Uji Validasi Dan Estimasi Kandungan Natriumbenzoat Dan Vitamin B6 Pada Minuman Berenergi Secara Spektrofotometri Derivatif

Lampiran 1. Perhitungan Pembuatan Pelarut HCl 0,1 N

HCl pekat = 37% ~ 12 N V1 x N1 = V2 x N2

V1 x 12 N = 1000 mL x 0,1 N

V1

12 N = 8,3 ml = 8,5 ml

Lampiran 2. Bagan Alir Prosedur Penelitian

Natrium benzoat BPFI

ditimbang secara seksama 59 mg dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan HCL 0,1N

LIB I Natrium benzoat 500 μg/ml diambil 10 mL

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan HCL 0,1N

LIB II Natrium benzoat 50 μg/ml

Standar 1 3 μg/mL Standar 2 4 μg/mL Standar 3 5 μg/mL Standar 4 6 μg/mL Standar 5 7 μg/mL diambil 1,5

mL diambil 2 mL

diambil 2,5 mL

diambil 3 mL diambil 3,5 mL

diukur serapan maksimum pada λ 200 -400nm

Lampiran 2. (Lanjutan)

Vitamin B6 BPFI

ditimbang seksama 50 mg

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan HCL 0,1N

LIB I Vitamin B6 500 μg/ml

Diambil 10 mL

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan HCL 0,1N

LIB II Vitamin B6 50 μg/ml

Standar 1 6 μg/mL

Standar 2 7,5 μg/mL

Standar 4 10,5 μg/mL

Standar 3 9,5 μg/mL

Standar 5 12 μg/mL

diambil 3 mL diambil 3,75 mL

diambil 4,75 mL

diambil 5,25

mL diambil 6 mL

diukur serapan maksimum pada λ 200-400nm

Lampiran 2. (Lanjutan)

Larutan Standar Natrium Benzoat

3 μg/mL, 4μg/mL, 5μg/mL, 6μg/mL dan 7 μg/mL

diukur serapan pada λ 200-400 nm ditransformasikan ke serapan derivat pertama

ditransformasikan ke serapan derivat kedua

ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis

dibuat kurva kalibrasi λ 245,4 nm

Persamaan Regresi

Larutan Standar Vitamin B6

6 μg/mL, 7,5μg/mL, 9,5μg/mL, 10,5μg/mL dan 12 μg/mL

diukur serapan pada λ 200-400 nm ditransformasikan ke serapan derivat pertama

ditransformasikan ke serapan derivat kedua

ditentukan zero crossing ditentukan panjang gelombang analisis

dibuat kurva kalibrasi λ 307,4 nm

Lampiran 2. (Lanjutan)

Sampel

diambil 20 mL

dimasukkan ke dalam beaker dipanaskan

disaring

didinginkan pada suhu kamar diambil 1 mL

dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL

dilarutkan dan dicukupkan dengan HCL 0,1N

diukur pada λ 245,4 nm dan 307,4 nm

Nilai Absorbansi

Lampiran 3. Kurva Serapan Natrium Benzoat pada Berbagai Konsentrasi

Kurva serapan natrium benzoat 3 μg/mL

Kurva serapan natrium benzoat 4 μg/mL

Kurva serapan natrium benzoat 5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,3 0 0 0

0 ,2 0 0 0

0 ,1 0 0 0

0 ,0 0 0 0

Lampiran 3. (Lanjutan)

Kurva serapan natrium benzoat 6 μg/mL

Kurva serapan natrium benzoat 7 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Ab

s.

0 ,6 0 0 0

0 ,4 0 0 0

0 ,2 0 0 0

Lampiran 4. Kurva Serapan Vitamin B6 pada Berbagai Konsentrasi

Kurva Serapan Vitamin B6 6 μg/mL

Kurva Serapan Vitamin B6 7,5 μg/mL

Kurva Serapan Vitamin B6 9,5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,4 0 0 0

0 ,2 0 0 0

0 ,0 0 0 0

Lampiran 4. (Lanjutan)

Kurva Serapan Vitamin B6 10,5 μg/mL

Kurva Serapan Vitamin B6 12 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Ab

s.

0 ,5 0 0 0

0 ,0 0 0 0

Lampiran 5. Kurva Serapan Derivat Pertama Natrium Benzoat pada Berbagai Konsentrasi

Kurva serapan derivat pertama natrium benzoat 3 μg/mL

Kurva serapan derivat pertama natrium benzoat 4 μg/mL

Kurva serapan derivat pertamanatrium benzoat 5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 2 0 0

-0 ,0 4 0 0

Lampiran 5. (Lanjutan)

Kurva serapan derivat pertama natrium benzoat 6 μg/mL

Kurva serapan derivat pertamanatrium benzoat 7 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 5 0 0

Lampiran 6. Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 pada Berbagai Konsentrasi

Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 6 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 7,5 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 9,5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 2 0 0

-0 ,0 4 0 0

Lampiran 6. (Lanjutan)

Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 10,5 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Pertama Vitamin B6 12 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 5 0 0

Lampiran 7. Kurva Serapan Derivatif Kedua Natrium Benzoat pada Berbagai Konsentrasi

Kurva Serapan Derivat Kedua Natrium Benzoat 3 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Natrium Benzoat 4 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Natrium Benzoat 5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 1 0 0

0 ,0 0 5 0

0 ,0 0 0 0

Lampiran 7. (Lanjutan)

Kurva Serapan Derivat Kedua Natrium Benzoat 6 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Natrium Benzoat 7 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 2 0 0

0 ,0 1 0 0

0 ,0 0 0 0

Lampiran 8. Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 pada Berbagai Konsentrasi

Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 6 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 7,5 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 9,5 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 0 5 0

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 0 5 0

Lampiran 8. (Lanjutan)

Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 10,5 μg/mL

Kurva Serapan Derivat Kedua Vitamin B6 6 μg/mL

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 1 0 0

Lampiran 9. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Natrium Benzoat

No. Konsentrasi (μg/mL) (X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 0,0000

2. 3,0000 0,0019

3. 4,0000 0,0025

4. 5,0000 0,0032

5. 6,0000 0,0037

6. 7,0000 0,0043

No. X Y X Y

2`

XY

2

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

2. 3,0000 0,0019 9,0000 3,61.10-6 0,0057 3. 4,0000 0,0025 16,0000 6,25.10-6 0,0010 4. 5,0000 0,0032 25,0000 1,024.10-5 0,0160 5. 6,0000 0,0037 36,0000 1,369.10-5 0,0222 6. 7,0000 0,0043 49,0000 1,849.10-5 0,0301

ΣX = 25

X

�

= 4,1667

ΣY = 0,0156

Y

�

= 2,6

.10-3 ΣX

2 ΣY = 135 2 = 5,228.10 ΣXY = 0,0840 -5

�

=

�

(

∑ ��

)

−

(

∑ �

)(

∑ �

)

�

(

∑ �

2

)

−

(

∑ �

)

2

=

6 (0,840)

−

(25)(0,0156)

6 (135)

−

(25

2

)

=

6,16216 . 10−4

�� =���+�

�= �� − ���= (2,6. 10−3)−(6,16216. 10−4_{)(4,1667) = 2,6899. 10}−5

Maka persamaan garis regresinya adalah �= (6,16216�+ 0,26899) × 10−4

Perhitungan Koefisien Korelasi :

�

=

�

(

∑ ��

)

−

(

∑ �

)(

∑ �

)

�

=

6 (0,0840)

−

(25)(0,0156)

�

[6 (135)

−

25

2

][6 (5,228. 10

−5

)

−

(0,0156)

2

]

=

0,9995

Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan derivat kedua natrium benzoat pada panjang gelombang 245,4 nm adalah 0,9995.

Lampiran 10. Perhitungan Persamaan Garis Regresi Vitamin B6

No. Konsentrasi (μg/mL) (X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 0,0000

2. 6,0000 0,0017

3. 7,5000 0,0023

4. 9,5000 0,0029

5. 10,5000 0,0032

6. 12,0000 0,0037

No. X Y X2` Y2 XY

1. 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000

2. 6,0000 0,0017 36,0000 2,89.10-6 0,0102 3. 7,5000 0,0023 56,2500 5,29.10-6 0,01725 4. 9,5000 0,0029 90,2500 8,41.10-6 0,0275 5. 10,5000 0,0032 110,2500 1,024.10-5 0,0336 6. 12,0000 0,0037 144,0000 1,636910-5 0,0444

ΣX = 45,5

X

�

= 7,5833

ΣY = 0,0138

Y

�

= 0,0023

ΣX2 _ΣY

= 436,75 2 = 4,052.10 ΣXY = 0,1330 -5

�

=

�

(

∑ ��

)

−

(

∑ �

)(

∑ �

)

�

(

∑ �

2

)

−

(

∑ �

)

2

=

6 (0,1330)

−

(45,5)(0,0138)

6 (436,75)

−

(45,5

2

)

=

3,09132 . 10−4

�� =���+�

�= �� − ���= (0,0023)−(3,09132. 10−4_{)(7,5883) =− 4,425. 10}−5

Maka persamaan garis regresinya adalah �= (3,09132� −0,4425) × 10−4

�

=

�

(

∑ ��

)

−

(

∑ �

)(

∑ �

)

���

(

∑ �

2

)

−

(

∑ �

)

2

���

(

∑ �

2

)

−

(

∑ �

)

2

�

�

=

6 (0,1330)

−

(45,5)(0,0138)

�

[6 (436,75)

−

(45,5)

2

][6 (4,052. 10

−5

)

−

(0,0138)

2

]

=

0,9991

Maka, koefisien korelasi dari data kalibrasi serapan derivat kedua vitamin B6 pada panjang gelombang 307,4 nm adalah 0,9991.

