1. Transfusi Komponen Darah
Transfusi darah WB diberikan pada kasus yang terbatas. Terapi transfusi darah sekarang, terutama bergantung pada pemberian komponen darah yang dibutuhkan pasien. Tiga komponen darah utama yang digunakan dalam terapi transfusi adalah PRC, thrombocyte concentrate (TC) dan fresh frozen plasma (FFP). Produk-produk ini dapat diperoleh baik dengan mengolah WB (450-500 ml), yang merupakan teknik yang paling sederhana, atau dengan apheresis hanya komponen yang dibutuhkan diambil dari donor, sisanya dikembalikan ke donor. Prosedur standar produk persiapan darah dari donor darah adalah
seba-gai berikut: darah donor dalam kantong darah yang berisi antikoagulan CPD, seluruh darah disentrifugasi untuk memisahkan sel darah sesuai dengan ukuran dan kepadatan. Red blood cells mengendap, sementara plasma tetap di atas, white blood cells (WBC) dan trombosit membentuk BC pada lapisan antara plasma dan RBC. Akhirnya, ketiga komponen didistribusikan diantara kantong darah sterile interconnected blood bagsdengan menerapkan tekanan semi-otomatis untuk sentrifugasi kantong yang berisi WB. Untuk mencegah berbagai reaksi pasca transfusi dan anti human leucocyte antigen (HLA) alloimunisasi, digunakan darah WB dengan leucofiltration. Setiap komponen yang diperoleh dari seluruh darah memiliki kondisi penyimpanan yang optimal, yang me mungkinkan untuk mempertahankan aktifitas dan fungsi spesifik. Suhu adalah parameter penyimpanan yang sangat penting berhubungan dengan kelang sungan hidup dan kualitas produk yang ditujukan untuk transfusi.
Penyimpanan pada suhu kamar menunjukkan adanya proliferasi bakteri yang meningkatkan risiko penularan bakteri (Delobelet al., 2010).
2. Struktur Eritrosit
Membran eritrosit terdiri dari protein, fosfolipid, dan lapisan lipid bilayer. Membran eritrosit terdiri dari 3 lapisan yaitu lapisan luar hidrofilik yang terdiri dari glikolipid, glikoprotein dan protein, lapisan tengah hidrofobik yang terdiri dari protein, kolesterol, dan fosfolipid; dan lapisan dalam hidrofilik yang terdiri dari protein. Komposisi membran eritrosit terdiri dari 52% protein, 40% lipid, dan 8% karbohidrat. Protein yang terdapat pada bagian luar membran sampai permukaan sitoplasmik disebut membran protein integral. Protein yang terda- pat pada permukaan sitoplasmik tepat di bawah lapisan lipid bilayerdan mem- bentuk sitoskleton disebut membran protein perifer (Harmening et al., 2002; Lichtman et al., 2007).
Red blood cells normal adalah 6-8 m dengan diameter dan tebal 1,5-2,5 pM. Red blood cells
dewasa berbentuk seperti cakram bikonkaf dan tidak berinti atau organel lainnya. Membran RBC terdiri dari lipid bilayer yang mengandung fosfolipid, protein, kolesterol, glikoprotein dan glikolipid yang merupakan struktur yang sangat kompleks dan fleksibel, terdiri lebih dari 300 protein membran (Harmening, 2002). Komponen utama dari sitoskeleton adalah spektrin protein, yang membentuk kompleks dengan protein sitoskeletal lainnya, seperti ankyrin, actin
dan protein 4.1, yang memperkuat lipid bilayer. Kompleks spektrin ini bergantung pada fosforilasi ATP yang berfungsi dengan baik. Integritas dan stabilitas membran dikaitkan dengan penurunan ATP atau terjadi kerusakan oksidatif pada protein tersebut, yang menyebabkan hilangnya membran deformabilitas (Hoffman, 2013). Deformabilitas adalah salah satu karakteristik yang paling penting dari membran RBC. Tanpa kemampuan ini, itu tidak akan mampu melewati kapiler kecil dan celah sinusoidal limpa, dengan diameter 3-5 μ m
(Triulzi and Yazer, 2010). Membran memiliki distribusi asimetris fosfolipid dan kaya glikoprotein yang disebutglycophorins. Protein transmembran utama dari RBC adalah protein pertukaran channel anion, umumnya dikenal sebagai band 3, yang mengkatalisis pertukaran klorida bikarbonat, sisi yang mengikat protein dan enzim glikolitik sitoskeletal dan berperan dalam penghapusansenescentRBC (Harmening, 2002).
