KETEBALAN LAPISAN GRANULOSA MENCIT
(Mus musculus L.) BETINA SELAMA FOLIKULOGENESIS
SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK RIMPANG RUMPUT
TEKI (Cyperus rotundus L.)
(Skripsi)
Oleh
NEVI DINI ASTUTI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS LAMPUNG
KETEBALAN LAPISAN GRANULOSA MENCIT
(Mus musculus L.) BETINA SELAMA FOLIKULOGENESIS
SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK RIMPANG RUMPUT
TEKI (Cyperus rotundus L.)
(Skripsi)
Oleh
NEVI DINI ASTUTI
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Mencapai Gelar SARJANA SAINS
Pada Jurusan Biologi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS LAMPUNG
ABSTRAK
KETEBALAN LAPISAN GRANULOSA MENCIT (Mus musculus L.) BETINA SELAMA FOLIKULOGENESIS SETELAH PEMBERIAN
EKSTRAK RIMPANG RUMPUT TEKI (Cyperus rotundus L.)
Oleh Nevi Dini Astuti
Berbagai alat kontrasepsi pada wanita secara umum telah diperkenalkan tetapi dalam penggunaannya masih ditemui banyak hambatan karena belum diperoleh alat kontrasepsi yang ideal yang bebas dari efek samping. Penggunaan tanaman atau tumbuh-tumbuhan di Indonesia masih merupakan sumber utama dalam menemukan obat baru termasuk sebagai obat kontrasepsi. Salah satu tanaman obat yang biasa digunakan sebagai bahan kontrasepsi adalah rumput teki (Cyperus rotundus L.).
Bagian rumput teki yang digunakan sebagai bahan obat adalah rimpangnya. Rimpang rumput teki memiliki kandungan senyawa kimia antara lain flavonoid,
terpenoid,saponin,alkaloid, dan minyak atsiri. Diduga diantara kandungan tersebut ada yang bersifat antiestrogen sehingga rimpangnya dapat digunakan sebagai peluruh haid dan membersihkan keguguran.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.) terhadap ketebalan lapisan granulosa selama
folikulogenesis mencit (Mus musculus L.) betina. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli sampai Oktober 2009 di Laboratorim Zoologi, Laboratorium Kimia Organik FMIPA Unila dan Laboratorium Patologi Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung.
Pemberian perlakuan diberikan kepada mencit dengan cara dicekok (secara oral) setiap hari selama14 hari berturut-turut. Setelah pemberian perlakuan selesai, pada hari ke-15 mencit dibedah untuk diambil ovariumnya. Kemudian dilanjutkan dengan pembuatan preparat histologi dari ovarium. Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah ketebalan lapisan granulosa selama folikulogenesis.
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri dari 4 kelompok perlakuan dengan 6 kali pengulangan. Data dianalisis dengan Analisis Ragam (ANARA). Apabila diperoleh perbedaan yang nyata dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT) dengan derajat kepercayaan 5 %.
Hasil analisis data menunjukkan bahwa dibandingkan kontrol, pemberian ekstrak rumput teki (Cyperus rotundus L.) dengan dosis 1,256 ml/40gBB, 12,56
ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap ketebalan lapisan granulosa pada folikel primer, folikel sekunder dan folikel tersier pada ovarium mencit (Mus musculus L.).
Keywords : rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.), mencit
Judul Skripsi : KETEBALAN LAPISAN GRANULOSA
MENCIT (Mus musculus L.) BETINA SELAMA FOLIKULOGENESIS SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK RIMPANG RUMPUT TEKI
(Cyperus rotundus L.) Nama Mahasiswa : Nevi Dini Astuti Nomor Pokok Mahasiswa : 0517021053 Program Studi : Biologi
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
MENYETUJUI 1. Komisi Pembimbing
Drs. Hendri Busman, M. Biomed. Dr. H. Sutyarso, M.Biomed. NIP. 195901011987031001 NIP. 195704241987031001
2. Ketua Jurusan
MENSAHKAN
1. Tim Penguji
Ketua : Drs. Hendri Busman, M.Biomed. ...
Sekretaris : Dr. H. Sutyarso, M.Biomed. ...
Penguji
Bukan Pembimbing : Dra. Nuning Nurcahyani, M.Sc. ...
2. Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Terbanggi Besar pada tanggal 2 November 1986, anak pertama dari tiga bersaudara, yaitu Nanda Alur Puja Sari dan Damar Adjie Fadlan dan merupakan putri dari pasangan Bapak Jaka Sungkawa dan Ibu Purwanti.
Penulis menamatkan pendidikan Taman Kanak-kanak di TK Bhayangkari pada tahun 1993. Pendidikan Dasar diselesaikan diselesaikan pada tahun 1999 di SD N 2 Palapa. Pendidikan menengah pertama diselesaikan di SLTP N 9 Bandar Lampung pada tahun 2002, dan pendidikan menengah umum di SMU N 2 Bandar Lampung pada tahun 2005. Penulis tercatat sebagai mahasiswa di Jurusan Biologi Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Lampung pada tahun 2005.
Selama menempuh pendidikan di Jurusan Biologi FMIPA Unila, penulis pernah melaksanakan Kerja Praktik (KP) di Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung pada bulan Juli-Agustus 2008. Penulis pernah menjadi asisten mata kuliah Biologi Umum untuk Jurusan Agrobisnis dan
Alhamdulillahi Robbil’alamin...
Dengan segala kerendahan hati, kupersembahkan karya
sederhana ini untuk orang-orang tercinta :
Kedua orang tua ku yang paling kusayangi dan
kucintai...
Untuk adik-adikku dan keluarga besarku tersayang...
Untuk seseorang yang selalu kusayangi...
Motto
”
Sukses tidak ditentukan oleh otak kita
melainkan tergantung dari cara berfikir kita
”
”
Bekerja keras adalah bagian dari fisik
Bekerja cerdas adalah bagian dari otak
Dan
Air mengatasi kemarahan...
Manis mengatasi kepahitan empedu...
Akal mengatasi kekurangan diri...
Senyum mengatasi kedukaan kalbu dan iman mengatasi
ketandusan jiwa...
- - -
Ilmu yang paling utama adalah ilmu yang diamalkan...
Sedang amal yang paling utama adalah menjaga perbuatan...
- - -
Hanya dengan tersenyum kita telah memberikan sisi terbaik
yang kita miliki untuk orang lain...
SANWACANA
Puji syukur atas kehadirat Allah SWT , yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada penulis, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Ketebalan Lapisan Granulosa Mencit (Mus musculus L.) Betina Selama
Folikulogenesis Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki (Cyperus rotundusL.)”.
Dalam menyelesaikan skripsi ini penulis tidak terlepas dari bantuan berbagai pihak yang selalu memberikan semangat dan dorongan untuk terus maju baik secara moril maupun materil. Pada kesempatan kali ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
1. Bapak Drs. Hendri Busman, M.Biomed., selaku pembimbing I yang telah memberikan bimbingan, saran, arahan, serta transfer ilmu dari mulai pengerjaaan skripsi ini sampai terselesaikannya skripsi ini.
3. Ibu Dra. Nuning Nurcahyani, M.Sc., selaku pembahas yang telah memberikan saran, kritik, masukan, serta koreksi kepada penulis dalam upaya perbaikan skripsi ini.
4. Ibu Dra. Yulianty, M.Si., selaku Pembimbing Akademik yang telah memberikan nasihat dan pengarahan kepada penulis selama penulis menjalankan kuliah.
5. Bapak Drs. Bambang Irawan M, Sc., selaku Ketua Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Lampung.
6. Bapak dan Ibu Dosen, serta seluruh staf Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung, khususnya seluruh staf di Jurusan Biologi.
