PERKEMBANGAN DAN PERTUMBUHAN PLASENTA TIKUS
(Rattus norvegicus) PADA UMUR KEBUNTINGAN 13, 17, DAN 21
HARI AKIBAT PENYUNTIKAN bST (bovine Somatotropin)
INTAN TOLISTIAWATY
DEPARTEMEN ANATOMI, FISIOLOGI, DAN FARMAKOLOGI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
ABSTRAK
INTAN TOLISTIAWATY. Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST
(bovine Somatotropin). Di bawah bimbingan ARYANI SISMIN
SATYANINGTIJAS dan PUDJI ACHMADI.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian bST (bovine Somatotropin) terhadap pertumbuhan dan perkembangan plasenta tikus pada umur kebuntingan 13, 17, dan 21 hari. Tikus betina bunting sebanyak 36 ekor dibagi dalam 3 kelompok yaitu kelompok tikus yang tidak mendapatkan perlakuan (kontrol/K), kelompok tikus yang disuntikkan dengan bST 0 mg/kg BB (minyak/M) dan kelompok tikus yang disuntikkan dengan bST 9 mg/kg BB (hormon/H). Penyuntikan dilakukan pada hari ke-4 sampai dengan hari ke-12 kebuntingan. Pada usia kebuntingan 13, 17, dan 21 hari dilakukan pembedahan untuk mengeluarkan plasenta beserta fetus untuk dilakukan pengukuran bobot, kandungan DNA, dan RNA dengan menggunakan alat spektrofotometer. Hasil penelitian menunjukan bahwa pemberian bST meningkatkan kadar DNA dan tidak berpengaruh pada kadar RNA.
PERKEMBANGAN DAN PERTUMBUHAN PLASENTA TIKUS
(Rattus norvegicus) PADA UMUR KEBUNTINGAN 13, 17, DAN 21
HARI AKIBAT PENYUNTIKAN bST (bovine Somatotropin)
INTAN TOLISTIAWATY
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada
Fakultas Kedokteran Hewan
DEPARTEMEN ANATOMI, FISIOLOGI, DAN FARMAKOLOGI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
Judul : Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST (bovine Somatotropin)
Nama Mahasiswa : Intan Tolistiawaty
NRP : B04103053
Program Studi : Kedokteran Hewan
Disetujui
Dr. Drh. Aryani S. Satyaningtijas, MSc Drs. Pudji Achmadi Pembimbing I Pembimbing II
Diketahui
Dr. Drh. Wayan Teguh Wibawan, MS. Wakil Dekan FKH-IPB
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Toli-toli 18 Januari 1986 sebagai anak kedua dari empat bersaudara dari pasangan suami-istri Ir. Zainal Abidin Gani dan Ir Nurbaety. Penulis menyelesaikan pendidikan Sekolah Dasar di SDN Tanamodindi II Palu pada tahun 1997. Lulus Sekolah Lanjutan Tingkat Pertama di SLTPN 1 Luwuk pada tahun 2000 dan lulus Sekolah Lanjutan Tingkat Atas di SMUN I Luwuk pada tahun 2003. Pada tahun yang sama melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Kedokteran Hewan IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis sampaikan kehadirat Allah SWT atas berkat, rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi tentang Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST (bovine Somatotropin).
Dengan selesainya skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Dr. drh. Aryani Sismin Satyaningtijas MSc. selaku dosen pembimbing I atas segala bimbingan, dorongan dan nasehat serta segala kemudahan yang diperoleh penulis selama penelitian dan penulisan skripsi.
2. Drs. Pudji Achmadi selaku dosen pembimbing II atas segala bimbingan, dorongan dan nasehat serta segala kemudahan yang diperoleh penulis selama penelitian dan penulisan skripsi.
3. Dr. drh. Hera Maheshwari MSc. selaku dosen penguji atas segala masukan yang diberikan.
4. Dr. drh Razak Achmad Hamzah MS. selaku dosen pembimbing akademik atas bimbingan dan nasehatnya selama masa perkuliahan.
5. Dr. Nastiti Kusumorini atas bimbingan dan nasehatnya.
6. Program hibah kompetensi A3 yang telah mendanai penelitian ini.
7. Ibu Sri, Bu Ida, Pak Edi dan seluruh staf di Laboratorium Fisiologi dan Farmakologi, Fakultas Kedokteran Hewan IPB.
8. Papa Ir. Zainal Abidin Gani, mama Ir Nurbaety, kak zia, Ika, Inda dan Ajeng atas doa, kasih sayang serta dukungannya baik material dan spiritual.
9. Keluarga besar yang berada di Makassar atas segala doa dan nasehat yang diberikan.
11. Anak-anak Rulita (Rhiska, Rikki, Ais, Mbak Dhika, Lina dan Ninit) atas motivasi dan kebersamaan selama ini serta telah menjadi keluarga keduaku. 12.Teman-teman MPV 2007, Green Gonjreng, kenanga 14, Djejaka, Chandra,
Au, Reny, Eka, Bayu, Bone, Zaldi, Achy, Nie Peng atas kebersamaan.
13.Sahabatku Irvan dan Yuyun atas support, pengertian dan masukan yang diberikan.
14.Teman baruku ‘Giadi Seto Pratomo’ yang mau mendengar keluh kesah, celoteh, dan terima kasih telah memberi warna baru.
15.Gymnolemata 40 dan semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu. Semoga penulisan ini dapat bermanfaat bagi yang membutuhkan.
Bogor, Agustus 2007
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL………... vi
DAFTAR GAMBAR……….. vii
DAFTAR LAMPIRAN……….. viii
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Data biologi umum tikus ……… 6
2. Konsentrasi standar DNA……… 17
3. Konsentrasi reagen untuk uji kadar DNA………... 18
4. Konsentrasi standar RNA... 19
5. Labeling untuk pewarnaan dan pengujian kadar RNA... 20 6. Bobot basah, bobot kering, dan kadar air pada umur kebuntingan
13, 17, dan 21 hari...
21 7. Konsentrasi dan total DNA dan RNA pada umur kebuntingan 13,
17, dan 21 hari...
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Susunan embrio dan plasenta... 7
2. Produksi bST... 12
3a. Bobot basah plasenta... 22
3b. Bobot kering bebas lemak plasenta... 22
3c. Kadar air plasenta... 22
4. Konsentrasi DNA plasenta... 25
PERKEMBANGAN DAN PERTUMBUHAN PLASENTA TIKUS
(Rattus norvegicus) PADA UMUR KEBUNTINGAN 13, 17, DAN 21
HARI AKIBAT PENYUNTIKAN bST (bovine Somatotropin)
INTAN TOLISTIAWATY
DEPARTEMEN ANATOMI, FISIOLOGI, DAN FARMAKOLOGI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
ABSTRAK
INTAN TOLISTIAWATY. Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST
(bovine Somatotropin). Di bawah bimbingan ARYANI SISMIN
SATYANINGTIJAS dan PUDJI ACHMADI.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian bST (bovine Somatotropin) terhadap pertumbuhan dan perkembangan plasenta tikus pada umur kebuntingan 13, 17, dan 21 hari. Tikus betina bunting sebanyak 36 ekor dibagi dalam 3 kelompok yaitu kelompok tikus yang tidak mendapatkan perlakuan (kontrol/K), kelompok tikus yang disuntikkan dengan bST 0 mg/kg BB (minyak/M) dan kelompok tikus yang disuntikkan dengan bST 9 mg/kg BB (hormon/H). Penyuntikan dilakukan pada hari ke-4 sampai dengan hari ke-12 kebuntingan. Pada usia kebuntingan 13, 17, dan 21 hari dilakukan pembedahan untuk mengeluarkan plasenta beserta fetus untuk dilakukan pengukuran bobot, kandungan DNA, dan RNA dengan menggunakan alat spektrofotometer. Hasil penelitian menunjukan bahwa pemberian bST meningkatkan kadar DNA dan tidak berpengaruh pada kadar RNA.
