PEMERIKSAAN CAIRAN ASCITES

(1)

TES DAN INTERPRETASI

CAIRAN ASITES

(2)

PENDAHULUAN

Asites :

  

 Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang

intraperitoneal (rongga serosa) oleh berbagai

sebab. sebab. sebab. sebab.   

 Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1-Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1--

-10 ml cairan

10 ml cairan untuk membasahi lapisan atauuntuk membasahi lapisan atau

10 ml cairan

tunika serosa. tunika serosa. tunika serosa. tunika serosa.   

 Keseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitoneal

tergantung tekanan koloid osmotik dalam

kapiler, permeabilitas dinding kapiler dan

tekanan hidrostatik.

(3)

PENDAHULUAN

Asites :

  

 Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang Akumulasi cairan yang berlebihan di ruang

intraperitoneal (rongga serosa) oleh berbagai

sebab. sebab. sebab. sebab.   

 Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1-Normal ruang intra peritoneal hanya berisi 1--

-10 ml cairan

10 ml cairan

tunika serosa. tunika serosa. tunika serosa. tunika serosa.   

 Keseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitonealKeseimbangan cairan intraperitoneal

tergantung tekanan koloid osmotik dalam

kapiler, permeabilitas dinding kapiler dan

tekanan hidrostatik.

(4)

Patogenesis terbentuknya asites :

Peningg

Peninggian ian permeabilitas permeabilitas kapiler kapiler karenakarena

Peningg

Peninggian ian permeabilitas permeabilitas kapiler kapiler karenakarena

inflamasi, yang disertai kenaikan kadar protein

darah lebih dari 3mg/dl.

Penurun

Penurunan tekanan koloid an tekanan koloid osmotik, karenaosmotik, karena

Penurun

Penurunan tekanan koloid an tekanan koloid osmotik, karenaosmotik, karena

gangguan sintesis albumin, penurunan kadar

protein darah kurang dari 2,5mg/dl.

Peninggian tekanan hidrostatik karena peninggian

tekanan vena misalnya pada payah jantung

kongestif atau pada sirosis hepatis.

Hambatan alira

Hambatan aliran limn limfe karena tumor, inflamasi,fe karena tumor, inflamasi,

Hambatan alira

Hambatan aliran limn limfe karena tumor, inflamasi,fe karena tumor, inflamasi,

fibrosis, dll

Perforasi organ atau ruptur pembuluh darah oleh

trauma, misalnya perforasi usus.

(5)

M

ETODE :

M

ETODE :

Pengambilan sampel cairan asites dilakukan

dengan punksi abdominal/peritoneal :

Indikasi punksi abdominal :

Indikasi Terapeutik

Indikasi Terapeutik : Untuk mengurangi

: Untuk mengurangi

tekanan intra abdominal.

Indikasi Diagnostik

Indikasi Diagnostik : Untuk menentukan

: Untuk menentukan

diagnosis dan penanganan.

(6)

Persiapan pasien :

±

± Jelaskan tujuan tes dan cara pengambilanJelaskan tujuan tes dan cara pengambilan

sampel. Penjelasan yang tepat mengenai tujuan sampel. Penjelasan yang tepat mengenai tujuan dan cara kerja membantu menimbulkan sikap dan cara kerja membantu menimbulkan sikap koperatif dari penderita dan memudahkan

koperatif dari penderita dan memudahkan dalam melakukan tindakan.

dalam melakukan tindakan. ±

± Buat surat persetujuan tindakan.Buat surat persetujuan tindakan. ±

± MMonitor tanda vital (tensi,nadi) penderitaonitor tanda vital (tensi,nadi) penderita

sebelum, selama dan sesudah pengambilan sebelum, selama dan sesudah pengambilan sampel.

(7)

TES

_M

AKROSKOPI

TES

_M

AKROSKOPI

1.

Volume

2.

Warna dan Kejernihan

3.

Berat jenis

4.

(8)

1. 1. Volume

Volume

Pra analitik :

Persiapan sampel : tidak ada persiapan

khusus

Prinsip tes : makin besar volume cairan

asites menunjukkan besarnya

penekan

penekan--an organ intraperitoneal

an organ intraperitoneal

5,6,7,8

Alat : Gelas ukur .

(9)

Analitik :

Cara kerja : melihat besarnya

volume cairan asites pada gelas ukur

5,6,7,8

Pasca analitik :

Interpretasi :

Volume cairan menunjukkan

beratnya penyakit dan besarnya

penekanan intra abdominal 5,6,7,8

(10)

2. 2. Warna dan kejernihan

Warna dan kejernihan

Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada persiapan

khusus

Prinsip tes : setiap kelainan memberi

warna dan kejernihan yang berbeda.

Alat : tabung yang jernih.