7. Bapak drh. Wisnu, drh. Hadi, Pak Narman, Pak Joko, dan semua pihak di BPPV Regional III Bandar Lampung.
8. Papa, mama, serta kedua adikku; Nanda dan Alan, yang selalu dengan tulus mendoakan serta telah banyak memberikan perhatian, kasih sayang, dukungan moril maupun materil dan juga motivasi yang tiada henti-hentinya.
9. Teman-teman terbaikku (the Uno’s) : Bagas yang selalu siap siaga jadi tukang
ojek dadakan, Tira yang hobinya ’berdakwah’ dengan muka Innocentnya dan
Dewi yang selalu dengan gaya lebainya. Terima kasih untuk kebersamaannya, waktunya, canda tawanya, kasih sayang, semangat, perhatian serta saran-saran yang telah diberikan.
11.Teman-teman seangkatan ku Bioholic 05 : Mei, Yeyen, Noni, No’, Hotma, Ana, Sri, Febri, Ika, Widya TP, Danang, Andes, Ari (Rio), Mahe, Uki, Adi, Yuries, Ari TN, Roby, Anjar, Khoirul, Asep, Yeni, Imung, Anggi, Meli, Leni, Anggi, Mika, Putu, Mbak Widi, Mbak Win,Gita, thanks a lot.
12.Untuk Ipul yang telah mengisi hari-hariku menjadi lebih berwarna. Terima kasih untuk support, perhatian dan pengertiannya.
13.Anak-anak Biologi : Mbak Pao yang ndut, Bobby, Revi, Anton, Nunu, Amel, Kak Ipin.
14.Almamaterku tercinta dan semua pihak yang tidak dapat saya sebutkan namanya satu persatu, yang telah dengan tulus membantu saya dalam penyelesaian dan penyusunan skripsi ini.
Sesungguhnya Allah akan membalas semua bantuan Kalian dan semoga ini akan menjadi hal yang terbaik untuk kita semua. Penulis menyadari bahwa masih terdapat banyak kekurangan di dalam penyusunan skripsi ini. Oleh karena itu, saran dan kritik yang membangun sangat penulis harapkan di masa yang akan datang. Akhirnya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Bandar Lampung, Mei 2010.
Nevi Dini Astuti
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PENGESAHAN ... i
SANWACANA ... ii
DAFTAR ISI ... iii
DAFTAR TABEL ... iv
DAFTAR GAMBAR ... v
I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang ... 1
B. Tujuan Penelitian ... 2
C. Manfaat Penelitian ... 3
D. Kerangka Pikir... ... 3
E. Hipotesis ... 5
II. TINJAUAN PUSTAKA ... 6
A. Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) ... 6
1. Klasifikasi Tanaman Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) ... 6
2. Ciri-ciri Tanaman Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) ... 6
4. Kegunaan Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) ... 9
B. Biologi Mencit (Mus musculus L.) ... 9
C. Ovarium ... 11
D. Histologi Sel Granulosa ... 14
E. Folikel Ovarium ... 15
1. Folikel Primer ... 16
2. Folikel Sekunder ... 17
3. Folikel Tersier ... 18
4. Folikel Graaf ... 19
III. METODE PENELITIAN ... 22
A. Waktu dan Tempat Penelitian ... 22
B. Alat dan Bahan ... 22
1. Alat ... 22
2. Bahan ... 23
C. Metode Kerja ... 24
1. Persiapan Kandang ... 24
2. Penyediaan Bahan Uji .... ... ... 24
3. Pembuatan Ekstrak Rumput Teki (C. rotundus L.)... 25
4. Pemberian Perlakuan Ekstrak Rumput Teki (C. rotundus L.)... 25
5. Proses Pembedahan Mencit (Mus musculus L.) ... 27
D. Pengamatan dan Pengukuran Ketebalan Sel-sel Granulosa ... 27
1. Teknik Pembuatan Slide ... 27
a. Trimming ... 28
b. Dehidrasi ... 28
c. Embedding ... 29
d. Cutting ... 30
e. Staining (pewarnaan) Menggunakan Pewarna HE ( Hematoxylin-Eosin) ... 30
f. Mounting ... 32
h. Pembuatan Pewarnaan Dengan Harris Hematoxylin Eosin ... 32
2. Pengukuran Ketebalan Lapisan Granulosa ... 33
3. Parameter yang Diamati ... 33
E. Rancangan Penelitian dan Analisis Data ... 34
IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ... 36
A. Hasil Penelitian ……… 36
1. Lapisan Granulosa pada Folikel Primer ……… 36
2. Lapisan Granulosa pada Folikel Sekunder ………. 38
3. Lapisan Granulosa pada Folikel Tersier ... 40
B. Pembahasan ... 42
1. Lapisan Granulosa pada Folikel Primer ... 42
2. Lapisan Granulosa pada Folikel Sekunder ……… 43
3. Lapisan Granulosa pada Folikel Tersier ... 43
V. SIMPULAN DAN SARAN ... 47
A. Simpulan ... 47
B. Saran ... 47
DAFTAR PUSTAKA ... 48
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
1. Data Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Primer Mencit
Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 53 2. Data Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Sekunder Mencit
Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 53 3. Data Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Tersier Mencit
Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 53 4. Analisis Ragam (ANARA) Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki
terhadap Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Primer pada Ovarium
Mencit. 54
5. Uji BNT Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki terhadap Ketebalan
Lapisan Granulosa Folikel Primer pada Ovarium Mencit. 54 6. Analisis Ragam (ANARA) Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki
terhadap Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Sekunder pada Ovarium
Mencit. 54
7. Uji BNT Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki terhadap Ketebalan
Lapisan Granulosa Folikel Sekunder pada Ovarium Mencit. 55 8. Analisis Ragam (ANARA) Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki
terhadap Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Tersier pada Ovarium
Mencit. 55
9. Uji BNT Pengaruh Ekstrak Rimpang Rumput Teki Terhadap Ketebalan
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) 7 2. Rimpang Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) 8
3. Mencit (Mus musculus L.) 10
4. Struktur Ovarium 12
5. Perkembangan Folikel Ovarium 13
6. Korpus Luteum 15
7. Folikel Primer Ovarium Mamalia 17
8. Folikel Sekunder Ovarium Mamalia 18
9. Folikel Tersier Ovarium Mamalia 19
10.Folikel Graaf Ovarium Mamalia 20
11.Diagram Alir Penelitian 35
12.Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Primer Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 36 13.Folikel Primer Mencit Setelah Pemberian
Ekstrak Rimpang Rumput Teki 37
14.Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Sekunder
Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 38 15.Folikel Sekunder Mencit Setelah Pemberian
16.Rata-rata Ketebalan Lapisan Granulosa Folikel Tersier
Setelah Pemberian Ekstrak Rimpang Rumput Teki 40 17.Folikel Tersier Mencit Setelah Pemberian
Ekstrak Rimpang Rumput Teki 41
1
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Indonesia adalah negara yang memiliki keanekaragaman tumbuhan. Sudah banyak sekali tumbuhan yang dapat dijadikan sebagai obat-obatan tradisional yang digunakan untuk menyembuhkan berbagai macam penyakit termasuk obat kontrasepsi. Berbagai kalangan masyarakat belakangan ini mulai
meminati kebiasaan penggunaan pengobatan tradisional dengan menggunakan ramuan tumbuh-tumbuhan. Hal ini disebabkan karena masyarakat mulai menyadari bahwa penggunaan berbagai macam obat agar tidak menimbulkan efek samping yang buruk pada tubuh mereka (Astirin dan Muthmainah, 2002).
Diantara jenis tumbuhan yang masih liar yang penting untuk diteliti yang dapat dijadikan sebagai obat kontrasepsi wanita adalah rumput teki (Cyperus rotundus L.). Tumbuhan ini memiliki kandungan kimia antara lain saponin, flavonoid, terpenoid dan minyak atsiri yang berkhasiat untuk mengatasi masalah-masalah kewanitaan diantaranya menormalkan siklus haid (Sa’roni dan Wahjoedi, 2002).
