amfetamin

IDENTIFIKASI AMFETAMIN SECARA KUANTITATIF DAN

KUALITATIF

Disusun oleh: Kelompok : 5 (lima)

Nama : Agnes Felicia L Elsa Angelina Lidwina Septie Ch Melianti Natalia indri Thomas F Wurry Priliandry Prodi :D IV Analis Kesehatan Semester : 6 (enam)

Tingkat : 3 (tiga)

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN PERDHAKI CHARITAS PALEMBANG

Identifikasi ATS Secara Kualitatif Dan Kuantitatif

Upaya untuk menentukan identitas obat, pendekatan analitis harus memerlukan penentuan setidaknya menggunakan dua parameter. Hal ini diakui bahwa pemilihan parameter dalam kasus tertentu akan mempertimbangkan obat yang terlibat dan sumber daya laboratorium yang tersedia untuk analis.

A. Tes Persumtif

Tes presumtif prosedurnya berupa penyaringan terdiri dari dua atau tiga tes independen. Tes untuk memberikan indikasi ada atau tidak adanya obat dalam sampel uji. Tes persumtif ini baik, karena semua teknik analisis, memaksimalkan kemungkinan hasil yang benar, dan meminimalkan kemungkinan positif palsu. Namun, tes presumtif tidak dianggap cukup untuk identifikasi obat dan hasil harus dikonfirmasi dengan tes laboratorium tambahan.

Tes presumtif lebih sering digunakan sebagai uji lapangan, meskipun juga dilakukan di laboratorium sebagai prosedur penyaringan pertama. Untuk ATS tes skrining, tes warna, atau tes spot, biasanya digunakan, meskipun immunoassay tes dan sejumlah teknik instrumental cepat dan portabel juga tersedia. Metode skrining Instrumental seperti spektrofotometer mobilitas ion (ion-scan), spektrometer massa portabel, FTIR atau Raman spektrometer, baru-baru ini telah mendapatkan popularitas. Banyak alat tes komersial untuk skrining ATS yang tersedia, tetapi harus diuji spesifisitas dan sensitivitas.

1. Tes Warna

Tes Warna merupakan tes kimia sederhana dan tercepat dapat diterapkan pada sampel. Kebanyakan tes warna sangat sensitif, preman, hanya beberapa menit yang diperlukan untuk menyelesaikan tes yang sukses, dan Hasil terbaik diperoleh dengan jumlah sampel terkecil, sering kurang dari satu mg.

Karena sampel dapat bervariasi dalam kemurnian (konsentrasi ATS), dan zat-zat yang tidak terkait mungkin ada, warna yang ditunjukkan oleh tes ini harus ditafsirkan dengan hati-hati.

Teknik uji Warna

Yang paling penting tes warna untuk zat ini Marquis, Simon dan uji Chen. Uji Marquis memungkinkan perbedaan antara amphetamine dan cincin analog tersubstitusi. Tes Simon umumnya digunakan sebagai tes untuk amina sekunder, seperti cincin methamphetamine dan amfetamin tersubstitusi sekunder, termasuk MDMA dan MDE. Namun, amina sekunder lainnya, misalnya, dietilamina dan piperidin, dapat memberikan warna yang sama. Secara umum, warna yang intens namun mungkin cepat memudar di hadapan beberapa kotoran. Penting untuk analis mengkonfirmasi hasil tes Simon dengan melakukan tes tambahan,misalnya, tes Marquis. Tes Chen digunakan untuk membedakan efedrin, pseudoefedrin, norephedrine, fenil propanolamin dan methcathinone dari amphetamine dan methamphetamine, yang tidak bereaksi dengan Chen tes reagen.

Tes keempat, uji asam galat, menyediakan cara sederhana untuk perbedaan MDMA, MDA dan MDEA dari amfetamin atau metamfetamin, karena bereaksi secara khusus dengan senyawa aromatik methylenedioxy. Prekursor berisi methylenedioxy-substruktur, seperti safrole dan isosafrol juga bereaksi.

Uji Marquis

 Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai di piring spot.

 Tambahkan satu tetes Marquis Reagent 1, satu tetes reagen 2, dan aduk.

Uji Simon

 Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam piring spot.

 Tambahkan satu tetes Reagen Simon 1 dan aduk.

 Tambahkan satu tetes Reagen Simon 2, dan kemudian satu tetes reagen 3.

 Amati warna Uji Chen

 Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam piring spot.

 Tambahkan 2 tetes Reagen Chen 1.

 Tambahkan 2 tetes Reagen Chen 2, kemudian tambahkan 2 tetes Reagen 3 dan aduk.

 Amati warna. Uji asam galat

 Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam tabung reaksi kecil.

 Tambahkan satu tetes Reagent Gallic acid.

 Amati warna.

Hasil

tes asam galat digunakan untuk mengidentifikasi, secara umum, cincin substitusi methylenedioxy dan ATS individu dengan sub-struktur, hasilnya tidak disertakan secara terpisah, untuk zat individu, dalam tabel. Warna hijau tua menunjukkan adanya MDA, MDMA, MDE, N-hidroksi - MDA atau MMDA. Dalam beberapa kasus, misalnya, MDE dan N-hidroksi - MDA, warna hijau dapat berubah menjadi coklat selama tes.

Tabel 1 hasil uji Warna

Senyawa Reagen Marquis Reagen Simon Reagen Chen Amphetamine Orange, Perlahan

coklat Cathinone NR NR * Secara bertahap berubah menjadi kuning atau orange Dimethylamphetamine Orange NR * NR * Ephedrine Pseudoephedrine NR NR * Ungu N-Ethylamphetamine Kuning, menjadi

coklat Metamfetamin Orange, Perlahan – lahan berubah coklat biru NR * Methcathinone NR Sedikit biru, cincin, seperti endapan Secara bertahap berubah menjadi kuning atau orange Norephedrine NR NR Ungu 2C-B Kuning hijau NR * NR * 2C-T-2 Cahaya merah muda, orange NR * 2C-T-7 NR NR *

DMA Hijau Hijau

Gelap NR *

DOB Kuning hijau NR * NR * DOET Coklat kuning NR *

FLEA Biru gelap/hitam NR * MBDB Biru gelap/hitam Biru

MDA Biru gelap/hitam NR * NR * MDDM Biru gelap/hitam

MDEA Biru gelap/hitam Biru coklat NR * MDMA Biru gelap/hitam Biru NR * MDOH Biru gelap/hitam

MMDA Ungu NR * NR * 4-MTA NR NR * PMA NR cahaya hijau NR * STP/DOM Kuning NR * NR * TMA Orange NR *

Catatan: NR = tidak ada reaksi

* Warna reagen harus dianggap sebagai negatif.

Catatan analit (A) ATS spesifik

Hasil tes warna dapat berubahan dari hasil uji warna. Meskipun berbagai macam warna yang digunakan untuk produksi tablet ATS, sebagian warna yang larut dalam air, dan kelarutan mereka dapat dimanipulasi dengan mengubah pH larutan. Dalam kasus tersebut, oleh karena itu, analis harus menyesuaikan prosedur ekstraksi dan menghilangkan warna sama sekali sebelum melanjutkan ke tes warna itu sendiri.

