Pengaruh Konsentrasi Air Perasan Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Streptococcus Pyogenes Secara in vitro

(1)

LAMPIRAN

DAFTAR RIWAYAT HIDUP PENELITI

Nama : Septami Putri Hajati

Jenis Kelamin : Perempuan

Tempat / Tanggal Lahir : Palembang / 8 September 1994

Kewarganegaraan : Indonesia

Agama : Islam

Alamat : Jalan Universitas no. 48, Medan

Email : septamip@yahoo.com

Riwayat Pendidikan :

1. Sekolah Dasar IBA Palembang (2000-2006)

2. Sekolah Menengah Pertama Negeri 9 Palembang (2006-2009)

3. Sekolah Menengah Atas Negeri 17 Palembang (2009-2012)

4. Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara (2012-sekarang)

Riwayat Organisasi :

1. Anggota Divisi Kemuslimahan FULDFK Wilayah 1 tahun 2013-2014

2. Anggota Divisi NAPZA SCORA FK USU tahun 2013-2014

3. Anggota Divisi Kenaziran Panitia Hari Besar Islam (PHBI) FK USU tahun

2013-2014

4. Anggota Divisi Kenaziran Badan Kenaziran Masjid (BKM) Ar Rahmah FK

(2)

(3)

(4)

(5)

LAMPIRAN

HASIL UJI STATISTIK

Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov

Uji Homogenitas Levene

Test of Homogeneity of Variances

Diameter

Levene Statistic

df1 df2 Sig.

8,888 6 21 ,000

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

Diameter

N 28

Normal Parametersa,b

Mean 1,5893

Std. Deviation

2,32846

Most Extreme Differences

Absolute ,320

Positive ,320

Negative -,247

Kolmogorov-Smirnov Z 1,691

Asymp. Sig. (2-tailed) ,007

(6)

LAMPIRAN

Uji Post Hoc Multiple Comparisons dengan metode Mann-Whitney

(7)

LAMPIRAN

Test Statisticsa

Diameter

Mann-Whitney U 8,000

Wilcoxon W 18,000

Z ,000

Asymp. Sig. (2-tailed) 1,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1,000b a. Grouping Variable: Konsentrasi

b. Not corrected for ties.

Npar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

Konsentrasi N Mean Rank Sum of Ranks

Diameter

K (-) 4 2,50 10,00

12,5% 4 6,50 26,00

Total 8

Test Statisticsa

Diameter

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 10,000

Z -2,530

Asymp. Sig. (2-tailed) ,011 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,029b a. Grouping Variable: Konsentrasi

(8)

LAMPIRAN

Npar Tests

(9)

LAMPIRAN

Npar Tests

(10)

LAMPIRAN

Npar Tests

(11)

LAMPIRAN

Npar Tests

(12)

LAMPIRAN

Npar Tests

(13)

LAMPIRAN

Npar Tests

(14)

LAMPIRAN

Npar Tests

(15)

LAMPIRAN

Npar Tests

(16)

LAMPIRAN

Npar Tests

(17)

LAMPIRAN

Uji Regresi Linier b. All requested variables entered.

(18)

LAMPIRAN

ANOVAa

Model Sum of

Squares

df Mean

Square

F Sig.

1

Regression 4,760 1 4,760 98,213 ,000b

Residual ,872 18 ,048

Total 5,632 19

a. Dependent Variable: diameter b. Predictors: (Constant), Ko

Coefficientsa

Model Unstandardized

Coefficients

Standardized Coefficients

t Sig.

B Std. Error Beta

1 (Constant) -,620 ,169 -3,674 ,002

Ko 1,145 ,116 ,919 9,910 ,000

(19)

LAMPIRAN

DOKUMENTASI

Gambar 1. Zona hambat pada replikasi I

Gambar 1. Zona hambat pada replikasi II

Gambar 1. Zona hambat pada replikasi III

(20)

31

DAFTAR PUSTAKA

Ambarwati, Fitrosana Enda. 2012. Pengaruh Pemberian Larutan Ekstrak Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) terhadap Pembentukan Plak Gigi. Fakultas Kedokteran. Universitas Diponegoro. Semarang. Available from:

<http://eprints.undip.ac.id/37540/1/FITAROSONA_G2A007079_LAP.KTI. ppdf>. [17 April 2015].

Anggrahini, Shinta Putri. 2014. Pengaruh Konsentrasi Jeruk Nipis (Citrus

aurantifolia) Sebagai Antifungi terhadap Pertumbuhan Candida albicans

Secara In Vitro. Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Muhammadiyah Surakarta. Jawa Tengah. Available from: <eprints.ums.ac.id/31192/>. [26 Mei 2015].

Brooks, G.F., Janet, S. B., & Stephen, A. M. 2007. Jawetz, Melnick, &

Adelberg’s Mikrobiologi Kedokteran Edisi 25, trans. Nugroho, Aryandhito

Widhi, et al. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. p: 204-210.

Buxton, Rebecca. 2010. Blood Agar Plates and Hemolysis: Streptococcus and

Other Catalase Negative Gram-Positive Cocci. ASM Microbe Library.

Available from:

<http://www.microbelibrary.org/component/resource/laboratory-test/2881- blood-agar-plates-and-hemolysis-streptococcus-and-other-catalase-negative-gram-positive-cocci>. [25 Mei 2015].

Clinical Laboratory Standards Institute. 2012. Performance Standards for

Antimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Second Informational Supplement. CLSI document M100-S22.

Cowan, Marjorie Murphy. 1999. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clinical

Microbiology Reviews, vol. 12, no. 4, pp. 564-582. Available from:

<www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10515903>. [25 Mei 2015].

Dep Kes RI. 1999. Good Laboratory Practices. Dep Kes RI. Jakarta.

Dorland, W. N. 2011. Kamus Kedokteran Dorland Edisi 28. Jakarta: EGC. p: 248.

Hariana, Arief. 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Jakarta: Niaga Swadaya. p: 149.

(21)

32

Leman, Saharman. 2009. Demam Reumatik dan Penyakit Jantung Reumatik. In: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam Edisi Kelima Jilid II. Jakarta: Interna Publishing. p: 1662.

Mardiastuti, H.W., et al. Emerging Resistance Pathogen: Situasi Terkini di Asia, Eropa, Amerika Serikat, Timur Tengah, dan Indonesia. Majalah Kedokteran Indonesia, vol. 57, no. 3, pp. 75-79. Available from:

<indonesia.digitaljournals.org/index.php/idnmed/article/download/490/491> [29 April 2015].

Mukhitasari, Dyna Ayu. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Air Perasan Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia, Swingle) terhadap Pertumbuhan Shigella dysenteriae Secara In Vitro. Fakultas Kedokteran. Universitas Jember. Jawa Barat. Available from:

<http://repository.unej.ac.id/bitstream/handle/123456789/3001/Dyna%20% Ayu%20Mukhtisari.pdf?sequence=1>. [24 Mei 2015].

Notoatmodjo, Soekidjo. 2010. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: Rineka Cipta. p: 56-57.

Pradani, Ninditha Retno. 2012. Uji Aktivitas Antibakteri Air Perasan Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia, Swingle) terhadap Pertumbuhan Bakteri

Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Fakultas Kedokteran. Universitas Jember. Jawa Barat. Available from:

<http://repository.unej.ac.id/bitstream/handle/123456789/3115/Ninditha%2 0Retno%20Pradani.pdf?sequence=1> [22 Mei 2015].

Putra, Yoseph Arif. 2011. Aktivitas Antimikroba Air Perasan dan Ekstrak Etanol Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) terhadap Beberapa Bakteri Penyebab Infeksi Saluran Pernafasan Akut (ISPA) In Vitro. Fakultas Kedokteran. Universitas Kristen Maranatha. Jawa Barat. Available from:

<http://repository.maranatha.edu/2474/1/0810122_Abstract_TOC.pdf> [18 April 2015].

Razak, Abdul, Aziz Djamal, & Gusti Revilla. 2013. Uji Daya Hambat Air Perasan Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) terhadap Pertumbuhan Bakteri

Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Jurnal Kesehatan Andalas, vol. 5,

no. 1, pp. 5-8. Available from: <http://jurnal.fk.unand.ac.id>. [27 Maret 2015].

Sarwono, B. 2001. Khasiat dan Manfaat Jeruk Nipis. Jakarta: Agromedia Pustaka. p: 1-12.