Pada penelitian ini digunakan mencit (Mus musculus L) sebagai hewan
2
digunakan untuk kepentingan manusia dan ternak dengan memberikan berbagai keterangan dasar yang diperlukan dalam penelitian serta secara efektif dapat dipelajari dengan dana penelitian yang lebih murah bila dibandingkan dengan hewan ternak lainnya (Wikipedia, 2008).
Folikulogenesis merupakan proses dimana sel-sel germinal di ovarium
berkembang diantara sel-sel somatik serta menjadi matur dan mampu untuk di fertilisasi. Folikulogenesis adalah suatu proses yang mengambil waktu sangat panjang. Folikulogenesis dapat dibagi menjadi dua tahap yang berbeda yaitu independen gonadotropin (preantral), yang memerlukan waktu 300 hari dan dependen gonadotropin (antral atau Graafian), yang memerlukan waktu 50 hari (Anantasika, 2007).
Agar didapatkan data yang dapat mendukung pemakaian empiris, maka dilakukan penelitian tentang viabilitas ovarium mencit. Setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki pada mencit betina, diharapkan dapat
memperoleh informasi mengenai keamanannya yang dikhawatirkan dapat menimbulkan efek toksik selama folikulogenesis terutama pada ketebalan lapisan granulosa pada mencit betina.
B. Tujuan Penelitian
3
C. Manfaat Penelitian
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah tentang manfaat rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.) sebagai bahan baku pembuatan obat kontrasepsi wanita.
D. Kerangka Pikir
Indonesia yang kaya dengan berbagai macam tanaman belum memanfaatkan secara optimal berbagai macam tanaman tersebut untuk dijadikan obat baru, termasuk obat kontrasepsi. Tanaman atau tumbuh-tumbuhan masih merupakan sumber utama dalam menemukan obat baru. Seringkali obat tradisional yang digunakan masih berdasarkan pengalaman tetapi belum memberi dasar secara ilmiah (Astirin dan Muthmainah, 2002).
Salah satu jenis tumbuhan yang masih liar yang dapat digunakan sebagai obat oleh wanita untuk peluruh haid, aborsi, membersihkan haid dan juga
digunakan sebagai obat kontrasepsi adalah rumput teki (Cyperus rotundus L.). Bagian yang digunakan sebagai obat tradisional yang mempunyai pengaruh terhadap sistem reproduksi wanita adalah rimpang Cyperus rotundus L. (rumput teki) yang mengandung saponin, flavonoid, terpenoid dan minyak atsiri. Diduga diantara kandungan tersebut ada yang bersifat antiestrogen sehingga dapat menghambat atau memodifikasi estrogen dan menyebabkan pendarahan haid (menstruasi) (Sa’roni dan Wahjoedi, 2002).
4
telur (ovum) yang berjalan dari indung telur menuju rahim, melalui saluran yang diberi nama tuba falopi. Pada saat tersebut, jaringan endometrial dalam lapisan endometrium di dalam rahim menebal sebagai persiapan terjadinya pembuahan oleh sperma.
Jika terjadi pembuahan, dinding ini akan semakin menebal dan menyediakan tempat janin tumbuh. Namun jika tidak terjadi pembuahan, jaringan
endometrial ini akan hancur dengan sendirinya dan keluar melalui vagina dalam bentuk cairan menstruasi. Terjadi pengeluaran cairan mentruasi akibat rontoknya jaringan endometrial dari dalam rahim. Proses ini terjadi sekitar 7 (tujuh) hari. Sedangkan jumlah darah yang keluar tergantung setebal apa jaringan endometrial yang rontok. Siklus menstruasi sendiri dimulai dari hari pertama mentruasi hingga satu hari sebelum mentruasi berikutnya. Pada menstruasi atau haid terjadi penurunan kadar hormon estrogen dan
progesteron sehingga menyebabkan degenerasi, perdarahan dan pelepasan dari endometrium. Keadaan normal siklus terjadi selama 28 hari (Utama, 2009).
5
estrogen. Dalam arti luas androgen dan progesteron dianggap sebagai zat-zat antiestrogen. Fungsi penting dari progesteron adalah menstimulasi
endometrium untuk tumbuh lebih lanjut serta mensekresi dan mengumpulkan zat-zat gizi bagi perkembangan telur menjadi janin (Diniah, 2006).
E. Hipotesis
6
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Rumput Teki (Cyperus rotundus L)
1. Klasifikasi Tanaman Rumput Teki (Cyperus rotundus L.)
Rumput teki (Cyprus rotundus L.) merupakan jenis tanaman yang telah banyak digunakan untuk mengatasi berbagai masalah kesehatan. Klasifikasi dari rumput teki (Cyperus rotundus L.) yaitu : regnum Plantae, divisi Magnoliophyta, kelas Liliopsida, ordo Poales, famili Cyperaceae, genus
Cyperus dan spesies Cyperus rotundus L. (Anonim, 2008a). 2. Ciri-ciri Tanaman Rumput Teki (Cyperus rotundus L.)
Rumput teki merupakan tanaman menahun yang tumbuh liar dan kurang mendapat perhatian. Sering dianggap sebagai gulma atau tanaman
pengganggu yang layak dicabut atau dibuat sebagai makanan ternak. Bagian yang biasanya digunakan sebagai obat adalah rimpangnya yang apabila sudah tua akan terdapat banyak tunas yang menjadi umbi berwarna coklat atau hitam (Anonim, 2008a).
7
kebun, di ladang dan di tempat lain sampai pada ketinggian 1000 m dari permukaan laut.
Tanaman rumput teki (Gambar 1) mudah dikenali karena bunga-bunganya berwarna hijau kecoklatan, terletak di ujung tangkai dengan tiga tunas helm benang sari berwarna kuning jernih, membentuk bunga-bunga berbulir, mengelompok menjadi satu berupa payung (Anonim, 2008a).
Gambar 1. Rumput Teki (Cyperus rotundus L.) (Anonim, 2008a).
Ciri khas dari tanaman ini terletak pada buah-buahnya yang berbentuk kerucut besar pada pangkalnya, kadang-kadang melekuk berwarna coklat, dengan panjang 1,5 - 4,5 cm dengan diameter 5 - 10 mm. Daunnya berbentuk pita, berwarna mengkilat dan terdiri dari 4-10 helai, terdapat pada pangkal batang membentuk rozet akar, dengan pelepah daun tertutup tanah. Pada rimpangnya yang sudah tua terdapat banyak tunas yang menjadi umbi berwarna coklat atau hitam. Rasanya sepat kepahit-pahitan dan baunya wangi. Umbi-umbi ini biasanya mengumpul berupa rumpun (Anonim, 2008a ).
daun bunga
8
3. Kandungan Kimia Rumput Teki (Cyperus rotundus L.)
Rimpang rumput teki (Gambar 2) mengandung bahan-bahan kimia
diantaranya adalah alkaloida, glikosida, flavonoid, minyak atsiri, gula, zat pati, saponin, terpenoid dan resin (Anonim a, 2008). Kandungan dalam rimpang rumput teki dapat digunakan sebagai peluruh haid, abortus dan dapat membersihkan keguguran. Hal ini dikarenakan diduga di dalam rimpang rumput teki terdapat kandungan yang bersifat antiestrogen atau estrogen
lemah (Sa’roni dan Wahjoedi, 2002). Flavonoid dapat membantu untuk
mengeluarkan keringat, berfungsi sebagai anti radang serta dapat membantu menghilangkan rasa sakit (Mursito, 1999). Kandungan minyak atsiri pada rumput teki berkhasiat untuk mengurangi rasa sakit, mengobati tekanan darah rendah, memperlancar air seni dan dapat membantu proses pencernaan makanan (Balkan, 2001).
