i
DISERTASI
EKSPRESI PROTEIN 53 MUTAN DAN B-CELL LYMPHOMA-2 PROTEIN POSITIF SERTA EKSPRESI
CASPASE-3 NEGATIF SEBAGAI FAKTOR RISIKO TERJADINYA KANKER OVARIUM TIPE EPITEL
I NYOMAN GEDE BUDIANA
PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2015
ii
DISERTASI
EKSPRESI PROTEIN 53 MUTAN DAN B-CELL LYMPHOMA-2 PROTEIN POSITIF SERTA EKSPRESI
CASPASE-3 NEGATIF SEBAGAI FAKTOR RISIKO TERJADINYA KANKER OVARIUM TIPE EPITEL
I NYOMAN GEDE BUDIANA NIM : 0990271018
PROGRAM DOKTOR
PROGRAM STUDI ILMU KEDOKTERAN PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR
2015
iii
EKSPRESI PROTEIN 53 MUTAN DAN B-CELL LYMPHOMA-2 PROTEIN POSITIF SERTA EKSPRESI
CASPASE-3 NEGATIF SEBAGAI FAKTOR RISIKO TERJADINYA KANKER OVARIUM TIPE EPITEL
Disertasi untuk Memperoleh Gelar Doktor
pada Program Doktor, Program Studi Ilmu Kedokteran, Program Pascasarjana Universitas Udayana
I NYOMAN GEDE BUDIANA NIM : 0990271018
PROGRAM DOKTOR
PROGRAM STUDI ILMU KEDOKTERAN PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA DENPASAR
2015
iv
v
PENETAPAN PANITIA PENGUJI DISERTASI
Disertasi ini Telah Diuji pada Ujian Tertutup oleh Panitia Penguji Tanggal: 27 April 2015
Panitia Penguji Disertasi Berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana No. : 1120/UN14.4/HK/2015
Tanggal : 13 April 2015
Ketua : Prof. dr. N. Tigeh Suryadhi, MPH, PhD Anggota :
1. Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K) 2. Prof. Drh. I Nyoman Mantik Astawa, PhD 3. Dr. dr. Ida Sri Iswari, SpMK, M.Kes 4. Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, SpPD, KEMD
5. Prof. Dr. dr. Wimpie I Pangkahila, SpAnd, FACCS 6. Prof. dr. Herman Susanto, SpOG(K)
7. Dr. dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si
vi
PERNYATAAN BEBAS PLAGIARISME
Yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : dr. I Nyoman Gede Budiana, SpOG(K) Program Studi : Ilmu Kedokteran
NIM : 0990271018
No. Tlp/No. HP : 08123997401
Email : budiana1971@gmail.com
Judul Proposal : Ekspresi Protein 53 Mutan dan Ekspresi B-Cell Lymphoma-2 Protein Positif serta Ekspresi Caspase-3
Negatif sebagai Faktor Risiko Terjadinya Kanker Ovarium Tipe Epitel
Merupakan hasil karya original yang bisa dipertanggungjawabkan keasliannya dan tidak mengandung unsure plagiarism.
Pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya. Apabila di kemudian hari ditemukan adanya pelanggaran, maka saya bersedia untuk mempertanggungjawabkan sesuai peraturan yang berlaku.
Denpasar, 10 April 2015 Yang membuat pernyataan,
(dr. I Nyoman Gede Budiana, SpOG(K)
vii
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji dan syukur penulis panjatkan kehadapan Ida Sang Hyang Widhi Wasa/Tuhan Yang Maha Kuasa, karena atas asung kerta wara nugraha-Nya, penulis mempunyai kekuatan dan kesehatan lahir batin untuk menjalani pendidikan doktor dan laporan dalam bentuk disertasi ini dapat penulis selesaikan.
Dalam menjalani pendidikan, penulis banyak mendapatkan bimbingan, dukungan, motivasi semangat, dan petunjuk teknis sehingga disertasi ini dapat diselesaikan. Untuk itu, ijinkanlah penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K) selaku promotor, yang dengan penuh perhatian telah memberikan dorongan, semangat, bimbingan, dan saran selama penulis menjalani pendidikan doktor, khususnya dalam penyelesaian disertasi ini. Terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya juga penulis sampaikan kepada Prof. Drh. I Nyoman Mantik Astawa, PhD selaku kopromotor I dan Dr. dr. Ida Sri Iswari, SpMK, M.Kes selaku kopromotor II atas segala perhatian dan kesabarannya telah memberikan bimbingan, semangat, dan saran kepada penulis selama menjalani pendidikan doktor dan dalam penyelesaian disertasi.
Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, SpPD, KEMD, dan mantan Rektor Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. I Made Bakta, SpPD, KHOM, atas kesempatan dan fasilitas yang telah diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan program doktor di Universitas Udayana. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Direktur Program Pascasarjana Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, SpS(K) beserta jajarannya.
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Dr. dr. Bagus Komang Satriyasa, M.Repro dan Dr. dr. Tjokorda Gde Bagus Mahadewa, SpBS(K), M.Kes selaku Ketua dan Sekretaris Program Studi Doktor Ilmu Kedokteran Program Pascasarjana Universitas Udayana serta Dr. dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si dan Dr. dr. I Dewa Made Sukrama, SpMK selaku mantan Ketua dan mantan Sekretaris Program Studi Doktor Ilmu Kedokteran Program Pascasarjana
viii
Universitas Udayana atas kesempatan dan dorongan yang diberikan kepada penulis selama menjadi mahasiswa Program Doktor Ilmu Kedokteran pada Program Pascasarjana Universitas Udayana. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada seluruh staf pegawai Program Studi Doktor Ilmu Kedokteran Program Pascasarjana Universitas Udayana, yaitu Ni Nyoman Arimani, S.Sos, Ni Ketut Partini, S.Sos, Deppy Librata, S.Kom, Luh Komang Ari Lestari, SP, dan I Made Arisandhi, SS, atas bantuannya selama penulis mengikuti pendidikan program doktor.
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Dekan dan mantan Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Udayana, Prof. Dr. dr. Putu Astawa, SpOT(K), M.Kes dan Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, SpPD, KEMD, atas ijin dan kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti pendidikan program doktor.
Demikian juga ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Direktur Utama dan mantan Direktur Utama RSUP Sanglah Denpasar, dr. Anak Ayu Saraswati, MARS dan dr. I Wayan Sutarga, MPHM, atas ijin yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti pendidikan program doktor.
Selesainya disertasi ini tidak terlepas dari bimbingan, masukan, saran- saran, sanggahan, dan koreksi dari tim penguji disertasi. Untuk itu, penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K), Prof. Drh. I Nyoman Mantik Astawa, PhD, Dr. dr. Ida Sri Iswari, SpMK., M.Kes, Prof. Dr. dr. Wimpie I Pangkahila, SpAnd, FAACS, Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, SpPD, KEMD, Prof. dr.
N. Tigeh Suryadhi, MPH, PhD, Prof. dr. Herman Susanto, SpOG(K), dan Dr. dr. I Wayan Putu Sutirta Yasa, M.Si.
Penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada dr. Tjokorda Gde Agung Suwardewa, SpOG(K) dan Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K) selaku Ketua Bagian dan mantan Ketua Bagian/SMF Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar, atas ijin dan kesempatan untuk mengikuti pendidikan program doktor. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada guru-guru dan sejawat di Bagian/SMF Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar, yaitu Prof. Dr. dr. I Gede Putu Surya, SpOG(K), Prof. dr.
ix
Made Kornia Karkata, SpOG(K), Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K), dr.
Ketut Putra Kemara, SpOG, dr. I Putu Gede Wardhiana, SpOG(K), dr. Tjokorda Gde Agung Suwardewa, SpOG(K), dr. Ida Bagus Upadana Pemaron, SpOG, dr. I Gusti Putu Mayun Mayura, SpOG, dr. Ida Bagus Putra Adnyana, SpOG(K), dr.
Made Suyasa Jaya, SpOG(K), dr. Anak Agung Ngurah Jaya Kusuma, SpOG(K), dr. Anak Agung Ngurah Anantasika, SpOG(K), Dr. dr. I Wayan Megadhana, SpOG(K), dr. Nono Tondohusodo, SpAnd, dr. I Nyoman Haryasa Sanjaya, SpOG(K), MARS, dr. Ketut Surya Negara, SpOG(K), MARS, dr. Putu Doster Mahayasa, SpOG(K), Dr. dr. Ida Bagus Gde Fajar Manuaba, SpOG, MARS, Dr.
dr. I Nyoman Bayu Mahendra, SpOG, dr. I Gede Mega Putra, SpOG(K), dr.