(22)

33

Sturm, Tasha. 2011. Streptococcus pyogenes, a Gram-Positive Coccus. ASM Microbe Library. Available from: <http://www.microbelibrary.org/library/2- associated-figure-resource/3486-streptococcus-pyogenes-a-gram-positive-coccus>. [25 Mei 2015].

Taiwo, S.S., Oyenkanmi, B.A., Adesiji, Y.O., Opaleye, O.O., & Adeyeba, O.A. 2007. In vitro Antimicrobial Activity of Crude Extracts of Citrus

aurantifolia Linn and Tithonia diversifolia Poaceae on Clinical Bacterial

Isolates. International Journal of Tropical Medicine, vol. 2, no. 4, pp: 113-117. Available from:

<www.medwelljournals.com/abstract/?doi=ijtmed.2007.113.117>. [25 Mei 2015].

Tim Mikrobiologi FK Unibraw. 2003. Bakteriologi Medik. Jawa Timur: Bayumedia Publishing. p: 145-148.

Utami, P., & Puspaningtyas, D. E. 2013. The Miracle of Herbs. Jakarta: Agromedia Pustaka. p: 171.

Wahyuni, A. S., 2007. Uji Beda Mean. Dalam: Statistika Kedokteran. Jakarta: Bamboedoea Communication. p: 74-75.

Warsa, Usman Chatib. 1994. Kokus Positif Gram. In: Staff Pengajar Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta Barat: Binarupa Aksara. p: 112-120.

(23)

16

BAB 3

KERANGKA KONSEP, DEFINISI OPERASIONAL, DAN HIPOTESIS

3.1. Kerangka Konsep

Berdasarkan tujuan penelitian yang telah dikemukakan sebelumnya, maka

kerangka konsep dalam penelitian ini dapat digambarkan sebagai berikut:

Variabel Independen Variabel Dependen

Gambar 5. Kerangka Konsep Penelitian

3.2. Definisi Operasional

Batasan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Konsentrasi air perasan jeruk nipis

a. Definisi operasional: Konsentrasi air perasan jeruk nipis merupakan

perbandingan massa atau volume air perasan jeruk nipis terhadap massa

atau volume larutan atau pelarut.

b. Kategori : 6,25%, 12,5%, 25%, 50%, dan 100%

c. Skala pengukuran: Ordinal

2. Pertumbuhan Streptococcus pyogenes

a. Definisi operasional: Pertumbuhan Streptococcus pyogenes dilihat

dengan menghitung zona hambat. Zona hambat adalah zona atau daerah

jernih yang terbentuk disekitar cakram antimikroba yang tidak

ditumbuhi oleh koloni bakteri (daerah bebas koloni).

b. Alat ukur: Jangka sorong

(24)

17

d. Kategori:

- Ada, jika terdapat zona hambat dan dibandingkan dengan

levofloxacin dan sesuaikan dengan tabel CLSI M100-S22 yang

memuat zona hambat Streptococcus pyogenes terhadap levofloxacin.

- Tidak ada, jika tidak terdapat zona hambat.

e. Skala pengukuran: Nominal

3.3. Hipotesis

Semakin tinggi konsentrasi air perasan jeruk nipis maka daya hambatnya

(25)

18

BAB 4

METODE PENELITIAN

4.1.Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental dengan rancangan

Posttest Only Control Group Design dengan alasan untuk mengetahui pengaruh

lama kontak dan konsentrasi air perasan jeruk nipis terhadap pertumbuhan

Streptococcus pyogenes. Dalam rancangan ini perlakuan atau intervensi telah

dilakukan, kemudian dilakukan pengukuran (observasi) atau posttest

(Notoatmodjo, 2010).

4.2.Lokasi dan Waktu Penelitian 4.2.1. Lokasi Penelitian

Lokasi pelaksanaan penelitian dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi

Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.

4.2.2. Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan selama 3 bulan, yaitu mulai bulan September 2015

sampai dengan bulan November 2015.

4.3.Sampel Penelitian

Sampel dalam penelitian ini adalah biakan spesimen-spesimen yang

telah diidentifikasi sebagai bakteri Streptococcus pyogenes yang diambil dari

Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran USU. Penentuan jumlah

sampel dalam penelitian ini menggunakan rumus Federer, yaitu:

Keterangan:

t = banyak perlakuan

r = jumlah replikasi

Dalam penelitian ini dilakukan 7 perlakuan (kelompok), yaitu pemberian air

perasan jeruk nipis konsentrasi 6,25%; 12,5%; 25%; 50%; dan 100% dan

(26)

19

positif berupa suspensi levofloxacin. Perlakuan terhadap kontrol hanya dilakukan

1 kali. Berdasarkan rumus tersebut, didapatkan:

bakteri Streptococcus pyogenes. Jika dibulatkan maka jumlah sampel untuk

masing-masing kelompok adalah 4 sampel bakteri Streptococcus pyogenes.

4.4.Variabel Penelitian 4.4.1. Variabel Bebas

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah air perasan jeruk nipis dengan

konsentrasi 6,25%; 12,5%; 25%; 50%; dan 100%.

4.4.2. Variabel Terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah diameter zona hambat

pertumbuhan Streptococcus pyogenes pada media Mueller Hinton di sekitar

cakram setelah kontak selama 24 jam (inkubasi) dengan air perasan jeruk nipis

dengan konsentrasi 6,25%; 12,5%; 25%; 50%; dan 100%.

4.5.Teknik Pengumpulan Data 4.5.1. Jenis Data Penelitian

Jenis data yang digunakan dalam penelitian ini adalah data primer, yaitu

data yang diambil selama pengujian daya hambat air jeruk nipis (Citrus

aurantifolia) terhadap S. pyogenes di Laboratorium Mikrobiologi FK USU.

4.5.2. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu:

- Ose - Kapas lidi

(27)

20

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu:

- Mueller Hinton Agar (MHA)

- Air Perasan Jeruk nipis (Citrus Aurantifolia)

- Biakan bakteri Streptococcus pyogenes

- Aquabides

- Levofloxacin disc

4.5.3. Prosedur dan Teknik Penelitian

1. Persiapan bakteri

Koloni bakteri Streptococcus pyogenes diperoleh dari hasil biakan

spesimen-spesimen yang telah diidentifikasikan dengan metode standar di

Laboratorium Mikrobiologi FK USU.

2. Pembuatan perasan jeruk nipis

Jeruk nipis yang segar di cuci dengan menggunakan air yang bersih.

Kemudian, jeruk nipis dipotong dengan menggunakan pisau yang steril,

diperas dan disaring airnya menggunakan kain steril ke dalam labu

Erlenmeyer steril, lalu ditutup dengan aluminium foil steril dan disimpan

pada suhu 4ºC sampai saat digunakan. Kemudian, blank disc direndam pada

setiap konsentrasi yang telah ditentukan selama 10-15 menit (Taiwo et al., 2007).

3. Pembuatan konsentrasi air jeruk nipis

Menurut Suswanti dan Nurfida (2009) dalam Pradani (2012), cara

(28)

21

jeruk nipis sebanyak 4 ml tanpa menambahkan bahan apapun yang dimasukkan ke

dalam tabung reaksi I. Kemudian dilakukan pengenceran bertingkat dengan

kelipatan setengahnya sampai didapatkan larutan konsentrasi 6,25% dan divortex

selama 60 detik. Dari larutan konsentrasi 100% diambil sebanyak 1 ml

dimasukkan ke dalam tabung reaksi II yang sudah diisi dengan 1 ml aquades steril

kemudian divortex selama 60 detik sehingga didapatkan konsentrasi 50%. Dari

larutan konsentrasi 50 % diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi III

yang sudah diisi dengan 1 ml aquades steril kemudian divortex selama 60 detik

sehingga didapatkan konsentrasi 25%. Dari larutan konsentrasi 25% diambil 1 ml

dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi IV yang sudah diisi dengan 1 ml aquades

steril kemudian divortex selama 60 detik sehingga didapatkan konsentrasi 12,5%.

Dari larutan konsentrasi 12,5% diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung

reaksi V yang sudah diisi dengan 1 ml aquades steril kemudian divortex selama

60 detik sehingga didapatkan konsentrasi 6,25%. Beri label pada tabung untuk

setiap kali pengenceran sesuai dengan konsentrasinya.