Gambar 2. Rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.) (Anonim, 2008a).
9
4. Kegunaan Rumput Teki (Cyperus rotundus L.)
Biasanya bagian yang dipakai sebagai obat adalah umbinya (rimpang). Kegunaannya antara lain sebagai obat kuat, obat sakit perut, obat untuk memperlancar kencing, obat cacingan, obat peluruh serta pengatur haid, sebagai air pencuci anti keringat, dalam bentuk air rebusan sebagai obat untuk penyakit mulut (obat kumuran), obat sakit gigi (akar tongkat dimamah atau sebagai bubuk) dan untuk obat borok. Di daerah Jawa, akar teki digunakan sebagai obat kecut (anti kejang) terhadap sakit mencret (Anonim, 2008a).
Tanaman ini juga mempunyai kegunaan lain, yaitu sebagai obat sakit dada, sakit iga. rasa sakit sewaktu haid (Dysmenorrhea), datang haid tidak teratur (irregular menstruation) dan penyakit-penyakit pada wanita (gynecological diseases), luka terpukul, memar, gatal-gatal di kulit, bisul, pendarahan, keputihan, gangguan fungsi pencernaan seperti mual, muntah, nyeri lambung dan nyeri perut (Anonim, 2008a).
B. Biologi Mencit (Mus musculus L.).
Menurut (Priyambodo, 1995), mencit diklasifikasikan sebagai berikut :
10
Mencit (Mus musculus L.) (Gambar 3) merupakan hewan mamalia pengerat yang sering disebut juga sebagai hewan kosmopolitan yang menempati hampir semua habitat. Termasuk rodensia pemanjat, kadang-kadang menggali lubang,
menggigit. Hewan ini hidup secara nokturnal, takut terhadap cahaya serta dapat hidup dengan baik di ruangan dengan temperatur 200C– 250C dan kelembaban 45
[image:30.612.194.449.287.431.2]– 55% (Wikipedia, 2008).
Gambar 3. Mencit (Mus musculus L.) (Wikipedia, 2008).
11
pengaruh yang buruk pada tubuh mencit setelah mencicipi makanan tersebut (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988).
Menurut Smith dan Mangkoewidjojo (1988), mencit memiliki berat badan yang bervariasi. Berat badan mencit pada umur 4 minggu dapat mencapai 18-24 gram. Mencit dewasa umur 6 bulan berat mencapai 30-34 gram atau lebih. Mencit rumah ini dapat bertahan hidup selama 1-2 tahun, dengan lama produksi
ekonomis selama 9 bulan dan masa kehamilan berkisar antara 19-21 hari. Mencit dapat melakukan perkawinan lagi setelah beranak 1 sampai dengan 24 jam. Fase uterus dimulai antara jam 4 sore dan 10 malam. Biasanya mencit betina ini kawin dalam 3 jam pertama periode uterus.
C. Ovarium
Bagian yang paling utama dari alat kelamin betina adalah ovarium. Ovarium terletak di dalam rongga peritoneum yang berada di dekat ginjal berjumlah satu pasang yang terdiri dari kiri dan kanan. Fungsi dari ovarium adalah untuk menghasilkan sel-sel telur dan juga untuk mensekresi hormon-hormon pada kelamin betina yaitu hormon estrogen dan progesteron (Toelihere, 1997).
12
[image:32.612.175.465.248.519.2]pubertas, ovum yang sudah matang akan dilepaskan dari sel folikel dan dikeluarkan dari ovarium. Proses pelepasan dari ovarium disebut ovulasi. Sel ovum siap untuk dibuahi oleh sel spermatozoa dari pria, yang apabila berhasil bergabung akan membentuk zigot (Anonim, 2008b).
13
Gambar 5. Perkembangan folikel ovarium mamalia, memperlihatkan oosit, zona pelusida, sel-sel granulosa di sekitarnya, sel-sel teka dan ovarium folikuli (Junqueira, Carneiro dan Kelley, 1998).
Ovarium berfungsi mengeluarkan hormon steroid dan peptida seperti estrogen dan progesteron. Kedua hormon ini penting dalam proses pubertas wanita dan ciri-ciri seks sekunder. Estrogen dan progesteron berperan dalam persiapan dinding rahim untuk implantasi telur yang telah dibuahi. Selain itu juga berperan dalam
memberikan sinyal kepada kelenjar hipotalamus dan pituitari dalam mengatur siklus menstruasi (Anonim, 2008b).
14
a. Monotocous : Biasanya dimiliki oleh hewan yang melahirkan satu anak dalam 1 kali kelahiran. Ovarium pada jenis hewan ini yang berbentuk bulat panjang atau oval. Contoh : sapi dan kerbau.
b. Polytocous : Biasanya dimiliki oleh hewan yang melahirkan anak dengan jumlah yang banyak dalam satu kali kelahiran. Ovarium pada jenis hewan ini berbentuk seperti buah murbei. Contoh : tikus dan babi.
Umur dan masa reproduksi dari hewan betina sangat menentukan ukuran ovarium pada hewan menyusui. Pada hewan yang telah sering kali beranak, ukuran
ovariumnya dapat menjadi dua kali ukuran ovarium betina remaja (Partodihardjo, 1980). Adapun dalam siklus hidup ovarium meliputi folikel diantaranya adalah oosit, sel granulosa, sel teka, stroma ovarium, epitel permukaan ovarium dan persarafan ovarium (Winda, 2007).
D. Histologi Sel Granulosa
15
Gambar 6. Korpus Luteum (Mariano, 1974).
Sel granulosa menunjukkan fenotip yang berbeda-beda tergantung lokasinya. Sel granulosa mural (dalam folikel antral mempunyai aktivitas steroid terbanyak dengan kadar 3ß-hidroksisteroid dehidrogenase dan aromatase yang paling tinggi, juga mempunyai reseptor LH tertinggi. Sel granulosa antral, aktivitas steroidnya rendah. Sel granulosa tengah aktivitas mitosisnya tertinggi (Winda, 2007).
E. Folikel Ovarium
Folikel ovarium terbenam dalam stroma korteks. Sel granulosa adalah satu atau lebih lapisan folikel yang mengelilingi sebuah folikel yang terdiri atas sebuah oosit. Jumlah total folikel dalam kedua ovarium wanita dewasa muda normal diperkirakan sebanyak 400.000, tetapi sebagian besar darinya akan lenyap oleh Sel-sel
16
proses degeneratif selama masa reproduktif yang disebut atresia (Guyton dan Hall, 1997).
Regresi folikel ini dimulai sebelum kelahiran dan berlanjut sepanjang seluruh kehidupan reproduktif. Selama menopause, hanya sejumlah kecil folikel yang tersisa. Karena pada umumnya hanya satu ovum yang dilepaskan oleh ovarium pada setiap siklus menstruasi dengan lama rata-rata yaitu 28 hari dan masa reproduktif seorang wanita berlangsung 30-40 tahun, maka jumlah total ovum yang dapat dilepaskan adalah 450. Ada beberapa tahap perkembangan folikel. Untuk mencapai kematangan, folikel melalui melalui tahapan-tahapan
perkembangan folikel-folikel primer, sekunder, tersier dan Graaf (Guyton dan Hall, 1997).
1. Folikel Primer
17
Gambar 7. Folikel Primer Ovarium Mamalia (Junqueira, Carneiro dan Kelley, 1998).
