Aktivitas enzim protease dari bacillus sbtilis pada media limbah cair tahu

(1)

(2)

RENNY R O C H A N I . F 1 9 . 1 5 4 1 . A k t i v i t a s e n z i m p r o t e a s e d a r i

3 a c i l l u s s u b t i l i s . p a d a m e d i a l i m b a h c a i r t a h u . O i b a w a h b i m b i n g a n P r o f . O r . FG W i n a r n o d a n 11. W i n i a t i P u d j i R a h a j u .

RINGKASAN

S a c i l l u s s u b t i l i s m e r u p a k a n s a l a h s q t u j e n i s b a k t e r i y a n g s a n g a t p o t e n s i a l d a l a m m e n g h a s i l k a n e n z i m p r o t e a s e . P a d a p e n e l i t i a n i n i a k a n d i l i h a t a k t i v i t a s e n z i m p r o t e a s e y a n g d i h a s i l k a n o l e h S a c i l l u s s u b t i l i s y a n g d i d a p a t d a r i l a b o r a t o r i u m M i k r o b i o l o g i P a n g a n 3 u r u s a n T e k n o l o g i P a h g a n o a n G i z i , F a t e t a - I P 3 , y a n g o i t u m b u h k a n p a a a m e d i a l i r n b a h c a i r t a h u .

B a c i l l u s s u b t i l i s d i t u r n b u h k e n p a d a 5 0 m l l i m b a h

c a i r

+ - L - . Cdilil d e n g a n s u h u i n k u c - - : _{- = a -}

3 7 ' ~ < a l a z i ~ k c ~ a t ~ z b e r ; c y a n ; d e n g a n k e c e p a t a n 1 0 0 p u t a r a n / m e n i t . S e b a g a i p e m b a n d i n g d i - l a k u k a n p e n u m b u h a n B a c i l l u s s u b t i l i s p a d a m e d i a s i n t e t i k s e p e r t i y a n g d i l a k u k a n o l e h May d a n E l l i o t t ( 1 9 6 8 ) , kemu- d i a n d i u k u r a k t i v i t a s n y a .

B a c i l l u s s u b t i l i s y a n g d i t u m b u h k a n p a d a l i m b a h

c a i r

t a h u d e n g a n pH a w a l

6 . 5 ;

7 . 5 ; 8 . 5 ; d a n 9 . 5 m e n u n j u k k a n

k e -

(3)

Penambahan d e k s t r o s a s e b a n y a k 2, 4, 6 d a n 8 p e r s e n d a - p a t m e n u r u n k a n a k t i v i t a s p r o t e a s e yang d i h a s i l k a n . Semakin t i n g g i k o n s e n t r a s i d e k s t r o s a d a l a m m e d i a , s e m a k i n r e n d a h a k t i v i t a s p r o t e a s e n y a .

Fenambahan u r e a s e b a n y a k 0.257 p e r s e n d a l a m l i m b a h c a - i r t a h u j u g a t i d a k m e m b e r i k a n p e n i n g k a t a n t e r h a d a p a k t i v i - t a s p r o t e a s e , m a l a h c e n d e r u n g m e n g a l a m i p e n u r u n a n .

P r o d u k s i p r o t e a s e y a n g d i h a s i l k a n pada l i m b a h c a i r t a - h u t a n p a penambahan sumber k a r b o n d a n sumber n i t r o g e n b e r k i - s a r a n t a r a 0.8219 Anson u n i t / l s a m p a i 1.5520 Rnson u n i t / l d e n g a n pH a w a l m e d i a 9.5.

