7.1. Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan dapat disimpulkan bahwa :
1. Pemberian krim ekstrak Jagung Ungu 50 % secara topikal menghambat peningkatan kadar MMP-1 jaringan dermis kulit tikus Wistar yang dipapar dengan sinar UV-B.
2. Pemberian krim ekstrak Jagung Ungu 50 % secara topikal menghambat penurunan jumlah kolagen jaringan dermis kulit tikus Wistar yang dipapar dengan sinar UV-B.
7.2. Saran
Sebagai saran dalam penelitian ini adalah:
Perlu dilakukan uji klinik terhadap khasiat ekstrak jagung ungu pada manusia dalam mencegah dan memperbaiki tanda-tanda penuaan kulit dini akibat paparan sinar ultra violet.
DAFTAR PUSTAKA
DAFTAR PUSTAKA
Abdel-Aal ,Jaclyn Shipp and El-Sayed M 2010 Food Applications and Physiological Effects of Anthocyanins as Functional Food Ingredients , The Open Food Science Journal, 2010, 4, 7-22
Astadi, I.R., M. Astuti, U. Santoso and P.S. Nugraheni. 2009. In vitro antioxidant activity of
anthocyanins of black soybean seed coat in human low density lipoprotein (LDL). Food
Chem., 122: 659-663.
Bartke, A. 2005. Role of the growth hormone/insulin-like growth factor system in mammalian aging. Endocrinology .10: 2-12.
Baskoro, A., Konthen, P.G. 2008. Basic Immunology of Aging Process. Naskah Lengkap pada 5th Bali Endocrine Update 2nd Bali Aging and Geriatric Update Symposium. Bali 11-13 April 2008.
Baumann, L. 2005. Cosmetic and Skin Care in Dermatology, in : Fitzpatrick T.B. et al , editors. Dermatology in General Medicine, Mc graw-Hill Book co. p. 2363-2367.
Baumann, L. 2008. Cosmetics and Skin Care in Dermatology. In: Wolff, K., Goldsmith, L.A, Katz, S.L., Gilchrest, B.A., Paller, A.S., Leffell, D.J., editors. Fitzpatrick’s Dermatology in General Medicine. 7th. Ed. New York: McGrawHill. p.2357-63
Baumann, L & Saghari, S 2009, Photoaging. in: Baumann L, Saghari, S, Weisberg (eds). Cosmetic dermatology principles and practice. New York: McGraw-Hill, pp. 2-19.
Berneburg, M., Plettenberg, H., Krutmann, J. 2000. Photoaging of Human Skin. Photodermatology, Photoimunology, dan Photomedicine. 16: 239-244. Bhattacharyya, T. K., and Thomas, J. R. 2004. Histomorphologic Changes in
Aging Skin. Observation in the CBA Mouse Model. Archives of Facial Plastic Surgery. 6 (1): 21-5.
Boyce, S.T., Supp, A.P., Swope, V.B., and Warden, G.D. 2002. Vitamin C Regulates Keratinocyte Viability, Epidermal Barrier, and Basement Membrane In Vitro, and Reduces Wound Contraction after Grafting of Cultured Skin Substitutes. J Invest Dermatol. 118: 565-72.
Campbell, D. 1963. Experimental and Quasi-Experimental Design for Research. Boston: Houghton Miffin Company. p. 13-22.
Cho,T.H., Lee, J.W., Lee, M.H. 2008. Evaluating the Cytotoxic Doses of Narrowband and Broadband UV-B in Human Keratinocytes, Melanocytes, and Fibroblast. Photodermatology, Photoimmunology dan Photomedicine. Vol 24. P.110-114.
Choi, C.P., Kim, Y.I., Lee, J.W., Lee, M.H. 2007. The Effect of Narrowband Ultraviolet B on the Expressions of Matrix Metalloproteinase-1,Transforming Growth Factor- β1 and Type 1 Collagen in Human Skin Fibroblast. Experimental Dermatology, Original Article. Department of Dermatology, Kyunghee University, Seoul, Korea.
Chung, J.H., Cho, S., and Kang, S. 2004. Why Does the Skin Age? Intrinsic Aging , Photoaging and Their Pathophysiology. in: Rigel, D.S., Weiss, R.A., Lim, H.W., Dover, J.S. editors. Photoaging. New York: Marcel Dekker Inc. p. 1-23.
