PENGARUH EKSTRAK DAUN SAMBILOTO (Andrographis paniculata Nees) TERHADAP PENURUNAN KADAR MDA(Malondialdehyde) PLASMA DARAH TIKUS PUTIH (Rattus novergicus strain wistar) YANG DIPAPAR ASAP ROKOK SECARA SUBAKUT

KARYA TULIS AKHIR

PENGARUH EKSTRAK DAUN SAMBILOTO (Andrographis paniculata Nees) TERHADAP PENURUNAN KADAR MDA(Malondialdehyde) PLASMA DARAH TIKUS PUTIH (Rattus novergicus strain wistar) YANG

DIPAPAR ASAP ROKOK SECARA SUBAKUT

Oleh :

MIRATUNISA AZZAHRAH 201210330311041

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG FAKULTAS KEDOKTERAN

ii

HASIL PENELITIAN

PENGARUH EKSTRAK DAUN SAMBILOTO (Andrographis paniculata Nees) TERHADAP PENURUNAN KADAR MDA(Malondialdehyde) PLASMA DARAH TIKUS PUTIH (Rattus novergicus strain wistar) YANG DIPAPAR

ASAP ROKOK SECARA SUBAKUT

KARYA TULIS AKHIR Diajukan kepada

Universitas Muhammadiyah Malang untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan

dalam Menyelesaikan Program Sarjana Fakultas Kedokterran

Oleh :

MIRATUNNISA AZZAHRAH 201210330311041

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG FAKULTAS KEDOKTERAN

iii

LEMBAR PENGESAHAN

KARYA TULIS AKHIR

Telah disetujui sebagai hasil penelitian untuk memenuhi persyaratan Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran

Universitas Muhammadiyah Malang

Tanggal 15 Februari 2016

Pembimbing I

dr. Fathiyah Safithri, M.Kes

Pembimbing II

dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG

Mengetahui,

Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang

iv

LEMBAR PENGUJIAN

Karya Tulis Akhir oleh Miratunnisa azzahrah ini Telah diuji dan dipertahankan di depan Tim Penguji Pada tanggal 15 Februari 2016

Tim Penguji

dr. Fathiyah Safithri, M.Kes Ketua

dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG Anggota

v

KATA PENGANTAR

Bismillahirramanirrahim. Alhamdulilahhirobil’alamin, puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena atas rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya tulis akhir ini dengan bantuan dari berbagai pihak.

Penelitian yang berjudul “Pengaruh Ekstrak Daun Sambiloto

(Andrographis Paniculata Nees) Terhadap Penurunan Kadar MDA

(Malondialdehyde) Plasma Darah Tikus Putih (Rattus Novergicus Strain Wistar)

Yang Dipapar Asap Rokok Secara Subakut” ini diajukan untuk memenuhi salah satu persyaratan untuk mencapai gelar Sarjana Kedokteran Jurusan Pendidikan Dokter pada Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.

Penulis menyadari bahwa penyusunan karya tulis akhir ini jauh dari sempurna, walaupun demikian penulis telah berusaha semaksimal mungkin serta mendapatkan bantuan dan bimbingan dari Dosen Pembimbing dalam rangka penyusunan. Tanpa bantuan dan dorongan dari berbagai pihak, sangatlah tidak mudah menjalani masa perkuliahan hingga pada penyusunan karya tulis akhir ini.

Malang, 15 Februari 2016

vi

UCAPAN TERIMAKASIH

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan berbagai pihak, karya tulis akhir ini tidak akan bisa diselesaikan dengan tepat waktu, oleh karena itu penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada berbagai pihak tersebut di bawah ini :

1. Tuhan Yang Maha Esa, Allah S.W.T., yang selalu memberikah rahmat kepada penulis dan memberikan kekuatan dan pertolongan yang sangat tidak terduga sehingga dapat menyelesaikan karya tulis akhir ini.

2. dr. Irma Suswati, M.Kes, selaku dekan Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.

3. dr. Fathiyah Safithri, M.Kes, selaku pembimbing I yang dengan penuh kesabaran dan pengertian berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan karya tulis akhir ini.

4. dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG, selaku pembimbing II yang penuh kesabaran dan telah berkenan membimbing dan mengarahkan dalam menyelesaikan karya tulis akhir ini.

5. dr. Anung Putri Illahika, M.Si, sebagai penguji yang telah berkenan menguji, mengoreksi, memberi masukan dan menerima hasil penelitian ini.

6. dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG, selaku Pembantu Dekan 1 Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.

7. dr. Rahayu,Sp. S, selaku Pembantu Dekan 2 Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.

vii

9. dr. Nanang Mardi Raharjo, Sp. THT (Alm.), selaku dosen wali yang senantiasa memberi dukungan pada penulis selama proses perkuliahan. 10.Seluruh Dosen Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang

yang telah memberikan ilmu dan dukungan kepada penulis dalam menyelesaikan studi.

11.Orang Tua tercinta, mamah Nuryati (Alm.) dan dae Muhammad Nor, AR yang senantiasa menyayangi penulis dan tidak henti-hentinya mendukung, mendo’akan, dan percaya bahwa penulis akan bisa menyelesaikan karya tulis akhir ini, dan kakak-kakak ku tercinta d’Eka dan d’Yayan yang

begitu sabar mendengarkan keluh-kesah penulis dan adikku Fawaz dan Ibu d’ Rayu yang senantiasa mendukung penulis.

12.Seluruh Staf Karyawan FK UMM, terimakasih atas semua bantuannya kepada penulis.

13.Keluarga di kosan Bendungan Tangga, Mba’ Nita, Anna, Dina, Alfi yang senantiasa memotivasi penulis dalam menyelesaikan karya tulis akhir ini. 14.Teman-teman tersayang dari semester 1 yang senantiasa membantu dan

memotivasi penulis, Ani, Erizi, Husna, Uniq, Yudha, Tias, terimakasih teman-teman.

15.Keluarga besar FK UMM 2012 yang sama-sama berjuang bersama untuk menjadi Dokter.

viii

Penulis menyadari bahwa penelitian ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan masukan dari berbagai pihak. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi penulis dan berbagai pihak.