PERKEMBANGAN DAN PERTUMBUHAN PLASENTA TIKUS
(Rattus norvegicus) PADA UMUR KEBUNTINGAN 13, 17, DAN 21
HARI AKIBAT PENYUNTIKAN bST (bovine Somatotropin)
INTAN TOLISTIAWATY
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan pada
Fakultas Kedokteran Hewan
DEPARTEMEN ANATOMI, FISIOLOGI, DAN FARMAKOLOGI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
Judul : Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST (bovine Somatotropin)
Nama Mahasiswa : Intan Tolistiawaty
NRP : B04103053
Program Studi : Kedokteran Hewan
Disetujui
Dr. Drh. Aryani S. Satyaningtijas, MSc Drs. Pudji Achmadi Pembimbing I Pembimbing II
Diketahui
Dr. Drh. Wayan Teguh Wibawan, MS. Wakil Dekan FKH-IPB
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Toli-toli 18 Januari 1986 sebagai anak kedua dari empat bersaudara dari pasangan suami-istri Ir. Zainal Abidin Gani dan Ir Nurbaety. Penulis menyelesaikan pendidikan Sekolah Dasar di SDN Tanamodindi II Palu pada tahun 1997. Lulus Sekolah Lanjutan Tingkat Pertama di SLTPN 1 Luwuk pada tahun 2000 dan lulus Sekolah Lanjutan Tingkat Atas di SMUN I Luwuk pada tahun 2003. Pada tahun yang sama melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Kedokteran Hewan IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis sampaikan kehadirat Allah SWT atas berkat, rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi tentang Perkembangan dan Pertumbuhan Plasenta Tikus (Rattus norvegicus) Pada Umur Kebuntingan 13, 17, dan 21 Hari Akibat Penyuntikan bST (bovine Somatotropin).
Dengan selesainya skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Dr. drh. Aryani Sismin Satyaningtijas MSc. selaku dosen pembimbing I atas segala bimbingan, dorongan dan nasehat serta segala kemudahan yang diperoleh penulis selama penelitian dan penulisan skripsi.
2. Drs. Pudji Achmadi selaku dosen pembimbing II atas segala bimbingan, dorongan dan nasehat serta segala kemudahan yang diperoleh penulis selama penelitian dan penulisan skripsi.
3. Dr. drh. Hera Maheshwari MSc. selaku dosen penguji atas segala masukan yang diberikan.
4. Dr. drh Razak Achmad Hamzah MS. selaku dosen pembimbing akademik atas bimbingan dan nasehatnya selama masa perkuliahan.
5. Dr. Nastiti Kusumorini atas bimbingan dan nasehatnya.
6. Program hibah kompetensi A3 yang telah mendanai penelitian ini.
7. Ibu Sri, Bu Ida, Pak Edi dan seluruh staf di Laboratorium Fisiologi dan Farmakologi, Fakultas Kedokteran Hewan IPB.
8. Papa Ir. Zainal Abidin Gani, mama Ir Nurbaety, kak zia, Ika, Inda dan Ajeng atas doa, kasih sayang serta dukungannya baik material dan spiritual.
9. Keluarga besar yang berada di Makassar atas segala doa dan nasehat yang diberikan.
11. Anak-anak Rulita (Rhiska, Rikki, Ais, Mbak Dhika, Lina dan Ninit) atas motivasi dan kebersamaan selama ini serta telah menjadi keluarga keduaku. 12.Teman-teman MPV 2007, Green Gonjreng, kenanga 14, Djejaka, Chandra,
Au, Reny, Eka, Bayu, Bone, Zaldi, Achy, Nie Peng atas kebersamaan.
13.Sahabatku Irvan dan Yuyun atas support, pengertian dan masukan yang diberikan.
14.Teman baruku ‘Giadi Seto Pratomo’ yang mau mendengar keluh kesah, celoteh, dan terima kasih telah memberi warna baru.
15.Gymnolemata 40 dan semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu. Semoga penulisan ini dapat bermanfaat bagi yang membutuhkan.
Bogor, Agustus 2007
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL………... vi
DAFTAR GAMBAR……….. vii
DAFTAR LAMPIRAN……….. viii
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Data biologi umum tikus ……… 6
2. Konsentrasi standar DNA……… 17
3. Konsentrasi reagen untuk uji kadar DNA………... 18
4. Konsentrasi standar RNA... 19
5. Labeling untuk pewarnaan dan pengujian kadar RNA... 20 6. Bobot basah, bobot kering, dan kadar air pada umur kebuntingan
13, 17, dan 21 hari...
21 7. Konsentrasi dan total DNA dan RNA pada umur kebuntingan 13,
17, dan 21 hari...
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Susunan embrio dan plasenta... 7
2. Produksi bST... 12
3a. Bobot basah plasenta... 22
3b. Bobot kering bebas lemak plasenta... 22
3c. Kadar air plasenta... 22
4. Konsentrasi DNA plasenta... 25
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman 1. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari
kebuntingan 13...
33 2. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari
kebuntingan 17...
33 3. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari
kebuntingan 21...
33 4. Analisa data hasil penghitungan bobot kering bebas lemak
plasenta hari kebuntingan 13...
33 5. Analisa data hasil penghitungan bobot kering bebas lemak
plasenta hari kebuntingan 17...
34 6. Analisa data hasil penghitungan bobot kering bebas lemak
plasenta hari kebuntingan 21...
34 7. Analisa data hasil penghitungan kadar air plasenta hari
kebuntingan 13...
34 8. Analisa data hasil penghitungan kadar air plasenta hari
kebuntingan 17...
34 9. Analisa data hasil penghitungan kadar air plasenta hari
kebuntingan 21...
35 10. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi DNA plasenta hari
kebuntingan 13...
35 11. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi DNA plasenta hari
kebuntingan 17...
35 12. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi DNA plasenta hari
kebuntingan 21...
35 13. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari
kebuntingan 13...
36 14. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari
kebuntingan 17...
36 15. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari
kebuntingan 21...
36 16. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi RNA plasenta hari
kebuntingan 13...
17. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi RNA plasenta hari kebuntingan 17...
37 18. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi RNA plasenta hari
kebuntingan 21...
37 19. Analisa data hasil penghitungan total RNA plasenta hari
kebuntingan 13...
37 20. Analisa data hasil penghitungan total RNA plasenta hari
kebuntingan 17...
37 21. Analisa data hasil penghitungan total RNA plasenta hari
kebuntingan 21...
