Efek Imunomodulator Ekstrak Etil Asetat Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

(1)

(2)

(3)

Lampiran 3. Bagan Alur Penelitian

Diinjeksikan dengan 0,1 ml SDMS 1% secara intraplantar pada telapak kaki sebelah kanan

Dilakukan pengukuran volume pembengkakan kaki mencit pada hari kedelapan (setelah 24 jam) (Vt)

Kontrol pembawa : CMC Na 0,5 %

Diinduksi dengan 0,1 ml sel darah merah sapi (SDMS) 1%

Kontrol positif : Levamisol 25 mg/kg BB

(5 Ekor)

Hasil

(4)

Lampiran 3. Lanjutan Uji Titer Antibodi

Diberikan perlakuan selama 7 hari secara per oral

Diambil darah melalui vena ekor dan masukkan ke dalam microtube

Disentrifus dengan kecepatan 1900 rpm selama 10 menit Diambil serumnya sebanyak 25 µl dan diteteskan ke dalam lubang microtitration plate 96

Ditambahkan larutan PBS dan SDMS 1% sebanyak 25 µl Dilakukan pengenceran sebanyak dua kali

Diamati penggumpalan yang terjadi

Ditentukan nilai titer antibodi berdasarkan pengenceran yang terakhir

Ditransformasikan nilai titer antibodi dengan [2log(titer)+1] 25 ekor mencit jantan

Kontrol negatif : CMC Na 0,5 %

(5 Ekor)

Kontrol positif : Levamisol 25 mg/kg BB

(5)

Lampiran 4. Perhitungan Serbuk Levamisol yang Ditimbang Bobot 20 tablet = 5,97 g

Kandungan Levamisol/tablet = 29,46 mg

Serbuk sampel yang ditimbang setara 25 mg Levamisol :

=

x

5,97 g

(6)

Lampiran 5. Contoh Perhitungan Dosis untuk dosis 50 mg/kg BB

Misalnya BB mencit = 27 g

 Jumlah yang diberikan : x 27 g = 1,35 mg

 Konsentrasi EEADMD : = 5 mg/ml

(7)

Lampiran 6. Gambar Alat-alat

Pipet mikro

Sentrifuge

(8)

Lampiran 7. Gambar Hewan Percobaan

(9)

Lampiran 8. Pembengkakan Kaki Mencit dan Hemaglutinasi

Pembengkakan kaki mencit

Pembengkakan awal (Vo)

(10)

Lampiran 8. Lanjutan

Hemaglutinasi

CMC

(11)

EEADMD

DOSIS 50 mg

DOSIS 100mg

(12)

Lampiran 9. Hasil Analisis Statistik

Tests of Normality

Kelompok

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Statistic df Sig.

a. Lilliefors Significance Correction

*. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variances

(13)

ANOVA

(I) Kelompok (J) Kelompok

(14)

Dosis100mg/kgbb .12950 .04454 .061 -.0044 .2634

Dosis50mg/kgbb .04600 .04199 .807 -.0803 .1723 Dosis100mg/kgbb -.10200 .04199 .150 -.2283 .0243 Dosis200mg/kgbb -.23150* .04454 .000 -.3654 -.0976 Dosis50mg/kgbb .04600 .04199 .287 -.0419 .1339 Dosis100mg/kgbb -.10200* .04199 .025 -.1899 -.0141 Dosis200mg/kgbb -.23150*_{.04454 .000 -.3247 -.1383}

(15)

Homogeneous Subsets

Dosis50mg/kgbb 5 .5100

Levamisol25mg/kgbb 5 .5560 .5560

Sig. 1.000 .820 .167 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,762.

b. The group sizes are unequal. The harmonic mean of the group sizes is used. Type I error levels are not guaranteed.

Tests of Normalityb

Kelompok

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Statistic df Sig. a. Lilliefors Significance Correction

b. Titerantibodi is constant when Kelompok = CMC-Na0,5%. It has been omitted.

Test of Homogeneity of Variances

Titerantibodi Levene

Statistic df1 df2 Sig.

(16)

Descriptives

Titerantibodi CMC-Na0,5% 4 2.50

Dosis 50mg/kgbb 5 9.00

Dosis100mg/kgbb 5 17.00

Dosis200mg/kgbb 5 22.00

Levamisol25mg/kgbb 5 10.00

Total 24

Test Statisticsa,b

Titerantibodi Chi-Square 21.460

df 4

Asymp. Sig. .000

(17)

MANN WHITNEY

a. Kelompok CMC-Na dan Dosis 50 mg/kgbb

Ranks

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 10.000

Z -2.619

Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed

Sig.)]

.016a

a. Not corrected for ties.

b. Grouping Variable: Kelompok

b. Kelompok CMC-Na dan Dosis 100 mg/kgbb

Ranks

Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks

Titerantibodi CMC-Na0,5% 4 2.50 10.00

Dosis100mg/kgbb 5 7.00 35.00

Total 9

Test Statisticsb

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 10.000

Z -2.619

Sig.)]

(18)

c. Kelompok CMC-Na dan Dosis 200 mg/kgbb

Ranks

Dosis200mg/kgbb 5 7.00 35.00

Total 9

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 10.000

Z -2.619

Sig.)]

.016a

d. Kelompok CMC-Na dan Levamisol 25 mg/kgbb

Ranks

Levamisol25mg/kgb

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 10.000

(19)

Sig.)]

.016a

e. Kelompok dosis 50 mg/kg bb dan dosis 100 mg/kg bb

Ranks

Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks Titerantibodi Dosis 50mg/kgbb 5 3.00 15.00

Dosis100mg/kgbb 5 8.00 40.00

Total 10

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.694

Sig.)]

.008a

f. Kelompok dosis 50 mg/kgbb dan dosis 200 mg/kgbb

Ranks

Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks Titerantibodi Dosis 50mg/kgbb 5 3.00 15.00

Dosis200mg/kgbb 5 8.00 40.00

(20)

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.694

Sig.)]

.008a

g. Kelompok dosis 50 mg/kg bb dan Levamisol 25 mg/kg bb

Ranks

Titerantibodi Dosis 50mg/kgbb 5 5.00 25.00

Levamisol25mg/kgbb 5 6.00 30.00

Total 10

Titerantibodi

Mann-Whitney U 10.000

Wilcoxon W 25.000

Z -.600

Sig.)]

.690a a. Not corrected for ties.

h. Kelompok dosis 100 mg/kg bb dan dosis 200 mg/kg bb

Ranks

Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks Titerantibodi Dosis100mg/kgbb 5 3.00 15.00

Dosis200mg/kgbb 5 8.00 40.00

(21)

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.694

Sig.)]

.008a

i. Kelompok dosis 100 mg/ kg bb dan Levamisol 25 mg/kg bb

Ranks

Titerantibodi Dosis100mg/kgbb 5 8.00 40.00

Total 10

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.694

Sig.)]

.008a

(22)

j. Kelompok dosis 200 mg/kg bb dan Levamisol 25 mg/kg bb

Ranks

Titerantibodi Dosis200mg/kgbb 5 8.00 40.00

Total 10

Titerantibodi

Mann-Whitney U .000

Wilcoxon W 15.000

Z -2.694

Sig.)]

.008a