Anom Suardika, SpOG(K), dr. I Gede Ngurah Harry Wijaya Surya, SpOG, dr. I Made Darmayasa, SpOG(K), dr. I Made Bagus Dwi Aryana, SpOG(K), dr. I Wayan Artana Putra, SpOG(K), dr. Anak Agung Gede Putra Wiradnyana, SpOG(K), dr. Jacqueline Sudiman, GradDipRepSc, MRepSci, PhD, dr. Kadek Fajar Marta, M.Biomed, SpOG, dr. Endang Sri Widiyanti, M.Biomed, SpOG, dr. I Gede Sastra Winata, M.Biomed, SpOG, dan dr. Ryan Saktika Mulyana, M.Biomed, SpOG, atas segala dukungan yang telah diberikan kepada penulis selama menjalani pendidikan doktor.
Ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya penulis sampaikan kepada guru-guru dan sejawat di Divisi Onkologi Ginekologi, Bagian/SMF Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar, yaitu Prof. Dr. dr. Ketut Suwiyoga, SpOG(K), dr. Ida Bagus Upadana Pemaron, SpOG, dr. I Gusti Putu Mayun Mayura, SpOG, Dr. dr. I Nyoman Bayu Mahendra, SpOG, dan dr. I Gede Sastra Winata, M.Biomed, SpOG, yang banyak memberikan sumbangan moril dan materil kepada penulis serta banyak membantu mengambil alih tugas dan kewajiban pelayanan di RSUP Sanglah Denpasar selama penulis mengikuti pendidikan Program Studi Doktor Ilmu Kedokteran Universitas Udayana.
Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada seluruh staf pegawai di Bagian/SMF Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar, yaitu Dra. Luh Ketut Ariasih, Ni Wayan Suastini, SH, Gusti Ayu Made
x
Budiyasih, SE, A.A. Sri Agung Ardaningrum, SE, Luh Putu Rika Suantari, SE, M. Nina Trisnawati, Amd, Drs. Ketut Tunas, M.Si, Diana, I Wayan Dwipa, Luh Dina Mariati, dan Ni Made Kesumawati, atas bantuannya selama penulis menjalani pendidikan dan menyelesaikan disertasi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada seluruh peserta Program Pendidikan Dokter Spesialis I Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar atas segala bantuannya sehingga penelitian dan penulisan disertasi ini dapat diselesaikan.
Ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada dr. A.A.A. Susraini, SpPA dan dr. Luh Putu Iin Indrayani Maker, SpPA selaku Ketua Bagian dan Kepala Instalasi Laboratorium Patologi Anatomi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar.
Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Dr. dr. IG.A. Sri Mahendra Dewi, SpPA(K), dr. Ni Wayan Winarti, SpPA, Alit Nursarih, dan seluruh staf pegawai Laboratorium Patologi Aanatomi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar yang telah membantu penulis dalam pelaksanaan dan prosesing bahan-bahan penelitian.
Penulis tidak lupa menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada semua penderita dan keluarganya yang juga merupakan guru bagi penulis.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada seluruh guru-guru yang telah memberikan bimbingan mulai dari Sekolah Dasar sampai Perguruan Tinggi, yang telah dengan sabar mendidik, memberikan ilmu pengetahuan, etika, dan moral kepada penulis. Ucapan terima kasih dan sembah sujud penulis haturkan kepada kedua orang tua penulis, I Wayan Susun dan Ni Nengah Puji, sebagai Guru Rupaka, yang telah mengasuh dan membesarkan penulis, memberikan doa restu, nasihat, bimbingan, dorongan, kasih sayang, pengertian, dan kesabaran selama penulis menjalani pendidikan doktor bahkan sepanjang hayat penulis. Demikian juga ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Bapak dan Ibu mertua, Raka Suwasta dan Ni Made Ripek, yang dengan penuh kasih sayang memberikan dukungan selama penulis menjalani pendidikan doktor.
Ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya penulis sampaikan
xi
juga kepada saudara-saudara penulis, Ir. I Gede Arya Suyata, dr. I Made Sutresna, SpB, dan Ir. I Ketut Putu Suparta, yang telah banyak memberikan dukungan moril dan materiil kepada penulis selama menjalani pendidikan doktor. Terakhir tetapi yang utama, kepada istri tercinta, Ni Made Evawani Utari, ST, dan anak-anakku tersayang, I Gede Bagus Wikarna Satyabrata, I Made Bagus Nugraha Jaya Wisesa, dan Ni Nyoman Pradnya Prameswari, yang dengan penuh pengertian dan kesabaran telah memberikan dorongan moril, semangat, doa, kasih sayang, dan pengorbanan selama penulis menjalani pendidikan doktor di Program Studi Doktor Ilmu Kedokteran Universitas Udayana.
Akhirnya, ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya penulis sampaikan kepada semua pihak, yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu, atas segala dukungan moril dan materiil yang telah diberikan kepada penulis selama menjalani pendidikan doktor, semoga Ida Sang Hyang Widhi Wasa/Tuhan Yang Maha Esa membalas budi baik yang telah diberikan, serta senantiasa melimpahkan rahmat-Nya kepada kita semua sehingga dapat bekerja dan mengabdi sesuai swadarma-nya masing-masing. Terima kasih.
Denpasar, 10 April 2015
Penulis
xii ABSTRAK
EKSPRESI PROTEIN 53 MUTAN DAN B-CELL LYMPHOMA-2 PROTEIN POSITIF SERTA EKSPRESI CASPASE-3 NEGATIF SEBAGAI FAKTOR
RISIKO TERJADINYA KANKER OVARIUM TIPE EPITEL
Selama tiga dasawarsa terakhir, kanker ovarium masih merupakan masalah kesehatan perempuan di dunia, termasuk Indonesia. Hal ini terkait dengan tingginya angka insiden dan angka kematian yang diakibatkan oleh kanker ovarium. Beberapa upaya terapi seperti operasi, kemoterapi, dan radiasi, sebagai terapi tunggal atau kombinasi juga belum memberikan hasil yang memuaskan. Di sisi lain, pengetahuan dan penelitian-penelitian di bidang biologi molekuler semakin maju, termasuk tentang protein-protein yang terlibat pada mekanisme apoptosis seperti p53, Bcl-2, dan caspase-3. Penanganan kanker ovarium melalui pemahaman terhadap mekanisme karsinogenesisnya dan besarnya risiko terjadinya kanker ovarium tipe epitel pada ekspresi ketiga protein tersebut lebih menjanjikan di masa yang akan datang. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan ekspresi p53 mutan dan Bcl-2 positif dan ekspresi caspase-3 negatif sebagai faktor risiko terjadinya kanker ovarium tipe epitel.
Rancangan penelitian ini adalah kasus kontrol. Penelitian dilaksanakan di Bagian/SMF Obstetri dan Ginekologi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar dan Laboratorium Patologi Anatomi FK UNUD/RSUP Sanglah Denpasar. Penelitian dilaksanakan dari bulan Januari 2013 sampai Desember 2014. Sampel yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi dibagi menjadi dua kelompok. Kelompok kasus adalah pasien-pasien dengan kanker ovarium tipe epitel sedangkan kelompok kontrol adalah pasien-pasien dengan tumor jinak ovarium tipe epitel.
Ekspresi p53 mutan, Bcl-2, dan caspase-3 diperiksa secara imunohistokimia.
Telah dilakukan penelitian terhadap 25 kasus dan 25 kontrol.
Karakterisitik kelompok kasus dan kelompok kontrol berdasarkan umur adalah 50,44±7,94 tahun dan 48,40±6,52 tahun, paritas 1,20±0,91 dan 1,36±0,76, Indeks Massa Tubuh (IMT) 22,66±5,11 dan 22,82±2,93, riwayat kontrasepsi oral 8% dan 4%, riwayat keluarga 0% dan 4%. Tidak ada sampel penelitian dengan riwayat pemakai obat-obat induksi ovulasi dan terapi sulih hormon pada kedua kelompok penelitian. Semua karakteristik sampel pada kedua kelompok penelitian dengan nilai p>0,05. Odds ratio (OR) ekspresi p53 mutan positif, ekspresi Bcl-2 positif, dan caspase-3 negatif masing-masing adalah 5,41 (IK 95%=1,02-28,79; p=0,03), 5,76 (IK 95%=1,36-24,36; p=0,01), 6,47 (IK 95%=1,23-34,01; p=0,02).
