ABSTRAK
KEMAMPUAN Trichoderma sp. DAN FILTRATNYA DALAM MENEKAN PERTUMBUHAN Sclerotium rolfsii SECARA IN VITRO
Oleh
INDAH PUSPITA DEWI
Salah satu penyebab rendahnya produksi kedelai nasional adalah adanya serangan penyebab penyakit rebah kecambah. Pengendalian yang dapat dilakukan adalah dengan menggunakan agen antagonis. Penelitian ini bertujuan mengetahui kemampuan
Trichoderma sp. dan filtratnya dalam menekan pertumbuhan Sclerotium rolfsii secara in
vitro. Pengujian terdiri atas uji antagonisme dengan metode kultur ganda dan uji filtrat
Trichoderma sp. terhadap pertumbuhan S. rolfsii. Percobaan disusun dalam Rancangan
Acak Lengkap (RAL) dengan lima ulangan. Data yang diperoleh dianalisis dengan sidik ragam dan dilanjutkan dengan uji BNT pada taraf nyata 5%. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa Trichoderma sp. dan filtratnya mampu menekan pertumbuhan S. rolfsii secara in vitro. Isolat Trichoderma sp. yang kemampuan penghambatannya
paling tinggi adalah isolat Trichoderma harzianum.
KEMAMPUAN Trichoderma sp. DAN FILTRATNYA
DALAM MENEKAN PERTUMBUHAN Sclerotium
rolfsii SECARA IN VITRO
( Skripsi )
Oleh
INDAH PUSPITA DEWI
FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS LAMPUNG
xvi
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Tata letak jamur Trichoderma sp. dan S. rolfsii pada uji
antagonisme dalam cawan petri. (P = biakan S. rolfsii,
T = biakan Trichoderma sp.). ... 11
2. Penghambatan Trichoderma sp.(T) terhadap pertumbuhan Sclerotium rolfsii (Sr). (A) Trichoderma 1, (B) Trichoderma 2, (C)Trichoderma 3, dan (D) Trichoderma 4. ... 14
3. Perbandingan pertumbuhan S. rolfsii dalam media PDA yang mengandung filtrat Trichoderma pada 2 hsi. (A) Trichoderma 1, (B) Trichoderma 2, (C) Trichoderma 3, (D) Trichoderma 4, dan (K) Kontrol = tanpa filtrat Trichoderma. .
...
164. Mekanisme antibiosis Trichoderma sp. yang ditunjukkan oleh batas warna kecoklatan di antara Trichoderma sp. dan S. rolfsii. ... 18
5. T. harzianum secara mikroskopis. ... 29
6. T. koningii isolat 1 secara mikroskopis. ... 29
DAFTAR ISI
3.4.1 Isolasi dan perbanyakan Sclerotium rolfsii. ... 9
3.4.2 Peremajaan dan pembuatan filtrat Trichoderma sp. ... 9
3.4.3 Pengujian antagonisme dengan metode kultur ganda. ... 10
3.4.5 Pengujian Trichoderma sp. terhadap perkecambahan
sklerotia S. rolfsii. ... 12
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 14
4.1Hasil Penelitian ... 14
4.1.1 Pengujian antagonisme dengan metode kultur ganda. ... 14
4.1.2 Pengujian filtrat Trichoderma sp. terhadap perkecambahan dan pertumbuhan Sclerotium rolfsii ... 15
4.1.3 Pengujian Trichoderma sp. terhadap perkecambahan sklerotia S. rolfsii. ... 16
4.2 Pembahasan ... 17
V. KESIMPULAN DAN SARAN ... 20
5.1Kesimpulan ... 20
5.2Saran ... 20
PUSTAKA ACUAN ... 21
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Persentase penghambatan Trichoderma sp. terhadap
pertumbuhan koloni S. rolfsii. ... 14 2. Rata-rata pertumbuhan koloni S. rolfsii pada media yang
mengandung fitrat (metabolit) Trichoderma sp. ... 16 3. Pengaruh filtrat Trichoderma terhadap perkecambahan sklerotia
S. rolfsii. ... 17 4. Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
Sclerotium rolfsii metode kultur ganda 1 hsi. ... 24 5. Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium rolfsii
metode kultur ganda 1 hsi. ... 24 6. Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
Sclerotium rolfsii metode kultur ganda 2 hsi. ... 24 7. Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium rolfsii
metode kultur ganda 2 hsi. ... 25 8. Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
Sclerotium rolfsii metode kultur ganda 3 hsi. ... 25 9. Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium rolfsii
metode kultur ganda 3 hsi. ... 25 10.Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
Sclerotium rolfsii uji filtrat 2 hsi. ... 26 11.Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium
rolfsii uji filtrat 2 hsi. ... 26 12.Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
Sclerotium rolfsii uji filtrat 3 hsi. . ... 26 13.Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium rolfsii
uji filtrat 3 hsi. ... 27 14.Hasil pengamatan penghambatan Trichoderma sp. terhadap
xv
15.Anova penghambatan Trichoderma sp. terhadap Sclerotium rolfsii
uji filtrat 2 hsi. ... 27 16.Rata-rata pertumbuhan koloni S. rolfsii pada media yang
mengandung filtrat (metabolit) Trichoderma sp. ... 28 17.Rata-rata laju pertumbuhan koloni S. rolfsii pada media yang
mengandung filtrat (metabolit) Trichoderma sp. ... 28 18.Jumlah sklerotia yang tumbuh pada pengujian Trichoderma sp.