Chung, J.H., Seo, J.Y., Choi, H.R., Lee, M.K., Youn, C.S., Rhie, G., Cho, K.H., Kim, K.H., Park, K.C., and Eun, H.C. 2001. Modulation of Skin Collagen Metabolism in aged and Photoaged Human Skin In Vivo. The Journal of Investigative Dermatology. vol 117 no 5: p. 1218-1224.
Cooper, R. 1997. Oxidant, antioxidant and Free Radicals, in Antioxidant, Woodland Health Series. p.1- 8
Cunningham W, Aging and Photoaging., Baran R ,Maibach HI Editor. Texbook of Cosmetic and Dermatology Edisi ke-3. Abingdon: Taylor & Francis Group, 2005: 445-54.
Dai, J., and Mumper, R.J. 2010. Plant Phenolics: Extraction, Analysis and Their Antioxidant and Anticancer Properties. Molecules. 15:7313-52.
Dianasari, R. 2013. Photochemoprotection Effect of Active Component of Purple Corn (Zea Mays L) on Rats’ Skin. Denpasar. (penelitian pendahuluan) Devasagayam ,TP., Tilak, JC., Boloor, KK., Sane, KS., Ghaskadbi, SS., Lele
,RD., Free radicals and antioxidants in human health: current status and future prospects. PubMed 2004
Droge, W. 2002. Free Radicals in the Physiological Controlof Cell Function. Physiol Rev.82: 47–95.
Eichler, O., Sies, H., Stahl, W. 2002. Divergent Optimum Level of Lycopene, β-Carotene and Lutein Protecting Against UV-B Irradiation in Human Fibroblast. Journal of Photochemistry and Photobiology. 75(5). 503-506
Fagot, D., Asselineau, D., and Bernerd, F. 2004. Matrix metalloproteinase-1 production observed after solarsimulated radiation exposure is assumed by dermal fibroblasts but involves a paracrine activation through epidermal keratinocytes. Photochem Photobiol. 79:499–505.
Fernandes, D. 2008. Evolution of Coemeceuticals and Their Application to Skin Disorders, including Aging and Blemishes. In: Walters, K.A., Roberts, M.S. Editor. Dermatologic, Cosmeceutic, and Cosmetic Development. New York: Informa. p. 51-5.
Fisher, G.J., Kang, S., Varani, J., Csorgo, Z.B., Wan, Y., Datta, S., Voorhees, J.J. 2001. Mechanism of Photoaging and Chronological Skin Aging. Arch Dermatol. Department of Dermatology, University of Michigan, Ann Arbor. Vol 138: p. 1462-1470.
Fisher, G.J., Quan, T., Purohit, T., Shao, Y., Cho, M.K., Varani, J., Kang, S., Voorhess, J.J. 2009. Collagen Fragmentation Promotes Oxidative Stress and Elevates Matrix Metalloproteinase-1 in Fibroblast in Aged Human Skin. The American Journal of Pathology, vol 174: p. 101-115.
Fisher, G.J., Voorhees, J.J., Kang, S., Quan, T., He, T. 2004. Solar UV Irradiation Reduces Collagen in Photoaged Human Skin by Blocking Transforming Growth Factor-β TypeII Receptor/Smad Signaling. American Journal of Pathology. vol 165: no 3. p. 741 -758.
Fourtanier, A., Moyal, D. 2004. Acute and Chronic effect of UV on skin, What Are They and How To Study Then. In: Rigel, D.S., Weiss, R.A., Lim, H.W., Dover, J.S. editors. Photoaging. New York: Marcel Dekker Inc. p. 15-31. Fowler, B. 2003. Functional and Biological Markers of Aging in Klatz, R. Anti
Aging Medical Therapeutic Vol 5. The A4M Publication.Chicago. p. 43. Furr, H.C., Clark, R.M. 1997. Intestinal Absorption and Tissue Distribution of
Carotenoid. Journal of Nutritional and Biocemistry, vol 8: p. 364-377. Fuhrman, B., Aviram, M. 2002. Polyphenols and Flavonoids Protect LDL against
Atherogenic Modifications. In: Canedas, E., Packer, L. Handbook of Antioksidants, 2nd edition New York : Marcel Dekker, Inc. p. 306-311 Ghosh, D., Konishi, T. 2007. Anthocyanin and Anthocyanin-rich extracts: role in
diabetes and eye function. Asia Pac J Clin Nutr 16(2): 200-208
Gilchrest, B.A., Yaar, M. 2000. Aging of Skin. In: Fitzpatrick T.B. et al , editors. Dermatology in General Medicine, Mc Graw-Hill Book Co 2, p. 1386-1387. Goldman, R., Klatz. 2003. The New Anti-Aging Revolution.Australasian
Helfrich, Y.R., Sachs, D. L., and Voorhees, J. J. 2008. The Biology of Skin Ageing. European Dermatology. 39-42.