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekspresi p53 mutan dan Bcl-2 positif, serta ekspresi caspase-3 negatif merupakan faktor risiko terjadinya kanker ovarium tipe epitel.
Kata kunci: kanker ovarium tipe epitel, ekspresi p53 mutan, ekspresi Bcl-2, ekspresi caspase-3.
xiii ABSTRACT
POSITIVE EXPRESSION OF MUTANT PROTEIN 53 AND B-CELL LYMPHOMA-2 PROTEIN AND NEGATIVE EXPRESSION OF CASPASE-3 AS RISK FACTORS FOR EPITHELIAL OVARIAN CANCER
Over the past three decades, ovarian cancer remains to be women’s health problem in the world, including Indonesia. It has been associated with high rates of incidence and mortality caused by ovarian cancer. Several attempts of therapies such as surgery, chemotherapy, and radiation, either as a single or in combination therapies remain unsatisfactory. On the other hand, knowledge and researches in molecular biology is advancing, including proteins that involved in apoptosis mechanisms such as p53, Bcl-2, and caspase-3. Treatment of ovarian cancer through the understanding of carcinogenesis mechanism and the risk of epithelial ovarian cancer in the expression of these proteins are more promising in the future. This study aimed to demonstrate mutant p53 expression and positive Bcl-2 and negative caspase-3 expression as risk factors for epithelial ovarian cancer.
Case control was used as a study design. The research was located in the Department of Obstetrics and Gynecology, Faculty of Medicine, Udayana University/Sanglah General Hospital and Laboratory of Anatomical Pathology, Faculty of Medicine, Udayana University/Sanglah General Hospital in Denpasar.
The research was conducted from January 2013 to December 2014. The samples that qualified from inclusion and exclusion criteria were divided into two groups.
Cases group were patients with epithelial ovarian cancer and the control group were patients with benign ovarian epithelial tumors. Expression of mutant p53, Bcl-2, and caspase-3 examined by immunohistochemistry.
The study was conducted on 25 cases and 25 controls. Characteristics of the case group and the control group based on age was 50.44 ± 7.94 years and 48.40 ± 6.52 years, parity was 1.20 ± 0.91 and 1.36 ± 0.76, body mass index (BMI) was 22.66 ± 5.11 and 22.82 ± 2.93, history of oral contraceptive was 8%
and 4%, a family history was 0% and 4%, respectively. Neither sample with history of ovulation induction drug nor hormone replacement therapy in both study groups. All the characteristics of the samples in both study groups, with p>
0.05. Odds ratio (OR) of positive mutant p53 expression, positive Bcl-2 expression, and negative caspase-3 expression were respectively 5.41 (95% CI = 1.02 to 28.79; p = 0.03), 5, 76 (95% CI = 1.36 to 24.36; p = 0.01), 6.47 (95% CI = 1.23 to 34.01; p = 0.02).
Conclusion of this study are the positive expression of mutant p53 and Bcl-2, and negative expression of caspase-3 are risk factors for epithelial ovarian cancer.
Keywords: epithelial ovarian cancer, mutant p53 expression, Bcl-2 expression, caspase-3 expression.