Lampiran 11. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Natrium Benzoat

Persamaan garis regresinya adalah Y = (6,16216X + 0,266899) . 10

No.

-4

X Y Yi (10-3) Y-Yi (10-5) (Y-Yi)2 (10-9) 1 0,0000 0,0000 0,02669 -2,6690 0,7123 2 3,0000 0,0019 1,87534 2,4662 0,6082 3 4,0000 0,0025 2,49155 0,8446 0,0713 4 5,0000 0,0032 3,10777 9,2230 8,5064 5 6,0000 0,0037 3,72399 -2,3986 0,5753 6 7,0000 0,0043 4,34020 -4,0202 1,6162 Σ (Y-Yi)2 12,0898

�� = �∑(�−��)

2

�−2

=

�

(12,0898.10−9)2

6−2

=

6,0449 .10

��� =3 × _{�����}��

=

3 ×6,0449.10−

9

6,16216.10−4

=

2,94 .10

-9

-5

��� =10 × _{�����}��

=

10 ×6,0449.10−9

6,16216.10−4

=

9,81 .10

μg/mL

Lampiran 12. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Vitamin B6

Persamaan garis regresinya adalah Y = (3,09132X – 0,4425) . 10

No.

-4

X Y Yi (10-3) Y-Yi (10-5) (Y-Yi)2 (10-9) 1 0,0000 0,0000 -0,0443 4,4250 1,9581 2 6,0000 0,0017 1,8105 -11,0542 12,2195

3 7,5000 0,0023 2,2742 2,5760 0,6636

4 9,5000 0,0029 2,2892 0,7496 0,0562

5 10,5000 0,0032 3,2016 -0,1636 0,0027 6 12,0000 0,0037 3,6653 3,4666 1,2017 Σ(Y-Yi)2 16,1018

�� = �∑(�−��)

2

�−2

=

�

(16,1018.10−9)2

6−2

=

8,0509.10

��� =3 × _{�����}��

=

3 ×8,0509.10−

9

3,0913.10−4

=

7,8131.10

-9

-5

��� =10 × _{�����}��

=

10 ×8,0509.10−

9

3,0913.10−4

=

2,6043.10

μg/mL

Lampiran 13. Kurva Serapan Derivat Kedua Penetapan Kadar Sampel

Sampel 2 Minuman Berenergi Merek K

Lampiran 13. (Lanjutan)

Sampel 4 Minuman Berenergi Merek K

Lampiran13. (Lanjutan)

Sampel 6 Minuman Berenergi Merek K

Lampiran13(Lanjutan)

Sampel 2 Minuman Berenergi Merek M

Lampiran13(Lanjutan)

Sampel 4 Minuman Berenergi Merek M

Lampiran13(Lanjutan)

Sampel 6 Minuman Berenergi Merek M

Lampiran 14. Hasil Analisis Kadar Natrium Benzoat dan Vitamin B6 dalam Sampel

1. Sampel Merek K

No. Vol.

(mL) A245,4 A

Konsentrasi Natrium Benzoat

307,4

(μg/mL)

Kadar Natrium Benzoat (mg/kg)

Konsentrasi Vitamin B6

(μg/mL)

Jumlah Vitamin

B6 (mg / sajian) 1 1 0,0113 0,0007 541,8439 513,8192 60,1588 9,0238 2 1 0,0109 0,0008 522,6182 495,5878 68,2419 10,2363 3 1 0,0109 0,0007 522,6182 495,5878 60,1588 9,0238 4 1 0,0112 0,0007 537,0375 509,2614 60,1588 9,0238 5 1 0,0109 0,0007 522,6182 495,5878 60,1588 9,0238 6 1 0,0109 0,0007 522,6182 495,5878 60,1588 9,0238

� 528,2257 500,9053 61,5060 9,2260

No. Vol.

(mL) A245,4 A

Konsentrasi Natrium Benzoat 307,4 (μg/mL) Kadar Natrium Benzoat (mg/kg) Konsentrasi Vitamin B6 (μg/mL) Jumlah Vitamin B6 (mg / sajian) 1 1 0,0117 0,0014 561,0696 533,2191 116,7406 17,5111 2 1 0,0117 0,0014 561,0696 533,2191 116,7406 17,5111 3 1 0,0118 0,0014 565,8761 537,7869 116,7406 17,5111 4 1 0,0118 0,0011 565,8761 537,7869 92,4913 13,8737 5 1 0,0118 0,0012 565,8761 537,7869 100,5744 15,0861 6 1 0,0119 0,0015 570,6825 542,3548 124,8237 18,7236

� 565,0750 537,0256 111,3519 16,7028

Lampiran 15. ContohPerhitungan Kadar Natrium Benzoat dan Vitamin B6 dalam Sampel

I. Merek K Absorbansi (Y) :

Natrium Benzoat = 0,0113 Vitamin B6 = 0,0007

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis maksimum untuk natrium benzoat pada 245,4 nm : Y = (6,16216X + 0,266899) . 10

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis maksimum untuk vitamin B6 pada 307,4 nm : Y = (3,09132X – 0,42526) . 10

-4

Sehingga untuk mendapatkan kadar (X) sampel digunakan subtitusi (Y) terhadap persamaan regresi pada masing-masing panjang gelombang.

-4

1. Natrium Benzoat

Konsentrasi Natrium Benzoat : 0,0113 = (6,16216�+ 0,266899). 10−4

(asam benzoat) �= �

0,0113

10−4� –0,266899

Kadar Asam Benzoat : ����

�

C : kosentrasi larutan sampel (μg/mL) V : volume larutan pengenceran (mL) Fp : faktor pengenceran

W : volume sampel (mL) Maka, 18,2944 ��/�� × 25 �� × 1

1 �� = 457,3603 μg/mL

Kadar yang dihitung merupakan kadar dari asam benzoat. Untuk menghitung kadar natrium benzoat maka digunakan rumus :

=������������������������� �������

������ ������� ���������������

= 457,3603 ×144 ,1

122 ,1× 100,40% =541,8439 μg/mL

Lampiran 15(Lanjutan)

100 mL sampel merek K setara dengan 105,4542 g. Maka kadar natrium benzoat dalam sampel :

= 541,8439 μg/mL = 54184,39 μg/100 mL = 54184,39 μg/105,4542 g = 513,8192 μg/g

= 513,8192 mg/kg

2. Vitamin B6

Konsentrasi Vitamin B6 : 0,0007 = (3,09132� −0,442526). 10−4

�

=

0,0007

10−4+0,442526

3,09132

=

2,4075 μg/mL

Kadar Vitamin B6 : ����

C : kosentrasi larutan sampel (μg/mL) V : volume larutan pengenceran (mL) Fp : faktor pengenceran

W : volume sampel (mL) Maka, 2,4075 ��/�� × 25 �� × 1

1 �� = 60,1875 μg/mL

Kadar vitamin B6 dalam sampel:

=�������������6 ���������������

= 60,1875 × 99,95% =60,1588 μg/mL

Jumlah vitamin B6 per sajian sampel :

= �������������6 ×����������������� = 60,1588 μg/mL × 150 ��= 9,0238 mg/sajian

Lampiran 15(Lanjutan)

II. Merek M

Panjang gelombang analisis (Y) : Natrium Benzoat = 0,0117 Vitamin B6 = 0,0014

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis maksimum untuk natrium benzoat pada 245,4 nm : Y = (6,16216X + 0,266899) . 10

Persamaan regresi pada panjang gelombang analisis maksimum untuk vitamin B6 pada 307,4 nm : Y = (3,09132X – 0,42526) . 10

-4

Sehingga untuk mendapatkan kadar (X) sampel digunakan subtitusi (Y) terhadap persamaan regresi pada masing-masing panjang gelombang.