4. Uji kepekaan dengan cara difusi

- Siapkan lempeng agar dalam cawan petri yang mengandung koloni bakteri

yang telah diidentifikasikan sebagai Streptococcus pyogenes.

- Ambil koloni bakteri yang akan diuji kepekaannya dan dimasukkan ke medium

cair dalam tabung reaksi, eramkan 2-5 jam pada suhu 36-37ºC.

- Buat suspensi bakteri dengan kekeruhan sesuai dengan Nephelometer Mcfarland 0,5

- Celupkan swab kapas steril ke dalam suspensi yang terdapat dalam tabung

reaksi.

- Dengan gerakan menekan dan memutar kapas lidi steril tersebut pada dinding

tabung.

- Kemudian swab tersebut diusapkan pada permukaan lempeng agar Mueller

Hinton dan sebarkan secara merata pada permukaan agar tersebut.

Diamkan selama 3-5 menit sampai mengering.

- Letakkan cakram yang telah diberi air perasan jeruk nipis pada permukaan

(29)

22

- Inkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam.

- Periksa Zona Hambat di sekitar cakram antimikroba dan kertas cakram jeruk

nipis tersebut yang tidak ditumbuhi oleh koloni bakteri dan diukur

diameternya dengan jangka sorong (caliper) atau penggaris dan disesuaikan

pembacaannya berpedoman pada tabel CLSI M100-S22 untuk

Streptococcus pyogenes (Kumala, 2006).

4.6.Pengolahan dan Analisa Data

Data yang telah di kumpulkan dari setiap pengukuran disajikan dalam

bentuk tabel untuk mempermudah pengolahan dan pembahasan. Data yang

diperoleh akan dianalisis menggunakan analisis regeresi linier. Sebelumnya

dilakukan uji normalitas Kolmogorov-Smirnov dan uji homogenitas Levene.

Kemudian dilakukan uji Post Hoc multiple comparisons dengan metode

Mann-Whitney untuk melihat ada perbedaan atau tidak pada masing-masing perlakuan

(30)

23

masing-masing kelompok adalah 4 sampel bakteri Streptococcus pyogenes.

Berdasarkan data yang telah dikumpulkan dan dianalisa, maka dapat disimpulkan

hasil penelitian sebagai berikut.

5.1.1. Deskripsi Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran

Universitas Sumatera Utara. Lokasinya berada di Jalan Universitas No. 1,

Kelurahan Padang Bulan, Kecamatan Medan Baru, Medan, Sumatera Utara.

5.1.2. Deskripsi Karakteristik Sampel Penelitian

Sampel dalam penelitian ini adalah biakan spesimen yang telah

diidentifikasi sebagai bakteri Streptococcus pyogenes yang diambil dari

Laboratorium Mikrobiologi FK USU. Sampel penelitian dibagi menjadi 7

kelompok. Pada tiap kelompok dilakukan pengulangan sebanyak 4 kali sehingga

jumlah total sampel yaitu 28 sampel Streptococcus pyogenes. Setiap pengulangan

memerlukan 1 buah media Mueller Hinton. Dengan demikian, media Mueller

Hinton yang dibutuhkan berjumlah 4 buah.

5.1.3. Hasil Uji Laboratorium

Sifat antibakteri pada air perasan jeruk nipis dapat dilihat dengan adanya

zona hambat di sekitar area disk yang telah berisi air perasan jeruk nipis dalam

berbagai konsentrasi pada media Mueller Hinton yang telah ditumbuhi bakteri

Streptococcus pyogenes. Pengukuran zona hambat dilakukan dengan menggunakan jangka sorong.

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan terhadap aktivitas antibakteri

air perasan jeruk nipis terhadap pertumbuhan Streptococcus pyogenes, didapatkan

(31)

24

Gambar 6. Daya hambat yang ditandai dengan zona bening di sekitar disk

Keterangan:

1. Kontrol positif (levofloxacin)

2. Kontrol negatif (aquabides)

3. Air perasan jeruk nipis konsentrasi 6,25%

4. Air perasan jeruk nipis konsentrasi 12,5%

5. Air perasan jeruk nipis konsentrasi 25%

Tabel 1. Zona hambat air perasan jeruk nipis terhadap pertumbuhan S. pyogenes

Diameter Zona Hambat (mm)

Replikasi K (-) 6,25% 12,5% 25% 50% 100% K (+)

I 0 0 9 11 13 15 35

II 0 0 9 11 13 15 35

III 0 0 9 11 13 15 35

IV 0 0 10 12 14 16 36

Rata-rata 0 0 9,25 11,25 13,25 15,25 35,25

Keterangan:

K (-) : aquabides

(32)

25

Grafik 1. Zona hambat air perasan jeruk nipis terhadap pertumbuhan S. pyogenes

Berdasarkan tabel dan grafik tersebut, diketahui bahwa rata-rata diameter

zona hambat air jeruk nipis terhadap pertumbuhan bakteri S. pyogenes pada

konsentrasi 6,25% adalah 0 mm, konsentrasi 12,5% adalah 9,25 mm, konsentrasi

25% adalah 11,25 mm, konsentrasi 50% adalah 13,25 mm, dan konsentrasi 100%

adalah 15,25 mm. Sedangkan pada kelompok kontrol yang diberi levofloxacin,

rata – rata diameter zona hambat yang terbentuk adalah 35,25 mm.

Zona hambat yang terbentuk berdasarkan tabel tersebut dimulai dari

konsentrasi 12,5% hingga konsentrasi 100%. Sedangkan pada konsentrasi 6,25%

tidak terbentuk zona hambat. Semakin meningkat konsentrasi, maka diameter

zona hambat yang terbentuk semakin luas.

5.1.4. Hasil Analisa Statistik

Untuk mengetahui pengaruh konsentrasi dalam menghambat pertumbuhan

Streptococcus pyogenes secara iv vitro, maka data yang diperoleh dianalisis

dengan menggunakan uji anova satu arah. Uji anova dilakukan untuk

membandingkan data lebih dari 2 kelompok. Uji anova termasuk ke dalam

statistik parametrik. Dengan demikian, syarat yang diperlukan untuk

menggunakan uji anova adalah data berdistribusi normal dan varians data

homogen (Wahyuni,2007).

Konsentrasi air perasan jeruk nipis

Replikasi 1

Replikasi 2

Replikasi 3

(33)

26

Uji normalitas data yang digunakan adalah uji Kolmogorov-Smirnov. Uji ini

bertujuan untuk mengetahui apakah data yang diperoleh terdistribusi normal atau

tidak. Kriteria sebuah data berdistribusi normal adalah apabila didapatkan nilai p

(signifikansi) > α . Berdasarkan uji tersebut, didapatkan nilai p = 0,007 dari data keseluruhan. Dengan nilai p (signifikansi) < α dimana α = 0,05, maka dapat dikatakan bahwa data pada penelitian ini tidak berdistribusi normal.

Selanjutnya, analisis data dilanjutkan dengan uji homogenitas Levene. Uji

ini dilakukan untuk mengetahui data tersebut memiliki varians data yang

homogen atau tidak. Hasil uji didapatkan nilai p (signifikansi) sebesar 0,000.

Dengan nilai p < 0,05 berarti varians data tidak homogen. Hal ini menunjukkan

bahwa analisis data menggunakan anova satu arah tidak dapat dilakukan karena

data tidak berdistribusi normal dan varians data tidak homogen.

Uji alternatif yang dapat digunakan yaitu uji non parametrik dengan

menggunakan uji Kruskal-Wallis. Metode ini penerapannya analog dengan uji

parametrik anova (Wahyuni, 2007). Dari perhitungan Uji Kruskal-Wallis,

didapatkan nilai p (signifikansi) sebesar 0,000. Dengan nilai p < 0,05 maka

varians zona hambat yang terbentuk pada lima konsentrasi yang berbeda memiliki

perbedaan bermakna. Dengan nilai tersebut, maka dilakukan uji selanjutnya, yaitu

uji Post Hoc multiple comparisons dengan metode Mann-Whitney. Uji ini

dilakukan untuk mengetahui kelompok mana yang memiliki perbedaan dan tidak.

Prinsipnya adalah membandingkan media peringkat dari sampel I dan sampel II.