Hui C, Bin Y, Xiaoping Y, Long Y, Chunye C, Mantian M, Wenhua L.2010 Anticancer activities of an anthocyanin-rich extract from black rice against breast cancer cells in vitro and in vivo. PubMed
Humbert, P.G., Haftek, M., Creidi, P., Lapiere, C., Nusgens, B., and Richard, A. 2003. Topical Ascorbic Acid on Photoaged Skin: Clinical, Topographycal and Ultrastructural Evaluation; Double Blind Study vs Placebo. Exp Dermatol. 12:237-44.
Ichihashi, M., Ando, H., Yoshida M., Niki Y., and Matsui, M. 2009. Photoaging of The Skin. J Anti-Aging Med. 6(6): 46-59.
Jawi, I Made and Budiasa Ketut 2009 .Water Extract of Purple Sweet Potato Tub Decrease
Total Cholesterol and Increase Total Antioxidant In Rabbit Blood. Denpasar Jones, Kenneth 2005. The Potential Health Benefits of Purple Corn. Herbal Gram,
65:46-49. American Botanical Council.
Junqueira, L.C., Carneiro, J., Kelley, R.O.1997. Histologi Dasar Kulit. Edisi 8. Penerbit Buku Kedokteran EGC. hal 357-369.
Kähkönen MPand Heinonen M. 2003 ,Antioxidant activity of anthocyanins and their aglycons, PubMed.
Kaminer, M.S. 1995. Photodamage: Magnitude of the Problem. in: Gilchrest, B.A., editor. Photodamage. Blackwell Science. p.3-9.
Karlsen Anette, Lars Retterstøl, Petter Laake, Ingvild Paur, Siv Kjølsrud-Bøhn, Leiv Sandvik,and Rune Blomhoff (2007) Anthocyanins Inhibit Nuclear Factor-kB ,Activation in Monocytes and Reduce Plasma Concentrations of Pro-Inflammatory Mediators in Healthy Adults , The Journal of Nutrition. Norway, vol. 137 no. 8 1951-1954
Katiyar, S.K. and Afaq, F., 2010. Polyphenols: Skin Photoprotection and Inhibition of Photocarcinogenesis. Mini Rev Med Chem. 11(14): 1200–15. Kim, Hyeon Ho., Shin, C.M., Park, Chi-Hyun., Kim, K.H., Cho, K.H., Eun, H.C.
Chung, Jin Ho. 2005. Eicosapentaenoic Acid Inhibits UV-Induced MMP-1 Expression in Human Dermal Fibroblast. Journal of Lipid Research, Vol 46: p. 1712-1719.
Kim, S.Y., Kim , S.J., Lee, J.Y., Kim W.G., Park,W.S., Sim Y.C., Lee, S.J. 2004. Protective Effects of Dietary Soy Isoflavones against UV-Induced Skin Aging in Hairless Mouse Model. Original Research Journal of the American College of Nutrition , vol 23: p.157-162.
Klatz, R. 2003. Acknowledgement in: Klatz, R. 2003 Anti Aging medical Therapeutics Vol 5..The A4M publication. Chicago. p. 3.
Konczak and Zhang 2004, anthocyanin rich extract-induced from WorldWideScience.org
Krutmann, J. and Glichrest, B.A. (2006) Photoaging of Skin. In: Glichrest, B.A. and Krutmann, J., Ed., Skin Aging, Springer, Heiderberg, 33-43.
Lee, Young-Rae, Noh, Eun-Mi, Jeong, E.Y., Yun, Eok-Kweon, Kim, J.H., Kwon, K.B., Kim, B.S., Lee, S.H., Park, C., Kim, Jong-Suk. 2009. Cordycepin Inhibits UV-B-Induced Matrix Metalloproteinase Expression by Suppressing the NFκB Pathway in Human Dermal Fibroblast. Experimental and Molecular Biomedicine, Vol 41, p.548-554.