(4)

A K T I V I T S S

E N Z I K

PROTEASE D n K I S a c i l l u s s u b t i l i s

?ADA

<qEDIA LIMaAH C A I R TAHU

O l e h : RENNY ROCHSNI F 1 9 . 1 6 4 1

S K R I P S I

S e b a g a i s e l a h s a t u s y a r a t u n t u k m e m p e r o l e h g e l a r SRR2AidA TEKNOLOGI & ~ T A N I A N

p a d a J u r u s a n TEKNOLOGI PRtJGAN D A N G I Z I

-

F a k u l t a s l e k n o l o g i F e r t a n i a n I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r

1 3 8 6

FdKULTkS TEKNOLOGI PE3T.?NIP8iq I N S T I T U T PE2TANIAid B O G 0 3

(5)

INSTITUT PERTANIAN BOGOR FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

AKTIVITAS

E N Z I M

PROTEASE

D A R I

B a c i l l u s s u b t i l i s PAD2 MEDIA LIMBAH CAIR

T A H U

S e b a g a i s a l a h s a t u s y a r a t u n t u k r n e m p e r o l e h g e l z r S f i 3 J A N A TEKNOLUGI PERTRIiIAN

p a d a 3 u r u s a n TEKNOLOGI PANGAN 36P: Z i Z I F a k u l t a s T e k n o l o g i P e r t a n i a n

I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r

O l e h : i?ENNY HUCHANI

F 1 9 . 1 6 4 1

O i l a h i r k a n p a d ? t a n g g a l 3 _{f i g u s t u s 1 9 5 4}

d i C i r e b o n

T a n g g a l l u l u s : 2 0 S e p t e n ~ b e r 1 9 8 6

(6)

K A T A PENGAMTAR

-

P u j i s y u k u r p e n u d i s p a n j a t k a n k e p a d a i u h a n Yang Maha Esa y a n g t e l a h m e n b e r i k a n r a h m a t d a n a n u q e r a h s e r t a b i m b i - nqan k e p a d a p e n u l i s h i n g q a p e n u l i s d a p a t m e n y e i e s a i k a n t u - gas a k h i r d a n p e n v u s u n a n s k r i p s i i n i ,

S k r i p s i i n i d i s u s u n b e r d a s a f k a n h a s i l p e n e l i t i a n y a n g t e l a h d i l a k u k a n s e l a m a empat b u l a n d i l a b o r a t o r i u m F u s b a n g -

-

t e p a ( P u s a t Pengembangan i e k n o l o g i P a n g a n ) , I n s t i t u t P e r t a - n i a n B o g o r .

P e n u l i s t e l a h b e r u s a h a u n t u k m e n y a j i k a n s k r i p s i i n i d e n q a n s e b a i k - b a i k n y a , t e t a p i d i s a d a r i j u q a m a s i h a d a n y a t

k e k u r a n q a n - k e k u r a n q a n . G i e h k a r e n a i t u k r i t i k d a n s a i a n y a n q membangun s a n g a t d i h a r a p k a n u n t u k m e m p e r b a i k i p e n u l i - s a n s e l a n j u t n y a .

Pada k e s e m p a t a n i n i , p e n u l i s juga:mengwcepkan t e r i m a k a s i h y a n q s e b e s a r - b e s a r n y a k e p a d a :

1. Bapak P r o f . D r . FG W i n a r n o s e b a g a i d o s e n p a n b i m b i n g utama yang t e l a h m e m b e r i k a n b i m b i n q a n s e l a m a pene- l i t i a n s a m p a i t e r s u s u n n y a s k r i p s i i n i .

2. I b u I r . W i n i a t i P u d j i Z a h a j u s e b a g a i o o s e n pembim- b i n g p e n d a m p i n q y s n g t e l s h m e n b e r i k a n b i m b i n g a n se- l a m a p e n e l i t i a n s a m p a i t e r s u s u n n y a s k r i p s i i n i .

(7)

4. Sernua p i h a k y a n g t e l a h rnernberikan b a n t u a n n y a , yang t i d a k d a p a t p e n u l i s s e b u t k a n s a t u p e r s a t u .

A k h i r u l k a t a , sernoga s k r i p s i i n i b e r r n a n i a a t b a g i p i h a k

yang rnernerlukannya.

(8)

DAFTAR I S 1

H a l a m a n OAFTAR TABEL

...

v i i OAFTAR GAMBAR

...

v i i i OAFTAR L A M P I R A N

...

i x

I. PENOAHULUAN

...