“Maka nikmat Tuhanmu yang manakah yang kamu dustakan?”
(QS Ar- Rahman :13)
“And We have certainly made the Qur’an easy for remembrance. So is there any who will remember?”
(Al Qur’an 54:17)
“ Jangan berputus asa dari rahmat Allah, sesungguhnya Dia Mengampuni segala dosa.”
(Q.S. Az-Zumar:53)
Barangsiapa yang bertakwa kepada Allah, maka Allah akan menunjukkan kepadanya jalan keluar dari kesusahan, dan diberikan-Nya rejeki dari jalan yang tidak disangka-sangka,
dan barangsiapa yang bertawakal kepada Allah, niscaya Allah mencukupkan keperluannya.”
(Surah At-Talaq :2-3)
“No one despairs of solace from Allah, except people who are unbelievers.”
Alhamdulillah
Puji syukur kehadirat ALLAH SWT atas segala nikmat dan
karunia yang telah diberikan, kupersembahkan karya
kecilku ini kepada
Ayahku tercinta, Suwondo, S.Pd.,
Ibuku tercinta Suprihati, S.Pd.,
Suamiku terkasih Budi Setiawan, S.E.,
Mamasku tersayang Hindra Susilo,
Mbakku tersayang Ryan Noviana Eka Putri, S.P.
Anakku, “Princess” Naura Aulia Azzahra Naryndra
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Sribhawono, Kecamatan Bandar Sribhawono, Kabupaten Lampung Timur pada tanggal 9 Mei 1992, merupakan anak bungsu dari dua bersaudara dari pasangan Bapak Suwondo,S.Pd. dan Ibu Suprihati, S.Pd.
Penulis menempuh jenjang pendidikan sekolah dasar di Sekolah Dasar Negeri 3 Sribhawono, Kabupaten Lampung Timur lulus tahun 2004, dan melanjutkan pendidikan di Sekolah Menengah Pertama Negeri 1 Bandar Sribhawono,
Kabupaten Lampung Timur, lulus tahun 2007 dan Sekolah Menengah Atas Negeri 1 Bandar Sribhawono, Kabupaten Lampung Timur, lulus tahun 2010. Pada tahun yang sama penulis terdaftar sebagai mahasiswa Fakultas Pertanian Universitas Lampung melalui jalur PKAB.
Pada tahun 2013 penulis melaksanakan Praktik Umum di PT Great Giant Pineapple, Kecamatan Terbanggi Besar, Kabupaten Lampung Tengah. Pada tahun 2014 penulis melaksanakan Kuliah Kerja Nyata (KKN) di Desa Agung Timur Kecamatan Kalirejo, Kabupaten Lampung Tengah.
SANWACANA
Puji Syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT karena berkat rahmat karunia dan hidayah-Nya lah penulis dapat menyelesaikan tugas akhir skripsi ini. Dalam pembuatan skripsi yang berjudul “Kemampuan Trichoderma sp. dan filtratnya
dalam menekan pertumbuhan Sclerotium rolfsii secara in vitro”, penulis
menyadari adanya kekurangan, untuk itu penulis menerima kritik dan saran yang bersifat membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Tri Maryono, S.P., M.Si., selaku dosen pembimbing pertama yang telah memberi arahan dan bimbingan dalam menyelesaikan skripsi ini. 2. Ibu Titik Nur Aeny, M.Sc., selaku dosen pembimbing kedua, serta ibu Dr. Ir.