Bila nilai p (signifikansi) < 0,05 maka data tersebut memiliki perbedaan yang

bermakna. Namun, ketika nilai p > 0,05 maka data tersebut tidak memiliki

perbedaan yang bermakna.

Selanjutnya, untuk mengetahui ada atau tidaknya pengaruh konsentrasi air

perasan jeruk nipis dalam menghambat pertumbuhan Streptococcus pyogenes,

dilakukan uji regresi linier. Dengan uji regresi linier, dapat dilihat bagaimana nilai

suatu variabel bebas berhubungan dengan variabel terikat (Wahyuni, 2007). Dari

hasil uji regersi linier nilai signifikan yang didapatkan sebesar 0,000. Oleh karena

(34)

27

terdapat pengaruh antara varabel bebas (air perasan jeruk nipis) terhadap variabel

terikat (diameter zona hambat pertumbuhan Streptococcus pyogenes).

5.2.Pembahasan

Air perasan jeruk nipis (Citrus aurantifolia) diuji aktivitas antibakterinya

terhadap bakteri Streptococcus pyogenes secara in vitro. Pengujian dilakukan

dengan metode difusi disk (cakram). Metode difusi digunakan karena metode ini

merupakan metode mempunyai keuntungan ekonomis dan sederhana (mudah

dibuat). Prosedur yang paling sering digunakan dan dianjurkan oleh WHO (World

Health Organization) dan NCCLS (Nation Committee for Clinical Laboratory

Standards) adalah metode difusi cakram modifikasi Kirby Bauer (Depkes RI,

1999).

Setelah dilakukan penelitian, terdapat hasil pembentukan zona hambat

disekitar disk yang telah berisi air perasan jeruk nipis. Zona hambat kemudian

diukur dengan menggunakan jangka sorong. Hasil yang didapatkan adalah

ditemukannya zona hambat disekitar disk pada konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan

100%. Kontrol negatif dengan aquabides tidak ditemukan zona hambat sedangkan

kontrol positif dengan levofloxacin didapatkan rata-rata diameter zona hambat

35,25 mm.

Pada hasil uji Kruskal-Wallis didapatkan hasil berupa terdapat perbedaan

efek antibakteri air perasan jeruk nipis terhadap pertumbuhan Streptococcus

pyogenes. Selain itu, dilakukan perbandingan antara lima kelompok konsentrasi

air perasan jeruk nipis dengan kontrol positif dan kontrol negatif dengan uji Post

Hoc Multiple Comparisons dengan metode Mann Whitney. Hasilnya didapatkan

pada lima kelompok konsentrasi terdapat perbedaan daya hambat yang signifikan

apabila dibandingkan dengan kontrol positif maupun kontrol negatif. Hal ini

membuktikan bahwa air perasan jeruk nipis memiliki daya antibakteri terhadap

Streptococcus pyogenes.

Hasil penelitian ini sesuai dengan kepustakaan yang mengatakan bahwa

salah satu efek farmakologis yang dimiliki oleh jeruk nipis yaitu sebagai

(35)

28

jeruk nipis dapat digunakan untuk pengobatan hipertensi, batuk, lendir

tenggorokan, demam, panas pada malaria, jerawat, ketombe, dan lain – lain. Daya antibakteri pada perasan jeruk nipis telah terbukti pada berbagai

penelitian. Dari penelitian yang dilakukan oleh Mukhitasari (2012), air perasan

jeruk nipis dapat menghambat pertumbuhan S. dysentriae. Selain itu, berdasarkan

penelitian yang dilakukan oleh Taiwo dkk. (2007), air perasan jeruk nipis (Citrus

aurantifolia) dapat menghambat pertumbuhan bakteri E. Coli, Klebsiella sp., Proteus sp., Pseudomonas sp. Penelitian lainnya yang dilakukan oleh Razak dkk.

(2013), air perasan jeruk nipis memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan

Staphylococcus aureus pada konsentrasi 25% sampai dengan konsentrasi 100%.

Berdasarkan hasil penelitian pada tabel 1, zona hambat yang terbentuk

dimulai pada konsentrasi 12,5% sampai dengan 100%. Rata-rata diameter yang

terbentuk pada konsentrasi 12,5% adalah 9,25 mm. Pada konsentrasi yang lebih

besar, yaitu 25% rata-rata diameter yang terbentuk semakin besar, yatu 11,25 mm.

Peningkatan besar rata-rata diameter zona hambat terjadi sampai konsentrasi

100%. Dari tabel ini dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi konsentrasi air

perasan jeruk nipis maka semakin besar pula diameter zona hambat yang

dihasilkan. Hal ini juga didukung dengan hasil analisis regresi linier yang

menyatakan bahwa ada pengaruh antara variabel bebas (konsentrasi air perasan

jeruk nipis) terhadap variabel terikat (diameter zona hambat pertumbuhan

Streptococcus pyogenes) berupa terbentuknya zona hambat di sekitar disk.

Pengaruh konsentrasi dalam menghambat pertumbuhan bakteri telah

dibuktikan oleh berbagai penelitian. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh

Pradani (2012), air perasan jeruk nipis mempunyai potensi aktivitas antibakteri

terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus. Pada penelitian ini pembentukan

zona hambat pada Staphylococcus aureus mulai terbentuk pada konsentrasi 6,25%

sampai 100%. Rata-rata zona hambat pada konsentrasi 6,25% adalah 0,88 cm,

sedangkan pada konsentrasi 100% zona hambat yang terbentuk semakin luas,

yaitu 1,89 cm. Dengan demikian, pada penelitian Pradani (2012) dapat

(36)

29

semakin besar daya antibakterinya dan semakin besar pula diameter zona

hambatnya.

Pada penelitian ini, digunakan kontrol positif dan kontrol negatif. Fungsi

kontrol positif adalah sebagai pembanding apakah zat uji (air perasan jeruk nipis)

sudah tepat dan dapat menghasilkan perubahan positif pada variabel terkontrol

(diameter zona hambat). Dari kelompok kontrol negatif (aquabides) dapat

dihasilkan suatu baseline sehingga perubahan pada variabel tergantung dapat

terlihat. Dengan adanya kelompok kontrol, maka efek bias pada pembacaan hasil

akan semakin minimal.

Secara in vitro, diameter zona hambat yang terbentuk setelah pemberian air

perasan jeruk nipis lebih kecil bila dibandingkan dengan kontrol positif

(levofloxacin). Hal ini dapat diakibatkan oleh jumlah kandungan bahan anti

bakteri dari perasan jeruk nipis tidak sebanding dengan jumlah kandungan bahan

antibakteri pada levofloxacin. Selain itu, hambatan oleh mekanisme resistensi

Streptococcus pyogenes terhadap zat anti bakteri juga berpengaruh pada diameter

zona hambat yang tebentuk pada pemberian air perasan jeruk nipis.

(37)

30

BAB 6

KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan

Berdasarkan hasil analisis pada penelitian ini, maka dapat diambil

kesimpulan yaitu air perasan jeruk nipis memiliki daya antibakteri dalam

menghambat pertumbuhan Streptococcus pyogenes secara in vitro. Semakin tinggi

konsentrasi air perasan jeruk nipis maka daya antibakteri dalam menghambat

pertumbuhan Streptococcus pyogenes semakin baik.

6.2. Saran

Setelah dilakukan penelitian, dapat disampaikan beberapa saran sebagai

berikut:

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut seperti uji in vivo dan uji lainnya agar

air perasan jeruk nipis dapat diketahui pengaruhnya dari berbagai aspek

pengujian.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh air perasan jeruk

(38)

4

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1.Jeruk Nipis 2.1.1. Taksonomi

Secara taksonomi, tanaman Citrus aurantifolia termasuk dalam klasifikasi

sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Dicotyledonae

Ordo : Rutales

Famili : Rutaceae

Genus : Citrus

Spesies : Citrus aurantifolia

Jeruk nipis memiliki beberapa nama yang berbeda, antara lain jeruk pecel

(Jawa), jeruk durga (Madura), jeruk alit, kaputungan, dan lemo (Bali),

mudutelong (Flores), lemo ape, lemo kapasa (Bugis), usinepese (Ambon), lemau

nepis (Kalimantan), limau nipis (Malaysia), summa nao atau manao (Thailand),

acid lime (Inggris), limmece, limah (Arab), zhi qiao (Cina) (Hariana, 2006).