PENDAHULUAN
Latar belakang
Rendahnya konsumsi protein hewani masyarakat disebabkan karena pemerintah belum dapat memenuhi permintaan akan daging, susu, ataupun telur yang terus meningkat seiring dengan bertambahnya jumlah penduduk. Untuk itu diperlukan suatu cara untuk mengembangkan ternak yang mempunyai daya reproduksi dan produksi yang cepat dan banyak seperti hewan atau ternak yang dapat menghasilkan lebih dari 1 anak persekelahiran (hewan politokus) seperti babi dan tikus. Dewasa ini banyak dilakukan penelitian dalam upaya untuk meningkatkan kuantitas dan kualitas ternak seperti inseminasi buatan, transfer embrio, dan superovulasi. Penambahan feed additive pada pakan dan pemberian hormon eksogen juga dilakukan dalam beberapa penelitian untuk mencapai perkembangan dan pertumbuhan yang maksimal pada hewan. Penggunaan hormon sebagai growth promotor untuk peningkatan bobot badan tanpa harus memberikan pakan dalam jumlah banyak pada ternak sapi, domba, dan unggas telah dilakukan sejak tahun 1950 di USA (Omega 2003).
Plasenta merupakan sistem yang berkomponen ganda yaitu selaput embrional dan selaput lendir rahim. Kedua komponen tersebut membentuk suatu kesatuan untuk keperluan pertukaran timbal balik faali antara induk dan fetus serta menghasilkan hormon-hormon (Sukra 2000). Pertumbuhan dan perkembangan setelah lahir ditentukan oleh fungsi plasenta sebagai transport nutrisi antara induk dan embrio pada saat dalam kandungan. Mc Donald (1980) melaporkan bahwa dengan meningkatnya ukuran embrio, proses difusi pemberian makan terhadap embrio menjadi tidak cukup untuk mempertahankan hidup dan meneruskan pertumbuhannya, sehingga membran ekstra embrional berkembang sebagai sarana untuk mencukupi meningkatnya kebutuhan nutrisi.
Pemberian hormon pertumbuhan akan mengakibatkan peningkatan kecepatan sintetis protein di seluruh sel-sel tubuh dan meningkatkan mobilisasi asam lemak dari jaringan adiposa, meningkatkan asam lemak bebas dalam darah, serta meningkatkan penggunaan asam lemak untuk energi (Guyton dan Hall 1997). Penelitian ini dilakukan untuk melihat pemberian bST pada tikus bunting pada hari kebuntingan ke ke 13, 17, dan 21 terhadap peningkatan perkembangan dan pertumbuhan plasenta. Bila pertumbuhan dan perkembangan plasenta berjalan dengan baik maka dapat diasumsikan bahwa asupan nutrisi dari induk ke fetus melalui plasenta menjadi lebih baik.
Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas pemberian bST terhadap pertumbuhan dan perkembangan plasenta tikus pada umur kebuntingan 13, 17, dan 21 hari.
Hipotesa
Manfaat
TINJAUAN PUSTAKA
Biologi Umum Tikus
Tikus adalah hewan yang sering digunakan untuk penelitian-penelitian bidang reproduksi karena mempunyai siklus reproduksi yang pendek dan merupakan mamalia yang paling subur diantara mamalia lain (data mengenai biologi umum tikus disajikan pada Tabel 1). Tikus dapat berkembang biak dengan cepat, berukuran kecil, pemeliharaannya mudah tidak memerlukan biaya yang besar (Malole dan Pramono 1989). Tikus putih lebih cepat dewasa dibandingkan hewan coba lain seperti kelinci dan tidak memperlihatkan perkawinan musiman (Smith dan Mangkoewidjojo 1988). Klasifikasi tikus menurut Ballenger pada tahun 2001 adalah sebagai berikut :
Kerajaan : Animalia
Filum : Chordata
Kelas : Mamalia
Ordo : Rodentia
Subordo : Sciurognathi
Familia : Muridae
Subfamili : Murinae
Genus : Rattus
Spesies : Rattus norvegicus
Siklus Reproduksi Tikus
supaya anak-anak yang sedang disusui tidak terlantar. Tikus mempunyai kemampuan reproduksi tinggi karena ditunjang oleh kematangan seksual yang cepat yaitu antara 2-3 bulan, masa bunting yang singkat yaitu antara 21-23 hari dan melahirkan keturunan dalam jumlah yang banyak hingga mencapai 20 ekor persekelahiran.
Siklus reproduksi tikus putih terdiri dari beberapa fase yaitu :
a. Proestrus adalah fase persiapan, waktunya pendek dan terjadi perubahan tingkah laku serta alat kelamin bagian luar (Partodihardjo 1987). Fase ini berlangsung selama 12 jam dan pada sediaan apus vagina terlihat adanya sel-sel kecil dengan inti bulat (Smith dan Mangkoewidjojo 1988).
b. Estrus adalah periode yang ditandai oleh keinginan kelamin dan penerimaan pejantan oleh hewan betina sehingga ciri khas dari estrus adalah terjadinya kopulasi, menghampiri pejantan dan tidak lari bila pejantan menungganginya (Partodihardjo 1987). Fase ini berlangsung selama 9-20 jam dan pada sediaan apus vagina terlihat sel epitel yang mengalami penandukan dan seringkali intinya piknotik atau tanpa inti (Smith dan Mangkoewidjojo 1988)
c. Metestrus adalah fase yang terjadi segera setelah estrus selesai dan tidak terlihat nyata berlangsung kira-kira 21 jam. Pada fase ini terbentuk corpus luteum dan terjadi penghambatan pembentukan folikel de Graaf yang lain dan mencegah terjadinya estrus (Nalbandov 1990). Pada sediaan apus vagina tampak sel-sel kornifikasi dan mulai tampak leukosit (Smith dan Mangkoewidjojo 1988).
d. Diestrus adalah periode terakhir dan terlama dari siklus birahi, dimana terjadi pematangan CL. Bila terjadi fertilisasi keberadaan CL akan dipertahankan, tetapi jika tidak terjadi regresi dari CL akibat pengaruh PGF2α (Hafez 1980). Fase ini berlangsung kira-kira 57-60 jam dan pada
Tabel 1. Data Biologi Umum Tikus
8-11 jam setelah muncul estrus, spontan Pada waktu estrus
7-10 jam 5-6 gram
Jantan : 300-400 gram Betina : 250-300 gram Rata-rata 9 ekor Diskoidal, hemokorial
2 kornua, bermuara sebelum serviks 3 betina 1 jantan
Sumber : Smith dan Mangkoewidjojo, 1988
Implantasi adalah proses yang berlangsung secara bertahap yaitu tahap persentuhan embrio dengan endometrium, terlepasnya zona pellucida, pergeseran atau pembagian tempat, dan pertautan antara trophoblast dengan epitel endometriun. Pada hewan politokus implantasi tiap-tiap embrio dalam uterus diatur oleh suatu mekanisme kontraksi myometrium hingga tidak terjadi pertimbunan embrio pada satu tempat, melainkan terjadi penyebaran keseluruh permukaan endometrium (Partodihardjo 1987).