Suskandini Ratih D., M.P., selaku dosen pembahas yang telah banyak memberikan arahan, nasehat dan saran dalam penyelesaian skripsi ini. 3. Ayah dan Ibu penulis, Suwondo, S.Pd. dan Suprihati, S.Pd., yang telah
memberi limpahan dan curahan kasih sayang, motivasi dan dukungan hingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini.
5. Bapak Ir. Muhammad Syamsoel Hadi, M.Sc., selaku pembimbing akademik yang telah banyak memberikan saran, nasehat dukungan dan motivasi bagi penulis
6. Bapak Dr. Ir. Purnomo, M.S., selaku ketua bidang Proteksi Tanaman Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
7. Bapak Dr.Ir. Kuswanta Futas Hidayat, M.P., selaku ketua jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
8. Bapak Prof. Dr. Ir. Wan Abbas Zakaria, M.S., selaku Dekan Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
9. Bapak/ibu staf pengajar dan karyawan yang telah memberikan bekal ilmu dan bimbingan selama penulis menempuh studi di Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
10.Ayu Dwi Lestari, Cindy Margaretha, S.P., dan Ika Ayuningsih, S.P., serta teman-teman Agroteknologi yang telah membantu selama penulis
menyelesaikan studi.
11.Mba Uum, Pak Paryadi dan Mas Iwan yang telah membantu selama melakukan penelitian di laboratorium.
Semoga Allah SWT membalas semua kebaikan mereka dan semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat. Amin.
Bandar Lampung, 16 Oktober 2014 Penulis
2
I. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang dan Masalah
Kedelai merupakan komoditas tanaman pangan yang penting di Indonesia. Produksi kedelai di Indonesia mencapai angka 0,8 juta ton per tahun, sedangkan kebutuhan kedelai di Indonesia mencapai 2,5 juta ton per tahunnya (Kementan, 2013). Untuk itu perlu adanya upaya dalam meningkatkan produksi kedelai.
Upaya meningkatkan produksi kedelai masih mengalami banyak kendala, diantaranya: lahan yang kurang tersedia bagi petani kedelai dan serangan hama dan penyebab penyakit. Serangan hama dan penyebab penyakit dapat
mengakibatkan penurunan produksi tanaman kedelai. Salah satu penyakit yang sering ditemukan dalam budidaya tanaman kedelai adalah penyakit rebah kecambah (damping- off) yang disebabkan oleh Sclerotium rolfsii.
Patogen S. rolfsii relatif sulit dikendalikan karena mampu bertahan selama bertahun-tahun di dalam tanah dalam bentuk sklerotia dan mempunyai kisaran inang yang luas (Semangun, 1993). Pengendalian menggunakan fungisida belum memberikan hasil yang baik, justru memberikan dampak negatif. Oleh karena itu diperlukan cara pengendalian lain yang lebih ramah lingkungan, misalnya
2
Salah satu agen antagonis yang sering digunakan untuk mengendalikan jamur patogen tumbuhan adalah jamur Trichoderma sp. Mekanisme antagonis jamur Trichoderma sp. adalah parasitisme, lisis, antibiosis, dan kompetisi ruang
(Soesanto, 2008). Selain dapat digunakan langsung untuk mengendalikan patogen, Trichoderma sp. juga dapat digunakan secara tidak langsung untuk
mengendalikan patogen,yaitu menggunakan metabolit sekunder yang
dihasilkannya yang terkandung dalam media pertumbuhannya (Radder, 2005).
1.2 Tujuan Penelitian
Penelitian bertujuan menguji kemampuan Trichoderma sp. dan filtratnya dalam menekan pertumbuhan S. rolfsii penyebab penyakit rebah kecambah tanaman kedelai.
