Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik
Terhadap Pertumbuhan Tanaman Padi
SITI IRMA SURYANI
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
Untuk Ibu Nani Nuryani dan Bapak Antonius Suwanto,
dua dari sedikit guru terbaik
Tuhan merahasiakan lautan dan menampakkan buih
Tuhan merahasiakan angin dan menampal{kan debu
Bagaimana pasir bisa bertebaran sendiri?
Pasir kau lihat, angin yang menghamburkannya tidak
Bagaimana buih bisa bepercikan tanpa tenaga lautan?
Cuma buih yang kau lihat, tapi lautan kau abaikan
Di hadapan pedagang tukang sihir menyulap cahaya bulan
Dan sebagai bayarannya dia memperoleh emas
Dunia adalah tukang sihir
Kita adalah pedagang yang membeli cahaya bulan dari dunia
RINGKASAN
SITI IRMA SURYANI. Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintctik Anoksigenik Terhadap Pcrtumbuhan Tanaman Padi (The Influence a/The Use of Anoxygenic Photosynthetic Bacteria on Rice Planl Growth).
Dibimbing oleh ANTONIUS SUWANTO dan ARIS TJAH10LEKSONO.
Nitrogen adalah salah satu unsur terpcnting bagi pertnmbuhan tanaman padi. Penambatan N2 dari udara mcrupakan peristiw(l penting untuk mcningkatkan kadar nitrogen daJam tallah. Baktcri fOlosinlctik anoksigenik (BFA) memiliki kcmampuan menambal N2. Dalam pcnclitiall ini dilakukan uji terhadap 15 isolat BFA dan kombinasinya dcngan Bacillus po/ymyxa dan Paenibacil/us azotofixans, yang juga mampu mcnambat N1 , alas penganlhnya tcrhadap pcrtumbuhan tanaman padi yang dilihat dari bcr.lt
kcringnya. Data bcrat kering tanaman padi diolah dcngan Rancangan Acak Lcngkap dan Uji Duncan. Pcrbcdaan tinggi tamunan padi yang telah diinokulasi dengan BFA pada media kCflas tissue maupun lumpur sawall ウセ」。イ。@ visual sudah nampak pada hari ke-14 setclah inokulasi. Inokulasi dcngan 1solat-isolat BFA pada media kertas tissue tidak menunjukkan pengaruh yang nyata terhadap berat kering t(lnaman padi dibandingkal1 dengan kontrol bakteri negatif (inokulasi dcngan 1.:.. .... \dJerichia coli DH5a..). Dibandingkan dengal1 kontrol bakteri negalif. 14 dari 15 isolat BFA yang diuji mCllunjukkan pengaruh positif yang nyata tcrhadap berat kering tanaman padi Pada inokulasi isolat -isolat BFA pada tanaman padi pada media IWl1pur sawall. Hal ini mengindikasikan bal1\\'a ke-14 isolat terscbul lumbuh dan memiliki kemampuan ll1cnambat N2 atau dapat memproduksi faktor tumbuh tanaman yang lain. Tiga isola! BFA yang meningk(ltkan berat kering tanaman padi dengan hasil yang paling til1ggi adalah MB-I8, MB-9 dan MB-21.2. Pcncampuran isolat-isolat BFA dcngan Bacillus ーッャyiQセカク。@ dan Paenibacilllls azotojixans
Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik
Terhadap Pertumbuhan Tanaman Padi
SITI IRMA SURY ANI
Skripsi
scbagai salah satu syarat uotuk mCl1lpcrolch gclar Sarjalla Sains
pada
Jurusan Biologi
JURUSAN BlOLOGI
FAKULTAS MATEMATlKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTlTUT PERTANIAN BOGOR
Judul
Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik Terhadap
Pertumbuhan Tanaman Padi
Nama
NIM
Siti Irma Suryani
G30.0249
Dr.
Ir. Antonius Suwanto. M.Sc.
Pernbimbing I
Tanggal Lulus:
3 () DE C
tIIJ
Menyetujui,
Ketua Jurusan
\
Dr
Jr.
Alis nahjoleksonO, DEA
RIWAYAT HlOUr
Penulis dilahirkan di Tangerang pada tanggal 4. lanuari 1976 scbagai anak kccmpat dati tujuh
bersaudara .• Jl1ak dari Ahmad Saduni dan luriah.
Pada tahull 1993 pcnulis lulus dari SMA Ncgcri 2 Tangerang rum pnda taluUl yang sam<l lulus
sclcksi masuk IPS melalui jalur Undangan Sclcksi Masuk IPS. Penulis m<1suk kc Jurusan Biologi,
Fakullas Matcmatika dan Ilmu Pengclahuan Alam pada tahull 1994.
Sclama masa pcrkuliahan pCl1ulis iQャ」ャセ。、ゥ@ asistcn mata kuliah Biologi Dasar 1 & II, Genetika Dasar. dan Biologi Molekular Kcragaillan Baktcri. Pacia 1996-1997 pCllulis aktif di majalah mahasiswa
PRAKATA
Alhamdulillah, puji syukur bagi Allah Yang Mal1:1 Kasih at as segala rahmat yang dibcrikan
schingga pCIlulis dapal Illcnyclcsaikan karya ilmiah ini. Judui yang dipilih cl'1lam pcnclitian iill adalah
Pcngaruh Pcmakaian Baktcri Fotosintctik Anoksigcnik Tcrhadap Pcrtumbuhan Tanaman Padi.
PCIluiis Illcngucapkan tcrimakasih kcpada Bapak Antonius Suwanto dan Bapak Aris Tjahjoleksono
sclaku pcmbimbing alas bimbingan dan mOlivasi yang dibcrik<ln, dan juga kcpada Ibu Yulin Lcstari sclaku
pcnguji yang tclah 「セャiャケ。ォ@ mcmbcrikan saran. Tcrima kasih juga pCIlulis tujukan kcpada Irawan Tan alas isalnt-isolat yang dibcrikan. Abdur ROI' .. ak alas bantuannya mCIl10trct objck penelitian, Bapak Husen dari
Laboratoriull1 Biologi Molckulcr BIOTROP. kawan-kawan di Laboratorium Mikrobiologi dan Biokimia
PAU Bio(eknologi IPB dan Labora(orillm Biologi Molekuler BIOTROP alas kerjasama yang baik, ser(a
kawan-kawan Angkatan 30 dan saudara-saudara di Baituzzukhruf alas motivasi yang diberikan dml doa
yang dipanja(kan. Penulis juga mengueapkan (erima kasih kepada Ayah, Ibu serta seillruh keluarga alas
segala doa dan kasih sayang yang tulus.
