105
rase
pada
skala
minyak
GLA
of
CPO
immobilized desaturase inat produce containing
SUHARYANTO M.
Indonesia, 16 Tcknnlogi
Indonesia
is a acid high economic value oil. Research scale showed
Absidia corymbifera and Rhiwpus fungi
have the to increase of
crude oil and through
enzymatic
especially having
role in process by applying
technique. research
to process
version desaturase
using continuous system at to produce
A corymbifera biomass
with and used for
of in
at scale per day).
of included
substrate, of zeolite for
and
process. The that
in small of ( I -
3 gave higher
average 7 8 4
compared to that immobilized
parf icles which reached
4.67 However, of
caused plugging
substrate The of immobilized
in system w a s
18 hours. of
zeolite was 850
while that larger particles
was 875
at optimum condition yielding 1.58% initial concentration acid
[Keyword; corymbifera, CPO
sion, enzyme, enzyme
acid].
(GLA) yang tinggi scbagai minyak
pada skala lahoratorium mrnunjukkan
bahwa Absidia sp.
mcmiliki untuk
minyak (CPO) dan
menghasilkan melalui biokonversi
Stabilitas enzim desaturase, khususnya
yang pada dapat
lain
kondisi optimum biokonversi CPO untuk
minyak yang kaya
majemuk. GLA enzim
semipilot. Ekstrak enzim Dalam dengan
biomassa fungi A. 10% dengan palmitat,
digunakan lemak
untuk kontinu
pada skala (15.000 per
rata-rata yang
diamobilisasi pada zeolit berukuran
mrn) dengan Namun.
kccil
pada kontinu
9-18 jam. alir optimum
pada zeolit berukuran
(1-3 mm) adalah 850 pada
mm)
875 pada kondisi
optimum rnenghasilkan GLA dari kandungan linolenat
Penda huluan
gamma
GLA) bagi dunia
dan antara lain
lipo-
protein penderita
terolernia
sindroma prahaid eksema dan sebagai anti
99 untuk
(lames & Carter, 1988). Di Jepang, GLA dipasarkan sebagai baku
untuk kelembapan (Suzuki,
dapat terbentuk dari biokonversi linoleat (LA) enzirn
yang dihasilkan oleh fungi dari
produksi khususnya
1997). Pada litian sebelumnya 1997) cairan
Absidia
mcningkatkan angka iodin CPO.
Cairan ini juga
menjadi linoleat (LA) dan LA menjadi
Hat cairan
enzim desaturase, dan desaturase. Adanya enzim
pada penghasil GLA
jenuhan, menjadi
yang belum
bahwa fermentasi
juga memiliki
desaturase dapat diamobilisasi
dcngan butiran sapi zeolit untuk
meningkatkan proses
biokonversi (Tri-Panji
Sistem biokonversi yang ban yak terapkan di industri adalah sistem kontinu.
Sistem kontinu adalah biokonversi yang
memungkinkan komponen dial
dan hingga produk
Sistem
dibanding dengan batch
proses. penghematan
dan kecepatan proses. Laju alir
CPO dengan pada skala .
kontinu selama proses perlu diketahui sehingga biokonversi dapat
secara optimal. penelitian skala
semipilot pilot perlu sebelurn
teknologi biokonversi dapat
kan pada skala industri. penelitian kondisi ukuran
butiran zeolit yang digunakan dalam desaturase, laju alir substrat,
enzim desaturase selarna
proses biokonversi dalam sistem
kontinu pada skala
Bahan dan
A. corymbi
Fungi A. diperoleh dari
Laboratorium dan Bioproses,
Bioteknologi Indone-
sia (BPBPI), dan dalam
medium potato agar (PDA) miring.
Inokulum labu Erlen-
meyer 500 berisi medium
trose broth (PDB) yang diinokulasi dengan dua loop spora dan miselium A ,
dari PDA miring 72 jam.
pada suhu ruang (25-30°C) di rak bergoyang pada kecepatan 110 selama 72 jam selanjutnya miselium
untuk sumber inokulum.