Analitik

Cara kerja : lihat warna dan kejernihan

sampel 5,6,7,8

(11)

Pasca analitik

Interpretasi :

±

± Warna transudat biasanya kekuningWarna transudat biasanya

kekuning--kuningan dan jernih sedang eksudat dapat kuningan dan jernih sedang eksudat dapat berbeda

berbeda--bedabeda ±

± Bilirubin memberi warna kuningBilirubin memberi warna kuning ±

± Darah berwarna merah atau coklatDarah berwarna merah atau coklat ±

± Pus memberi warna putihPus memberi warna putih--kuning dankuning dan keruh

keruh ±

(12)

3. 3. Berat jenis (BJ)

Berat jenis (BJ)

Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada

persiapan khusus

Prinsip tes : menentukan jenis cairan

Alat : Urinometer bila cairannya

banyak, bila sedikit dipakai

refraktometer

(13)

Analitik

Cara kerja : Cara kerja :

BJ yang diukur dengan menggunakan hidrometer BJ yang diukur dengan menggunakan hidrometer atau urinometer, hasil pembacaan pada

atau urinometer, hasil pembacaan pada

urinometer dikoreksi dengan temperatur ruangan urinometer dikoreksi dengan temperatur ruangan seperti pada urinalisa

seperti pada urinalisa

Suhu kamar : Suhu ruangan saat pemeriksaan. Suhu kamar : Suhu ruangan saat pemeriksaan. Suhu tera : suhu yang tertulis pada alat

Suhu tera : suhu yang tertulis pada alat ~ Pengukuran BJ dengan refraktometer ~ Pengukuran BJ dengan refraktometer

Suhu kamar ± suhu tera x 0,001 + BJ pd hidrometer

BJ = ---3

(14)

Cara Kerja : Cara Kerja :

Bersihkan permukaan prisma refraktometer Bersihkan permukaan prisma refraktometer dengan kain yang lembab, kemudian dengan dengan kain yang lembab, kemudian dengan kain kering. Tutup dengan penutupnya, pegang kain kering. Tutup dengan penutupnya, pegang secara horisontal. Teteskan 1 tetes cairan

secara horisontal. Teteskan 1 tetes cairan

asites pada lekukan penutup prisma. Arahkan asites pada lekukan penutup prisma. Arahkan alat ke arah sumber sinar. Fokuskan

alat ke arah sumber sinar. Fokuskan eye piece,eye piece,

langsung baca skala dimana terlihat batas langsung baca skala dimana terlihat batas antara gelap dan terang .

antara gelap dan terang . Pasca analitik :

Pasca analitik : Interpretasi : Interpretasi :

BJ cairan ascites (transudat) umumnya BJ cairan ascites (transudat) umumnya ee

1,018. Bila >1,018 menunjukkan adanya 1,018. Bila >1,018 menunjukkan adanya proses inflamasi (eksudat) .

(15)

4.

4. Bekuan

Bekuan

Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus Prinsip tes : fibrinogen menyebabkan sampel Prinsip tes : fibrinogen menyebabkan sampel membeku.

membeku.

Alat : tabung yang jernih. Alat : tabung yang jernih.

Analitik

Cara kerja : biarkan sampel selama 1 jam, kemudian Cara kerja : biarkan sampel selama 1 jam, kemudian lihat apakah ada bekuan atau tidak.

lihat apakah ada bekuan atau tidak.

Pasca analitik

Interpretasi : Interpretasi :

Bekuan ( + ) : eksudat : ada proses peradangan Bekuan ( + ) : eksudat : ada proses peradangan Bekuan (

(16)

B. TES KI

_M

IA

B. TES KI

_M

IA

Tujuan tes: Membedakan transudat dan eksudat Tujuan tes: Membedakan transudat dan eksudat Pemeriksaan Kimia mencakup :

Pemeriksaan Kimia mencakup :

Tes Rivalta (Tes Seromusin/tes protein Tes Rivalta (Tes Seromusin/tes protein kualitatif)

kualitatif)

Tes protein kuantitatif Tes protein kuantitatif Tes glukosa kuantitatif Tes glukosa kuantitatif

Tes LDH (Laktat Dehidrogenase) kuantitatif Tes LDH (Laktat Dehidrogenase) kuantitatif

(17)

1. 1. Tes Rivalta (tes seromusin/tes

Tes Rivalta (tes seromusin/tes

protein kualitatif)

Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus.

Prinsip tes:

Penambahan asam asetat glacial pada

cairan akan menimbulkan

terjadinya

cairan akan menimbulkan

terjadinya

penggumpalan protein, yang terlihat

sebagai kekeruhan .

(18)

Alat dan bahan :

gelas ukur

pipet tetes

asam asetat glacial

aquades.

Analitik

Cara kerja :

±

±Campurkan asam asetat glasial 2 tetesCampurkan asam asetat glasial 2 tetes dalam aquades 100 ml.

dalam aquades 100 ml. ±

±Teteskan setetes cairan asites padaTeteskan setetes cairan asites pada permukaan larutan tersebut.

(19)

Pasca analitik

Interpretasi :

-- Positif (terbentuk awan putih kebiruan)

Positif (terbentuk awan putih kebiruan)

p

eksudat

-- Negatif (tidak terbentuk awan putih)

Negatif (tidak terbentuk awan putih)

p

transudat 6,7,8 .

(20)

Tes Protein (Kuantitatif)

Pra analitik Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus.

Metode semi otomatis

Prinsip tes : Protein dengan ion Cuprum (Cu) Prinsip tes : Protein dengan ion Cuprum (Cu)

dalam larutan alkalis akan dalam larutan alkalis akan

membentuk kompleks senyawa membentuk kompleks senyawa yang berwarna ungu kebiruan. yang berwarna ungu kebiruan. Absorban warna yang dihasilkan Absorban warna yang dihasilkan

dibaca pada panjang gelombang 540 dibaca pada panjang gelombang 540 nm.5,7

(21)

Alat dan bahan metode semiotomatik:

Fotometer Fotometer

Pipet ukur 5 ml Pipet ukur 5 ml

Pipet mikro 50 ul,250ul Pipet mikro 50 ul,250ul Inkubator 37

Inkubator 37rrCC

Pipet volumetrik 50 ml Pipet volumetrik 50 ml

Reagen : NaOH 6 mol/liter Reagen : NaOH 6 mol/liter Reagen Biuret

Reagen Biuret Larutan NaCl

Larutan NaCl--Na azideNa azide

Larutan standar Protein 100g/l Larutan standar Protein 100g/l Reagen blanko biuret