Malang, 15 Februari 2016

ix DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL... ii

LEMBAR PENGESAHAN... iii

LEMBAR PENGUJIAN... iv

KATA PENGANTAR... v

UCAPAN TERIMAKASIH... . vi

ABSTRAK... ix

ABSTRACT... x

DAFTAR ISI... xi

DAFTAR TABEL... xiv

DAFTAR GAMBAR... xv

DAFTAR SINGKATAN... xvi

BAB1 PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang... 1

1.2 Rumusan masalah... 3

1.3 Tujuan penelitian... 3

1.3.1 Tujuan umum... 3

1.3.2 Tujuan khusus... 3

1.4 Manfaat Penelitian... 3

1.4.1 Manfaat akademik... 3

1.4.2 Manfaat klinis... 4

1.4.3 Manfaat masyarakat... 4

x

2.1 Sambiloto ( Andrographis paniculata Ness)... 5

2.1.1 Taksonomi... 5

2.1.2. Morfologi tanaman sambiloto... 5

2.1.3. Kimia dan kandungan bahan aktif... 6

2.2. Rokok dan Peroksidasi Lipid... 8

2.2.1. Kandungan rokok... 8

2.2.2. Jenis-jenis rokok... 13

2.2.3. Asap rokok sebagai radikal bebas... 14

2.2.4. Peroksidasi Lipid... 15

2.3. Radikal Bebas... 17

2.3.1. Definisi radikal bebas... 17

2.3.2. Pembentukan radikal bebas... 17

2.3.3. Tipe radikal bebas dalam tubuh... 18

2.3.4. Sumber radikal bebas... 18

2.4 Hubungan Asap Rokok, Radikal Bebas dan Kerusakan Saluran Pernapasan... 21

2.5 Antioksidan... 23

2.6 Sambiloto Sebagai Antioksidan... 24

2.6.1 Flavonoid... 24

2.6.2 Andrographolid... 25

2.7 Malondialdehida (MDA)... 26

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS.. 30

3.1 Kerangka Konsep... 30

xi

BAB 4 METODE PENELITIAN

4.1 Jenis Penelitian... 32

4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian... 32

4.3 Populasi dan Sampel... 32

4.3.1 Populasi... 32

4.3.2 Sampel... 32

4.3.3 Replikasi... 32

4.3.4 Teknik pengambilan sampel... 33

4.3.5 Karakteristik sampel penelitian (kriteria inklusi dan eksklusi)... 33

4.3.6 Variabel penelitian... 33

4.3.6.1 Variabel bebas... 34

4.3.6.2 Variabel tergantung... 34

4.3.7 Definisi operasional variabel... 34

4.4 Alat dan Bahan Penelitian... 34

4.5 Prosedur Penelitian... 34

4.6 Analisa Data... 39

4.7 Alur Penelitian... 40

BAB 5 HASIL DAN ANALISIS PENELITIAN 5.1 Hasil Penelitian... 41

5.2 Analisis Data... 43

BAB 6 PEMBAHASAN... 48

xii

DAFTAR TABEL

xiii

DAFTAR GAMBAR

2.1 Andrographis paniculata Ness... 5

2.2 Kandungan rokok... 9

2.3 Struktur Kimia Malondialdehid (MDA)... 25

xiv

DAFTAR SINGKATAN ANOVA : Analysis of Variance

CO : Carbon Monoksida NO : Nitrit Oxide

NO2 : Nitrit Peroksida

H2O2 : Hidrogen peroksida

H2S : Sulfida Acid HNE : 4-hidroksi-nonenal MDA : Malondialdehyde OH : Radical Hidroksil

PAH :Polycyclic Aromatic Hydrocarbons PUFA : Poly Unsaturated Fatty Acid ROI : Reactive Oxygen Intermediate ROS : Reactive Oxygen Species SOD : Superoxyde dismutase

TBARS : Thiobarbituratic acid Reactive Substance TBA : Tiobutirat

TCA : Tricloroasetat

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 : Hasil Kadar MDA

Lampiran 2 : Analisa Data

Lampiran 3 : Dokumentasi Penelitian

Lampiran 4 : Surat Determinasi

Lampiran 5 : Surat Keterangan Ekstrak

Lampiran 6 : Surat Laik Etik

Lampiran 7 : Surat Keterangan bimbingan

xvi

DAFTAR PUSTAKA

Aliya , 2010, The Lung, In : Kumar, Abbas, Fausto, dkk, Pathologic Basis of

Disease, 8th edn, Robbins and Cotran, USA, pp. 576 – 737.

Arief S, 2010, Radikal Bebas, Naskah Publikasi Ilmu Kesehatan Anak FK UNAIR, Surabaya, Jurnal Ilmu Kesehatan Anak, Vol. 1, hal.1-9.

http//www.pediatrik.com/06224113752-xOzu61.doc (diakses 10 september 2015).

Botham, 2009, Lipid yang Penting Secara Fisiologis, In : Wulandari N,dkk, Biokimia Harper, Ed. 27, EGC Medical Publisher, Jakarta, hal. 128-138.

Chao and Lin, 2010, Isolation and Identification of Bioactive Compounds in

Andrographis paniculata, Chines Medicine, pp. 1 – 175.

Darbar, Bose , Bhaumik , dkk, 2009,Antioxidant and Hepatoprotective Effect of

Andrographis paniculata Leaf Extract on Diclofenact Induced

Hepatotoxicity In Rats, Pharmacologyonline, Vol. 2, pp. 95-108.

Dalle-Donne, 2010, Biomarkers of Oxidative Damage in HumanDisease, Clinical Chemistry Vol.52, No. 4, pp. 601–623.

Ganjar I., Rohman A., 2010, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka pelajar, Yogyakarta, hal. 72-72, 456-474.

Guan SP, Tee W, Ng DSW, dkk, 2012, Andrographolide Protects Against

Cigarette Smoke-induced Oxidative Lung Injury Via Augmentation of Nrf2

xvii

Jawi, I.M., Suprapta, D.N., Subawa, A.A.N, 2008, Ubi Jalar Ungu Menurunkan Kadar MDA dalam Darah dan Hati Mencit setelah Aktivitas Fisik Maksimal, Jurnal Veteriner, 9(2) Juni, hal. 65-72.