Leiden JJ. Clinical features of aging skin. Br J Dermatol 2003; 43: 1-3.
Moon, Hee Jung, Lee Soon Ryen, Shim, S,N., Jeong, S.H., Stonik, V.A., Rasskavov, Valery A., Zvyagintseva, T., Lee, Y.H. 2008. Fucoidan inhibits UV-B-Induced MMP-1 Expression in Human Skin Fibroblast. Biol.Pharm.Bull.31(2). 284-289.
Moos, Varien., 2013. Anthocyanins from Purple corn .
http://cancer.vg/en/purple-corn-maize
Moyer, R. A., Hummer, K. E., Finn, C. E., Frei, B., and Wrolstad, R. E. (2002). Anthocyanins, phenolics, and antioxidant capacity in diverse small fruits: Vaccinium, Rubus, and Ribes. Journal of Agricultural and Food Chemistry 50, 519-525.
Nichols, J.A., and Katiyar, S.K. 2010. Skin Photoprotection by Natural Polyphenols: Anti-inflammatory, Antioxidant and DNA Repair Mechanisms. Arch Dermatol Res. 302(2):1-19.
Nakatani, N., Fukuda, H., Fuwa, H.. Major anthocyanin of Bolivian purple corn Zea mays. Agric Biol Chem. 1979;43(2):389-392.
Narayanan, D.L., Saladi, R.N., and Fox, J.L. 2010. Ultraviolet Radiation and Skin Cancer. International Journal of Dermatology. 49:978–86.
Obagi, Z.E. 2000. Skin Health Concepts, in Obagi Skin Health Restoration dan Rejuvenation. Springer. p.27-45
Padayatty, S.J., Katz, A., Yao, H.W., Eck, P., Kwon, O., Lee, J.H., Chen, S., Corpe, C., Dutta, A., Dutta, S.K., and Levine, M. 2003. Vitamin C as An Antioxidant: Evaluation of Its Role in Disease Prevention. J Am Coll Nutr. 22(1):18-35.
Paik, S.J. Experimental and Quasi-Experimental Research Designs. 2004. The
LSS Review. 3(2): 3-4.
Pangkahila,W. 2007. Anti Aging Medicine Memperlambat Penuaan Meningkatkan kualitas Hidup. Penerbit Buku Kompas. Jakarta, hal 10-1
Pascual S de – Teresa, c. Santos-Buelga, and JC Rivas-Gonzalo. LC-MS Analysis of Anthocyanins From Purple Corn Cob.Journal Science Food Agriculture 82:1003-1006 (2002)
Pham-Huy, L.A., He, H., Pham-Huy, C. 2008. Free Radicals, Antioxidant in Disease and Health. International Journal of Biomedical Science, Vol 4: p. 89-96.
Pinnel, R.S. 2003. Cutaneous Photodamage, Oxidative Stress, and Topical Antioxidant Protection, A Continuing Medical Education, American Academy of Dermatology. p. 1-19.
Pu Jing, M.S. 2006.,Presented in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree Doctor of Philosophy the Graduate School of The Ohio State University (Dissertation)
Quan, T., Qin, Z., Xia, W., Shao, Y., Voorhees, J. J., and Fisher, G. J. 2009. Matrix-degrading Metalloproteinases in Photoaging. J Investig Dermatol Symp Proc. 14(1):20–4.
Rabe, J.H., Mamelak, A.J., Mc Elgunn, P., Morison, W.L., Sauder, D.N. 2006. Photoaging : Mechanism and Repair, Continuing Medical Education, American Academy of Dermatology, Inc. p.1-19.
Sauermann, K., Jaspers, S., Koop, U., and Wenek, H. 2004. Topically Applied Vitamin C Increases The Density of Dermal Papillae in Aged Human Skin. BMC Dermatology. 4:13.
Seltzer, J.L., Eisen, A.Z. 2006. The Role of Extracellular Matrix Metalloproteinases in Conective Tissue Remodelling. In: Fitzpatrick T.B. et al , editors. Dermatology. Mc Graw-Hill Book co, p 200-209.
Smith, E.S. 2001. Demographics of Aging and Skin Disease, in Geriatric Dermatology part I. p. 63.
