BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
B. Saran
1. Perlu dilakukan pengembangan metode ekstraksi sampel yang dapat menjamin pemisahan nikotin dan turunanya dapat terpisah dengan baik
2. Perlu dilakukan validasi metode KCKT fase terbalik pada penetapan kadar nikotin rokok dalam ekstrak etanolik menggunakan kondisi optimal
3. Perlu dilakukan penetapan kadar nikotin rokok dalam ekstrak etanolik menggunakan metode KCKT fase terbalik menggunakan metode yang sudah teroptimasi dan tervalidasi.
76
DAFTAR PUSTAKA
Ahuja, S. dan Rasmussen, H., 2007, HPLC Method Developments for Pharmaceutical, Elsevier Academic Press, Italy, pp.14,15,472.
Alali, F., dan Massadeh, A., 2002, Determination of Nicotine and General
Toxicity of Jordan’s Market Cigaretts, Acta Chim, Slov, pp.50, 251-258.
Anonima, 2012, Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan Serat, Tembakau, http://balittas.litbang.deptan.go.id/ind/index.php?option=com_content&v iew=category&id=84&Itemid=78, diakses tanggal 30 April 2012
Anonimb, 2012, How nicotine works, maxkirsten, http://www.stop-smoking-in-1- hour.co.uk/Whatmakesnicotineaddictive.html, diakses tanggal 17 April 2012.
Anonimc, 2012, Department of Chemistry, Internal Standards, http://www.chemistry.adelaide.edu.au/external/soc-rel/content/int-
std.htm, diakses tanggal 24 April 2012.
Anonimd, 2012, Phenomenex, Appllication Nicotine and Related Compounds, http://www.phenomenex.com/Application/Detail/10901, diakses tanggal 30 Desember 2012.
Bao,Z., He,. X.Y., Ding., X., Prabhu, S., Hong, J.Y., 2005, Drug Metabolism and Disposition, Metabolism of Nicotine and Cotinine By Human Cytochrome P450 2A13, Vol.33, No.2, The American Society for Pharmacology and Experimental Therapeutics, America, pp. 258-261. Benowitz, N.L., Hukkanen,J., Jacob, P.Y., 2009, Nicotine Chemistry, Metabolism,
Kinetics and Biomarkers, Springer, Verlag Berlin Heidelberg, pp.30-32. Cairns, D., 2004, Intisari Kimia Farmasi, edisi 2, Penerbit Buku Kedokteran
EGC, Jakarta, pp.10.
Center for Drug Evaluation and Research, 1994, Reviewer Guidance Validation of Chromatographic Methods, Food and Drug Administration, Rockville, pp. 25.
Chan, C.C., Lam, H., Lee., Y.C., Zhang, X.M., 2004, Analytical Method Validation and Instrument Performance Verification, A John Wiley & Sons, Inc., New York, pp. 13-14, 125.
Demas, in process, Validasi Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Standar Internal Asetanilida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995, Farmakope Indonesia, edisi 4, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 7,1002,1009- 1011,1066
Domino,E.F., 1999, Pharmacological Significance of Nicotine, in Gorrod, J.W., and Jacob,P. Analytical Determination of Nicotine and Their Compound and Their Metabolites, Chaper 1, Elsevier, Italy, pp.2-4, 7, 75-76, 362, 499.
Ettre, L.S., 1993, International UNION of Pure and Apllied Chemisctry, Nomenclature for chromatography (IUPAC Recommendations 1993), vol.65, no.4, Department of Chemical Engineering Yale University, USA, pp.843.
Gandjar, I.G. dan Rohman,A., 2010, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, pp. 222, 224-225, 230-234,254-255, 326-327, 333-340, 379- 390, 393-394,460,466-467.
Geiss, O. dan Kotzias, D., 2007, European Commission, Tobacco, Cigarettes and Cigarette Smoke, An Overview, Institue for Health and Consumer Protection, Italy, pp.10,12.