2.1.2. Asal Usul

Asal usul dan penyebaran geografis jeruk nipis diduga berasal dari India

Utara yang berbatasan dengan Myanmar, atau di Malaysia bagian utara. Namun

menurut Swingle, jeruk nipis berasal dari kepulauan di Asia Tenggara.

Jeruk nipis tiba di Amerika Tengah dan Amerika Selatan (Kolumbia,

Ekuador) melalui Kepulauan Pasifik. Ia dibawa bangsa Polynesia yang berlayar

sampai ke pantai barat Amerika.

Semua jeruk nipis yang berkembang di Eropa dibawa orang dari India ke

Persia, Palestina, Mesir, dan Eropa oleh bangsa Arab. Saatnya bersamaan dengan

jeruk lemon. Hal ini diutarakan dalam pustaka bangsa Arab pada abad ke-13

(39)

5

2.1.3. Jeruk Nipis Indonesia

Jeruk nipis yang dibudidayakan di Indonesia tidak jelas varietasnya. Namun

di Instalasi Penelitian dan Pengkajian Teknologi Pertanian Tlekung, Malang, telah

dikoleksi kultivar jeruk nipis komersial yang disebut jeruk nipis wajak. Bibit yang

dikembangkan adalah bibit jeruk bebas penyakit.

Ciri-ciri karakter jeruk nipis lokal yaitu: pohonnya tumbuh sebagai pohon

kecil bercabang lebat, tetapi tak beraturan. Tajuknya selalu hijau. Tinggi pohon

berkisar antara 1,5 sampai 5 m. Ranting-rantinngnya berduri pendek, kaku, dan

tajam. Daunnya tunggal, selang-seling, berbentuk jorong sampai bundar, dan

berukuran (4-8) cm x (2-5) cm. Pada bagian pinggir daun bergerigi kecil dan

tangkai daunnya bersayap sempit.

Bunga jeruk nipis berbentuk tandan pendek, berada di ketiak daun pada

pucuk yang baru merekah. Banyaknya bunga per tandan sekitar 1-10 kuntum.

Bunga putih terlihat sewaktu masih kuncup. Daun kelopaknya berbentuk cawan,

dan bercuping sekitar 8-12 cm. Benang sarinya berjumlah antara 20 sampai 25

utas. Tangkai putiknya mudah dibedakan dengan bakal buah.

Daging buah jeruk nipis bersegmen. Segmen buahnya berdaging hijau

kekuning-kuningan dan mengandung banyak sari buah yang beraroma harum. Sari

buahnya asam sekali. Sari buahnya yang sangat asam berisi asam sitrat berkadar

7-8% dari berat daging buah. Ekstrak sari buahnya sekitar 41% dari bobot buah

yang sudah masak.

Produktivitas jeruk nipis sangat tergantung dari umur, kondisi tanaman,

keadaan iklim, kesuburan tanah, dan pemeliharaan tanaman. Di Indonesia jeruk

nipis bisa berbunga dan berbuah secara serentak, dan bisa berlangsung sepanjang

tahun. Untuk berkembang, buah jeruk nipis memerlukan waktu 5-6 bulan, sejak

muncul bunga sampai buah siap dipanen. Buah masak pohon akan berubah warna:

dari hijau menjadi kuning. Setelah mencapai tahap masak penuh, jeruk akan jatuh

ke tanah.

Jeruk nipis dipasarkan dalam bentuk buah segar. Buah dipetik pada saat

umurnya sudah cukup tua, saat warna kulitnya masih hijau, tetapi kondisinya

(40)

6

Buah yang masih hijau menandakan belum masak penuh. Buah yang djual

di pasar, umumnya masih berwarna hijau. Buah seperti ini cocok untuk

pengiriman jarak jauh atau dipasarkan di daerah lain, sebab yang hijau itu akan

berubah menjadi kuning setelah terperam selama dalam proses pengiriman. Ketika

sampai di tangan konsumen, buah sudah masak penuh (Sarwono, 2001).

Gambar 1. Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia)

(Sarwono, 2001)

Gambar 2. Pohon Jeruk Nipis

(Sarwono, 2001)

2.1.4. Kandungan dan Manfaat Jeruk Nipis

Menurut hasil analisis di Thailand, per 100 gram bagian buah yang dapat

dimakan, komposisinya sebagai berikut: 91 gram kandungan air, 0,5 gram protein,

2,4 gram lemak, 5,9 gram karbohidrat, 0,3 gram serat, 17 Si vitamin A, 46 mg

(41)

7

Beberapa bahan kimia yang terkandung dalam jeruk nipis diantaranya asam

sitrat sebanyak 7-7,6%, damar lemak, mineral, minyak terbang, sitral limonen,

fellandren, lemon kamfer, geranil asetat, cadinen, dan linalin asetat. Selain itu,

jeruk nipis juga mengandung vitamin C sebanyak 27 mg/100 g jeruk, Ca sebanyak

40 mg/100 g jeruk, dan P sebanyak 22 mg (Hariana, 2006).

Berdasarkan Daftar Komposisi Baban Makanan, yang dikeluarkan Lembaga

Makanan Rakyat Departemen Kesehatan, setiap 100 gram jeruk nipis

mengandung 86 gram air, 0,8 gram protein, 0,3 gram lemak, 12,3 gram

karbohidrat, 40 mg kalsium, 22 gram fosfor, 0,6 mg zat besi, 0,04 mg vitamin B1,

27 mg vitamin C, dan 37 kalori energi. Bagian yang dapat dimakan sekitar 76%

dari bobot keseluruhan (Sarwono, 2001).

Jeruk nipis memiliki berbagai macam manfaat. Daun jeruk dan bunga jeruk

nipis dapat digunakan untuk pengobatan hipertensi, batuk, lendir tenggorokan,

demam, panas pada malaria, jerawat, ketombe, dan lain-lain. Air buahnya

digunakan sebagai penyedap masakan, minuman penyegar, bahan pembuat asam

sitrat, membersihkan karat pada logam atau kulit yang kotor. Selain itu, dapat

digunakan sebagai obat tradisional maupun campuran jamu (Dalimarta, 2000).

Efek farmakologis yang dimiliki oleh jeruk nipis di antaranya antidemam,

mengurangi batuk, antiinflamasi, dan antibakteri (Hariana, 2006). Manfaat lain

yang dimiliki oleh jeruk nipis adalah sebagai antifungi. Berdasarkan penelitian

Anggrahini (2014), ekstrak jeruk nipis berpengaruh dalam menghambat

pertumbuhan Candida albicans dimana semakin besar konsentrasi, maka diameter

zona hambat yang terbentuk juga semakin besar.

2.2.Streptococcus pyogenes

Famili : Streptococcaceae

Genus : Streptococcus

Spesies : Streptococcus pyogenes

Sebagian besar streptokokus yang mempunyai antigen grup A adalah S.

pyogenes. S. pyogenes merupakan patogen utama pada manusia yang

(42)

8

pascainfeksi-streptokokus. S. pyogenes secara khas menghasilkan zona-zona hemolisis β yang besar (diameter 1 cm) di sekitar koloni yang berdiameter lebih dari 0,5 mm. S. pyogenes bersifat PYR-positif (menghidrolisis

I-pyrrolidonyl-2-naphthylamide) dan biasanya sensitif terhadap basitrasin (Brooks et al., 2012).

Gambar 3. Streptokokus yang Tersusun dalam Bentuk Rantai

(Sturm, 2011)

Gambar 4. Streptococcus pyogenes yang Dikelilingi oleh Zona Hemolisis β

(Buxton, 2010)

2.2.1. Morfologi dan Identifikasi

1. Organisme topikal

Masing-masing kokus berbentuk bulat atau ovoid dan tersusun menyerupai

rantai. Kokus membelah diri pada bidang yang tegak lurus terhadap sumbu

panjang rantai. Anggota kokus yang tersusun dalam rantai sering memiliki

gambaran diplokokus yang nyata dan sesekali tidak menyerupai batang. Panjang

(43)

9

gram positif, tetapi seiring bertambahnya usia kultur dan kematian bakteri,

streptokokus kehilangan sifat gram positifnya dan dapat tampak sebagai

gram-negatif; untuk sebagian streptokokus, hal ini dapat terjadi setelah inkubasi selama

satu malam (Brooks et al., 2012).