Spormann, TM., Albert, FW., Rath, T., Dietrich ,H., Will, F., Stockis,
JP., Eisenbrand, G., Janzowski, C., (2008) . Anthocyanin/polyphenolic-rich fruit juice reduces oxidative cell damage in an intervention study with patients on hemodialysis .Department of Chemistry, Division of Food Chemistry and Toxicology, University of Kaiserslautern, Erwin-Schroedinger-Strasse 52, 67663 Kaiserslautern, Germany.
Stahl, W., Heinrich, U., Wiseman, S., Eichler, O., Sies, H., and Tronnier, H. 2001. Dietary Tomato Paste Protects against Ultraviolet Light-Induced Erythema in Humans. J Nutr. 131:1449 – 51.
Sun-Young, K., Su-Jun, K., Jin-Young, L., Wan-Gi, K., Won-Seok, P., Young-Chul, S., and Sang-Jun, L. 2004. Protective Effects of Dietary Soy Isoflavones Against UV-Induced Skin-Aging in Hairless Mouse Model. Journal of American College of
Nutrition. 23(2):157-62.
Styles E.D and O.Ceska. Flavonoid pigments in genetic strains of maize. Phytochemistry 11: 3019–21 (1972).
Tinkler, J.H., Bohm, F., Scalch,W., Truscott, T.G. 1994. Dietary Carotenoid Protect Human Cells from Damage. Journal Photochemical Photobiology, Vol 26: p. 283-285.
Tjitrosoepomo, C., 1991. Taksonomi Tumbuhan. Gajah Mada Universy Press, Yogyakarta.
Tschachler, E., Morizot, F. 2006. Ethnic Differences in Skin Aging. In: Gilchrest, B.A., Krutmann, J. editors. Skin Aging. Springer. p. 23-31.
Wang ,LS., Stoner ,GD., (2008) .Anthocyanins And Their Role in Cancer Prevention. Department of Internal Medicine and Comprehensive Cancer Center, Ohio State University College of Medicine, Columbus, OH 43210, USA.
Wasitaatmadja, S.M. 2007. Anatomi dan Faal kulit. dalam: Djuanda, A., Hamzah, M., Aisah, S. editor. Ilmu Penyakit kulit dan Kelamin. Edisi 5. Balai Penerbit FKUI 2007. 7-8.
WHO Report . 2010. WHOSIS (WHO Statistical Information System). Available at: http://apps.who.int/whosis/database/core/core_select_proccess.cfm/
Accesed Januari 9, 2011
Winarsi, H. 2007. Antioksidan alami dan Radikal Bebas, Potensi dan aplikasinya dalam kesehatan. Kanisius.
Wlascheck, I. Tantcheva-Poor, L. Naderi, W. Ma, S. Alexander, Z. Razi-Wolf, J. Shuller, K. Scharffetter-Kochanek .Solar UV irradiation and dermal photoaging. Journal of Photochemistry and Photobiology B, 63 (2001), pp.
41–51
Wrolstad RE (2006) Anthocyanin Pigments—Bioactivity and Coloring Properties. Journal Food of Science. Volume 69, Issue 5, pg C419-425
Yaar, M. 2006. Clinical and Histological Features of Intrinsic versus Extrinsic Skin Agin., in : Gilchrest, B.A., Krutmann, J. editors. Skin Aging. Springer. p.10-21.
Yaar, M., Gilchrest B.A.2008. Biochemical and Moleculer Changes in Photoaged Skin. in: Gilchrest, B.A., editor. Photodamage. Blackwell Science.p. 168-179.
Yolanda ,Rosi Helfrich, MD., Dana, L., Sachs, MD., John J,Voorhees., MD. Overview of Skin Aging and Photoaging. Dermatology
Nursing. 2008;20(3):177-183.
Young, A.R. 2000. Acute and Chronic Effect of Ultraviolet Radiation on the Skin, in: Fitzpatrick, T.B., et al ,editors. Dermatology. Mc Graw-Hill Book Co, 1275-1281.
Yulianto, I. 2008. “The Changes of Fibroblast Cells due to UV-B Irradiation in Various Doses an In Vitro Experimental” (disertasi). Program Pasca Sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga Surabaya.
Zussman, J., Ahdout, J., and Kim, J. 2010. Vitamin and Photoaging: Do Scientific Data Support Their Use? J Am Acad Dermatol. 63: 507-25.