Folikel primer ditandai dengan oosit primer yang mulai membesar, perubahan bentuk sel folikuler yang mengelilinginya dari bentuk gepeng menjadi kuboid dan berproliferasi membentuk sel granulosa dengan epitel bertingkat. Sel granulosa terletak di atas suatu membran basalis yang memisahkan mereka dari sel stroma sekelilingnya membentuk teka folikuli. Kemudian sel-sel granulosa dan oosit mengeluarkan suatu lapisan glikoprotein pada permukaan oosit tersebut, sehingga membentuk zona pelusida. Sel granulosa akan
membentuk tonjolan-tonjolan kecil yang menyerupai jari-jari menjulur melintasi zona pelusida. Tonjolan-tonjolan ini penting untuk pengangkutan zat-zat dari sel folikuler menuju ke oosit (Singh, 1991).
2. Folikel Sekunder
18
[image:38.612.222.420.136.256.2]pada waktu hewan betina telah lahir serta menjalani pendewasaan tubuh (Partodihardjo, 1980).
Gambar 8. Folikel Sekunder Ovarium Mamalia (Junqueira, Carneiro dan Kelley, 1998).
Guyton dan Hall (1997), menyatakan bahwa tahap awal dari terbentuknya folikel sekunder adalah karena adanya proses proliferasi dari sel granulosa yang berlangsung secara cepat. Sel-sel granulosa akan mengeksresi cairan folikuler yang mengandung estrogen, setelah proliferasi berlangsung selama beberapa hari.
4. Folikel Tersier
19
Gambar 9. Folikel Tersier Ovarium Mamalia (Junqueira, Carneiro dan Kelley, 1998).
Karena adanya perkembangan yang terus berlanjut sehingga terbentuk ruang-ruang terisi cairan yang tampak diantara sel-sel granulosa. Ruang-ruang-ruang itu saling bergabung membentuk antrum. Rongga ini berisi cairan liquor folliculi. Pada mulanya antrum berbentuk bulan sabit, tetapi semakin lama akan
semakin membesar. Diameter folikel tersier 10 mm (Singh, 1991).
5. Folikel Graaf
20
Gambar 10. Folikel Graaf Ovarium Mamalia (Junqueira, Carneiro dan Kelley, 1998).
Folikel Graaf ditandai dengan folikel yang semakin membesar sebagai akibat dari penimbunan cairan serta oosit yang melekat pada dinding folikel yang diselaputi oleh sel-sel granulosa. Karena sel granulosa tidak membelah sesuai dengan proporsi terhadap penimbunan cairan, maka lapisan granulosa makin menipis (Guyton dan Hall, 1997).
21
22
III. METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli sampai dengan Oktober 2009 di Laboratorium Zoologi Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung, pembuatan ekstrak rumput teki (Cyperus rotundus L.) di Laboratorium Kimia Organik FMIPA Universitas Lampung dan pembuatan preparat histologi sel-sel granulosa dilakukaan di Laboratorium Patologi Balai Penyidikan dan Pengujian Hewan Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung.
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain : kandang mencit yang terbuat dari kawat sebanyak 6 kandang, masing-masing kandang berisi 4 ekor mencit dengan 4 perlakuan yang berbeda, spuit 1 ml yang telah
23
untuk pencekokan ekstrak rimpang rumput dan seperangkat alat bedah untuk membedah mencit serta mengambil organ reproduksinya.
Alat-alat yang digunakan untuk proses pembuatan preparat histologi granulosa, antara lain : pinset skapel, embedding cassette, oven, cangkir logam, cetakan paraffin, balok kayu, kuas, flotation bath, inkubator,
stopwatch, api gas, pisau, pisau mikrotom, mikrotom geser, tissueprosesor,
obyek glass, cover glass, kertas label untuk memberi tanda preparat histologi granulosa, mikroskop untuk pengamatan preparat histologi dan kamera untuk dokumentasi.
2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan yaitu : 24 ekor mencit betina berumur 3 bulan dengan berat 30-40 gram, ekstrak rimpang rumput teki, aquabides digunakan untuk pengenceran ekstrak rimpang rumput teki, pelet ayam sebagai pakan mencit, kloroform sebagai obat bius, buffer formalin 10% sebagai larutan fiksasi, alkohol 80% dan 90% untuk dehidrasi, alkohol absolut dan Xylol
untuk clearing, paraffin untuk impregnasi, paraplast (paraffin cair) untuk meletakkan organ, canada balsam untuk melekatkan slide preparat dengan
24
C. Metode Kerja
1. Persiapan Kandang
Sebelum penelitian dilaksanakan, terlebih dahulu disiapkan kandang dari kawat dengan ukuran 15 x 15 cm.
2. Penyediaan Bahan Uji
Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit betina (M. Musculus L.)
yang berumur 3 bulan dengan berat badan 30-40 gram sebanyak 24 ekor dibagi menjadi 4 kelompok perlakuan masing-masing dengan 6 kali pengulangan. Hewan percobaan diperoleh dari Balai Penyidikan dan
25
3. Pembuatan Ekstrak Rumput Teki (C. rotundus L)
Terlebih dahulu tumbuhan diidentifikasi untuk memastikan rimpang yang diambil berasal dari tumbuhan rumput teki (C. rotundus L.). Rimpang yang diperoleh dibersihkan, kemudian dikeringkan sebanyak 500 gram.
Pengeringan selanjutnya dengan lemari pengering pada suhu tidak lebih dari
50 ˚C hingga menjadi serbuk. Kemudian serbuk rimpang rumput teki
dihaluskan dengan ayakan mesh-48 hingga menjadi halus. Kemudian serbuk yang telah halus dibuat ekstrak rimpang rumput teki dengan cara dimaserasi (perendaman dengan pelarut ethanol 99% sebanyak 1,5 liter selama 1hari) di dalam toples. Setelah itu hasil maserasi dipisahkan dari ampasnya untuk disaring dari pelarut hingga ekstrak menjadi pekat dengan menggunakan
rotary evaporator pada suhu 40-50oC dengan kecepatan 60 rpm kurang lebih selama 2 jam. Setelah pemekatan tersebut maka diperoleh ekstrak rimpang rumput teki (C. rotundus L) dalam bentuk pasta yang kemudian diencerkan menjadi bentuk cair.
4. Pemberian Perlakuan Ekstrak Rumput Teki (C. rotundus L.)
Menurut Sa’roni dan Wahjoedi (2002) tentang ”Pengaruh Infus Rimpang
Cyperus rotundus L. Terhadap Siklus Estrus Dan Bobot Uterus Pada Tikus
Putih”, perlakuan yang diberikan yaitu:
26
3. Kelompok dosis 112,5 mg/100 g BB (C) 4. Kelompok dosis 337,5 mg/100 g BB(D)
Dosis tersebut didapat dari serbuk rimpang rumput teki 11,25 mg dan diberikan pada hewan uji tikus putih dengan berat 100 gram (2,5 X berat mencit), kemudian dikonversi ke berat mencit yang dikelompokkan secara acak menjadi 4 kelompok, sehingga dosis ekstrak rimpang rumput teki yang digunakan dalam penelitian ini adalah:
Kelompok (K) Perlakuan kontrol dengan diberi 96 ml aquabides Kelompok (P1) Perlakuan dosis 1, 256 ml/40g BB
Kelompok (P2) Perlakuan dosis 12, 56 ml/40g BB Kelompok (P3) Perlakuan dosis 37, 67 ml/40g BB
27
5. Proses Pembedahan Mencit (Mus musculus L.)
Proses pembedahan mencit dilakukan pada hari ke-15 untuk diambil ovariumnya, setelah diberi perlakuan selama 14 hari. Mencit yang akan dibedah, sebelumnya terlebih dahulu dibius dengan kloroform, kemudian setelah mencit tidak bergerak lagi lalu mulai dilakukan pembedahan pada bagian ventral tubuh mencit secara vertikal. Spesimen dibuka perutnya dan diambil ovariumnya. Ovarium yang telah diambil segera difiksasi dengan larutan formalin 10% atau 10% formolsaline (1 bagian formalin dalam 9 bagian NaCl – fisiologis) di dalam botol. Perbandingan volume spesimen dengan larutan formalin 1 : 10, agar didapatkan hasil fiksasi yang sempurna. Kemudian ovarium tersebut segera dibawa ke Laboratorium Patologi Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung untuk dibuat preparat histologinya, sehingga lapisan granulosa dapat diamati.