Plasenta
Plasenta adalah suatu tenunan yang tumbuh dari embrio dan induknya yang terjalin saat waktu proses pertumbuhan embrio. Dalam plasenta terdapat dua komponen ganda yaitu selaput embrional dan selaput lendir rahim (Sukra 2000). Menurut Frandson (1992) plasenta terdiri dari susunan membran sedemikian rupa yang berisikan selaput chorion yang merupakan membran paling luar yang berkontak langsung dengan uterus maternal, allantois yang terletak diantara korion dan amnion, amnion merupakan membran yang paling dekat dengan fetus, dan kuning-kuning telur vestigial (seperti yang terlihat pada Gambar 1).
Gambar 1. Susunan embrio dan Plasenta
Tikus mempunyai bentuk plasenta tipe discoidal dan secara makroskopik susunan plasenta pada tikus yaitu hemoendothelial dimana pembuluh darah pada fetus masuk ke pool darah maternal, sehingga hanya endotel dari pembuluh darah fetal memisahkan sirkulasi induk dan anak (Frandson 1992).
Fungsi Plasenta
Plasenta berfungsi untuk pertukaran produk-produk metabolisme dan produk gas antara ibu dan janin seperti oksigen, karbon monoksida yang berlangsung secara difusi primitif, pertukaran nutrien dan elektrolit seperti asam amino, asam lemak bebas, karbohidrat, dan vitamin yang berjalan seiring usia kebuntingan, dan pemindahan antibodi induk oleh sinsitiotrophoblas dengan cara pinositosis dan selanjutnya diangkut ke pembuluh darah janin, dengan demikian janin memperoleh antibodi induk (Sadler 2000).
Menurut Hafez (1980) peranan plasenta selama masa kebuntingan adalah sebagai transport, tempat penyimpanan, dan biosintetis. Pada blastosit, nutrisi berasal dari cairan uterine dan setelah terjadi perlekatan pada endometrium, nutrisi berasal dari produk yang dihasilkan dari metabolisme endometrium. Pada awal konseptus, embrio berkembang pada uterus (endometrium) dimana kebutuhan nutrisi diambil langsung dari maternal. Dan ketika sirkulasi antara maternal dan fetal sudah mencapai keseimbangan maka nutrisi diabsorbsi dari pembuluh darah maternal ke pembuluh darah fetal melalui placental barier.
Mekanisme transport metabolit pada plasenta dilakukan secara difusi pasif, difusi fasilitatif, transport aktif, dan penyebaran bahan-bahan serta ada beberapa metabolit yang dapat memperoleh akses ke fetus melalui kontak trophoblast fetus dengan bagian uterus pada sisi plasenta (Ferrel 1989).
manusia, tikus, kucing, babi, dan sapi. Dan hormon gonadotropin diproduksi oleh
placental cytotrophoblast (Hafez 1980).
Menurut Guyton dan Hall (1997) plasenta menghasilkan beberapa hormon yaitu :
1. Pada manusia : Human Chorionic Gonadotropin yang meningkatkan pertumbuhan corpus luteum dan sekresi estrogen dan progesteron oleh korpus luteum.
2. Estrogen yang meningkatkan pertumbuhan organ kelamin induk dan beberapa jaringan janin.
3. Progesteron yang membantu perkembangan khusus dari endometrium uterus, peningkatan perkembangan dan beberapa jaringan dan organ janin, dan membantu meningkatkan perkembangan apparatus sekretori dari kelenjar mammae.
4. Pada manusia : Human somatomammotropin yang mungkin meningkatkan pertumbuhan beberapa jaringan janin serta membantu perkembangan kelenjar mammae. Sekresi ini akan meningkat dengan adanya peningkatkan ukuran plasenta dan disekresikan ke dalam sirkulasi fetus dan maternal (Ferrel 1989)
Menurut Ferrel (1989) jaringan plasenta juga memproduksi prolaktin yang berperan dalam perkembangbiakan fetus. Peran ini merupakan pelayanan sebagai “hormon pertumbuhan” fetus, stabilisasi dari produksi prostaglandin uterus, dan mungkin dalam regulasi volume cairan amnion.
Somatotropin
oleh pituitary anterior terutama oleh kelompok sel-sel asidofil khususnya sel-sel somatotrof (Muller et al 1999), dan sekresinya sangat dipengaruhi oleh faktor neural, metabolik, dan hormonal (Djojosoebagio 1990).
ST disekresi oleh kelenjar hipofisa sesuai dengan kebutuhan fisiologis yakni melalui dua pengaturan yaitu Growth Hormone Releasing Factor (GHRF) dan
Growth Hormone Inhibiting Factor (GHIF). Setelah dikeluarkan oleh hipofisa ST akan diangkut melalui sistem aliran darah, namun karena molekulnya yang besar maka tidak dapat menerobos membran sel sehingga hormon memerlukan kehadiran reseptor spesifik di membran sel (Shahib 2001; Manalu 2001).
ST mempengaruhi pertumbuhan berbagai jaringan target secara langsung maupun tidak langsung. Pengaruh tidak langsung somatotropin dalam mempengaruhi pertumbuhan adalah merangsang produksi faktor pertumbuhan yaitu dengan merangsang pembentukan Insulin Like Growth Factor (IGF-I) di hati (Campbell et al
2004) dimana IGF-I mempunyai efek kuat dalam menstimulasi pertumbuhan.
ST akan memacu gerakan asam-asam lemak tak berester dari depo lemak, sehingga mengakibatkan pengurangan lemak karkas dan menambah kandungan lipid plasma darah dan hati (Turner dan Bagnara 1976).
Pemberian ST dapat meningkatkan bobot badan ternak, memperbaiki Feed Conversion Ratio (FCR), meningkatkan kualitas karkas karena menurunkan kandungan lemak dalam daging (Omega 2003). Pada babi yang disuntikkan ST, katabolisme protein dan efisiensi makanan meningkat serta daging yang dihasilkan mempunyai kadar lemak yang sangat rendah (Bush et al 2002; Davis et al 2004) dan pemberian ST pada tikus yang diambil hipofisisnya mengalami peningkatan bobot badan .
Bovine Somatotropin
Bovine somatotropin (bST) merupakan hormon protein diproduksi oleh kelenjar pituitary sapi yang terdapat pada dasar otak hewan dan bekerja penting untuk pertumbuhan, perkembangan, dan fungsi tubuh hewan. bST yang diberikan secara injeksi bukan dengan peroral karena mengakibatkan penghambatan dan inaktivasi pembentukan asam amino dan peptida dalam saluran cerna (Biotech 2003). bST didapatkan dari kelenjar pituitary sapi yang diambil dan diekstraksi, tetapi hanya dalam jumlah yang kecil dan harganya sangat mahal. Dengan adanya kemajuan teknologi pembuatan bST dilakukan dengan membuat rekombinan bST dengan mengambil gen yang berespon terhadap produksi bST dari sapi, yang diidentifikasi dari jaringan sel sapi. Gen tersebut diisolasi dan diinokulasikan ke dalam bagian plasmid bakteri Eschericia coli. Dimana bakteri ini sering ditemukan dalam saluran pencernaan hewan maupun manusia. Kemudian hasil dari bakteri tersebut dimurnikan dan disuntikkan lagi ke sapi, untuk digunakan dalam upaya peningkatan produksi dan reproduksi sapi (seperti pada Gambar 2).
sehingga dapat mendorong proses transkripsi dan translasi dalam ribosom di dalam sitoplasma (Hardjopranjoto 1995).