Air dan anion, seperti klorida (Cl-) dan bikarbonat (HCO3-), mengalir bebas melintasi membran RBC. Hal ini diduga terjadi melalui saluran pertukaran anion. Kation, namun, seperti natrium (Na+) dan kalium (K+), harus secara aktif diangkut melintasi membran. Sodium terutama ekstraseluler dan kalium intra- seluler. Red blood cells mempertahankan homeostasis air dengan mengen- dalikan transportasi kation ini dengan ATP dependent Na+/ K+ pompa. Konsentrasi kalsium (Ca2+) perlu dikontrol juga, karena konsentrasi intraseluler kelebihan dapat memiliki efek negatif pada RBC bentuk dan fleksibilitas. Hal ini dilakukan oleh ATP dependent Ca2+pompa. Bentuk dan volume RBC karena itu tergantung pada ATP, dengan penipisan yang mengakibatkan kaku dan dehidrasi RBC. Perubahan dalam protein atau lipid yang berhubungan dengan membran RBC dapat mengakibatkan penurunan deformabilitas dan permeabilitas dan akhirnya penyerapan dari RBC di limpa (Harmening
andMorrof, 2005).
a. Membran Protein Eritrosit
Membran protein eritrosit merupakan membran phospolipid bilayer asimetris yang terdiri 10 protein mayor dan 200 protein minor, dengan berat molekul antara 16.000 – 244.000 dalton. Membran protein tediri protein membran integral (glikoporin) dan protein membran perifer (spektrin).
Membran protein eritrosit disokong oleh komplek sitoskleletal spektrin-aktin (Harmening
et al., 2002; Lichtman et al., 2007; Telen, 2009; Buys et al., 2013). Adanya perubahan komposisi fosfolipid pada eritrosit akan berdam- pak pada bentuk eritrosit dan kemampuan berubah bentuk, sedangkan peru- bahan pada protein sitoskeletal eritrosit akan mempengaruhi keutuhan mem- bran ketika menghadapi kondisi tekanan sirkulasi (Bennett
et al., 2007; Girasoleet al., 2007). b. Protein Membran Integral
Protein membran integral terdiri dari glikoprotein dengan glikoprotein utama yaitu glikoporin yang menyusun 20% dari protein membran total. Glikoporin terdiri dari empat tipe yaitu A, B, C, D, yang berfungsi untuk membawa antigen eritrosit. Fungsi glikoprotein tersebut adalah membawa antigen eritrosit dan reseptornya dan membran protein (anion exchange channel glycoprotein). Lapisan lipid bilayer dan membran integral mem-pengaruhi stabilitas mekanik dan rigiditas membran (Harmening et al., 2002; Lichtman et al., 2007; Telen, 2009).
c. Protein Membran Perifer
Protein membran perifer terdiri dari spektrin, ankyrin, protein 4.1, aktin dan membran (Lihat gambar 1). Spektrin merupakan protein paling banyak pada membran sitoskeleton eritrosit yaitu 25-30% dari total protein membran dan 75% protein perifer. Spektrin merupakan molekul fleksibel berbentuk seperti batang yang mengandung dua rantai polipeptida yaitu rantai α (band1) dengan berat molekul 240.000 dalton dan rantai β (band
2) dengan berat molekul 225.000 dalton. Fungsi protein-protein ini adalah mempertahankan keutuhan membran eritrosit, mempertahankan eritrosit dari tekanan
sirkulasi, membentuk bikonkaf dan deformitas eritrosit (Har mening et al., 2002; Lichtman
et al., 2007; Telen, 2009).
Gambar 1. Membran eritrosit (Hoffbrandand Moss, 2011).