D. Pengamatan dan Pengukuran Ketebalan Lapisan Granulosa
1. Teknik Pembuatan Slide
Ketebalan lapisan granulosa dievaluasi melalui gambaran histologi dari ovarium.
28
a. Trimming
Trimming dilakukan setelah proses fiksasi dengan menggunakan larutan
buffer formalin 10%, dengan perbandingan antara volume spesimen dengan larutan1 : 10 untuk mendapatkan hasil yang baik. Spesimen berupa ovarium dicuci bersih dengan air mengalir untuk menghilangkan larutan fiksasi, kemudian jaringan spesimen dipotong setebal 2 – 4 mm menggunakan pisau skapelNo. 22-24. Potongan jaringan tersebut
dimasukkan ke dalam embedding casette, tiap embedding cassette berisi 1– 5 buah potongan jaringan yang disesuaikan dengan besar kecilnya
potongan. Kemudian dicuci di bawah air mengalir selama 30 menit.
b. Dehidrasi
Embedding cassette diletakkan di atas tisu untuk mengeringkan air. Kemudian diberi perlakuan sebagai berikut secara berurutan :
Tahap Waktu Zat Kimia
Dehidration 2 jam Alkohol 80% 2 jam Alkohol 95% 2 jam Alkohol 95% Clearing 1 jam Alkohol absolut I
29
1 jam Xylol I 1 jam Xylol II 1 jam Xylol III
Impregnasi 2 jam Paraffin I 2 jam Paraffin II 2 jam Paraffin III
c. Embedding
Setelah proses dehidrasi, disiapkan paraplast cair dengan paraplast
dimasukkan ke dalam cangkir logam dan dimasukkan dalam oven dengan suhu di atas 580C. Dituangkan paraplast cair ke dalam pans. Jaringan satu persatu dipindahkan dari embedding cassette ke dasar pans dengan
mengatur jarak satu dengan yang lainnya. Pans dimasukkan atau
diapungkan di dalam air. Paraplast yang berisi jaringan dilepaskan dari pans, paraplast dipotong-potong sesuai dengan letak jaringan dengan menggunakan skalpet atau pisau hangat. Kemudian diletakkan pada balok kayu yang berfungsi untuk dipegang saat dipotong dengan mikrotom, pinggirnya diratakan dan ujungnya dibuat sedikit meruncing. Blok
30
d. Cutting
Proses cutting dilakukan di dalam ruangan dingin. Cutting adalah proses pemotongan jaringan dengan menggunakan mikrotom yang terlebih dahulu
didehidrasi. Sebelum dipotong, blok terlebih dahulu didinginkan,
pemotongan dilakukan secara kasar dan halus, selanjutnya blok dipotong dengan ketebalan 4 -5 µm. Setelah blok dipotong, dipilih lembaran yang baik, diapungkan pada air dan kerutannya dihilangkan dengan cara salah satu sisi lembaran jaringan tersebut ditekan dengan ujung jarum, di sisi lain ditarik dengan kuas runcing. Kemudian lembaran jaringan tersebut dipindahkan ke dalam waterbath selama beberapa detik sampai
menggembung sempurna. Dengan gerakan disedot, jaringan tersebut diambil dengan slide bersih dan ditempelkan di tengah atau sepertiga atas/bawah. Dihindari agar jangan sampai ada gelembung udara di bawah jaringan. Setelah itu slide yang telah berisi jaringan ditempatkan pada inkubator (370C) selama 24 jam sampai jaringan melekat sempurna pada
slide.
e. Staining (pewarnaan) Menggunakan Pewarna HE ( Hematoxylin-Eosin)
Setelah pembuatan slide preparat selesai, dilakukan pengamatan di bawah mikroskop untuk melihat preparat yang terbaik sebelum dilakukan
31
pewarna HE, secara berurutan slide dimasukkan ke dalam zat kimia di bawah ini dengan waktu sebagai berikut :
Zat Kimia Waktu
Xylol I 5 menit Xylol II 5 menit Xylol III 5 menit Alkohol Absolut I 5 menit Alkohol Absolut II 5 menit Aquades 1 menit
Harris Hematoxylin 20 menit Aquades 1 menit Acid alkohol 2 – 3 celupan Aquades 1 menit Aquades 15 menit
Eosin 2 menit Alkohol 96% I 2 menit
32
f. Mounting
Setelah proses pewarnaan selesai slide ditempatkan di atas tisu pada tempat yang datar, bagian atas slide ditetesi dengan bahan mounting yaitu
canada balsam dan langsung ditutup dengan cover glass dengan cepat agar tidak ada gelembung udara yang terbentuk.
g. Pembacaan Slide Dengan Mikroskop
Slide yang telah jadi diperiksa di bawah mikroskop cahaya dengan
pembesaran 40x, 100x, 200x atau 400x. Pada slide yang baik, akan terlihat inti sel berwarna biru dan sitoplasma berwarna merah. Hasil pengamatan yang didapatkan, dicatat dalam bentuk data tabel.
h. Pembuatan Pewarnaan Harris Hematoxylin Eosin Bahan pewarnaan :
a. Hematoxylin kristal : 5 g b. Alkohol Absolut : 50 g c. Ammonium (potassium alkena) : 100 g/L
d. Aquadest : 1000mL
e. Mercury oxide : 2,5 g Cara kerja :
33
dilarutkan pada alkohol absolut. Campuran larutan tersebut dididihkan selama 1 menit sambil diaduk, lalu secara perlahan-lahan ditambahkan
mercury oxide sampai berwarna jingga gelap. Setelah itu, larutan dikeluarkan dari panas dan segera didinginkan. Untuk memperjelas pewarnaan inti ditambahkan 2-4 mL asam asetat glasial per 100 mL larutan. Larutan ini perlu disaring sebelum digunakan.
2. Pengukuran Ketebalan Lapisan Granulosa
Pengukuran ketebalan lapisan granulosa dilakukan dengan menggunakan mikrometer. Mikrometer dipasang pada lensa okuler kemudian dikalibrasi terlebih dahulu. Ketebalan lapisan granulosa diukur dari membran basalis terdalam sampai membran basalis terluar pada tahapan folikel primer, sekunder, tersier dan folikel Graaf.
3. Parameter yang Diamati
34
E. Rancangan Percobaan dan Analisis Data
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang
diperoleh kemudian dianalisis dengan menggunakan Analisis Ragam (ANARA). Apabila diperoleh perbedaan yang nyata dilanjutkan dengan uji BNT dengan derajat kepercayaan 5%.
35
Gambar 11. Diagram Alir Penelitian Pengambilan Data
Analisis pembacaan slide histologi lapisan granulosa dengan mikroskop dan pengukuran ketebalan
lapisan granulosa.
Laporan Penelitian Interpretasi data Penyusunan laporan
Pelaksaan Penelitian
Pemberian perlakuan Ekstrak Rimpang Rumput Teki Proses Pembedahan Mencit
Pembuatan Preparat Histologi Lapisan Granulosa, yaitu : Fiksasi
Trimming Dehidrasi Embedding Cutting
Staining/pewarnaan Mounting
Persiapan Penelitian Persiapan Kandang
Penyediaan Bahan Uji
Pembuatan Ekstrak Rimpang Rumput Teki (Cyperus rotundus L.)
36
IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
1. Lapisan Granulosa Folikel Primer
Pengaruh pemberian ekstrak rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.) terhadap ketebalan lapisan granulosa pada folikel primer mencit (Mus musculus L.) dapat dilihat pada Gambar 12.