E. coli
Natural bST Gene
bST
Gene Insertion Isolation and
Purification Fermentation of Protein
Gambar 2 Produksi bST (bovine Somatotropin) Sumber : Biotech 2003
Efek fisiologi dari penggunaan bST adalah peningkatan produksi dari sapi seperti peningkatan produksi susu dan berpengaruh pada reproduksi jika diberikan pada dosis tinggi dapat mengakibatkan peningkatan kematian embrio, sehingga pemberian bST sebaiknya dilakukan pada awal kebuntingan (Biotech 2003). Pemberian bST efektif untuk merangsang pertumbuhan tikus tetapi tidak untuk manusia (Harper et al 1979), hal ini dikarenakan somatotropin pada sapi dan tikus memiliki kesamaan beberapa asam amino pembentuk hormon tersebut (Turner dan Bagnara 1976). Pemberian bST pada tikus akan mengakibatkan pertambahan berat badan terus-menerus (Turner dan Bagnara 1976).
DNA dan RNA
perkembangan biologis dari seluruh bentuk kehidupan sel. Berbentuk polimer panjang nukleotida, mengkode barisan residu asam amino dalam protein dengan menggunakan kode genetik, sebuah kode nukleotida triplet, dengan nukleotida terdiri dari empat tipe: Adenine (A), Guanine (G), Cytosine (C), dan Thymine (T). DNA seringkali dirujuk sebagai molekul hereditas karena ia bertanggung jawab untuk penurunan sifat genetika dari kebanyakan ciri yang diwariskan. Informasi genetika yang diwariskan oleh keturunan dari suatu organisme ditentukan oleh barisan pasangan basa. Sebuah untai DNA mengandung gen, sebagai ”cetak biru” organisme. DNA membuat genom organisme (Hadi dan Nurlaila 2006). Selama pembelahan sel, DNA direplikasi dan dapat diteruskan ke keturunan selama reproduksi.
Ribo Nucleid Acid (RNA) atau asam ribonukleat terdiri dari benang panjang ribonukleotida. Tiap ribonukleotida terdiri dari gula pentose, molekul gugusan phospat, dan sebuah basa nitrogen. Berbeda dengan DNA, basa timin tidak terdapat pada RNA melainkan digantikan dengan basa Urasil (U) (Suryo 1986). Molekul ini jauh lebih pendek dari DNA dan ditemukan dalam jumlah yang lebih banyak didalam sel. Terdapat 3 golongan utama RNA adalah RNA data (mRNA), RNA pemindah, dan RNA ribosom. mRNA berfungsi sebagai cetakan yang digunakan oleh ribosom untuk melangsungkan proses translasi informasi genetik. Urutan nukleotida mRNA bersifat komplementer dengan pesan genetik yang terkandung di dalam potongan spesifik untai cetakan DNA (Lehninger 1998).
Tiap belah kromosom anak akan mengisi inti sel anak. Transkripsi ialah mencetak RNA yang bertujuan untuk sintesa protein. Sintesa protein dibuat untuk pembentukan sejumlah enzim yang mengkatalisa sintesa berbagai organik lain dalam sel. Jika gen aktif bereplikasi atau transkripsi maka ikatan hidrogen jadi lepas dan tiap utas jadi terentang lurus. Jika seluruh panjang satu molekul atau fragmen DNA lepas demikian, disebut denaturasi, artinya tidak dalam keadaan alami (Yatim 2000).
Sintesa Protein
Protein mempunyai peranan penting dalam organisasi struktural dan fungsional dari sel. Proses pembuatan protein menyangkut informasi genetik yang beralih dari asam nukleat ke protein. Tahap pertama ini dikenal dengan proses transkripsi, dimana tidak menimbulkan perubahan dalam kode, karena DNA dan RNA data adalah komplementer. Tahap kedua adalah proses translasi, dimana menimbulkan perubahan dalam kode yaitu dari urutan nukleotida ke urutan asam amino (Suryo 1986).
BAHAN DAN METODE
Waktu dan Tempat
Penelitian dilakukan di laboratorium Fisiologi, Departemen Anatomi, Fisiologi dan Farmakologi, Fakultas Kedokteran Hewan IPB pada bulan Mei-Desember 2006.
Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus betina dari spesies Rattus norvegicus, galur Sprague-Dawley paritas kedua dan berumur ± 16 minggu serta tikus jantan berumur ± 16 minggu untuk mengawini betina. Untuk mendapatkan tikus betina bunting dilakukan perkawinan secara alamiah dengan mencampurkan pejantan dan betina dalam satu kandang. Kebuntingan ditandai dengan adanya sperma dalam ulasan vagina.
Pemeliharaan tikus bunting dilakukan kandang hewan coba FKH IPB dan setiap tikus dikandangkan secara terpisah dalam kandang yang terbuat dari plastik berukuran 30 cm X 20 cm X 12 cm dan dilengkapi dengan kawat kasa penutup pada bagian atasnya. Pakan dan air minum dilakukan ad libitum.
Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah hormon somatotropin (bST), minyak jagung, eter, dan alkohol. Selain itu juga digunakan zat-zat kimia, antara lain untuk pengujian kadar RNA : TCA 5%, KOH 1 N, H2O, HCN 1 N, FeCl 0.1 %, orcinol, dan
standar RNA. Untuk pengujian kadar DNA : TCA 5%, P-nitrofenilhidrazin, n-butilasetat, NaOH 2 N, dan standar DNA.
Metode Penelitian
Sebanyak 36 tikus betina bunting dibagi dalam 3 kelompok percobaan yaitu K (kelompok kontrol) yang tidak diberi perlakuan apapun, M (kelompok minyak) yang disuntik dengan minyak jagung dengan dosis 0 mg bST/kg BB, dan H (kelompok hormon) yang disuntik dengan hormon somatotropin dengan dosis 9 mg bST/kg BB (Azain et al 1993). Penyuntikan dilakukan secara intra muskular (IM) pada bagian otot paha belakang kiri dan kanan secara bergantian setiap hari, dimulai pada usia kebuntingan hari ke 4 sampai dengan hari ke 12.
Fetus dikorbankan pada usia kebuntingan 13, 17, dan 21 hari untuk mengukur pertumbuhan dan perkembangan plasenta melalui pengukuran bobot, kandungan DNA, dan RNA baik dari kelompok M atau H masing-masing dengan jumlah 4 ekor.
Cara Kerja
Pembedahan tikus dilakukan untuk mengeluarkan plasenta bersama dengan fetus. Plasenta yang akan dianalisis dimasukkan kedalam alkohol 70 % dan kemudian dikeringkan dengan cara dimasukkan ke dalam oven sehingga diperoleh bahan kering bebas lemak (BKBL). Dengan menggunakan mortar, plasenta dihaluskan hingga menjadi tepung dan hasilnya yang digunakan untuk pengujian DNA dan RNA.
Metode penentuan kadar DNA dan RNA, dilakukan sesuai yang dilakukan oleh Manalu dan Sumaryadi (1998).
1. Prosedur penentuan kadar Deoxyribo Nucleic Acid (DNA)
Prinsip dari metode ini adalah terjadinya hidrolisis DNA dalam TCA. Hidrolisis ini akan mengakibatkan terjadinya reaksi pewarnaan spesifik dengan p-nitrofenilhidrazin dan NaOH serta pemecahan ikatan deoksiribose oleh pemanasan. Pengembangan warna berakhir dengan penambahan n-butilasetat dan konsentrasi DNA yang didasarkan kepekatan warna larutan dapat dibaca dengan spektrofotometer U-2001 Merk Hitachi dengan panjang gelombang 560 µm.