2. Kultur

Sebagian besar streptokokus tumbuh pada medium solid sebagai koloni

doskoid, biasanya berdiameter 1 – 2 mm. S. pyogenes merupakan tipe hemolitik β. Hemolisis tipe β, membentuk zona bening di sekeliling koloninya, tidak ada sel darah merah yang masih utuh, zona tidak bertambah lebar setelah disimpan dalam

peti es (Brooks et al., 2012; Warsa, 1994).

3. Karakteristik pertumbuhan

Pada perbenihan biasa, pertumbuhannya kurang subur jika kedalamnya

tidak ditambahkan darah atau serum. Kuman ini tumbuh baik pada pH 7,4-7,6,

suhu optimum untuk pertumbuhan adalah 37°C, pertumbuhannya cepat berkurang

pada suhu 40°C. Streptococcus hemolyticus meragi glukosa dengan membentuk

asam laktat yang dapat menghambat pertumbuhannya. Tumbuhnya akan subur

bila diberi glukosa berlebih dan diberikan bahan yang dapat menetralkan asam

laktat yang terbentuk (Warsa, 1994).

Kebanyakan streptokokus merupakan organisme anaerob fakultatif, serta

tumbuh pada kondisi aerobik dan anaerobik. Streptococcus pyogenes dan

Streptococcus faecalis bersifat anaerob fakultatif, sedangkan Peptostreptococcus

bersifat anaerob mutlak (Tim Mikrobiologi FK Unibraw, 2003).

Streptococcus terdiri dari kokus yang berdiameter 0,5-1 µm. Dalam bentuk

rantai yang khas, kokus agak memanjang pada arah sumbu rantai. Tidak

membentuk spora, kecuali beberapa strain yang hidupnya saprofilik. Geraknya

negatif (Warsa, 1994).

4. Variasi

Varian pada galur streptokokus yang sama dapat memperlihatkan bentuk

koloni yang berbeda. Hal ini khususnya terdapat pada galur S. pyogenes yang

membentuk koloni yang mengkilap ataupun buram. Koloni yang tampak buram,

(44)

10

virulen. S. pyogenes pada koloni yang mengkilap cenderung menghasilkan sedikit

protein M dan seringkali tidak virulen (Brooks et al., 2012).

2.2.2. Struktur Antigen

1. Protein M

Substansi ini merupakan faktor virulensi pada S. pyogenes grup A, kerjanya

menghambat fagositosis. Terutama dihasilkan oleh kuman dengan koloni tipe

mukoid. Pembentukannya kurang jika kuman telah mengalami penanaman

berulang-ulang dan akan pulih kembali jika kuman disuntikkan pada binatang

percobaan berulang kali. Protein ini dapat ditemukan dalam ekstrak Streptococcus

grup A yang dibuat dengan asam hidrokhlorida panas (Warsa, 1994).

2. Substansi T

Antigen ini tidak ada hubungannya dengan virulensi kuman. Rusak pada

ekstraksi dengan asam atau dengan pemanasan. Atigen ini diperoleh dari kuman

melalui pencernaan proteolitik yang dengan cepat menghancurkan protein M

(Brooks et al., 2012).

3. Nukleoprotein

Ekstraksi Streptokokus dengan basa lemah, menghasilkan suatu campuran

yang terdiri dari protein dan substansi P yang mungkin merupakan bagian dari

badan sel kuman (Warsa, 1994).

2.2.3. Toksin dan Enzim

1. Streptokinase

Enzim ini juga disebut fibrinolisis, kerjanya merubah plasminogen dalam

serum menjadi plasmin, yaitu suatu enzim proteolitik yang menghancurkan fibrin

dan protein lainnya. Proses pencernaan ini dapat dihambat oleh inhibitor

nonspesifik dalam serum dan oleh antibodi spesifik, antistreptokinase.

Streptokinase dimiliki oleh Streptokokus grup A, G, dan C (Brooks et al., 2012).

2. Streptodornase

Streptokokus grup A juga dapat memecah DNA. Bila enzim ini belum

masuk ke dalam membran plasma sel hidup, sifatnya masih inaktif. Berperan

(45)

11

disebabkan oleh pecahnya PMN. Streptokinase dan streptodornase bekerja

sebagai enzimatic debridement (Tim Mikrobiologi FK Unibraw, 2003).

3. Hialuronidase

Enzim ini memecah asam hialuronat yang merupakan komponen penting

dari bahan dasar jaringan ikat. Hialuronidase membantu dalam penyebaran

kuman. Enzim yang telah dimurnikan dipergunakan dalam pengobatan, yaitu

membantu dalam penyebaran dan penyerapan obat yang disuntikkan ke dalam

jaringan tubuh (Warsa, 1994).

Selain itu, enzim ini bersifat antigenik dan bersifat spesifik untuk tiap

sumber bakteri atau sumber jaringan. Setelah infeksi oleh organisme penghasil

hialuronidase, antibodi spesifik akan ditemukan dalam serum (Brooks et al.,

2012).

4. Eksotoksin pirogenik (Toksik eritogenik)

S. pyogenes menghasilkan eksotoksin A yang memiliki fage lisogenik.

Eksotoksin pirogenik bekerja sebagai superantigen yang memicu sel T dengan

cara berikatan dengan kompleks histokompabilitas mayor kelas II di daerah Vβ

pada reseptor sel T. Sel T yang teraktivasi melepaskan sitokin yang menyebabkan

syok dan cedera jaringan (Brooks et al., 2012).

5. Hemolisin

In vitro Streptokokus dapat menyebabkan terjadinya hemolisis pada sel

darah merah dalam berbagai taraf. Jika penghancuran sel darah merah terjadi

secara lengkap dengan disertai pelepasan hemoglobin, maka disebut beta

hemolisis. Jika penghancuran sel darah merah tidak terjadi secara lengkap dengan

disertai pembentukan pigmen hijau, maka disebut alfa hemolisis. Gamma

hemolisis kadang-kadang dipakai untuk menunjukkan kuman yang nonhemolitik.

Streptococcus grup A beta-haemolyticus membentuk 2 macam hemolisin, yaitu

sreptolisin-O dan Strepptolisin-S. Streptolisin-O aktif dalam suasana anaerob dan

melisiskan sel darah merah. Sedangkan streptolisin-S menyebabkan terbentuknya

zona bening di sekeliling koloni kuman yang ditanam pada lempeng agar darah

(46)

12

2.3.Penyakit Akibat Streptococcus pyogenes 2.3.1 Penyakit Akibat Invasi S. pyogenes

Port d’entre sangat memengaruhi gambaran klinik. Pada setiap kasus dapat

terjadi infeksi yang cepat meluas secara difus ke jaringan sekitarnya dan saluran

getah bening, tetapi peradangan setempatnya sendiri hanya terjadi secara ringan.

Dari saluran getah bening infeksi cepat meluas ke dalam peredaran darah,

sehingga terjadi bakteremia.

1. Erisipelas

Jika port d’entre-nya kulit atau selaput lendir dapat terjadi erisipelas -suatu selulitis superfisialis dengan batas lesi yang tegas, edematous, berwarna merah

terang dan sangat nyeri- disertai pembengkakan edema masif yang keras dan tepi

infeksi yang cepat meluas (Warsa, 1994).

2. Selulitis

Selulitis adalah suatu infeksi akut pada kulit dan jaringan subkutan yang

menyebar dengan cepat. Selulitis terjadi akibat infeksi yang berkaitan dengan luka

bakar, insisi bedah, trauma ringan, ataupun luka lainnya (Brooks et al., 2012).

3. Sepsis puerpuralis

Sepsis puerpuralis terjadi pada masa puerpereum. Jalan masuk kuman

streptokokus adalah uterus. Penyakit ini disertai dengan septikemia yang dimulai

dari luka yang terinfeksi (endometritis) (Tim Mikrobiologi FK Unibraw, 2003).

4. Sepsis

Sepsis terjadi karena luka bekas operasi atau karena trauma, terkena infeksi

oleh kuman Streptokokus. Ada yang menyebut penyakit ini sebagai surgical

scarlet fever. Bakteremia S.pyogenes juga dapat terjadi setelah infeksi kulit,

misalnya selulitis, dan yang lebih jarang, faringitis. (Warsa, 1994; Brooks et al.,

2012).