Haborne, A.J., 1998, Phytochemical Methods A Guide to Modern Technicques of Plant Analysis, Thomson Science, Weinheim, Germany, p.15.
Harvey,D., 2000, Modern Analytical Chemistry, McGraw-Hill Companies, United States of America, pp. 370,371, 579-586,584.
Johnson, E.L., Stevenson,R., 1978, Basic Liquid Chromatography, diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata, Penerbit ITB, Bandung, pp. 22-24, 99. Kealey,D., Haines,P.J., 2005, Analytical Chemistry, BIOS Scientific Publisher
Limited, United Kingdom, pp. 191.
Kusuma, D.A., Sudarminto,S.Y., Siti,N.W., 2012, Studi Kadar Nikotin dan Tar Sembilan Merk Rokok Kretek Filter yang Beredar di Wilayah, Kabupaten Nganjuk, J.Tek.Pert, vol.5, No.3, pp. 151-155.
Lennen, A.G.M., 2010, Practical Biochemistry for Medical Student, Rapid analytical techniques for diagnosing and managing diabetes:Theory, http://www.liv.ac.uk/~agmclen/Medpracs/practical_4/theory_4.html, diakses tanggal 16 Februari 2013.
Ma’arif, A.S., 2012, Bahaya Rokok Terhadap Kesehatan, Rumah Sakit Paru Dr.H.A.Rotinsulu Bandung, http://www.rotinsuluhospital.org/, diakses tanggal 17 April 2012.
Massadeh, A.M., Gharaibeh, A.A., Omari K.W., 2009, Journal of Chromatographic Science, A Single-Step Extraction Method for the Determination of Nicotine and Cotinine in Jordanian Smokers’ Blood and Urine Samples by RP-HPLC and GC-MS, Vol. 47, pp. 170-178. Meyer, V. R., 2004, Practical High-Performance Liquid Chromatography, 4th
edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, United States Of America, pp. 76-77.
Miller, J.M. dan Crowther, J.B., 2000, Analytical Chemistry In a GMP Environment – A Practical Guide, John Wiley & Sons, Inc., New York, United States Of America, pp. 196-197,205,389.
Moffat, C., Osselton, M.D., Widdop, B., 2011, Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons, 4th edition, Pharmaceutical Press, London, UK, pp. 816-817, 1772-1773.
Mulja, M. dan Suharman, 1995, Analisis Instrumental, Universitas Airlangga, Surabaya, pp. 26.
Nakajima, M., Yamamoto, T., Kuroiwa, Y., and Yokoi, T., 2000, Improved Highly Sensitive Method for Determination of Nicotine and Cotinine in Human Plasma by High Performance Liquid Chromatography, Journal of Chromatography B, 742 (2000), pp. 211-215.
Partodiharjo, S., 2010, Kenali Narkoba dan Musuhi Penyalahgunaannya, Penerbit Erlangga, Jakarta, pp. 57-62.
Presiden Republik Indonesia, 2012, Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 109 tahun 2012 Tentang Pengamanan Bahan Yang Mengandung Zat Adiktif Berupa Produk Tembakau Bagi Kesehatan, Pemerintah Republik Indonesia, Jakarta.
Presiden Republik Indonesia, 2003, Peraturan Pemerintahan Republik Indonesia Nomor 19 tahun 2003 Tentang Pengamanan Rokok Bagi Kesehatan, Pemerintah Republik Indonesia, Jakarta.
Putri, A.E.S., 2011, Optimasi Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) Fase Terbalik Pada Penetapan Kadar Nikotin Dalam Ekstrak Etanolik Daun Tembakau, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Sastrohamidjojo, 2001, Dasar-Dasar Spektroskopi, Cetakan II, Penerbit Liberty, Yogyakarta, pp. 22-23.