(22)

Analitik

Cara kerja Semiotomatik

Pipetkan kedalam tabung

Pipetkan kedalam tabung--tabung sbb:

tabung sbb:

Larutan Blanko reagen Blanko standar standar sampel Blanko

sampel R eagen biuret 2,5 ml - 2,5 ml 2,5 ml -R eagen blanko - 2,5 ml - - 2,5 ml Biuret Protein Standar - 50 ul 50 ul - -100g/l Sampel pasien - - - 50ul 50 ul Akuades 50 ul - - -

(23)

-Perhitungan Semiotomatik :

Perhitungan Semiotomatik :

Kadar Protein :

Kadar Protein : T

T x 100 g/l

x 100 g/l

S



T = Absorban sampel

T = Absorban sampel -- absorban

absorban

blanko

sampel

sampel ±

± absorban

absorban

blanko reagen

S = Absorban standar

S = Absorban standar ±

± absorban

absorban

blanko

standar

(24)

b. Cara otomatis

Pra analitik

Persiapan sampel : tidak ada

persiapan

khusus.

Prinsip tes:

Protein + Cu+

Cu

Protein + Cu+

Cu--Protein kompleks

Protein kompleks

Pembacaan dilakukan dengan

fotometer

(25)

Alat dan bahan cara otomatis :

Pipet mikro 500 ul

Tabung mikro

Rak tabung, rak reagen

Alat otomatis Cobas

M

ira

Alat otomatis Cobas

M

ira

Reagen 1: Reagen Blank

Reagen 2 : Reagen Biuret

(26)

Analitik

Masukkan 500 ul sampel cairan asites

Masukkan 500 ul sampel cairan asites ke dalam tabung mikro.

ke dalam tabung mikro.

Letakkan tabung mikro pada rak tabung. Letakkan tabung mikro pada rak tabung. Siapkan reagen pada rak reagen

Siapkan reagen pada rak reagen

masukkan dalam alat otomatis Cobas masukkan dalam alat otomatis Cobas

Mira.

Buat program untuk pemeriksaan Buat program untuk pemeriksaan protein. Selanjutnya pemeriksaan protein. Selanjutnya pemeriksaan berjalan secara otomatis.

(27)

Pasca analitik :

Interpretasi :

Kadar protein < 3 mg/dl : transudat

Kadar protein

(28)

3. Tes glukosa kuantitatif

Pra analitik

±

± Persiapan sampel : tidak ada persiapan khususPersiapan sampel : tidak ada persiapan khusus 6,7,9

6,7,9 ±

± MMetode : Heksokinase.etode : Heksokinase.

Akibat penambahan reagen terhadap sampel

yang mengandung glukosa

(29)

Prinsip tes :

HK HK Glukosa + ATP

Glukosa + ATP GG--66--P + ADPP + ADP

Heksokinase mengkatalisasi fosforilase glukosa Heksokinase mengkatalisasi fosforilase glukosa menjadi glukosa

menjadi glukosa--66 --fosfatase oleh ATPfosfatase oleh ATP G

G--66--PDHPDH G

G--66--P + NADP P + NADP gluconategluconate--66--P + NADPHP + NADPH + H

+ H

Konsentrasi glukosa diukur dengan fotometer. Konsentrasi glukosa diukur dengan fotometer.

(30)

Alat dan bahan:

Pipet mikro 500 ul

Tabung mikro

Rak tabung

Reagen 1 : Buffer/ATP/NADP

Reagen 2 : HK/G

Reagen 2 : HK/G--6

6--PDH

PDH

Alat otomatis Cobas

M

ira.

Alat otomatis Cobas

M

ira.

(31)

Analitik

Cara Kerja : Cara Kerja :

Masukkan 500 ul sampel cairan asites ke

Masukkan 500 ul sampel cairan asites ke dalam tabung mikro.

dalam tabung mikro.

Letakkan tabung mikro pada rak tabung. Letakkan tabung mikro pada rak tabung.

Siapkan reagen pada rak reagen masukkan Siapkan reagen pada rak reagen masukkan dalam alat otomatis Cobas Mira.

dalam alat otomatis Cobas Mira. Buat program untuk pemeriksaan. Buat program untuk pemeriksaan.

Selanjutnya pemeriksaan berjalan secara Selanjutnya pemeriksaan berjalan secara otomatis.

(32)

Pasca analitik:

Interpretasi :

Kadar glukosa = glukosa plasma:

transudat

Kadar glukosa > glukosa plasma :

eksudat

(33)

4. Tes LDH kuantitatif

Pra Analitik Pra Analitik

Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Prinsip tes :

Prinsip tes :

Kinetik UV Pyruvate + NADH + H+ LDH L Kinetik UV Pyruvate + NADH + H+ LDH L--Laktat + NAD

Laktat + NAD++

NADH akan mengoksidasi secara langsung NADH akan mengoksidasi secara langsung dengan bantuan aktivasi LDH dan diukur dengan bantuan aktivasi LDH dan diukur dengan fotometer.