1

I 1

.

T I N J A U A N PUSTAKA

...

4

A

.

L I M B A H C A I R TAHU

...

4

B

.

ENZIN PROTEOLITIK

...

a

C

.

MIKROORGANISMA P E N G H A S I L E N Z I M

PROTEASE

...

1 4 0

.

M E D I A F E R M E N T A S I

...

1 7

...

E

.

S I N T E S A DFIN PROOUKSI E N Z I l r l PROTEASE 2 0 F

.

A K T I U I T A S E N Z I M

...

2 3

...

G

.

KEGUNAAN E N Z I M PROTEASE 2 5

111

.

METODA P E N E L I T I A N

...

2 7 A

.

BAHAN DAN A L A T

...

2 7

2

.

A l a t

...

3 0

8

.

_{METOOA P E N E L I T I A N}

...

_{3 1}

1

.

P k n e l i t i a n t a h a p I ...a. 3 1

2

.

P ' e n e l i t i a n t a h a p 11

...

3 5 3

.

P e n e l i t i a n t a h a p I11

...

3 6

4

.

P e m b u a c a n k u r v a s t a n d a r

...

3 7

...

I V

.

H A S I L DAN PERBAHASAN 39

...

.

(9)

Haiaman

...

1

.

K o r n p o s i s i l i m b a h c a i r t a h u 3 9

...

2

.

P e n g u k u r a n a k t i v i t a s p r o t e a s e 4 1

3

.

P e n g u j i a n kernampuan B a c i l l u s t i l i s u n t u k r n e n g h a s i l k a n e n z i m

p r o t e a s e

...

4 2

...

4

.

P e n e n t u a n r a n g e pH 4 2

B

.

PENGARUH pH AWAL FERMENTASI TERHRDAP

AKTIVITAS PROTEASE

...

4 3

C

.

?E?dGARUH PENAMBAHAN D i K S T R O S A 3AN UREA

TEZHAUAP AKTIVITAS PROTEASE

...

4 8 V

.

KESIMPULAN DAiU S A R A N

...

5 7

...

DAFTAR PUSTAKA 5 0

(10)

DAFTAR TABEL

H a l a m a n T a b e l 1.

T a b e l 2 .

-

l a b e l

3 . .

T a b a l B .

T a b e l

5.

T a b e l

6.

T a b e l 7 .

T a b e l 8 .

T a b e l

9 .

T a b e l 1 0 .

K o m p o s i s i z a t g i z i d a n a s a m a m i n o

...

p a d a k e d e l a i d a n t a h u 5

...

K o m p o s i s i l i m b a h c a i r t a n u 6 K l a s i f i k a s i , p r o t e i n a s e d a r i m i k r o -

o r g a n i s m a

...

10 R i k r o o r g a n i s m a p e n g h a s i l e n z i m p r o -

...

t e a s e e k s t r a s e l u l e r 1 4

P r o d u k s i e n z i m p r o t e a s e p a d a m e d i a

s e l e k t i f

...

1 6 K o m p o s i s i m e d i a u n t u k B a c i l l u s d a n

k a p a n g p e n g h a s i l p r o t e a s e . . . 18 K o m p o s i s i m e d i a u n t u k m e m p r o d u k s i

...

p r o t e a s e p a d a l a b u b e r g o y a n g

L9

A n a l i s a e n z i m p r o t e a s e d e n g a n s u b s t r a t

h e m o g l o b i n

...

;...

3 3 K o m p o s i s i m e d i a s i n t e t i k u n t u k B a c i l l u s

...

s u b t i l i s p e n g h a s i l p r o t e a s e 3 4

...