Dalam kasus, ketika tes warna tidak dapat ditafsirkan dengan jelas karena kehadiran tablet pewarna, prosedur berikut akan sering menghasilkan hasil yang diterima:

Tempatkan sejumlah kecil (sekitar 10 mg) dari sampel ke dalam tabung reaksi kecil. Menambahkan sekitar 1 ml metanol (atau 1 ml 4:1 campuran metanol: metilen klorida). Setelah penyaringan melalui glass wool, menguap sampai kering. kemudian dilanjutkan dengan uji warna dengan hati-hati menambahkan larutan sampel air di piring spot dan menambahkan warna reagen. Karena sampel yang sudah diencerkan, 3 tetes reagen per satu tetes larutan sampel akan cukup.

Kehadiran pengencer dan adulterants juga dapat mengganggu reaksi warna dan menghasilkan hasil tes negatif palsu. Sedangkan uji Simon dapat menyebabkan hasil negatif palsu ketika adulterants atau pengencer yang hadir dalam sampel ATS, tes Marquis kurang sensitif sampel tercemar oleh karena itu, lebih baik ketika konsentrasi ATS disampel sangat rendah.

(B) Umum

Warna-warna yang dijelaskan adalah penilaian subjektif karena persepsi individu warna. Karena itu, aspek subjektif dari evaluasi warna, untuk itu diperlukan setiap analis untuk menguji standar referensi yang tepat untuk memastikan bahwa ia dapat mengenali setiap hasil uji warna. Demikian pula, disarankan untuk melakukan pengujian tanpa substansi sasaran untuk memastikan keakraban dengan warna reagen.

tes warna negatif umumnya cukup dapat diandalkan dalam membangun tidak adanya senyawa target; Namun, hasil positif hanya dugaan indikasi kemungkinan adanya suatu senyawa. Banyak senyawa lain, sering tidak berbahaya dan tidak terkendali oleh undang-undang nasional atau internasional, dapat memberikan warna yang sama dengan tes reagen.

Oleh karena itu, wajib bagi analis untuk mengkonfirmasi tes warna positif dengan menggunakan tes laboratorium tambahan.

Untuk menghilangkan kemungkinan hasil positif palsu karena tempat yang terkontaminasi.

2. Tes Anion

Pengujian anion bertujuan untuk forensik biasanya memanfaatkan kelarutan gabungan dengan reaksi yang dipilih di mana hasil ditentukan ada atau tidak adanya, dan kelarutan, dari endapan. Kelarutan ATS berbeda dan garam dalam air dan beberapa pelarut dijelaskan di bawah ini.

Metode Untuk Identifikasi dan Analisis Amfetamin, Metamfetamin

Amfetamin dan garamnya

Dasar Hidroklorida Posfat Sulfat Air Sedikit

larut

Larut Larut Larut

Metanol atau etanol Larut Larut Sedikit larut

Sedikit larut

Dietil eter Larut Tidak larut Tidak larut Tidak larut Kloroform Larut Larut Tidak larut Tidak larut

Metafetamin dan Garamnya

Base Hidroklorida Air Sedikit larut Larut Metanol atau etanol Larut Larut

Dietil eter Larut Tidak larut

kloroform Larut Larut

Ring-Tersubstitusi ATS dan Garamnya

Bebas dari cincin tersubstitusi ATS umumnya tidak larut dalam air dan larut dalam etanol, dietil eter, kloroform dan pelarut organik lainnya. Garam hidroklorida mereka larut dalam air dan etanol, sedikit larut dalam kloroform, dan tidak larut dalam dietil eter. Kelarutan zat individu kelompok ini tergantung pada ATS cincin tersubstitusi tertentu yang dimaksud.

Metode

Semua reagen harus disiapkan sesuai dengan prosedur yang ditetapkan. Rincian persiapan reagen dijelaskan dalam lampiran II.

Uji Perak Nitrat

Sampel ATS diketahui dilarutkan dalam beberapa tetes air deionisasi dan diobati dengan 1-2 tetes larutan AgNO3. Hasil untuk anion umum adalah tercantum di bawah ini. Karena anion lain juga dapat memberikan hasil yang sama, tes tambahan atau sosialisasi keterbatasan pengujian harus dilakukan.

Klorida: Bentuknya endapan putih yang tidak larut dalam nitrat pekat asam. Endapan larut dalam larutan amonia encer, dari mana dapat kembali dipicu oleh penambahan asam nitrat.

Bromida: Bentuk kuning pucat krim berwarna endapan yang tidak larut dalam asam nitrat. Endapan sangat lambat larut dalam larutan amonia encer dan larut dalam larutan amonia pekat. Hal ini dapat diendapkan dengan penambahan asam nitrat.

Iodida: Bentuk endapan kuning cerah yang sedikit larut dalam terkonsentrasi larutan amonia tetapi larut dalam larutan tiosulfat.

Sulfat: Bentuknya yang berwarna kristal endapan ringan yang dapat dengan mudah diidentifikasi dengan menempatkan solusi pengujian pada slide mikroskop dan mencari karakteristik "diamond" berbentuk kristal perak sulfat.

Fosfat: Bentuk endapan kuning muda, yang larut dalam amonia encer solusi, atau asam nitrat dingin.

Untuk sulfat dan fosfat garam, tes khusus tambahan dapat dilakukan: Uji garam sulfat

Yang tidak diketahui sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam air dan diperlakukan dengan larutan barium klorida. Sebuah endapan putih, yang tidak larut dalam asam klorida, menunjukkan adanya garam sulfat.

Uji garam fosfat

sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam larutan yang terbuat dari volume yang sama (misalnya, 1 ml masing-masing) larutan asam nitrat (10% v / v) dan larutan amonium molibdat (10% b / v). Dengan pemanasan, pembentukan endapan terang kenari kuning, yang larut dalam larutan amonia, menunjukkan kehadiran garam fosfat.

Catatan Analitis

Karena semua tes anion dilakukan dalam larutan air, air-kelarutan Garam ATS merupakan pra-kondisi untuk hasil yang berarti. Mencuci endapan dengan air sebelum melakukan tes untuk pembubaran endapan sangat penting untuk menghilangkan larut (non-endapan) anion.

3. Uji Mikrokristal

Uji Microcrystal uji cepat, sederhana, dan sangat sensitif untuk identifikasi zat dan isomer optik mereka. Mereka melibatkan pembentukan Kristal dari reaksi senyawa target dengan pereaksi kimia, diikuti dengan analisis kristal yang dihasilkan dengan menggunakan mikroskop polarisasi.

Metode

Bentuk paling sederhana dari tes terdiri dari penambahan setetes pereaksi sesuai dengan tes substansi, diikuti dengan mengamati dan menganalisis kristal yang terbentuk di bawah mikroskop polarisasi. Dalam rangka mempertahankan catatan yang akurat, fitur karakteristik kristal harus dijelaskan. hasil tes paling akurat adalah dengan foto. Jika foto tidak tersedia sketsa bentuk kristal sangat membantu.

B. KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) *

KLT telah menjadi salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk pemisahan dan identifikasi obat. Hal ini cepat (analisis tidak lebih lama dari tiga puluh menit), sensitif (sub-miligram kuantitas analit diperlukan), sangat fleksibel dalam fase gerak baik stasioner, dan bisa menerima berbagai macam zat, di dasar dan garam bentuk, mulai dari paling polar dengan bahan non-polar yang paling. Hal ini juga setuju untuk varietas teknik visualisasi, dan itu adalah murah. Meskipun keuntungan nyata dari TLC, di banyak negara, tidak diterima sebagai suatu teknik untuk identifikasi obat.

Pelat KLT (Fase Stasioner)

Lapisan: gel G Silica dengan ketebalan lapisan 0,25 mm, dan mengandung indikator, yang berfluoresensi di bawah sinar UV panjang gelombang 254 nm Catatan: Pelat disiapkan oleh analis harus diaktifkan sebelum digunakan dengan menempatkan mereka ke dalam oven untuk setidaknya 10 sampai 30 menit pada suhu 120 °C. Pelat kemudian disimpan dalam desikator lemak bebas silika biru gel. Aktivasi panas biasanya tidak diperlukan untuk lapisan ikatan kimia (pelat komersial).

Ukuran tipe pelat: 20x20 cm, 20 x 10 cm, 10 x 5 cm (10 x 5 cm pelat harus digunakan dengan sisi 10 cm vertikal di tangki KLT).

Sistem Pelarut (Fase Gerak) Sistem A : Methanol 100

Konsentrat amonia 1.5 Sistem B : Ethyl acetate 85

methanol 10

Konsentrat amonia 5 Sistem C : Cyclohexane 75

toluene 15 Diethylamine 10

Metode

Sistem Pelarut

Siapkan sistem pelarut seakurat mungkin dengan menggunakan pipet dan mengukur silinder. Biarkan sistem pelarut dalam tangki TLC untuk sementara waktu cukup untuk memungkinkan saturasi fasa uap yang akan dicapai sebelum analisis (dengan tangki kertas berlapis penyerap, ini memakan waktu sekitar 5 menit).

Persiapan standar ATS dan solusi sampel

Bentuk standar dan sampel, garam atau dasar, tidak penting. Entah bentuk akan memuaskan. Karena sifat dasar pelarut berkembang, senyawa bermigrasi.

ATS solusi standar: harus disiapkan pada konsentrasi sekitar 2 mg / ml dalam metanol. Harus disimpan dalam gelap dan tempat yang dingin.

Solusi sampel ATS (ATS sampel tidak diketahui): solusi Sampel harus disiapkan pada konsentrasi sekitar 5mg/ml dalam metanol. Dalam kasus-kasus, di mana kemurnian ATS diduga menjadi sangat rendah karena pemalsuan, mungkin diperlukan untuk mempersiapkan solusi sampel lebih terkonsentrasi (sepuluh kali lebih terkonsentrasi solusi yang disarankan sebagai titik awal). Untuk sampel ATS dalam bentuk selain bubuk, solusi sampel harus disiapkan sebagai berikut:

Tablet: menggiling sejumlah tablet (setelah rencana pengambilan sampel umum) sampai menjadi bubuk halus dan menyiapkan solusi bubuk.

Kapsul: Keluarkan isi dari sampel yang representatif dari kapsul (berikut rencana pengambilan sampel umum) dan mempersiapkan solusi bubuk. Larutan encer: Spot langsung, atau setara 5mg/ml, jika konsentrasi dari ATS diketahui.

Penotolan sampel

Letakkan kedua 1 µL dan 5 µL tempat larutan sampel, bersama-sama dengan 2 µL dari larutan standar (s) ke pelat KLT (Kontrol negatif harus

diterapkan ke pelat). Spotting harus dilakukan dengan hati-hati, tanpa merusak permukaan pelat tersebut.

Titik awal yang dijalankan yaitu, "garis bercak," harus 2 cm dari bagian bawah piring. Jarak antara aplikasi sampel (tittk bercak) harus minimal 1 cm, dan bintik-bintik tidak harus ditempatkan lebih dekat dari 1,5 cm ke tepi sisi pelat. Untuk menghindari noda menyebar selama pengembangan, ukuran dari sampel tempat harus sekecil mungkin (≤2 mm).

Biarkan tempat kering, dan tempat piring ke pelarut jenuh TLC (kejenuhan dari fasa uap dicapai dengan menggunakan bantalan pelarut jenuh atau kertas saring sebagai lapisan tangki). Lepaskan piring dari tangki pembangunan segera setelah pelarut mencapai garis pembangunan ditandai sebelumnya; jika tidak, bintik-bintik menyebar akan terjadi.

Metode / Visualisasi reagen analit Target dan hasil

A. sinar UV pada 254 nm metode Universal. Banyak zat, termasuk ATS, memberikan bintik-bintik ungu di piring dinyatakan hijau neon.

B. Ninhydrin reagen amina primer dan sekunder dilampirkan ke atom karbon alifatik, seperti amphetamine dan methamphetamine, mengakibatkan violet atau bintik-bintik merah muda.

C. diasamkan kalium Sensitif reagen umum. Kebanyakan primer dan sekunder amina reagen iodoplatinate memberikan tempat biru muda. D. Fast Black K primer dan amina sekunder memberikan yang warna

berbeda-beda dari violet (amina primer) ke oranye atau oranye-merah (amina sekunder).

E. Marquis Perbedaan antara reagen tersubstitusi dan cincin tersubstitusi ATS.

F. Fluorescamine reagen (Fluram) reagen Sensitif untuk amina primer. Direkomendasikan untuk deteksi konsentrasi rendah amina primer.

G. Simon reagen. Reagen umum untuk amina sekunder (efedrin dan pseudoephedrine tidak bereaksi).

Kata kunci :

Metode / Visualisasi reagen

A. Plate sinar UV dikeringkan di bawah sinar UV pada 254nm dan 366nm. B. Ninhydrin reagen: Siapkan larutan 10% dalam etanol. Semprot piring

dengan reagen ninhidrin dan keringkan dalam oven pada suhu 120 ° C selama minimal 15 menit. Warna violet atau ungu dihasilkan oleh amina primer seperti amphetamine dan amina sekunder seperti methamphetamine dan Efedrin.

C. Diasamkan dengan reagen kalium iodoplatinate Larutkan 0.25g platinic klorida dan 5g kalium iodida dalam air 100 ml. Tambahkan 2 ml asam klorida pekat. Semprot piring dengan larutan kalium iodoplatinate dan mengamati bintik-bintik berwarna Amphetamine dan methamphetamine bintik abu-abu ungu-coklat- pada latar belakang merah muda.

D. Fast Black K Solusi: Siapkan larutan 1% dari garam Hitam K dalam air [2,5-Dimethoxy-4-((4-nitrophenyl) azo) benzena diazonium tetrachlorozincate (2:1)] Solusi B: 1 N NaOH Semprot piring dengan larutan A dan mengamati bintik-bintik berwarna. Amina sekunder seperti methamphetamine dan MDMA menghasilkan bintik-bintik segera. Larutan B menghasilkan bintik-bintik berwarna untuk amphetamine.