3. Jenis Darah Transfusi
Beberapa jenis darah transfusi berdasarkan lama waktu penyimpanan darah. Lama simpan darah adalah sebagai jumlah kalender hari antara hari koleksi unit RBC dan hari transfusi. Pada pasien denganmultipletransfusi, dengan analisa lama penyimpanan yang digunakan dari pasien adalah unit darah dengan usia penyimpanan RBC tertua (Gauvinet al.,2010).
a. Darah segar
Darah segar adalah darah yang baru diambil dari donor sampai 6 jam sesudah pengambilan. Keuntungan pemakaian darah segar ialah faktor pembekuannya masih lengkap termasuk faktor labil (V dan VIII) dan fung si eritrosit masih relatif baik. Kerugiannya sulit diperoleh dalam waktu yang tepat karena untuk pemeriksaan golongan, reaksi silang dan trans- portasi diperlukan waktu lebih dari 4 jam dan risiko penularan penyakit relatif banyak (Surgenoret al., 2001).
Darah baru adalah darah yang disimpan antara 6 jam sampai 6 hari sesudah diambil dari donor. Faktor pembekuan disini sudah hampir habis, dan juga dapat terjadi peningkatan kadar kalium, amonia, dan asam laktat (Boediwasenoet al, 2007).
c. Darah Simpan
Darah simpan yaitu darah yang disimpan lebih dari 6 hari. Keun- tungannya mudah tersedia setiap saat, bahaya penularan lues dan sitome- galovirus hilang, sedangkan kerugiaannya ialah faktor pembekuan terutama faktor V dan VIII sudah habis. Kemampuan transportasi oksigen oleh eritrosit menurun yang disebabkan karena afinitas Hb terhadap oksigen yang tinggi, sehingga oksigen sukar dilepas ke jaringan. Hal ini disebabkan oleh penurunan kadar 2,3 DPG. Kadar K+, amonia, dan asam laktat tinggi (Cote and Dsida, 2001).
4. Perubahan Darah Simpan
Darah simpan akan mengalami beberapa perubahan yaitu perubahan mor- fologis, penurunan ATP, penurunan 2,3 DPG, perubahan sifat mekanik dan terjadi kerusakan oksidatif.
a. Perubahan Morfologis.
Perubahan morfologi dari bentuk cekung ganda disc normal, RBC rusak selama hari-hari penyimpanan. Bentuk yang paling penting adalah creno- cytes yaitu eritrosit bulat dengan spikula, spikula ini sesuai dengan vesikel lipidic yang menonjol dari membran. Transformasi ini dikaitkan dengan hilangnya permukaan/volume RBC, yang berakibat terjadinya peningkatan konsentrasi Hb pada sel dengan kerapuhan osmotik. Ada beberapa bukti bahwa semua perubahan morfologis ini berkorelasi dengan penurunan ATP dari RBC (Esperet al., 2012).
b. PenurunanAdenosine Triphosphate(ATP)
Perubahan biomekanik permukaan RBC dan viskositas sitoplasma ter- jadi setelah penurunan ATP. Ada korelasi yang rendah antara kadar ATP RBC simpan dan RBC segar, kecuali bila kadar ATP menurun > 50%. Ketidak konsistenan ini menunjukkan bahwa pada kadar ATP yang sangat tinggi tidak memiliki dampak pada RBC hidup pasca transfusi. Meskipun penurunan ATP tidak menjelaskan tentang kerusakan membran, penipisan ATP meningkatkan kadar mediator sekunder seperti kalsium intraseluler, fosforilasi protein kinase dan membran yang menjaga integritas membran sel. Analisis fosfolipid menunjukkan perubahan keseimbangan fosforilasi/ dephosphorilation di RBC selama minggu kedua dan ketiga penyimpanan. Peningkatan bentuk phosphorilated dari
phosphoinositol-4-phosphate, di- sertai dengan munculnya crenocytes, ini menunjukkan hubungan antara dephosphorilation dan perubahan morfologi RBC. Ketika RBC disimpan
dalam aditif, konsentrasi ATP tetap meningkat diawal penyimpanan, pun- caknya sekitar 2 minggu, kemudian secara bertahap menurun hingga dibawah 50% pada minggu ke 6 dari penyimpanan. Oksidasi glukosa anae- robic (glikolisis) merupakan satu-satunya sumber energi bagi RBC. Lang kah-langkah awal dari proses ini memerlukan ATP dan tidak dapat dilan jutkan ketika ATP habis. Hilangnya ATP juga dapat mengurangi kemam puan transfusi RBC untuk efek mediasi nitrite oxide(NO) vasodilatasi arte- roil dalam merespon hipoksia. Membran dan komponen sitoplasma
me-miliki dampak morfologi dan deformabilitas RBC selama penyimpanan. Modifikasi ini mengurangi waktu paruh RBC pasca transfusi. Perubahan bi- omedik RBC adalah dari perubahan lipidic bilayer, protein dan sitoskeleton. Interaksi antara 3 komponen
mendukung pembentukan 20 sampai 80 vesikel nm, yang dapat dideteksi pada minggu kedua penyimpanan. Kerusakan oksidatif adalah hal lain mekanisme penting kerusakan RBC, dampak
bio-mekanik dengan merusak membran fosfolipid dan spektrin memberikan kontribusi pembentukanschistocytesdanspherocytes, kerapuhan osmotik (Alizadehrad et al., 2012). c. Penurunan 2,3Diphosphoglycerate(2,3 DPG).