xiv DAFTAR ISI
Halaman
Sampul Dalam... i
Lembar Pengesahan... iii
Penetapan Panitia Penguji Disertasi... iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIARISME... v
UCAPAN TERIMA KASIH... vi
ABSTRAK... xi
DAFTAR ISI... xiii
DAFTAR TABEL... xvii
DAFTAR GAMBAR... xviii
DAFTAR SINGKATAN... xix
DAFTAR LAMPIRAN... xxi
BAB I PENDAHULUAN... 1
1.1 Latar Belakang Masalah... 1
1.2 Rumusan Masalah... 7
1.3 Tujuan Penelitian... 8
1.3.1 Tujuan umum... 8
1.3.2 Tujuan khusus... 8
1.4 Manfaat Penelitian... 8
1.4.1 Manfaat keilmuan... 8
1.4.2 Manfaat praktis... 9
BAB II KAJIAN PUSTAKA... 10
2.1 Kanker Ovarium... 10
2.1.1 Epidemiologi... 10
2.1.2 Kanker ovarium dalam keluarga... 15
2.2 Protein 53 (p53)... 17
2.2.1 Protein penekan tumor p53... 17
2.2.2 Struktur p53... 20
2.2.2.1 Bagian N-terminal... 21
xv
2.2.2.2 Bagian pengikat DNA... 22
2.2.2.3 Bagian C-terminal... 22
2.2.3 Peran p53... 23
2.2.3.1 Regulasi siklus sel dan perbaikan kerusakan DNA... 24
2.2.3.1 Apoptosis... 27
2.2.4 Protein 53 dan kanker ovarium... 31
2.3 Protein Bcl-2... 33
2.4 Caspase-3... 36
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP PENELITIAN, DAN HIPOTESIS PENELITIAN... 42
3.1 Kerangka Berpikir... 42
3.2 Konsep Penelitian... 44
3.3 Hipotesis Penelitian... 45
BAB IV METODE PENELITIAN... 46
4.1 Rancangan Penelitian... 46
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian... 47
4.2.1 Lokasi penelitian... 47
4.2.2 Waktu penelitian... 47
4.3 Populasi, Sampel Penelitian, dan Jumlah Sampel... 47
4.3.1 Populasi penelitian... 47
4.3.2 Sampel penelitian... 47
4.3.3 Besar sampel... 48
4.4 Identifikasi Variabel, Hubungan Antar Variabel, dan Definisi Operasional Variabel... 49
4.4.1 Identifikasi variabel... 49
4.4.2 Hubungan antar variabel... 49
4.4.3 Definisi operasional variabel... 50
4.5 Bahan-Bahan Penelitian... 53
4.6 Alur Penelitian dan Prosedur Pengumpulan Sampel Penelitian... 53
4.6.1 Alur penelitian... 53
4.6.2 Prosedur pengumpulan sampel penelitian... 54
xvi
4.7 Instrumen Penelitian dan Metode Pemeriksaan Sampel Penelitian... 55
4.7.1 Instrumen penelitian... 55
4.7.2 Metode pemeriksaan sampel penelitian... 56
4.8 Pengumpulan Data dan Analisis Data... 58
4.8.1 Pengumpulan data... 58
4.8.2 Analisis data... 58
BAB V HASILPENELITIAN... 59
5.1 Distribusi Umur, Paritas, Indeks Masa Tubuh (IMT), Kontrasepsi Oral, Riwayat Keluarga, Induksi Ovulasi, dan Terapi Sulih Hormon pada Kedua Kelompok... 59
5.2 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi p53 Positif... 61
5.3 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Bcl-2 Positif... 62
5.4 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Caspase-3 Negatif... 63
BAB VI PEMBAHASAN... 65
6.1 Distribusi Karakteristik Umur, Paritas, Indeks Massa Tubuh (IMT), Riwayat Keluarga, Riwayat Pemakaian Kontrasepsi Oral, Riwayat Pemakaian Obat-Obat Induksi Ovulasi, dan Riwayat Terapi Sulih Hormon pada Kedua Kelompok... 66
6.1.1 Distribusi umur... 66
6.1.2 Distribusi paritas... 69
6.1.3 Distribusi indeks massa tubuh (IMT)... 71
6.1.4 Distribusi riwayat keluarga... 74
6.1.5 Distribusi riwayat pemakaian kontrasepsi oral... 76
6.1.6 Distribusi riwayat pemakaian obat-obat induksi ovulasi... 78
6.1.7 Distribusi riwayat pemakaian terapi sulih hormon... 80
6.2 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi p53 Positif... 82
6.3 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Bcl-2 Positif... 89
6.4 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Caspase-3 Negatif... 92
6.5 Temuan Baru (Novelty)... 96
xvii
6.5.1 Risiko kanker ovarium tipe epitel... 96
6.5.2 Patogenesis molekuler kanker ovarium tipe epitel... 97