1.3Kerangka Pemikiran
Salah satu mikroorganisme yang dikenal sebagai agen pengendalian hayati adalah jamur Trichoderma sp. Trichoderma sp. dapat digunakan secara langsung dan tidak langsung untuk mengendalikan patogen tumbuhan. Penggunaan
Trichoderma sp. secara langsung yaitu dengan mengaplikasikan biakan atau spora
Trichoderma sp. pada patogen. Penggunaan Trichoderma sp. secara tidak
3
Kemampuan filtrat Trichoderma dalam menghambat atau mengendalikan patogen, berkaitan dengan enzim dan toksin yang terkandung dalam filtrat tersebut. Menurut El-Katatny et al. (2000), filtrat Trichoderma mengandung enzim kitinase dan β-1,3- glukanase, sedangkan menurut Mukherjee et al. (2012), metabolit Trichoderma mengandung toksin harzianic acid, tricholin, peptaibols, gliotoxin, viridian, T22azaphilone, 1 hydroxy-3-methyl-anthraquinone, 1,8-dihydroxy-3-methyl-anthraquinone, T39butenolide, harzianolide, dan harzianopyridone.
Menurut Gveroska dan Ziberoski (2012) bahwa filtrat Trichoderma sp. efektif menghambat Alternaria alternata dan mengakibatkan abnormalitas morfologi patogen tersebut. Radder (2005) melaporkan bahwa filtrat dari Trichoderma mampu menghambat pertumbuhan miselia dan pembentukan sklerotia dari S. rolfsii penyebab penyakit layu pada kacang tanah.
1.4 Hipotesis
Hipotesis yang diajukan dalam penelitian adalah:
1. Trichoderma sp. mampu menekan pertumbuhan S. rolfsii secara in vitro. 2. Filtrat Trichoderma sp. mampu menekan pertumbuhan S. rolfsii secara in
4
II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Botani Tanaman Kedelai
Klasifikasi dari tanaman kedelai adalah sebagai berikut (Rukmana dan Yuniarsih, 1996) :
Divisio : Spermatophyta Classis : Dicotyledoneae Ordo : Rosales
Familia : Papilionaceae Genus : Glycine
Species : Glycine max (L.) Merill
Tanaman kedelai (Glycine max (L.) Merr.) termasuk dalam famili Leguminosae dan genus Glycine. Tipe perkecambahan bibit kedelai adalah tipe
5
2.2 Penyakit Rebah Kecambah
Penyakit yang disebabkan oleh S. rolfsii adalah rebah kecambah atau rebah bibit pada tanaman muda dan busuk pangkal batang pada tanaman menjelang dewasa. Soesanto (2008) menjelaskan bahwa jamur tular tanah termasuk Sclerotium rolfsii sulit di tangani karena mampu bertahan selama bertahun-tahun dalam tanah dalam bentuk sklerotium dan mempunyai kisaran inang yang luas.
S. rolfsii merupakan jamur yang bersifat parasit fakultatif yang tumbuh dan
bertahan secara saprofit dalam tanah. Apabila tidak ada tanaman inang, jamur dapat membentuk struktur istirahat berupa sklerotia yang mampu bertahan di dalam tanah walaupun dalam lahan tersebut tidak terdapat pertanaman (Tjahyadi, 1995 dalam Kuswinanti, 2006). Jamur ini dapat menyebabkan beberapa penyakit mematikan pada tanaman seperti busuk batang, layu dan rebah kecambah
(Semangun, 1993).
2.3 Jamur Antagonis (Trichoderma sp.)
Mikroorganisme antagonis adalah mikroorganisme yang mempunyai pengaruh yang merugikan terhadap mikroorganisme lain yang tumbuh dan berasosiasi dengannya. Antagonis meliputi mikoparasit, kompetitor yang agresif dan antibiosis. Awalnya pertumbuhan hifa jamur Trichoderma sp. memanjang, kemudian membelit dan mempenetrasi hifa dari jamur inang, sehingga hifa inang mengalami lisis lalu hancur (Cook dan Baker, 1983).
6
patogen (secara biologis). Pemanfaatan musuh-musuh alami yang sering digunakan adalah penggunaan agen antagonis. Agen antagonis yang sering digunakan untuk pengendalian hayati adalah Trichoderma sp. (Tindaon, 2008).
Mikoparasit terjadi ketika jamur memarasit miselium pathogen dengan menembus dinding sel dan masuk kedalam sel untuk mengambil zat makanan dari dalam sel sehingga patogen akan mati (Harman, 1998). Antibiosis terjadi ketika
Trichoderma spp. menghasilkan zat antibiotik seperti alametichin, paracelsin,
trichotoxin yang mampu menghancurkan sel jamur melalui perusakan
permeabilitas membran sel, dan enzim chitinase, laminarinase yang menyebabkan lisis dinding sel (Nugroho et al., 2008). Kompetisi terjadi saat Trichoderma sp. berkompetisi dengan jamur lain dalam memperebutkan makanan dan tempat hidup. Interfensi terjadi karena hifa Trichoderma spp. mengakibatkan perubahan permeabilitas dinding sel (Harman, 1998).