Scmoga karya ilmiah ini dapat bcrmanfaat.
Bogor, Desember 1998
DAFTARISI
Halaman
DAFTAR TABEL ... . VI
DAFTAR GAMBAR ... . VI
DAFT AR LAMPIRAN ... . VI
PENDAHULUAN ... .
BAHAN DAN METODE
Pcnyiapan 150lat Baktcri... ... 1
Penyiapan Bahan Tananlan ... ... ... ... ... .... .... ... 2 Asai Perlumbuhan Tanaman Padi ... 2
HASIL DAN PEMBAHASAN
Perkembangan Pertumbuhan Tanaman Padi Pada Media Kertas Tissue ... ,_, 2 Perkembangan Pcrtwnbuhan Tanaman Fadi Pada Media Lumpur Sawall .... ... ... ... . 3
Profil Pertumbuhan Tanaman Padi Pada Media Kertas Tissue
Yang Diinokulasi Dengan Biakan Tunggal BFA... ... 3 Profil Pcrtumbuhan Tanaman Padi Pada Media Lumpur Sawah
Yang Diinokulasi Dengan Biakan Tunggal BFA... ... ... ... 4 Profil Pcrtumbuhan Tanaman Padi Yang Diinokulasi Dengan
Kombinasi Isolal-isolal BFA Deng,m P. GZ%jixGns alau B. polymyxG ... ... 5
KESIMPULAN DAN SARAN ... 6
DAFTAR TABEL
Halaman
I. Pengamh penambahan BFA dan media kertas tissue (erhadap bera( kering (anaman padi
UIl1ur 21 hari ... 4
2. Pengaruh pcnambahan SF A dan media lumpur sawah tcrhadap heral kcring tanmnan padi
lUllur 21 hari ... ... ... 4 3. Pcngaruh penambahan BFA yang dikombinasi dengan 13. po/ymyxa dan P. aZQfojixans
(erhadap bera( kering (anaman padi umUf 21 hari yang (umbuh pada media lumpur sawall.. 5
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Profil pertwnbuhan (amman padi yang di(anam pada media kertas tissue
pada hari ke-7, ke-14 dan ke-21 se(elah inokulasi... 2
2. Profil pertumbuhan tanaman padi yang ditanam pada media lumpur sawall
PENDAHULUAN
Padi adalah ballan makanan pokok sebagian
besar penduduk dW1ia. Dcngan semakin
meningkmnya populasi penduduk dunia, meningkat pula kebuluhan akan padi. Salah salu
faktor penting yang mcmpengaruhi tingkat produksi padi adalah pcmupukan. Pcmupukan
dibutuhkan karena kandwlgan hara yang tcrdapat
dalam tanah yang tcrgenang air wl1ul11nya sangat
scdikit .
Salah salu unsur hara yang lcrpenting bagi
laJ13111311 padi adalall nitrogen. Kegiatan pertanian yang intcpsif cepat mcnurunkan perscdiaan
nitrogen (Alexander 1977). Hampir setiap tempat
mcngalami kckurangan unsur iui, kccuali bila
ditambahkan pupuk nitrogen buatan (Yoshida 1981). Tetapi pemberian pupuk nitrogen kc tanah perlanian sering banyak yang (erbuang. Peluluhan
mcrupakan salah satu pcnyebab utama hilangnya
nitrogen hingga mencapai 20-50% dari pupuk nitrogen yang ditambahkan ke tanah perlanian. Pada sawah bahkan bisa lebih dari separuhnya yang hilang (Subba Rao 1994). Selain itu pupuk
yang digunakan umumnya mcrupakan pupuk kimia yang dapat 111cnimbulkan masalah barn karena
dapat menyebabkan ketick1kseimbangan unsur ham tanah. Karena hal-hal tersebut maka usaha-usaha
pencarian dan pcngcmbangan jenis-jenis pupuk
hayati menjadi penting .
Penambatan N2 secat"3 hayati merupakan
peristiwa yang sangal penting unluk mengembalikan nitrogen ke tanah (Subba Rao 1982). Bakteri Fotosintetik Anoksigenik (BFA)
seperti rィッ、ッセーゥイゥャャオャQQL@ RhodopseudomonGs,
Rhodomicrobium. dan Rhodobacter memiliki
kemampuan menambat N2 (Brock & Madigan
1991, Richards 1987). Madigan el af. (1984) juga
mcngemukakan bahwa kemampuan Illcnambat N::! mcrupakan hal yang UIl1um pada anggota-anggota
Rhodospirillaceae. BFA juga merupakan Illikrob
yang UIllUlll tcrdapal di lahan-Iah;:m sawall Asia Tcnggara yang merupakan dacrah tropis dcngan suhu minimum dan intensitas cahaya yang rclatif
tinggi (Kobayashi el al. 1967). Scumahu el al.
(1997) mclaporkan bahwa bcberapa isolal BFA
dari bcrbagai dacrah di Indonesia mampu ll1cningkatkan bcnH kering tanaman padi.
Pada habitalnya BFA sclalu bcrada dalam
kclompok bcrs<lma dcngan baktcri-baktcri lain
(Kobayashi el al 1967). Kobayashi & Kobayashi
(1995) mengcmukakan bahwa biakan campuran
Rhodobacter capsulatus dcngan masing-masing
Azotobacter agilis, Bacillus megaleriul11 dan
Bacillus sub Ii/is dalam kondisi acrobik mampu menambat N:z lcbih banyak daripada biak;m murni
R. capsulatus e1alam konelisi yang sama.
Bacillus pO(Vl1lyxa dan Pael1ibacillus
aZDlojiXQI1S (Bacillus azotojixan::.) l11empakan
bakteri-baktcri yang diisolasi dari tanah dan akar
rwnpuL Galur-galur tcrlcntu dari !3. po(vmyxa dapat menambat N2, scdangkan pacta P. azotojixans
kemampuan mcnambat N2 justru melliadi salah
satu cirinya (Seldin el al. 1984).