Schung,K. Dan Taylor,T., 2012, The Essential CHROMacademy Guide, Mobile Phase Optimization Strategies for Reversed Phase HPLC, LCGC, North America, pp. 35.
Snyder, L.R., Kirkland, J.J., Glajch, J.L., 1997, Practical HPLC Method Development, 2nd edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, pp 25- 26.
Snyder, L.R., Kirkland, J.J., Dolan, J.W., 2010, Introduction of Modern Liquid Chromatography, 3rd edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, pp. Xl. 25, 28, 33, 40-42, 51-52, 71, 109,151-152,316,327,331.
Smith, J.H., 2002, Chromatographic Properties of Silica-Based Monolithic HPLC Columns, Dissertation, 5
Stratton, K., 2001, Clearing The Smoke : Assessing The Science Base For Tobacco Harm Reduction, National Academy of Sciences, United States of America, pp.27.
Skoog, D.A., West, D.M., Holler, F.J., 1994, Analytical Chemistry, Sixth edition, Saunders College Publishing, USA, pp. 383.
Tjitrosoepomo,G., 1994, Taksonomi Tumbuhan Obat-Obatan, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, pp. 341-342.
Tuomi, T., Johnson, T., dan Reijula, K., 1999, Analysis of Nicotine, 3- Hydroxycotinine, Cotinine and Caffeine in Urine of Passive Smokers by HPLC-Tandem Mass Spectrometry, Clinical Chemistry, American Association for Clinical Chemistry.
Yahya, A.F., 2010, Menaklukkan Pembunuh No. 1: Mencegah dan Mengatasi Penyakit Jantung Koroner Secara Tepat dan Cepat, Penerbit Qanita, Bandung, pp. 45.
LAMPIRAN 3. Perhitungan polaritas fase gerak yang dioptimasi
Diketahui data berikut :
Pelarut/Solvent Polarity Index Metanol 5,1
Air 10,2
Perhitungan polarity index :
1. Fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% = 50:50 Indeks polaritas = � , + � , = , + , = ,
2. Fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% = 60:40 Indeks polaritas = � , + � , = , + , = ,
3. Fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% = 70:30 Indeks polaritas = � , + � , = , + , = ,
LAMPIRAN 4. Kromatogram hasil optimasi fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% (50:50)
1. Kecepatan 0,5 mL/min
2. Kecepatan 0,8 mL/min
3. Kecepatan 1,0 mL/min
LAMPIRAN 5. Kromatogram hasil optimasi fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% (60:40)
1. Kecepatan 0,5 mL/min
2. Kecepatan 0,8 mL/min
3. Kecepatan 1,0 mL/min
LAMPIRAN 6. Kromatogram hasil optimasi fase gerak metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% (70:30)
1. Kecepatan 0,5 mL/min
2. Kecepatan 0,8 mL/min
3. Kecepatan 1,0 mL/min
LAMPIRAN 7. Contoh kromatogram sampel dengan fase gerak yang telah teroptimasi (metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% (70:30))
LAMPIRAN 8. Contoh Kromatogram seri baku dengan fase gerak yang telah teroptimasi (metanol : ammonium asetat + TEA 0,1% (70:30))
LAMPIRAN 10. pH Fase Gerak
Komposisi Perbandingan pH yang didapat Metanol : ammonium asetat 10 mM + TEA 0,1% 50:50 7 60:40 7 70:30 7
LAMPIRAN 11. Perhitungan nilai koefisien distribusi nikotin dan asetanilida
Digunakan data injeksi baku campuran nikotin 20 µg/mL dan asetanilida 20 µg/mL pada fase gerak yang telah teroptimasi, yakni metanol : ammonium asetat 10 mM + TEA 0,1% (70:30).