1.250 1.260 1.270 1.280 1.290 1.300 1.310 1.320 1.330 1.340 1.350 K e te balan la pi s a n gra nul osa (µ m )
kontrol 1,256 ml/40gBB 12,56 ml/40gBB 37,67 ml/40gBB
Dosis Perlakuan
1,313 1,312
1,346
1,284
P1 P2 P3
[image:56.612.130.489.411.582.2]K
37
37,67 ml/40gBB ketebalan lapisan granulosa folikel primer pada ovarium mencit mengalami penurunan setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki bila dibandingkan dengan kontrol. Namun, pada perlakuan dengan dosis 12,56 ml/40gBB setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki ketebalan lapisan granulosa folikel primer mengalami peningkatan sebesar 3% bila
dibandingkan dengan kontrol
Gambar 13 menunjukkan lapisan granulosa pada folikel primer yang terdiri dari kontrol dan perlakuan dengan dosis 1,256 ml/40gBB, 12,56 ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB.
1 1
A B
1 1
[image:57.612.132.511.320.638.2]
C D Gambar 13. Folikel Primer (A. Kontrol; B. 1,256 ml/40gBB; C.12,56
38
Berdasarkan hasil pengamatan, diketahui bahwa ekstrak rimpang rumput teki tidak memberikan pengaruh secara nyata terhadap ketebalan lapisan granulosa pada folikel primer.
2. Lapisan Granulosa Folikel Sekunder
Gambar 14 menunjukkan rata-rata ketebalan lapisan granulosa pada folikel sekunder ovarium mencit ± standar deviasi setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki. 1.340 1.360 1.380 1.400 1.420 1.440 1.460 1.480 1.500 1.520 1.540 Kete ba la n la pi s a n g ran ul os a (µ m)
kontrol 1,256 ml/40gBB 12,56 ml/40gBB 37,67 ml/40gBB
Dosis Perlakuan 1,469
1,531
1,411
1,505
[image:58.612.135.494.331.498.2]K P1 P2 P3
Gambar 14. Rata-rata ketebalan lapisan granulosa pada folikel sekunder setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.).
39
ketebalan lapisan granulosa folikel sekunder bila dibandingkan dengan kontrol setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki.
Di bawah ini (Gambar 15) merupakan lapisan granulosa pada folikel sekunder yang terdiri dari kontrol dan perlakuan dengan dosis 1,256 ml/40gBB, 12,56 ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB.
1
1
A B
1 1
[image:59.612.131.502.224.558.2]C D
Gambar 15. Folikel Sekunder (A. Kontrol; B. 1,256 ml/40gBB; C. 12,56 ml/40gBB; D. 37,67 ml/40gBB). 1) Lapisan Granulosa (Perbesaran 100x, HE)
40
3. Lapisan Granulosa Folikel Tersier
Pengaruh pemberian ekstrak rimpang rumput teki terhadap ketebalan lapisan granulosa pada folikel tersier mencit dapat dilihat pada Gambar 16.
2.050 2.100 2.150 2.200 2.250 2.300 2.350 K eteb al an l ap isan g ran u lo sa (µ m) kontrol 1,256 ml/40gBB 12,56 ml/40gBB 37,67 ml/40gBB Dosis Perlakuan 2,331 2,243 2,144 2,198
[image:60.612.156.492.222.386.2]K P1 P2 P3
41
[image:61.612.131.519.146.448.2]Hasil dari pengamatan lapisan granulosa pada folikel tersier dapat dilihat dari gambar 17.
1
1
A B
1
1
C D
Gambar 17. Folikel Tersier (A. Kontrol; B. 1,256 ml/40gBB; C. 12,56 ml/40gBB; D. 37,67 ml/40gBB). 1. Lapisan Granulosa (Perbesaran 100x, HE)
Pada saat penelitian, selain mengetahui ketebalan lapisan granulosa pada folikel primer, folikel sekunder dan folikel tersier juga diamati bentuk dari folikel tersebut karena berhubungan dengan batas dari sel-sel granulosa yang akan diukur
ketebalannya. Bentuk folikel hanya sedikit yang berbentuk lonjong atau tidak bulat. Hal ini dikarenakan teknik pembuatan preparat pada saat pemotongan dan
42
Hasil pada penelitian, tidak menunjukkan adanya kelainan histologi pada lapisan granulosa pada tahapan folikel primer, sekunder dan tersier seperti peradangan atau kerusakan sel yang berarti. Peningkatan dan penurunan ketebalan lapisan granulosa tidak dipengaruhi oleh faktor-faktor kelainan histologi pada lapisan granulosa seperti peradangan atau kerusakan sel.
B. Pembahasan
1. Ketebalan Granulosa pada Folikel Primer
Folikel primer yang sedang tumbuh ditandai dengan adanya perbesaran oosit sel-sel folikular yang gepeng kemudian berkembang menjadi sel-sel
berbentuk kuboid dan berkembang menjadi granular. Sel-sel ini disebut dengan lapisan granulosa (Geneser 1994).
Hasil pengamatan terhadap ketebalan lapisan granulosa folikel primer dapat dilihat pada gambar 12. Jika dibandingkan dengan kontrol, pemberian perlakuan dengan dosis ekstrak 1,256 ml/40gBB ketebalan lapisan granulosa mengalami peningkatan sebesar 3% dan peningkatan ini lebih besar bila dibandingkan dengan perlakuan dosis 12,56 ml/40gBB. Namun, pada dosis 37,67 ml/40gBB terjadi penurunan ketebalan lapisan granulosa sebesar 3% bila dibandingkan dengan kontrol setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki.
43
2. Lapisan Granulosa pada Folikel Sekunder
Pada tahap folikel sekunder ditandai dengan adanya proliferasi secara cepat dari lapisan granulosa. Pada saat proliferasi berlangsung selama beberapa hari, sel-sel granulosa akan mensekresi estrogen yang terkandung di dalam cairan folikuler (Guyton dan Hall, 1997).
Folikel sekunder ditandai dengan sel granulosa pada manusia terdiri dari 6-12 lapis sel, oosit mencapai ukuran yang besar maksimal dan letak dari oosit tersebut eksentrik di dalam folikel (Yatim, 1994).
Dari pengamatan pada gambar 14, diketahui bahwa rata-rata ketebalan lapisan granulosa pada folikel sekunder ovarium mencit setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki mengalami peningkatan pada perlakuan dosis 1,256 ml/40gBB sebesar 7% jika dibandingkan dengan kontrol. Pada perlakuan dosis 37,67 ml/40gBB juga mengalami peningkatan ketebalan lapisan granulosa bila dibandingkan dengan kontrol namun peningkatannya tidak sebesar pada dosis 1,256 ml/40gBB hanya 4%. Dosis 12,56 ml/40gBB mengalami penurunan pada ketebalan lapisan granulosa setelah pemberian ekstrak rimpang rumput teki yaitu sebesar 5% bila dibandingkan dengan kontrol. Penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak rimpang rumput teki tidak memberikan perbedaan yang nyata terhadap ketebalan lapisan granulosa pada folikel sekunder pada perlakuan dosis 1,256
ml/40gBB, 12,56 ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB jika dibandingkan dengan kontrol.
3. Lapisan Granulosa pada Folikel Tersier
44
terbentuk akan terjadi proliferasi secara cepat dari sel granulosa dan teka sehingga laju sekresi sel akan meningkat (Guyton dan Hall, 1997).