(34)

Alat dan bahan:

±

± Pipet mikro 500Pipet mikro 500QQll

±

± Tabung mikroTabung mikro ±

± Rak tabungRak tabung ±

± Alat otomatis Cobas Alat otomatis Cobas MMiraira ±

± Reagen 1 : Buffer/ATP/NADPReagen 1 : Buffer/ATP/NADP ±

(35)

Analitik

Masukkan 500

Masukkan 500QQl sampel cairan asites kel sampel cairan asites ke dalam tabung mikro.

dalam tabung mikro.

Letakkan tabung mikro pada rak tabung. Letakkan tabung mikro pada rak tabung.

Siapkan reagen pada rak reagen masukkan Siapkan reagen pada rak reagen masukkan dalam alat otomatis Cobas Mira.

dalam alat otomatis Cobas Mira.

Kalau terjadi kesukaran dalam membedakan Kalau terjadi kesukaran dalam membedakan eksudat dan transudat maka biasanya

eksudat dan transudat maka biasanya dilakukan tes LDH.10

(36)

Pasca analitik

Interpretasi :

Bila kadar LDH kurang dari 200IU/l

adalah transudat

Kadar LDH sama atau lebih dari 200IU/l

adalah eksudat.

(37)

TES KI

_M

IA TA

_M

BAHAN UNTUK

TES KI

_M

IA TA

_M

BAHAN UNTUK

CAIRAN ASITES :

Enzim amilase

Alkali fosfatase

Laktat

Ureum kreatinin

Amonia

Bilirubin

(38)

1. 1. Tes enzim amilase

Tes enzim amilase

Pemeriksaan rutin Pemeriksaan rutin

Dilakukan bila ada dugaan asites yang Dilakukan bila ada dugaan asites yang disebabkan pankreatitis, pseudokistik disebabkan pankreatitis, pseudokistik pankreas dan perforasi pankreas atau pankreas dan perforasi pankreas atau gastroduodenal.

gastroduodenal.

Nilai normal enzim amilase pada cairan Nilai normal enzim amilase pada cairan asites sama dengan nilai normal pada asites sama dengan nilai normal pada plasma darah.

plasma darah.

Bila terdapat peningkatan enzim amilase Bila terdapat peningkatan enzim amilase lebih tiga kali enzim amilase plasma

lebih tiga kali enzim amilase plasma

menunjukkan adanya keadaan patologis menunjukkan adanya keadaan patologis diatas.

(39)

2.

2. Tes Alkali fosfataseTes Alkali fosfatase

Dilakukan bila ada dugaan ruptur gaster, Dilakukan bila ada dugaan ruptur gaster, nilai alkali fosfatase >10 IU/l. 5

nilai alkali fosfatase >10 IU/l. 5

3.

3. Tes LaktatTes Laktat

Dilakukan bila ada dugaan peritonitis Dilakukan bila ada dugaan peritonitis bakterial. Nilai laktat pada peritonitis bakterial. Nilai laktat pada peritonitis bakterial 4,44mmol/l. 5

bakterial 4,44mmol/l. 5

4.

4. Tes Ureum KreatininTes Ureum Kreatinin

Dilakukan bila ada dugaan asites yang Dilakukan bila ada dugaan asites yang disebabkan oleh ruptur traktur urinarius, disebabkan oleh ruptur traktur urinarius, misalnya pada ruptur buli

misalnya pada ruptur buli--buli. Pada ruptur buli. Pada ruptur buli

buli--buli didapatkan nilai ureum kreatininbuli didapatkan nilai ureum kreatinin cairan asites lebih dari ureum kreatinin cairan asites lebih dari ureum kreatinin serum.

(40)

5.

Tes Amonia

Dilakukan bila ada dugaan asites yang

disebabkan oleh perforasi ulkus

peptik, ruptur appendiks, strangulasi

usus dan ruptur buli

usus dan ruptur buli--buli. Nilai amonia

buli. Nilai amonia

cairan asites pada keadaan tersebut

lebih dari amonia serum.

6.

Tes Bilirubin

Dilakukan bila ada dugaan asites yang

disebabkan oleh oleh ruptur vesica

fellea, nilai bilirubin lebih dari 6,0mg/dl.

(41)

C. TES

_M

IKROSKOPI

C. TES

_M

IKROSKOPI

1.

1. Hitung Jumlah selHitung Jumlah sel

Tujuan : Membedakan transudat dan Tujuan : Membedakan transudat dan eksudat.

eksudat.

Hitung jumlah lekosit dilakukan bila Hitung jumlah lekosit dilakukan bila diduga cairan asites tersebut diduga cairan asites tersebut bersifat

bersifat eksudatif .eksudatif . Pra Analitik :

Pra Analitik :

Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. Prinsip tes

Prinsip tes : menghitung jumlah sel lekosit: menghitung jumlah sel lekosit pada cairan asites

(42)

Alat dan bahan :

Larutan Turk Larutan Turk

kamar hitung Improved New Bauer kamar hitung Improved New Bauer pipet mikro ukuran 20ul, 200ul

pipet mikro ukuran 20ul, 200ul mikroskop. mikroskop. Analitik : Analitik : Cara kerja : Cara kerja :

Encerkan cairan asites dengan larutan Turk Encerkan cairan asites dengan larutan Turk dengan pengenceran 10 kali.

dengan pengenceran 10 kali.

Hasil pengenceran diteteskan pada kamar Hasil pengenceran diteteskan pada kamar hitung, kemudian dibaca di bawah mikroskop hitung, kemudian dibaca di bawah mikroskop pada empat kotak lekosit, hasil perhitungan pada empat kotak lekosit, hasil perhitungan dikali 25/mm3 .