2.5 ml, tabung reaksi ditutup dengan tutup beraluminium foil, kemudian dipanaskan dalam penangas air mendidih selama 20 menit. Setelah itu, didinginkan dalam penangas air dingin selama 5 menit kemudian disentrifuge dengan kecepatan 1500 rpm selama 20 menit. Proses sentrifuge ini menghasilkan supernatan (1). Supernatan ini dituang ke dalam tabung reaksi dan disimpan. Endapan yang diperoleh diekstraksi ulang. Dari hasil ekstraksi ini diperoleh supernatan (2). Supernatan (1) dan (2) dicampurkan, kemudian diencerkan dengan TCA 5% hingga volumenya menjadi 7.5 ml, kemudian disimpan dalam refrigerator/ice box selama satu malam.
Tahap berikutnya adalah pewarnaan dan pengujian kadar DNA. Hal pertama yang dilakukan adalah mempersiapkan tabung reaksi yang telah dilabel untuk pembuatan blank, standar dan juga semua sampel. Standar DNA dibuat dengan konsentrasi seperti pada Tabel 2. Selanjutnya untuk masing-masing tabung diisi dengan reagen seperti yang disajikan pada Tabel 3.
Tabel 2. Konsentrasi standar DNA Konsentrasi
(μg/ml) Standar Absorbent
0 Blank (1 ml H2O) 0
5 12.5 μl stock + 987.5 μl H2O 0.003
10 25 μl stock + 975 μl H2O 0.069
20 50 μl stock + 950 μl H2O 0.088
50 125 μl stock + 875 μl H2O 0.145
100 250 μl stock + 750 μl H2O 0.194
200 500 μl stock + 500 μl H2O 0.317
Tabel 3. Konsentrasi reagen untuk uji kadar DNA
Tabung p-nitrofenil
Hidrazin TCA 5% Vol. akhir
Semua tabung ditutup dengan aluminium foil dan diletakkan kembali pada penangas air mendidih selama 20 menit, kemudian didinginkan selama 5 menit. Selanjutnya ditambahkan n-butilasetat (2.5 ml) dan dikocok selama 7 kali, kemudian disentrifuge dengan kecepatan 2000 rpm selama 10 menit. Aliquots yang terbentuk diambil 1.5 ml dan ditambahkan 0.5 ml NaOH 2 N pada setiap tabung. Larutan diencerkan dengan ditambahkan H2O sebanyak 0.5 ml. Larutan divorteks, selanjutnya
dibaca dengan spektrofotometer U-2001 Merk Hitachi dengan panjang gelombang 560 µm. Sebelumnya alat dipanaskan 15 menit dan setiap 25 sampel distandarisasi lagi untuk blanko.
Faktor pengenceran sampel adalah 12.5 mg BKBL/7.5 ml TCA 5% = 1.67 mg BKBL/ml. Sampel yang dibaca sebanyak 1 ml = 1 x 1.67 = 1.67 mg BKBL. Misal hasil baca spektrofotometer = Y μg/ml. Jadi konsentrasi DNA sampel = Y/1.67 μg/mg BKBL.
2. Prosedur penentuan kadar Ribo Nucleic Acid (RNA)
dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Setiap sampel ditambahkan KOH 1 N sebanyak 1.5 ml, kemudian tabung reaksi ditempatkan pada penangas air 37oC selama 5 jam. Setelah itu, tabung reaksi ditempatkan di dalam wadah yang berisi es dan ditambahkan 150 μl HCL 6 N. Masih di tempat yang sama, larutan ditambahi 1.65 ml TCA 5% sehingga terbentuk larutan putih keruh. Larutan yang terbentuk disentrifuge dengan kecepatan 1800 rpm selama 15 menit. Supernatan hasil ekstraksi pertama dan kedua diencerkan sampai volume 7.5 ml dengan TCA 5%. Tahap berikutnya setelah tahap ekstraksi adalah tahap pewarnaan, kedua tahap ini harus dilakukan pada hari yang sama.
Tahap pewarnaan dan pengujian RNA diawali dengan mempersiapkan tabung reaksi untuk blank, standar dan sampel. Untuk pembuatan standar RNA, digunakan stock RNA standar stock 2 mg/ml (2000 μg/ml). Standar RNA dibuat dengan ketentuan seperti pada Tabel 4. selanjutnya masing-masing tabung diisi reagen sesuai dengan Tabel 5.
Tabel 4. Konsentrasi standar RNA Konsentrasi
(μg/ml) Standar Absorbent 0 Blank (1 ml H2O + 1 mlTCA 5%) 0
10 5 μl stock + 995 μl H2O 0.078
20 10 μl stock + 990 μl H2O 0.190
40 20 μl stock + 980 μl H2O 0.482
60 30 μl stock + 970 μl H2O 0.706
80 40 μl stock + 960 μl H2O 0.845
100 50 μl stock + 950 μl H2O 1.133
Tabel 5. Labeling untuk pewarnaan dan pengujian kadar RNA
Tabung FeCl3 0.1% Orcinol Vol. akhir
Blank 1 ml H2O
1 ml TCA 5%
Standar a 0.5 ml standar 200 1 ml 0.1 ml 1.6 ml Standar b 0.5 ml standar 100 1 ml 0.1 ml 1.6 ml
.
Standar h 0.5 ml standar 0 1 ml 0.1 ml 1.6 ml Sampel 1 0.5 ml sampel 1 1 ml 0.1 ml 1.6 ml Sampel 2 0.5 ml sampel 2 1 ml 0.1 ml 1.6 ml
.
Sampel 36 0.5 ml sampel 36 1 ml 0.1 ml 1.6 ml
Larutan akan berwarna kuning, selanjutnya semua tabung ditutup dengan tutup beraluminium foil dan diletakkan pada penangas air mendidih selama 30 menit dan diusahakan pemanasan merata untuk setiap tabung sehingga larutan akan berwarna hijau. Konsentrasi RNA di dalam tabung dibaca dengan spektrofotometer U-2001 Merk Hitachi dengan panjang gelombang 670 μm dan sebelumnya alat dipanaskan 15 menit, setiap 25 sampel distandarisasi lagi untuk blanko.
Faktor pengenceran sampel adalah 12.5 mg BKBL/7.5 ml TCA 5% = 1.67 mg BKBL/ml. Sampel yang dibaca sebanyak 0.5 ml = 0.5 x 1.67 = 0.835 mg BKBL. Misalkan hasil baca spektrofotometer = Y μg/ml. Jadi konsentrasi RNA sampel = Y/0.835 μg/mg BKBL.
Analisis Statistik
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dziuk (1992) menyatakan bahwa potensi pertumbuhan anak dipengaruhi oleh kondisi sejak berada dalam kandungan maka asupan nutrisi untuk fetus harus bagus. Pemberian bovine Somatotropin (bST) dengan dosis 0 mg/kg BB dan 9 mg/kg BB secara IM pada tikus putih bunting dilakukan untuk melihat kemampuannya dalam meningkatkan fungsi dari plasenta dalam pertukaran nutrisi dan metabolit dari induk ke anak dan sebaliknya. Tabel 6 menyajikan data pengaruh penyuntikan bST pada hari kebuntingan 4 sampai dengan 12 terhadap pertumbuhan dan perkembangan dari plasenta tikus bunting 13, 17, dan 21 hari.
