EFIKASI LARVASIDA
Bacillus thuringiensis
israelensis
TERHADAP KEMATIAN LARVA
Culex quinquefasciatus
DARI DAERAH BEKASI
Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN
OLEH:
Aqidatul Islamiyyati Elqowiyya
NIM: 1112103000042
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI
SYARIF HIDAYATULLAH
JAKARTA
v
KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala rahmat dan
hidayah-Nya, penulis dapat menyelesaikan laporan penelitian ini yang berjudul
Efikasi larvasida Bacillus thuringiensisisraelensis terhadap kematian larva Culex quinquefasciatus dari daerah Bekasi.
Tak lupa, shalawat serta salam saya hanturkan pada junjungan Nabi besar
kita, Nabi Muhammad saw yang membawa kita dari zaman jahiliyah ke zaman
terang benderang yang penuh dengan teknologi ini beserta kepada para keluarga
dan sahabatnya.
Dalam pembuatan skripsi ini, penulis telah berusaha semaksimal mungkin
dengan segala kemampuan yang penulis miliki. Tanpa mengurangi penghargaan
dan penghormatan penulis kepada semua pihak yang telah berjasa terhadap
penyelesaian skripsi ini yaitu: Drs. H. Mohammad Bisry dan Hj. Muizzah, S.Pd.I,
kedua orangtua saya yang telah banyak mendukung dan mendoakan untuk
keberhasilan dan kesuksesan saya, Silvia Fitrina Nasution, M.Biomed dan dr.
Dyah Ayu Woro, M.Biomed selaku dosen pembimbing skripsi saya yang telah
banyak membimbing dan mengarahkan dalam penelitian dan penyusunan laporan
skripsi ini, dr. H. Meizi Fachrizal Achmad, M.Biomed dan dr. Intan Keumala
Dewi, SpMK selaku penguji skripsi yang telah memberikan masukan dalam
penyusunan laporan penelitian ini serta teman-teman sejawat PSPD 2012 yang
selalu mendukung saya.
Sudah tentu, laporan skripsi ini masih terdapat kekurangan dan koreksi.
Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi
kemajuan penulis.
Ciputat, September 2015
vi
ABSTRAK
Aqidatul Islamiyyati Elqowiyya. Program Studi Pendidikan Dokter. Efikasi larvasida Bacillus thuringiensis israelensis terhadap kematian larva Culex quinquefasciatus dari daerah Bekasi.
Latar belakang: Resistensi terhadap insektisida banyak dilaporkan telah terjadi pada nyamuk Culex quinquefasciatus. Penggunaan bahan kimiawi sebagai insektisida dalam jangka waktu tertentu dapat menyebabkan resistensi nyamuk dan pencemaran lingkungan. Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) merupakan larvasida biologi yang bekerja sebagai toksin pencernaan pada larva yang dapat menyebabkan kematian, namun bersifat aman terhadap hewan bukan sasaran dan manusia, serta aman bagi lingkungan. Tujuan: untuk mengetahui pengaruh konsentrasi Bti terhadap kematian larva Cx. quinquefasciatus, serta konsentrasi efektif yang menyebabkan 50% dan 90% kematian larva. Metode penelitian:
Desain penelitian eksperimental, berpasangan dan lebih dari 2 kelompok perlakuan. Sampel yang diambil secara purposive sampling berupa larva instar III dan IV dari daerah Bekasi. Selanjutnya uji efikasi dilakukan dengan 5 konsentrasi Bti yaitu 0.0025, 0.005, 0.01, 0.02 dan 0.04 mg/L serta kontrol negatif. Hasil:
Analisa statistik didapatkan bahwa konsentrasi Bti berpengaruh kuat terhadap kematian larva dengan nilai p=0.00 dan r =0.9. Nilai LC50 didapatkan pada
konsentrasi 0.012 mg/L dan LC90 terdapat pada konsentrasi 0.024 mg/L.
Kesimpulan: Bti efektif menyebabkan kematian larva instar III dan IV nyamuk Cx. quinquefasciatus dengan konsentrasi yang rendah.
vii
ABSTRACT
Aqidatul Islamiyyati Elqowiyya. Medical Education Program. Efficacy of larvicide Bacillus thuringiensis israelensis against larvae of Culex quinquefasciatus from Bekasi area.
Background: Resistance on insecticide has been several reported against Culex quinquefasciatus. Formulated chemicals in insecticide for certain period has caused resistance in mosquitoes and environment pollution. Bacillus thuringiensis israelensis (Bti) as biological larvicide produces toxin in digestive system of larvae to cause mortality, but safe for non target animals, human, and environment. Purpose: To investigate Bti concentration effects against larvae of Cx. quinquefasciatus, and efficacy of the concentrations to cause 50% (LC50) and 90% (LC90) of larvae mortality. Method: Experimental study, paired, and more than 2 groups of treatments. Purposive sampling was collected and determined as instar III and IV from Bekasi area. Following test of efficacy was conducted for 5 concentrations of Bti, such 0.0025, 0.005, 0.01, 0.02, 0.04 mg/L and negative control. Result: Concentrations of Bti have strong effect to larvae mortality, with p value 0.00 and r=0.9. The LC50 of Bti against the larvae was indicated by concentration of 0.012 mg/L, and 0.024 mg/L for the LC90. Conclusion: Bti is effective to cause mortality against the instar III and IV of the Cx. quinquefasciatus larvae by low concentration.
viii
DAFTAR ISI
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ... ii
LEMBAR PENGESAHAN PEMBIMBING ... iii
PENGESAHAN PANITIA UJIAN ... iv
ix
2.3 Pemanfaatan Bti dalam pemberantasan vektor nyamuk di Indonesia .. 13
2.4 Kerangka Teori ... 14
2.5 Kerangka Konsep ... 14
2.6 Definisi Operasional ... 15
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ... 16
x
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus pada berbagai
konsentrasi setelah 24 jam perlakuan pada uji pendahuluan ... 23
Tabel 4.2 Hasil uji esterase pada larva instar IV Culex quinquefasciatus ... 24
Tabel 4.3 Jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus pada berbagai konsentrasi setelah 24 jam perlakuan pada uji utama ... 24
Tabel 4.4 Hasil Uji Normalitas ... 26
Tabel 4.5 Hasil Uji Variasi Data ... 26
Tabel 4.6 Hasil Uji One Way ANOVA ... 27
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Morfologi Bacillus thuringiensis ... 4
Gambar 2.2 Spora dan kristal Bacillus thuringiensis israelensis ... 5
Gambar 2.3 Cara kerja Bacillus thuringiensis ... 6
Gambar 2.4 Telur Culex quinquefasciatus di bawah mikroskop ... 8
Gambar 2.5 Telur Culexquinquefasciatus di atas air ... 8
Gambar 2.6 Larva Culex quinquefasciatus ... 8
Gambar 2.7 Perbedaan morfologi larva Culex quinquefasciatus instar I, II, III dan IV ... 9
Gambar 2.8 Pupa Culex quinquefasciatus ... 10
Gambar 2.9 Nyamuk dewasa Culex quinquefasciatus ... 10
Gambar 2.10 Perbandingan antenna nyamuk jantan dan betina ... 11
xii
DAFTAR GRAFIK
Grafik 4.1 Grafik hubungan antara konsenterasi larvasida Bacillus thuringiensis sub sp. israelensis dengan persentase jumlah
kematian larva Culex quinquefasciatus ... 25 Grafik 4.2 Grafik hasil regresi linier konsenterasi larvasida Bti terhadap
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Culex quinquefasciatus merupakan vektor penular penyakit filariasis. Kasus filariasis di Indonesia setiap tahunnya mengalami
peningkatan dan telah menyebar di hampir seluruh wilayah. Tercatat
sampai dengan tahun 2009, telah ditemukan 11.914 kasus filariasis dan
sekitar 71,9% kabupaten/kota di Indonesia telah dinyatakan endemis
filariasis.1 Melihat tingginya angka endemisitas di Indonesia, diperlukan
upaya pemberantasan filariasis, salah satunya dengan pengendalian vektor
nyamuk pembawa parasit penyebab penyakit tersebut.