Dari hasil penelitian yang dilakukan, diketahui bahwa rata-rata ketebalan lapisan granulosa folikel tersier pada setiap perlakuan (dosis 1,256 ml/40gBb, 12,56 mg/40gBB dan 37,67 ml/40gBB) mengalami penurunan bila
dibandingkan dengan kontrol. Namun pada dosis 37,67 ml/40gBB, rata-rata ketebalan lapisan granulosa folikel tersier mengalami peningkatan jika dibandingkan dengan dosis 12,56 ml/40gBB. Pada pemberian dosis 12,56 ml/40gBB, jika dibandingkan dengan kontrol mengalami penurunan sebesar 18%. Pada dosis 1,256 ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB juga mengalami penurunan bila dibandingkan dengan kontrol walaupun tidak sebesar pada dosis 12,56 ml/40gBB. Penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak rimpang rumput teki memberikan pengaruh yang tidak nyata terhadap
ketebalan lapisan granulosa pada folikel tersier. Hal tersebut dapat dilihat pada Gambar 16.
Berdasarkan hasil yang didapat, pemberian ekstrak rimpang rumput teki tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap rata-rata ketebalan lapisan granulosa. Namun walaupun tidak memberikan perbedaan yang nyata, terjadi peningkatan dan penurunan rata-rata ketebalan lapisan granulosa tahapan folikel primer, sekunder dan tersier pada setiap perlakuan dosis 1,256 ml/40gBB, 12,56 ml/40gBB dan 37,67 ml/40gBB apabila dibandingkan dengan kontrol.
Adanya penurunan serta peningkatan ketebalan lapisan granulosa diduga dapat disebabkan karena faktor internal dan faktor eksternal (lingkungan). Faktor internal misalnya keadaan dari hewan uji yaitu mencit betina yang mengalami stres
menyebabkan penurunan ketebalan lapisan granulosa. Faktor-faktor penyebab stres antara lain :
45
2. Suhu yang berubah-ubah 3. Kebisingan dan keramaian
Faktor-faktor penyebab stres tersebut pertama kali akan diterima oleh panca indera dan diteruskan ke sistem syaraf pusat lalu akan dialirkan ke organ tubuh. Organ yang dialiri stres antara lain adalah kelenjar hormon misalnya kelenjar hormon estrogen. Apabila organ tersebut telah dipengaruhi stres maka akan terjadi perubahan pada sistem keseimbangan tubuh yang menimbulkan perubahan fungsional dari organ target. Dengan kata lain, salah satu penyebab penurunan ketebalan lapisan granulosa dikarenakan adanya pengaruh internal yaitu stres dari hewan uji yaitu mencit (Mus musculus L.) betina ( Gunawan dan Sumadiono, 2007).
Selain faktor internal, telah disebutkan bahwa faktor eksternal juga berpengaruh terhadap ketebalan lapisan granulosa. Meskipun pemberian ekstrak rimpang rumput teki tidak memberikan pengaruh yang nyata terhadap ketebalan lapisan granulosa, namun terjadi peningkatan ketebalan lapisan granulosa tahapan folikel primer, sekunder dan tersier apabila masing-masing perlakuan dosis dibandingkan dengan kontrol. Faktor eksternal yang mempengaruhi adalah kandungan dari senyawa rimpang rumput teki. Senyawa pada rimpang rumput teki yang semula diduga bersifat antiestrogen justru bersifat estrogenik (memacu estrogen). Senyawa tersebut adalah flavonoid. Menurut Saddiqi (2008), senyawa flavonoid adalah golongan dari isoflavon yang kerjanya adalah sebagai pengendali dari efek estrogen (estrogenik). Dengan kata lain, efek estrogenik pada senyawa isoflavon bekerja untuk mengatur estrogen agar diproduksi dalam jumlah yang memadai sehingga terjadi peningkatan pada lapisan granulosa.
46
V. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak rimpang rumput teki (Cyperus rotundus L.) tidak berpengaruh terhadap ketebalan lapisan granulosa folikel primer, folikel sekunder dan folikel tersier ovarium mencit (Mus musculus L.).
B. Saran
DAFTAR PUSTAKA
Anantasika, A. 2007. Fisiologi Folikulogenesis dan Ovulasi. Disampaikan pada Symposium Pertemuan Ilmiah Tahunan (PIT) III- HIFERI 24-27 Januari 2007. Yogyakarta. http;//ksuheimi.blogspot.com./2008/07/Fisiologi-Folikulogenesis-dan-Ovulasi.html. 15 September 2008. 10.19 WIB.
Anonim a. 2008. Cyperus rotundus. http;//id. Wikipedia.org/wiki/fotosintesis. Diakses 28 Juni 2009. 03:10:25 PM.html.
Anonim b. 2008. Ovarium. http://id.wikipedia.org/wiki/Ovarium. Diakses 29 Juni 2009. 02:56:40 PM. html.
Astirin, O.P. dan Muthmainah. 2002. Struktur Histologi Ovarium Tikus (Rattus norvegicus) gravid Setelah Pemberian Ekstrak Momordica charantia L. Jurnal Pharmacon. Jakarta. 1(2). 26-30.
Balkan, J. 2001. Aroma Terapi. Dahara Prize. Semarang. Hal 5-6.
Diniah, Z. 2006. Peran Biokimia Terhadap Hormon Wanita. Universitas PGRI Adi Buana. Surabaya. Hal 10-11.
Geneser, F. 1994. Buku Teks Histologi. Diterjemahkan oleh Dr. F. Arifin Gunawijaya M.S. Binarupa Aksara. Jakarta. Hal.284-286.
Gunawan, B., dan Sumadiono. 2007. Stres dan Sistem Imun Tubuh : Suatu
Pendekatan Psikoneuroimunologi. Cermin Dunia Kedokteran. Hal. 13-15. Guyton, A.C. dan J.E.Hall. 1997. Buku Ajar Histologi Kedokteran. Edisi ke-9.
Junqueira L.C., Carneiro J., and Kelley R.O. 1998. Histologi Dasar. Edisi ke-8. Diterjemahkan oleh Dr. Jan Tambayong. Buku Kedokteran EGC. Jakarta. Hal. 434-438.
Mariano, S.H.1974. Atlas of Human Histology. Edisi ke-4. United Status of Amerika. Hal. 211.
Mursito, B. 1999. Tampil Percaya Diri dengan Ramuan Tradisional. Penebar Swadaya. Jakarta. Hal. 4.
Partodihardjo, S. 1980. Ilmu Reproduksi Hewan. Mutiara. Jakarta. Hal. 44-50. Priyambodo, S. 2003. Pengendalian Hama Tikus Terpadu Seri Agrikiat. Penebar
Swadaya. Yakarta. Hal 5-6.
Sa’roni dan Wahjoedi, B. 2002. Pengaruh Infus Rimpang Cyperus rotundus L. (Teki)
terhadap Siklus Estrus dan Robot Uterus pada Tikus Putih. Jurnal Bahan Alam Indonesia (1): 45-48.
Shaddiqi, T. 2008. Potensi In Vitro Zat Sitotoksik Anti Kanker Daun Tanaman Kepel (Stelechocarpus buharol) Terhadap Carcinoma Colorectal. Hal. 4-5.
Singh, I. 1991. Teks dan Histologi Manusia. Binarupa Aksara. Jakarta. Hal. 293. Smith, J.B. dan Mangkoewidjojo, S. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan dan
Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. UI Press. Jakarta. Hal. 276. Toelihere, M.R. 1997. Fisiologi Reproduksi pada Ternak. Angkasa. Bandung. Hal.
138-143.
Utama, C. 2009. Bagaimana Hormon Estrogen dapat Menyebabkan Menstruasi dan Bagaimana Mekanismenya. http:/www.klikdokter.com.15/07/09. 01:10:30 PM.
Wikipedia. 2008. Mus musculus
Winda. 2007. Siklus Hidup Ovarium. http://ksuheimi.blogspot.com/2007/09/ siklus- hidup-ovarium.html.29/06/09. 02:05:24 PM.
Yatim, W. 1994. Reproduksi dan Embriologi. Tarsito. Bandung. Hal. 68-70.