(43)

Pasca analitik :

Interpretasi : Interpretasi :

Lebih dari 80% transudat dan kurang dari 20 Lebih dari 80% transudat dan kurang dari 20 % eksudat menunjukkan jumlah lekosit <

% eksudat menunjukkan jumlah lekosit < 1000/mm 3

1000/mm 3

Jumlah lekosit > 10.000/mm 3 dijumpai Jumlah lekosit > 10.000/mm 3 dijumpai pada pankreatitis.

pada pankreatitis. Jumlah lekosit 25

Jumlah lekosit 25--100.000/mm3 dijumpai100.000/mm3 dijumpai pada peritonitis bacterial

pada peritonitis bacterial Jumlah lekosit 5

Jumlah lekosit 5--10.000/mm3 dijumpai pada10.000/mm3 dijumpai pada peritonitis TB

(44)

2. Hitung Jumlah Eritrosit:

±

± Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus.Persiapan sampel : tidak ada persiapan khusus. ±± Prinsip:Prinsip:

Hitung jumlah eritrosit dilakukan bila cairan asites Hitung jumlah eritrosit dilakukan bila cairan asites berwarna kemerahan.Untuk membedakan darah berwarna kemerahan.Untuk membedakan darah tersebut akibat punksi perco

tersebut akibat punksi perco--baan, maka asitesbaan, maka asites yang diambil untuk pemeriksaan mikroskopik yang diambil untuk pemeriksaan mikroskopik

terutama untuk pemeriksaan hitung eritrosit tidak terutama untuk pemeriksaan hitung eritrosit tidak diambil dari cairan yang pertama kali keluar dari diambil dari cairan yang pertama kali keluar dari drainase tetapi sebaiknya diambil saat

drainase tetapi sebaiknya diambil saat pertengahan drainase.

(45)

Alat dan bahan :

larutan Hayem

kamar hitung Improved New

Bauer

pipet mikro ukuran 20ul, 200ul

mikroskop.

(46)

Analitik

Cara kerja :

Encerkan cairan asites dengan larutan

Hayem dengan pengenceran 200 kali.

Hasil pengenceran diteteskan pada kamar

hitung, kemudian dibaca di bawah

mikroskop pada lima kotak eritrosit, hasil

perhitungan dikali 10.000/mm3.

(47)

Pasca analitik

Interpretasi :

~

~ jumlah eritrosit >100.000/mm3

jumlah eritrosit >100.000/mm3

menunjukkan adanya trauma atau

keganasan.

~

~ Bila jumlah eritrosit <100.000/mm3

Bila jumlah eritrosit <100.000/mm3

kemungkinan eritrosit berasal akibat

punksi percobaan.

(48)

3. Hitung Jenis

Persiapan sampel : sampel disentrifus kemudian Persiapan sampel : sampel disentrifus kemudian yang diambil adalah sedimennya.

yang diambil adalah sedimennya.

Prinsip tes: Perbedaan morfologi lekosit dan Prinsip tes: Perbedaan morfologi lekosit dan daya serap masing

daya serap masing--masing jenis lekositmasing jenis lekosit

terhadap zat warna. Untuk membedakan jenis terhadap zat warna. Untuk membedakan jenis inflamasi akut atau kronis maka dilakukan

inflamasi akut atau kronis maka dilakukan pemeriksaan hitung jenis sel. Untuk

pemeriksaan hitung jenis sel. Untuk

membedakan jenis inflamasi akut atau kronis membedakan jenis inflamasi akut atau kronis maka dilakukan pemeriksaan hitung jenis sel . maka dilakukan pemeriksaan hitung jenis sel .

(49)

Alat dan bahan :

alat sentrifus

kaca objek,

metil alkohol (fiksasi),

pewarnaan Giemsa,

pengukur waktu.

(50)

Analitik

Cara kerja :

Sedimen cairan asites dibuat hapusan

kemudian biarkan kering.

Fiksasi

dengan

metil

alkohol

dan

setelah

Fiksasi

dengan

metil

alkohol

dan

setelah

kering diwarnai dengan Giemsa selama 20

menit.

Kemudian bilas dengan air mengalir.

Hasilnya dibaca di bawah mikroskop.6,7,8

(51)

Pasca analitik

Interpretasi :

Hitung 100 sel lekosit, bila P

MM

N

Hitung 100 sel lekosit, bila P

MM

N

(polimorfonukl

ear)

>50%

(polimorfonukl

ear)

>50%

p

inflamasi akut

Limfosit >50%

(52)

D. TES

_M

IKROBIOLOGI

D. TES

_M

IKROBIOLOGI

a.

a. PewarnaaPewarnaaPewarnaaPewarnaan n n n GramGramGramGram

Pra analitik

Persiapan sampel : sampel ditempatkan dalam

tabung yang steril (tabung kaca dengan sterilisasi

autoklaf, tabung plastik dengan ultraviolet, dapat

diperoleh di bagian mikrobiologi) tanpa

antikoagulan.

Prinsip tes: bakteri akan menyerap zat warna

tertentu

tertentu yaitu yaitu kristal kristal violet. violet. Dengan Dengan penguatanpenguatan

tertentu

tertentu yaitu yaitu kristal kristal violet. violet. Dengan Dengan penguatanpenguatan

lugol, bakteri Gram positif akan tetap mengikat

warna ungu meskipun ada penambahan alkohol

dan fuschin/safranin, sedangkan bakteri Gram

negatif

negatif akan akan melepaskan warna melepaskan warna ungu ungu dengandengan

negatif

negatif akan akan melepaskan warna melepaskan warna ungu ungu dengandengan

adanya penam

adanya

penam-adanya penam--bahan alkohol akan mengikat-bahan alkohol akan mengikatbahan alkohol akan mengikatbahan alkohol akan mengikat

safranin atau fuchsin menjadi warna merah.