Inokulum dengan blender
selama kemudian sebanyak
(vlv) ditambahkan ke dalam medium
tasi (1993) dengan
komposisi 7;
2,507;
0,004 1 ; 0,000 1 , dengan sebagai surnber karbon,
ditambahkan 1 : sampai pH
Kultur diinkubasi selama 120 jam pada suhu
ruang (25-30°C) di dalarn film
volume 60 dengan ketebalan
I cm. biomassa miselium
untuk sumber enzim
enzim
dengan menghancurkan
masa segar yang telah
menggunakan selama 15
enzim kasar dipisahkan dari
pecahan menggunakan pada
Buchner dibantu dengan yang berisi
desaturase digunakan untuk percobaan amobilisasi dengan butiran zeolit sebagai pendukung atau pengamobi
penenruan
Butiran zeolit berukuran 1-3 mm (ukuran kecil) 8-10 (ukuran besar)
yang diperoleh dari sebelum
sebagai pendukung
dicuci dengan air mengalir, kemudian
dalam 1 M selama
jam dengan dua kali
perendam. Butiran zeolit ini kemudi an
dengan di dalam oven
pada suhu 200°C selarna
Amobilisasi desaturase dilakukan
dengan cara masing-masing g
zeolit teraktivasi ke dalam 200 ekstrak enzim dikocok dengan
pengocok pada kecepatan 180 satu jam pada suhu ruang
kemudian cairan dipisahkan. enzim ditentukan
et al.
dan arnobilisasi menggunakan (1 951) dengan protein BSA (bovine serum albumin). Butiran yang telah mengamobilisasi enzim digunakan
untuk biokonversi CPO.
mengetahui desaturase
selama proses biokonversi,
zeolit yang rnengandung enzim (2 g)
zeolit untuk dianalisis
bilangan iodinnya mcnggunakan
AOAC A (unit)
didefinisikan sebagai peningkatan ketidakjenuhan CPO yang reaksi
oleh 1 m g enzim dalam
zeolit selama (g I 00 g CPO per enzim per Butiran zeolit yang
telah mengamobilisasi enzirn digunakan untuk biokonversi
Optimasi proses sistem
Ekstrak kasar desaturase yang telah dalam medium arnobilisasi (1.000 dengan dua ukuran butiran
optimum biokonversi
yang diperoleh dari percobaan sebelumnya (Tri-Panji et 2003). Zeolit berukuran 1-3 mm (kecil) memiliki rongga butiran
total volume, sedangkan zeolit berukuran besar memiliki volume rongga cnzim yang
diamobilisasi pada ukuran kecil, laju alir yang digunakan adalah 830 jam yang diperoleh dari kontak enzim-
30 623 yang
diperoleh kontak 40 Pada
penggunaan medium pengamobil zeolit
berukuran besar, laju y ang
digunakan adalah 875 kontak
30 dan 656 kontak 40
CPO yang telah mengalami
biokonversi dari penampung
dari jam 2, 4, 6 , 9, 12, 18,
24, dan ditentukan peningkatan bilangan iodin aktivitas desaturase.
dianalisis dengan GC
et (bilangan
iodin, bilangan peroksida, sebelum
biokonversi pada optimum
dcngan ( 1 995).
enzirn diuji untuk sarnpai
enzirn amabil digunakan untuk
proses kontinu.
dan Pembahasan
Pemilihan
berukuran kecil memiliki
per bobot yang jauh
lebih besar dibandingkan zeolit berukuran besar. Dengan demikian, butiran zeolit yang lebih kecil akan mampu menjerap dan mengamobilisasi desaturase lebih
dibandingkan dengan yang berukuran lebih besar. Jumlah desaturase yang lebih akan mampu bilangan iodin
yang lebih Bilangan iodin CPO
blanko, g CPO dapat
menjadi 12 satuan dengan desaturase terarnobilisasi pada zeolit ukuran