Senyawa Retention time (menit) Asetanilida 3,645
Nikotin 4,638
Diketahui spesifikasi kolom :
SHIM PACK CLC-C8 fully encapped residual silanol, diameter internal 4,6 mm, panjang kolom 250 mm, ukuran diameter partikel 5 µm, specific surface area 300 (m2/g), carbon content 10,5%, pore volume 1 mL/g, pore diameter 10 nm dan binding mode monomeric,
= � − � = � − � , / � = , � �= = , � � , � = , = , √ �√ � = , . √ . , . √ µ = , µ Asetanilida �′= − = , − , , = , = �′ � = , , � − , = , Nikotin �′= − = , − , , = , = �′ � = , , � − , = ,
LAMPIRAN 12. Contoh Penyiapan Fase Gerak
Pada penelitian ini menggunakan fase gerak metanol : ammonium asetat 10 mM + TEA 0,1% dengan perbandingan 50:50, 60:40 dan 70:30.
Penyiapan ammonium asetat 10 mM dan TEA3 0,1%
Dibutuhkan 10 mM ammonium asetat (BM = 77,08), dengan demikian dibutuhkan penimbangan sebanyak 0,7708 gram untuk 1000 mL ammonium asetat 10 mM. Ammonium yang ditimbang seksama lebih kurang 10% dari 0,7708 gram, sehingga didapatkan range penimbangan yang diijinkan ialah 0,69372-0,84788 g.
= � �
� = � � = � − � , � = , � �
Dibutuhkan TEA 0,1%v/
v (0,1 mL dalam 100 mL), bila dibuat 1000 mL ammonium asetat 10 mM, maka diambil sebanyak 1,0 mL TEA menggunakan pipet gondok.
Penimbangan ammonium asetat (BM = 77,08) Berat wadah kosong = 14,9945 g Berat wadah + isi = 15,7789 g Berat wadah + sisa = 14,9974 g -
Berat isi = 0,7815 g
= � � = , , �� ≈ , =
Hasil penimbangan ammonium asetat yang telah ditimbang dilarutkan dalam aquabidest dan dimasukan ke labu takar 1000,0 mL, tambahkan TEA 1,0 mL ke dalam labu dan add hingga tanda.
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi berjudul “Optimasi Komposisi dan Kecepatan Alir Sistem Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) Fase Terbalik Pada Penetapan
Kadar Nikotin Dalam Rokok “Merek X”
Menggunakan Standar Internal Asetanilida” memiliki nama lengkap Eric Antonius. Penulis lahir di Pontianak tanggal 26 April 1991 sebagai anak pertama dari dua bersaudara, dari pasangan Tio Su Cheng dan Herlina. Pendidikan formal yang pernah ditempuh penulis adalah menyelesaikan pendidikan di SD Suster Pontianak (1997-2003), SMP Suster Pontianak (2003-2006), SMA Santo Petrus Pontianak (2006-2009). Penulis melanjutkan pendidikannya di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2009. Selama menumpuh pendidikan di Fakultas Farmasi Universita Sanata Dharma penulis terlibat dalam berbagai kegiatan dan organisasi, antara lain Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas (BEMF) Farmasi sebagai koordinator Divisi Jurnalistik tahun 2010-2011 dan sebagai wakil gubernur bidang internal tahun 2011-2012. Selain itu penulis pernah menjadi Panitia Pharmacy Competition Fakultas Farmasi USD sebagai Steering Commitee (2010), Panitia Pharmacy Performace sebagai seksi Publikasi, Dekorasi, dan Dokumentasi (2009), dan Tim Majalah Pharmaholic sebagai Chief Editor (2011). Dibidang akademik, penulis pernah menjadi asisten dosen Praktikum Kimia Dasar (2010), Praktikum Kimia Organik (2011 dan 2012), Praktikum Farmasi Fisika (2012), Praktikum Bentuk Sediaan Farmasi (2012), Praktikum Formulasi Teknologi Sediaan Solid A (2012), Praktikum Analisis Sediaan Obat Tradisional (2012), Praktikum Kimia Analisis (2012), dan Praktikum Spektroskopi (2011).