(53)

Alat dan bahan :

±

± Gelas objekGelas objek ±

± MMinyak emersiinyak emersi ±

± MMikroskopikroskop ±

± Rak pewarnaanRak pewarnaan ±

± BunsenBunsen ±

(54)

Cat Gram A Cat Gram A ::

Kristal violet (warna ungu) ««« 2 gram Kristal violet (warna ungu) ««« 2 gram Alkohol 96%««««««« 20 cc Alkohol 96%««««««« 20 cc Amonium oxalat 1 % dalam aqua 80 cc Amonium oxalat 1 % dalam aqua 80 cc Cat Gram B:

Cat Gram B:

Jodium (warna coklat) «««««

Jodium (warna coklat) ««««« 1 gram1 gram Kalium jodida««««««.

Kalium jodida««««««. ««.. .2 gram««.. .2 gram Aquades ««««««««.Aquades ««««««««. «« 300 cc«« 300 cc Cat Gram C Cat Gram C :: Aceton (tdk berwarna) «««««30 cc Aceton (tdk berwarna) «««««30 cc Alkohol «««««««««««70 cc Alkohol «««««««««««70 cc Cat Gram D Cat Gram D :: Safranin ««««««««««.1 gram Safranin ««««««««««.1 gram Alkohol 96% ««««««««10 cc Alkohol 96% ««««««««10 cc Aquades ««««««««««.90 cc Aquades ««««««««««.90 cc

(55)

Analitik

Buatlah sediaan di atas kaca objek, Buatlah sediaan di atas kaca objek,

keringkan pada suhu kamar dan panaskan di keringkan pada suhu kamar dan panaskan di atas api 3

atas api 3 ± ± 4 menit. Dinginkan.4 menit. Dinginkan.

Letakkan sediaan di atas rak pewarnaan. Letakkan sediaan di atas rak pewarnaan. Preparat yang telah siap dicat digenangi Preparat yang telah siap dicat digenangi dengan cat Gram A selama 1

dengan cat Gram A selama 1-- 3 menit.3 menit. Kuman Gram (+) dan Gram (

Kuman Gram (+) dan Gram (--) akan) akan

berwarna ungu, kemudian cat dibuat dan berwarna ungu, kemudian cat dibuat dan tanpa dicuci.

tanpa dicuci.

Kemudian digenangi cat Gram B selama ½ Kemudian digenangi cat Gram B selama ½ --1 menit, kemudian dicuci dengan air

1 menit, kemudian dicuci dengan air mengalir.

(56)

Tetesi / dicelup cat Gram C sampai warna Tetesi / dicelup cat Gram C sampai warna dilunturkan

dilunturkan

Kemudian ditetesi dengan cat Gram D selama 1 Kemudian ditetesi dengan cat Gram D selama 1± ±22 menit.

menit.

Gram D merupakan warna kontras maka bakteri Gram D merupakan warna kontras maka bakteri Gram (+) yang telah mengikat cat gram A tidak

Gram (+) yang telah mengikat cat gram A tidak mampu mengikat Gram D, sehingga bakteri tetap mampu mengikat Gram D, sehingga bakteri tetap berwarna ungu, sedangkan bakteri Gram (

berwarna ungu, sedangkan bakteri Gram (--) yang) yang telah dilunturkan oleh cat Gram C (bakteri tidak telah dilunturkan oleh cat Gram C (bakteri tidak berwarna), akan mengikat warna cat Gram D berwarna), akan mengikat warna cat Gram D sehingga bakteri akan berwarna merah.

sehingga bakteri akan berwarna merah.

Cuci dengan air dan keringkan di udara. Setelah Cuci dengan air dan keringkan di udara. Setelah kering lihat di bawah mikroskop pembesaran 100 x kering lihat di bawah mikroskop pembesaran 100 x menggunakan minyak emersi.

(57)

Pasca analitik

Interpretasi :

Gram positif (+) : bakteri akan berwarna

ungu, bentuknya jelas (batang atau kokus)

Gram negatif (

Gram negatif (--) : bakteri akan berwarna

) : bakteri akan berwarna

merah, bentuknya jelas (batang atau

kokus )

(58)

b. Pewarnaan Ziehl Neelsen

Pra analitik

Persiapan sampel : sampel ditempatkan

dalam tabung yang steril (tabung kaca

dengan sterilisasi autoklaf, tabung

plastik dengan ultraviolet, dapat

diperoleh di bagian mikrobiologi) tanpa

antikoagulan.

Prinsip tes : bakteri akan mengikat

warna merah sesuai sifatnya.