E. Marquis reagent:

Tambahkan 8-10 tetes larutan formaldehida 40% addkan dengan 10 ml asam sulfat pekat. Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Penyemprotan dengan Marquis reagent tidak dianjurkan karena asam sulfat pekat terlibat. Namun, memberikan informasi tambahan yang berguna untuk membedakan antara ATS, misalnya, setelah deteksi dengan ninhidrin. Untuk itu, drop reagen Marquis dengan pipet Pasteur pada tempat yang sudah terdeteksi.

F. Fluorescamine reagen (Fluram)

Larutkan 10 mg fluorescamine dalam 50 ml aseton. keringkan Air dengan blower udara panas. Amati piring di bawah sinar UV pada 366 nm. Amphetamine memberikan warna kuning neon titik terang.

Methamphetamine tidak terdeteksi. (Untuk stabilisasi pada 366 nm, semprot dengan larutan 10% v / v dari trietylamine dalam diklorometana). G. Simon reagen

Larutkan 100 mg sodium nitroprusside dan 2 g natrium karbonat dalam 10 ml air (yaitu, larutan air yang mengandung natrium nitroprusside pada konsentrasi 1%, dan natrium karbonat pada 20%). Siapkan reagen baru sebelum digunakan. Semprot piring dengan reagen Simon. Tempatkan piring dalam tangki kosong bersama dengan gelas yang berisi asetaldehida. Tutup tangki. Uap asetaldehida akan menyebabkan methamphetamine tempat untuk menjadi warna biru intens. Amina primer tidak dapat dideteksi, karena sensitivitas rendah sistem untuk kelompok zat, dan gangguan pada latar belakang warna ketika amonia digunakan dalam pelarut berkembang.

H. Dragendorff reagen Larutan stok: Larutkan 0,85 g bismut subnitrate (dasar) dalam 10 ml asam asetat. Encerkan dengan 50 ml dengan air dan tambahkan 8 g kalium iodida dalam 20 ml air Semprot piring dengan larutan yang dibuat dari 1 ml larutan stok Dragendorff, 2 ml asetat asam dan 10 ml air. Warna bervariasi dari oranye ke ungu.

Interpretasi

Setelah visualisasi, menandai tempat (misalnya, dengan pensil), dan menghitung faktor retardasi (Rf) nilai-nilai:

Jarak migrasi: dari asal ke pusat zona analit (spot) Rf =

Pengembangan jarak: dari asal pelarut depan.

Hal ini sangat umum untuk mengekspresikan faktor retensi sebagai Rf x 100, disebut sebagai HRF.

Hasil

Bandingkan warna dan nilai-nilai Rf sampel ATS. Nilai Rf untuk beberapa ATS diberikan dalam Tabel 2.

Tabel 2. Nilai Rf sering ditemui ATS dan adulterants TLC sistem

NAMA ATS TLC sistem

A B C Amphetamine 0.48 (0.43) 0.37 (0.43) (0.20) Chatinone 0.66 0.56 DOB 0.37 0.32 (0.13) DOET 0.36 0.32 (0.24) DMA 0.37 0.33 0.19 N-ethylamfetamin 0.47 0.37 (0.47) Methamphetamine 0.35 (0.31) 0.22 (0.42) (0.28) MDA 0.36 (0.39) 0.33 (0.42) (0.18)

NAMA ATS TLC sistem

A B C MDMA 0.31 (0.33) 0.21 (0.39) (0.24) MMDA 0.40 0.31 PMA 0.41 (0.73) 0.33 (0.43) (0.23) STP / DOM 0.35 (0.51) 0.31 (0.41) (0.15) TMA 0.35 0.20 EPHEDRINE (0.30) (0.25) (0.05) CAFFEIN (0.52) (0.52) (0.03)

Nilai Rf dalam kurung telah diperoleh dengan menggunakan pelat silika diresapi dengan metanol KOH (0,1 mol / l).

Catatan analitis

Penting bahwa standar referensi ATS dijalankan secara bersamaan di piring yang sama. Atau, reproducibility dapat secara signifikan ditingkatkan dengan menggunakan senyawa referensi dan dikoreksi nilai Rf (Rfc). Untuk tujuan

identifikasi, baik nilai Rf dan warna bercak setelah penyemprotan dengan reagen visualisasi yang berbeda harus selalu dipertimbangkan.

C.KROMATOGRAFI GAS (GC)-ionisasi nyala DETECTOR (FID)

Untuk analisis GC dari ATS. Menggunakan kolom kapiler dengan diameter internal antara 0,2 dan 0,32 mm. GC prosedur memanfaatkan kolom megabore kapiler (0,53 mm diameter internal) merupakan sarana untuk memperbaiki menyelesaikan daya dibandingkan dengan kolom dikemas, dan lebih kuat daripada bore kapiler sistem kolom sempit. Lama GC sistem yang dirancang untuk kolom dikemas dapat dikonversi untuk digunakan dengan kolom megabore.

Metode

1. ANALISIS KUALITATIF

Persiapan standar ATS dan solusi sampel Larutan standar ATS: timbang 25 mg garam ATS standar (s) ke dalam labu volumetrik 25 ml dan addkan sampai tanda dengan air. Pipet sebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung. Tambahkan larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan 5 ml ekstrak pelarut. Membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkan berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, pindahkan lapisan pelarut (Misalnya, kloroform) melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.

Solusi sampel ATS (unknown sample ATS): berat 25-150 mg sampel, tergantung pada kemurnian diantisipasi, untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1 mg / ml garam analit, ke dalam labu ukur 25 ml addkan dengan air.

Pipet larutan dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam gelas 10 ml tutup tabung reaksi. Tambahkan larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Lalu tambahkan 5 ml pelarut ekstraksi (misalnya, kloroform).

Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkan berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarut melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.

Inject 1-2 ul lapisan pelarut ke dalam GC.

Jika sampel cepat diperlukan, sampel dapat diambil secara langsung dalam etanol / amonia berair (99:1), dan disuntikkan ke kromatografi gas. Dengan menggunakan metode ini, kondisi injektor dan kolom dapat memburuk lebih cepat dibandingkan dengan sampel diekstraksi (Catatan: Metode ini tidak cocok untuk analisis kuantitatif karena sulit untuk menghasilkan kromatografi baik di keberadaan amonia).

Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analit dengan standar referensi. Urutan elusi adalah sebagai berikut: amphetamine <methamphetamine <pseudoephedrine <efedrin <PMA <PMMA <MDA <MDMA <4-MTA <MDEA <MBDB <2C-B. Di bawah kondisi yang dijelaskan, kafein dan ketamin, yang sering ditemukan dalam sampel ATS di beberapa daerah, mengelusi setelah 2C-B.

2. ANALISIS KUANTITATIF

Tiga metode untuk analisis GC-FID kuantitatif ATS disediakan di bawah ini: metode standar tunggal (A) dan metode standar (B dan C). Metode A dan B tidak memerlukan derivatisasi, sedangkan metode C membutuhkan silylation.

Metode A: metode standar Tunggal , metode A cocok untuk pemeriksaan ATS secara kuantisasi. Metode Ini melibatkan persiapan larutan standar ATS dengan konsentrasi yang sama dengan konsentrasi analit.