Pengendalian vektor nyamuk dan lingkungan merupakan bagian
dari program pemberantasan penyakit yang ditularkan oleh nyamuk
tersebut, baik berupa pengendalian secara biologi maupun kimiawi.2
Pengendalian secara kimiawi lebih sering digunakan, yaitu dengan
pengasapan atau fogging untuk memberantas nyamuk dewasa dan
penggunaan larvasida kimiawi untuk membunuh larva. Namun,
penggunaan bahan-bahan kimiawi tersebut dalam jangka waktu tertentu
dapat menyebabkan resistensi vektor dan pencemaran lingkungan. Oleh
karena itu, diperlukan upaya memberantas vektor nyamuk dengan cara
yang aman dan tidak mencemari lingkungan. Salah satunya adalah dengan
penggunaan Bacillus thuringiensisisraelensis (Bti)sebagai larvasida.2,3
Bti merupakan bakteri Gram positif fakultatif anaerob yang
digunakan sebagai larvasida biologi. Btimemproduksi kristal protein yang
bekerja sebagai toksin/racun pencernaan larva. Ketika larva memakan
toksin tersebut, terjadi perforasi dinding usus larva yang dapat
mengakibatkan kematian larva. Bti dapat mematikan berbagai larva
nyamuk, baik Aedes, Culex maupun Anopheles, namun tidak mematikan
2
Menurut WHO, larvasida ini efektif membunuh jentik nyamuk
tersebut pada LC 50 sebesar 0.008-0.024 mg/L dan LC 90 sebesar
0.018-0.059 mg/L.5
Melihat berbagai kelebihan dari Bti yang tidak membahayakan
dan mencemari lingkungan, namun efektif membunuh berbagai jenis larva
nyamuk, maka penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efikasi larvasida
Bti terhadap kematian larva instar III/IV Culex quinquefasciatus yang diambil dari daerah Bekasi.
1.2 Rumusan Masalah
Penggunaan bahan-bahan kimiawi dalam jangka waktu tertentu
dapat menyebabkan resistensi vektor dan pencemaran lingkungan. Oleh
karena itu, diperlukan upaya memberantas vektor nyamuk dengan cara
yang aman dan tidak mencemari lingkungan. Salah satunya adalah dengan
penggunaan Bti sebagai larvasida. Bagaimana efikasi larvasida Bti
terhadap kematian larva Culex quinquefasciatus instar III/IV dari daerah
Bekasi?.
1.3 Hipotesis
Bti efektif membunuh larva Culex quinquefasciatus instar III/IV dengan konsentrasi kematian (LC50 dan LC90) yang sangat rendah.
1.4 Tujuan Penelitian
1.4.1 Tujuan Umum
Untuk mengetahui efikasi larvasida Bti terhadap kematian larva
instar III/IV Culex quinquefasciatus dari daerah Bekasi.
1.4.2 Tujuan Khusus
1. Mengetahui persentase kematian larva Culex quinquefasciatus instar III/IV pada rentang konsentrasi 0 mg/L, 0,005 mg/L, 0,01 mg/L, 0,02
2. Mengetahui pengaruh konsentrasi larvasida Bti terhadap kematian
larva.
3. Mengetahui Lethal Concentration (LC50 dan LC90) Bti yang efektif
terhadap kematian larva Culex quinquefasciatus instar III/IV.
1.5 Manfaat Penelitian
Memberikan tambahan informasi tentang manfaat penggunaan
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Taksonomi, Morfologi, Karakteristik dan Cara Kerja Bacillus
thuringiensis israelensisis (Bti)
2.1.1 Taksonomi Bti
Kingdom : Eubacteria
Filum : Firmicutes
Kelas : Bacilli
Ordo : Bacillales
Famili : Bacillaceae
Genus : Bacillus
Spesies : Bacillus thuringiensis
Subspesies : Bacillus thuringiensis israelensis.6
2.1.2 Morfologi dan Karakteristik Bacillus thuringiensis
Bacillus thuringiensis merupakan bakteri Gram positif, fakultatif
anaerob, berbentuk batang dengan ukuran 3-5 µm. Bakteri ini memiliki
flagel, oleh karena itu ia dapat bergerak/motil. Bt merupakan organisme
saprofit yang hidup dan mendapatkan makanan dari bahan organik/
organisme yang telah mati.6
.
Gambar 2.1 Morfologi Bacillus thuringiensis.7
Bt memiliki 67 subspesies yang berbeda, salah satunya Bacillus
lainnya terletak pada jenis antigen yang terkandung pada flagelnya yaitu
H-14. Sedangkan pada bentuknya, Bti dengan subspesies lainnya sama. 6 Bakteri ini tumbuh dalam 2 fase yaitu fase vegetatif dan spora. Jika
dalam kondisi yang menguntungkan seperti suplai nutrien yang diperlukan
tersedia, maka bakteri akan tumbuh dalam fase vegetatif. Namun jika
bakteri hidup pada kondisi dimana suplai nutrien tidak mencukupi maka
bakteri akan membentuk spora (parasporal crystalline inclusions) dimana spora ini terdiri dari berbagai insecticidal crystal protein (ICP) yang bersifat toksik.8,9
ICP atau kristal protein ini memiliki bentuk yang
bermacam-macam yaitu bipiramida, kuboid, datar, rhomboid maupun gabungan dari
berbagai bentuk. Kristal protein atau kompleks spora-kristal protein ini
jika dimakan oleh invertebrata tertentu, khususnya larva Diptera,
Coleoptera dan Lepidoptera dapat meracuni usus larva. Umumnya Bt
hidup ditanah, tumbuhan dan di dalam tubuh serangga yang sudah mati.5
Gambar 2.2 Spora dan kristal Bacillus thuringiensis israelensis.10
Bt diformulasikan dalam berbagai macam bentuk larvasida baik
dalam bentuk cair, granul, spray, tablet, pelet dan bubuk, dengan
persentase kandungan zat aktif berupa spora dan kristal protein hidup
maupun yang telah diinaktivasi. Kandungannya berbeda-beda tergantung
jenis produknya. Vectobac WG merupakan produk larvasida berbentuk granul yang mengandung zat aktif Bti sebesar 37,4%, dan mudah larut
6
2.1.3 Cara Kerja Bacillus thuringiensis
ICP yang dihasilkan oleh Bacillus thuringiensis pada saat fase sporulasi merupakan protoksin yang masih belum aktif. Cara kerja ICP ini
dimakan oleh larva dan larut dalam usus larva, ICP/protoksin diubah
menjadi toksin aktif oleh enzim proteolitik dalam usus larva, kemudian
toksin akan berikatan dengan reseptor spesifik pada membran usus larva.