Menurut Streets (1980) dalam Tindaon (2008), Trichoderma sp. diklasifikasikan dalam Kingdom Fungi,Devisio Amastigomycota,Class Deutromycetes,Ordo Moniliales, Famili Moniliaceae,Genus Trichoderma, Spesies Trichoderma sp. Cendawan marga Trichoderma terdapat lima jenis yang mempuyai kemampuan untuk mengendalikan beberapa patogen yaitu T. harzianum, T. koningii, T. viride, T. hamatum dan T. polysporum. Jenis yang banyak dikembangkan di Indonesia
7
Trichoderma sp. dapat digunakan untuk mengendalikan patogen secara langsung
yaitu dengan mengaplikasikan Trichoderma sp. langsung dengan patogen sehingga sel Trichoderma sp. dan sel patogen dapat bertemu langsung yang mengakibatkan mekanisme antagonis terjadi. Selain itu, Trichoderma sp. dapat digunakan secara tidak langsung yaitu dengan menggunakan metabolit sekunder yang dihasilkan Trichoderma sp. yang mampu menekan pertumbuhan patogen. Lorito et al. (1993) melaporkan bahwa T. harzianum menghasilkan enzim kitinolitik yang bekerja sama secara sinergis dengan bakteri dari genus Enterobacter untuk menghambat pertumbuhan dari Fusarium solani.
Filtrat Trichoderma sp. menghasilkan senyawa beracun yang dapat digunakan untuk mengendalikan pertumbuhan patogen. Penggunaan filtrat Trichoderma sp. yang mengandung enzim kitinase dan β-1,3- glukanase mampu menekan
8
III. BAHAN DAN METODE
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Ilmu Penyakit Tumbuhan, Bidang Proteksi Tanaman, Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Lampung dari April – Agustus 2014.
3.2 Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan antara lain; media PDA (Potato dextrose agar), media PDB (Potato dextrose broth), biakan patogen S. rolfsii, isolat Trichoderma sp., NaOCl, alkohol, asam laktat, dan lain-lain. Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain shaker, rotamixer, cawan petri dengan diameter 9 cm, cork borer, alumunium foil, plastik wrap, plastik tahan panas, tabung erlenmeyer, dan lain-lain.
3.3 Metode Penelitian
9
3.4 Pelaksanaan Penelitian
3.4.1 Isolasi dan perbanyakan S. rolfsii
Jamur S. rolfsii diisolasi dari bagian tanaman kedelai yang terserang S. rolfsii. Bagian tanaman yang sakit dipotong dengan ukuran 0,5 cm. Potongan tersebut lalu direndam dalam akuades lalu direndam lagi dalam larutan NaOCl (klorok) selama 30 detik. Setelah direndam, potongan tersebut dibilas kembali dalam akuades dan ditiriskan diatas tisu. Setelah ditiriskan, potongan tersebut diletakkan di atas permukaan media PDA dalam cawan petri.
3.4.2 Peremajaan dan pembuatan filtrat Trichoderma sp.
Sebanyak 4 isolat Trichoderma sp. yaitu T. koningii, T. koningii, T. harzianum, dan Trichoderma sp. yang digunakan dalam percobaan ini didapatkan dari koleksi di Laboratorium Penyakit Tanaman Bidang Proteksi Tanaman Jurusan
Agroteknologi Universitas Lampung yang diperoleh dari hasil isolasi tanah rizosfer tanaman cabai.
Keempat isolat Trichoderma sp. yang digunakan berasal dari pengelompokkan 11 isolat yang dibedakan dari warna dan pola koloni jamur. Biakan Trichoderma sp. terlebih dahulu diremajakan pada media PDA sebelum digunakan dalam
10
Untuk mendapatkan filtrat Trichoderma, jamur ini terlebih dahulu dibiakkan pada media cair potato dextrose broth (PDB). Komposisi media cair yang digunakan sama dengan komposisi media PDA, tetapi tanpa menggunakan agar. Sebanyak 5 potongan cakram Trichoderma sp. dimasukkan dalam 500 ml media cair yang sudah disiapkan dalam tabung Erlenmeyer, kemudian diinkubasi selama 7 hari pada suhu ruang dengan pencahayaan matahari. Setelah 7 hari, media cair tesebut disaring untuk memisahkan struktur jamur dengan cairannya. Filtrat tersebut selanjutnya digunakan dalam pengujian.