Pembuatan larutan baku internal (IS): timbang akurat sekitar 25 mg standar (misalnya, n-tetradecane atau lainnya n-alkana dengan bahkan jumlah atom karbon, atau difenilamin) dan di larutkan dalam 25 ml pelarut pengekstrak (misalnya, kloroform). Jika standar internal solusi digunakan untuk ekstraksi, konsentrasi sasaran sebaiknya disiapkan dalam rentang instrumen linear (tidak lebih dari 0,5 mg / ml).

Persiapan standar ATS dan solusi sampel : ATS standar dan larutan sampel harus mengikuti prosedur yang diuraikan di atas untuk analisis kualitatif, dengan

menggunakan larutan standar internal untuk ekstraksi dari ATS standar dan sampel, sebagai berikut: (A) ATS standar di Timbang akurat sekitar 25 mg garam ATS standar (s) masukkan kedalam volumetrik labu 25 ml dan addkan sampai tanda dengan air. pipet secara akurat sebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung. Tambahkan larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan 5 ml larutan baku internal.

Tutup dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkan berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, pindahkan lapisan pelarut yaitu natrium sulfat anhidrat ke dalam botol GC. Menganalisis larutan standar dalam rangkap tiga atau lebih. (B) sampel ATS (sample diketahui ATS) Timbang akurat 25-150 mg sampel, tergantung pada kemurnian, untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1 mg / ml garam analit, larutkan menggunakan labu volumetric 25 ml dan addkan sampai tanda air. Sampel diantisipasi kemurnian ditentukan secara empiris. pipet secara akurat sebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung. Tambahkan larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan 5 ml larutan baku internal. Tutup dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkan berdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, pindahkan lapisan pelarut yaitu natrium sulfat anhidrat Persentase Isi obat dalam sampel dapat dihitung dengan menggunakan rumus: ATS % =

dimana

ATS (%) = Isi ATS diketahui (sebagai dasar atau garam, = kemurnian sampel) CST = Konsentrasi ATS larutan standar (mg / ml), yang telah dipersiapkan bawah

(a), di atas (=berat standar ATS murni per mili-pelarut liter)

CATS = Konsentrasi ATS larutan sampel yang tidak diketahui (mg / ml),

yang telah dipersiapkan di bawah (b), di atas (= berat diketahui ATS sampel per mililiter pelarut)

AATS / IS = Jumlah kawasan Puncak yang tidak diketahui ATS dibagi dengan luas

puncak standar internal (sebaiknya, rata-ratadikerjakan secara duplo)

Ast/IS = Jumlah Luas puncak standar ATS dibagi dengan jumlah luas puncak dari

standar internal (rata-rata penentuan rangkap tiga)

Metode B: metode Multiple-standar tanpa derivatisasi Metode di bawah ini adalah metode kalibrasi multi-titik yang direkomendasikan, divalidasi. Metode GC untuk analisis kuantitatif dari ATS, dengan dan tanpa derivatization.

Pembuatan larutan baku internal (IS) Timbang akurat 0,3-0,4 g standar internal yang dipilih (n-tetradecane, n-alkana lain, difenilamin, atau ATS struktural terkait dalam bentuk dasar) tambahkan ke dalam labu ukur 500 ml encerkan dengan kloroform untuk memberikan Larutan standar internal dari 0,6-0,8 mg / ml. Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC) Larutan stok standar harus mengandung semua senyawa dalam konsentrasi ions sekitar 1000 mg / l.

Untuk persiapan larutan stok: (A) beratnya sekitar 1000 mg garam ATS menjadi 1000 ml labu volumetrik dan add kan sampai tanda dengan air. (B) pipet secara akurat 5 ml larutan ini ke dalam gelas tutup uji 20 ml. tambahkan 5 ml kloroform. (C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Menggunakan pipet Pasteur, mentransfer sekitar 1 ml lapisan kloroform melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil.

Persiapan beberapa standar kalibrasi titik Level calibrasi Larutan standar ATS (µl) Larutan IS (µl) CHCl3 (µl) Konentrasi dari garam ATS (mg/l) Level 1 20 100 880 20 Level 2 40 100 860 40 Level 3 60 100 840 60 Level 4 80 100 820 80 Level 5 100 100 800 100

Metode C: metode Multiple-standar dengan derivatisasi

Siapkan diderivatisasi ATS standar dan sampel solusi dengan mengukur sebuah aliquot (misalnya, 100ml) solusi standar melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil Langkah (c) di atas) bersama-sama dengan aliquot dari 100 ml, larutan standar internal 750 ml, kloroform dan 50 ml BSTFA (atau BSTFA + 1% TMCS) menjadi sampel GC botol. Menggunakan 50 mL BSTFA di setiap langkah untuk persiapan larutan standar dan sampel, dan menambahkan kloroform untuk membuat sampai 1 ml.

D. GAS spektrometri massa kromatografi (GC-MS)

GC-MS adalah salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk identifikasi secara kuantisasi, pada sampel obat forensik. Persiapan standar ATS dan solusi sampel Sampel disiapkan seperti yang dijelaskan dalam metode GC yang diberikan sebelumnya. Persiapan derivatif adalah particularly diinginkan ketika spektrum massa molekul underivatized adalah nilai diagnostik rendah. Derivatisasi dari ATS biasanya menghasilkan ion fragmen rasio m / z lebih tinggi dan kelimpahan yang lebih tinggi. Ion massa yang tinggi lebih spesifik dan mereka memiliki Nilai diagnostic lebih, karena mereka tidak terpengaruh oleh campur ion latar belakang seperti kolom berdarah atau kontaminan lainnya.

untuk penggunaan di GC-MS, sampel amina primer juga dapat diambil langsung dalam karbon disulfida (CS2), Yang menghasilkan pembentukan isothiocyanate, derivatif yang memberikan spektrum massa lebih karakteristik dari senyawa induk.

dan kolom dapat memburuk lebih cepat daripada dengan sampel diekstraksi. untuk penggunaan di GC-MS, sampel amina primer juga dapat diambil langsung dalam karbon disulfida (CS2), yang menghasilkan pembentukan isothiocyanate, derivatif yang memberikan spektrum massa lebih karakteristik dari senyawa induk.

Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum massa analit dengan standar referensi. Semua senyawa diidentifikasi oleh GC-MS dan dilaporkan oleh analis harus dibandingkan dengan spektrum massa saat standar acuan yang tepat, sebaiknya diperoleh dari instrumen yang sama, dioperasikan di bawah kondisi yang sama.

E. KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (HPLC)

Selain GC, HPLC adalah teknik lain pemisahan utama yang biasa digunakan dalam analisis obat forensik. Untuk memudahkan persiapan sampel, reproduktifitas terbaik dan pendeteksian, terbalik kromatografi fase direkomendasikan untuk analisis ATS dan cincin mereka tersubstitusi analog. Kolom paling universal dan serbaguna adalah terikat oktadesil silika kolom (C18). Panjang kolom, diameter, ukuran partikel, ukuran pori-pori dan beban karbon harus dipertimbangkan sebelum pemilihan akhir kolom. Karena ada berbagai macam fase stasioner dan mobile yang tersedia untuk analis, hanya pedoman disajikan di bawah ini.