Ikatan ini menyebabkan lisis epitel usus larva dan juga mengganggu
permeabilitas cairan sehingga sel menjadi bengkak kemudian pecah dan
pada akhirnya mengakibatkan kematian larva.9,11
Gambar 2.3 Cara kerja Bacillus thuringiensis.4
Selain menyebabkan lisis epitel, toksin ini mengakibatkan
penurunan nafsu makan larva, sehingga larva menjadi tidak nafsu makan
dan berhenti makan. Di sisi lain, bakteri ini terus berproliferasi dalam
tubuh larva sehingga larva menjadi septik. Mekanisme ini juga turut
berperan dalam kematian larva. Kematian ini mengakibatkan tubuh larva
berubah menjadi kehitaman atau kecoklatan.9
Bt aman digunakan bagi lingkungan karena Bt akan terurai oleh
sinar ultraviolet, bersifat tidak toksik dan tidak patogen terhadap spesies
bukan sasaran seperti burung, cacing, ikan dan spesies lain yang hidup di
dalam air. Namun dilaporkan bahwa pada hewan percobaan kelinci, Bt
Bt yang terkontak dengan kulit, mata, terhirup, termakan atau terminum
tidak berbahaya bagi kesehatan.5
Telah diketahui bahwa racun Bt aktif di suasana basa pada sistem
pencernaan. Oleh karena itu, racun Bt dapat aktif pada larva. Namun pada
manusia yang termakan Bt tidak akan menyebabkan efek patologis,
dikarenakan kondisi sistem pencernaan manusia yang bersifat asam.
Dilaporkan bahwa manusia yang memakan Bt hingga 1000 mg/hari
selama 3-5 hari tidak menunjukkan efek negatif. Selain itu, Bt tidak
memicu kanker dan tidak menyebabkan kelainan kongenital.12
2.2. Taksonomi, Morfologi, Habitat dan Perilaku, serta Siklus Hidup
Cx. quinquefasciatus
2.2.1. Taksonomi Cx. quinquefasciatus
Kingdom : Animalia
Filum : Arthropoda
Kelas : Insecta
Ordo : Diptera
Famili : Culicidae
Genus : Culex
Spesies : Culex quinquefasciatus.13
2.2.2. Morfologi Cx. quinquefasciatus
Telur Cx.quinquefasciatus berbentuk lonjong seperti peluru dengan ujung tumpul yang tersusun berkelompok membentuk seperti rakit.
Panjang telur sekitar 1/4 inch dan lebar 1/8 inch.14,15 Telur yang baru diletakkan diatas air masih berwarna putih, beberapa jam setelah berkontak
dengan air berubah menjadi coklat kehitaman. Telur ini berisi calon larva
8
Gambar 2.4 Telur Cx. quinquefasciatus di bawah
mikroskop.
Sumber: Dokumentasi pribadi.
Gambar 2.5 Telur Cx quinquefasciatus di atas
air.17
Tubuh larva terdiri dari bagian kepala, thoraks dan abdomen. Pada bagian abdomennya, terdiri dari 8 segmen dengan sifon terletak pada
bagian dorsal abdomen.18,19 Sedangkan saddle terletak di bagian ventral
abdomennya. Sifonnya 4 kali lebih panjang dibandingkan spesies larva lainnya dengan bulu lebih dari satu pasang.18
Gambar 2.6 Larva Cx. quinquefasciatus
Sumber: Dokumentasi pribadi
Sesuai dengan perkembangannya, larva nyamuk ini dibagi menjadi
4 tahap yaitu instar I, II, III dan IV.20 Pertumbuhan dan perkembangan larva berbeda-beda tergantung suplai nutrisi dan temperatur tempat larva
hidup.14
Tampak bentuk satu persatu di bawah ikroskop
Sifon
Kepala
Thoraks Abdomen
Gambar 2.7 Perbedaan morfologi larva Cx. quinquefasciatus instar I, II, III dan IV.13
1. Instar I yaitu pada hari ke 1-2 setelah telur menetas dengan
ukuran 1-2 mm.
2. Instar II yaitu pada hari ke 2-3 setelah telur menetas dengan
ukuran 2,5 - 3,5 mm.
3. Instar III yaitu pada hari ke 3-4 setelah telur menetas dengan
ukuran 4-5 mm.
4. Instar IV yaitu pada hari ke 4-6 setelah telur menetas dengan
ukuran 5-6 mm.14
Tabel 2.1 Perbandingan ukuran larva Cx. quinquefasciatus instar I, II, III dan IV.14
Pada pupa, bagian kepala dan dada bergabung menjadi
10
seperti bentuk koma.14,21 Pupa sering naik ke permukaan air untuk bernapas melalui sepasang terompet pernafasan di bagian thoraksnya.21
Gambar 2.8 Pupa Cx. quinquefasciatus.22
Pada fase ini, pupa tidak memerlukan makanan dan terjadi
perkembangan organ tubuhnya seperti sayap untuk persiapannya menjadi
nyamuk dewasa.14
Nyamuk dewasa terdiri atas bagian kepala, thorax dan abdomen dengan ukuran bervariasi 4-10 mm.Pada bagian kepala terdapat sepasang
mata majemuk, sepasang antenna, sepasang palpus yang berfungsi sebagai pendeteksi tingkat kelembaban lingkungan, dan juga proboscis yang digunakan untuk menghisap makanan yang dibutuhkannya. Baik jantan
maupun betina, menghisap cairan tumbuhan (nektar). Gula pada nektar
menjadi sumber energi bagi nyamuk ketika terbang. Selain nektar, betina
juga menghisap darah yang didalamnya mengandung protein. Protein ini
diperlukan untuk perkembangan ovarium dan telur.14,19
Gambar 2.9Nyamuk dewasa Cx. quinquefasciatus.22
Selain itu, hal lain yang membedakan jantan dan betina adalah panjang
palpus dan proboscis. Pada nyamuk jantan, palpus lebih panjang atau sama dengan proboscis. Namun sebaliknya pada nyamuk betina.17,23
Nyamuk dewasa memiliki abdomen dengan ujung tumpul, warna cokelat muda. Sayap berbentuk sempit panjang dengan ujung runcing dan
kaki yang berwarna lebih gelap dibandingkan tubuhnya.16
Gambar 2.10 Perbandingan antenna nyamuk jantan dan betina.24
2.2.3. Habitat dan Perilaku Cx. quinquefasciatus
Nyamuk ini hidup dan berkembangbiak di air yang keruh atau
kotor seperti di got, selokan, comberan, sungai yang dipenuhi sampah dan
tempat-tempat lainnya yang tinggi pencemarannya.16,25 Begitu pula dengan larva, lebih menyukai tempat-tempat yang tertutupi rumput maupun
tanaman air. Hal ini bertujuan agar larva terlindungi dari ikan dan predator
air lainnya.14
Nyamuk tersebut merupakan nyamuk yang menghisap darah
sebagai sumber makanannya (hematofagik), baik menghisap darah manusia (antrofilik) maupun binatang (zoofilik) terutama mamalia dan
burung. Nyamuk ini biasanya istirahat saat siang hari dan menghisap darah
manusia pada malam hari setelah matahari terbenam. Oleh karena itu, Cx.
quinquefasciatus dikenal sebagai nocturnal mosquito yang sering masuk ke dalam rumah-rumah terutama tengah malam dan nyamuk ini bersifat
12
2.2.4. Siklus hidup Cx. quinquefasciatus
Nyamuk betina dapat bertelur hingga 400 butir telur diatas
permukaan air kotor membentuk sekumpulan telur yang berdekatan seperti
rakit. Biasanya ia meletakkan telur pada malam hari di air yang
menggenang daripada air yang mengalir. Dalam siklusnya, nyamuk betina
dapat bertelur setiap 3 hari sekali.14
Telur tersebut menetas menjadi larva setelah 2-3 hari di air dan
berkembang dari larva instar I sampai larva instar IV yang berlangsung
kurang lebih 6-8 hari.20
Setelah itu, larva instar IV molting atau berganti kulit menjadi pupa. Perubahan ini optimum terjadi ketika suhu lingkungan 27º- 30ºC.