Penelitian ini bertujuan untuk Illcndapatkan_ beberapa isolat BF A ケ。ョァNァサュセゥエ@ 、Nゥァuijセjォ。ョ⦅ウN・qHjァAAャB@
pupuセセセQAョ。ョN@
__pセQYl@
..
_dan ___jjスァヲヲゥセNエAil@
Gセー・ョァ。ヲゥェic@ ー・ョ。Aョ「セjiAセiス@ __!L""
l!qjyI1lJ,!C: __ NeセセNAセ@-。コッャッ}ャク。セQセGM dcngan BFA Mエ」イィ。、セャー@ pcrill1nblJhll1l_
Mエ。ャ⦅セ@
BAHAN
DAN
METODE
Pcnclitian ini dilakukan di Laboratorium
Mikrobiologi dan Biokimia (MB) PAU Bioleknologi IPB dan Laboratoriu111 Biologi Molekuler BIOTROP pada bulan April-Oklobcr 1997 dan bulan Juli-Seplember 1998.
Pcnyiapan Isolai Bakicri
Isolat-isolat bakteri yang digunakan adalah koleksi Laboratorium MB PAU Bioleknologi. Isolat-isolat BFA yang diuji adalah ME-I, MB-5. MB-7. MB-8, MB-9. MB-12.2. MB-I5. ME-18. 19. 21.2. 22. 28. 39. MB-60. & MB-61 (lrawan el al. 1988). lsolat-isolal
lain adalah Paenibaci/lus azo{ojixans dan Bacillus
ーッセカャQコカク。@ yang" didapat dan Unh'crsiti Sains
Malaysia (Seldin el al. 1984), scrta Escherichia
coli DH5cx. yang digunakan untuk menginokulasi
konlrol bakteri. Seluruh isolal BFA
masing-masing ditumbuhkan pada media Sistrom dalmn tabung-tabung ulir (volume
±
8 ml) sclmna 3 hari sccara anaerobik. Isolat-isolat P. azotojixans, B. po(vmyxa dan E coli DH5a ditumbuhkan padamedia LB sccara acrobik. Satu mililitcr suspcllsi
sci
C±
10' sellml) dari liap isolal dicuci dcnganPcnyiapan Bahan Tanaman
Benih padi (varietas IR64) didesinfeksi dengan earn dircndam dalam H20 2 50/0 selama 10 men it dan dibilas dengan aquadcs stcril selama I menit. Bcnih padi kcmlldian direndam dalam ctanol 95% selama 10 delik, dan dibilas lagi dcngan aquadcs slerii sclama I mcnil. SClelah itu benih padi direndam dalam GA, ( asam giberelal) I ppm selama 2 hari. Pemakaian GA3 dilakukan llntuk meningkatkan daya kccambah bcnih yang mungkin telah tumn akibat pcrlakuan dcsinfcksi, dan mcnyeragamkan waktu keeambah bcnih. Pcnelitian pendahuluan mCllunjllkkan bahwa pcmakaian GA3 mcmpereepat pcrkceambahan.
Asai Pcrtumbuhan Tanaman Padi
Benih padi dikecambahkan dalam cawan-eawan petri selama 4 hari, lalu kccambah dipindahkan ke dalam bOIOI-botol sclai berisi media t,mam dan larutan hara lanpa nitrogen (Yoshida el al. 1976). Ada dua macam media tanam yang digunakan, yaitu kertas tissue tak beparfmu (merck Kissy Superior produksi PT Pancausahatama Paramita) yang tcluh disterilkan yang digunakan hanya pada uji biakan tunggal BFA, dan Iwupur sawah yang diambil dmi Kelurahan Bendungan. Kecamatan Ciawi Kabupaten Bogar (± 10 g) yang lelah disterilkan
2
yang digunakan untllk uji biakan tllnggal BFA dan uji biakan campuran. Kedlla media dislcrilkan dalam otoklaf sclama 15 Illcnit pada suhu 121°C pH larutan hara untuk media kertas tissue di,ltur menjadi 5.0-5.3 scdangkan untuk media lanmn lumpur sawall diatur menjadi 6.0-7.0. Pengaturan pH dilakukan dengan penambahan 1 N NaOH atau 0.1 N He!. lnokulasi bakteri dilakukan langsung setelah kecambah dipindahkan ke botol-botol sclai. Kontrol yang digunakan ada tiga macam, yailu salu pcrIaku;:li1 inokul<:lsi dcngan E. coli DH5o:. untuk konlroi bakteri ncgatif, perlakuan lanpa inokulasi untuk kontrol ョ」ァ。エゥ{セ@ dan pcrlakuan pcmberian larutnn hara yang mcngandung 0.1 <XI (wi\")
NH.,NO, untuk kontrol posit if. Botol-botol yang tclah bcrisi tanaman terscbut dilctakkan di rumah kaca. Uji biakan tunggal BFA pada media kertas tissue dilakukan pada bulan Oktober 1997. scdangkan uji biakan tunggal BFA pada media lumpur sawah dilakukan pada bulan Agustus 1998. Uji biakan campuran dilakukan pada bulan September 1998. Setelah 21 hari. seluruh bagian tanaman dipanen lalu dikcringkan di dalam ovcn dengan suhu 120°C sclama lujuh jam lalll ditimbang. Data berat kering terscbut kemudian diolah dengan metodc Rancangan Acak Lcngkap dan Uji Duncan (Gaspersz 1991).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Perkcmbangall Pertumbuhan Tanaman Padi Pada Media Ker-tas Tissue
Hari ke-7 Hari ke-21
Hari kc-14
Gmnbar 1. Profil pcrtumbuhan tanaman padi yang dit:.mam pada mcdia tanam kertas tissue pada hari ke-7, ke-14
rum
ke-21 setelah inokulasi.kontfol ncgatif. R.'1ta-rata tanaman padi yang
diinokulasi baik dcngan isolat -isolat BFA maupun
dcngan E. coli DH50'. tcrlihat lcbih linggi dari kontrol ncgatif. Kontrol positif lcbih tinggi
dibandingkan scmua tanaman yang lain.
Sedangkan pada hari kc-21, tcrlihat pcrbcdaan yang mencolok antara kontrol positif dengan tanaman-tanmnan yang lain. Kontrol positif lcbih tinggi dan lcbih hijau dibandingkan scluruh tanaman yang lain. Konlrol negatif lcbih rendah dibandingkan SCHlUa tanaman yang lain.
Pcri{cmiJangan PCI1.umbuhan Tanaman Padi Pada I\1cdia Tamlll1 Lumpur" Sawah
Di hari ke-7 inokulasi. sama dcngan yang di tanam pada kcrtas tissue, bclulll tcrlihat pcrbcdaan yang mencolok antar tanaman-tanaman yang ditanam pada media lumpur sawall. Scdangkan
pada hari ke-14, tampak pcrbcdaan di antard
tanaman-tanaman tersebut. Tanaman-tanaman
padi yang diinokulasi dengan BFA dan E. coli DH5a. mcmiliki ukumn yang lcbih tinggi dibandingkan kontrol ncgatif. walaupnn lebih rendah dibandingkan dcngan kontrol posit if. Pacta
hari ke-21, sepcrti juga yang ditanam pada media kcrtas tissue tanaman-tanaman kontrol positif lebih tinggi dibandingkan yang lain. Tanaman konual
[image:12.532.62.258.460.715.2]ncga!if juga tampak Icbih rcndah dibandingkan dengan yang diinokulasi dengan isolat -isolat BFA (Gambar 2).
Hari ke-7
Hari ke-14
3
Hari ke-21
Gambar 2. Profil pcrtumbuhan tanmnan padi yang ditanam pacta media tanam lumpur
sawah pada hari kc-7, kc-14 dan ke-21 setelah inokulasi.
Pada masa awal pertumbuhan tanaman,
pcrbedaan bcluIl1 tampak mencolok. Hal ini
mungkin discbabkan tanaman masih menggunakan nitrogen tcrscdia yang terdapat pada lumpur sawall
yang kandungannya rdatif sama pada setiap botol uji. Sctelah menggunakan nitrogen dari lumpur
sawah, tanaman barn Iuenggunakan nitrogen dari
hasil penambatan N, oleh isolat-isolat BFA. Maka tampaklah pcrbedaan tinggi antar tanaman-tanaman terscbut, yang terlihat makin Il1cneolok pada hari ke-21 (hari panen). Perbedaan tinggi
kemungkinan akan makin nyata jika tanaman dipanen pada usia yang lebih tua dan wadah lanam
lebih besar.
P.-ofi! Pcrtumbuhan Tanaman Padi Pad a Mcdia
Kcrtas Tisslle Yang Diinokulasi Dcngan Biakan tunggal BFA
Dari pcngukuran berat kering t3naman padi yang telall diinokulasikan dengan lima belas isola1 BFA dalam media kertas tissue didapatkan bahwa
II isolal menunjukkan hasil rata-rata berat kering
yang lebih tinggi dan cmpat isolat yang lcbih rcndah dibandingkml dengan E. coli DH5a . Sccara statistik ke-I5 isolat BFA tcrsebut temyata
tidak bcrbeda nyata dcngan E. coli DH5a.. Kontrol
negatif ュ・ュャャセオォォ。ョ@ hasil rata-rata berat kering yang tcrcndah dibandingkan dengan SCHum isolat,
semen tara kontrol positif menunjukkan hasil
rata-rata berat kering yang tertinggi. Seluruh isola1 berbeda nyata dengall kontrol negatif kecuali
Tabcl 1. Pengamh penambahan BFA dan media kertas tissue tcrhadap berm kering tanmnan padi Ulnur 21 lwri
Perlakuan Bera! Kering (g)*
Kontrol Positif 0.06210 a MB-61 0.04060 b MB-12.2 0.04050 b MB-21.2 0.03920 be MB-I 0.03880 be MB-9 0.03873 be
MB-39 0.03850 bed
ME-15 0.03750 bed MB-5 0.03720 bed MB-18 0.03710 bed MB-22 0.03700 bed MB-7 0.03G20 bed E. coli DH5cx 0.03617 bed MB-19 0.03590 bed MB-8 0.03580 bed MB-2R 0.03480 ee ME-GO 0.03380 de Kontrol Negatif 0.03030 e
Kl!ternngan:
Angka yang diikuti olch salah satu alnu Icbih hurufynng sallla tidak b¢rbcda nyata pada t.1rnfuji 5%
*Rata-rata dari tiga ulangan
Dari hasil tersebut terlihat bahwa pemberiau inokulum seeara Ulllum berpengaruh pada pertumbuhan tauaman padi. Baik yang diinokulasi dengan BFA maupun dengan E. coli DHScx tumbuh lebih baik dibandingkan dengan kontrol negatif. lsolat-isolat BFA yang digunakan
kemungkinan mati atau lerhambal pertumbuhannya karena kondisi lingkungan yang kurang sesuai unluk pertumbuhannya. Penggunaan kertas tissue
sebagai media tanalll dapat lllempengaruhi pertumbuhan BFA yang habitat alaminya adalah lumpur s<1\v311, walaupun d..:'1lam Seulllahu et al. (1997) disebutkan ada isolat -isolat BFA yang
pengaruhnya berbcda nyata dengan E coli DH5cx. pada media tanam kertas tisu. Dcrajat keasaman l£1rutan hara yang berkisar 5.0-5.3, sesuai dcngan
yang dianjurkan oleh Yoshida et 01. (1976) juga dapat mempengaruhi pertumbuhan sel-sel BFA
yang umumnya tumbuh baik dalam kisaran pH normaL
Profil Pcrtumbuhan Tanaman Padi Pada l\lcdia
Lumpur Sawah Yang Diinokulasi Dcngan
Biakan Tunggal BFA
Seluruh perlakuan dengan isolat-isolat BFA dalam media lumpur sawah menunjukkan hasil rata-rata berat kering tan3man padi yang lebih tinggi daripada per1akllan dengan E. coli DH5a
dan kontrol ncgatif. Secara statistik scluruh isolat
bcrbeda nyata dengan keduanya keeuali MB-19 yang tidak berbeda nyata dengan E. coli DH5cx. Di
antara isolat-isolat BFA pun saling berbeda n1'£1ta. Ada tiga isolat dengan h::ISil berat kcring tertinggi yang saling tidak bcrbeda nyata, yaitll MB-IS,
MB-21.2 dan MB-9 (Tabcl 2).
Tabel 2. Pengaruh penambahan BFA dan media
lumpur sawah lcrhadap berat kering tanaman padi
umur 21 hmi
Perlakuau
Kontrol Positif MB-18 MB-2I.2 MB-9 MB-61 MB-28 MB-39 MB-7 MB-5 MB-15 MB-8 MB-12.2 MB-I MB-GO MB-22 MB-19 E. coli DH5cx Kontrol Negatif
Kctcrangan:
Berat Kering (g)*
0.07863 a 0.05967 b 0.05807 be 0.05737 be 0.05567 e 0.05287 d 0.05257 d 0.05257 d 0.05237 d 0.05223 d 0.04887 e 0.04843 e 0.04837 e 0.04743 e 0.04723 c 0.04587 ef 0.04350 fg 0'()42 13 g
Angka yang diikuti oleh salah satl! atlllllcbih hllnlfyang sama tidak bcrbcda nyata pada tarafuji 5%
*Rata-rata dan tiga ulangan
Hasil pengujian dengan media lumpur sawah menunjukkan bahwa isolat-isolat yang digunakan dapat meningkatkan pcrtumbuhan tanmnan padi
pada kisaran pH 6.0-7.0. Perbedaan-perbedaan yang te,jadi di antara isolat-isolat BFA. dapat
disebabkan olch pcrbcdaan kemal11puan
[image:13.541.51.255.145.377.2]pcrbcdaan pertumbuhan tanaman padi. Kemungkinan lain adalah pcrbcdaan kcmampuan penambalan N2 atau produksi faktor penmeu tumbull tanaman laiJmya tidak terlalu besar, tetapi perbedaan kecepatan pertumbuhan isolatlah yang menyebabkan perbedaan berat kering tanaman. Jika kecepatan pertumbuhmmya lcbih tinggi, dcngan semakin bertambalmya waktu, jumlah selnya akan lebih banyak dibandingkan yang memiliki keccpatan ー・イエオュ「オィセャョ@ yang lcbih rendah.
Tiga isolat BFA yang mcmbcrikan pertumbuhan tanaman dcngan hasil tcrtinggi. yaitu MB-18, MB-21.2 dan MB-9, dicalllpurkan dcngan isolal B. polymyxa dan P. GZOlojiXGnS untuk uji lebih lanjut.
Profil Pcr-tumbuhan Tanaman Padi Yang
Diinokulasi Dengan Kombinasi Isolat-isolat
BFA Dengan P. azotojLX{llls atau B. pO(l'l11yxa
Hasil pengujian kombinasi isolat-isolat BFA dengan B. polymyxa dan P. azotojixans menunjukkan pengaruh yang beragam. MB-9 Illenghasilkan berat kering yang lebih baik jik.1 dicalllpurkan dengan B. polymyxa daripada biakan tunggalnya ataupun kOlllbinasi lainnya. MB-18 lebih baik jika berada dalalll biakan tunggaL
5
Sedangkal1 MB-21.2 menghasilkan beral kering yang lebih tinggi jika dic<lIllpUrkan dengan P. GZOlojiXGnS, tClapi tidak demikian jika dicampurkan dengan B. ーoセvQQャケク。N@ Pcnambahan B. polyl11yxa dan P. azolojixans tidak berbcda nyala dcngan E.coli DH5a dan kantrol negatif Lャャセャャャ@
dcngan kata lain tidak mcmbcrikan kontribusi bagi pertumbuhan lanaman padi (TabeI 3).
Keragaman pengamh kombinasi isolat -isolat
BFA dengan /J. ーッセカャQャケク。@ dan P. azotojixans yang
ditunjukkan dengan カ。イゥセャウゥ@ pcrbcdaan bera! kering diduga karcna interaksi yang terjadi di antara bakteri-baktcri terscbut bcrbeda-beda. Intcraksi yang ter:iadi pada kombinasi yang mcnghasilk,1Il berat kering lcbill tinggi daripada biakan tunggal BFA-nya, seperti MB-9 dengan /3. ーッセカュケク。@ dan
ME-IS dcngan P. azotojixons, diduga mcnghasilkan cfck sincrgis yang dapat mcningkatkan bcrat kcring l(lI1(lI11aIl padi. Scdangkan intcraksi yang mungkin tcrjadi pada kombinasi yang mcnghasilkan berat kcring Icbih rendah daripada biakan tunggal BFA-nya, seperti MB-9 dengan P. azotojixal1s, MB-21.2 dcngan B.
ーッセカュケク。L@ alau ME-I8 dengan B. ーッセカjQャケク。@ dan P. azotojixans, adalah persaingan anlar anggota biakan campuran dalam hal nutrisi.
Tabel 3. Pengaruh penambahan BFA yang dikombinasi dengan B. polYIIIYxa dan P. azotojixans terhadap berat kering tanamall padi umur 21 hari yang tumbull pacta media lumPll! sawah
Pcrlakuan
Kontrol Positif
MB-9 + B. ーoセvャャQケク。@
MB-18 MB-9
MB-18 + P. azotojixans MB-1S + B. PO(I'III-,'W MB-21.2 + P. azotojixans
MB-9 + B. po(ymyxa
+
P. azolojixansMB-21.2
MB-21.2 + B. ーoセvャャiケク。@ + P. azolo/ixans P. azo{o/ixans
MB-1S + 13. polvmyxa
+
P. azoto(ixal1s MB-21.2 + 13. polvlllyxaE.coli DH5u
Berell Kering (g)*
0.08013 a 0.05997 b 0.05943 b 0.05750 be 0.05733 be 0.05707 be 0.05550 cd 0.05530 cd 0.05487 cd 0.05313 d 0.04950 c 0.04940 c 0.04870 c 0'()4710 c
MB-9 + P. azorojixans 0.04610 ef
13. ーッセカャQQケク。@ 0.04583 cf
Kontrol Negatif (l.()4253 f
[image:14.532.60.473.455.676.2]HasH yang didapatkm dal,llll penelitian ini
berbeda dengan yang dilaporkan Kobayashi &
Kobayashi (1995). Hasil penelitian Kobayashi &
Kobayashi (1995) menunjukkan bahwa
pencampuran BFA dengan bakteri lain akan Illeningk.:'ltkan penambatan N2. Hal ini mungkin disebabkan karena kondisi percobaan yang
berbeda. Pada Kobayashi & Kobayashi (1995) percobaan dilakukan di bawah kondisi acrobik
scdangkan percobaan ini dilak'1lkan pada lumpur sawall yang kandungan oksigennya relalif rcndah. Kandungan oksigen yang rendah ini diduga
mcnghambal perlumbuhan B. polymyxa dan P. azotojixans.
KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil yang diperolch dapal disimpulkan ballWa pada hari ke-14 sctciah
inokulasi sudah terlihat perbedaan tinggi lanalllan
padi, baik yang ditanam pada media kerlas tissue Illaupun pada media lumpur sawall. Dcngan semakin bertambalmya umur tanall1an padi makin lerlihat perbedaan tinggi lanaman secara visual. Inokulasi BFA secara UIl1Ulll berpengaruh positif
terhadap perlumbuhan tanaman padi.
Isolat-isolat ME-18, ME-9 dan ME-21.2, walaupun tidak sebaik kontrol positif, bisa
mcningkati<an pcrtull1buhan tanall1an padi scllingga dapal mcnjadi kandidat unluk digunakan scbagai pupuk hayati bagi tamllnan padi. Pcncampuran BFA dcngan P. azotojixans dan B. polYlllyxa
dalall1 pcnclitian ini ュ・ョuャセオォォ。ョ@ pcngaruh yang beragam bagi pertumbuilan tanaman padi.
Unluk penelitian- penelitian bcrikutnya tcntang pell1bcrian bakteri ke tanaman padi disarankan
dilakukan dalam rumah bca yang terkontrol suhu dan kelembabannya sehingga faktor-faktor lersebut
bisa seragam.
DAFTAR PUSTAKA
Alexander, M. microbiology. Inc., USA.
1977. Introduction to soil
Ed. Ke-2. John Wiley and Sons,
Brock, T.D. & M.T. Madigan. 1991 Biology of Microorganisms. Ed. Ke-6. Prentice Hall, New
Jersey.
Gaspersz, V. 1991. Metode Perancangan Percobaan untuk Jlmll-ilmu Pertanian, I1mu-ilmu Teknik, Biologi. CV Annico, Bandung.
Irawan, A. Suwanto & P.D. Tjondronegoro. 1998. Isolasi dan penapisan baklcri folosinletik
anoksigenik penghasil asmn o-aminolcvulinat
ekstraseluler. Hayati. In press.
Kohayashi, M. & M. Kobayashi. 1995. Wastc
remediation and treatment using ano:\"ygenic
phototrophic bacteria, him. 1269-1282. Di dalmn R.E. Blankenship, M.T. Madigan & C.E.
Bauer (Penyunting). Ano.,,\vgenic
Photosynthetic Bacteria. Kluwer Academic
Publishers, Netherlands.
Kobayashi, M., E. Talmhashi & K Kawab'Uchi. 1967. Distribution of nitrogen fixing
microorganism in paddy soil of Southeast Asia. Soil Sci. 104: 113-118.
Madigan, M. S.S. Cox & R.A. Stegeman. 1984
Nitrogen fixation and nitrogenase activities in
members of the family Rhodospirillaceae. J.
Bacterial. 34: 73-78.
Richards, R.N. 1987. 711e Microbiology of Terestrial Ecosystems. Longman Scientific and
Tcchnical, England, UK.
Seldin, L., J.D. Van Elsas & E.G.c. Penido. 1984. Bacillus azotojlxons sp. nov.,
a
nitrogcn-fixing species from Brazilian soils andgmssroots. Int. J. Syst. Bacterial. 34 (4):451-456.
Scumahu, C.A., A. Suwanto & A.
Tjahjoleksollo. 1997. Karaklcrisasi sejumlah
isolat bakteri fotosintclik anoksigcnik untuk
pupuk hayali padi. Hayati 4(3): 67-71.
Subba Rao, N.S. 1982. Bio(ertilizers il1
Agriculture. Oxford and Publishing Co .. Ncw
Dclhi.
Yoshida, S., D.A. Forna, J.B. Cock & K.A. Gomez. 1976 LaborafOlY A/anual for Physiological Srudies Hセイ@ Rice. Ed. Kc 3. The lntcmational Rice Research Institute. Los Banos. l。ァオョセャN@ Philippines.
7
Yoshida, S. 1981. Fundamentals of RIce Crop Science. The Intcmational Rice Research
Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik
Terhadap Pertumbuhan Tanaman Padi
SITI IRMA SURYANI
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
Untuk Ibu Nani Nuryani dan Bapak Antonius Suwanto,
dua dari sedikit guru terbaik
Tuhan merahasiakan lautan dan menampakkan buih
Tuhan merahasiakan angin dan menampal{kan debu
Bagaimana pasir bisa bertebaran sendiri?
Pasir kau lihat, angin yang menghamburkannya tidak
Bagaimana buih bisa bepercikan tanpa tenaga lautan?
Cuma buih yang kau lihat, tapi lautan kau abaikan
Di hadapan pedagang tukang sihir menyulap cahaya bulan
Dan sebagai bayarannya dia memperoleh emas
Dunia adalah tukang sihir
Kita adalah pedagang yang membeli cahaya bulan dari dunia
RINGKASAN
SITI IRMA SURYANI. Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintctik Anoksigenik Terhadap Pcrtumbuhan Tanaman Padi (The Influence a/The Use of Anoxygenic Photosynthetic Bacteria on Rice Planl Growth).
Dibimbing oleh ANTONIUS SUWANTO dan ARIS TJAH10LEKSONO.
Nitrogen adalah salah satu unsur terpcnting bagi pertnmbuhan tanaman padi. Penambatan N2 dari udara mcrupakan peristiw(l penting untuk mcningkatkan kadar nitrogen daJam tallah. Baktcri fOlosinlctik anoksigenik (BFA) memiliki kcmampuan menambal N2. Dalam pcnclitiall ini dilakukan uji terhadap 15 isolat BFA dan kombinasinya dcngan Bacillus po/ymyxa dan Paenibacil/us azotofixans, yang juga mampu mcnambat N1 , alas penganlhnya tcrhadap pcrtumbuhan tanaman padi yang dilihat dari bcr.lt
kcringnya. Data bcrat kering tanaman padi diolah dcngan Rancangan Acak Lcngkap dan Uji Duncan. Pcrbcdaan tinggi tamunan padi yang telah diinokulasi dengan BFA pada media kCflas tissue maupun lumpur sawall ウセ」。イ。@ visual sudah nampak pada hari ke-14 setclah inokulasi. Inokulasi dcngan 1solat-isolat BFA pada media kertas tissue tidak menunjukkan pengaruh yang nyata terhadap berat kering t(lnaman padi dibandingkal1 dengan kontrol bakteri negatif (inokulasi dcngan 1.:.. .... \dJerichia coli DH5a..). Dibandingkan dengal1 kontrol bakteri negalif. 14 dari 15 isolat BFA yang diuji mCllunjukkan pengaruh positif yang nyata tcrhadap berat kering tanaman padi Pada inokulasi isolat -isolat BFA pada tanaman padi pada media IWl1pur sawall. Hal ini mengindikasikan bal1\\'a ke-14 isolat terscbul lumbuh dan memiliki kemampuan ll1cnambat N2 atau dapat memproduksi faktor tumbuh tanaman yang lain. Tiga isola! BFA yang meningk(ltkan berat kering tanaman padi dengan hasil yang paling til1ggi adalah MB-I8, MB-9 dan MB-21.2. Pcncampuran isolat-isolat BFA dcngan Bacillus ーッャyiQセカク。@ dan Paenibacilllls azotojixans
Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik
Terhadap Pertumbuhan Tanaman Padi
SITI IRMA SURY ANI
Skripsi
scbagai salah satu syarat uotuk mCl1lpcrolch gclar Sarjalla Sains
pada
Jurusan Biologi
JURUSAN BlOLOGI
FAKULTAS MATEMATlKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTlTUT PERTANIAN BOGOR
Judul
Pengaruh Pemakaian Bakteri Fotosintetik Anoksigenik Terhadap
Pertumbuhan Tanaman Padi
Nama
NIM
Siti Irma Suryani
G30.0249
Dr.
Ir. Antonius Suwanto. M.Sc.
Pernbimbing I
Tanggal Lulus:
3 () DE C
tIIJ
Menyetujui,
Ketua Jurusan
\
Dr
Jr.
Alis nahjoleksonO, DEA
RIWAYAT HlOUr
Penulis dilahirkan di Tangerang pada tanggal 4. lanuari 1976 scbagai anak kccmpat dati tujuh
bersaudara .• Jl1ak dari Ahmad Saduni dan luriah.
Pada tahull 1993 pcnulis lulus dari SMA Ncgcri 2 Tangerang rum pnda taluUl yang sam<l lulus
sclcksi masuk IPS melalui jalur Undangan Sclcksi Masuk IPS. Penulis m<1suk kc Jurusan Biologi,
Fakullas Matcmatika dan Ilmu Pengclahuan Alam pada tahull 1994.
Sclama masa pcrkuliahan pCl1ulis iQャ」ャセ。、ゥ@ asistcn mata kuliah Biologi Dasar 1 & II, Genetika Dasar. dan Biologi Molekular Kcragaillan Baktcri. Pacia 1996-1997 pCllulis aktif di majalah mahasiswa
PRAKATA
Alhamdulillah, puji syukur bagi Allah Yang Mal1:1 Kasih at as segala rahmat yang dibcrikan
schingga pCIlulis dapal Illcnyclcsaikan karya ilmiah ini. Judui yang dipilih cl'1lam pcnclitian iill adalah
Pcngaruh Pcmakaian Baktcri Fotosintctik Anoksigcnik Tcrhadap Pcrtumbuhan Tanaman Padi.
PCIluiis Illcngucapkan tcrimakasih kcpada Bapak Antonius Suwanto dan Bapak Aris Tjahjoleksono
sclaku pcmbimbing alas bimbingan dan mOlivasi yang dibcrik<ln, dan juga kcpada Ibu Yulin Lcstari sclaku
pcnguji yang tclah 「セャiャケ。ォ@ mcmbcrikan saran. Tcrima kasih juga pCIlulis tujukan kcpada Irawan Tan alas isalnt-isolat yang dibcrikan. Abdur ROI' .. ak alas bantuannya mCIl10trct objck penelitian, Bapak Husen dari
Laboratoriull1 Biologi Molckulcr BIOTROP. kawan-kawan di Laboratorium Mikrobiologi dan Biokimia
PAU Bio(eknologi IPB dan Labora(orillm Biologi Molekuler BIOTROP alas kerjasama yang baik, ser(a
kawan-kawan Angkatan 30 dan saudara-saudara di Baituzzukhruf alas motivasi yang diberikan dml doa
yang dipanja(kan. Penulis juga mengueapkan (erima kasih kepada Ayah, Ibu serta seillruh keluarga alas
segala doa dan kasih sayang yang tulus.
Scmoga karya ilmiah ini dapat bcrmanfaat.
Bogor, Desember 1998
DAFTARISI
Halaman
DAFTAR TABEL ... . VI
DAFTAR GAMBAR ... . VI
DAFT AR LAMPIRAN ... . VI
PENDAHULUAN ... .
BAHAN DAN METODE
Pcnyiapan 150lat Baktcri... ... 1
Penyiapan Bahan Tananlan ... ... ... ... ... .... .... ... 2 Asai Perlumbuhan Tanaman Padi ... 2
HASIL DAN PEMBAHASAN
Perkembangan Pertumbuhan Tanaman Padi Pada Media Kertas Tissue ... ,_, 2 Perkembangan Pcrtwnbuhan Tanaman Fadi Pada Media Lumpur Sawall .... ... ... ... . 3
Profil Pertumbuhan Tanaman Padi Pada Media Kertas Tissue
Yang Diinokulasi Dengan Biakan Tunggal BFA... ... 3 Profil Pcrtumbuhan Tanaman Padi Pada Media Lumpur Sawah
Yang Diinokulasi Dengan Biakan Tunggal BFA... ... ... ... 4 Profil Pcrtumbuhan Tanaman Padi Yang Diinokulasi Dengan
Kombinasi Isolal-isolal BFA Deng,m P. GZ%jixGns alau B. polymyxG ... ... 5
KESIMPULAN DAN SARAN ... 6
DAFTAR TABEL
Halaman
I. Pengamh penambahan BFA dan media kertas tissue (erhadap bera( kering (anaman padi
UIl1ur 21 hari ... 4
2. Pengaruh pcnambahan SF A dan media lumpur sawah tcrhadap heral kcring tanmnan padi
lUllur 21 hari ... ... ... 4 3. Pcngaruh penambahan BFA yang dikombinasi dengan 13. po/ymyxa dan P. aZQfojixans
(erhadap bera( kering (anaman padi umUf 21 hari yang (umbuh pada media lumpur sawall.. 5
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Profil pertwnbuhan (amman padi yang di(anam pada media kertas tissue
pada hari ke-7, ke-14 dan ke-21 se(elah inokulasi... 2
2. Profil pertumbuhan tanaman padi yang ditanam pada media lumpur sawall
PENDAHULUAN
Padi adalah ballan makanan pokok sebagian
besar penduduk dW1ia. Dcngan semakin
meningkmnya populasi penduduk dunia, meningkat pula kebuluhan akan padi. Salah salu
faktor penting yang mcmpengaruhi tingkat produksi padi adalah pcmupukan. Pcmupukan
dibutuhkan karena kandwlgan hara yang tcrdapat
dalam tanah yang tcrgenang air wl1ul11nya sangat
scdikit .
Salah salu unsur hara yang lcrpenting bagi
laJ13111311 padi adalall nitrogen. Kegiatan pertanian yang intcpsif cepat mcnurunkan perscdiaan
nitrogen (Alexander 1977). Hampir setiap tempat
mcngalami kckurangan unsur iui, kccuali bila
ditambahkan pupuk nitrogen buatan (Yoshida 1981). Tetapi pemberian pupuk nitrogen kc tanah perlanian sering banyak yang (erbuang. Peluluhan
mcrupakan salah satu pcnyebab utama hilangnya
nitrogen hingga mencapai 20-50% dari pupuk nitrogen yang ditambahkan ke tanah perlanian. Pada sawah bahkan bisa lebih dari separuhnya yang hilang (Subba Rao 1994). Selain itu pupuk
yang digunakan umumnya mcrupakan pupuk kimia yang dapat 111cnimbulkan masalah barn karena
dapat menyebabkan ketick1kseimbangan unsur ham tanah. Karena hal-hal tersebut maka usaha-usaha
pencarian dan pcngcmbangan jenis-jenis pupuk
hayati menjadi penting .
Penambatan N2 secat"3 hayati merupakan
peristiwa yang sangal penting unluk mengembalikan nitrogen ke tanah (Subba Rao 1982). Bakteri Fotosintetik Anoksigenik (BFA)
seperti rィッ、ッセーゥイゥャャオャQQL@ RhodopseudomonGs,
Rhodomicrobium. dan Rhodobacter memiliki
kemampuan menambat N2 (Brock & Madigan
1991, Richards 1987). Madigan el af. (1984) juga
mcngemukakan bahwa kemampuan Illcnambat N::! mcrupakan hal yang UIl1um pada anggota-anggota
Rhodospirillaceae. BFA juga merupakan Illikrob
yang UIllUlll tcrdapal di lahan-Iah;:m sawall Asia Tcnggara yang merupakan dacrah tropis dcngan suhu minimum dan intensitas cahaya yang rclatif
tinggi (Kobayashi el al. 1967). Scumahu el al.
(1997) mclaporkan bahwa bcberapa isolal BFA
dari bcrbagai dacrah di Indonesia mampu ll1cningkatkan bcnH kering tanaman padi.
Pada habitalnya BFA sclalu bcrada dalam
kclompok bcrs<lma dcngan baktcri-baktcri lain
(Kobayashi el al 1967). Kobayashi & Kobayashi
(1995) mengcmukakan bahwa biakan campuran
Rhodobacter capsulatus dcngan masing-masing
Azotobacter agilis, Bacillus megaleriul11 dan
Bacillus sub Ii/is dalam kondisi acrobik mampu menambat N:z lcbih banyak daripada biak;m murni
R. capsulatus e1alam konelisi yang sama.
Bacillus pO(Vl1lyxa dan Pael1ibacillus
aZDlojiXQI1S (Bacillus azotojixan::.) l11empakan
bakteri-baktcri yang diisolasi dari tanah dan akar
rwnpuL Galur-galur tcrlcntu dari !3. po(vmyxa dapat menambat N2, scdangkan pacta P. azotojixans
kemampuan mcnambat N2 justru melliadi salah
satu cirinya (Seldin el al. 1984).
Penelitian ini bertujuan untuk Illcndapatkan_ beberapa isolat BF A ケ。ョァNァサュセゥエ@ 、Nゥァuijセjォ。ョ⦅ウN・qHjァAAャB@
pupuセセセQAョ。ョN@
__pセQYl@
..
_dan ___jjスァヲヲゥセNエAil@
Gセー・ョァ。ヲゥェic@ ー・ョ。Aョ「セjiAセiス@ __!L""
l!qjyI1lJ,!C: __ NeセセNAセ@-。コッャッ}ャク。セQセGM dcngan BFA Mエ」イィ。、セャー@ pcrill1nblJhll1l_
Mエ。ャ⦅セ@
BAHAN
DAN
METODE
Pcnclitian ini dilakukan di Laboratorium
Mikrobiologi dan Biokimia (MB) PAU Bioleknologi IPB dan Laboratoriu111 Biologi Molekuler BIOTROP pada bulan April-Oklobcr 1997 dan bulan Juli-Seplember 1998.
Pcnyiapan Isolai Bakicri
Isolat-isolat bakteri yang digunakan adalah koleksi Laboratorium MB PAU Bioleknologi. Isolat-isolat BFA yang diuji adalah ME-I, MB-5. MB-7. MB-8, MB-9. MB-12.2. MB-I5. ME-18. 19. 21.2. 22. 28. 39. MB-60. & MB-61 (lrawan el al. 1988). lsolat-isolal
lain adalah Paenibaci/lus azo{ojixans dan Bacillus
ーッセカャQコカク。@ yang" didapat dan Unh'crsiti Sains
Malaysia (Seldin el al. 1984), scrta Escherichia
coli DH5cx. yang digunakan untuk menginokulasi
konlrol bakteri. Seluruh isolal BFA
masing-masing ditumbuhkan pada media Sistrom dalmn tabung-tabung ulir (volume
±
8 ml) sclmna 3 hari sccara anaerobik. Isolat-isolat P. azotojixans, B. po(vmyxa dan E coli DH5a ditumbuhkan padamedia LB sccara acrobik. Satu mililitcr suspcllsi
sci
C±
10' sellml) dari liap isolal dicuci dcngan