(59)

Alat dan bahan :

Gelas objek Gelas objek Minyak emersi Minyak emersi Mikroskop Mikroskop Rak pewarnaan Rak pewarnaan Bunsen Bunsen Sengkelit Sengkelit Kaca objek Kaca objek Reagen : Reagen :

-- Ziehl Neelsen AZiehl Neelsen A -- Ziehl Neelsen BZiehl Neelsen B -- Ziehl Neelsen CZiehl Neelsen C

(60)

Analitik

Buatlah sediaan di atas kaca objek, keringkan pada Buatlah sediaan di atas kaca objek, keringkan pada suhu kamar dan panaskan di atas api 3

suhu kamar dan panaskan di atas api 3± ± 4 menit.4 menit. Dinginkan. Letakkan sediaan di atas rak pewarnaan. Dinginkan. Letakkan sediaan di atas rak pewarnaan. Preparat yang telah siap, dicat dan digenangi dengan Preparat yang telah siap, dicat dan digenangi dengan cat ZN

cat ZN ± ± A, kemudian A, kemudian dipanasi dengan lampudipanasi dengan lampu sampai menguap tetapi tidak mendidih.

sampai menguap tetapi tidak mendidih. Bakteri yangBakteri yang tahan asam dan yang tidak tahan asam akan

tahan asam dan yang tidak tahan asam akan berwarna merah.

berwarna merah. Tunggu selama 5 menit kemudianTunggu selama 5 menit kemudian dicuci dengan air

dicuci dengan air

Kemudian preparat ditetesi dengan cat ZN

Kemudian preparat ditetesi dengan cat ZN ±± B.B. Bakteri yang tahan asam akan tetap berwarna Bakteri yang tahan asam akan tetap berwarna

merah, sedang yang tidak tahan asam menjadi tidak merah, sedang yang tidak tahan asam menjadi tidak berwarna.

(61)

Setelah itu preparat segera diangkat dan Setelah itu preparat segera diangkat dan dicuci dengan air.

dicuci dengan air.

Genangi preparat dengan ZN

Genangi preparat dengan ZN ± ± C selama 2C selama 2 menit, bakteri yang tahan asam tidak akan menit, bakteri yang tahan asam tidak akan mengikat warna ZN

mengikat warna ZN ± ± C, tetapi yang tidakC, tetapi yang tidak tahan asam akan mengikat warna biru. tahan asam akan mengikat warna biru. Cuci preparat dengan air dan dikeringkan Cuci preparat dengan air dan dikeringkan dalam temperatur kamar.

dalam temperatur kamar.

Keringkan dan lihat di bawah mikroskop Keringkan dan lihat di bawah mikroskop dengan pembesaran 100x meng

dengan pembesaran 100x meng--gunakangunakan minyak emersi.

(62)

Pasca analitik:

Interpretasi:

-- Basil tahan asam

Basil tahan asam



Basil terlihat berwarna

merah.

-- Basil tidak tahan asam

Basil tidak tahan asam



Basil berwarna

biru.

(63)

E. PETANDA TU

_M

OR

E. PETANDA TU

_M

OR

Carcinoembryonic Antigen (CEA)

~

M

etode Semi otomatis

~

M

etode Semi otomatis

Pra analitik

Persiapan pasien : tidak ada persiapan khusus. Persiapan pasien : tidak ada persiapan khusus. Persiapan sampel : sampel yang digunakan

Persiapan sampel : sampel yang digunakan

adalah serum atau plasma, hindari sampel yang adalah serum atau plasma, hindari sampel yang hemolisis.

hemolisis.

Prinsip tes : Enzyme immunoassay berdasarkan Prinsip tes : Enzyme immunoassay berdasarkan prinsip

(64)

Alat dan bahan :

±

± Alat Cobas EIA Alat Cobas EIA ±

± Fotometer (panjang gelombang 450nm)Fotometer (panjang gelombang 450nm) ±

± alat pencuci ( washer )alat pencuci ( washer ) ±

± pengeram ( inkubator)pengeram ( inkubator) ±

± rak dan tabung reaksi yang dilengkapirak dan tabung reaksi yang dilengkapi adhesive foil

adhesive foil ±

± pipet mikro 50ulpipet mikro 50ul ±

(65)

Bahan :

manik

manik--manik ( bead )

manik ( bead )

larutan T

M

B Substrate : 8 T

M

B

larutan T

M

B Substrate : 8 T

M

B

(Tetramethylbenzidine )

larutan T

M

B Buffer : 10 substrate buffer

larutan T

M

B Buffer : 10 substrate buffer

Stopping solution : Sulphuric acid 5 %

Larutan standar 3 a

(66)

Analitik

Cara kerja : Cara kerja : a. Otomatis (

a. Otomatis (CobCob_as_as Cor Cor _e_e_®)_®)

Pada prinsipnya pemeriksaan CEA cara Pada prinsipnya pemeriksaan CEA cara otomatis sama dengan cara semioto

otomatis sama dengan cara semioto--matis.matis. Perbedaannya antara lain :

Perbedaannya antara lain :

1.

1. Semua tahap reaksi pada pemeriksaanSemua tahap reaksi pada pemeriksaan

serta pengukuran dilakukan oleh alat Cobas serta pengukuran dilakukan oleh alat Cobas Core secara otomatis

Core secara otomatis

2.

2. Pada tahap reaksi enzimatik tidakPada tahap reaksi enzimatik tidak

dibutuhkan stopping solution dibutuhkan stopping solution

3.