Lampiran 1: Prosedur Penanganan Hewan Coba
Percobaan di laboratorium yang menggunakan hewan coba sebagai subjek penelitian dalam penelitian ini adalah tikus Wistar, dimana harus diperhatikan beberapa prinsip dalam pemeliharaannya. Pemeliharaan yang baik diharapkan hasil yang sesuai dengan tujuan penelitian dan juga dipandang dari segi etika penelitian yang berkaitan dengan penggunaan hewan coba (ethical clearance).
Beberapa prinsip yang harus dipenuhi yaitu:
1. Pengawasan lingkungan
Prinsip yang paling penting terkait dengan lingkungan tempat pemeliharaan hewan coba adalah suatu lingkungan yang stabil dan sesuai dengan keperluan fisiologis jenis hewan coba. Suhu, kelembapan dan kecepatan pertukaran udara yang ekstrem harus dihindari. Pembuatan ventilasi yang baik mendukung kelancaran pertukaran udara, serta memungkinkan mengurangi penyebaran penyakit. Suhu ruangan yang optimum untuk pemeliharaan tikus Wistar berkisar antara 250 – 300 C.
2. Pengawasan kenyamanan
Kenyamanan hewan coba terkait dengan kondisi kandang tempat pemeliharaan. Bahan kandang terbuat dari plastik yang ditutup kawat. Prinsip yang paling penting dalam memilih bahan untuk kandang tikus Wistar adalah mudah dibersihkan, tahan lama, tahan digigit tikus Wistar. Kisaran ukuran kandang tikus Wistar yang umum dipakai
berukuran 35 cm X 20 cm X 10 cm. Ukuran kandang tersebut cukup untuk memelihara 10 – 15 ekor tikus Wistar dalam satu kandang. Dengan asumsi memberi ruang cukup untuk bergerak dengan bebas dalam berbagai posisi. Sistem kandang juga dilengkapi tempat makanan dan minuman yang mudah dijangkau oleh seluruh tikus Wistar.
3. Pengawasan nutrisi (makan dan minum)
Selama percobaan hewan coba diberikan makan dan minum dengan kualitas yang optimum pula. Apabila hal ini tidak terpenuhi tentunya juga akan berpengaruh terhadap kehidupan, kesehatan tikus Wistar dan bias terhadap hasil penelitian. Misalnya tikus Wistar memerlukan makanan dengan kandungan protein sekitar 20 %. Sehingga untuk mendapatkan makanan dengan komposisi tersebut biasanya dipakai makanan dalam bentuk pelet yang komposisinya sudah tertera dalam kemasannya. Air minum bersih dan bebas dari kontaminasi harus selalu tersedia untuk hewan coba. Alat-alat minum harus sering dicuci dan disterilkan misalnya dua minggu sekali.
4. Pengawasan kesehatan
Kandang hewan percobaan harus selalu dijaga kebersihannya, agar hewan berbiak dengan baik dan percobaan berhasil sesuai yang diharapkan. Kandang tikus Wistar harus dibersihkan sekurang-kurangnya seminggu sekali. Hal ini dilakukan untuk menghindari tumbuhnya jamur dan bakteri yang dapat mempengaruhi kesehatan
tikus Wistar. Biasanya kandang tikus Wistar yang terbuat dari bahan plastik dapat dibersihkan dengan mencuci kotak tersebut dan mengganti sekam yang dipakai sebagai alas kandang.
Secara lengkap penanganan tikus Wistar yang dipakai dalam penelitian ini dapat dijabarkan seperti di bawah ini:
1. Penanganan sebelum penelitian
Beberapa hal yang dilakukan sebelum pelaksanaan penelitian terhadap tikus Wistar antara lain:
a. Menyiapkan kandang pemeliharaan yang optimal dan nyaman bagi tikus Wistar; terkait dengan ukuran, keadaan kandang (ventilasi cukup, sekam padi untuk alas kandang) dan tempat makan/minum yang mudah dijangkau oleh seluruh tikus Wistar.
b. Melakukan aklimatisasi; menyesuaikan tikus Wistar terhadap kondisi lingkungan tempat percobaan. Aklimatisasi dilakukan pada kandang pemeliharaan selama 14 hari sebelum pelaksanaan penelitian.
c. Pemberian makan dan minum secara teratur.
d. Pemeriksaan kesehatan tikus Wistar; apabila ada tikus Wistar yang sakit langsung dikeluarkan dari kelompok.