K o m p o s i s i l i m b a h c a i r t a h u 3 9

(11)

(12)

(13)

(14)

(15)

(16)

(17)

(18)

(19)

(20)

(21)

(22)

(23)

(24)

(25)

(26)

(27)

(28)

(29)

(30)

(31)

(32)

(33)

(34)

(35)

(36)

(37)

(38)

(39)

(40)

(41)

(42)

(43)

(44)

(45)

(46)

(47)

(48)

(49)

(50)

(51)

(52)

(53)

(54)

(55)

(56)

(57)

(58)

(59)

(60)

(61)

(62)

(63)

(64)

(65)

(66)

(67)

(68)

(69)

(70)

(71)

(72)

(73)

(74)

(75)

(76)

(77)

(78)

(79)

(80)

(81)

(82)

(83)

RENNY R O C H A N I . F 1 9 . 1 5 4 1 . A k t i v i t a s e n z i m p r o t e a s e d a r i

3 a c i l l u s s u b t i l i s . p a d a m e d i a l i m b a h c a i r t a h u . O i b a w a h b i m b i n g a n P r o f . O r . FG W i n a r n o d a n 11. W i n i a t i P u d j i R a h a j u .

RINGKASAN

S a c i l l u s s u b t i l i s m e r u p a k a n s a l a h s q t u j e n i s b a k t e r i y a n g s a n g a t p o t e n s i a l d a l a m m e n g h a s i l k a n e n z i m p r o t e a s e . P a d a p e n e l i t i a n i n i a k a n d i l i h a t a k t i v i t a s e n z i m p r o t e a s e y a n g d i h a s i l k a n o l e h S a c i l l u s s u b t i l i s y a n g d i d a p a t d a r i l a b o r a t o r i u m M i k r o b i o l o g i P a n g a n 3 u r u s a n T e k n o l o g i P a h g a n o a n G i z i , F a t e t a - I P 3 , y a n g o i t u m b u h k a n p a a a m e d i a l i r n b a h c a i r t a h u .

B a c i l l u s s u b t i l i s d i t u r n b u h k e n p a d a 5 0 m l l i m b a h

c a i r

+ - L - . Cdilil d e n g a n s u h u i n k u c - - : _{- = a -}

3 7 ' ~ < a l a z i ~ k c ~ a t ~ z b e r ; c y a n ; d e n g a n k e c e p a t a n 1 0 0 p u t a r a n / m e n i t . S e b a g a i p e m b a n d i n g d i - l a k u k a n p e n u m b u h a n B a c i l l u s s u b t i l i s p a d a m e d i a s i n t e t i k s e p e r t i y a n g d i l a k u k a n o l e h May d a n E l l i o t t ( 1 9 6 8 ) , kemu- d i a n d i u k u r a k t i v i t a s n y a .

B a c i l l u s s u b t i l i s y a n g d i t u m b u h k a n p a d a l i m b a h

c a i r

t a h u d e n g a n pH a w a l

6 . 5 ;

7 . 5 ; 8 . 5 ; d a n 9 . 5 m e n u n j u k k a n

k e -

(84)

Penambahan d e k s t r o s a s e b a n y a k 2, 4, 6 d a n 8 p e r s e n d a - p a t m e n u r u n k a n a k t i v i t a s p r o t e a s e yang d i h a s i l k a n . Semakin t i n g g i k o n s e n t r a s i d e k s t r o s a d a l a m m e d i a , s e m a k i n r e n d a h a k t i v i t a s p r o t e a s e n y a .

Fenambahan u r e a s e b a n y a k 0.257 p e r s e n d a l a m l i m b a h c a - i r t a h u j u g a t i d a k m e m b e r i k a n p e n i n g k a t a n t e r h a d a p a k t i v i - t a s p r o t e a s e , m a l a h c e n d e r u n g m e n g a l a m i p e n u r u n a n .

P r o d u k s i p r o t e a s e y a n g d i h a s i l k a n pada l i m b a h c a i r t a - h u t a n p a penambahan sumber k a r b o n d a n sumber n i t r o g e n b e r k i - s a r a n t a r a 0.8219 Anson u n i t / l s a m p a i 1.5520 Rnson u n i t / l d e n g a n pH a w a l m e d i a 9.5.