-4

1. Natrium Benzoat

Konsentrasi Natrium Benzoat : 0,0117 = (6,16216�+ 0,266899). 10−4

(asam benzoat) �=

�0,0117

10−4� –0,266899

Kadar Asam Benzoat : ����

�

C : kosentrasi larutan sampel (μg/mL) V : volume larutan pengenceran (mL) Fp : faktor pengenceran

W : volume sampel (mL) Maka, 18,9435 ��/�� × 25 �� × 1

1 �� = 473,5884 μg/mL

Kadar yang dihitung merupakan kadar dari asam benzoat. Untuk menghitung kadar natrium benzoat maka digunakan rumus :

=������������������������� �������

������ ������� ���������������

= 473,5884 ×144 ,1

122 ,1× 100,40% =561,0696 μg/mL

Lampiran 15(Lanjutan)

100 mL sampel merek M setara dengan 105,2231g. Maka kadar natrium benzoat dalam sampel :

= 561,0696 μg/mL = 56106,96 μg/100 mL = 56106,96 μg/105,4542 g = 533,2191 μg/g

= 533,2191 mg/kg

2. Vitamin B6

Konsentrasi Vitamin B6 : 0,0014 = (3,09132� −0,442526). 10−4

�

=

0,0014

10−4+0,442526

3,09132

=

4,6720 μg/mL

Kadar Vitamin B6 : ����

C : kosentrasi larutan sampel (μg/mL) V : volume larutan pengenceran (mL) Fp : faktor pengenceran

W : volume sampel (mL) Maka, 4,6720 ��/�� × 25 �� × 1

1 �� = 116,8 μg/mL

Kadar vitamin B6 dalam sampel:

=�������������6 ×��������������� = 116,8 × 99,95% =116,7406 μg/mL

Jumlah vitamin B6 per sajian sampel :

= �������������6 ×����������������� = 116,7406 μg/mL × 150 ��= 17,5111 mg/sajian

Lampiran 16. Perhitungan Statistik Kadar Natrium Benzoat dalam Sampel

1. Sampel Merek K

No. X

Kadar (μg/mL) (� − �) (� − �)2

1 541,8439 13,6182 185,4560

2 522,6182 -5,6075 31,4441

3 522,6182 -5,6075 31,4441

4 537,0375 8,8118 77,6477

5 522,6182 -5,6075 31,4441

6 522,6182 -5,6075 31,4441

ΣX =3169,2257

�= 528,2257 Σ(� − �)

2

= 388,8800

SD = �∑��−��

2

�−1

=

�

388,8800

6−1

=

8,8191

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = 5,

Data diterima jika t hitung < t tabel t hitung 1 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

13,6182

8,81907⁄_√6

�

= 3,7824

t hitung 2 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−5,6075

8,8191⁄_√6

�

= 1,5575

t hitung 3 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−5,6075

8,8191⁄√6

�

= 1,5575

t hitung 4 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

8,8118

8,8191⁄_√6

�

= 2,4475

t hitung 5 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−5,6075

8,8191⁄√6

�

= 1,5575

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−5,6075

8,8191⁄_√6

�

= 1,5575

Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Lampiran 16(Lanjutan)

Kadar natrium benzoat pada sampel merek K : μ = � ± (t_{α/2, dk)}

= 528,2257 ± (4,0321 x 8,8191 / √6) x SD / √n)

= (528,2257 ± 14,5182) μg/mL = (52822,57 ± 1451,82)μg/100 mL = (52822,57 ± 1451,82)μg/105,4542 g = (500,9053 ± 13,7673)μg/g

= (500,9053 ± 13,7673)mg/kg

2. Sampel Merek M

No. X

Kadar (μg/mL) (� − �) (� − �)

1 561,0696 -4,0054 16,0429

2 561,0696 -4,0054 16,0429

3 565,8761 0,8011 0,6417

4 565,8761 0,8011 0,6417

5 565,8761 0,8011 0,6417

6 570,6825 5,6075 31,6417

ΣX =3390,45

�= 565,075 Σ(� − �)

2

= 65,4550

SD = �∑��−��

2

�−1

=

�

65,4550

6−1

=

3,6181

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = 5,

maka t_(α/2,dk)

Data diterima jika t hitung < t tabel. = 4,0321

t hitung 1 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−4,0054

3,6181⁄√6

�

= 2,7116

Lampiran 16(Lanjutan)

t hitung 2 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−4,0054

3,6181⁄√6

�

= 2,7116

t hitung 3 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,8011

3,6181⁄√6

�

= 0,5423

t hitung 4 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,8011

3,6181⁄_√6

�

= 0,5423

t hitung 5 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,8011

3,6181⁄√6

�

= 0,5423

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

5,6075

3,6181⁄_√6

�

= 3,7963

Kadar natrium benzoat pada sampel merek M : μ = � ± (t_{α/2, dk)}

= 565,075 ± (4,0321 x 3,6181 / √6) x SD / √n)

= (565,075 ± 5,9557) μg/mL = (56507,5 ± 595,57) μg/100 mL = (56507,5 ± 595,57) μg/105,2231 g = (537,0256 ± 5,6981) μg/g

= (537,0256 ± 5,6981) mg/kg

Lampiran 17. Perhitungan Statistik Kadar Vitamin B6 dalam Sampel

1. Sampel Merek K

No. X

Kadar (μg/mL) (� − �) (� − �)

2

1 60,1588 -1,3472 1,8149

2 68,2419 6,7359 45,3727

3 60,1588 -1,3472 1,8149

4 60,1588 -1,3472 1,8149

5 60,1588 -1,3472 1,8149

6 60,1588 -1,3472 1,8149

ΣX = 369,5060

�= 61,5060 Σ(� − �)

2

= 54,4473

SD = �∑��−��

2

�−1

=

�

54,4473

6−1

=

3,2999

maka t_(α/2,dk)

Data diterima jika t hitung < t tabel, = 4,0321

t hitung 1 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−1,3472 3,2999⁄√6

�

= 1

t hitung 2 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

8,3.10−3 3,2999⁄_√6

�

= 4

t hitung 3 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

6,7359

3,2999⁄√6

�

= 1

t hitung 4 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−1,3472 3,2999⁄_√6

�

= 1

t hitung 5 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−1,3472 3,2999⁄√6

�

= 1

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−1,3472 3,2999⁄_√6

�

= 1

Dari hasil perhitungan tersebut diperoleh bahwa semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Lampiran 17(Lanjutan)

Kadar vitamin B6 pada sampel merek K : μ = � ± (tα/2, dk)

= 61,5060 ± (4,0321 x 3,2999 / √6) x SD / √n)

= (61,5060 ± 13,2758) μg/mL

Jumlah per sajian vitamin B6 pada sampel merek K : μ = (61,5060 ± 13,2758) μg/mL X 150 mL

= (9,2559 ± 1,9914) mg

No. X

Kadar (μg/mL) (� − �) (� − �)2

1 116,7406 5,3387 29,0386

2 116,7406 5,3387 29,0386

3 116,7406 5,3387 29,0386

4 92,4913 -18,8606 355,7224

5 100,5744 -10,7775 116,1543

6 124,8237 13,4719 181,4910

ΣX = 668,1113

�= 111,3519 Σ(� − �)

2

= 740,4834

SD = �∑��−��

2

�−1

=

�

740,4834

6−1

=

12,1695

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01, dk = 5,

maka t_(α/2,dk)

Data diterima jika t hitung < t tabel. = 4,0321

t hitung 1 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

6,7.10−5

0,00015⁄_√6

�

=1,0846

Lampiran 17(Lanjutan)

t hitung 2 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

6,7.10−5.

0,00015⁄√6

�

= 1,0846

t hitung 3 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

6,7.10−5

0,00015⁄_√6

�

= 1,0846

t hitung 4 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,00023

0,00015⁄√6

�

= 3,7963

t hitung 5 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

−0,00013

0,00015⁄_√6

�

= 2,1693

t hitung 6 =

�

�−�

�� √�⁄

�

=

�

0,00017

0,00015⁄√6

�

= 2,7116

Kadar vitamin B6 pada sampel merek M μ = � ± (tα/2, dk)

= 111,3519 ± (4,0321 x 0,00015 / √6) x SD / √n)

= (111,3519 ± 0,0006) μg/mL

Jumlah per sajian vitamin B6 pada sampel merek M μ =(111,3519 ± 0,0006) μg/mL X 150 mL

= (16,7028) mg

Lampiran 18. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali

Kurva serapan perolehan kembali - 2

Lampiran 18(Lanjutan)

Kurva serapan perolehan kembali – 4

Kurva serapan perolehan kembali – 5

Kurva serapan perolehan kembali – 6

1. Hasil Uji Perolehan Kembali Natrium Benzoat

No. Vol. Sampel

Absorbansi (λ 245,4 nm)

Kons. (μg/mL) Kadar (μg/mL) Persen Perolehan Kembali (%)