Metode

Persiapan standar ATS dan solusi sampel

Larutkan jumlah yang tepat dari standar atau sampel dalam fase gerak, penargetan konsentrasi komponen aktif antara 0,05-0,50 mg / ml. Contoh solusi harus disaring sebelum analisis. Saham dan standar solusi harus disiapkan dari standar referensi. Standar kerja harus berada dalam rentang linear detektor dan sekitar 80-120% dari konsentrasi sasaran. Beberapa titik kalibrasi diinginkan tetapi metode standar tunggal juga diterima.

Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analit dengan bahwa standar referensi dan, jika tersedia, dengan menggunakan beberapa panjang gelombang UV atau diode array atau deteksi pemindaian UV cepat. Kekhususan

metode ini penting, karena selalu ada kemungkinan bahwa senyawa serupa mengelusi pada waktu retensi yang sama. Perintah elusi khas adalah sebagai berikut: norephedrine, efedrin, amfetamin, methamphetamine, MDA, MDMA dan MDEA. Pemisahan efedrin/pseudoefedrin dan norephedrine / norpseudoephedrine pasangan bisa sulit, dan mungkin memerlukan sedikit penyesuaian kondisi HPLC.

F. FOURIER TRANSFORM INFRARED (FTIR) SPEKTROSKOPI

Spektroskopi inframerah secara luas digunakan sebagai uji kualitatif juga metode kuantitatif untuk penentuan dan analisis struktur ATS. Analisis FTIR dapat menjadi alat yang sangat berguna untuk penyaringan cepat ATS tablet dan bubuk, memberikan indikasi mengenai homogenitas tablet

preparasi sampel

Sebuah teknik diinginkan adalah metode halida disc, dapat dianalisis ulang berkali-kali, jika disimpan lebih dari pengering a. Metode halida disk yang * terdiri dari penggilingan sampel kering dengan sangat halus bubuk, kemudian pencampuran sekitar 1 mg bubuk sampel dihomogenisasi dengan 200 mg hati-hati dikeringkan dan digiling halida alkali. Namun, KCl sedikit kurang higroskopis, dan umumnya direkomendasikan atas KBr, terutama ketika analit adalah garam hidroklorida (untuk menghilangkan masalah pertukaran halida). Namun, spektrum yang diperoleh dengan metode ini tidak dapat langsung dibandingkan dengan yang diperoleh dari salah satu metode yang dijelaskan di atas.

Isolasi obat murni dari sampel Isolasi basa bebas ATS

Larutkan 25-50 mg sampel dalam 1 ml 0,1 N asam tartaric. Tambahkan 4-5 tetes amonium hidroksida dan ekstrak dengan kloroform. Melewati lapisan kloroform melalui kolom kecil berisi plug kapas untuk menghilangkan partikel tersuspensi. Biarkan sebagian dari solusi kloroform menguap langsung ke cakram KBr dan

merekam spektrum inframerah dari basa bebas, misalnya, dengan film tipis Teknik pada cakram KBr.

Isolasi garam ATS

Giling sampel menjadi serbuk 20-50 mg dengan 1-2 ml kloroform. Saring, mengumpulkan ekstrak. Menyebabkan kristalisasi, filter, kristal kering, dan menjalankan spektrum inframerah Hasil dari garam ATS oleh salah satu metode yang dijelaskan di bawah ini.

Metode

Spectra garam ATS dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut metode:

 KBr halida disc (1-1,5%)

 Nujol memikirkan metode

 Metode langsung, misalnya pemantulan difusi ATR

 Metode pantul

Spectra ATS basa dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut metode:

 Metode film tipis

 Kartu IR

 Metode langsung, misalnya pemantulan difusi ATR

Metode persiapan sampel IR alternatif untuk methamphetamine Metode ekstraksi kering Serial

Tempatkan 200 mg sampel bubuk methamphetamine ke Pasteur sekali pakai pipet dengan plug glass wool. Cuci sampel dengan 1 ml-bagian aseton dan mengumpulkan fraksi aseton. Biarkan kolom kering dan kemudian bilas dengan 1 ml aliquot-metanol dan mengumpulkan fraksi metanol. Bahan larut kemudian dapat dihapus dari pipet. Semua fraksi diperiksa oleh spektroskopi inframerah untuk identifikasi.

Pemisahan fisik / selektif re-kristalisasi

Prosedur di bawah ini juga bekerja untuk jenis campuran ditunjukkan; mereka tidak bekerja dengan baik dengan amphetamine hydrochloride.

Campuran diketahui mengandung metamfetamin: Tambahkan dalam gelas 25 mg sampel 20 ml dari 2:1 campuran kloroform dan heksana. Tambahkan dietil eter untuk mengendapkan metamfetamin. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine hidroklorida).

Campuran diketahui mengandung metamfetamin, pseudoefedrin, dan efedrin:

 Tempatkan 100 mg sampel dalam secarik kertas saring dan cuci dengan 40 ml 3:1 campuran kloroform dan heksana.

 Cuci dengan kloroform, dan keringkan, untuk pemeriksaan (efedrin hidroklorida). menguapkan larutan asli.

 Larutkan satu setengah sampel ini dalam 20 ml 2:1 campuran kloroform dan heksana, berkonsentrasi sekitar setengah volume awal,

 Dan menambahkan dietil eter untuk mengendapkan methamphetamine. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine hidroklorida).

 Larutkan setengah lainnya dari sampel dalam 2 ml kloroform dan tambahkan 1,6 ml heksana untuk mengendapkan pseudoefedrin tersebut. Filter, kering dan memperoleh IR spektrum (pseudoefedrin hidroklorida).

Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan spektrum analit dengan standar referensi, atau dari perpustakaan spektral.

G. ANALISIS ISOMERS OPTIK

Kebanyakan ATS memiliki satu atom karbon asimetrik mengakibatkan sepasang enantiomer untuk setiap ATS. Tergantung pada sumber, oleh karena itu, bentuk enansiomer berbeda amfetamin, metamfetamin atau lainnya ATS mungkin ditemui di sampel diajukan untuk analisis.. Di negara-negara di mana

perundang-undangan nasional mensyaratkan bahwa spesifik isomer optik ini diidentifikasi, prosedur analit berikut dapat digunakan.

1. MELTING POINT

Perbandingan titik leleh sampel dicampur dengan standar acuan murni enatiomerically adalah tes cepat dan sederhana untuk membedakan optik isomer. Sebagai contoh, d-dan-l methamphetamine hydrochloride memiliki Titik lebur yang sama (170-175 ° C), tetapi campuran dari jumlah yang sama dari kedua isomer optik (campuran rasemat) memiliki titik lebur yang lebih rendah (130-135 ° C). Metode ini membutuhkan sampel yang cukup murni. Umumnya, titik leleh harus ditentukan dengan menggunakan sampel kering.

2. TES mikrokristal

Tes mikrokristal untuk isomer optik amfetamin:

Uji klorida emas [5% HAuCl4 di H3PO4] Mentransfer sejumlah kecil sampel bubuk ke dalam depresi rongga geser, dan tambahkan satu atau dua tetes reagen volatilizing (larutan NaOH 5%). Ini membebaskan amina bebas dalam bentuk basa bebas yang mudah menguap, yang naik dari solusi sebagai uap. Segera mentransfer setetes pereaksi pengujian (5% HAuCl4 di H3PO4) ke slide kaca dan membalikkan slide melintang atas sampel rongga. Reagen kemudian bereaksi dengan uap amina hadir dalam rongga. Setelah selang waktu yang tepat, membalikkan kembali slide reagen dan memeriksa untuk kristal dalam reagen atau di tepi drop reagen.