Penurunan 2,3 DPG selama penyimpanan memproduksi RBC dengan efikasi dan efektifitas rendah untuk meningkatkan oksigenasi dalam jaring- an. Deplesi 2,3 DPG terbesar terjadi pada hari ketujuh penyimpanan. Dalam kondisi normal nilai 2,3 DPG untuk intraseluler eritrosit adalah sekitar 4,5 mmol/L. Setelah 24 jam penyimpanan, nilai ini turun menjadi sekitar 3,0-3,5 mmol/L, dan seluruh 2,3 DPG habis setelah dua minggu.
Penurunan 2,3 DPG memiliki konsekuensi untuk kapasitas pembawa oksigen dari sel-sel ini, afinitas oksigen (O2) sangat meningkat untuk setiap tekanan parsial tertentu O2
(pergeseran kiri besar kurva disosiasi oksigen).
Red blood cells dengan kadar 2,3 DPG rendah membawa O2, tetapi tidak melepaskan O2 setelah berada di jaringan. Mengingat bahwa ada peningkatan kapasitas mengikat O2, ekstraksi oksigen terganggu, jika seseorang memiliki volume sirkulasi seluruhnya terdiri dari PRC simpan, seluruh ekstraksi O2tubuh akan kurang dari 25%, dan saturasi vena akan tinggi. Kadar 2,3 DPG menurun dengan cepat selama minggu pertama penyimpanan, turun ke kadar tidak terdeteksi pada akhir minggu. Hilang- nya 2,3 DPG menyebabkan pelepasan O2 RBC simpan ke jaringan kurang mudah daripada sel normal. Faktor - faktor yang mengontrol konsentrasi 2,3 DPG dalam RBC adalah keseimbangan antara kadar sintesis oleh2,3 diphσspho glycerate mutaselaju degradasi oleh 2,3-diphospho glycerate fosfatase,
dan pH di atas 7,0. Sintesis 2,3 DPG pada pH dibawah 7,0 terjadi deposisi, pH larutan pengawet dapat bervariasi antara 7,0-8,0, tetapi pH optimum 7,6.
Faktor-faktor yang dapat membantu untuk meningkatkan konsentrasi 2,3 DPG adalah :
i. Penambahan asam nikotinat dalam media pengawet untuk RBC me- ningkatkan konsentrasi 2,3 DPG, mengurangi hemolisis dan membantu mempertahankan pH yang lebih tinggi.
ii. Penambahan kadar optimal asam askorbat secara signifikan meningkat- kan konsentrasi 2,3 DPG harus optimal, karena di atas konsentrasi tertentu itu ATP berkurang dan meningkatkan hemolisis. Konsentrasi asam askorbat yang digunakan bervariasi, sebaiknya dikisaran 3 sam- pai 5 mg / dl suspensi RBC. Namun konsentrasi asam askorbat yang optimum dengan efek hemolitik minimum dan efek menguntungkan adalah konsentrasi 4.0 mg/dl suspensi RBC.