Perbedaan antara larva dan pupa adalah pada saat fase larva, dimana larva
memerlukan makanan yang diambilnya dari tempat perindukannya
(breeding place). Pupa tidak memerlukan makanan tetapi memerlukan oksigen yang didapatkan melalui tabung pernafasan (breathing trumpet).
Setelah itu, pupa tumbuh menjadi nyamuk dewasa dalam waktu 2-5 hari.21 Nyamuk betina dapat bertahan hidup hingga 2 bulan, namun nyamuk
jantan hanya kurang dari 10 hari.14
2.3. Pemanfaatan Bti dalam pemberantasan vektor nyamuk di Indonesia
Bti sebagai insektisida biologi telah digunakan oleh Amerika
Serikat sejak tahun 1960-an. Namun, di Indonesia insektisida ini belum
umum digunakan oleh masyarakat luas. Kini Bti telah diperdagangkan di
Indonesia sebagai bioinsektisida dengan berbagai formulasi baik dalam
bentuk wettable powder (WP), water dispersible granule (WG), aqueous suspension (AS), soluble liquid (SL) dan suspension concentrate (SC) dengan berbagai merk dagang.3,28,29
Selain menggunakan produk komersial dalam pemberantasan
vektor nyamuk di Indonesia, digunakan pula Bti yang diperoleh dari
isolasi bakteri dari habitatnya langsung yaitu tanah dan dikembangbiakkan
dalam media air kelapa.30 Seperti halnya penelitian Balitbangkes (Badan
Penelitian dan Pengembangan Kesehatan) yang dilakukan oleh Christina
dan Widyastuti (2013), didapatkan hasil persentase kematian larva
Anopheles sp. sebesar 80-100% dan Culex sp. sebesar 79,31-100%.31
Selain itu, dapat pula digunakan ekstrak dari kristal endotoksin Bti.
Seperti halnya penelitian Anggraeni, Christina dan Wianto (2013) yang
14
2.4. Kerangka Teori
2.5. Kerangka Konsep
Diberi larvasida Bti dengan berbagai konsentrasi Larva Cx. quinquefasciatus
instar III/IV
Larva hidup Tidak diberi larvasida Bti
Larva mati Efek larvasida (-) Efek larvasida (+)
Dimakan dan larut dalam usus larva Bersifat toksik
bagi larva Morfologi/ KarakteristikBti
Kristal protein Spora
Lisis sel epitel pencernaan larva
Gangguan permeabilitas sel
2.6. Definisi Operasional
No. Variabel Definisi Operasional
Loupe. Jumlah larva instar III/IV yang mati.
16
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Desain Penelitian
Penelitian ini bersifat eksperimental dengan lebih dari 2 kelompok
perlakuan, dan dilakukan secara berpasangan. Pengambilan sampel
nyamuk dilakukan secara purposive sampling yang memenuhi kriteria sampel terpilih. Analisa statistik dilakukan untuk mengetahui tentang
efikasi Bti pada beberapa konsentrasi berbeda terhadap kematian larva
instar III/IV nyamuk Cx. quinquefasciatus serta nilai LC50 dan LC90 dari
larvisida tersebut.
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian
Pengambilan sampel yang berupa telur dan larva nyamuk Cx.
quinquefasciatus dilakukan pada bulan April 2015 di wilayah Bekasi dari tempat perindukan nyamuk tersebut yaitu air got/selokan. Pemeliharaan
nyamuk, identifikasi, serta pengujian sampel dilakukan bulan April-Juni
2015 di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu
Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
3.3. Populasi dan Sampel Penelitian
3.3.1. Populasi Penelitian
Populasi dalam penelitian ini berupa koloni larva Cx.
quinquefasciatus instar I sampai IV yang dipelihara dalam wadah berisi media air got.
3.3.2. Besar Sampel Penelitian
Dalam menentukan banyaknya sampel dalam setiap konsentrasi,
maka digunakan rumus Federer, yaitu: 33
Keterangan:
n = besar sampel
t = jumlah kelompok perlakuan
Pada penelitian ini, digunakan 1 kelompok kontrol dan 5 kelompok
yang diberi larvasida Bti dengan konsentrasi berbeda. Berdasarkan rumus
tersebut, maka didapatkan banyaknya sampel yang digunakan adalah:
(n-1) (t-1) ≥ 15
(n-1) (5-1) ≥ 15
(n-1) 4 ≥ 15
4n –4 ≥ 15
4n ≥ 19
n ≥ 4.75
Minimal sampel yang digunakan adalah 5 ekor larva, sedangkan
jumlah sampel yang diuji pada penelitian ini untuk setiap konsentrasi
adalah 25 ekor larva.34 Larva yang memenuhi kriteria inklusi yaitu telah
mencapai instar III/IV serta masih hidup yang ditandai dengan larva yang
bergerak aktif ketika diberi rangsangan, selanjutnya di ambil secara acak
dengan menggunakan pipet dari wadah perindukannya di laboratorium.
Kemudian larva tersebut ditempatkan pada wadah yang telah berisi larutan
Bti dengan berbagai konsentrasi sebagai perlakuan, dan wadah yang hanya
berisi air keran (tap water) sebagai kontrol.
Perlakuan dilakukan selama 24 jam. Pencatatan jumlah larva yang
mati dilakukan saat 24 jam setelah perlakuan. Jumlah pengulangan dalam
setiap perlakuan adalah 4 kali.
3.3.3. Kriteria Sampel
1. Kriteria inklusi
18
Larva yang masih hidup ditandai dengan larva yang bergerak
aktif ketika diberi rangsangan.
Berasal dari filial atau keturunan yang umurnya sama.
Larva diberi perlakuan pakan dan media rearing yang sama.
2. Kriteria eksklusi
Larva yang sudah berubah menjadi pupa.
Larva yang tidak sehat dan cacat.
3.4. Variabel Penelitian
a. Variabel independen (bebas) : konsentrasi larutan larvasida Bti.
Pada penelitian ini dibuat rentang konsentrasi sebesar 0, 0.01, 0.02,
0.04, 0.06, dan 0.08 mg/L.
b. Variabel dependen (terikat) : kematian larva instar III/IV setelah 24
jam.
Pada penelitian ini, dihitung berapa jumlah larva yang mati setelah
mendapat perlakuan berupa pemberian larvasida Bti dengan berbagai
konsentrasi pada media hidupnya di dalam wadah.
c. Variabel luar terkendali:
Umur larva yaitu larva instar III/IV.
Pakan larva.
Ph dan salinitas air.
Suhu ruangan tempat rearing nyamuk.
d. Variabel luar tidak terkendali:
Kondisi biologis larva.
Kontaminan lingkungan dalam media tumbuh larva.
Kualitas larvasida dan pelarutnya.
3.5. Alat dan Bahan
3.5.1. Alat
Kandang nyamuk, pipet tetes, mikropipet, gelas plastik, neraca
penyaring, label, termometer, dan mikroplat ELISA Foto alat dan bahan
dilampirkan pada lampiran 2.
3.5.2. Bahan
Larva Cx. quinquefasciatus instar III/IV, Vectobac WG (Bahan aktif: Bacillus thuringiensisisraelensis), air aquadest sebagai pelarut, pelet ikan sebagai pakan larva, air gula sebagai pakan nyamuk dewasa dan
bahan uji esterase: larutan phosphat buffer saline (PBS) 0,02 M, coupling reagen, α-naftil asetat dan asam asetat 10%.