(85)

A K T I V I T S S

E N Z I K

PROTEASE D n K I S a c i l l u s s u b t i l i s

?ADA

<qEDIA LIMaAH C A I R TAHU

O l e h : RENNY ROCHSNI F 1 9 . 1 6 4 1

S K R I P S I

S e b a g a i s e l a h s a t u s y a r a t u n t u k m e m p e r o l e h g e l a r SRR2AidA TEKNOLOGI & ~ T A N I A N

p a d a J u r u s a n TEKNOLOGI PRtJGAN D A N G I Z I

-

F a k u l t a s l e k n o l o g i F e r t a n i a n I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r

1 3 8 6

FdKULTkS TEKNOLOGI PE3T.?NIP8iq I N S T I T U T PE2TANIAid B O G 0 3

(86)

INSTITUT PERTANIAN BOGOR FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

AKTIVITAS

E N Z I M

PROTEASE

D A R I

B a c i l l u s s u b t i l i s PAD2 MEDIA LIMBAH CAIR

T A H U

S e b a g a i s a l a h s a t u s y a r a t u n t u k r n e m p e r o l e h g e l z r S f i 3 J A N A TEKNOLUGI PERTRIiIAN

p a d a 3 u r u s a n TEKNOLOGI PANGAN 36P: Z i Z I F a k u l t a s T e k n o l o g i P e r t a n i a n

I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r

O l e h : i?ENNY HUCHANI

F 1 9 . 1 6 4 1

O i l a h i r k a n p a d ? t a n g g a l 3 _{f i g u s t u s 1 9 5 4}

d i C i r e b o n

T a n g g a l l u l u s : 2 0 S e p t e n ~ b e r 1 9 8 6

(87)

K A T A PENGAMTAR

-

P u j i s y u k u r p e n u d i s p a n j a t k a n k e p a d a i u h a n Yang Maha Esa y a n g t e l a h m e n b e r i k a n r a h m a t d a n a n u q e r a h s e r t a b i m b i - nqan k e p a d a p e n u l i s h i n g q a p e n u l i s d a p a t m e n y e i e s a i k a n t u - gas a k h i r d a n p e n v u s u n a n s k r i p s i i n i ,

S k r i p s i i n i d i s u s u n b e r d a s a f k a n h a s i l p e n e l i t i a n y a n g t e l a h d i l a k u k a n s e l a m a empat b u l a n d i l a b o r a t o r i u m F u s b a n g -

-

t e p a ( P u s a t Pengembangan i e k n o l o g i P a n g a n ) , I n s t i t u t P e r t a - n i a n B o g o r .

P e n u l i s t e l a h b e r u s a h a u n t u k m e n y a j i k a n s k r i p s i i n i d e n q a n s e b a i k - b a i k n y a , t e t a p i d i s a d a r i j u q a m a s i h a d a n y a t

k e k u r a n q a n - k e k u r a n q a n . G i e h k a r e n a i t u k r i t i k d a n s a i a n y a n q membangun s a n g a t d i h a r a p k a n u n t u k m e m p e r b a i k i p e n u l i - s a n s e l a n j u t n y a .

Pada k e s e m p a t a n i n i , p e n u l i s juga:mengwcepkan t e r i m a k a s i h y a n q s e b e s a r - b e s a r n y a k e p a d a :

1. Bapak P r o f . D r . FG W i n a r n o s e b a g a i d o s e n p a n b i m b i n g utama yang t e l a h m e m b e r i k a n b i m b i n q a n s e l a m a pene- l i t i a n s a m p a i t e r s u s u n n y a s k r i p s i i n i .

2. I b u I r . W i n i a t i P u d j i Z a h a j u s e b a g a i o o s e n pembim- b i n g p e n d a m p i n q y s n g t e l s h m e n b e r i k a n b i m b i n g a n se- l a m a p e n e l i t i a n s a m p a i t e r s u s u n n y a s k r i p s i i n i .

(88)

4. Sernua p i h a k y a n g t e l a h rnernberikan b a n t u a n n y a , yang t i d a k d a p a t p e n u l i s s e b u t k a n s a t u p e r s a t u .