Kumar , Mahat R, Batra J, 2015, Evaluation of lipid parameters, Liver Function Test, CRP and MDA (as a marker of lipid perokxidation) in chronic

cigarette smokers,Internasional Journal of Biomedical and Advance

Research, 6, pp: 115-119.

Kurnia, Permatasari, Subandi, 2011, Pengaruh Ekstrak Jintan Hitam Terhadap MDA dan Sel Spermatogonium Tikus yang Dipapar Asap Rokok Kretek Subakut, Jurnal Kedokteran Brawijaya, vol. 26, No. 3, hal. 161 – 165.

Kusumalaningsih, S. 2010. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Ed. 3, Penebar Swadaya, Jakarta, hal: 50-56.

Jarukamjor K. And Nemoto N., 2008, Pharmacological Aspect of Andrographolid

paniculata on Health and It’s Major Diterpenoid Constituen

Andrographolid, Journal of Health Science. Vol. 54 No4, pp. 370 – 381.

Lykkesfeldt, Viscovich, Poulsen H, 2008, Plasma malondialdehyde is induced by

smoking: a study with balanced antioxidant profiles, British Journal of

Nutrition, 92, pp: 203-206.

Mitev D, Gradeva H, Stoyanova Z, dkk, 2010, Evaluation of Thiol Compounds

And Lipid Peroxidative Products In Plasma of Patients With COPD, Trakia

xviii

Muhammad I. Efek Antioksidan Vitamin C Terhadap Tikus (Rattus norvegicus L) Jantan Akibat Pemaparan Asap Rokok [dissertation]. Bandung; 2009 (disertasi)

Notoatmodjo S., 2012, Metodologi Penelitian Kesehatan, Ed. 1 Rev, Rineka Cipta, Jakarta, hal. 115-130.

Purboyo A, Efek Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) pada Kelinci yang dibebani glukosa, Surakarta, 2009. (disertasi)

Rais, 2015, Isolasi dan Penentuan Kadar Flavonoid Ekstrak Etanolik Herba Sambiloto (Andrographis paniculata Ness), Pharmaҫiana, Vol. 5, No. 1, hal. 101-106.

Rima A, Suradi, Eddy S, dkk. Korelasi Antara Jumlah Makrofag, Neutrofil Dan Kadar Enzim Matrix Metalloproteinase (MMP)-9 Pada Cairan Kurasan Bronkial Perokok. Surakarta. J Respir Ind .2007;27(3):3

Sharon, 2010, Bahaya Tembakau dan Bentuk – Bentuk Sediaan Tembakau, diunduh September 2015

<resources.unpad.ac.id/unpadcontent/uploads/publikasi.../rokok.PDF>.

Shashank and Abhay, 2013, Chemistry and Biological Activities of Flavonoids :

An Overview, The Scientific World Journal, Vol. 2013, Article ID 162750,

xix

Sri, 2011, Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Akar, Kulit Batang, dan Daun

Tanaman Sambiloto (Andrographis paniculata) Dengan Metode Linoleat –

Tiosianat, Fitofarmaka, Vol. 1 No. 2, hal. 9-13.

Tjakradidjaja, Fransusca A, Anita S, 2011, Pomegranate (Punicagranatum L) powder reduced malondialdehyde (MDA) level in cigarette smoke exposed

rats. Med J Indonesia, pp.20:34-9.

Thirumalai T., Theresa S. V., Ekumalai, dkk, 2010, In Vivo of Cigarette Smoke on

Lipid Peroxidation and Antioxidant status in Male albino Mice, Journal

Pharm. Sci. And Res., Vol. 2, pp. 579-582.

World Health Organitation, 2015, Global Surveillance, Prevention and Control of

Chronic Respiratory Disease: A Comprehensive Approach, WHO

Publication, pp. 5-7.

World Health Organitation, 2012, WHO Global Report : Mortality Attributable to

Tobacco, WHO Publication, pp. 14-30.

1 BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Saat ini Indonesia menempati posisi ke-4 dengan jumlah terbesar perokok di dunia dan lebih dari 5 juta orang meninggal karena menghisap langsung rokok, sedangkan 600 ribu orang meninggal karena terpapar asap rokok (WHO, 2012). Asap rokok mengandung molekul radikal bebas sebanyak 1016 molekul radikal bebas per satu hisapan. Radikal bebas dapat

menyebabkan banyak penyakit pada berbagai organ tubuh Asap rokok dapat memicu terbentuknya radikal bebas dalam tubuh seperti

nitrit oksida (NO) dan nitrit peroksida (NO2) dalam fase gas (Kusumalaningsih, 2010, Muhammad, 2009).

Dampak buruk dari merokok dapat diakibatkan akumulasi kerusakan oksidatif yang disebabkan oleh ROS (Reactive Oxygen Species), yang disebut stres oksidatif. Radikal bebas dapat meningkatkan pengeluaran makrofag dan neutrofil antara lain di saluran nafas dan menginaktivasi

antiprotease yang dapat menimbulkan ketidakseimbangan

protease-antiprotease, mekanisme tersebut menyebabkan Penyakit Paru Obstruktif Kronik

(PPOK) (Aliya , 2010). Stres oksidatif menginduksi peroksidasi lipid

2

dan mantan perokok lebih tinggi dibandingkan dengan pasien yang tidak merokok (Lykkesfeldt, 2008; Mitev, 2010).

Peroksidasi lipid dapat dihambat dengan pemberian antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron ( electron donor) dan yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif. Akibatnya kerusakan sel akan dihambat (Winarsi, 2010).

Salah satu sumber antioksidan alami adalah Andrographis paniculata Nees atau yang dikenal dengan nama sambiloto. Sambiloto mengandung polifenol, salah satunya yang utama adalah flavonoid dengan kadar 46,322 g/kg (4,63%) terhadap quersetin dalam ekstrak. Sambiloto juga mengandung Andrographolide sebanyak 2,5 – 4,8 % di dalam ekstrak kering daun yang dapat menghambat produksi ROS dan adhesi dari

neutrofil (Guan SP, Tee W dan Ng DSW, 2012). Berdasarkan penelitian Sri

(2011) ekstrak daun sambiloto memiliki daya antioksidan lebih besar yaitu 76,63 % dibandingkan daya antioksidan vitamin E yaitu 75,37 %.

Berdasarkan latar belakang tersebut, penelitian ini bertujuan untuk membuktikan apakah antioksidan dalam ekstrak daun sambiloto dapat menurunkan kadar MDA plasma darah tikus putih (Rattus novergicus strain

wistar) yang diberi paparan asap rokok sebagai radikal bebas.

1.2 Rumusan Masalah

3

(Rattus novergicus strain wistar) yang dipapar asap rokok secara subakut.

1.3 Tujuan Penelitian 1.3.1 Tujuan Umum

Untuk membuktikan pemberian ekstrak daun sambiloto sebagai antioksidan dapat menurunkan kadar MDA plasma darah tikus putih strain wistar yang dipapar asap rokok secara subakut.

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Untuk membuktikan terjadi peningkatan kadar MDA plasma darah pada tikus putih strain wistar yang dipapar asap rokok secara subakut.

2. Untuk mengetahui dosis optimal ekstrak daun sambiloto dalam menurunkan kadar MDA pada tikus putih strain wistar yang dipapar asap rokok secara subakut.

3. Untuk mengetahui hubungan dosis dengan efek ekstrak daun sambiloto dalam menurunkan kadar MDA pada tikus putih strain wistar yang dipapar asap rokok secara subakut.

1.4 Manfaat Penelitian 1.4.1 Manfaat akademik

4

2. Menjadi dasar untuk melakukan penelitian selanjutnya yang berkaitan dengan antioksidan dalam ekstrak daun sambiloto.

1.4.2 Manfaat klinis

Mengetahui manfaat ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata Nees) sebagai antioksidan alami sebagai terapi pencegahan terjadinya peroksidasi lipid.

1.4.3 Manfaat masyarakat