3.6. Cara Kerja Penelitian
3.6.1. Persiapan dan Pengumpulan Larva Cx. quinquefasciatus
Telur dan larva diambil dari got di daerah Bekasi untuk dipelihara
(rearing) di lab Parasitologi FKIK UIN Jakarta. Telur dan larva diletakan dalam wadah yang berbeda. Larva dipisahkan dari kotoran air got
menggunakan saringan dan diletakkan didalam wadah yang berisi air
keran setinggi 2/3 dari tinggi wadah. Larva diberi makan berupa pelet ikan
setiap 2-3 hari sekali, diberikan secukupnya untuk mencegah pertumbuhan
bakteri yang dapat membuat larva mati. Setelah itu, dalam waktu 3-5 hari,
larva instar I tumbuh menjadi larva instar III/IV dengan panjang 4-6 cm.
Larva instar III/IV inilah yang menjadi sampel penelitian ini, Sebelum
dilakukannya uji pendahuluan, sampel larva instar III/IV diidentifikasi
terlebih dahulu dibawah mikroskop. (Lihat lampiran 2).
3.6.2. Uji Pendahuluan
a. Uji resistensi enzim esterase dengan metode Lee.
Jentik nyamuk instar IV awal digerus untuk dibuat homogenat.
Dilarutkan dengan 0,5 ml larutan PBS 0,02 M.
50 µL homogenat dipindahkan ke sumur mikroplat dengan
menggunakan mikropipet.
Setiap sumuran ditambahkan 50 µL bahan substrat α-naftil asetat
20
Setiap mikroplat ditambahkan 50 µL bahan coupling reagen.
Setelah reaksi berlangsung 10 menit, warna merah berubah
menjadi biru.
Ditambahkan 50 µL asam asetat 10% pada setiap sumuran.
Kemudian dibaca dengan ELISA reader dengan panjang
gelombang 450 nm.
b. Uji efikasi Bti
Vectobac WG (Bti) ditimbang dengan neraca digital sebanyak
200 mg dan dicampur aquadest sebanyak 20 ml sehingga
menghasilkan larutan induk sebesar 1% atau 10.000 ppm. Larutan
induk diencerkan hingga menghasilkan 10 ppm. Ambil larutan
tersebut dengan menggunakan mikropipet 100 µ L, 200 µ L, 400 µ L,
600 µ L, dan 800 µ L. Masing-masing ditambahkan ke dalam gelas
plastik berisi aquadest sebanyak 100 ml sehingga diperoleh larutan
sebesar 0.01, 0.02, 0.04, 0.06, dan 0.08 mg/L. (Lihat lampiran 2).
Pada masing-masing gelas plastik diberikan 25 ekor larva
instar III/IV tanpa diberikan makan/pelet ikan. Kemudian setelah 24
jam perlakuan, dihitung jumlah larva yang mati. Larva yang sudah
mati kemudian disaring dan digerus sebelum dibuang.
Sisa larva hidup yang tidak digunakan untuk pengujian,
kemudian dibiarkan menjadi nyamuk dewasa untuk digunakan dalam
uji bioassay rekan peneliti lainnya.
3.7. Pengumpulan dan Manajemen Data
Larva instar III/IV yang telah diberikan perlakuan, kemudian
dihitung larva yang hidup dan yang mati setelah 24 jam perlakuan. Larva
yang hidup ditandai dengan ciri-ciri yaitu larva bergerak ketika diberi
rangsangan dengan menggunakan lidi serta aktif berenang didalam air,
sedangkan larva yang telah mati adalah larva yang tidak bergerak ketika
Jumlah larva yang mati dihitung dan dicatat untuk setiap
perlakuan. Pengulangan dilakukan sebanyak 4 kali untuk setiap perlakuan
serta kontrol. Data yang diperoleh kemudian dimasukkan dalam program
excel dan diolah serta dianalisis dalam program SPSS 21.0 (Lihat lampiran
2)
3.8. Analisis Data
Data yang diperoleh akan diolah dan dianalisis menggunakan
analisis Probit untuk menentukan efikasi larvasida terhadap kematian larva
nyamuk yang dinyatakan dengan nilai konsentrasi yang menyebabkan
kematian 50% dan 90% (LC50 dan LC90).
Selain itu juga dilakukan uji parametrik One Way ANOVA untuk melihat pengaruh perlakuan antar kelompok terhadap kematian larva, dan
regresi linier untuk mengukur derajat hubungan antara konsentrasi
larvasida (X) dan kematian larva (Y), yang dinyatakan dengan nilai
persentase dari r2 (sebagai koefisien korelasi).35
3.9. Alur Penelitian
Penelitian menggunakan 5 kelompok perlakuan yang diberikan
larvasida Bti dan 1 kelompok kontrol tanpa diberikan larvasida tersebut.
Pengulangan dilakukan sebanyak 4 kali. Berikut ini adalah alur
22
Alur Penelitian Telur dan larva yang.
diambil dari got berisi 25 larva Culex
quinquefasciatus
Kelompok 1: Larvasida Bti 0% Kelompok 2: Larvasida Bti 0.01 mg/L Kelompok 3: Larvasida Bti 0.02 mg/L Kelompok 4: Larvasida Bti 0.04 mg/L Kelompok 5: Larvasida Bti 0.06 mg/L Kelompok 6: Larvasida Bti 0.08 mg/L
Rearing larva di laboratorium
Pengulangan percobaan sebanyak 4 kali di setiap
konsentrasinya dalam air yang telah diberi
23
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
4.1.1 Uji Pendahuluan
Pada uji pendahuluan digunakan 6 konsentrasi yaitu 0, 0.01, 0.02,
0.04, 0.06,dan 0.08 mg/L dengan 4 kali pengulangan. Hasil kematian larva
setelah 24 jam perlakuan pada uji pendahuluan dapat dilihat pada tabel 4.1
Tabel 4.1 Jumlah kematian larva Cx.quinquefasciatus pada berbagai konsentrasi setelah 24 jam perlakuan pada uji pendahuluan.
Dari tabel diatas, dapat diketahui bahwa pada konsentrasi 0.01
konsentrasi yang berada diatasnya yaitu 0.02 dan 0.04 mg/L.
4.1.2 Uji Resistensi dengan metode Lee
Untuk menentukan apakah sampel uji sudah mengalami resistensi,
maka dilakukan uji resistensi dengan metode Lee terhadap mekanisme
aktivitas enzim kolinesterase dalam tubuh larva nyamuk, didapatkan hasil
sebagai berikut. (Lihat lampiran 2).
Konsentrasi
Jumlah kematian larva setelah 24 jam
24
Tabel 4.2 Hasil uji esterase pada larva instar IV Culex quinquefasciatus.
Nilai AV pada sumur ke-
1 2 3 4 5
F 1.257 1.483 1.508 1.333 1.240
G 1.311 1.479 1.369 1.347 1.310
Rata – rata nilai AV data diatas dengan ELISA adalah 1364 dan
1.363. Menurut Lee, 1990, nilai tersebut dikategorikan bersifat sangat
resisten.36
0 – 0,7 = sangat peka.
0,7 – 0,9 = resisten sedang.
> 0,9 = sangat resisten.
4.1.3 Uji bioassay larvasida Bti
Hasil kematian larva setelah 24 jam perlakuan pada uji utama dapat
dilihat pada tabel 4.3.