Hasil

Baik d-dan l-amphetamine memberikan mikrokristal, menyerupai batang panjang kuning atau jarum kasar dan pisau panjang dan sempit. Cara untuk membedakan mereka adalah untuk membentuk rasemat, yang tidak memberikan kristal yang berbeda.. Kristal ini sebagian besar terbentuk setelah inversi. Untuk tujuan ini, menambahkan beberapa bubuk sampel yang tidak diketahui untuk sejumlah kecil

dikenal garam d-amphetamine dalam satu rongga. Ulangi tes di atas. campuran yaitu (d + d) atau (l + l) akan memberikan batang kuning panjang dll. metamfetamin d-Methamphetamine diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan "V" pisau dengan satu sisi yang lebih pendek dari sisi lain. l-Methamphetamine memberikan bentuk karakteristik ujung berbentuk cerutu (mereka lancip di kedua sisi ujung pisau). d, l-Metamfetamin bentuk tunggal dan "X" pisau yang kadang-kadang berbentuk "Pisau".

MDMA

MDMA diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan kristal berbentuk X putih Kristal ini mirip dengan d, lmethamphetamine dengan emas klorida, namun dapat dibedakan dengan praktek.

Catatan: Karena MDMA sangat sensitif dalam bereaksi dengan reagen emas klorida, hanya sebagian kecil sudah cukup untuk hasil yang baik. Tes emas klorida juga berguna untuk prekursor efedrin dan pseudoefedrin, dan dapat berguna untuk nikotinamida dan kafein.

Hasil

d-Methamphetamine memberikan jarum orange panjang. dl-Methamphetamine memberikan batang oranye-merah dengan karakteristik miring berakhir.

3. TEKNIK INSTRUMENTAL

Ada beberapa metode instrumental langsung (GC kiral, HPLC atau CE) dan metode derivatisasi tidak langsung tersedia untuk analisis isomer optik ATS. Pemilihan metode tergantung pada ruang lingkup analisis, ketersediaan peralatan dan persyaratan laboratorium lainnya.. Kekuatan dan kelemahan dari kedua pendekatan harus dipertimbangkan dengan hati-hati. Metode instrumental Direct memungkinkan analisis isomer optik tanpa derivatisasi, menggunakan fasa diam kiral dan / atau aditif kiral untuk menjalankan penyangga (CE). Metode tidak langsung didasarkan pada derivatisasi analit dengan kirai reagen untuk menghasilkan dua diastereoisomer yang berbeda dengan yang berbeda

fisiko-kimia sifat yang dapat dipisahkan pada fase diam akiral. Metode menggunakan derivatisasi kiral dasarnya lebih murah dan melakukannya tidak memerlukan peralatan khusus atau kolom. Teknik GC Kromatografi gas (GC) adalah teknik mapan untuk pemisahan kiral. itu dapat dilakukan dengan menggunakan metode langsung, menggunakan kolom kapiler kiral, atau metode tidak langsung, di mana pemisahan ini dicapai dengan menggunakan reagen kirai dan akiral fasa diam. Kromatografi gas kiral (metode GC langsung) Fasa diam yang tersedia secara komersial untuk pemisahan GC isomer optik biasanya diproduksi dengan penambahan siklodekstrin makromolekul diderivatisasi untuk fase diam umum. Yang paling umum digunakan fase diam kiral untuk ATS adalah beta-siklodekstrin berbasis. metode Preparasi sampel (ekstraksi) untuk analisis GC kiral adalah sama seperti untuk normal GC.

Derivatisasi kiral (metode GC tidak langsung)

Diastereoisomer dari ATS dapat disusun dengan menggunakan reagen yang berbeda seperti acylchlorides, alkylsulphonates, isothiocyanates, chloroformates. Asam Mosher (trifluoromethyl)-asam fenilasetat], asam Mosher klorida, dan N-trifluoroasetil-1-prolyl klorida (TPC, juga dikenal sebagai TFAP-Cl) paling populer. Asam dan asam klorida hasil Mosher dalam derivatisasi kuantitatif yang paling amina, dengan pengecualian efedrin dan pseudoefedrin. Hal ini dapat digunakan sebagai reagen untuk kedua GC dan analisis HPLC. TPC dikenal untuk menghasilkan turunan stabil hampir semua ATS termasuk Kelompok efedrin.

Teknik HPLC

Untuk HPLC, berbagai pendekatan yang telah digunakan, termasuk derivatisasi dengan reagen kiral, penggabungan aditif kiral dalam fase gerak, dan penggunaan fase diam kiral. Berbagai kolom HPLC kiral tersedia secara komersial. Kinerja fasa diam kiral dalam HPLC telah ditingkatkan secara dramatis dalam beberapa tahun terakhir, meskipun analisis tersebut masih mahal.

Teknik CE

Zona elektroforesis kapiler sangat menguntungkan untuk analisis kiral karena memungkinkan untuk pemisahan yang sangat efisien enansiomer tanpa derivatisasi dan kolom khusus (kapiler). Untuk pemisahan ATS, aditif kiral untuk buffer run seperti hidroksil-propil beta-siklodekstrin yang umum digunakan.

Teknik Infrared (IR)

Meskipun enantiomer memiliki spektrum inframerah yang sama, inframerah (IR) spektroskopi dapat digunakan untuk membedakan antara enantiomer dari senyawa diberikan setelah mengubahnya menjadi diastereomer yang sesuai.

ATS, adalah semua basa organik dapat dengan mudah bereaksi dengan asam organik kiral untuk membentuk diastereomer. D-dan l-amphetamine, misalnya, dapat digabungkan dengand-mandelic acid untuk membentuk dua diastereomer, d-amphetamine-d-mandelate danl-amphetamine-d-mandelate, yang memiliki spektrum IR yang berbeda.

Metode

Larutan garam ATS (10-50 mg) dibuat basa, dan ATS diekstraksi ke dalam metilen klorida. Methylene chloride dikeringkan natrium sulfat anhidrat dan dipekatkan sampai sekitar 2 ml. Sebuah larutan jenuh d-mandelic acid dalam metilen klorida ditambahkan, beberapa tetes pada satu waktu, sampai solusi ATS dinetralkan (pH kertas). D-mandelate-ATS garam diperbolehkan untuk mengkristal, solusi disaring melalui hisap, dan kristal dicuci dengan sebagian kecil dari metilen klorida. Setelah kering, disc KBr dari kristal dipersiapkan, dan spektrum inframerah diperoleh. Prosedur ini diulang menggunakan isomer optik murni yang diketahui dari ATS yang sesuai.

Hasil

Identifikasi isomer optik dilakukan dengan membandingkan spektra yang dihasilkan dengan yang diperoleh dari standar referensi murni sesuai. Band IR di 800-1600cm-1 daerah memberikan informasi yang paling analitis khas.

Spektra IR dari garam-garam isomer optik amfetamin dengan asam mandelic diberikan dalam edisi awal dari manual PBB "metode Direkomendasikan untuk pengujian amphetamine dan methamphetamine" (ST/NAR/9). Data juga dapat diakses pada halaman web Laboratorium dan Ilmiah Bagian ini.