Tabel 6. Bobot basah, bobot kering, kadar air, pada umur kebuntingan 13, 17, dan 21 hari.
Huruf superscript yang sama pada baris yang sama menunjukkan bahwa data tidak
berbeda nyata (p>0.05)
Bobot basah dan kering hari 13 : Bobot plasenta + fetus
Gambar 3a. Bobot Basah Plasenta
Gambar 3b. Bobot Kering Bebas Lemak Plasenta
80
Hasil penelitian menunjukkan bahwa bST 9 mg/kg BB hanya memberikan pengaruh terhadap bobot kering bebas lemak plasenta. Ini terlihat bahwa pada hari ke-13 kebuntingan bobot kering bebas lemak plasenta lebih tinggi dibandingkan dengan kedua perlakuan lain tetapi tidak diiringi dengan peningkatan bobot basah. Hal ini menunjukkan bahwa bST tidak meretensi air tetapi justru menaikkan proliferasi sel-sel plasenta.
Penyuntikan bST pada tikus dilakukan pada hari ke 4 sampai dengan 12 kebuntingan sedangkan masa plasentasi pada tikus terjadi pada umur kebuntingan 12 hari sehingga pemberian bST dapat diandalkan untuk membantu proses tersebut. Secara fisiologis pada awal-awal kebuntingan plasenta belum tumbuh sempurna dimana membran plasma masih berbentuk padat dan belum terisi cairan serta belum berkembang sepenuhnya sehingga daerah permukaannya sempit karena plasenta belum tumbuh sempurna, tetapi seiring dengan pertambahan umur kebuntingan dan pertumbuhan umur fetus terjadi peningkatan konduktivitas dan permeabilitas mengakibatkan penipisan lapisan-lapisan difusi membran dan daerah permukaan menjadi sangat luas (Guyton dan Hall 1997). Hal ini yang menyebabkan bobot kering bebas lemak lebih tinggi secara signifikan pada umur kebuntingan 13. Selain itu peningkatan yang terjadi pada umur kebuntingan 13 karena plasenta dan fetus merupakan satu kesatuan yang tidak dapat dipisahkan.
Bila terlihat adanya peningkatan bobot basah pada plasenta pada hari ke 17 dan 21 umur kebuntingan karena pada umur tersebut fungsi plasenta telah berlangsung baik dalam penyaluran nutrisi, menghasilkan hormon untuk mempertahankan kebuntingan serta transfer air yang digunakan untuk memperluas ruang cairan (Ferrel 1989). Dan juga dengan meningkatnya ukuran embrio, maka proses difusi tidak mencukupi lagi sehingga membran ekstrak embrional diperlukan sebagai sarana untuk mencukupi meningkatnya kebutuhan nutrisi yang lebih banyak (Mc Donald 1980).
fetus dan sisa metabolit dari fetus ke induk. Peningkatan bobot basah juga diduga sebagai pengaruh fungsi plasenta dalam menghasilkan hormon untuk mempertahankan kebuntingan dan proses reproduksi lainnya yang semakin meningkat misalnya plasenta akan menghasilkan placental lactogen yang dapat meningkat dengan adanya peningkatan ukuran plasenta dan hormon ini disekresikan ke dalam sirkulasi fetus dan maternal (Ferrel 1989).
Tabel 7. Konsentrasi dan total DNA dan RNA pada umur kebuntingan 13, 17, dan 21 hari.
Huruf superscript yang sama pada baris yang sama menunjukkan bahwa data tidak
berbeda nyata (p>0.05)
kontrol (seperti pada Gambar 4). Terjadinya peningkatan konsentrasi DNA pada kelompok minyak dan hormon dapat diasumsikan adanya faktor cekaman dan stres sehingga menyebabkan dikeluarkannya growth hormon endogen, glukagon, dan hormon lain (Guyton dan Hall 1997). Penyuntikan bST mempunyai pengaruh untuk meningkatkan proliferasi sel seperti sel trophoblast yang nantinya akan berkembang membentuk penonjolan-penonjolan vili plasenta yang berguna untuk transfer nutrien. DNA mengandung instruksi genetik yang menentukan perkembangan biologis (Hadi dan Nurlaila 2006) dan menurut Guyton dan Hall (1997) dengan pemberian somatotropin dapat mengakibatkan peningkatan transkripsi inti DNA yang berpengaruh pada peningkatan RNA.
50
Gambar 4. Konsentrasi DNA Plasenta
kegiatan metabolisme, biosintesa, pertumbuhan, pernafasan, dan perkembangbiakan dari sel (Suryo 1986)
80
Gambar 5. Konsentrasi RNA Plasenta
Pada hari kebuntingan ke 13 dan 17 terjadi peningkatan proliferasi sel diiringi dengan peningkatan aktivitas sintetis sel-sel pada plasenta dimana pada usia kebuntingan 13 kadar RNA adalah yang tertinggi, yaitu saat awal penghentian pemberian bST (pada hari ke 12). Somatotropin merangsang aktivasi sintesa protein pada sel-sel yang mengalami proliferasi. Mendekati hari terjadinya partus (yaitu pada usia kebuntingan 21) aktivitas sel-sel ini terlihat menurun bila dilihat dari kadar RNA. Proliferasi sel yang terjadi pada hari ke 21 tidak lagi diiringi oleh aktivitas sintesa sel-sel tersebut. Penurunan ini diduga karena efek bST sudah mulai berkurang dan juga kinerja dari plasenta mulai menurun, sedangkan pada hari ke 21 kadar DNA yang masih tinggi diduga karena efek endogenous estrogen yang mulai meningkat saat menjelang partus. Yamashita et al (1990) menyatakan bahwa proliferasi sel-sel uterus diatur oleh estrogen, sehingga dapat diasumsikan bahwa estrogen juga menyebabkan proliferasi sel-sel pada plasenta.
pertukaran nutrien dan elektrolit seperti asam amino, asam lemak bebas, karbohidrat, dan vitamin yang berjalan seiring usia kebuntingan. Selain itu plasenta juga berfungsi dalam pemindahan antibodi induk yang diambil oleh sinsitiotrophoblast dengan cara pinositosis dan selanjutnya diangkut ke pembuluh darah janin sehingga janin memperoleh antibodi induk (Sadler 2000). Plasenta juga menghasilkan hormon yang berfungsi untuk menjaga fetus selama kebuntingan seperti estrogen, progesteron, dan placental lactogen.
KESIMPULAN DAN SARAN
KESIMPULAN
Pemberian bST dengan dosis 9 mg/kg BB pada usia kebuntingan 4 sampai dengan 12 hari mempunyai efek pada pertumbuhan dan perkembangan plasenta yaitu meningkatkan kadar DNA, tetapi bST tidak mempengaruhi aktivitas sintetis sel (RNA).