6.6 Keterbatasan Penelitian... 99
BAB VII SIMPULAN DAN SARAN... 101
7.1 Simpulan... 101
7.2 Saran... 101
DAFTAR PUSTAKA... 103
LAMPIRAN... 121
xviii
DAFTAR TABEL
Halaman 2.1 Pengelompokan Keluarga Caspase... 38 5.1 Distribusi Umur, Paritas, dan IMT pada Kedua Kelompok... 60 5.2 Distribusi Riwayat Kontrasepsi Oral, Riwayat Keluarga, Riwayat
Pemakaian Obat-Obat Induksi Ovulasi, dan Terapi Sulih Hormon... 60 5.3 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi p53 Positif... 61 5.4 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Bcl-2 Positif... 62 5.5 Risiko Kanker Ovarium Tipe Epitel pada Ekspresi Caspase-3 Negatif... 64
xix
DAFTAR GAMBAR
Halaman
2.1 Struktur p53... 21
2.2 Mekanisme p53 Menghentikan Siklus Sel pada Fase G1-S... 25
2.3 Mekanisme p53 Menghentikan Siklus Sel pada Fase G2-M... 26
2.4 Mekanisme Apoptosis yang Dimediasi oleh p53... 32
2.5 Protein-Protein yang Termasuk Keluarga Bcl-2... 36
2.6 Struktur Caspase-3... 40
2.7 Skema Aktivasi Caspase-3 dan Caspase Executioner Lainnya... 41
3.1 Konsep Penelitian... 44
4.1 Rancangan Penelitian... 46
4.2 Hubungan Antar Variabel... 49
4.3 Alur Penelitian... 55
5.1 Ekspresi p53 Negatif... 62
5.2 Ekspresi p53 Positif... 62
5.3 Ekspresi Bcl-2 Negatif... 63
5.4 Ekspresi Bcl-2 Positif... 63
5.5 Ekspresi caspase-3 Negatif... 64
5.6 Ekspresi caspase-3 Positif... 64
6.1 Hubungan antara Variabel-Variabel Penelitian... 99
xx
DAFTAR SINGKATAN
ACOG : American College of Obstetric and Gynecologic AIF : Apoptosis inducing factor
Apaf-1 : Apoptosis protease-activating factor-1
Asp : Aspartat
ATM : Ataxia telangiectasia mutated
ATR : Ataxia telangiectasia and Rad3 related Bcl-2 : B-cell lymphoma-2 protein
BH : Bcl-2 homology
BRCA1 : Breast Cancer Antigen 1 BRCA2 : Breast Cancer Antigen 2 CA125 : Cancer Antigen 125 CAK : cdk-activating kinase
CARD : Caspase activated and recruitment domain Caspase-3 : Cystein aspartic acid protease-3
Cdc2 : Cell division cycle-2 cdk : cyclin-dependent kinase CED : Caenorhabditis elegans Chk2 : Checkpoint kinase-2 DBD : DNA binding domain DED : Death effector domain
DISC : Death-inducing signaling complex DNA : Deoxiribose Nucleic Acid
ER-α : Estrogen receptor-α ER-β : Estrogen receptor-β
FADD : Fas associated death domain FAS : Fatty acid syntetase
FASL : Fatty acid syntetase ligand
GADD45 : Growth arrest and DNA damaged-45
Glu : Glutamat
xxi Gran B : Granzyme B
HBOC : Hereditary breast and ovarian cancer HNPCC : Hereditary non-polyposis colorectal cancer IAPs : Inhibitor of apoptosis proteins
ICAD : Inhibitor of caspase activated deoxyribonuclease
IL : Interleukin
IMT : Indeks Massa Tubuh
Ipaf : Interleukin-1β-converting-enzyme protease-activating factor
NCI : the National Cancer Institute NES : Nuclear export sequence
NOD-LRR : Nucleotide-binding oligomerization domain-leucine-rich repeat
PARP : Poly(ADP-ribose) polymerase
P53 : Protein 53
pRb : protein Retinoblastoma
PUMA : p53-upregulated modulator of apoptosis SEER : the Surveillance Epidemiology and End Results TNF : Tumor necrosis factor
TRAIL : TNF-related apoptosis-inducing ligand VEGF : Vascular endothelial growth factor
wt : Wild type
3-D : Tiga dimensi
xxii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1 Surat Keterangan Kelaikan Etik... 121
2 Surat Ijin Pelaksanaan Penelitian... 122
3 Lembar Informasi Pasien... 123
4 Lembar Informed Consent... 128
5 Lembar Pengumpulan Data... 129
6 Klasifikasi Histologis Tumor Ovarium Tipe Epitel... 131
7 Prosedur Pemeriksaan Histopatologi dan Pulasan Imunohistokimia... 133
8 Tabulasi Data Penelitian... 136
9 Hasil Analisis Statistik... 138
