji terdistribusi normal.
Uji Homogenitas Levene
Tujuan : Untuk melihat data konsentrasi kaspase-3 tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data konsentrasi kaspase-3 homogen Ha : Data konsentrasi kaspase-3 tidak homogen Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Test of Homogeneity of Variances Konsentrasi Kaspase-3
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.450 3 16 .265
Keputusan : Uji Homogenitas konsentrasi kaspase 3 seluruh kelompok homogen (p≥0,05) sehingga bisa dilanjutkan dengan uji ANOVA 2. Uji Analysis of Varian (ANOVA)
Tujuan : Untuk melihat data konsentrasi kaspase-3 tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data konsentrasi kaspase-3 tidak berbeda secara signifikan
Ha : Data konsentrasi kaspase-3 berbeda secara signifikan
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
ANOVA Konsentrasi Kaspase-3
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups .069 3 .023 .341 .796
Within Groups 1.076 16 .067
Total 1.145 19
Keputusan : konsentrasi kaspase-3 tidak berbeda secara signifikan, sehingga tidak perlu dilakukan pengujian lanjutan.
Lampiran 12. Analisis Data Bobot Testis
1. Uji Normalitas dan Homogenitas Terhadap Motilitas Sperma
Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov
Tujuan : Untuk melihat data bobot testis tikus homogen atau tidak Hipotesis : Ho : Data bobot testis terdistribusi normal
Ha : Data bobot testis tidak terdistribusi normal Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Tests of Normality Kelompok Kolmogorov-Smirnov a Statistic df Sig. Bobot Testis Kontrol .211 5 .200* dosis 50 .296 5 .175 dosis 100 .396 5 .010 dosis 150 .190 5 .200*
Keterangan: Keputusan : Uji normalitas bobot testis seluruh kelompok uji terdistribusi normal.
Uji Homogenitas Levene
Tujuan : Untuk melihat data Motilitas Spermatozoa tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data Motilitas Spermatozoa homogen Ha : Data Motilitas Spermatozoa tidak homogen Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Test of Homogeneity of Variances Bobot Testis
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.104 3 16 .956
Keputusan : Uji Homogenitas bobot testis seluruh kelompok homogen (p≥0,05) sehingga bisa dilanjutkan dengan uji ANOVA
2. Uji Analysis of Varian (ANOVA)
Tujuan : Untuk melihat data motilitas spermatozoa tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data motilitas spermatozoa tidak berbeda secara signifikan
Ha : Data motilitas spermatozoa berbeda secara signifikan
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
ANOVA Bobot Testis
Sum of Squares
df Mean Square F Sig.
Between Groups .075 3 .025 2.207 .127
Within Groups .182 16 .011
Total .257 19
Keputusan : Bobot testis tidak berbeda secara signifikan, sehingga tidak perlu dilakukan pengujian lanjutan.
Lampiran 13. Analisis Data Motilitas Spermatozoa
1. Uji Normalitas dan Homogenitas Terhadap Motilitas Sperma
Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov
Tujuan : Untuk melihat data Motilitas Sperma tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data Motilitas Spermatozoa terdistribusi normal Ha : Data Motilitas Spermatozoa tidak terdistribusi normal
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Keputusan : Uji normalitas motilitas spermatozoa seluruh kelompok uji terdistribusi normal.
Uji Homogenitas Levene
Tujuan : Untuk melihat data Motilitas Spermatozoa tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data Motilitas Spermatozoa homogen Ha : Data Motilitas Spermatozoa tidak homogen Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Tests of Normality Kelompok Kolmogorov-Smirnov a Statistic df Sig. Motilitas Sperma Kontrol .188 5 .200* dosis 50 .284 5 .200* dosis 100 .209 5 .200* dosis 150 .209 5 .200*
Test of Homogeneity of Variances Motilitas Sperma
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.178 3 16 .910
2. Uji Analysis of Varian (ANOVA)
Tujuan : Untuk melihat data motilitas spermatozoa tikus homogen atau tidak
Hipotesis : Ho : Data motilitas spermatozoa tidak berbeda secara signifikan
Ha : Data motilitas spermatozoa berbeda secara signifikan
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
ANOVA Motilitas Spermatozoa
Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups 118.274 3 39.425 7.134 .003
Within Groups 88.421 16 5.526
Total 206.695 19
Keputusan: motilitas spermatozoa berbeda secara bermakna, sehingga pengujian dilanjutkan dengan uji BNT/LSD
3. Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) terhadap motilitas spermatozoa kelompok hewan uji.
Tujuan : Untuk menentukan data motilitas spermatozoa kelompok mana yang memberikan nilai yang berbeda secara
signifikan dengan data motilitas spermatozoa kelompok lainnya.
Hipotesis : Ho : Data motilitas spermatozoa tidak berbeda secara signifikan
Ha : Data motilitas spermatozoa berbeda secara signifikan
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Multiple Comparisons Dependent Variable: Motilitas Sperma
LSD
(I) kelompok (J) kelompok Mean
Difference (I-J)
Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Kontrol dosis 50 -1.816677 1.486783 .239 -4.96852 1.33516 dosis 100 1.910119 1.486783 .217 -1.24172 5.06196 dosis 150 4.751155* 1.486783 .006 1.59932 7.90300 dosis 50 kontrol 1.816677 1.486783 .239 -1.33516 4.96852 dosis 100 3.726796* 1.486783 .023 .57496 6.87864 dosis 150 6.567832* 1.486783 .000 3.41599 9.71967 dosis 100 kontrol -1.910119 1.486783 .217 -5.06196 1.24172 dosis 50 -3.726796* 1.486783 .023 -6.87864 -.57496 dosis 150 2.841036 1.486783 .074 -.31080 5.99288 dosis 150 kontrol -4.751155* 1.486783 .006 -7.90300 -1.59932 dosis 50 -6.567832* 1.486783 .000 -9.71967 -3.41599 dosis 100 -2.841036 1.486783 .074 -5.99288 .31080
Keterangan: dosis 150 mg/kgBB berbeda secara signifikan dengan kelompok control dan kelompok dosis 50 mg/kgBB, namun tidak berbeda secara signifikan dengan kelompok dosis 100 mg/kgBB.
Lampiran 14. Uji Korelasi antar Variabel
Uji Korelasi Pearson
Tujuan : Untuk menunjukkan hubungan antara variabel konsentrasi kaspase-3 dengan variable lain
Hipotesis : Ho : Tidak terdapat hubungan antara variabel konsentrasi kaspase-3 dengan variable lain
Ha : terdapat hubungan antara variabel konsentrasi kaspase-3 dengan variable lain
Pengambilan Keputusan:
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 maka Ho ditolak.
Correlation Motilitas Sperma Bobot Testis Konsentrasi Kaspase-3 Motilitas Sperma Pearson Correlation 1 -.119 .007 Sig. (2-tailed) .618 .977 N 20 20 20 Bobot Testis Pearson Correlation -.119 1 -.262 Sig. (2-tailed) .618 .265 N 20 20 20 Konsentrasi Kaspase-3 Pearson Correlation .007 -.262 1 Sig. (2-tailed) .977 .265 N 20 20 20
Keterangan: Tidak terdapat hubungan yang signifikan antara variabel konsentrasi kaspase 3 dengan variable lain.