2.3.2 Penyakit Akibat Infeksi Lokal S. pyogenes

1. Nyeri tenggorok akibat streptokokus

Nyeri tenggorok streptokokus merupakan bentuk yang paling sering dari

infeksi streptokokus hemolitik. S. pyogenes melekat ke epitel faring. Pada bayi

(47)

13

sedikit demam; dan infeksinya cenderung untuk meluas ke telinga tengah,

prosesus mastoideus dan selaput otak. Kelenjar getah bening cervical biasanya

membesar. Penyakitnya dapat berlangsung berminggu-minggu. Pada anak-anak

yang lebih besar dan pada orang dewasa, penyakitnya berlangsung lebih akut

dengan nasofaringitis dan tonsilitis yang hebat, selaput lendir hiperemis dan

membegkak dengan eksudat yang purulen. Kelenjar getah bening cervical

membesar dan nyeri, biasanya disertai demam tinggi. Dua puluh persen dari

infeksi ini tidak menimbulkan gejala (asimptomatik) (Tim Mikrobiologi FK

Unibraw, 2003; Brooks et al., 2012).

2. Impetigo

Pada impetigo lokalisasi nyeri sangat superfisial, dengan pembentukan

vesicopustula di bawah stratum korneum. Bagian kulit yang mengelupas diliputi

oleh crusta yang berwarna kuning. Penyakit ini sangat menular pada anak-anak

dan biasanya disebabkan oleh Streptokokus dan bermacam-macam Stafilokokus

(Warsa, 1994).

2.3.3 Penyakit Paska Infeksi Streptokokus

Setelah suatu infeksi S. pyogenes terutama radang tenggorokan dapat

disusul suatu masa laten selama 1 – 4 minggu, kemudian dapat timbul nefritis atau

demam rheuma. Adanya masa laten ini menunjukkan bahwa penyakit yang timbul

setelah infeksi Streptokokus bukan merupakan akibat langsung dari penyebaran

bakteri, melainkan merupakan reaksi hipersensitif daripada organ yang terkena

terhadap zat anti Streptokokus (Brooks et al., 2012).

Berikut ini adalah penyakit paska infeksi streptokokus:

1. Glomerulonefritis akut

Penyakit ini dapat timbul 1 – 4 minggu setelah infeksi kulit S. pyogenes.

Beberapa galur yang nyata bersifat nefritogenik, terutama dari tipe M 2, 42, 49,

56, 57, dan 60. Glomerulonefritis dapat dipicu oleh kompleks antigen-antibodi

pada membran basal glomerulus (Brooks et al., 2012).

2. Demam rematik

Menurut Taranta dan Markowitz (1981) dan Stollerman (1990) dalam

(48)

14

semua umur, tetapi 90% dari serangan pertama terdapat pada umur 5-15 tahun.

Pada umur dibawah 5 tahun, jarang terjadi.

Demam rematik atau rheumatic fever merupakan gejala sisa (sequale) yang

terberat dari infeksi Streptococcus hemolyticus. Timbul kerusakan pada otot dan

katup jantung. Kemungkinan terjadi reaksi silang antara otot jantung dengan

antibodi terhadap streptokokus (Tim Mikrobiologi FK Unibraw, 2003).

Timbulnya demam rematik biasanya didahului oleh infeksi S. pyogenes 1 –

4 minggu sebelumnya. Infeksinya mungkin hanya ringan tanpa memberikan

gejala. Namun, pada umumnya, pasien dengan nyeri tenggorok streptokokus yang

berat memiliki resiko lebih besar untuk berkembang menjadi demam rematik

(Brooks et al., 2012).

2.4.Pengaruh Jeruk Nipis Terhadap Bakteri

Minyak atsiri dan flavonoid merupakan kandungan pada jeruk nipis yang

memiliki efek hambatan terhadap pertumbuhan bakteri. Daya antibakteri minyak

atsiri jeruk nipis yang berasal dari senyawa fenol dan turunannya dapat

mendenaturasi protein sel bakteri. Salah satu senyawa turunan itu adalah klavikol

yang memiliki daya bakterisida lima kali lebih kuat dibandingkan fenol. Fenol

merupakan senyawa toksik, mengakibatkan struktur tiga dimensi protein

terganggu dan terbuka menjadi struktur acak tanpa adanya kerusakan pada

struktur kerangka kovalen. Hal ini menyebabkan bakteri terdenaturasi. Fenol dan

beberapa senyawa fenolik mempunyai kegunaan sebagai antiseptik, desinfektan,

atau bahan pengawet (Brooks et al., 2005).

Senyawa flavonoid bersifat antioksidan, antidiabetik, antikanker, antiseptik,

dan antiinflamasi. Sifat antibakteri flavonoid secara umum disebabkan senyawa

ini mempunyai kemampuan mengikat protein ekstraseluler dan protein integral

yang bergabung dinding sel bakteri (Murphy, 1999). Akibat mekanisme tersebut,

permeabilitas dinding sel pecah karena tidak mampu menahan tekanan sitoplasma

(Lasmayanty, 2007). Kandungan flavonoid dapat menekan sitokin, yakni

penyebab peradangan dalam saluran pencernaan serta bertindak sebagai

antioksidan dan antikarsinogenik dalam lambung (Utami dan Puspaningtyas,

(49)

15

Menurut Poedjiadi (1994) dalam Ambarwati (2012), selain mengandung

minyak atsiri dan flavonoid, jeruk nipis juga mempunyai kandungan asam sebesar

7-7,6%. Asam dapat mendenaturasi protein sel bakteri dengan cara mengacaukan

jembatan garam dengan adanya muatan ionik. Denaturasi ditandai dengan adanya

kekeruhan yang meningkat dan timbulnya gumpalan.

Pengaruh jeruk nipis sebagai antibakteri telah dibuktikan oleh banyak

penelitian, terutama terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Hasil penelitian

menunjukkan bahwa minyak atsiri daun jeruk nipis mempunyai aktivitas

hambatan terhadap pertumbuhan S. aureus pada kadar 20%, 40%, dan 80% serta

Escherichia coli pada kadar 40% dan 80% (Dalimartha, 2000). Penelitian

terhadap S. aureus juga dilakukan oleh Pradani (2012) dan Razak dkk. (2013).

Pada penelitian Pradani (2012), terbentuk zona hambat dimulai pada konsentrasi

6,25% hingga konsentrasi 100%. Pada penelitian Razak dkk. (2013), air perasan

jeruk nipis memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dengan

berbagai konsentrasi yaitu 25%, 50%, 75%, dan 100% dan terdapat pengaruh

lama kontak terhadap pertumbuhan bakteri. Pada penelitian tersebut dinyatakan

bahwa semakin tinggi konsentrasi air perasan jeruk nipis, maka daya hambatnya

semakin baik.

Selain Staphylococcus aureus, air perasan jeruk nipis juga berpengaruh

terhadap bakteri-bakteri lainnya. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh

Putra (2011), dari rata-rata zona hambat ekstrak etanol buah jeruk nipis terhadap

Streptococcus pneumonia, Pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium diphtheriae, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus adalah resisten

sampai intermediate. Pemberian ekstrak jeruk nipis pada S. dysenteriae yang

diteliti oleh Mukhitasari (2012) menunjukkan zona hambat pertumbuhan S.

dysenteriae mulai terbentuk pada konsentrasi 6,25% hingga 100%. Hal ini

menunjukkan bahwa perasan jeruk nipis mempunyai aktivitas antibakteri terhadap

S. dysenteriae. Penelitian lain yang dilakukan oleh Ambarwati (2010), pemberian

ekstrak jeruk nipis 65% dapat menghambat pembentukan plak pada gigi.

Pemberian larutan ekstrak jeruk nipis diberikan per oral pada subjek dengan

(50)

1

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1.Latar Belakang

Di Indonesia, jeruk nipis (Citrus aurantifolia) yang juga dikenal dengan

sinonim Limonia aurantifolia, Citrus javanica, Citrus notissima merupakan

tanaman yang tidak sulit untuk ditemukan karena penyebarannya yang sangat

luas. Penyebaran yang sangat luas ini disebabkan pohonnya dapat tumbuh hampir

di semua tipe tanah. Ia dapat tumbuh di tanah yang miskin hara dan cukup toleran

terhadap tanah berat (liat) asalkan drainasenya baik dan terhindar dari genangan

air. Selain itu, secara ekologis jeruk nipis sangat cocok tumbuh di dataran rendah

tropik dan masih dapat hidup sampai pada ketinggian 1.000 m dpl atau lebih

(Sarwono, 2001).