Tabel 4.3 Jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus pada berbagai konsentrasi setelah 24 jam perlakuan pada uji utama.
Prinsip dasar uji bioassay adalah pemaparan larva nyamuk dalam
batas perlakuan yang menggunakan konsentrasi dan waktu standar dengan
menggunakan insektisida yang dapat melumpuhkan larva nyamuk,
kemudian mencatat kelumpuhan dan kematian larva nyamuk di akhir
pemaparan dan pada akhir periode pemulihan (recovering time) selama 24 jam.34
Konsentrasi
Jumlah kematian larva setelah 24 jam
Pengamatan jumlah larva nyamuk yang mati dihitung setelah 24
jam dan bila persentase kematian pada kelompok kontrol berkisar 5-20%,
maka untuk faktor koreksi digunakan rumus Abbott:34
% kematian nyamuk uji - % kematian kontrol x 100% 100 - % kematian kontrol
Apabila kematian pada kontrol diatas 20% maka uji tersebut
dinyatakan gagal dan harus mengulang kembali percobaan.34
Pada tabel 4.3 diatas didapatkan bahwa pada konsentrasi 0 mg/L
(kontrol) tidak ditemukan kematian larva. Hal ini menyatakan bahwa
kondisi larva dalam keadaan baik dan dapat menyingkirkan adanya
kemungkinan faktor lain atau faktor perancu yang menyebabkan kematian
larva pada kelompok perlakuan.
Hasil uji pada kelompok perlakuan larvasida didapatkan kematian
terendah terdapat pada konsentrasi 0.0025 mg/L dengan persentase
kematian larva sebesar 20%, sedangkan kematian tertinggi terdapat pada
konsentrasi 0.04 mg/L dengan persentase kematian larva sebesar 99%.
Hasil ini sama dengan hasil uji pendahuluan pada tabel 4.1 di atas. Pada
tabel tersebut dapat dilihat bahwa semakin besar konsentrasi semakin
banyak larva yang mati. Hal ini tergambar dalam grafik di bawah ini.
Grafik 4.1 Hubungan antara konsenterasi larvasida Btidengan persentase jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus
0 %
0 0,0025 0,005 0,01 0,02 0,04
26
4.2. Analisis Data
4.2.1 Uji Normalitas
Uji normalitas dilakukan untuk mengetahui distribusi data
penelitian. Data yang baik untuk digunakan dalam penelitian adalah data
yang berdistribusi normal. Hal ini juga merupakan salah satu syarat untuk
dapat dilakukannya uji One Way ANOVA. Dari hasil uji normalitas
Shapiro-Wilk didapatkan nilai p>0.05. Hal ini menunjukan bahwa
distribusi data normal.
Tabel 4.4 Hasil Uji Normalitas
Statistic df Sig. kematian .926 24 .078
4.2.2. Uji One Way ANOVA
Syarat lain untuk dilakukannya uji One Way ANOVA adalah varians data homogen. Pada uji variasi data, didapatkan nilai p sebesar
0.082. Hal ini menunjukan bahwa nilai p>0.05 yang artinya varians data
penelitian ini homogen. Hasil dapat dilihat pada tabel 4.5 dibawah ini.
Tabel 4.5 Hasil Uji Variasi Data
Levene Statistic df1 df2 Sig.
2358 5 18 .082
Berdasarkan hasil sebelumnya bahwa data yang diperoleh
berdistribusi normal dan varians data homogen, maka kedua syarat One Way ANOVA terpenuhi. Uji One Way ANOVA dilakukan untuk melihat pengaruh perlakuan dan antar kelompok perlakuan terhadap kematian
Tabel 4.6 Hasil Uji One Way ANOVA
Berdasarkan tabel 4.6 didapatkan bahwa nilai p<0.05 yaitu 0.000.
Hal ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara
konsenterasi larvasida Bti terhadap jumlah kematian larva instar III/IV.
Interpretasi dari analisa tersebut menunjukkan adanya pengaruh larvasida
terhadap kematian larva, dan perbedaan konsentrasi larvasida
menyebabkan perbedaan yang signifikan terhadap jumlah kematian larva.
4.2.3 Uji Least Significance Difference (LSD)
Pada uji One Way ANOVA diketahui bahwa terdapat perbedaan yang signifikan. Untuk mengetahui kelompok mana yang terdapat
perbedaan yang signifikan, maka dilakukan post hoc test yaitu uji Least Significance Difference (LSD). Didapatkan hasil bahwa pada semua kelompok terdapat perbedaan yang signifikan. Lihat lampiran 1.
4.2.4. Analisa Regresi Linier
Uji ini dilakukan untuk mengukur derajat hubungan antara
konsentrasi larvasida (X) dan kematian larva (Y), yang dinyatakan dengan
nilai persentase dari r2 (sebagai koefisien korelasi).
Tabel 4.7 Hasil Uji Regresi Linier
Regression Statistics
Multiple R 0.940721 R Square 0.884957 Adjusted R Square 0.856196 Standard Error 0.005701
28
Berdasarkan nilai R2 sebesar 0.885 maka nilai r didapatkan 0.9407, dimana nilai tersebut diantara nilai 0.8-1, yang dikategorikan bahwa
hubungan antara variabel independen (konsentrasi Bti) dan variabel dependen (kematian larva instar III/IV) sangat kuat. Hal ini menyatakan
bahwa konsentrasi larvasida sangat kuat berpengaruh terhadap kematian
larva nyamuk tersebut.
Grafik 4.2 Hasil regresi linier konsenterasi larvasida Bti terhadap jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus
4.2.5 Analisa Probit
Analisa Probit ditujukan untuk menentukan efikasi larvasida
terhadap kematian larva nyamuk yang dinyatakan dengan nilai konsentrasi
yang menyebabkan kematian 50% dan 90% yang dinyatakan dengan nilai
4.3 Pembahasan
Hasil bioassay dan analisa deskriptif menunjukkan persentase
kematian 50% larva instar III/IV pada konsentrasi 0,012 mg/L dan
kematian larva 90% terdapat pada konsentrasi 0.024 mg/L. Menurut
WHO, larvasida dikatakan efektif jika dapat membunuh larva sebesar
10-95% dari total larva uji. Pada penelitian ini didapatkan bahwa Bti efektif
membunuh jentik nyamuk tersebut pada nilai interval LC50 sebesar
0.010-0.013 mg/L dan interval LC 90 sebesar 0.022-0.028 mg/L.5,34
Pada penelitian Russell et al. (2003) dengan menggunakan Bti
formulasi granul yang diujikan pada larva instar III dari 6 spesies larva
yang berbeda yaitu Aedes aegypti, Ochlerotatus vigilax, Ochlerotatus notoscriptus, Culex sitiens, Culex annulirostris dan Culex quinquefasciatus didapatkan bahwa Culex annulirostris dan Culex quinquefasciatus merupakan spesies larva yang paling sensitif terhadap Bti formulasi granul dibandingkan spesies lainnya dengan LC 95 sebesar
0.019 mg/L.37 Nilai tersebut tidak jauh berbeda dengan hasil penelitian ini yang juga menggunakan formulasi granul. Ketika granul mengendap
dibawah permukaan air dan perilaku larva Culex memakan makanannya di bawah permukaan air maka semakin banyak toksin Bti yang dapat
memasuki tubuh larva tersebut.38
Kristal protein dan spora yang diproduksi oleh Bti merupakan
toksin yang akan larut dan aktif dalam suasana basa usus larva. Ikatan
antara toksin dengan reseptor cadherin menyebabkan rusaknya mikrovili usus, sel kolumnar, sel goblet serta lisisnya sel epitel lainnya, yang
berujung pada kematian larva.8,39 Pada menit awal setelah pemaparan, larva bergerak lemah ketika berenang dan pada akhirnya mengambang di
permukaan air tidak memberikan respon, kemudian mati.