SARAN
DAFTAR PUSTAKA
APHIS. 2003. Bovine Somatotropin. www.aphis.usda.gov/vs/ceah/cahm. [ 17 februari 2007]
Azain MJ, Kasser TR, Sabacky MJ, Baile CA. 1993. Comparison of Growth-Promoting Properties of Daily Versus Continous Administration of Somatotropin in Female Rats With Intact Pituitaries. J Anim Sci 71 : 384-392. Ballenger L. 2001. Rattus norvegicus. Animal Diversity Web.
Http://animaldiversity.ummz.umich.edu/site/accounts/information/Rattus_nov ergicus.html. [2004]
Biotech. 2003. Biotechnology Information Series. Http.// www. biotech. iastate. edu/ biotech_info_series/bio3. html. [17 februari 2007].
Bush JA et al. 2002. Somatotropin Induced Amino Acid Conservation in Pigs Involves Differential Regulation of Liver and Gut Area Cycle Enzyme Activity.
J Nutr 132 : 59-67.
Campbell NA, Reece JB, Mitchell LG. 2004. Biology (Biologi jilid III). Edisi 5. Manalu W (Alih bahasa). Terjemahan dari :Jakarta : penerbit Erlangga.
Davis TA et al. 2004. Somatotropin Regulation of Protein Metabolism in Pigs. J Anim Sci 82 : 207-210
Djojosoebagio S. 1990. Fisiologi Kelenjar Endokrinologi. Vol 1. Bogor : Pusat Antar Universitas Ilmu Hayat. Institut Pertanian Bogor.
Dziuk PJ. 1992. Embryonic Development and Fetal Growth. In: Clinical Trends and Basic Research In Animal Reproduction. Dieleman SJ, B Collenbrander, P Booman, T Van Der Lende (Edt). Anim. Reprod. Sci. 28 : 59-308.
Ferell CL. 1989. Placental Regulation of Fetal Growth. In : Animal Growth Regulation. DR Campion, GJ Hausman, RJ Martin (Editors). New York and London : Plenum Press. pp : 3-15.
Frandson RD. 1992. Anatomi dan Fisiologi Ternak. Edisi IV. B Srigandono, Koen P (Alih bahasa). Yoygakarta: Gajah Mada University Press.
Guyton AC, Hall JE. 1997. Text Book of Medical Physiology (Fisiologi Kedokteran. Edisi XI). Irawati S, Ken AT, Alex S (Alih bahasa). Jakarta: ECG.
Hafez ESE. 1980. Reproduction in Farm Animals. 4th edition. Philadelphia: Lea & Febinger.
Hardjopranjoto S. 1995. Ilmu Kemajiran Pada Ternak. Surabaya: Airlangga University Press.
Harper HA, Rodwell VW, Mayes PA. 1979. Review of Physiological Chemistry. Los Altos California: Lange Medical Publicatoins.
Hill M .2007. Placenta Histology
embryology.med.unsw.edu.au/Notes/placenta5.htm. [20 juli 2007]
Johnson M, Barry E. 1984. Essential Reproduction. Second Edition. Boston Melbourne: Blackwell Scientific Publications.
Lehninger AL. 1998. Principles Of Biochemistry (Dasar-dasar Biokimia). Maggy Thenawidjaja (Alih bahasa). Jakarta: Penerbit Erlangga.
Malole MBM, CS Pramono. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan Laboratorium. Bogor: Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat Jendral Pendidikan dan Kebudayaan, Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Pusat Antar Universitas Bioteknologi, Institut Pertanian Bogor.
Manalu W, Sumaryadi MY. 1998. Maternal serum progesteron concentration during gestation mammary gland growth and development at parturition in javanese thin-tail ewes with carrying a single or multiple fetuses. Small Rum Ress 27 : 131-136.
Manalu W. 2001. Somatotropin dalam industri peternakan sapi perah. Prosiding Diskusi Sehari Problema Penggunaan Hormon Dalam Produksi Ternak : Bandung, 3 Februari 2001, Bandung : Jurusan Nutrisi dan Makanan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Padjajaran. Hlm: 1-5
Mc Donald LE. 1980. Veterinary Endocrinology and Reproduction. 3rd Edit . Philadelphia: Lea and Febringer. pp: 21-23.
Muller EE, Locatelli V, Cocchi D. 1999. Neuroendocrine Control of Growth Hormone Secretion. Physiological Reviews 79 : 511-607.
Nalbandov AV. 1990. Fisiologi Reproduksi pada Mammalia dan Unggas. Jakarta: University Indonesia Press.
Partodihardjo S. 1987. Ilmu Reproduksi Hewan. Jakarta: Mutiara Sumber Widya. Sadler TW. 2000. Langman’s Medical Embriology (Embriologi kedokteran
Langman). Joko S (Alih bahasa) Jakarta: EGC.
Shahib NM. 2001. Hormon dari Klinik Ke Bioteknologi. Prosiding Diskusi Sehari Problema Penggunaan Hormon Dalam Produksi Ternak : Bandung, 3 Februari 2001, Bandung : Jurusan Nutrisi dan Makanan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Padjajaran. hlm 6-13
Smith JB, S Mangkoewidjojo. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan Di Daerah Tropis. Depok: UI Press.
Sukra Y. 2000. Wawasan Ilmu Pengetahuan Embrio Benih Masa Depan. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Departemen Pendidikan Nasional Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor
Steel RGD, Torrie JH. 1993. Prinsip dan Prosedur Statistik. Sumantri B (Alih bahasa). Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.
Suryo. 1986. Genetika . Yoygakarta: Gajah Mada University Press.
Toelihere MR. 1985. Fisiologi Reproduksi pada Ternak. Bandung: Penerbit Angkasa Bandung.
Turner CD, JT Bagnara. 1976. Endokrinologi Umum. Ed.6. Yogyakarta: Airlangga University Press.
Yamashinta S, Newbold RR, Melachan JA, Korach KS. 1990. The roles of estrogen receptor in uterine epithelium proliferation and cytodifferentiation in neonatal mice. Endocrinology 127 : 2456-2463.
Lampiran 1. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari
Lampiran 2. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari kebuntingan 17
Lampiran 3. Analisa data hasil penghitungan bobot basah plasenta hari kebuntingan 21
Lampiran 5. Analisa data hasil penghitungan bobot kering bebas lemak plasenta
Lampiran 6. Analisa data hasil penghitungan bobot kering bebas lemak plasenta hari kebuntingan 21
Lampiran 7. Analisa data hasil penghitungan kadar air plasenta hari kebuntingan 13
Lampiran 9. Analisa data hasil penghitungan kadar air plasenta hari
Lampiran 10. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi DNA plasenta hari kebuntingan 13
Lampiran 11. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi DNA plasenta hari kebuntingan 17
Lampiran 13. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari
Lampiran 14. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari kebuntingan 17
Lampiran 15. Analisa data hasil penghitungan total DNA plasenta hari kebuntingan 21
Lampiran 17. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi RNA plasenta hari
Lampiran 18. Analisa data hasil penghitungan konsentrasi RNA plasenta hari kebuntingan 21
Lampiran 19. Analisa data hasil penghitungan total RNA plasenta hari kebuntingan 13
Lampiran 21. Analisa data hasil penghitungan total RNA plasenta hari kebuntingan 21
Source DF Sum of Squares Mean Square F value Pr>F Model 2 0.029 0.015 0.02 0.979
Error 9 6.011 0.668 Corrected
Total