Buah jeruk nipis memiliki berbagai manfaat. Menurut Dalimartha (2000),

air buahnya digunakan sebagai penyedap makanan, bahan pembuat asam sitrat,

membersihkan karat pada logam atau kulit yang kotor. Selain itu, jeruk nipis juga

banyak digunakan sebagai obat-obatan melalui air perasannya. Untuk obat,

menurut Hariana (2006), jeruk nipis memiliki efek farmakologis sebagai

antidemam, mengurangi batuk, antiinflamasi, dan anti-bakteri. Sebagai

antibakteri, air jeruk nipis dapat digunakan sebagai obat kumur pada penderita

sakit tenggorokan atau abses tenggorokan.

Berdasarkan CDC (2013), Streptococcus pyogenes merupakan penyebab

utama dari infeksi saluran nafas bagian atas contohnya radang tenggorokan.

Terdapat 1 sampai 2,6 juta kasus radang tenggorokan terjadi di USA per tahun.

Bakteri ini juga merupakan penyebab utama dari necrotizing fascitis, penyakit

invasif yang dapat berakibat fatal pada 25% - 35% kasus. Manusia termasuk salah

satu makhluk yang paling rentan terhadap infeksi bakteri ini dan tidak ada alat

tubuh atau jaringan dalam tubuhnya yang betul-betul kebal. Kuman ini juga dapat

menyebabkan penyakit epidemik antara lain scarlet fever, erisipelas, radang

tenggorokan, rheumatic fever, dan bermacam-macam penyakit lainnya (Warsa,

(51)

2

Menurut Jacobs (2005) seperti dikutip W, Mardiastuti H. et al. (2007),

penisilin sebelumnya masih merupakan drug of choice dari infeksi Streptococcus

pyogenes. Namun, akhir-akhir ini telah diidentifikasi galur Streptococcus pyogenes yang resisten terhadap penisilin. Berdasarkan penelitian di Taiwan pada

tahun 2001 dijumpai resistensi pada bakteri ini terhadap makrolid sebesar 78%.

Akibat timbulnya resistensi dari antibiotik, maka saat ini telah banyak

dilakukan pengujian efek tanaman obat sebagai antibakteri, salah satunya jeruk

nipis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa minyak atsiri daun jeruk nipis

mempunyai aktivitas hambatan terhadap pertumbuhan S. aureus pada kadar 20%,

40%, dan 80% serta Escherichia coli pada kadar 40% dan 80% (Dalimartha,

2000). Selain itu, berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Putra (2011), dari

rata-rata zona hambat ekstrak etanol buah jeruk nipis terhadap Streptococcus

pneumonia, Pseudomonas aeruginosa, Corynebacterium diphtheriae, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus adalah resisten sampai intermediate.

Penelitian lain yang dilakukan oleh Ambarwati (2012), pemberian ekstrak jeruk

nipis 65% dapat menghambat pembentukan plak pada gigi. Pemberian larutan

ekstrak jeruk nipis tersebut diberikan per oral pada subjek dengan rentang usia 12 – 18 tahun.

Sejauh ini belum ditemukan literatur yang melaporkan tentang aktivitas

antibakteri dari air perasan jeruk nipis terhadap bakteri Streptococcus pyogenes,

maka peneliti ingin menguji pengaruh konsentrasi air perasan jeruk nipis (Citrus

aurantifolia) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes

secara in vitro.

2.1. Rumusan Masalah

Bagaimanakah pengaruh konsentrasi air perasan jeruk nipis (Citrus

(52)

3

3.1. Tujuan Penelitian

Mengetahui pengaruh konsentrasi air perasan jeruk nipis (Citrus

secara in vitro.

4.1. Manfaat Penelitian

Manfaat penelitian ini adalah sebagai berikut:

1. Bagi Masyarakat Umum

Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai efektivitas air

perasan jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dalam membunuh bakteri

Streptococcus pyogenes.

2. Di Bidang Akademik/ Ilmiah

Dapat memperkokoh landasan teoritis ilmu kedokteran terutama di bidang

mikrobiologi, khususnya mengenai pengaruh air perasan jeruk nipis (Citrus

secara in vitro.

3. Bagi Peneliti

Peneliti dapat mengetahui bagaimana cara meneliti pengaruh konsentrasi air

perasan jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dalam menghambat pertumbuhan

(53)

ii

ABSTRAK

Pendahuluan Jeruk nipis (Citrus aurantifolia) merupakan tanaman yang

memiliki berbagai macam manfaat. Salah satunya sebagai antibakteri. Perbedaan konsentrasi air perasan jeruk nipis diduga berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcu pyogenes secara in vitro.

Metode Tujuan penelitian ini adalah untuk melihat pengaruh konsentrasi air

perasan jeruk nipis (Citrus aurantifolia) dalam menghambat pertumbuhan bakteri

Streptococcus pyogenes secara in vitro. Penelitian ini dilakukan dengan metode

eksperimental dengan desain Posttest Only Control Group Design. Sampel penelitian berasal dari biakan specimen klinis yang telah diidentifikasi sebagai bakteri Streptococcus pyogenes di Laboratorium Mikrobiologi FK USU dengan empat kali pengulangan yang diambil dengan menggunakan rumus Federer. Data hasil penelitian diolah dengan uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji Regresi Linier.

Hasil Berdasarkan uji Kruskal-Wallis didapati nilai p sebesar 0,000 (CI 95%). Hal

ini menunjukkan bahwa varians zona hambat yang terbentuk pada lima konsentrasi yang berbeda memiliki perbedaan yang bermakna. Sedangkan pada uji Regresi Liner didapatkan nilai p sebesar ,000 (CI 95%) yang membuktikan bahwa terdapat pengaruh konsentrasi dalam menghambat pertumbuhan bakteri

Streptococcus pyogenes secara in vitro.

Diskusi Dari hasil analisis data tersebut dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi

konsentrasi air perasan jeruk nipis, maka daya hambat terhadap bakteri

Streptococcus pyogenes secara in vitro semakin besar. Untuk ke depannya

diharapkan akan ada penelitian-penelitian lain mengenai pengaruh konsentrasi air jeruk nipis terhadap bakteri lainnya.

(54)

iii

ABSTRACT

Introduction Lime (Citrus aurantifolia) is a plant which has many benefits. One

of them is as an antibacteria. The differences of concentration of lime fruit squeeze was assumed to take impact in inhibit the growth of the bacteria Streptococcus pyogenes in vitro condition.

Methods The purpose of this research was to determine the effect of concentration

of lime fruit (Citrus aurantifolia) squeeze towards the growth of the bacteria Streptococcus pyogenes in vitro condition. This research was conducted with experimental methods with Post Only Control Group Design.

relationship between the history of asthma and atopic dermatitis for the event of allergic rhinitis by the 13-14 years old school students in Pasaman regency.. The population in this research were all 13-14 years old school students in Pasaman regency. Samples were 190 students, taken by cluster sampling method. Research data was analyzed with Chi Square hypothesis test.

Results Based on the Chi Square test, the p value is 0,000 (CI 95%) for both

history of asthma and atopic dermatitis. It shows that there is a relationship between the history of asthma and atopic dermatitis for the event of allergic rhinitis. The prevalence ratio for history of asthma and atopic dermatitis are 2,079 and 2,381, respectively, so it can be assumed that the history of asthma and atopic dermatitis are the risk factors for allergic rhinitis.

Discussion The conclusion of this research is there is a relationship between the

history of asthma and atopic dermatitis and the event of allergic rhinitis by the 13-14 years old school students in Pasaman regency. The limitations of this research are: a limited amount of time in doing this research, some weaknesses of the design of the research and sampling method, the data collection was only based on the questionnaire, and also the competency of school students in answering the questions from the questionnaire. For the future, hoped that there will another researches about the history of asthma, atopic dermatitis and other factors as the risk factors for allergic rhinitis.

(55)

PENGARUH KONSENTRASI AIR PERASAN JERUK NIPIS (Citrus aurantifolia) DALAM MENGHAMBAT PERTUMBUHAN

BAKTERI Streptococcus pyogenes SECARA in vitro

Oleh:

SEPTAMI PUTRI HAJATI 120100328