iii. Penambahan asam nikotinat juga menurunkan efek pencucian yang keluar dari diethyl hexyl phtalate(DEHP)plasticizerdigunakan dalam kantongpoly vynil chlorida(PVC) ke media penyimpanan RBC. Hal ini penting karena DEHP pada kadar rendah menyebabkan penurunan kadar vitamin yang larut dalam lemak (A, D dan E) dan penghambatan membran terikat Na+K+ATPase. Konsentrasi asam nikotinat yang digu-nakan dalam antikoagulan bervariasi, sebaiknya di kisaran 5 sampai 8 mg/dl suspensi RBC, konsentrasi optimum 6,8 mg/dl suspensi RBC.
iv. Pemberian kedua asam nikotinat dan asam askorbat memiliki efek aditif, dengan efek lebih menguntungkan daripada efek masing-masing bila ditambahkan secara terpisah (Chandrasekharet al., 2004).
d. Perubahan Sifat Mekanik
Selama penyimpanan, beberapa perubahan bentuk RBC daridiskcekung ganda berubah menjadi echinocytes dan spheroechinocytes jumlah yang spherocytes ireversibel cacat dalam populasi RBC simpan berangsur-angsur meningkat sepanjang durasi penyimpanan.
Red blood cells secara bertahap kehilangan "deformabilitas" mereka selama penyimpanan. Haemoglobin berisi empat ion besi, satu ion pada masing-masing empat subunit yang terkoordinasi dalam cincin porfirin. Untuk memenuhi fungsi fisiologis utama, setiap molekul deoxyHbmengikat empat molekul O2. Sebagian kecil darioxyHb secara spontan melakukan autooksidasi untuk membentuk ferric methaemoglobin (metHb) dan anion superoksida. Dalam sirkulasiferricmetHb direduksi menjadiferrousHb olehnicotinamide adenosine dinucleotide hidrogen (NADH), reaksi ini akan diperlambat pada penyim panan RBC di refrigeratordan pembentukan metHb semakin besar dengan partially oxygenated Hb(Yoshidaand Shevkoplyas, 2010).
e. Kerusakan Oksidatif
Mekanisme kerusakan oksidatif dikeluarkan oleh RBC yang disim- pan. Kerusakan oksidatif lipid dan protein oksidasi/peroksidasi disebab- kan oleh reactive oxygen species (ROS), seperti hidroksil, peroksidase dan radikal alkoxylmerupakan salah satu faktor utama yang berkontri- busi terhadap perkembangan lesi penyimpanan. Red blood cellsmengan dung campuran yang sangat reaktif terhadap besi (Hb) dan oksigen (terlarut dalam sitosol dan terikat Hb). Namun, reaksi ini terhambat sedangkan pembentukan metHb ditingkatkan untuk RBC simpan dengan sebagian O2 Hb atom besi pada Hb harus dipertahankan dalam keadaan reversibel untuk mengikat O2. In vivo, besi pada Hb dilindungi dari oksidasi RBC, tetapi ketika sel dikeluarkan dari
tubuh, dan disimpan dalam kondisi dingin, mekanisme perlindungan terhadap RBC kehila ngan efisiensi dan Hb menjadi rentan terhadap oksidasi. Lesi penyimpanan RBC sebagai "semua hal-hal buruk" yang terjadi pada RBC dalam perjalanan kelangsungan hidup RBC ketika RBC kembali ke sirkulasi. Lesi penyimpanan RBC meliputi:
i. Penurunan ATP RBC dan 2,3 DPG
ii. Pengurangan deformabilitas terkait dengan hilangnya konstituen membran dan Hb.
iii. Akumulasi zat bioreaktif yang dilepaskan dari leukosit terutama pada non leucoreduction RBC (Gullikssonet al.,2009).