3. Alat Cobas Core akan mengeluarkan hasil Alat Cobas Core akan mengeluarkan hasil

berupa lembar

(67)

b. Semiotomatis b. Semiotomatis

Reaksi imunologi : Reaksi imunologi :

pipet sesuai skema di bawah ini (volume dalam

pipet sesuai skema di bawah ini (volume dalam L)L) Spesimen Spesimen /sampel /sampel Tabung reaksi Tabung reaksi S1 S1 S2S2 S3S3 S4S4 S5S5 S6S6 CC PP RBRB Standar 3a Standar 3a 5050 Standar 3b Standar 3b 5050 Standar 3c Standar 3c 5050 Standar 3d Standar 3d 5050 Standar 3e Standar 3e 5050 Standar 3 f Standar 3 f 5050 Kontrol Kontrol 5050 Sampel pasien Sampel pasien 5050 Anti CEA Anti CEA Conyugate Conyugate 200 200 200200 200200 200200 200200 200200 200200 200200 Manik Manik 11 11 11 11 11 11 11 11

(68)

Tutup tabung reaksi dan inkubasi pada inkubator Cobas EIA Tutup tabung reaksi dan inkubasi pada inkubator Cobas EIA 37 0 C

37 0 C

30 menit kemudian kocok. Hindari dari cahaya terang 30 menit kemudian kocok. Hindari dari cahaya terang

Angkat tutup tabung dan cuci dengan menggunakan Cobas Angkat tutup tabung dan cuci dengan menggunakan Cobas

EIA Washer EIA Washer

Reaksi enzimatik : Reaksi enzimatik :

10 menit sebelum akhir reaksi imunologik, siapkan larutan kerja 10 menit sebelum akhir reaksi imunologik, siapkan larutan kerja substrate

substrate

tambahkan 250 L larutan kerja substrat pada semua tabung reaksi, tambahkan 250 L larutan kerja substrat pada semua tabung reaksi, termasuk RB dan inkubasi selama 15 menit pada 37 0 C pada

termasuk RB dan inkubasi selama 15 menit pada 37 0 C pada inkubator Cobas EIA .

inkubator Cobas EIA .

Selanjutnya kocok dan jauhkan dari cahaya terang. Selanjutnya kocok dan jauhkan dari cahaya terang. Tambahkan

Tambahkan st _stoo_ppi_ppi_ng s_ng soluolu_t_t_i_ioo_n_{n 1 ml pada semua tabung reaksi, campur}_{1 ml pada semua tabung reaksi, campur}

dengan baik. dengan baik.

Setelah 1 jam, baca absorban dari standar, kontrol dan sampel pasien, Setelah 1 jam, baca absorban dari standar, kontrol dan sampel pasien, serta reagen blank pada fotometer 450 nm.

serta reagen blank pada fotometer 450 nm. ~ Nilai rujukan CEA14 : < 2,5 ng/ml

~ Nilai rujukan CEA14 : < 2,5 ng/ml ~ Nilai range alat Cobas Core : 0

(69)

Pasca analitik

Interptretasi : Interptretasi :

±

± Jika nilai > 50 ng/ml, sampel harusJika nilai > 50 ng/ml, sampel harus

diencerkan 1:10 dan 1:100, sebagai berikut : diencerkan 1:10 dan 1:100, sebagai berikut : Pengenceran 1 : 10

Pengenceran 1 : 10 pp 20 l sampel + 180 l20 l sampel + 180 l

diluent I Cobas Core diluent I Cobas Core Pengenceran 1 : 100

Pengenceran 1 : 100pp 20 l dari20 l dari pengenceran

pengenceran

I:10 + 180 l diluent I Cobas Core I:10 + 180 l diluent I Cobas Core ±

± Pada penyakit neoplasma, dijumpai kadar Pada penyakit neoplasma, dijumpai kadar CEA hingga 5 ng/ml.

CEA hingga 5 ng/ml. ±

± Pada keganasan umumnya dijumpai kadar Pada keganasan umumnya dijumpai kadar CEA lebih 10 ng/ml.

CEA lebih 10 ng/ml. ±

(70)

±

± Nilai >20 ng/ml preoperasi berprognosisNilai >20 ng/ml preoperasi berprognosis kurang baik, oleh karena menun

kurang baik, oleh karena menun--jukkan jukkan tingkat keganasan yang tinggi dan

tingkat keganasan yang tinggi dan adanya metastase.

adanya metastase. ±

± Dalam klinik untuk mendiagnosis, nilaiDalam klinik untuk mendiagnosis, nilai CEA ditunjang dengan tes lain dan

CEA ditunjang dengan tes lain dan keterangan klinis pasien

(71)

Ciri transudat dan eksudat sbb :

Transudat

Transudat EksudatEksudat Warna Warna Bau Bau Kejernihan Kejernihan Berat jenis Berat jenis Bekuan Bekuan Protein Protein Glukosa Glukosa LDH LDH Tes Rivalta Tes Rivalta Sel Sel--selsel Bakteriologik Bakteriologik (mikroskopik (mikroskopik /kultur) /kultur) kuning muda kuning muda Tidak berbau Tidak berbau encer, jernih encer, jernih kurang dari 1,018 (1,005 kurang dari 1,018 (1,005--1015) 1015) tidak ada tidak ada kurang dari 3mg/dl kurang dari 3mg/dl +

+ sama dengan plasmasama dengan plasma kurang dari 200IU/l

kurang dari 200IU/l negatif negatif kurang dari1000/mm3 kurang dari1000/mm3 negatif negatif muda purulen, muda purulen, mengandung darah mengandung darah Chyloid (bervariasi). Chyloid (bervariasi).

lebih atau sama dengan 1,018 lebih atau sama dengan 1,018 Bekuan spontan oleh adanya Bekuan spontan oleh adanya Fibrinogen

Fibrinogen

sama atau lebih dari 3mg/dl sama atau lebih dari 3mg/dl kurang dari glukosa plasma kurang dari glukosa plasma sama atau lebih dari 200IU/l sama atau lebih dari 200IU/l Positif

Positif

>1000/mm3(netrofil pada infeksi >1000/mm3(netrofil pada infeksi

akut, limfosit pada infeksi kronik) akut, limfosit pada infeksi kronik) positif