TAMBAHAN ANALITIS TEKNIK UNTUK ANALISIS ATS

Ada beberapa teknik analisis tambahan cocok untuk forensik identifikasi dan / atau kuantisasi ATS, seperti:

 Elektroforesis kapiler (CE)

 Spektroskopi inframerah gas kromatografi-Fourier berubah (GC-FTIR)

 LC-MS dan CE-MS, Near Infrared (NIR) Spektroskopi

 Resonansi magnetik nuklir (NMR) spektroskopi (kualitatif dan kuantitatif)

 kuantitatif FTIR

 kuantitatif TLC

 Raman spektroskopi FTIR

 Kromatografi ekstraksi gas fase-mikro padat (SPME-GC)

Penjelasan sebagian besar teknik ini adalah di luar lingkup ini "Manual pada direkomendasikan metode analisis untuk ATS ", dan analis yang dirujuk ke pelengkap "Manual pada teknik analisis secara umum, karakteristik mereka dan penggunaan praktis untuk analisis obat ". Empat teknik, NMR kualitatif, CE, SPME-GC, dan GC-FTIR secara singkat dijelaskan di bawah ini, karena mereka menawarkan spesifik, pilihan menarik untuk analisis ATS.

A. TEKNIK 1H-NUKLIR (NMR)

Ketersediaan sejumlah besar isomer posisi dari struktural terkait ATS, terutama cincin tersubstitusi ATS, membutuhkan alat yang efektif yang menyediakan diperlukan informasi struktural untuk diferensiasi mereka. NMR memungkinkan analis untuk tegas membedakan antara derivatif amphetamine cincin tersubstitusi yang berbeda, bahkan di hadapan Pengencer dan adulterants lainnya. Meskipun substitusi tertentu pola mirip satu sama lain di daerah sesuai dengan proton dari rantai alkil samping, spektrum terpadu dan pola aromatik sinyal proton memungkinkan perbedaan mereka dari satu sama lain. Sementara menjadi kuat alat untuk identifikasi analog, biaya spektroskopi NMR dan keahlian teknis yang diperlukan mencegah aplikasi luas dalam analisis rutin.

Metode

Larutkan sekitar 20 mg sampel obat dalam 1 ml D2O. Jika bahan tidak larut yang hadir, centrifuge, mengalihkan langsung supernatan ke dalam NMR tabung. Catat spektrum solusi ini mengandung bentuk garam dari ATS. Membebaskan basa bebas dari ATS in situ dengan penambahan 20-30 mg K2CO3 padat dan 0,5 ml CDCl3 dan merekam spektrum basa bebas. Bandingkan spektrum yang tidak diketahui dengan spektrum referensi, yang direkam pada transformasi Fourier instrumen pada 90 MHz menggunakan sudut lain dari 18 ° (1 µSec) tanpa penundaan setelah akuisisi data.

B. Kapiler ELEKTROFORESIS (CE)

CE, mirip dengan HPLC, tidak memerlukan derivatisasi atau ekstraksi langkah-langkah, dan karena itu menguntungkan atas GC untuk analisis senyawa ATS. Berbeda dengan HPLC, CE menawarkan kekuatan menyelesaikan lebih tinggi untuk analisis zat terlarut tersebut, yang diterjemahkan ke dalam analisis yang lebih cepat. Penggunaan kapiler dilapisi secara dinamis memberikan peningkatan yang signifikan dalam presisi, efisiensi puncak dan / atau waktu pemisahan untuk ATS senyawa lebih dari metode sebanding menggunakan kapiler uncoated.

tambahan pendekatan kapiler dilapisi secara dinamis dapat memungkinkan untuk analisis kiral cepat sampel menggunakan kapiler yang sama dan sampel botol tapi lari penyangga yang berbeda.

C. SOLID PHASE-MICRO EKSTRAKSI-GAS KROMATOGRAFI (SPME-GC)

SPME (ekstraksi fase padat mikro) adalah teknik persiapan sampel bebas pelarut,yang dapat digunakan untuk analisis headspace atas solusi, atau langsung di atasATS bubuk, atau dapat digunakan untuk (trace) analisis larutan air yang mengandung ATS. SPME biasanya dilakukan dengan jarum suntik khusus dilengkapi dengan silikaserat ditempatkan di atas piston jarum suntik. Serat dilapisi dengan polimer yangfase seperti yang digunakan dalam kolom kapiler. Selama sampling, serat lapisan menyerap senyawa dari fase gas di headspace, atau langsung darifase cair. Banyak lapisan serat yang berbeda yang tersedia untuk analisis ATS dan zat lainnya. Salah satu yang paling digunakan, misalnya, sebuah polydimethylsiloxane (PDMS) serat dilapisi.

Metode headspace

Sebuah sampel ATS berair dibuat basa untuk mengubah amina ke dalam basis bebas,sehingga meningkatkan volatilitas mereka. Sampel dapat tambahan dipanaskan untuk meningkatkan jumlah amina dalam fase gas di atas larutan sampel. Itu jarum suntik dengan serat terkena ditempatkan di ruang atas di atas solusi dandasar gratis ATS diserap pada bahan tersebut. Pada kesetimbangan, diekstrak jumlah setiap senyawa diserap pada bahan tersebut sebanding dengan konsentrasi merekadalam larutan, meskipun dengan koefisien distribusi yang berbeda. Setelah ekstraksiselesai, jarum suntik tersebut dipindahkan ke instrumen analitis yang dipilih. Ketika serat dimasukkan ke dalam dipanaskan pelabuhan GC injector, amina diekstrak termal desorbed. Dalam HPLC, KTK dan CE, campuran pelarut yang terelusi amina membentuk serat.

analisis dari sampel air

Serat dicelupkan langsung ke dalam larutan sampel air, yang dibuat basa untuk melepaskan dasar gratis ATS. Sampel larutan diaduk untuk meningkatkan pertukaran senyawa antara solusi dan serat untuk ekstraksi cepat. Analisis sampel dilakukan dengan cara yang sama seperti yang dijelaskan dalam metode headspace.

D. GAS KROMATOGRAFI-FOURIER TRANSFORM SPEKTROSKOPI INFRAMERAH (GC-FTIR)

GC-FTIR, sebagai teknik ditulis dgn tanda penghubung lain, menyatukan keuntungan dari GC teknik pemisahan dengan kekhususan analit tinggi IR. GC-FTIR dengan cahaya sel aliran pipa tidak memiliki keterbatasan untuk aliran gas pembawa, yang membuatnya ideal untuk digunakan dengan kolom bore lebar pendek, sehingga mengakibatkan analisis efisien dan cepat. Misalnya, ATS yang paling umum dapat dianalisis dalam waktu kurang dari lima menit. Namun, karena teknik ini agak sensitif, sejumlah besar zat harus disuntikkan, dan ketebalan film fase diam sangat penting dalam Agar tidak membebani kolom.

Metode

Persiapan sampel ATS

Persiapan sampel adalah sama seperti untuk analisis GC kualitatif di atas, tetapi target konsentrasi analit harus 1-10 mg / ml.

Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum FTIR analit dengan standar referensi.