3.4.3 Pengujian antagonisme dengan metode kultur ganda
Pengujian dengan metode kultur ganda dilakukan untuk mengetahui kemampuan Trichoderma sp. dalam kemampuan parasitisme, persaingan ruang dan nutrisi,
serta antibiosis dan lisis. Biakan Trichoderma sp. yang telah diinkubasi selama 4 hari kemudian dipindahkan ke dalam media PDA yang baru dengan menggunakan cork borer berdiameter 4 mm. Isolat patogen yang telah diinkubasi selama 4 hari
kemudian dipindahkan ke media PDA yang sama dengan Trichoderma sp. Potongan cakram Trichoderma sp. diletakkan 3 cm dari tepi cawan, sedangkan potongan cakram isolat patogen diletakkan 3 cm dari tepi cawan pada bagian sisi depan cuplikan Trichoderma sp, kemudian diinkubasi.
11
cawan. Setelah data jari-jari didapatkan kemudian dihitung persentase
penghambatan Trichoderma sp. terhadap pertumbuhan koloni patogen dengan rumus (Nduagu et al., 2008) :
K0 – K1
P = x 100% K0
P adalah persentase penghambatan, K0 = jari-jari koloni patogen ke arah tepi cawan petri (kontrol), dan K1 = jari-jari koloni patogen ke arah biakan Trichoderma sp.
Untuk mengetahui ada tidaknya lisis dan antibiosis dilakukan pengamatan pada titik pertemuan patogen dan Trichoderma sp. yang ditunjukkan adanya batas yang jelas antara koloni patogen dan Trichoderma sp. atau adanya warna kuning atau coklat yang dilihat dari bagian bawah cawan. Berikut ini merupakan tata letak uji antagonisme metode kultur ganda.
Gambar 1. Tata letak jamur Trichoderma sp. dan S. rolfsii pada uji antagonisme dalam cawan petri.(P = biakan S. rolfsii, T = biakan Trichoderma sp.).
P T
3 cm 3 cm
3 cm
12
3.4.4 Pengujian filtrat Trichoderma sp. terhadap pertumbuhan S. rolfsii.
Pada pengujian ini, media yang digunakan adalah campuran filtrat Trichoderma dan media PDA dengan perbandingan 1:1. Sebanyak 25 ml filtrat Trichoderma dicampur dengan 25 ml media PDA yang belum jadi, lalu diotoklaf pada suhu 121oC selama 10 menit. Untuk perlakuan kontrol, media yang digunakan hanya media PDA tanpa filtrat Trichoderma. Setelah selesai diotoklaf dan cukup dingin, media uji tersebut dituang dalam cawan petri dan dibiarkan membeku. Setelah beku, sebanyak 1 sklerotia S. rolfsii diletakkan tepat ditengah cawan lalu diinkubasi pada suhu ruang dengan pencahayaan matahari.
Perlakuan pada percobaan ini adalah filtrat dari 4 isolat Trichoderma sp. ditambah dengan 1 perlakuan kontrol. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 5 kali. Peubah yang diamati adalah pertumbuhan koloni jamur S. rolfsii. Pengamatan dilakukan setiap hari dengan mengukur pertumbuhan koloni S.rolfsii. Pengukuran dihentikan apabila pada perlakuan kontrol pertumbuhan koloni S.rolfsii telah mencapai tepi cawan petri.
3.4.5 Pengujian filtrat Trichoderma sp. terhadap perkecambahan sklerotia S. rolfsii.
Pada pengujian ini, sklerotia dari S. rolfsii terlebih dahulu direndam dalam filtrat Trichoderma terbaik. Perendaman dalam filtrat dilakukan selama 10 menit,
13
V. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian disimpulkan bahwa Trichoderma sp.dan filtratnya mampu menghambat pertumbuhan S. rofsii. Isolat Trichoderma yang memiliki memiliki kemampuan tertinggi dalam menghambat S. rofsii adalah isolat T. harzianum.