Selain menyebabkan lisis epitel, toksin ini mengakibatkan
penurunan nafsu makan larva, sehingga larva menjadi tidak nafsu makan
pori-30
pori kecil berukuran 0,5-1 nm sehingga terjadi gangguan permeabilitas
cairan. Di sisi lain, bakteri ini terus berproliferasi dalam tubuh larva
sehingga larva menjadi septik. Seluruh mekanisme ini turut berperan
dalam kematian larva. Tubuh larva yang mati tampak berwarna kehitaman
yang dimulai dari bagian anterior hingga posterior dan membengkak akibat terganggunya tekanan osmotik cairan.8,9,39,40
Kematian larva pada penelitian ini dipengaruhi oleh beberapa
faktor, baik faktor dari kondisi larva maupun faktor lingkungan. Ditinjau
dari faktor kondisi larva, larva yang digunakan pada penelitian ini adalah
larva instar III/IV dimana pada stadium ini, sistem pencernaan larva sudah
terbentuk dengan sempurna sehingga kristal protein dan spora pada Bti
dapat bekerja optimum sebagai racun perut. Oleh karena itu, Bti kurang
cocok digunakan untuk larva instar I/II. Begitupun larva yang telah
berubah menjadi pupa, karena pada fase tersebut, pupa tidak memerlukan
makanan lagi,14 tetapi memerlukan oksigen yang didapatkan melalui
tabung pernafasan (breathing trumpet).21
Faktor lain yang meningkatkan keefektifan larvasida ini dalam
membunuh larva adalah pengujian Bti dilakukan di dalam laboratorium
sehingga Bti tidak terpajan langsung oleh sinar ultraviolet yang dapat
merusak Bti. Bti dapat bekerja efektif pada suhu 28-32ºC dan pH 6,8-7,2.
Hal ini sesuai dengan kondisi suhu dan pH yang sama di laboratorium
tempat penelitian. pH lebih dari 9 dapat menyebabkan rusaknya kristal
protein Bti.41,42
Nyamuk Cx. quinquefasciatus telah resisten terhadap insektisida golongan piretroid, organofosfat dan karbamat. Namun tidak resisten
terhadap larvasida Bti. Bahkan suatu populasi larva yang telah diberikan
Bti selama 20 generasi tidak menujukkan adanya resistensi.28 Potensi toksisitasnya pun 300 kali lebih besar daripada piretroid sintetik.9 Oleh
karena itu, kemampuannya dipakai dalam mengatasi resistensi nyamuk
Menurut WHO, keutamaan lain dari Bti adalah aman digunakan
bagi lingkungan karena akan terurai oleh sinar ultraviolet, bersifat tidak
toksik dan tidak patogen terhadap spesies bukan sasaran seperti burung,
cacing, ikan dan spesies lain yang hidup di dalam air.4,12 Pada manusia, Bti yang terkontak dengan kulit, mata, terhirup, termakan atau terminum tidak
berbahaya bagi kesehatan.5 Dengan demikian larvasida Bti ini sangat direkomendasikan untuk digunakan dalam program pemberantasan vektor
32
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan dari hasil penelitian, dapat disimpulkan bahwa:
1. Persentase kematian larva instar III/IV terendah yaitu 20% pada
konsentrasi 0.0025 mg/L kematian 100% pada konsentrasi 0.04 mg/L.
2. Perbedaan konsentrasi larvasida Bti sangat berpengaruh kuat terhadap
kematian larva Culex quinquefasciatus instar III/IV.
3. Larvasida Bti efektif membunuh larva Cx. quinquefasciatus instar III/IV dengan LC 50 sebesar 0,012 mg/L dan LC 90 sebesar 0.024
mg/L.
5.2 Saran
1. Penelitian ini dapat diteruskan dengan menggunakan Bti terhadap
spesies nyamuk lain seperti Anopheles dan Aedes.
2. Penelitian lain dapat dibandingkan dengan menggunakan larvasida
biologi lainnya seperti penggunaan ekstrak tanaman atau cara
pengendalian biologis lain seperti penggunaan hewan air sebagai
predator larva nyamuk.
3. Untuk penelitian selanjutnya disarankan agar melakukan pengamatan
dalam beberapa rentang waktu sebelum 24 jam.
4. Penelitian ini dapat dikembangkan dari skala percobaan di
DAFTAR PUSTAKA
1. Soepardi J et al. 2010. Buletin jendela epidemiologi filariasis di Indonesia.
Jakarta: Pusat Data dan Surveilans Epidemiologi Kementerian Kesehatan RI.
vol 1: p.1-8.
2. Chandra B. 2009. Ilmu kedokteran pencegahan dan komunitas. Jakarta: EGC;
p.34-35.
3. Direktorat Jendral Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2012.
Pedoman penggunaan insektisida (pestisida) dalam pengendalian vector.
Jakarta: Kementerian Kesehatan RI; p.13-66.
4. World Health Organization. 1999. Microbal pest control agent Bacillus thuringiensis. Geneva; p.1-5.
5. World Health Organization. 2004. Review of Vectobac WG, Permanet,
Gokilaht-S 5EC. Geneva; p.27.
6. Cetinkaya FT. 2002. Isolation of Bacillus thuringiensis and investigation of its
crystal protein genes. Turki; p.4-5.
7. Organic Soil Technology. Bacillus thuringiensis var israelensis larvae toxin. Available from:
http://organicsoiltechnology.com/bacillus-thuringiensis-israelensis-bti.html [Cited 27 Agustus 2015].
8. Ibrahim MA, Griko N, Junker M, Bulla LA. 2010. Bacillus thuringiensis a genomics and proteomics perspective. Bioengineered Bugs; p.31-33.
9. Bahagiawati. 2002. Penggunaan Bacillus thuringiensis sebagai boinsektisida. Buletin Agrobio; 5(1): p.21-28.
10.Regis L, Oliveira CMF, Silva MH, Silva SB, Maciel A, Furtado AF. 2001.
Bacteriological larvicides of dipteral disease vectors. Trends Parasitol; 17:
p.377.
11.Knowles BH. 1994. Mechanism of action of Bacillus thuringiensis insecticidal delta-endotoxin. London: Academic Press; vol 24: p.276-283.
34
13.University of Michigan Museum of Zoology. Culex quinquefasciatus. Availablefrom:http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Culex_quinqu
efasciatus/classification/. [Cited 9 Desember 2014].
14.Manimegalai K, Sukanya S. 2014. Biology of the filarial vector, Culex quinquefasciatus (Diptera:Culicidae). Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci. 3(4): 718-24.
15.Jupp Peter. 2013. Mosquitoes: morphology and systematic. University of
Pretoria: p.1-13.
16.Prianto J. 2000. Atlas parasitologi kedokteran. Jakarta: PT. Gramedia.
17.Gough Harrold. 2013. A culex mosquito egg raft & irritating flies. Available from:
http://photomacrography.net [Cited 9 Desember 2014].
18.Hill S, Conrelly R. 2013. Southern house mosquito Culex quinquefasciatus Say. USA : Institute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. 19.Littig KS, Stojanovich CJ. Mosquitoes: characterictics of Anophelines and
Culicines: p.134-166.