Di beberapa negara, WB disimpan semalam pada suhu kamar sebelum pemisahan komponen darah, terutama untuk alasan logistik. Penyimpanan berkepanjangan umumnya dilakukan pada suhu kamar dan terutama pemenuhan kebutuhan untuk trombosit yang akan digunakan untuk persiapan unit trombosit BC reduction. Konsekuensi penyimpanan akan terjadi peningkatan produksi laktat dari glukosa oleh glikolisis RBC dan penurunan minimal dalam pH yaitu sekitar 0,1 satuan dibandingkan dengan kadar WB yang diproses dalam waktu 8 jam dan kemudian disimpan di 2-6 oC. Penurunan minimal ini tampaknya memiliki dampak yang signifikan pada metabolisme RBC yang dapat dilihat selama beberapa minggu. Dalam RBC, 2,3-DPG umumnya hilang selama 2 minggu pertama penyimpanan. Tingkat sintesis 2,3 DPG dikaitkan dengan pH RBC intraseluler dengan pada kadar pH di bawah 7,2. Sintesis 2,3 DPG dikaitkan dengan hilangnya ATP. Dalam situasi sebaliknya, ketika tingkat sintesis 2,3 DPG berkurang, sintesis kadar ATP dengan kadar lebih tinggi. Peningkatan kadar ATP, mencerminkan peningkatan pasokan energi
dan pemeliharaan yang lebih baik dari penurunan K+. 2,3 DPG intraseluler dikaitkan dengan pergeseran ke kiri kurva disosiasi oksigen dan dengan peningkatan afinitas O2 dan mungkin pasokan O2kurang efektif ke jaringan. Setelah transfusi, RBC dengan kadar 2,3 DPG rendah umumnya akan normal kembali dalam bebe- rapa hari (Gulliksson et al., 2009). Hasilreview LDH isoenzyme(1999) menyatakan bahwa pemulihan 2,3 DPG setelah kadarnya menurun membutuhkan waktu 12-48 jam dan disimpulkan bahwa sementara beberapa bank darah menganjurkan penggunaan darah segar untuk pasien dengan transfusi
masiv untuk mencegah penurunan kadar 2,3 DPG pasca transfusi. Ada sedikit bukti yang mendukung bahwa terjadi gangguan oksigenasi jaringan. Aditif RBC dapat mempertahankan kadar 2,3 DPG dengan lebih baik. Solusi alkali baru dengan tujuan untuk mempertahankan kadar 2,3 DPG dan ATP selama penyimpanan belum diketahui apakah aditif tersebut memiliki efek menguntungkan yang sama setelah unit RBC dibuat dari WB dengan penyimpanan semalam. Penelitian lebih lanjut tentang aditif tersebut dan mungkin modifikasi komposisi dapat memperbaiki situasi untuk masa depan dan memungkinkan penyimpanan WB semalam dengan memper tahankan kadar 2,3 DPG dan kadar ATP. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penyimpanan semalam WB sebelum penyusunan komponen darah umumnya terkait dengan peningkatan secara signifikan kadar ATP dan menurunnya kadar ekstraseluler K+, 2,3 DPG dan pH pada RBC aditif SAGM solusi aditif dibandingkan dengan RBC yang dipersiapkan dalam waktu 8 jam.
f. Bentuk RBC dan Rheologi
Protein membran yang rusak menyebabkan fungsinya sebagai pompa mulai gagal, sehingga eritrosit mulai membengkak dan lebih bulat atau setengah bola. Red blood cells
membran sel mencuat ke segala arah. Beberapa studi mengenai morfologi RBC berikut
cold storage telah menyimpulkan bahwa kegagalan pompa ion menyebabkan penurunan deformabilitas eritrosit yang menyebabkan menurunnya aliran mikro- vaskular.
g. Perubahan Mikrosirkulasi akibat Transfusi PRC Simpan.
Cacat rheologi spheroechonocytes dapat memperlambat aliran kapiler yang menyebabkan defisit pengiriman O2 sistemik, yang dirasakan sebagian besar pada jaringan otak dan ginjal. Sebuah studi dari mikrovaskuler perfusi yang membandingkan darah simpan dan darah segar menunjukkan bahwa RBC simpan mengurangi aliran mikrovaskular dan kepadatan kapiler fungsional sebesar 63% dan 54% masing-masing. h. Red Blood CellsMembran Vesikulasi.
Fenomena ini merupakan konsekuensi dari kegagalan protein transmem- bran, dan terjadi peningkatan respon inflamasi pada RBC. Red blood cells pada PRC simpan lebih mudah rusak dan kehilangan elastisitasnya. Sel-sel itu akan sulit melewati kapiler di mikrosirkulasi. Red blood cells dengan bentuk abnormal akan dihancurkan dalam sistem retikuloendotelial dan selanjutnya terjadi hemolisis.
i. Hemolisis dan PelepasanFreeHemoglobin
Penghancuran RBC baik dalam kantong darah dan dalam aliran darah tertentu menyebabkan hiperbilirubinemia ringan. Free Hb yang dilepaskan dalam sirkulasi merupakan oksida nitrat yang sangat baik. Reaksi ini terjadi secara singkat pada bagian metabolismenitric oxide(NO) danclearance.
Peningkatan K+ dan laktat dalam kantong darah akan menyebabkan meningkatnya keasaman pada kantong darah yang disimpan 42 hari. Hiperkalemia dan asidosis laktat dapat terjadi akibat terlalu banyak transfusi simpan ( CoteandDsida, 2001).
5. Citrate Phosphat Dextrose(CPD)
Lee pada tahun 1913 memperkenalkan sitrat sebagai antikoagulan untuk darah manusia. Rous dan Turner tahun 1915 mengenalkan bahwa glukosa memperlambat hemolisis suspensi RBC dalam saline, darah tersebut dapat disimpan dalam 4 minggu. Loutit and Mollison memperkenalkan antikoagulan acid citrate dextrose (ACD) dengan desain penggunaan rasio 1:4 kemudian 1:7 dalam WB. Suasana asam pada solution dengan pH 5,5 mencegah karamelisasi pada pemanasan glukosa. Acid citrate dextrose steril dalam WB atau PRC bisa mengurangi hemolisis dalam waktu 3 minggu. Penambahan antikoagulan pada WB mengurangi fosfat difus pada darah simpan meninggalkan fosfat intraseluler lebih banyak sebagai substrat pembentukan ATP. Penambahan fosfat pada ACD yaitu berupa CPD, CPD lebih baik daripada ACD saja dan mengurangi hemolisis. Citrate phosphat dextrose
ditetapkan untuk penyim panan WB selama 4 minggu (Hillyeret al., 2007). 6.Saline Adenine Glucose Manitol(SAGM)
Rous dan Turner mengembangkan sitrat pertama dan campuran glukosa untuk menyimpan RBC kelinci (Rous dan Turner, 1916) dan Robertson menggunakann dalam bank darah pertama di Perancis selama Perang Dunia I (Robertson, 1918). Dimasukkannya fosfat di tahun 1950-an dan 1970-an adenine sebagai solusi aditif, yang memperpanjang masa simpan dan meningkatkan kualitas penyimpanan RBC (Hess, 2006). Di sisi lain, pH menurun 5,8 sterilisasi sitrat dan glukosa (Acid Citrate Dextrose) solusi, memungkinkan penyimpanan RBC hingga 21 hari (Loutit dan Mollison, 1943). Perkembangan selanjutnya aditif ditandai
dengan penambahan natrium fosfat ke ACD dan CPD yang mengurangi kebocoran fosfat dari RBC yang disimpan dengan mengurangi gradien konsentrasi fosfat antara sitosol dan supernatan dengan waktu simpan darah 28 hari. Solusi aditif berikutnya ditambahkan ke RBC simpan untuk memberikan tambahan volume dan nutrisi untuk penyimpanan lebih lama. Solusi aditif pertama adalah SAG, dinamai konstituennya, garam, adenin dan glukosa, penurunan hematokrit penyimpanan dan viskositas sekitar 55%, namun variabilitas biologis yang tinggi hemolisis masih menghambat perpanjangan umur simpan RBC berkonsentrasi lebih dari 5 minggu, setidaknya sampai diperkenalkannya manitol (scavinger radikal bebas dan membran stabilizer) oleh Hogman et al. (1978). Solusi aditif yang mengandung 30 mM manitol mengurangi hemolisis dan lebih meningkatkan osmolaritas larutan ( Hess et al., 2009).
Solusi SAGM, merupakan solusi aditif standar yang digunakan di Eropa, sementara AS-1 dan AS-5 (banyak digunakan di Amerika Serikat) adalah dua varian SAGM yang berbeda dalam konsentrasi garam, gula dan mannitol. AS-3 adalah solusi aditif ketiga yang dilisensi di Amerika Serikat, digunakan secara eksklusif di Kanada (Hess, 2006). Sitrat dan manitol