A k h i r u l k a t a , sernoga s k r i p s i i n i b e r r n a n i a a t b a g i p i h a k

yang rnernerlukannya.

(89)

DAFTAR I S 1

H a l a m a n OAFTAR TABEL

...

v i i OAFTAR GAMBAR

...

v i i i OAFTAR L A M P I R A N

...

i x

I. PENOAHULUAN

...

1

I 1

.

T I N J A U A N PUSTAKA

...

4

A

.

L I M B A H C A I R TAHU

...

4

B

.

ENZIN PROTEOLITIK

...

a

C

.

MIKROORGANISMA P E N G H A S I L E N Z I M

PROTEASE

...

1 4 0

.

M E D I A F E R M E N T A S I

...

1 7

...

E

.

S I N T E S A DFIN PROOUKSI E N Z I l r l PROTEASE 2 0 F

.

A K T I U I T A S E N Z I M

...

2 3

...

G

.

KEGUNAAN E N Z I M PROTEASE 2 5

111

.

METODA P E N E L I T I A N

...

2 7 A

.

BAHAN DAN A L A T

...

2 7

2

.

A l a t

...

3 0

8

.

_{METOOA P E N E L I T I A N}

...

_{3 1}

1

.

P k n e l i t i a n t a h a p I ...a. 3 1

2

.

P ' e n e l i t i a n t a h a p 11

...

3 5 3

.

P e n e l i t i a n t a h a p I11

...

3 6

4

.

P e m b u a c a n k u r v a s t a n d a r

...

3 7

...

I V

.

H A S I L DAN PERBAHASAN 39

...

.

(90)

Haiaman

...

1

.

K o r n p o s i s i l i m b a h c a i r t a h u 3 9

...

2

.

P e n g u k u r a n a k t i v i t a s p r o t e a s e 4 1

3

.

P e n g u j i a n kernampuan B a c i l l u s t i l i s u n t u k r n e n g h a s i l k a n e n z i m

p r o t e a s e

...

4 2

...

4

.

P e n e n t u a n r a n g e pH 4 2

B

.

PENGARUH pH AWAL FERMENTASI TERHRDAP

AKTIVITAS PROTEASE

...

4 3

C

.

?E?dGARUH PENAMBAHAN D i K S T R O S A 3AN UREA

TEZHAUAP AKTIVITAS PROTEASE

...

4 8 V

.

KESIMPULAN DAiU S A R A N

...

5 7

...

DAFTAR PUSTAKA 5 0

(91)

DAFTAR TABEL

H a l a m a n T a b e l 1.

T a b e l 2 .

-

l a b e l

3 . .

T a b a l B .

T a b e l

5.

T a b e l

6.

T a b e l 7 .

T a b e l 8 .

T a b e l

9 .

T a b e l 1 0 .

K o m p o s i s i z a t g i z i d a n a s a m a m i n o

...

p a d a k e d e l a i d a n t a h u 5

...

K o m p o s i s i l i m b a h c a i r t a n u 6 K l a s i f i k a s i , p r o t e i n a s e d a r i m i k r o -

o r g a n i s m a

...

10 R i k r o o r g a n i s m a p e n g h a s i l e n z i m p r o -

...

t e a s e e k s t r a s e l u l e r 1 4

P r o d u k s i e n z i m p r o t e a s e p a d a m e d i a

s e l e k t i f

...

1 6 K o m p o s i s i m e d i a u n t u k B a c i l l u s d a n

k a p a n g p e n g h a s i l p r o t e a s e . . . 18 K o m p o s i s i m e d i a u n t u k m e m p r o d u k s i

...

p r o t e a s e p a d a l a b u b e r g o y a n g

L9

A n a l i s a e n z i m p r o t e a s e d e n g a n s u b s t r a t

h e m o g l o b i n

...

;...

3 3 K o m p o s i s i m e d i a s i n t e t i k u n t u k B a c i l l u s

...

s u b t i l i s p e n g h a s i l p r o t e a s e 3 4

...

K o m p o s i s i l i m b a h c a i r t a h u 3 9