1 1 mL 0,0144 23,3251 690,8433 100,61

2 1 mL 0,0143 23,1628 686,0369 96,77

3 1 mL 0,0141 22,8382 676,4240 89,08

4 1 mL 0,0140 22,6760 671,6176 85,23

5 1 mL 0,0141 22,8383 676,4240 89,08

6 1 mL 0,0142 23,0005 681,2304 92,92

Rata-rata 92,28

2. Hasil Uji Perolehan Kembali Vitamin B6

No. Vol. Sampel

Absorbansi (λ 307,4 nm)

Kons. (μg/mL) Kadar (μg/mL) Persen Perolehan Kembali (%)

1 1 mL 0,0045 14,7000 367,3172 102,39

2 1 mL 0,0047 15,3470 383,4835 108,85

3 1 mL 0,0041 13,4061 334,9848 89,45

4 1 mL 0,0048 15,6705 391,5666 112,08

5 1 mL 0,0043 14,0531 351,1510 95,92

6 1 mL 0,0043 14,0531 351,1510 95,92

Rata-rata 100,77

I. Perhitungan uji perolehan kembali natrium benzoat Absorbansi (Y) : λ 245,4 nm = 0,0144

λ 307,4 nm = 0,0045 Persamaan regresi pada spektrum derivat kedua :

Natrium Benzoat : Y = (6,16216X + 0,266899) . 10 Vitamin B6 : Y = (3,09132X – 0,42526) . 10

-4

Konsentrasi natrium benzoat :

-4

Y = (6,16216X + 0,266899) . 10 0,0144 = (6,16216X + 0,266899) . 10

-4

X = 23,3251 μg/mL(asam benzoat)

-4

0,0144

10−4 −0,266899 = 6,16216�

Konsentrasi awal setelah ditambahan larutan baku = 23,3251 μg/mL

Kadar = ����������� (��/��)

����� ������ (��) ����� (��) �����������������

= 23,3251 ��/��

1 �� × 25 ��× 1= 583,1275 μg/mL (asam benzoat)

Kadar natrium benzoat (CF

= ������������������������� �������

������������� ��������������� ) :

= 583,1275 ��/��×144 ,1

122 ,1× 100,40%= 690,8433 μg/mL

Kadar analit dalam sampel setelah ditambahkan larutan baku : (CF

Kadar rata-rata analit dalam sampel sebelum ditambah larutan baku : ) = 690,8433 μg/mL

(CA) = 565,075 μg/mL

Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A

C*

) :

A

= 200 μg/mL

1 �� × 0,625 ��× 1= 125 μg/mL

= ����������� (��/��)

����� ������ (��) ������ (��) ����������������

Maka % perolehan kembali natrium benzoat = ��−��

�∗� × 100%

= 690,8433 ��/�� − 565 ,075 ��/��

125 ��/�� × 100%

= 100,61%

II. Perhitungan uji perolehan kembali vitamin B6 Absorbansi (Y) : 245,4 nm = 0,0144

307,4 nm = 0,0045 Persamaan regresi pada spektrum derivat kedua :

Natrium Benzoat : Y = (6,16216X – 0,266899) . 10 Vitamin B6 : Y = (3,09132X – 0,42526) . 10

-4

Konsentrasi vitamin B6 :

-4

Y = (3,09132X – 0,42526) . 10 0,0045 = (3,09132X – 0,42526) . 10

-4

X = 14,7 μg/mL

-4

0,0045

10−4 −0,42526 = 3,09132�

Konsentrasi awal setelah ditambahan larutan baku = 14,7 μg/mL

Kadar = ����������� (��/��)

����� ������ (��) ����� (��) �����������������

= 14,7 ��/��

1 �� × 25 ��× 1= 367,5 μg/mL

Kadar vitamin B6 (CF

= �������������6 ���������������

) :

Lampiran 20(Lanjutan)

Kadar analit dalam sampel setelah ditambahkan larutan baku : (CF

Kadar rata-rata analit dalam sampel sebelum ditambah larutan baku : ) = 367,3172 μg/mL

(CA

Kadar larutan standar yang ditambahkan (C* ) = 111,3519 μg/mL

A

C*

) :

A

= 200 μg/mL

1 �� × 1,25 ��× 1= 250 μg/mL

= ����������� (��/��)

����� ������ (��) ������ (��) ����������������

Maka % perolehan kembali natrium benzoat = ��−��

�∗� × 100%

= 367 ,3172 ��/��− 111 ,3519 ��/��

250��/�� × 100%

Lampiran 21. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Natrium Benzoat dalam Sampel

No. Persen Perolehan Kembali

(Xi) (�� − �) (�� − �)

2

1 100,61% 8,3383 69,5278

2 96,71% 4,4383 19,6988

3 89,08% -3,1917 10,1867

4 85,23% -7,0417 49,5851

5 89,08% -3,1917 10,1867

6 92,92% 0,6483 0,4203

Σ Xi = 553,63% _{Σ(�� − �)}2 _{= 159,6055 μg/mL} � Xi = 92,28%

SD = �∑(��−�)2 �−1 = �

159,6055

6−1 = 5,6499 μg/mL

RSD = ��

� × 100% =

5,6499

Lampiran 22. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Vitamin B6 dalam Sampel

No. Persen Perolehan Kembali

(Xi) (�� − �) (�� − �)

2

1 102,39% 1,6217 2,6298

2 108,85% 8,0817 65,3133

3 89,45% -11,3183 128,1047

4 112,08% 11,3117 127,9538

5 95,92% -4,8483 23,5063

6 92,92% -4,8483 23,5063

Σ Xi = 604,61%

�Xi = 100,77% Σ(�� − �)

2

= 371,0143 μg/mL

SD = �∑(��−�)2 �−1 = �

371 ,0143

6−1 = 8,6141 μg/mL

RSD = ��

� × 100% =

8,6141

Lampiran 23. Komposisi Sampel Minuman Berenergi

Merek K

(Kemasan botol, volume 150 mL)

Merek M

(Kemasan botol, volume 150 mL)

Taurin 1000 mg Taurin 800 mg

Kafein 50 mg Kafein 50 mg

Inositol 50 mg Inositol 50 mg

Vitamin B3 20 mg Vitamin B3 20 mg

Vitamin B6 5 mg Vitamin B6 5 mg

Provitamin B5 5 mg Vitamin B5 5 mg Vitamin B12 5 mcg Gula 25 g

Gula 25 g Natrium Benzoat

Ponceau 4R Cl 16255 Pewarna Tartrazin CI 19140 Tartrazine Cl 19140

Asam Sitrat Trisodium Sitrat Natrium Benzoat

Perasa BPOM RI SL 03160091

Panjang Gelombang Maksimum Bahan-bahan dalam Sampel : Bahan Panjang Gelombang

Maksimum (nm) Rujukan

Taurin 570 Draganov, dkk., 2014

Kafein 273 Moffat, dkk., 2005

Inositol 261 Moffat, dkk., 2005

Niasinamid 261 Moffat, dkk., 2005

Vitamin B6 290 Moffat, dkk., 2005

Vitamin B12 361 Moffat, dkk., 2005

Sukrosa 190 Sumantri, dkk., 2013

Natrium Benzoat 230 Moffat, dkk., 2005

Tartrazin 425 Huda, N., 2001

Asam Sitrat 520 Napitupulu, P.M., 2011

Ponceau 506 Kartadarma, dkk., 2007

Lampiran 24. Gambar Sampel Minuman Berenergi

1. Merek K

DAFTAR PUSTAKA

Babu, K. M., Church, R.J., dan Lewander, W. (2008). Energy Drinks : The NewEye-Opener for Adolescents.Clinical Pediatric Emergency Medicine :

Elsevier,(9): 35-42.

Bates, C.J. (2006). Vitamins: Fat and Water Soluble: Analysis. Chichester : John Wiley & Sons Ltd.

BPOM. (2004). Ketentuan Pokok Pengawasan Suplemen Makanan. Jakarta: Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan.

BPOM. (2006). Minuman Berenergi. Diakses tanggal 21 Juni 2014

http://www.pom.go.id/new/index.php/view/berita/156/MINUMAN-BERENERGI.html

BSN. (1995). Bahan Tambahan Makanan. Jakarta : Badan Standardisasi Nasional.

BSN. (2002). Minuman Energi. Jakarta : Badan Standardisasi Nasional.

Cahyadi, W. (2008). Analisis dan Aspek Kesehatan: Bahan Tambahan Pangan. Edisi Ke-II. Jakarta: Bumi Aksara. Halaman 5-8, 193-194.

Dachriyanus. (2004). Analisis Struktur Senyawa Organik secara Spektrofotometri. Padang: Andalas University Press. Halaman 1.

Davidson, P.M., John, N.S., dan Alfred, L.B. (2005). Antimicrobials in Food. Third Edition. Boca Raton : Taylor & Francis Group. Halaman 12 - 17. Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ke-III. Jakarta : Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 744.