5.2 Saran
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka peneliti menyarankan agar dilakukan penelitian lanjutan mengenai cara penyiapan media kultur cair
Trichoderma sp. agar dapat meningkatkan kemampuan filtrat Trichoderma sp. dalam
21
PUSTAKA ACUAN
Cook R and Baker KF. 1983. The Nature and Practice of Biological Control of Plants Pathogens. American Phytopathological Society. St. Paul. Minnesota.
Di Pietro, A., M. Lorito, C. K. Hayes, R. M. Broadway, and G. E. Harman. 1993. Endochitinase from Gliocladium virens: isolation, characterization, and synergistic antifungal activity in combination with gliotoxin. Phytopathology 83:308-313.
El-katatny, M.H., Somitsch, W., Robra, K.H., El-Katatny., and Gubitz, G.M. 2000. Production of chitinase and β-1,3-glucanase by T. harzianum, Food technol. Biotechnol. 38 (3): 173-180
Gultom, J.M., 2008. Pengaruh Pemberian Beberapa Jamur Antagonis dengan berbagai Tingkat Konsentrasi untuk Menekan Perkembangan Jamur Phytium sp Penyebab Rebah Kecambah pada Tanaman Tembakau (Nicotiana
tabaccum L.) http://repository.usu.ac.id.pdf Akses 14 Maret 2014
Gveroska, B., and Ziberoski, J. 2012. Trichoderma harzianum as a biocontrol agent against Alternaria alternata on tobacco. J. Appl. Technol. & Innov. 7(2): 67-76
Harman, G. E. & C. P. Kubicek. (1998). Trichoderma and Gliocladium, Vol. 2. Enzymes, Biological Control and Commercial Applications. Taylor and Francis, London, UK. V Congreso Mundial del Aguacate. 725-733.
Kementan. 2013. Produksi Tanaman Pangan. http://aplikasi.pertanian.go.id/bdsp/ hasil kom.asp. diakses 5 Maret 2014
Kuswinanti, T., 2006. Efektivitas Trichoderma harzianum dan Gliocladium virens dalam Menekan Pertumbuhan Sclerotium rolfsii, Penyebab Penyakit Busuk Pangkal Batang pada Tanaman Kacang Tanah. Buletin Penelitian, Vol.9 (1), 10-17 hlm.
22
Mukherjee, P.K., Horwitz, B.A., dan Kenerly, C.M. 2012. Secondary metabolism in Trichoderma – a genomic perspective. Microbiol. 158:35-45
Nduagu C., Ekefan E.J., and Nwankiti A. O. 2008. Effect of Some Crude Plant Extracts on Growth of Colletotrichum capsici (Synd) &Bisby, Causal Agent of Pepper Antracnose. J. of Applied Biosci. 6(2): 184-190
Nugroho, T. T, Saryono Ulina, R. S. Silitonga, A. 2008. Laminarinase Activity Produced by Riau Local Biocontrol Fungi. Paper presented at the second Gruber-Soedigdo Lecture 2008 Seminar on Protein Folding and Dynamics and Their Implication for Human Disease. Bandung. Diakses 15 Agustus 2014
Radder, Siddanagoudar R., 2005. Effect of bioagents and their metabolites on sclerotium rolfsii Sacc of groundnut. Thesis Master of Science. University of Agricultural Sciences. Dharward.
Rukmana, R. dan Yuyun Yuniarsih.1996. Kedelai Budidaya dan Pascapanen. Kanisius. Yogyakarta.
Schirmbock. M, M Lorito, Y L Wang, C K Hayes, I Arisan-Atac, FScala, G E Harman and C P Kubicek. 1994. Appl. Environ. Microbiol. 1994,
60(12):4364.
Semangun, H. 1993. Penyakit Tanaman Pangan di Indonesia. Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
Semangun, H. 1996. Pengantar Ilmu Penyakit Tumbuhan. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta.
Soesanto, L. 2008. Pengantar Pengendalian Penyakit Tanaman. Rajawali Pers. PT. Raja Grafindo Persada.Jakarta.
Tindaon, H., 2008. Pengaruh Jamur Antagonis Trichoderma harzianum dan Pupuk Organik untuk Mengendalikan Patogen Tular Tanah Sclerotium rolfsii Sacc. Pada Tanaman Kedelai ( Glycine max L.) di Rumah Kasa.
http://repository.usu.ac.id.pdf akses pada 2 Januari 2014