20.Natadisastra D, Agoes R. 2005. Parasitologi kedokteran ditinjau dari organ
tubuh yang diserang. Jakarta: EGC.
21.Staf Pengajar Departemen Parasitologi FK UI. 2009. .Parasitologi kedokteran
4th ed. Jakarta: Balai Penerbit FK UI.
22.Bryant PJ. 2008. Southern house mosquito Culex quinquefasciatus. Available from: http://nahistoc.bio.uci.edu/dipteral/culex%20quinquefasciatus.htm [Cited
21 Juli 2015].
23.New Zealand Biosecure Entomology Laboratory. 2008. Culex
quinquefasciatus. New Zealand.
24.Inadays. Available from: www.inadays.com.tr/en/mosquito-museum [Cited 21
Juli 2015].
25.Molaei G et al. 2007. Host feeding pattern of Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) and its role in transmission of west nile virus in Harris County,
Texas. The American Society of Tropical Medicine and Hygiene; 77(1):
p.73-81.
26.Farajollahi A, Fonseca DM, Kramer LD, Kilpatrick AM. 2011. “Bird biting”
mosquitoes in epidemiology. National Institutes of Health. Infect Genet Evol:
11(7): p.1577-1585.
27.American Mosquito Control Association. 2014. Life cycle. Available from:
www.mosquito.org/life-cycle [Cited 21 Juli 2015].
28.Salaki CL, Sembiring L. 2009. Eksplorasi bakteri Bacillus thuringiensis dari berbagai habitat alami yang berpotensi sebagai agensia pengendali hayati
nyamuk Aedes aegypti Linnaeus. Yogyakarta: Fakultas Biologi UGM; p.156-161.
29.Hudayya A, Jayanti H, Moekasan TK. Daftar dan pengelompokan pestisida
yang beredar di Indonesia berdasarkan cara kerjanya. Bandung: Balai
Penelitian Tanaman Sayuran.
30.Trapsilowati W, Christina B. 2010. Partisipasi masyarakat dalam pengendalian
vektor malaria menggunakan Bacillus thuringiensis H-14 galur lokal di
Banjarnegara, Jawa Tengah. Media Litbang Kesehatan. Vol XX No.1; p.
26-32.
31.Christina B, Widyastuti U. 2013. Efekstivitas Bacillus thuringiensis H-14 strain local dalam buah kelapa terhadap larva Anopheles sp. dan Culex sp. di
Kampung Laut kabupaten Cilacap. Media Litbangkes. Vol 23 No. 2; p.58-64.
32.Anggraeni YM, Christina B, Wianto R. 2013. Uji daya bunuh ekstrak kristal
endotoksin Bacillus thuringiensis israelensis (H-14) terhadap jentik Aedes aegypti, Anopheles aconitus dan Culex quinquefasciatus. Jurnal Sain Veteriner; 31(1): p.35-42.
33.Sudigdo I. 2002. Dasar-dasar metodologi dalam penelitian klinis. Jakarta:
Bagian Ilmu Kesehatan Anak Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
34.WHO. 2005. Guidelines for laboratory and field testing for mosquito
larvicides.
35.Dahlan Sopiyudin. 2009. Statistik untuk kedokteran dan kesehatan 4th ed. Jakarta: Salemba Medika.
36.Lee HL. 1990. A Rapid and simple biochemical method for the detection of
36
37.Russell TL, Brown MD, Purdie DM, Ryan PA, Kay BH. 2003. Efficacy of
Vectobac (Bacillus thuringiensis variety israelensis) formulations for mosquito control in Australia. J Econ Entomol; 96(6): p.1786-91.
38.Raoska WA, Hopkins TL. 1981. Effects of mosquitoes larval feeding behavior
on Bacillus sphaericus. J invert Pathol; 37: p.269.
39.Gama ZP, Yanuwiadi B, Kurniati TH. 2010. Strategi pemberantasan nyamuk
aman lingkungan: potensi Bacillus thuringiensis isolat Madura sebagai musuh alami nyamuk Aedes aegypti. Jurnal Pembangunan dan Alam Lestari. Vol 1 No. 1; p.1-10.
40.Lopes J, Arantes O, Cenci MA. 2010. Evaluation of new formulation of
Bacillus thuringiensis israelensis. Braz J Biol; p.1109-1110.
41.Achille GN, Christophe HS, Yilian L. 2010. Effect of Bacillus thuringiensis var. israelesnsis (H-14) on Culex, Aedes and Anopheles larvae. Stem Cell;
1(1): p.60-68.
42.Lepe MR, Suero MR. 2012. Biological control of mosquito larvae by Bacillus
38
Multiple Comparisons
Dependent Variable: kematian
LSD
(I) konsentrasi (J) konsentrasi Mean
Difference
(I-J)
Std. Error Sig. 95% Confidence Interval
Lower
Lampiran 2
Foto-foto hasil kegiatan penelitian
Wadah tempat larva hidup
Rearing nyamuk di dalam kandang nyamuk Pemberian makan nyamuk dengan air
gula dan vitamin
Alat-alat yang digunakan dalam uji larvasida Bti terhadap larva
Vectobac WG (zat aktif: Bacillus thuringiensis israelesis)
40
Mikropipet 100 µl dan 1000 µl Granul Bti ditimbang dengan
neraca digital
Pemberian makan larva berupa pelet ikan
Pengenceran larvasida menjadi 10.000 ppm dan 10 ppm
Uji Pendahuluan dengan berbagai konsentrasi larvasida Pembuatan konsentrasi larvasida
Bahan untuk uji resistensi enzim esterase larva nyamuk Cx. quinquefasciatus Pengukuran pH air wadah tempat
larva hidup
Uji Utama dengan berbagai konsentrasi larvasida
Temperatur ruangan 28ºC
42
Sumur dalam uji resistensi enzim esterase
larva nyamuk Cx. quinquefasciatus
Hasil ELISA Reader
Pengambilan sampel larva dengan
Pengukuran panjang larva instar III Sampel larva instar III/IV
Pupa Cx. quinquefasciatus Laboratorium nyamuk
Telur Cx. quinquefasciatus yang
diidentifikasi dibawah mikroskop
Larva instar I Cx. quinquefasciatus yang diidentifikasi dibawah
44
Nyamuk jantan Cx. quinquefasciatus yang diidentifikasi dibawah
mikroskop Nyamuk betina Cx. quinquefasciatus
yang diidentifikasi dibawah
mikroskop
Larva instar II Cx. quinquefasciatus yang diidentifikasi dibawah
mikroskop
Larva instar III Cx. quinquefasciatus yang diidentifikasi dibawah
mikroskop
Larva instar IV Cx. quinquefasciatus yang diidentifikasi dibawah
mikroskop
Lampiran 3
Riwayat Penulis
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
PERSONAL DATA
Nama : Aqidatul Islamiyyati Elqowiyya
Jenis Kelamin : Perempuan
Tempat Tanggal Lahir: Tangerang, 24 Juli 1994
Status : Belum Menikah
Agama : Islam
Alamat : Jl. Dewi Sartika Gg. Masjid Ar Riyadh No 22 Rt 01
Rw 004 Ciputat 15411
No Telepon/HP : 085692026161/ 08123262233
Email : miaelqowiyya94@gmail.com
RIWAYAT PENDIDIKAN
1998 - 2000 : TK Cendrawasih Ciputat
2000 - 2006 : MI Pembangunan UIN Jakarta
2006 - 2009 : MTs Pembangunan UIN Jakarta
2009 - 2012 : SMA Negeri 34 Jakarta
2012 - Sekarang : Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas