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Ke-IV. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 585 dan 723.

Draganov, G.H., Pencheva, L.P., dan Tiodorus, K.A. (2014). Spectrophotometry Derivative of Taurine in Energy Drink Mixtures. International Journal of

Nutrition and Food Sciences, 2 (3): 123-126.

Engel, R. (2009). Development of Analytical Methods for Determination of Water

Soluble Vitamins in Functional Foods Products. Budapest : Corvinus

University of Budapest.

Ermer, J., dan McB. Miller, J.H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical

Gandjar, I.G. dan Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 240-243, 235-236, 464.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metoda dan Cara

Perhitungannya. Jakarta : Departemen Farmasi FMIPA UI. Halaman 117,

123, 130.

Hathcock, J. N. (2004). Vitamin and Mineral Safety. Second Edition. Washington D.C. : Council for Responsible Nutrition. Halaman 80 – 82.

Huda, N. (2001). Pemeriksaan Kerja Spektrofotometer UV-Vis GBC 911A

Menggunakan Pewarna Tartrazine CL 19140. Tanggal Akses 24 Juni

2014

http://vionanda.wordpress.com/author/vionanda/

Jeffery, G.H., Basset, J., Mendham, J. dan Denney, R.C. (1989). Vogel’s Textbook

of Quantitive Chemical Analysis. Fifth Edition. Halaman 645, 646

Kartadarma, E., Nawawi, A., dan Halida. (2007). Penentuan Kuantitatif Zat Warna Karmoixin, Ponceau 4R dan Merah Alura yang Ditambahkan dalam Minuman Angrem.Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, 18 (1) : 67-71.

Kus, S., Zgmunt, M. dan Norbert, O. (1996).Derivative UV-VIS Spectrophotometry in Analytical Chemistry. Chemical Analytics, 41: 899. Malinauskas, B.M., Aeby, V.G., Overton, R.F., Aeby, T.C., dan Heidal, K.B.

(2007). A survey of energy drink consumption patterns among college students. Nutrition Journal, 6: 35.

Moffat, Anthony C., David, M., Widdop, B., and Watts. (2005).Clarke’s Analysis

of Drugs and Poisons. Third Edition. London : Pahrmaceutical Press. Hal.

1015 dan 1125.

Munson, J.W. (1991). Analisis Farmasi Metode Modern. Penerjemah: Harjana Parwa B. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 334.

Myers, R.L. (2007). The 100 Most Important Chemical Compounds. Westport : Greenwood Publishing Group. Halaman 41 – 42.

Napitupulu, PM. (2011). Pemisahan dan Penentuan Kadar Asam Sitrat dari Buah

Asam Jawa (Tamaricus indica L.). Tanggal Akses 24 Juni 2014.

Nurhidayati, L. (2007). Spektrofotometri Derivatif dan Aplikasinya dalam Bidang Farmasi. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, 5 (2): 93-99.

Ozgur, M. U. dan Ikbal, K. (2002). Determination of Ternary Mixtures of Vitamins (B1, B6, B12) by Zero-Crossing Derivative Spectrophotometry.

Turkey Journal Chemistry, 26: 385-391.

Patel, K.N., Jayyadan, K.P., Ganesh, C.R., dan Naresh, B.R. (2010). Derivative Spectrometry Method for Chemical Analysis : A Review. Der Pharmacia

Lettre, 2 (2): 139-150.

Rojas, F.S., Ojeda, C.B., dan Pavon, J.M.C. (1988). Derivative Ultraviolet-Visible Region Absorbption Spectrophotometry and Its Analytical Applications.

Talanta, 35 (10): 753-761.

Saparinto, C. dan Diana, H. (2006). Bahan Tambahan Pangan. Yogyakarta : Kanisius. Halaman 38.

Sari, A.P., Fajrianti, A., Iqbal, M., dan Dwijayanti, R. (2013). Analisis

Spektrofotometri UV/Vis dari Campuran Kadar Kafein dan Natrium Benzoat dalam Minuman Berenergi “Phanter”.

Diakses 10 juli 2014.

Sather, K., dan Teresa, V. (2011). Determination of Caffeine and Vitamin B6 in

Energy Drinks by High-Performance Liquid Chromatography (HPLC).

Concordia College Journal of Analytical Chemistry, 2: 84-91.

Satiadarma, K., Mulja, Thahjono dan Kartasasmita. (2004). Asas Pengembangan

Prosedur Analisis. Edisi Ke-I. Surabaya: Airlangga University Press.

Halaman 49, 87-90.

Sumantri, Budiarti, A., dan Parameita, I. (2013). Perbandingan Kadar Sukrosa

dalam Madu Randu dan Madu Kelengkeng dari Peternak Lebah dan Madu Perdagangan di Kota Semarang. Tanggal Akses 24 Juni 2014

http://publikasiilmiah.unwahas.ac.id/index.php/ilmuFarmasidanklinik/artic le/view/867

Theobald, A. Dan Anklam, E. (1996). Evaluation of Methods for The Analysis of

Infant Formula. Luxembourg: European Commission Joint Research

Centre. Halaman 12.

USPNF. (2007). United States Pharmacopoeia. New York : Electronic Version. Hal 7019.

Wati, W. I. dan Any, G. (2012). Penetapan Kadar Asam Benzoat dalam Beberapa Merk Dagang Minuman Ringan secara Spektrofotometri Ultraviolet.

Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 2 (2): 111-118.

tunggal pada konsentrasi yang berbeda-beda. Data yang diperoleh selanjutnya diproses untuk selanjutnya dapat ditentukan nilai kemiringan (slope), intersep dan koefisien korelasinya (Gandjar dan Rohman, 2007).

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3. 1 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental, yaitu metode penelitian yang digunakan untuk mencari pengaruh perlakuan tertentu terhadap yang lain dalam kondisi yang terkendali. Ini merupakan jenis penelitian terbaik dalam pengujian hipotesis hubungan kausalitas.

3. 2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian, Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara, Medan, mulai dari bulan Maret sampai Juni 2014.

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah labu tentukur, beaker

glass, hot plate, erlenmeyer, gelas ukur, neraca analitik, corong, kertas saring,

spatula, penangas air, komputer dan spektrofotometerUV/visibel.

3. 3. 2 Bahan-bahan

Bahan-bahan yang digunakan adalah natrium benzoat BPFI, vitamin B6 BPFI, dan HCl 0,1N.

3. 4 Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, yaitu ditentukan atas dasar pertimbangan bahwa sampel yang terambil mempunyai karakteristik yang sama dengan yang diteliti. Sampel minuman berenergi yang digunakan dibeli di beberapa minimarket di sekitar Universitas Sumatera Utara, Medan,dengan merek yang berbeda. Sampel yang dianalisis diberi kode K dan M dengan nomor bets masing-masing merk sama.Kompisisi dan gambar sampel dapat dilihat di lampiran 23 dan 24 halaman 99 dan 100.

3. 5 Prosedur Penelitian 3. 5. 1 Pembuatan Pereaksi

3. 5. 2 Pembuatan Larutan Induk Baku dan Larutan Standar 3. 5. 2. 1Pembuatan Larutan Induk Baku Natrium Benzoat BPFI

Larutan induk natrium benzoat dibuat dengan menimbang seksama serbuk natrium benzoat sebanyak 59 mg yang setara dengan 50 mg asam benzoat, kemudian dilarutkan dengan 20 mLpelarut HCl 0,1N di dalam labu tentukur100 mL dan dicukupkan, sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 500 μg/mL (LIB I). Selanjutnya diambil 10mL larutan LIB I untuk diencerkan dengan HCl 0,1N di dalam labu tentukur100 mL untuk mendapatkan larutan dengan konsentrasi 50 μg/mL (LIB II).

3. 5. 2. 2 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin B6 BPFI

Dibuat larutan induk vitamin B6 dengan melarutkan 50 mg serbuk vitamin B6 dalam labu tentukur100 mL dengan pelarut HCl 0,1N dan dicukupkan untuk mendapatkan larutan dengan konsentrasi 500 μg/mL (LIB I). Kemudian diambil 10mL dari LIB I untuk diencerkan dengan HCl 0,1N di dalam labu tentukur 50mL sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 50 μg/mL (LIB II).

3. 5. 2. 3Pembuatan Larutan Standar Natrium Benzoat

3. 5. 2. 4Pembuatan Larutan Standar Vitamin B6

Diambil sebanyak 3 mL,3,75mL,4,75mL, 5,25 mL, dan 6mL dari LIB II vitamin B6.Kemudian masing-masing dimasukkan ke dalam 5 labu tentukur 25mL. Dilarutkan dengan 10 mL pelarut HCl 0,1 N.Kemudian dicukupkan dengan pelarutyang sama untuk membuat larutan standar dengan konsentrasi 6μg/mL,7,5μg/mL,9,5μg/mL,10,5μg/mL, dan 12 μg/mL secara berurutan. Kelima larutan standar ini telah berada dalam rentang absorbansi 0,2 – 0,6 yang sesuai dengan hukum Lambert-Beer dihitung dari nilai A (1%, 1cm) vitamin B6.

3. 5. 2. 5Pembuatan Larutan Standar Natrium Benzoat BPFI untuk Uji Akurasi

Dilarutkan 11,8 mg serbuk natrium benzoat yang setara dengan 10 mg asam benzoat dalam labu ukur 50 mL dengan HCl 0,1 N kemudian dicukupkan dengan pelarut yang sama untuk mendapatkan larutan standar natrium benzoat dengan konsentrasi 200 μg/mL.

3. 5. 2. 6 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin B6 BPFI untuk Uji Akurasi

Disiapkan larutan standarvitamin B6 dengan cara melarutkan 10 mg serbuk vitamin B6 dengan HCL 0,1 N dalam labu ukur 50 ml untuk mendapatkan konsentrasi vitamin B6 sebesar 200 μg/mL.

3. 5. 3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum

3. 5. 3. 1 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Natrium Benzoat

dilarutkan dengan 10 mL HCl 0,1N. Selanjutnya larutan diencerkan dengan pelarut yang sama hingga garis tanda, lalu dikocok sampai homogen untuk memperoleh larutan natrium benzoat dengan konsentrasi 5 μg/mL. Diukur serapan dari larutan standar ini pada panjang gelombang 200-400 nm menggunakan spektrofotometer UV/visibel.

3. 5. 3. 2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Vitamin B6

Diambil sebanyak 5,25mL dari LIB II vitamin B6 (konsentrasi = 50 μg/mL) kemudian dimasukan ke dalam labu tentukur 25mL untuk diencerkan dengan pelarut HCl 0,1N hingga garis tanda, lalu dikocok sampai homogen untuk memperoleh larutan dengan konsentrasi 10,5μg/mL. Diukur serapannya pada panjang gelombang 200 - 400 nm.

3. 5. 4 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif

3. 5. 4. 1 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Natrium Benzoat

Dibuat spektrum serapan (tanpa diderivatkan) dari larutan standarnatrium benzoat dengan konsentrasi 3μg/mL, 4μg/mL, 5μg/mL, 6μg/mL, dan 7μg/mL pada panjang gelombang 200-400 nm. Kemudian spektrum ditransformasikan menjadi spektrum serapan derivat pertama dan kedua dengan Δλ = 4 nm.

3. 5. 4. 2 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Vitamin B6

pada panjang gelombang 200 – 400 nm.Kemudian spektrum ditransformasikan menjadi spektrum serapan derivat pertama dan keduadengan Δλ = 4 nm.

3. 5. 5 Penentuan Zero Crossing

Penentuan zero crossing diperoleh dengan menumpangtindihkan spektrum serapan masing-masing derivat dalam berbagai konsentrasi larutan. Zero crossing masing-masing zat ditunjukkan oleh panjang gelombang yang memiliki serapan nol pada berbagai konsentrasi.

3. 5. 6 Penentuan Panjang Gelombang Analisis

Dibuat larutan natrium benzoat dengan konsentrasi 5 μg/mL, larutan vitamin B6 dengan konsentrasi 10,5 μg/mL, dan larutan campuran natrium benzoat 5 μg/mL dan vitamin B6 10,5 μg/mL. Kemudian ketiga larutan ini diukur serapannya pada panjang gelombang 200 – 400 nm.Selanjutnya ditransformasikan menjadi spektrum serapan derivat pertama dan kedua dari masing-masing zat tunggal dan dari campuran natrium benzoat dan vitamin B6. Spektrum serapan derivat kedua dari larutan zat tunggal dan campuran keduanya ditumpangtindihkan. Panjang gelombang yang dipilih untuk menjadi panjang gelombang analisis adalah yang pada panjang gelombang tertentu, serapan tunggal salah satu senyawa nol sedangkan serapan tunggalsenyawa pasangannya dan campuran keduanya hampir sama atau persis sama. Serapan dari salah satu senyawa ini dapat diukur secara selektif pada panjang gelombang tersebut, tanpa terganggu serapan senyawa pasangannya.

3. 5. 7. 1Pembuatan dan Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi Natrium Benzoat

Dibuat larutan standar natrium benzoat dengan konsentrasi 3μg/mL, 4μg/mL, 5μg/mL, 6μg/mL, dan 7 μg/mL, kemudian diukur serapan derivat kedua (Δλ = 4 nm) pada panjang gelombang analisis yang telah ditentukan.Dilakukan analisis hubungan antara konsentrasi dan nilai serapan sehingga diperoleh persamaan regresi linear y = ax + b.Dan berdasarkan nilai serapan pada panjang gelombang analisis, dilakukan perhitungan batas deteksi / limit of detection

(LOD)dan batas kuantitasi / limit of quantitation (LOQ).Untuk menentukan batas

deteksi dan batas kuantitasidapat digunakan rumus :

�� =�∑(�−��)2

�−2

��� = 3��

�����

��� = 10 ��

�����

Keterangan : SB = Simpangan baku

LOD = Limit of Detection

LOQ = Limit of Quantitation

gelombang analisis, dilakukan perhitungan batas deteksi / limit of detection (LOD) dan batas kua ntitasi / limit of quantitation (LOQ). Perhitungan untuk menentukan

LOD dan LOQ seperti rumus sebelumnya.

3. 5. 8 Penentuan Kadar Natrium Benzoat dan Vitamin B6 dalam Minuman Berenergi

Sebanyak 20 mL dari 150 mLvolume total larutan sampel minuman berenergi dalam botol diambilkemudian dipanaskan. Sampel dipanaskan menggunakan hot plate pada suhu 70o

3. 5. 9 Uji Validasi

C selama kurang lebih 5 menit. Larutan selanjutnya disaring, lebih kurang 10 mL filtrat pertama dibuang, dan filtrat selanjutnya ditampung. Filtrat didinginkan pada suhu kamar untuk selanjutnya dipipet sebanyak 1mL ke dalam labu tentukur 25 mL dan dicukupkan dengan pelarut HCl 0,1N, lalu dikocok sampai homogen. Larutan kemudian diukur serapannya padaderivat kedua pada panjang gelombanganalisis yang telah ditentukan untuk natrium benzoat dan vitamin B6.

Uji validasi ini meliputi uji akurasi dan presisi yangdilakukan menggunakan sampel minuman berenergi merek M dengan volume total 150 mL. 3. 5. 9. 1Uji Akurasi

diperoleh jumlah vitamin B6 250μg. Selanjutnya labu dicukupkan dengan HCL 0,1N dan diukur pada panjang gelombang analisis masing-masing. Hasil spektrum ditransformasikan menjadi spektrum derivat kedua dengan Δλ = 4 nm, kemudian dihitung persen perolehan kembali. Rumus untuk menghitung persen perolehan kembali yaitu:

�

�

− �

�

� ∗

� × 100%

Keterangan : CF =

C

Kadar analit dalam sampel setelah ditambahkan larutan baku

A

C*

= Kadar analit sampel sebelum ditambahkan larutan baku

A

3. 5. 9. 2 Uji Presisi

= kadar larutan standar yang ditambahkan

Presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Presisi merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen. Nilai simpangan baku relatif yang memenuhi persyaratan menunjukkan adanya keseksamaan metode yang dilakukan (Harmita, 2004). Simpangan baku relatif dapat dihitung dengan rumus berikut ini :

RSD = ��

� × 100%

Keterangan : � = Kadar rata-rata sampel SD = Standard Deviation

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4. 1 Hasil Penentuan Kurva Serapan Maksimum

Dari pembuatan dan pengukuran kurva serapan maksimum pada natrium benzoat dengan konsentrasi 5 μg/mL dan vitamin B6 10,5 μg/mL, diperoleh

[image:70.595.114.516.596.738.2]

panjang gelombang maksimum untuk masing-masing senyawa. Kurva serapan maksimum natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada gambar 4 dan 5.

Gambar 4. Kurva serapan maksimum natrium benzoat

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Abs.

0 ,4 0 0 0

0 ,2 0 0 0

0 ,0 0 0 0

[image:71.595.124.492.74.225.2]

Gambar 5. Kurva serapan maksimumvitamin B6

Dari gambar 4 dan 5 dapat diperoleh panjang gelombang maksimum untuk natrium benzoat dan vitamin B6 masing-masing pada 230,2 nm dan 292,0 nm. Menurut Moffat, et.al. (2004), panjang gelombang maksimum natrium benzoat dan vitamin B6 masing-masing pada 229,0 nm dan 290 nm.

4. 2. Hasil Penentuan Kurva Serapan

4. 2. 1 Hasil Penentuan Kurva Serapan Natrium Benzoat

Kurva tumpang tindih serapan, derivat pertama, dan derivat kedua natrium benzoat dalam berbagai konsentrasi dapat dilihat di gambar 6, 7 dan 8.

Gambar 6. Kurvatumpang tindihserapan natrium benzoat dalamberbagai konsentrasi

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Abs.

0 ,5 0 0 0

0 ,0 0 0 0

[image:72.595.113.512.80.263.2]

Gambar 7. Kurva tumpang tindih serapan derivat pertama natrium benzoat dalam berbagai konsentrasi

Gambar 8. Kurva tumpang tindih serapan derivat keduanatrium benzoat dalam berbagai konsentrasi

Dari gambar 6, 7, dan 8 dapat dilihat bahwa hasil kurva tumpang tindih dari natrium benzoat dalam berbagai konsentrasi baik dari kurva serapan, derivat pertama dan derivat kedua memiliki bentuk kurva yang serupa.

4. 2. 2 Hasil Penentuan Kurva Serapan Vitamin B6

Kurva tumpang tindih serapan, derivat pertama, dan derivat kedua vitamin B6 dalam berbagai konsentrasi dapat dilihat di gambar 9, 10 dan 11.

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0

Ab

s.

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 5 0 0

-0 ,1 0 0 0

[image:73.595.108.513.77.246.2]

Gambar 9. Kurvatumpang tindihserapan vitamin B6 dalam berbagai konsentrasi

Gambar 10. Kurva tumpang tindih serapan derivat pertamavitamin B6 dalam berbagai konsentrasi

Gambar 11. Kurvatumpang tindih serapan derivat kedua vitamin B6 dalam berbagai konsentrasi

Dari gambar 9, 10, dan 11 dapat dilihat bahwa hasil kurva tumpang tindih dari vitamin B6 dalam berbagai konsentrasi baik dari kurva serapan, derivat pertama dan derivat kedua, memiliki bentuk kurva yang serupa

4. 3 Hasil Penentuan Zero Crossing

4. 3. 1. Penentuan Zero CrossingNatrium Benzoat

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Abs.

1 ,0 0 0 0

0 ,5 0 0 0

0 ,0 0 0 0

[image:74.595.112.502.166.589.2]

Kurva serapan derivat pertama dan kedua natrium benzoat dalam berbagai konsentrasi ditumpangtindihkanuntuk mendapatkan zero crossing. Gambar 12 dan 13 adalah zero crossing natrium benzoat derivat pertama dan kedua.

[image:74.595.120.495.171.355.2]

Gambar 12. Zero crossing natrium benzoat derivat pertama dalam berbagai konsentrasi

Gambar 13. Zero crossing natrium benzoat derivat kedua dalam berbagai konsentrasi

Dari gambar 12 dan 13 dapat diperoleh beberapa zero crossingdari natrium benzoat pada masing-masing kurva tumpang tindih serapan derivat pertama dan kedua masing-masing dalam berbagai berbagai konsentrasi.

[image:75.595.119.494.189.383.2]

Kurva serapan derivat pertama dan kedua vitamin B6 dalam berbagai konsentrasi ditumpangtindihkan untuk mendapatkan zero crossing. Gambar 14 dan 15 adalah zero crossing vitamin B6 derivat pertama dan kedua.

[image:75.595.124.497.430.596.2]

Gambar 14. Zero crossing vitamin B6 derivat pertama dalam berbagai konsentrasi

Gambar 15. Zero crossing vitamin B6 derivat kedua dalam berbagai konsentrasi

Dari gambar 14 dan 15 dapat diperoleh beberapa zero crossing dari vitamin B6 pada masing-masing kurva tumpang tindih serapan derivat pertama dan kedua masing-masing dalam berbagai berbagai konsentrasi.

[image:76.595.112.496.217.439.2]

Panjang gelombang analisis didapatkan dengan menentukan zero crossing dari kurva serapan maksimum natrium benzoat, vitamin B6 dan campuran natrium benzoat dan vitamin B6 yang ditumpangtindihkan. Kurva tumpang tindih serapan maksimum, derivat pertama dan derivat kedua natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada gambar 16, 17 dan 18.

Gambar 16. Kurva tumpang tindihserapan maksimum natrium benzoat dan vitamin B6

Gambar 17. Kurva tumpang tindih serapan maksimum derivat pertama natrium benzoat dan vitamin B6

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400

Ab

s.

1,0000

0,5000

0,0000

[image:77.595.114.503.75.315.2]

Gambar 18. Kurva tumpang tindih serapan maksimum derivat kedua natrium benzoat dan vitamin B6

Dari gambar 16, 17 dan 18 diperoleh hasil bahwa pada spektrum derivat pertama ditemukan zero crossing hanya untuk vitamin B6. Jika dilihat hanya dari

zero crossing senyawa tunggalnya saja, pada serapan derivat pertama, zero

crossing untuk natrium benzoat yaitu pada 209,8nm; 230,0nm; 259,2nm;

273,6nm; dan 298,2 nm. Sedangkan untuk vitamin B6 pada 202,4nm; 258nm; 292,8nm; dan 325,6 nm.

Namun jika kita lihat pada gambar 17 dan 18, didapatkan hanya panjang gelombang analisis untuk vitamin B6 saja. Sedangkan panjang gelombang analisis untuk natrium benzoat belum bisa ditentukan. Oleh karenanya dibuat spektrum serapan derivat kedua untuk mendapatkan panjang gelombang analisis natrium benzoat dan vitamin B6.

Bila kedua pita serapan mempunyai panjang gelombang yang hampir sama akan terjadi pelebaran pita, maka kurva derivatif pertama tidak akan membantu pemisahan spektranya. Pada situasi tersebut maka dicoba derivatif kedua (Nurhidayati, 2007).

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400

Ab

s.

0,0100

0,0000

-0,0100

[image:78.595.115.498.287.522.2]

Dari spektrum derivat kedua, didapatkan zero crossing untuk natrium benzoat dan vitamin B6. Maka, pengukuran akan dilakukan pada derivat kedua dengan panjang gelombang analisis yang diperoleh. Kurva tumpang tindih serapan maksimum, derivat pertama dan derivat kedua natrium benzoat, vitamin B6 dan campuran natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada kurva gambar 19, 20, dan 21. Sedangkan panjang gelombang analisis natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada gambar 22 dan 23.

Gambar 19. Kurvatumpang tindih serapan maksimum natrium benzoat, vitamin B6 dan campuran natrium benzoat dan vitamin B6

Gambar 20. Kurvatumpang tindih serapan maksimumderivat pertama natrium benzoat, vitamin B6 dan campuran natrium benzoat dan vitamin B6

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400

Ab

s.

1,0000

0,5000

0,0000

[image:79.595.114.500.76.281.2]

Gambar 21. Kurva tumpang tindihserapanmaksimum derivat kedua natrium benzoat, vitamin B6 dan campuran natrium benzoat dan vitamin B6

Gambar 22. Panjang gelombang analisis natrium benzoat

Gambar 23. Panjang gelombang analisis vitamin B6

Dari gambar 19 sampai 23 diperoleh panjang gelombang analisis untuk penetapan kadar campuran natrium benzoat dan vitamin B6 adalah pada serapan derivat kedua. Hal ini diketahui berdasarkan zero crossing pada setiap derivat.

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0

Ab

s.

0 ,0 1 0 0

0 ,0 0 0 0

-0 ,0 1 0 0

[image:80.595.113.513.332.589.2]

Dari hasil spektrum serapan derivat kedua, diketahui bahwa zero crossing untuk natrium benzoat berada pada panjang gelombang 203,4nm; 220,2nm; 241,0nm; 267,6nm; 278,2nm dan 300,0 – 400,0 nm . Sedangkan zero crossing untuk vitamin B6 adalah pada panjang gelombang 211,8nm; 226,8nm; 241,4nm; 379,6nm; 302,2nm dan 325,0 – 400,0 nm. Setelah spektrum serapan derivat kedua dari kedua zat ditumpang tindihkan, diperoleh beberapa panjang gelombang analisis. Panjang gelombang analisis spektrum derivat kedua yang diperoleh dapat dilihat pada tabel 4.1.

Tabel 4.1. Panjang Gelombang Analisis Spektrum Derivat Kedua

Analit

Panjang Gelombang (nm) pada Spektrum Derivat Kedua

220,2 226,8 245,4 267,8 279,8 307,4

Natrium Benzoat

(5 μg/mL) -0 -0,0031 0,0032 0 -0,0002 0

Vitamin B6

(10,5 μg/mL) 0,0046 0 0 0,0013 -0 0,0032

Campuran Natrium Benzoat

dan Vitamin B6

0,0051 -0,0002 0,0029 0,0010 -0,002 0,0036

sama dan maksimum yaitu 0,0032 dan 0,0029. Sehingga untuk natrium benzoat panjang gelombang analisisnya adalah pada 245,4 nm. Sedangkan untuk vitamin B6 panjang gelombang analisis yang dipakai adalah 307,4 nm. Hal ini dikarenakan nilai serapan dari vitamin B6 dan larutan campuran pada panjang gelombang tersebut hampir sama dan maksimum yaitu 0,0032 dan 0,0036.

Menurut Nurhidayati (2007),bila campuran biner memiliki panjang gelombang zero crossing lebih dari satu, maka yang dipilih untuk dijadikan panjang gelombang analisis adalah panjang gelombang zero crossing yang serapan pasangannya dan campurannya persis sama, karena pada panjang gelombang tersebut dapat secara selektif mengukur serapan senyawa pasangannya dan memiliki serapan yang paling besar. Pada serapan yang paling besar, serapannya lebih stabil sehingga kesalahan analisis dapat diperkecil.

4. 5 Penentuan Linearitas Kurva Kalibrasi 4. 5. 1 Kurva Kalibrasi

[image:82.595.122.464.91.274.2]

Gambar 24.Kurva kalibrasi natrium benzoat pada panjang gelombang245,4 nm

Gambar 25. Kurva kalibrasi vitamin B6 pada panjang gelombang 307,4 nm Dari gambar 24 dan 25 dapat dilihat kurva kalibrasi natrium benzoat dan vitamin B6 yang memenuhi syarat linearitas dilihat dari hasil korelasinya (R). Ini berarti ada hubungan yang linear antara X dan Y atau dalam hal ini konsentrasi dan absorbansi.

4. 5. 2 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi

[image:82.595.122.452.317.485.2]

Tabel 4.2. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Natrium Benzoat dan Vitamin B6 Analit Batas Deteksi Batas Kuantitasi Natrium Benzoat 2,94 x 10-5 μg/mL 9,81 x 10-5 μg/mL Vitamin B6 7,81 x 10-5 μg/mL 2,60 x 10-4 μg/mL

Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi ini dapat dilihat pada lampiran 11 dan 12pada halaman 71 dan 72. Hal ini menunjukkan bahwa pengukuran kadar natrium benzoat dan vitamin B6yang telah dilakukan dapat terdeteksi dan terkuantitasi dengan menggunakan metode spektrofotometri derivatif.

Batas deteksi merupakan parameter uji batas yang dilakukan untuk mendeteksi jumlah terkecil analit dalam sampel yang masih memberikan respon signifikan dengan blanko. Sedangkan, batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama (Harmita, 2004).

4. 6 Kadar Natrium Benzoat dan Vitamin B6 dalam Minuman Berenergi Kadar natrium benzoat dan vitamin B6 dalam minuman berenergi merek K dan merek M diukur serapannya pada spektrum derivat kedua dengan panjang gelombang analisis yang telah ditentukan, 245,4 nm untuk natrium benzoat dan 307,4 nm untuk vitamin B6. Kadar natrium benzoat dan vitamin B6 dalam minuman berenergi dapat dilihat pada tabel 4.3.

Tabel4.3. Kadar Natrium Benzoat dan Vitamin B6 dalam Minuman Berenergi

No. Sampel

Kadar Natrium Benzoat

(mg/kg)

Jumlah Vitamin B6 Per Sajian

[image:84.595.114.506.355.533.2]

Berdasarkan tabel 4.3, diperoleh hasil bahwa kedua merek minuman berenergi yang dipakai sebagai sampel memenuhi persyaratan kadar aman untuk makanan. Kadar natrium benzoat kedua merek minuman berenergi memenuhi syarat SNI 01-0222-1995 tentang bahan tambahan makanan yaitu dengan batas maksium 600 mg/kg yang dapat dilihat pada lampiran 30halaman106. Sedangkan untuk vitamin B6, kadar sampelberada dibawah batas maksimum penggunaan per hari menurut BPOM No. HK.00.05.23.3644yaitu 100 mg/hari yang dapat dilihat pada lampiran 31 halaman 107.Perhitungan dan data kadar sampel dapat dilihat pada lampiran 13 – 17 di halaman 73 –87. Kurva tumpang tindih sampel M dan K, natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada gambar 26 dan 27.

Gambar 26. Kurva tumpang tindih sampel M, natrium benzoat dan vitamin B6

Gambar 27. Kurva tumpang tindih sampel K, natrium benzoat dan vitamin B6

n m .

2 0 1 ,1 5 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 3 3 ,4 6

Ab

s.

0 ,0 1 7 9

0 ,0 1 0 0

0 ,0 0 0 0

Dari gambar 26 dan 27 dapat diketahui bahwa kurva serapan kedua sampel serupa dengan kurva serapan larutan standar natrium benzoat dan vitamin B6 pada panjang gelombang analisis yang telah ditentukan.

4. 7 Hasil Uji Validasi 4. 7. 1 Hasil Uji Akurasi

[image:85.595.113.517.314.519.2]

Hasil uji perolehan kembali natrium benzoat dan vitamin B6 dapat dilihat pada tabel 4.4 dan 4.5.

Tabel 4.4.Hasil Uji Perolehan Kembali Natrium Benzoat

No. Volume Sampel Merek M Kadar Sebelum Penambahan Baku (μg/mL)

Penambahan Baku

Kadar Setelah Penambahan Baku (μg/mL)

Persen Perolehan Kembali 1 1 mL 533,2191 125 μg

658,9874 100,61 %

2 533,2191 654,1809 96,77 %

3 537,7869 649,1359 89,08 %

4 537,7869 644,3295 85,23 %

5 537,7869 649,1359 89,08 %

6 542,3548 658,5102 92,92 %

Rata-rata 92,28 %

Tabel 4.5. Hasil Uji Perolehan Kembali Vitamin B6

No. Volume Sampel Merek M Kadar Sebelum Penambahan Baku (μg/mL)

Penambahan Baku

Kadar Setelah Penambahan Baku (μg/mL)

Persen Perolehan Kembali 1 1 mL 116,7406

250 μg/mL

372,7060 102,39 %

2 116,7406 388,8722 108,85 %

3 116,7406 340,3735 89,45 %

4 92,4913 372,7060 112,08 %

5 100,5744 340,3735 95,92 %

6 124,8237 364,6229 95,92 %

[image:85.595.115.517.559.752.2]

Berdasarkan tabel 4.4 dan 4.5, diperoleh rata-rata persen perolehan kembali untuk natrium benzoat dan vitamin B6 masing-masing adalah 92,28%, dan 100,77%. Persen perolehan kembali tersebut menunjukkan kecermatan atau akurasi yang baik pada saat pemeriksaan kadar natrium benzoat dan vitamin B6 dalam sampel dengan metode perhitungan secara persamaan regresi. Hasil uji perolehan kembali ini memenuhi syarat akurasi yang telah ditetapkan,yaitu berada pada rentang 80 – 120% (Ermer dan Mcb. Miller, 2005). Data dan perhitungan hasil uji perolehan kembali dapat dilihat pada lampiran 18 – 20 di halaman 90 – 94.

4. 7. 2. Hasil Uji Presisi

Uji presisi dilakukan dengan perhitungan simpangan baku relatif (Relative

Standard Deviation). Berdasarkan data perhitungan terhadap kadar natrium

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5. 1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang dilakukan, maka dapat disimpulkan :

1. Metode spektrofotometri derivatif dapat digunakan untuk menganalisa natrium benzoat dan vitamin B6 pada minuman berenergi, dengan masing-masing panjang gelombang derivat keduapada 245,4 nmdan 307,4 nm, 2. Validasi metode spektrofotometri derivatif untuk menganalisa kandungan

natrium benzoat dan vitamin B6 pada minuman berenergi telah memenuhi syarat pengujian, yaitu persen perolehan kembali natrium benzoat dan vitamin B6 masing-masing adalah92,28% dan 100,77%telah memenuhi persyaratan 80 – 120%, dan simpangan baku relatifuntuk natrium benzoat dan vitamin B6 masing-masingadalah 6,1231% dan 8,5484% yang telah memenuhi persyaratanyaitu dibawah10 – 20%,

5. 2 Saran

1. Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan analisis terhadap sediaan lain seperti sirup atau minuman suplemen yang mengandung natrium benzoat dan vitamin B6 dengan menggunakan metode spektrofotometri derivatif.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2. 1 Minuman Berenergi

Minuman berenergi termasuk salah satu suplemen makanan yang terdiri dari komponen multivitamin, makronutrien (karbohidrat, protein), taurin dengan atau tanpa kafein dan biasanya ditambahkan herbal seperti ginseng, jahe dan sebagainya dengan bentuk sediaan COD(cairan obat dalam) dalam kemasan botol bervolume 150 mL, 250 mL atau serbuk dan tablet yang dilarutkan menjad