2. Penanganan selama penelitian
Selama penelitian tikus Wistar harus selalu dalam keadaan terkontrol. Beberapa hal yang harus diperhatikan antara lain:
a. Kenyamanan dan kesehatan tikus Wistar; kandang tikus Wistar
selama penelitian dijaga kebersihannya dan sekam padi diganti seminggu sekali.
b. Pemberian makan dan minum yang teratur; diberi makanan dalam bentuk pelet secara ad libitum, tikus Wistar juga tidak boleh dalam keadaan tanpa air minum. Air minum harus tersedia dan air tidak terkontaminasi. Air minum diberikan dengan botol-botol plastik dan tikus Wistar dapat minum air dari botol tersebut melalui pipa plastik.
c. Penanganan pemberian krim ekstrak jagung ungu
Tikus Wistar dibagi menjadi 2 kelompok yaitu: kelompok 1 dan kelompok 2, masing-masing kelompok terdiri dari 18 tikus Wistar. Tikus dari semua kelompok dicukur bulu punggungnya, kemudian dioleskan bahan dasar krim (plasebo) pada kelompok 1 dan krim extrak jagung ungu ada kelompok 2, masing-masing krim dioleskan sebanyak 0,05mg/cm2 luas permukaan kulit tikus.
Paparan kronis UV-B diberikan terhadap kelompok 1dan 2. Paparan dilakukan sebanyak 3 kali seminggu yang dimulai dengan 50 mJ/cm2 pada minggu pertama, diikuti dengan 70 mJ/cm2 pada minggu kedua, dan 2 minggu berikutnya dengan 80 mJ/cm2
sehingga total sinar UV-B yang diterima oleh masing-masing kelompok tikus tersebut adalah 840 mJ/cm2 selama 4 minggu. Bahan dasar krim (plasebo) dan krim ekstrak jagung ungu 50 % diaplikasikan 2 kali sehari, yaitu 20 menit sebelum disinari (untuk memberikan waktu absorpsi bahan topikal ke dalam kulit) dan 4 jam setelah penyinaran (terbentuknya ROS dimulai 4 jam setelah paparan). Aplikasi bahan topikal tetap dilakukan pada hari tanpa penyinaran.
3. Penanganan setelah penelitian
Pada akhir penelitian tikus Wistar dieuthanasia melalui cara di suntik dengan Ketamin 20mg/25g Xylazin 20mg/25g i.m., bila belum mati di tambahkan letal barbiturat (pentotal) i.m. Bila sudah mati, tikus Wistar ditempatkan dalam ruang kaca yang tertutup dan transparan. Setelah itu kadaver tikus Wistar dikubur untuk menghindari bau yang tidak sedap atau efek negatif lainnya.
Lampiran 4 : Analisa Statistika
Uji Normalitas Data
Tests of Normality
Kelompok
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Kolagen Kontrol .099 18 .200* .980 18 .947
Perlakuan .148 18 .200* .972 18 .826
MMP_1 Kontrol .111 18 .200* .961 18 .624
Perlakuan .190 18 .084 .897 18 .051
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Uji t-inpendent Kolagen dan MMP-1 antar Kelompok Group Statistics
Kelompok N Mean Std. Deviation Std. Error Mean
Kolagen Kontrol 18 65.5421 5.60838 1.32191
Perlakuan 18 71.6972 5.11418 1.20542
MMP_1 Kontrol 18 3.2233 .47317 .11153
Perlakuan 18 1.8989 .86234 .20326
Independent Samples Test
Levene's Test for Equality
of Variances t-test for Equality of Means
F Sig. t df Sig. (2-tailed) Mean Differenc e Std. Error Differenc e 95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper Kolagen Equal variances
assumed .001 .981 -3.441 34 .002 -6.15511 1.78899 -9.79078 -2.51945
Equal variances not
assumed -3.441 33.715 .002 -6.15511 1.78899 -9.79191 -2.51831 MMP_1 Equal variances
assumed 3.748 .061 5.713 34 .000 1.32444 .23184 .85328 1.79561
Equal variances not
Lampiran 5 : Foto Aktifitas Penelitian
Jagung Ungu (sebelah kiri) dan varitas
jagung lainnya di supermarket
Jagung Ungu
Tikus Yang Sudah Dikelompokkan dan Telah Dicukur
Tikus Yang Sudah Dikelompokkan dan Telah Dicukur
Pengolesan Krim Ekstrak Jagung
Ungu
Alat Simulator UV-B Penyinaran Tikus Dengan Sinar UV-B